Submitted by Alessandra Portugal (alessandradf@ioc.fiocruz.br) on 2013-10-03T11:40:07Z No. of bitstreams: 1 Beatriz Guerreiro Basilio Costa.pdf: 1448715 bytes, checksum: 9fad325ac3484b88b47961c78ef5db34 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-03T11:40:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Beatriz Guerreiro Basilio Costa.pdf: 1448715 bytes, checksum: 9fad325ac3484b88b47961c78ef5db34 (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A toxoplasmose é uma doença de alta prevalência no mundo, causada pelo Toxoplasma gondii, um parasita intracelular obrigatório. O T. gondii possui mecanismos de modulação do metabolismo do seu hospedeiro que garantem sua sobrevivência e a instalação da infecção crônica. Um dos tipos celulares mais permissivos à infecção e multiplicação do T. gondii são as células dendríticas (DC), paradoxalmente as células apresentadoras de antígeno mais eficazes, com capacidade de deflagrar uma resposta imune protetora eficaz e duradoura. Neste trabalho, estudamos a modulação do metabolismo lipídico de células dendríticas humanas na infecção por T. gondii. Mostramos que o parasita induziu a maturação da célula e um padrão misto de resposta inflamatória, com altas concentrações das citocinas pró-inflamatórias IL-6 e TNF- e da citocina antiinflamatória IL-10. Após 3 horas de infecção, verificamos que T. gondii induziu a expressão gênica de ciclooxigenase-2 (COX-2). De forma importante, observamos por qRT-PCR que a infecção com T. gondii regulou positivamente a expressão do gene do receptor nuclear (RN) regulado por lipídios PPAR, mas não do LXR. Já a expressão do mRNA das moléculas envolvidas no transporte e estoque de lipídios, FABP4 e ADRP, alvos do PPAR, e ABCA1, alvo do LXR, foram aumentadas pela infecção de 3 horas com o parasita. Utilizando duas técnicas distintas (BODIPY e coloração com ósmio) avaliamos a biogênese de corpúsculos lipídicos (CL) após infecção com o T. gondii e constatamos que essas organelas não foram induzidas após 3 horas de infecção. Entretanto, após 24 horas, 90% das DC apresentaram CL e o número de CL por DC foi estatisticamente maior. Observamos a presença de CL em DC não infectadas pelo parasita, mostrando que a indução da biogênese de CL é um fenômeno parácrino, não dependente da infecção celular. Avaliamos também a importância do PPAR na infecção por T. gondii, através do tratamento das DC com seu agonista ou antagonista. Após 3 horas, apenas os genes ADRP, FABP4 e ABCA1, alvos dos receptores nucleares, foram modulados. Por último, investigamos a influência do T. gondii na expressão das moléculas apresentadoras de antígenos lipídicos. Por citometria de fluxo, constatamos que não há alteração na expressão de membrana dessas moléculas. Contudo, por qRT-PCR, observamos que o T. gondii regula negativamente a expressão dos genes cd1d e cd1e. Em conclusão, mostramos que T. gondii foi capaz de regular positivamente o metabolismo lipídico das DC e negativamente as moléculas apresentadoras de lipídios CD1, sem a participação essencial de PPAR nesses processos. / Toxoplasmosis is a worldwide high prevalence disease caused by Toxoplasma gondii, an obligate intracellular parasite. T. gondii developed mechanisms for modulating the metabolism of its host, ensuring their survival and the chronic infection. Dendritic cells (DC) are one of the most permissive cell types to T. gondii infection and replication and are, paradoxically, considered the most effective antigen presenting cells, triggering an effective and long-lasting protective immune response. In this work, we studied the modulation of lipid metabolism in human dendritic cells infected with T. gondii. We showed that the parasite induced cell maturation, and a mixed pattern of inflammatory response with high levels of proinflammatory cytokines IL-6 and TNF-, and anti-inflammatory cytokine IL-10. After 3h of infection, we found that T. gondii induced increased gene expression of cyclooxygenase-2 (COX-2). Importantly, we observed by qRT-PCR that T. gondii infection upregulated the nuclear receptor (RN) PPAR gene expression, while the levels of LXR were unchanged. Furthermore, the mRNA expression of molecules involved in the transport and storage of lipids, FABP4 and ADRP, PPARtargets, and ABCA1, LXR target, were also increased at 3h of infection with the parasite. In parallel, using two different techniques, (BODIPY and osmium staining), we evaluated the biogenesis of lipid droplets (LD) after infection with T. gondii, and observed that these organelles were not induced after 3 hours of infection. However, after 24 hours, 90% of DC showed LD and the number of LD per DC was statistically enhanced. We observed the presence of LD in DC not infected with the parasite, showing that induction of biogenesis of LD is a paracrine phenomenon not dependent on cell infection. We also evaluated the role of PPAR in T. gondii infection by treating DC with its agonist or antagonist. After 3 hours of infection only the nuclear receptor target genes ADRP, FABP4 and ABCA1 were modulated. Finally, we investigated the influence of T. gondii in the expression of lipid antigens presenting molecules. By flow cytometry, we observed no variation in expression of these molecules in cell membrane. However, by qRT-PCR, we found that the T. gondii downregulated gene expression of cd1d and cd1e. In conclusion, we showed that T. gondii was able to upregulate the DC lipid metabolism, and downregulate CD1 lipid presentation. Apparently, the RN PPAR has no essential role in this process.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia / Made available in DSpace on 2012-10-22T11:58:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 231250.pdf: 874276 bytes, checksum: 846bed5b1854a38b996651a325db6b12 (MD5) / A levedura Candida glabrata tem sido apontada como importante patógeno emergente, sendo a segunda espécie mais comumente envolvida na etiologia das candidíases, infectando principalmente indivíduos imunodeficientes e imunocomprometidos. Devido à resistencia natural aos antifúngicos azólicos e à alta taxa de mortalidade associada a C. glabrata, os testes rápidos para sua identificação constituem importante ferramenta para a escolha terapêutica. Este microrganismo se destaca da maioria das leveduras por ser capaz de apenas consumir dois açúcares: a glicose e o dissacarídeo trealose (Gli 1-1 Gli). De fato, os testes rápidos de identificação têm como princípio justamente a habilidade desta levedura em hidrolisar as moléculas de trealose em duas de glicose. Dada a importância da metabolização da trealose para C. glabrata, no presente trabalho foi realizada uma caracterização bioquímica do catabolismo de trealose por esta levedura. Nossos resultados mostram que C. glabrata consome e fermenta eficientemente a trealose presente no meio de cultura, com parâmetros cinéticos e produtividades de biomassa e etanol semelhantes aos observados durante a fermentação da glicose. De fato, o crescimento em trealose não foi afetado pelo inibidor mitocondrial antimicina A, confirmando a eficiente fermentação deste dissacarídeo por C. glabrata. Na fase exponencial de crescimento em trealose foi detectado acúmulo de até 2,5 g/L de glicose no meio, indicando a possível hidrólise extracelular do dissacarídeo. A análise de uma possível atividade trealase na superficie das células revelou a presença de uma trealase ácida com um pH ótimo de 4,4. Esta enzima é sintetizada durante o crescimento em trealose, mas este açúcar não é aparentemente o indutor da atividade uma vez que níveis altos da enzima foram detectados também após o crescimento em glicerol, o mesmo ocorrendo durante a desrepressão das células após o consumo da glicose. Nossos resultados mostram também que C. glabrata secreta a trealase ácida para o meio de cultura, sendo que aproximadamente 30% da atividade enzimática total é secretada após o crescimento em trealose ou glicerol. A trealase ácida secretada para o meio de cultura apresenta uma massa molecular aparente, deduzida por filtração em gel, de 275 kDa na sua forma ativa. Entretanto, a análise de proteínas através de eletroforese em gel desnaturante (SDS-PAGE) revelou uma proteína com massa molecular aparente de aproximadamente 130 kDa, que pelo padrão de migração e forte ligação à lectina concanavalina A, indica tratar-se de uma glicoproteína. Esta glicoproteína apresenta uma massa molecular coincidente com o peso teórico da proteína codificada pelo gene CAGLOK05137g de C. glabrata, gene com ~60% de homologia a outras trealases ácidas de leveduras, sugerindo que a enzima ativa seja um dímero. A trealase ácida secretada por C. glabrata apresentou alta afinidade pela trealose, com valores de Km e Vmax de 3,4 mM e 80 U (mg de proteína)-1, respectivamente, além de possuir relativa estabilidade, mostrando-se altamente específica para seu substrato, a trealose. The yeast C. glabrata has been recognized as an important emergent pathogen, and is considered the second most common cause of candidiasis, infecting predominantly immunodeficient and immunocompromised patients. Due to its low sensitivity to antifungal azoles and high mortality, rapid identification tests are important in order to choose the appropriate therapeutic treatment. This microorganism differs from other yeasts because it assimilates only two sugars: glucose and the disaccharide trehalose (Glu 1-1 Glu). Indeed, the rapid identification tests are based on the ability of this yeast to hydrolyze trehalose into two molecules of glucose. Due to the importance that trehalose metabolism has for C. glabrata, in this work a biochemical characterization of trehalose catabolism by this yeast was performed. Our results show that C. glabrata consumes and ferments efficiently the trehalose present in the medium, with kinetic parameters and biomass and ethanol productivities similar to those observed during glucose fermentation. Indeed, growth on trehalose was not affected by the mitochondrial inhibitor antimycin A, confirming the efficient fermentation of this disaccharide by C. glabrata. During the exponential growth phase on trehalose up to 2.5 g/L of glucose was accumulated in the medium, suggesting the possible extracellular hydrolysis of the disaccharide. The analysis of a putative trehalase activity at the cell surface revealed the presence of an acid trehalase with pH optimum of 4.4. This enzyme is synthesized during growth on trehalose, but this sugar seems not to be an inducer of the activity as high levels of this enzyme were also detected after growth on glycerol, the same occurring during the derepression of the cells after glucose consumption. Our results also indicate that C. glabrata secretes the acid trehalase into the medium, and approximately 30% of the total enzymatic activity is secreted after growth on trehalose or glycerol. The acid trehalase secreted into the culture medium shows an apparent molecular mass, deduced by gel filtration, of 275 kDa in its native form. However, the analysis of proteins by denaturant gel electrophoresis (SDS-PAGE) reveled a protein with a molecular mass of approximately 130 kDa, which due to its migration pattern and strong binding to concanavalin A, indicates is a glycoprotein. This glycoprotein has a molecular mass coincident with the theorical weight of the protein encoded by the C. glabrata CAGLOK05137g gene, a gene with ~60% of homology with other yeast acid trehalases, suggesting that the active enzyme is a dimer. The acid trehalase secreted by C. glabrata shows a relative high affinity for trehalose, with Km and Vmax values of 3.4 mM and 80 U (mg of protein)-1, respectively. In addition, this enzyme was relatively stable, and seem to be highly specific for its substrate, trehalose.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-04-06T16:13:56Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1274921 bytes, checksum: 3cf0ec15ee77f433585fb7d53aa63999 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-06T16:13:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1274921 bytes, checksum: 3cf0ec15ee77f433585fb7d53aa63999 (MD5) Previous issue date: 2016-07-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As cianobactérias são micro-organismos aeróbicos fotoautotróficos simples cujos processos vitais requerem somente água, dióxido de carbono, substâncias inorgânicas e luz. A fotossíntese é o principal modo de obtenção de energia para o metabolismo desses micro-organismos, cuja origem foi estimada em cerca de 3,5 bilhões de anos pela descoberta de fósseis na Austrália. Os objetivos desse estudo permeiam a caracterização taxonômica de três linhagens baseando-se em dados morfológicos, moleculares e ecológicos (taxonomia polifásica) e a sua caracterização fisiológica e metabólica em condições de cultivo padrão. Os resultados filogenéticos aqui obtidos indicam classificações de gêneros inéditos para Coleção de Cianobactérias e Microalgas (CCM-UFV) do Laboratório de Ficologia da Universidade Federal de Viçosa-MG, demonstrando, assim, a eficiência da abordagem taxonômica polifásica. A caracterização dos parâmetros fisiológicos, metabólicos e de crescimento nas linhagens de cianobactérias sugere que o maior crescimento observado para algumas linhagens está associado, aparentemente, à manutenção do pH do meio e a uma rápida adaptação explicada, ao menos parcialmente, pela morfologia distinta entre as linhagens. Assim, foi possível verificar também o grande potencial da linhagem unicelular Synechococcus sp. PCC7942 para a produção de massa seca e proteínas totais. Os resultados obtidos nesse estudo demonstram também a importância e a necessidade de caracterizações fisiológicas mais detalhadas dos organismos desse filo. Isso se faz necessário não somente com o objetivo de se entender as diferentes morfologias usualmente observadas entre as linhagens, como também para um melhor entendimento das relações metabólicas e moleculares existentes nesse grupo, possibilitando assim a seleção de linhagens com alto potencial biotecnológico. Palavras-chave: Cianobactérias, filogenia, fisiologia, metabolismo. / The vital processes of those organisms require only water, carbon dioxide, and inorganic light. Photosynthesis is their primary mode of obtaining energy for metabolism of these prokaryotes micro-organisms. Their origin was estimated at about 3.5 billion years by the discovery of fossils in Australia. Here, we performed a taxonomic characterization of three strains based on morphological data, molecular and ecological (polyphasic taxonomy) coupled with a physiological and metabolic characterization of these selected strains under standard growth conditions. The phylogenetic analysis obtained here demonstrated the efficiency of the polyphasic taxonomic approach and indicated the classification of umprecedent genus available at the Collection of Cyanobacteria and microalgae from the Laboratory of Phycology, Plant Biology Departament at the Universidade Federal de Viçosa (UFV). By further performing characterization for growth, physiological, and metabolic traits in three cyanobacterial strains our results suggests that the increased growth of some strains appears to be associated with pH maintainance and rapid adaptation to the medium that is explained, at least partially, by the distinct morphology of the strains. Thus, it was possible to infer the great potential of the unicellular strain Synechococcus sp. PCC7942 for dry matter yield and total protein content. The results obtained here also demonstrated the importance and the need of a deep and extensive physiological characterization of organisms of this phylum. This is required not only to further understand the different morphologies usually observed between the strains, but also to obtain a better understanding of the metabolic and molecular relationships exist in this group, thus enabling a more adequate selection of strains for biotechnological potential. Keywords: Cyanobacteria, phylogeny, physiology, metabolism.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-03-29T12:53:17Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2365764 bytes, checksum: 984c8feb2a8baf25642c31e97966c5ed (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-29T12:53:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2365764 bytes, checksum: 984c8feb2a8baf25642c31e97966c5ed (MD5) Previous issue date: 2013-12-17 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / This is the first work to explore in details how natural variation in terms of morphology may be related to changes in growth, physiology and metabolism in cyanobacterial strains. Cyanobacterias are photosynthetic microorganisms that occupy diverse ecological niches and exhibit enormous diversity in terms of their habitats, physiology, morphology and metabolic capabilities. Accordingly, there is a growing interest for exploring these microorganisms for biotechnological applications. However, our knowledge concerning natural variation within different cyanobacteria strains in regard to metabolism is little and in general fragmented. In the present work, 18 cyanobacteria strains were used. These strains were separated in three groups based on morphological characters namely unicellular cyanobacteria, non-heterocystous cyanobacterial filaments and heterocystous cyanobacterial filaments. Higher growth in some strains was closely associated with: (i) an increased light absorption efficiency and use, reflecting directly on increments in net assimilation (A); (ii) a lower energetic requirement alongside dark respiration (R d ) and nitrogen fixation; and (iii) an adequate balance between A, R d and nitrogen fixation impacting the relative growth rate (RGR), daily biomass productivity and reserve accumulation (e.g. proteins, carbohydrates and lipids). In summary, it was observed a large potential of unicellular cyanobacterial strains for biomass, total soluble carbohydrates and lipids production, whereas non- heterocystous cyanobacterial strains were identified as promising protein producers. Although heterocystous cyanobacterial strains did not presented higher productivity of any evaluated reserves, these strains have an intrinsic potential for hydrogen production. Moreover, multivariate analysis revealed that physiological, metabolic and growth comparisons are consistent with previous morphological comparison. It is reasonable to assume that the morphological changes presented by the cyanobacterial strains used culminated in physiological, metabolic, and growth related changes. Furthermore, the results obtained demonstrate the importance of an extensive physiological and metabolic characterization within this phylum for a better understanding of metabolic relationships and selection of strains with higher potential for biotechnological applications. / Este trabalho é o primeiro a explorar como a variação natural, em termos de morfologia, pode estar relacionada a alterações no crescimento, fisiologia e metabolismo em cianobactérias. Esses micro-organismos fotossintetizantes ocupam atualmente diversos nichos ecológicos e, consequentemente, apresentam uma enorme diversidade fisiológica, metabólica e molecular. Desse modo, verifica-se um grande potencial no uso de cianobactérias em aplicações biotecnológicas. Contudo, pouco ou nada se sabe acerca da variação natural entre diferentes cepas no que diz respeito ao metabolismo em geral. Neste trabalho utilizou-se 18 cepas de cianobactérias divididas em três grupos, tomando como base os caracteres morfológicos apresentados: unicelular, filamentoso homocitado e filamentoso heterocitado. O maior crescimento observado em algumas cepas mostrou-se intimamente associado: (i) a alta eficiência na absorção e utilização de luz, refletindo diretamente em incrementos em fotossíntese líquida (A); (ii) às menores demandas energéticas associadas a respiração no escuro (R d ) e fixação de nitrogênio e, (iii) ao balanço adequado entre A, R d e fixação de nitrogênio influenciando a taxa de crescimento relativo (TCR), produtividade diária de biomassa e acúmulo de reservas (proteínas, carboidratos e lipídios). Em síntese, foi possível observar um grande potencial das cepas unicelulares para a produção de biomassa, carboidratos solúveis totais e lipídios, ao passo que as cepas homocitadas mostraram-se promissoras produtoras de proteínas. Embora as cepas heterocitadas não tenham apresentado maior produtividade de nenhuma das reservas avaliadas, essas cepas demonstram elevado potencial para a produção de hidrogênio. Utilizando análises multivariadas foi possível observar que o agrupamento resultante das comparações fisiológicas, metabólicas e de crescimento mostrou-se coerente ao observado por comparações morfológicas prévias, o que permite inferir que as variações morfológicas apresentadas pelas cepas aqui utilizadas acarretaram em alterações na fisiologia, metabolismo e crescimento. Desse modo, os resultados demonstram a importância de uma detalhada caracterização fisiológica dos organismos desse phylum, para um melhor entendimento das relações metabólicas existentes nesse grupo e seleção de cepas com potencial para aplicações biotecnológicas várias. / Dissertação enviada pela secretaria do curso por e-mail, em 28-03-17

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2017-08-09T16:29:47Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 768841 bytes, checksum: 20c78debd7b3f93ec71b8cad3b9c52d9 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-09T16:29:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 768841 bytes, checksum: 20c78debd7b3f93ec71b8cad3b9c52d9 (MD5) Previous issue date: 2017-04-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O repolho apresenta elevada demanda de nutrientes, dentre eles destaca-se o potássio (K) que é um dos macronutrientes mais extraídos pela cultura. Por apresentar elevada demanda de nutrientes, é uma cultura que requer a proposição de modelos de recomendação condizentes com o potencial produtivo atual. Diante disso, objetivou-se avaliar a produtividade e índices de eficiência de K na planta e no solo, a fisiologia e o metabolismo do repolho em função de doses e fontes desse nutriente, e propor um modelo de balanço nutricional para recomendação de nutrientes para a cultura. Foram conduzidos dois experimentos a campo em duas épocas do ano (verão e inverno) em áreas com diferentes disponibilidades de K no solo. O delineamento experimental foi em blocos ao acaso com quatro repetições. Os tratamentos consistiram de cinco doses de K 2 O (0, 100, 200, 400 e 800 kg ha -1 ) com a fonte Cloreto de Potássio (KCl), e um tratamento adicional com a fonte Sulfato de Potássio (K 2 SO 4 ) na dose de 200 kg ha -1 de K 2 O. O repolho apresentou alta eficiência de uso e de recuperação de K do solo quando em condições de menor disponibilidade de K, com a possibilidade de alcançar altas produtividades com aplicação de baixas doses de K. Com o incremento das doses de K a cultura acumulou grandes quantidades do nutriente na parte aérea, porém sem incremento correspondente na produtividade. Esse acúmulo de K diminuiu o acúmulo de N-NO 3- nas duas épocas de cultivo. A exportação de K foi a maior parte do acumulado na parte aérea para as duas épocas de cultivo, o que evidencia ser o repolho uma planta esgotante do solo. O uso restritivo ou excessivo de K incrementaram as atividades de enzimas antioxidantes, principalmente no período de verão, e também aumentaram o acúmulo de sólidos solúveis totais para as duas épocas de cultivo. Foram mínimas as diferenças entre as fontes K 2 SO 4 e KCl sobre a produtividade e índices de eficiência da adubação potássica no repolho. A fonte K 2 SO 4 acarretou menor acúmulo de Na + e de N-NO 3- para os dois períodos de cultivo, o que reforça o uso dessa fonte na obtenção de um produto com maior qualidade nutritiva. Para a modelagem da recomendação de fertilizantes, o sistema considerou o subsistema requerimento, que inclui a demanda da cultura e a eficiência de recuperação do nutriente aplicado, e o subsistema fornecimento, que corresponde ao fornecimento de nutrientes pelo solo e pelos resíduos culturais. Para determinar os atributos necessários à estimativa da demanda nutricional foram obtidos valores médios a partir de dados da literatura e de três experimentos, um com nitrogênio e dos dois experimentos com K citados anteriormente. A modelagem mostrou-se uma ferramenta útil para recomendação de adubação para a cultura do repolho. / Cabbage crop presents high demand of nutrients, potassium (K) stands out and it is one of the macronutrients most extracted by the crop. Cabbage requires proposition of recommendation models that are consistent with current productive potential because the crop presents high nutrient demand. This study aimed to evaluate the productivity and efficiency indexes of K in the plant and soil, the physiology and metabolism of cabbage in response to doses and sources of K, and to propose a nutritional balance model for nutrient recommendation for the crop. Two experiments were conducted in the field at two crop seasons (summer and winter) in areas with different soil K availability. The experiment was designed as randomized blocks with four replications. The treatments consisted of five doses of K 2 O (0, 100, 200, 400 and 800 kg ha -1 ) applied as Potassium Chloride (KCl), and an additional treatment with Potassium Sulphate (K 2 SO 4 ) at 200 kg ha -1 of K 2 O. Cabbage showed high use efficiency and recovery efficiency of K from soil under low K availability. High yields may be achieved applying low K doses. The crop accumulated large K quantities in the shoot, but without increases on productivity with increasing K doses. This accumulation of K decreased nitrate accumulation in both crop seasons. Potassium export was most of the accumulated in the shoot in both crop seasons, which shows that cabbage is a high demanding crop. The restrictive or excessive use of K increased the activities of antioxidant enzymes, mainly in the summer period, and also increased the accumulation of total soluble solids for both crop seasons. The differences between K 2 SO 4 and KCl sources on productivity and efficiency indices of K fertilization in cabbage were minimal. Potassium sulphate caused less accumulation of sodium and nitrate for both crop seasons, which reinforces the use of this source in order to obtain a product with higher nutritional quality. The system considered the subsystem requirement, which includes crop demand and nutrient recovery efficiency applied, and the subsystem supply, which corresponds to nutrient supply by soil and cultural waste for modeling the fertilizers recommendation. To determine the attributes needed to estimate nutritional demand, mean values were obtained from literature and from three experiments, one with nitrogen and the two K experiments cited above. The modeling showed to be a useful tool of fertilizers recommending for cabbage crop. / Foram impressas e anexadas 9 páginas no final da dissertação que estavam faltando.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-12-13T10:19:49Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1665204 bytes, checksum: 468a1926ff3e57bd4350a547188e5abd (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-13T10:19:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1665204 bytes, checksum: 468a1926ff3e57bd4350a547188e5abd (MD5) Previous issue date: 2015-07-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente estudo avaliou a resposta pós-prandial de marcadores do metabolismo lipídico referente ao consumo de uma refeição com alto conteúdo de ácidos graxos saturados (RS) ou de ácidos graxos monoinsaturados (RM), em mulheres adultas saudáveis, com peso normal ou excesso de peso. Tratou-se de um estudo de intervenção aguda, aleatório e controlado, realizado no Laboratório de Metabolismo Energético e de Composição Corporal e no Laboratório de Bioquímica Nutricional do Departamento de Nutrição e Saúde da Universidade Federal de Viçosa, previamente aprovado pelo Comitê de Ética e Pesquisa com Seres Humanos da Universidade Federal de Viçosa (Of. Ref. no 184/2011 e CAAE 542.585/2014). Participaram do estudo 63 mulheres adultas (26,9 ± 6,1 anos), sendo 35 mulheres normopeso (NP, <30% de gordura corporal total – GCT) e 28 com excesso de peso (EP, ≥30% GCT), residentes na cidade de Viçosa – MG. No dia da intervenção, 37 voluntárias (21 NP e 16 EP) receberam RS (14,6% do valor calórico total – VCT – em carboidratos, 6,2% em proteínas e 88,7% em lipídios, sendo 47% desses em ácidos graxos saturados – AGS) e 26 voluntárias (14 NP e 12 EP) receberam RM (17,5% do VCT em carboidratos, 4,3% em proteínas e 78,2% em lipídios, sendo 72% desses em ácidos graxos monoinsaturados – AGMI). As refeições testes eram compostas de dois muffins à base de bacon e queijo (RS) ou à base de azeite de oliva e castanhas (RM), com VCT de 1008 kcal, acompanhados de 500 ml de água. Foram realizadas extrações de sangue nos tempos T0, T2, T3 e T5 que correspondem ao jejum e 2, 3 e 5 horas pós-prandiais, respectivamente. As concentrações de triacilgliceróis, complemento C3, substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e perfil de ácidos graxos foram determinados em todos os tempos, mediante protocolo padronizado. Com base em revisão de literatura, após a intervenção com ácidos graxos monoinsaturados (AGMI), os autores têm encontrado um efeito benéfico em curto e em longo prazo como aumento das concentrações das frações de colesterol HDL e diminuição da fração LDL-C, amplamente conhecidos como fatores de proteção e risco, respectivamente para as doenças cardiovasculares. Como resultados do presente estudo, o aumento das concentrações do complemento C3 foi superior após RS, comparado a RM (área incremental abaixo da curva - iAUC = 4.365,5 ± 5.477,4 vs. 1.215,2 ± 882,4; p=0,006), sem diferenças entre os grupos NP e EP. Após o consumo de RM, a iAUC do complemento C3 foi maior no grupo com valores basais mais baixos de apolipoproteína A1, mostrando assim uma associação negativa entre eles (p=0,041). De modo interessante, após as 5 horas pós-prandiais os valores de ácido oleico plasmático continuaram elevados em relação ao valor de jejum no grupo NP (26,0 ± 4,2%), mas não em EP (23,7 ± 3,9%; p<0,001). Ademais, as mulheres que apresentaram alta porcentagem de AGS totais no plasma ao início da intervenção tiveram uma iAUC maior para os AG palmítico, esteárico e totais (p<0,05), enquanto que aquelas mulheres com alta porcentagem de AGMI apresentaram menor iAUC para o mesmo perfil de AG (p<0,05). Após RS, os valores de TBARS foram superiores nas voluntárias que iniciaram a intervenção com valores maiores de Apo B100 (p=0,018). Em conclusão, o presente estudo demonstrou, aparentemente pela primeira vez, o efeito de RS no aumento pós-prandial de 5 h das concentrações do complemento C3, comparado a RM. Ademais, o valor de ácido oleico permaneceu elevado em NP após 5 h do consumo RM, em relação ao grupo EP, sugerindo uma proteção das voluntárias com peso normal frente ao excesso de peso. Por sua vez, a resposta pós-prandial após consumo de RS parece ser mediada pelo perfil de ácidos graxos basais dos indivíduos, indicando um efeito acumulativo da resposta aguda a um perfil lipídico já estabelecido. Finalmente, os estudos pós-prandiais podem fornecer informações relevantes sobre o comportamento fisiológico frente ao consumo de diferentes componentes específicos da dieta, como são os ácidos graxos, e como esse comportamento pode ser modulado de acordo com características basais dos indivíduos (estado nutricional e metabólico). / This study evaluated the postprandial response to markers of lipid metabolism after the consumption of a high-saturated fatty acid meal (HSM) or high-monounsaturated fatty acid meal (HMM) by healthy women with normal weight or overweight. This acute, randomized, and controlled intervention study was performed at the Laboratory of Energy Metabolism and Body Composition and Laboratory of Nutritional Biochemistry, at the Department of Nutrition and Health of the Universidade Federal de Viçosa. The study was previously approved by the Ethics Committee and Human Research of the Universidade Federal de Viçosa (Of. Ref. No. 184/2011 and CAAE 542,585/2014). Were included in the study 63 adult women (26.9 ± 6.1 years), which were 35 normal-weight women (NW, <30% of total body fat - TBF) and 28 overweight (OW, ≥30% TBF), residents in Viçosa city - MG. In the day of the intervention, 37 volunteers (NW 21 and 16 OW) received HSM (14.6% caloric intake – CI – from carbohydrate, 6.2% from protein and 88.7% from fat, being 47% from saturated fatty acids- SFA) and 26 volunteers (NW 14 and 12 OW) received HMM (17.5% of CI from carbohydrate, 4.3% from protein and 78.2% from fat, being 72% from monounsaturated fatty acids - MUFA). The test meals were composed of two muffins based on bacon and cheese (HSM) or olive oil and nuts (HMM), with total caloric content of 1008 Kcal, taken together with 500 ml of water. Blood samples were collected at the times T0, T2, T3 and T5 corresponding to the fasting state and 2, 3 and 5 postprandial hours, respectively. The triacylglyceride and C3 complement concentrations, TBARS and fatty acid profile were determined at all times using standardized protocol. Based on the literature review, after the intervention with MUFA, the author have found a beneficial effect in the short and the long term as the increment in HDL concentration and lowering LDL concentration, recognized as protective and risk factors, respectively, for cardiovascular disease. As results of this study, the increment in the complement C3 concentration was higher after HSM, compared to HMM (iAUC 4365.5 ± 5477.4 vs. 1215.2 ± 882.4; p = 0.006) without difference between NW and OW groups. After consumption of HMM, the complement C3 iAUC was higher in group with lower levels of apolipoprotein A1, showing a negative association between them. Interestingly, after 5 hours the postprandial plasma oleic acid values remained high compared to fasting value in the NW group (26,0 ± 4,2%) but not in OW (23,7 ± 3,9 p <0.001). Furthermore, women who had a high percentage of total SFA plasma to earlier intervention had a greater iAUC for FA palmitic, stearic and total, while those women with high percentage of MUFA showed shorter iAUC for the same profile FA. After HSM, TBARS values were higher in volunteers who began the intervention with higher values of Apo B100. In conclusion, the present study demonstrated apparently for the first time, the effect of HSM postprandial increasing in concentrations of complement C3, compared to HMM. In addition, the increase in the oleic acid value remained after 5h consumption of NW, compared to the group OW, suggesting a protection of the volunteers with normal weight front overweight. In turn, the postprandial response after HSM consumption appears to be mediated by the baseline profile of volunteers, indicating a cumulative effect of acute response to a lipid already established. Finally, postprandial studies can provide relevant information on the physiological behavior front to the consumption of specific components of the diet, such as fatty acids, and how this behavior can be modulated for baseline characteristics of individuals (nutritional status and metabolic features).

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-08-12T11:09:39Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1176305 bytes, checksum: 5d862cfc0902b9fccc9819d9959d50fb (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-12T11:09:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1176305 bytes, checksum: 5d862cfc0902b9fccc9819d9959d50fb (MD5) Previous issue date: 2014-02-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Objetivo: Comparar o efeito da ingestão aguda de amendoim rico em ácido oleico sobre o apetite metabolismo energético entre homens eutróficos e com excesso de peso. Métodos: Quarenta e oito homens (27,2±7,6 anos) foram alocados nos grupos E (eutróficos, n=22) ou EP (excesso de peso, n=26) de acordo com o índice de massa corporal (IMC), entre 18,5 -24,9 kg/m2 e entre 27 -34,9 kg/m2, respectivamente. Após um jejum noturno (12 horas), o gasto energético de repouso (GER) foi avaliado por calorimetria indireta (Deltatrac II). Os indivíduos ingeriram junto ao desjejum 56 g de amendoim rico em ácido graxo oleico. Após intervalo de 30 minutos, a termogênese induzida pela dieta (TID) e oxidação de substratos energéticos foram avaliados nos 200 minutos seguintes. Neste período pós-prandial, foram ainda coletados dados para análise do apetite As variáveis: peso, IMC, composição corporal, perímetro da cintura e GE foram comparadas por meio do teste T ou Mann-Whitney, escolhidos de acordo com os testes de normalidade de Shapiro-Wilk e de igualdade de variâncias de Levene.Além disso, GE, quociente respiratório, oxidação de macronutrientes, TID e apetite foram avaliados por meio do cálculo da área incremental sob a curva (piAUC) pelo método trapezoidal. O nível de significância foi fixado em 5%. Resultados: O grupo EP apresentou maiores valores de GER e gasto energético pós-prandial (p< 0,001), bem como em suas área incremental abaixo da curva (piAUC) (p=0,016), em relação ao grupo E. O amendoim rico em ácido graxo oleico promoveu maior elevação da TID no grupo EP, porém, não foi significante em relação ao E. A oxidação de lipídios foi significativamente superior em todo período pós-prandial no grupo EP (p< 0,05). Em relação ao apetite, piAUC da sensação subjetiva do desejo prospectivo de se alimentar e da fome foi significativamente maior no E (p <0,001). Não houve diferença de saciedade e na compensação calórica entre E e EP (p>0,05), sendo que, ambos apresentaram compensação calórica incompleta (< que 100 pontos). Conclusão: O grupo EP apresentou maior gasto energético de repouso e oxidação de lipídios no período pós-prandial e menor sensação de fome e desejo de se alimentar. Desta maneira, sugere-se que o amendoim rico em ácido graxo oleico pode ser um coadjuvante no controle de peso corporal. Entretanto, como se trata de um estudo agudo, faz-se necessário avaliar os efeitos da inserção deste alimento na alimentação diária para avaliar seus efeitos no controle da obesidade. / Objective: To compare the effect of acute ingestion of peanuts rich in oleic acid on appetite, energy metabolism between normal weight and overweight men. Methods: Forty -eight men (27.2 ± 7.6 years) were divided in groups E (eutrophic, n = 22) or EP (overweight, n = 26) according to body mass index (BMI) between 18.5 -24.9 kg / m2 and between 27 -34.9 kg/m2, respectively. After an overnight fast (12 hours), the resting energy expenditure (REE) was assessed by indirect calorimetry (Deltatrac II). Subjects ingested 56 g of high-oleic fatty acid peanut in the breakfast. After a 30 minute interval, diet-induced thermogenesis (DIT) and energetic substrate oxidation were evaluated in the following 200 minutes. In the postprandial period, data for analysis of appetite were also collected. Variables: weight, BMI, body composition, waist circumference and GE were compared using the t test or Mann-Whitney, chosen according to the tests of the Shapiro-Wilk normality and equal variances Levene. In addition, GE, respiratory quotient, macronutrient oxidation, DIT and appetite were assessed by calculating the incremental area under the curve (piAUC) by the trapezoidal method. The significance level was set at 5 % .Results: The EP group showed higher values of GER and postprandial energy expenditure (p < 0.001), as well as their incremental area under the curve (piAUC) (p = 0.016) compared to group E. The peanuts rich in oleic fatty acid promoted greater elevation of DIT in EP group, however, was not significant in relation to E. The lipid oxidation was significantly higher throughout the postprandial period in PE (p < 0.05). In relation to appetite, piAUC of the subjective feeling of prospective desire to eat and the hungerwere significantly higher in E (p < 0.001). There was no difference in satiety and caloric compensation between E and EP (p > 0.05), and both showed incomplete caloric compensation (<than 100 points). Conclusion: The EP group showed increased resting energy expenditure and lipid oxidation during the postprandial period and lower feelings of hunger and desire to eat. Thus, it is suggested that the peanut rich in oleic fatty acid may be useful in controlling body weight. However, as this is an acute study, it is necessary to evaluate the effects of insertion of food in the daily diet to evaluate its effects in controlling obesity.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-08-19T17:48:17Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1216159 bytes, checksum: 8e09d29afb246af99cd42cce21af39aa (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-19T17:48:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1216159 bytes, checksum: 8e09d29afb246af99cd42cce21af39aa (MD5) Previous issue date: 2015-07-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O gênero Capsicum compreende um grupo altamente diversificado de pimentas doces e picantes. Curiosamente, os frutos de C. chinense têm uma enorme variabilidade em termos de tamanho, forma, cor e composição química. Além da típica característica de pungência dos frutos desse gênero, resultado da presença dos capsaicinóides, os frutos de C. chinense também são reconhecidos como excelentes fontes de carotenóides, ácido ascórbico, tocoferóis e flavonóides. Apesar do grande potencial para uso em programas de melhoramento genético e biotecnológicos, ainda são escassos os estudos relacionando rotas metabólicas para se entender as interações responsáveis por determinados fenótipos. Assim objetivou-se identificar características metabólicas relacionadas com os teores de capsaicinóides e sólidos solúveis em frutos de Capsicum chinense em diferentes estádios de desenvolvimento (20, 45 e 60 dias após a antese-DAA), cultivadas em condições semicontroladas. Observou-se que os teores totais de aminoácidos, proteínas e fenóis solúveis não alteraram durante o desenvolvimento dos frutos. Por outro lado, os níveis de clorofilas, sacarose, ácidos orgânicos e amido tiveram um decréscimo ao fim dos 60 DAA. Glicose, frutose, e carotenóides aumentaram ao longo do desenvolvimento. Os acessos Ac1, A101, A54, A26 e A100 apresentaram altos teores de capsaicinóides, e os acessos Ac2, A06, A17, A18 e A83 apresentaram reduzidos teores de capsaicinóides, sendo em alguns casos não detectáveis. Os teores de sólidos solúveis tenderam a aumentar ao longo do desenvolvimento correlacionando-se negativamente com os teores de malato. Porém os metabólitos secundários, em geral, não apresentaram um padrão entre os acessos ao longo do desenvolvimento. Observaram-se correlações negativas entre capsaicinóides e aminoácidos totais e malato. Em adição, correlações entre percentual de matéria seca e níveis de malato, fumarato e capsaicinóides foram encontradas. Análise de agrupamento sugere os teores de capsaicinóides como responsáveis pela separação dos grupos. Uma vez que as demais variáveis apresentaram padrões muito diferentes entre os acessos, sugere-se alta diversidade genotípica entre os acessos estudados. Em suma, os resultados obtidos indicam que: (i) o metabolismo de glicose, frutose e sacarose em frutos de pimenta é semelhante ao que ocorre em frutos de tomate, que são climatéricos; (ii) malato e fumarato são metabólitos importantes para o desenvolvimento de frutos de C. chinense; (iii) malato, flavonóides, ácidos fenólicos e outros metabólitos secundários aparentemente influenciam os teores de capsaicinóides, sólidos solúveis e percentual de matéria seca de frutos de C. chinense. / The genus Capsicum comprises a highly diverse group of sweet and spicy peppers. Interestingly, Capsicum chinense fruit have enormous variation in size, shape, color and chemical composition. Besides the typical characteristic of pungency of the fruits of this species, as a result of the presence of capsaicinoids, C. chinense fruits are also recognized as excellent sources of carotenoids, ascorbic acid, tocopherols and flavonoids. Despite the great potential for use in genetic and biotechnological breeding programs, there are only few studies linking metabolic pathways and the understanding of the interactions responsible for certain phenotypes have been performed. Thus the aim of this work was to identify metabolic traits related capsaicinoids and soluble solids content in fruits of C. chinense in different stages of development (20, 45 and 60 days after anthesis-DAA), grown in partially controlled conditions. It was observed that the total concentration of amino acids, soluble proteins and phenols did not change during fruit development. Moreover, chlorophyll, sucrose, organic acids and starch showed a decrease at 60 DAA and glucose, fructose, and carotenoids increased during the development. The Ac1, A101, A54, A26 and A100 accessions showed high levels of capsaicinoids, and the Ac2, A06, A17, A18 and A83 accessions showed reduced levels of capsaicinoids, which were in some cases undetectable. The soluble solids content tended to increase throughout the fruit development and negatively correlated with malate levels. The secondary metabolites evaluated in this study, in general did not show a pattern between accesses throughout the fruit development. Interestingly, negative correlations between capsaicinoids and total amino acids and malate were observed. In addition, correlations between the percentage of fruit dry weight, malate, fumarate and capsaicinoids levels were also evident. Cluster analysis suggests that capsaicinoids content was important for accession group separation. Since the other displayed different patterns between accesses, it is suggested that high phenotipic diversity among the accessions. In summary, the results indicated that: (i) the levels of glucose, fructose and sucrose in C. chinense fruits is similar to those observed in tomato fruits which has a climacteric fruit; (ii) malate and fumarate levels are important for C. chinense fruits development; (iii) malate, flavonoids, phenolic acids and other secondary metabolites apparently are related to capsaicinoids, soluble solids levels and percentage of dry matter in fruits of C. chinense.

Resumo não disponível

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Educação Física, Programa de Mestrado em Educação Física, 2015. / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2015-12-04T12:21:09Z No. of bitstreams: 1 2015_AndréBonadiasGadelha.pdf: 3224028 bytes, checksum: 6a1c7df0bf684a7aa7d6af65f37262e2 (MD5) / Approved for entry into archive by Patrícia Nunes da Silva(patricia@bce.unb.br) on 2015-12-23T14:09:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_AndréBonadiasGadelha.pdf: 3224028 bytes, checksum: 6a1c7df0bf684a7aa7d6af65f37262e2 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-23T14:09:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_AndréBonadiasGadelha.pdf: 3224028 bytes, checksum: 6a1c7df0bf684a7aa7d6af65f37262e2 (MD5) / OBJETIVO: Comparar os principais índices da adiposidade corporal na predição de fatores de risco cardiometabólico e na funcionalidade de mulheres idosas. MÉTODOS: Uma amostra representativa de mulheres idosas residentes no Distrito Federal (n=149; 67.17±6.12 anos) foi submetida a avaliação da composição corporal por meio do DEXA e outros 5 índices antropométricos (circunferência de cintura - CC, relação cintura estatura - RCE, índice de massa corporal - IMC, índice de adiposidade corporal - IAC e índice de conicidade - IC). A pressão arterial foi medida por método oscilométrico e análise sanguínea foi conduzida para perfil glicêmico, perfil lipídico e proteína C-reativa. A classificação da síndrome metabólica (SM) adotada obedeceu aos critérios do NCEP-ATP III. Os testes funcionais de levantar e sentar, agilidade e caminhada de 6 minutos foram conduzidos em subgrupo aleatorizado (n=87). A correlação de Pearson foi utilizada para identificar o relacionamento entre as variáveis e o teste t para amostras independentes para comparar os sujeitos classificados com e sem os desfechos de SM e de incapacidade funcional. Definiu-se pontos de corte específicos para cada índice de adiposidade a partir da curva ROC e o odds ratio foi calculado para os desfechos de desordem metabólica e funcionalidade baixa. RESULTADOS: Exceto para colesterol total e LDL, as variáveis de risco cardiometabólico apresentaram correlação significativa com pelo menos um dos índices da adiposidade. SM e capacidade funcional baixa apresentaram prevalência de 29.5% e de 36.8%, respectivamente. O grupo classificado com o desfecho de SM apresentou condição cardiometabólica inferior em comparação ao grupo de referência, com exceção de colesterol total e LDL. Os testes de Levantar e Sentar, Caminhada de 6 minutos e Agilidade apresentaram associação mais consistente com CC (r=-0.345; p<0.01), RCE (r=-0.417; p<0.01) e IAC (r=0.296; p<0.01), respectivamente. Na comparação entre as curvas ROC, a CC apresentou-se maior que %G (p<0.001), IAC (p<0.001), IC (p<0.02), IMC (p<0.04). O odds ratio para os desfechos de SM e incapacidade funcional foi maior para CC (OR=18.62; IC: 6.71-51.69) e RCE (OR=7.75; IC:0.95-63.17), respectivamente. CONCLUSÃO: Com base nos resultados apresentados, conclui-se que os índices da adiposidade que consideraram a gordura abdominal em seus cálculos apresentaram maior poder discriminatório e relacionamento mais consistente com os fatores de risco cardiometabólico e com a funcionalidade em amostra composta por mulheres idosas. / OBJECTIVE: To compare the main fatness indexes to predict cardiometabolic risk factors and functionality of older women. METHODS: A representative sample of older women from Federal District (n=149; 67.17±6.12 years) underwent to body composition assessment by DXA and other 5 anthropometric indexes (Waist Circumference – WC, Waist-to-Height Ratio – WHtR, Body Mass Index – BMI, Body Adiposity Index - BAI, and Conicity Index – CI). Blood pressure was evaluated by oscillometric method and blood sample was collected to glycemic profile, lipid profile, and C-reactive protein. Metabolic Syndrome (MetS) classification criteria was NCEP-ATP III. 30-s chair stand, 8-foot up-and-go, and 6-minute walk were performed in a randomized subsample (n=87). Pearson´s correlation was applied to identify the relationship between variables and the t test to independent samples to compare the subjects classified with and without MetS and disability. Odds ratio was calculated for outcomes of metabolic disorders and low functionality. RESULTS: Except for total cholesterol and LDL-cholesterol, cardiometabolic risk variables showed significant correlation with at least one of fatness indexes studied. MetS and low functional capacity prevalence was set 29.5% and 36.8%, respectively. The MetS group presented inferior cardiometabolic condition when compared with the reference group, except to total cholesterol and LDL-cholesterol. 30-s chair stand, 6-minute walk, and 8-foot up-and-go showed better consistent association with WC (r=-0.345; p<0.01), WHtR (r=-0.417; p<0.01), and BAI (r=0.296; p<0.01), respectively. In compare among ROC curves, the WC presented larger than fatness (p<0.001), BAI (p<0.001), CI (p<0.02), BMI (p<0.04). Odds ratio to MetS and disability outcomes were higher to WC (OR=18.62; CI: 6.71-51.69) and WHtR (OR=7.75; CI:0.95-63.17), respectively. CONCLUSION: Based on the presented results, it was concluded that the indexes of fatness which considered abdominal fat in its calculation had higher discriminatory power and more consistent relationship with cardiometabolic risk factors and with functionality in older women.