Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2001Bitstream added on 2014-06-13T19:57:13Z : No. of bitstreams: 1 barreiros_rc_me_botfm.pdf: 2089159 bytes, checksum: 5458c167603553aa52e8877b42426d13 (MD5) / O metabolismo da frutose, bem como o seu nível sangüíneo em recém-nascidos não está bem esclarecido. A frutose é uma hexose encontrada normalmente no organismo humano e tem seu metabolismo associado à glicose e ao sorbitol. As principais fontes de frutose são os vegetais e o mel. O leite materno não contém frutose. O metabolismo desse açúcar é independente da insulina o que o torna uma boa opção para utilização em pacientes com deficiência desse hormônio. Além da independência da insulina, o metabolismo da frutose é caracterizado por uma rápida fosforilação e rápida conversão em glicogênio e glicose ou conversão em glicerol, para posterior utilização no metabolismo lipídico. A frutose pode ser produzida endogenamente, a partir da glicose, através da via do sorbitol. Apesar de ser utilizado há tempos clinicamente como uma alternativa à glicose, existem poucos trabalhos na literatura determinando os níveis normais em humanos. Isso ocorreu em grande parte devidas dificuldades na dosagem desse carboidrato: em virtude de ser difícil a sua diferenciação da glicose, outra hexose, além da frutose ser encontrada em pouca quantidade em fluídos orgânicos... / The metabolism of fructose as well the blood-levels of fructose in newborn infants are not yet well established. Fructose is an hexose found naturally in fruits, vegetables and honey and its metabolism is associated with glucose and sorbitol. The human milk does not contain fructose. The metabolism of fructose is insulin independent, which makes it an alternative to glucose. Besides its independence of insulin, fructose is rapidly metabolized primarily in the liver, where occurs phosphorylation and conversion to glycogen and glucose or to glycerol, to further utilization in lipid metabolism. Fructose, also, can be produced by the human organism, originating from glucose by the sorbitol pathway. Although fructose is utilized since 1893 for medical purposes, there are few studies in the literature about normal levels of fructose in humans. This lack of studies is due in part to difficulties to determine this sugar in human fluids: glucose interferes in the final results and levels of fructose in biological fluids are very low. Our main goal was to establish the normal levels of fructose in newborn infants at 48 hours of life, with adequate weight for gestational age, breast-fed exclusively and to correlate the level of fructose with the levels of glucose and sorbitol. For this purpose we used the High performance liquid chromatography was used. Our study group was selected among breast-fed term newborn... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:31Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002-02-22Bitstream added on 2014-06-13T18:34:45Z : No. of bitstreams: 1 silva_cj_me_jabo.pdf: 651711 bytes, checksum: 6f7b9a354cd661de53615cc81e866c62 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Embora esteja bem estabelecido pelos experimentos clássicos, qual são os fatores que limitam a produção, o funcionamento da planta na fase reprodutiva que envolve um complexo relacionamento tanto entre órgãos fonte e dreno de fotossintatos como do metabolismo do nitrogênio em ambos os tipos de órgãos, ainda permanece pouco esclarecido. Assim sendo, na fase de polinização foram impostas diferentes proporções de folhas (% de fonte) e de grãos (% de dreno) em plantas de milho para estudar o efeito destes tratamentos sobre o comportamento do metabolismo do nitrogênio em grãos, folhas e colmos, em diferentes etapas da fase reprodutiva da cultura e suas relações com a produção de massa seca, desenvolvimento de grãos, bem como desenvolvimento e senescência das folhas. Avaliou-se atividade de algumas enzimas, o teor dos principais metabólitos nitrogendados nas folhas, nos colmos e nos grãos em formação, bem como os reflexos destas variáveis sobre algumas características agronômicas aos 2, 10, 20 e 30 dias após a polinização (dap). Os resultados do presente trabalho permitiram esclarecer que a atividade da redutase do nitrato na folha não foi afetada pelas alterações nas proporções de fonte e dreno de fotossintatos. Os teores de N-total, N-nitrato e N-aminoácidos livres, nas folhas, colmos e endospermas foram mais intensamente afetados quanto mais drásticas foram as reduções de folhas ou grãos. As reduções da fonte e dreno promoveram aumentos significativos nos teores de N-total, N-nitrato e N-aminoácidos livres nas partes remanescentes analisadas. Os teores de proteína solúvel foram mais afetados nos grãos, onde os maiores valores foram encontrados aos 10 dap., nos tratamentos sem folhas e sem grãos... / Although it is well very established, for the classic experiments, which are the factors that limit the production, the operation of the plant in the reproductive phase that involves a compound so much relationship between organs source and fotossintatos drain as of the metabolism of the nitrogen in both types of organs, it remains unclear. Like this being, in the pollination phase different proportions of leaves were imposed (% of source) and of grains (% of drain) in corn plants to study the effect of these treatments on the behavior of nitrogen metabolism in grains, leaves and stems, in different stages during reproductive phase of the culture and your relationships with the production of dry mass, development of grains, as well as development and senescence of leaves. Enzymes activity were evaluated (NR, TGO and TGP), the level of main metabolites (N-total, N-nitrate, free amino acids and soluble protein) in the leaves, in the stems and in the grains in formation, as well as the reflexes of these varied on the agronomic characteristics (mass evaporates of leaves stems and grains), to the 2, 10, 20 and 30 days after the pollination (dap). The results of the present work allowed to clear that the activity of the nitrate reductase in the leaf was not affected by the alterations in the source proportions and photoassimilated drain. The levels of N-total, N-nitrate and free N-amino acids, in the leaves, stems and endosperms were more intensely affected the more drastic they were the reductions of leaves or grains. The reductions of the source and drain promoted significant increases in the levels of N-total, N-nitrate and free N-amino acids in the analyzed remaining parts. The soluble protein concentration was more affected in the grains, where the largest values were found to the 10 dap, in the treatments without leaves and grains... (Complete abstract, click eletronic address below).

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:22:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseJFBM.pdf: 437107 bytes, checksum: 08c2de3a2538fc51bd31b85f9438b7cb (MD5) Previous issue date: 2004-03-29 / Universidade Federal de Minas Gerais / This work was done at the Laboratório de Bioquímica Adaptativa, Departamento de Genética e Evolução, UFSCar, and at the Laboratório de Bioquímica e Biologia Molecular da Universidade de Barcelona. We proposed studying digestive and metabolic features of fasted juveniles jundia Rhamdia quelen and fed on 20, 27 34 and 41% of protein in isocaloric diets. It was studied the hematological parameters, the immune system, the weight gain, the metabolic intermediates (glucose, lactate, pyruvate, free fatty acids, free amino acids, glycogen, protein, ammonia and urea), the digestive enzymes (unspecific proteases, trypsin, chymotrypsin, amylase and lipase), the enzymes of protein metabolism and excretion (Alanine aminotransferase ALT, Aspartate aminotransferase AST, Glutamate dehydrogenase GDH e Arginase), and the enzymes of the sugar metabolism (Glucokinase GK, 6-phosphofructo 1-kinase PFK1, Pyruvate kinase PK, FBP1, 6-phosphogluconte dehydrogenase 6GPDH and Glucose-6-phosphate dehydrogenase G6PDH). We observed that the immune system of jundia was unaltered by the nutritional changes. The digestive enzymes were responsive to the feed protein. The activities of the protein metabolism enzymes increased with the dietary protein likely to the protein synthesis demanded by growth. Excretion of nitrogenous compounds as consequence of amino acids surplus was observed. The activity of some of sugar metabolism enzymes was changed and the concentration of metabolic intermediates was altered with the availability of protein. We concluded that the digestive enzymes of jundia are inductive, responsive to the dietary protein. The increase of protein in diets leaded to weight gain, higher production of nitrogen wastes, and gluconeogenesis for the metabolical demands. / Este trabalho foi realizado no Laboratório de Bioquímica Adaptativa do Departamento de Genética e Evolução da UFSCar e no Laboratório de Bioquímica e Biologia Molecular da Universidade de Barcelona. No presente trabalho, propusemo-nos estudar aspectos digestivos e metabólicos de juvenis de jundiá Rhamdia quelen, em jejum e alimentado com quatro níveis de proteína (20, 27, 34 e 41 %) em dietas isocalóricas. Foram analisados os parâmetros hematológicos e sistema imune, o ganho médio de peso, intermediários metabólicos (glicose, lactato, piruvato, ácidos graxos livres, aminoácidos livres, glicogênio, proteína, amônia e uréia), enzimas digestivas (proteases inespecíficas, tripsina, quimiotripsina, amilase e lípase), enzimas do metabolismo protéico e excreção (Alanina aminotransferase ALAT, Aspartato aminotransferase ASAT, Glutamato desidorgenase GDH e Arginase) e enzimas do metabolismo de carboidratos (Glicoquinase GK, Fosfofrutoquinase1 PFK1, Piruvato quinase PK, Furtose 1,6-bifosfatase 1 FBP1, 6 Fosfogluconato desidrogenase 6GPDH e Glicose 6 fosfato desidrogenase G6PDH). O resultados obtidos indicaram que o sistema imune de jundiá não sofreu alterações em função dos regimes alimentares. As enzimas digestivas foram responsivas à concentração de proteína na ração. As enzimas do metabolismo protéico aumentaram sua atividade em relação ao aumento de proteína para possível manutenção de síntese protéica e do crescimento. Houve aumento de excreção de compostos nitrogenados pela disponibilidade de aminoácidos livres. Algumas enzimas relacionadas com o metabolismo de carboidratos sofreram alterações nas atividades, e as concentrações dos intermediários metabólicos variaram em função da disponibilidade de proteína. Neste trabalho concluímos que as enzimas digestivas de jundiá são indutivas pela concentração de proteína da dieta, o aumento de proteína da dieta aumenta o ganho de peso, a produção e excreção de nitrogenados, e a preferência metabólica nas condições ensaiadas para manutenção dos processos de produção de energia foi gliconeogênica.

Introduction: Obesity is a chronic disease whose pathophysiology involves changes in peripheral tissues and in the central nervous system (CNS). In this context, many researchers seek to understand the influence of saturated fat intake on the hypothalamus, a key structure in the food control. Objective: Assess inflammatory parameters of oxidative stress and energy metabolism in the hypothalamus of mice led to an animal model of obesity. Methodology: Swiss mice were divided into two study groups: control group and obese group. The control animals were fed with a diet with adequate amounts of macronutrients (standard diet), while the animals in the obese group were induced to obesity through the consumption of a diet high in saturated fat (high fat diet). Obesity induction had a duration of 10 weeks, and at the end of this period, the disease model was validated in animals. Shortly thereafter, the mice were euthanized; tissues of interest were dissected and taken for biochemical analysis. Results: Animals in the obese group had higher calorie consumption and, allied to this, had higher body weight and higher weight of mesenteric fat, compared to the control group. Obesity presented an increase in the levels of interleukin 1β (IL-1β) and decreased levels of interleukin 10 (IL-10) in the hypothalamus of animals. In addition, there was increased lipid peroxidation and protein carbonylation, coupled with the lower level of GSH in the hypothalamus of obese animals. However, there was no statistically significant difference in the activity of antioxidant enzymes superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) in the hypothalamus of both groups. The obese group had lower activity of complex I, II and IV of the mitochondrial respiratory chain, as well as lower activity of creatine kinase (CK) in the hypothalamus. Conclusion: Obesity presented inflammation, oxidative stress and mitochondrial dysfunction in the hypothalamus, a key structure in the food control. / Submitted by Alexandre Pedron Martins (alexandre.martins8@unisul.br) on 2017-05-05T18:51:50Z No. of bitstreams: 2 Dissertação de Ciências da Saúde - Rosiane de Bona Schraiber.pdf: 2138146 bytes, checksum: bdf08a9747c471f9fd3b96612d37e96e (MD5) Contrato de cessão de direitos autorais - Rosiane de Bona Schraiber.pdf: 602914 bytes, checksum: 37e44d0c7bde7fdee52943f30c470140 (MD5) / Approved for entry into archive by Alexandre Pedron Martins (alexandre.martins8@unisul.br) on 2017-05-05T18:52:02Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação de Ciências da Saúde - Rosiane de Bona Schraiber.pdf: 2138146 bytes, checksum: bdf08a9747c471f9fd3b96612d37e96e (MD5) Contrato de cessão de direitos autorais - Rosiane de Bona Schraiber.pdf: 602914 bytes, checksum: 37e44d0c7bde7fdee52943f30c470140 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-05T18:52:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação de Ciências da Saúde - Rosiane de Bona Schraiber.pdf: 2138146 bytes, checksum: bdf08a9747c471f9fd3b96612d37e96e (MD5) Contrato de cessão de direitos autorais - Rosiane de Bona Schraiber.pdf: 602914 bytes, checksum: 37e44d0c7bde7fdee52943f30c470140 (MD5) Previous issue date: 2016-06-24 / Introdução: A obesidade é uma doença crônica, cuja fisiopatologia envolve alterações nos tecidos periféricos e no Sistema Nervoso Central (SNC). Nesse contexto, diversos pesquisadores buscam compreender qual a influência do consumo de gordura saturada sobre o hipotálamo, estrutura chave no controle alimentar. Objetivo: Avaliar parâmetros inflamatórios, de estresse oxidativo e de metabolismo energético no hipotálamo de camundongos induzidos a um modelo animal de obesidade. Metodologia: Camundongos Swiss machos foram divididos em dois grupos de estudos: grupo controle e grupo obeso. Os animais do grupo controle foram alimentados com uma dieta com quantidades adequadas de macronutrientes (ração normolipídica), enquanto que os animais do grupo obeso foram induzidos a obesidade por meio do consumo de uma dieta rica em gordura saturada (ração hiperlipídica). A indução da obesidade teve uma duração de 10 semanas, e ao término desse período, o modelo da doença foi validado nos animais. Logo em seguida, os camundongos foram mortos, os tecidos de interesse foram dissecados e encaminhados para as análises bioquímicas. Resultados: Os animais do grupo obeso apresentaram maior consumo de calorias e, aliado a isso, apresentaram maior peso corporal, bem como maior peso de gordura mesentérica que os animais do grupo controle. A obesidade cursou com aumento nos níveis de interleucina 1β (IL-1β) e diminuição dos níveis de interleucina 10 (IL-10) no hipotálamo dos animais. Além disso, houve aumento da peroxidação lipídica e carbonilação de proteínas, aliada ao menor nível de glutationa (GSH) no hipotálamo dos animais obesos. No entanto, não houve diferença estatisticamente significativa quanto a atividade das enzimas antioxidantes superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT) no hipotálamo de ambos os grupos. O grupo obeso apresentou menor atividade dos complexos I, II e IV da cadeia respiratória mitocondrial, bem como menor atividade da creatina quinase (CK) no hipotálamo. Conclusão: A obesidade cursou com inflamação, estresse oxidativo e disfunção mitocondrial no hipotálamo, estrutura chave no controle alimentar.

Submitted by LIVIA MARIA BERALDO SIMÕES MATHIAS null (livia_beraldo@hotmail.com) on 2017-04-14T15:34:07Z No. of bitstreams: 1 MESTRADO Versao Final 13 abril 2017 pdf.pdf: 1211026 bytes, checksum: 6061dee1717bd06a4a45e7d018267638 (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-04-17T12:54:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 mathias_lmbs_me_bot.pdf: 1211026 bytes, checksum: 6061dee1717bd06a4a45e7d018267638 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-17T12:54:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 mathias_lmbs_me_bot.pdf: 1211026 bytes, checksum: 6061dee1717bd06a4a45e7d018267638 (MD5) Previous issue date: 2017-02-17 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução: a doxorubicina é um quimioterápico amplamente utilizado, mas apresenta a cardiotoxicidade como mais grave efeito colateral. A lesão miocárdica se inicia imediatamente após a infusão da droga e é mediada por lesão oxidativa, aumento de apoptose e ativação de metaloproteinases. O açaí é um fruto rico em antocianinas, que apresenta elevado efeito antioxidativo e anti-inflamatório. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito do açaí na prevenção da disfunção ventricular e a influência no estresse oxidativo, na apoptose e na atividade das metaloproteinases de matriz no modelo experimental de cardiotoxicidade aguda induzida pela doxorrubicina em ratos. Material e métodos: Foram utilizados 64 ratos Wistar machos, alocados em 4 grupos: controle (C), açaí (A), doxorrubicina (D) e açaí-doxorrubicina (DA). Os ratos receberam dieta padrão (grupos C e D) ou dieta padrão suplementada com açaí a 5% (grupos A e DA) por 4 semanas. Após esse período receberam injeção de doxorrubicina 20mg/kg (grupos D e DA) ou salina (grupos C e A). Quarenta e oito horas após a injeção, foi realizado ecocardiograma e estudo do coração isolado e em seguida foi realizada eutanásia. Foi coletado tecido cardíaco para realização de zimografia, Western blot, avaliação do estresse oxidativo e metabolismo energético, além da dosagem da concentração dos metabólitos de oxido nítrico (NO) no soro. Os resultados foram analisados por ANOVA de duas vias e foi considerada significância estatística de 5%. Resultados: Os animais que receberam doxorrubicina apresentaram diminuição do peso corporal e diminuição da ingestão de água e ração após a injeção da droga e o açaí não interferiu nesses resultados. Quarenta e oito horas após a injeção da doxorrubicina, os animais que receberam apresentaram aumento do átrio esquerdo, aumento do diâmetro sistólico do ventrículo esquerdo, diminuição da fração de encurtamento do ventrículo esquerdo e diminuição da onda E’ septal ao doppler tissular. Quando os ratos receberam doxorrubicina e foram suplementados com açaí, houve melhora da fração de encurtamento e do E’ septal. A doxorrubicina reduziu a +dP/dt, a –dP/dt e a pressão sistólica máxima, sugerindo piora tanto na função sistólica, quanto diastólica, no entanto o açaí não foi capaz de prevenir a disfunção ventricular no estudo do coração isolado. A doxorrubicina também ativou MMP-2, aumentou o estresse oxidativo, provocou alterações no metabolismo energético, com predomínio do metabolismo glicídico e causou aumento na apoptose, evidenciado por aumento na expressão proteica da caspase-3 ativa. Quando o açaí foi administrado conjuntamente, observamos melhora do metabolismo energético cardíaco, porém sem efeito na atividade de metaloproteinases de matriz, no estresse oxidativo ou na apoptose. Não observamos diferenças nas dosagens séricas dos metabólitos do NO entre os grupos. Conclusão: A doxorrubicina induziu alterações na estrutura e função cardíaca, além de aumento do estresse oxidativo, mudanças no metabolismo energético, ativação de MMP-2 e aumento da apoptose. O açaí preveniu o aparecimento de disfunção cardíaca e atenuou as mudanças no metabolismo energético. / Introduction: the doxorubicin is a widely used chemotherapeutic, but it presents cardiotoxicity as a most severe side effect. The myocardial injury immediately begins after the infusion of the drug and is mediated by oxidative injury, increased apoptosis and Metalloproteinases activation. The açaí berry is a fruit rich in anthocyanins, which provides high antirust and antiinflammatory effect. The goal of this study is to evaluate the effect of the açaí berry in the prevention of ventricular dysfunction and the influence on oxidative stress, in the apoptosis and in the of matrix Metalloproteinases activity in the experimental model of acute cardiotoxicity induced by doxorubicin in rats. Material and methods: 64 male Wistar rats were used, allocated in four (4) groups: control (C), açaí (A), doxorubicin (D) and açaí-doxorubicin (AD). The rats received standard diet (groups C and D) or standard diet supplemented with açaí berry to 5% (groups A and AD) for 4 weeks. After this period the rats received doxorubicin injection 20 mg/kg (groups D and AD) or saline (groups C and A). Forty-eight hours after the injection, an Echocardiogram was performed and a study of the isolated heart, and the following procedure was the euthanasia performance. The cardiac tissue of the rats were collected for zymography, Western blot, oxidative stress and energy metabolism evaluation, as well as the metabolic concentration dosage determination of nitric oxide (NO) in the blood serum. The results were analyzed by a two-way ANOVA and there was a statistical significance of 5%. Results: the rats who received doxorubicin showed decreased body weight and decreased water intake and feed after the drug injection and also the açaí berry did not interfere in the results. Forty-eight hours after the doxorubicin injection, the animals which were injected presented an increased left atrium, increased left ventricle systolic diameter, left ventricle systolic diameter decrease, left ventricle shortening and E’ wave to doppler tissular decrease. When the rats received doxorubicin and were supplemented with açaí berry, there was an improvement of the shortening fraction an the E’. The doxorubicin reduced the + dP/dt,-dP/dt and the maximum systolic pressure, suggesting a worsening in both systolic and diastolic function, however the açaí berry was not capable of preventing de ventricular 10 dysfunction on the study of the isolated heart. We did not observe any differences in the NO metabolites dosage between the groups. The doxorubicin also activated MMP-2, increased oxidative stress, caused changes in energetic metabolism, with predominance of the glycidic metabolism and caused an increase in the apoptosis, evidenced by the increase in the active caspase 3 expression. When the açai berry was administered jointly, we observed an improvement of the cardiac energetic metabolism, with no effect in the metalloproteinases of matrix or in the apoptosis. Conclusion: The doxorubicin induced alterations in the structure and cardiac functions, besides the increase of the oxidative stress, energetic metabolism changes, MMP-2 activation and increase in apoptosis. The açaí berry prevented cardiac dysfunction and attenuated the energetic metabolism changes.

Made available in DSpace on 2015-05-22T12:39:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000469226-Texto+Completo-0.pdf: 1935172 bytes, checksum: ed87439b55bcfab4db835f100fcb8202 (MD5) Previous issue date: 2015 / Agrochemicals are water contaminants, resulting from anthropogenic activities, having as main objective the elimination of some form of life and, therefore, being harmful even to non-target species. It is utmost importance the standardization and the use of bioindicators, especially of native organisms, besides the development of toxicity tests or bioassays to assess the impacts of the agroindustrial activities. Thus, it was sought to identify possible biochemical changes, to evaluate the oxidative balance and the survival of individuals of catfish Rhamdia quelen, in two aged groups, facing acute toxicity tests with different concentrations of Roundup® (glyphosate: 18, 36, 72 and 144μg/L), Primoleo® (atrazine: 2. 5, 5, 10 and 15μg/L) and Facet® (quinclorac: 1. 75, 3. 5, 7 and 14μg/L). The procedures were performed with fingerlings (individuals with total length between 6 and 8 cm) and sexually newly matured individuals, called young-adult (with total length of more than 18 cm). All the animals were purchased from a farm and were kept for 7 days in a period called Acclimatization. After, agrochemicals were applied individually, at concentrations similar to those reported for the natural environment and allowed by law in our country. After 7 days of exposuring to the agrochemical, the animals were euthanized by cervical spinal cord section and the gill, liver, kidney and muscle tissues were separated and frozen at -20ºC.In fingerlings, pools were performed, grouping the tissue from three individuals, due to their low weight; the tissues from young-adult were analyzed individually. It was estimated the effect of this agrochemicals on intermidiate metabolism, by determining the glycogen levels, total proteins, total lipids and triacylglycerols, on the two length ranges. It was also evaluated the effect of this agrochemicals on the oxidative status determining the activity of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT), and levels of lipid peroxidation (TBARS) in all the tissues from the animals on the two length ranges. The experimental procedures and the biochemical readings were performed in triplicate. It was also observed the effect of this agrochemicals on the survival of the individuals in experimental culture conditions, in both aged groups, searching for confirmation of sublethallity of determined concentrations for testing. The results are organized into three articles. The first is entitled Metabolic parameters and oxidative balance Rhamdia quelen changed after exposure to herbicides of rice crops (Roundup®, Primoleo® and Facet®), for submission to the journal Archives of Environmental Contamination and Toxicology, which presents the results obtained for the metabolism and the oxidative balance of fingerlings, which seem to have been able to modulate their enzymes as not to suffer oxidative damage front to Roundup® herbicide (by increasing CAT) and Primoleo® (without changes in SOD and CAT). The Facet® led to the increase of lipid peroxidation, especially in the gill, kidney and muscle tissues, despite the higher SOD, prejudicing the species significantly.The biochemical composition tissue of juveniles of R. quelen changed significantly, which may cause damages, mainly in the gill tissue, leading to a loss of homeostasis and it may result the death of the animals and/or the decrease of the reproductive success, when chronically exposed to these substances and concentrations. The second article entitled Metabolic changes in silver catfish exposed to herbicide of rice crop Roundup®, Primoleo® and Facet®, is concerned to the young-adult metabolism, for submission to the journal Environmental Pollution. There were changes in the metabolic profile of all sampled tissues, showing a differentiated tissue responsiveness, being the gills and the kidneys the most affected organs by the exposure to agrochemicals. The herbicide Facet® changed the gill tissue significantly, and it was suggested that the relevant Brazilian agencies regulate its use in protective standards for the environment. Finally, the third manuscript Article Oxidative status and lipid peroxidation determined by the exposure to agrochemicals Roundup®, Primoleo® and Facet® in Rhamdia quelen approaches the oxidative stress suffered by young-adults to be submitted to the journal Ecotoxicology and Environmental Safety. In this work the liver and kidney tissues were the most affected, and it can be infered that the Facet® (quinclorac) was the most toxic herbicide to the sexually newly matured individuals, followed by Primoleo® (atrazine) and after by Roundup® (glyphosate). One can suggest, from this set of results, a review of the current legislation in our country, to include products with the quinclorac active principle into the toxic list to be controlled in the natural environment. / Os agroquímicos são contaminantes aquáticos decorrentes das atividades antropogênicas, tendo como principal objetivo a eliminação de alguma forma de vida, sendo, portanto, lesivos inclusive à espécies não-alvo. É de extrema importância a padronização e a utilização de espécies bioindicadoras, em especial de organismos autóctones, além do desenvolvimento de testes de toxicidade ou bioensaios para avaliação dos impactos decorrentes das atividades agroindustriais. Assim, buscou-se verificar possíveis alterações bioquímicas, avaliar o balanço oxidativo e a sobrevivência de indivíduos do jundiá Rhamdia quelen, em duas faixas etárias, frente a testes de toxicidade aguda com diferentes concentrações de Roundup® (glifosato: 18, 36, 72 e 144μg/L), Primoleo® (atrazina: 2,5, 5, 10 e 15μg/L) e Facet® (quinclorac: 1,75, 3,5, 7 e 14μg/L). Foram realizados os procedimentos com alevinos (indivíduos com comprimento total entre 6 e 8 cm) e indivíduos recém-maturados sexualmente, chamados alevinões (com comprimento total superior a 18 cm). Todos os animais foram comprados de uma piscicultura e permaneceram por 7 dias em um período denominado Aclimatação. Após, os agroquímicos foram aplicados individualmente, em concentrações semelhantes às relatadas para o ambiente natural e permitido pela legislação vigente em nosso país. Após 7 dias de exposição ao agroquímico, os animais foram eutanasiados por secção de medula cervical, e foram separados os tecidos branquial, hepático, renal e muscular, sendo congelados a -20ºC.Nos alevinos, foram realizados agrupamentos dos tecidos de três indivíduos, devido seu baixo peso; os tecidos dos alevinões foram analisados individualmente. Estimou-se o efeito destes agroquímicos sobre o metabolismo intermediário, através da determinação dos níveis de glicogênio, proteínas totais, lipídeos totais e triacilgliceróis, nas duas faixas de comprimento. Avaliouse também o efeito destes agroquímicos sobre o status oxidativo determinando a atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD) e catalase (CAT), além dos níveis de lipoperoxidação (TBARS) nos quatro tecidos dos animais, das duas faixas de comprimento. Os procedimentos experimentais e as leituras biquímicas foram realizados em triplicata. Ainda observou-se o efeito destes sobre a sobrevivência dos indivíduos em condições de cultivo experimental, nas duas faixas etárias, buscando a confirmação da subletalidade das concentrações determinadas para os testes. Os resultados estão organizados em três artigos, sendo o primeiro intitulado Parâmetros metabólicos e balanço oxidativo de Rhamdia quelen alterado frente à exposição a herbicidas de lavoura de arroz (Roundup®, Primoleo® e Facet®), para a submissão à Revista Archives of Environmental Contamination and Toxicology, onde são apresentados os resultados obtidos para o metabolismo e o balanço oxidativo dos alevinos, que parecem ter conseguido modular suas enzimas a ponto de não sofrerem dano oxidativo frente aos herbicidas Roundup® (pelo aumento da CAT) e Primoleo® (sem alterações nas enzimas SOD e CAT). O Facet® provocou o aumento da lipoperoxidação, principalmente nos tecidos branquial, renal e muscular, apesar da elevação da SOD, agredindo significativamente a espécie.A composição bioquímica tecidual dos juvenis de R. quelen sofreu alterações significativas, podendo acarretar a danos principalmente no tecido branquial, conduzindo à perda da homeostase e podendo acarretar na morte dos animais e/ou a diminuição do sucesso reprodutivo, quando expostos cronicamente a estas substâncias e nestas concentrações. O 2º artigo, intitulado Alterações metabólicas em jundiás expostos aos herbicidas de lavoura de arroz Roundup®, Primoleo® e Facet®, versa sobre o metabolismo de alevinões, para submissão à Revista Environmental Pollution. Houve alterações no perfil metabólico de todos os tecidos amostrados, evidenciando uma responsividade tecidual diferenciada, sendo as brânquias e os rins os órgãos mais afetados com a exposição aos agroquímicos. O herbicida Facet® alterou significativamente o tecido branquial, sendo sugerido que os órgãos brasileiros competentes regulamentem o seu uso em normas protetivas ao meio ambiente. Por fim, o manuscrito do artigo Status oxidativo e lipoperoxidação determinados pela exposição aos agroquímicos Roundup®, Primoleo® e Facet® em Rhamdia quelen, aborda o estresse oxidativo sofrido pelos alevinões, a ser submetido à Revista Ecotoxicology and Environmental Safety. Neste trabalho os tecidos hepático e renal foram os mais afetados, e podemos inferir que o Facet® (quinclorac) foi o agroquímico mais tóxico aos indivíduos recém-maturados sexualmente, seguido do Primoleo® (atrazina) e após o Roundup® (glifosato). Podese, a partir deste conjunto de resultados, sugerir uma revisão na legislação vigente em nosso país, a fim de incluir produtos com o princípio ativo quinclorac na lista de tóxicos a serem controlados no ambiente natural.

Made available in DSpace on 2015-07-08T03:25:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000471669-Texto+Completo-0.pdf: 569 bytes, checksum: 6a1c936d05685eff8820f7ae0824dac4 (MD5) Previous issue date: 2015 / Currently, the execution of biological research that is able to classify and characterize the biodiversity and its ecological relations has been increasingly important and necessary in order to achieve environmental conservation. Conservation physiology is concerned about studying and qualifying many variables related to an organism, so that is possible to increase the knowledge about the functioning of a given species and to detail main environmental requirements or to establish periods of natural vulnerability. The genus Hyalella presents an American distribution and has a great importance on the food chain where it occurs, and becoming a fundamental link in processes of energy transference. The amphipod Hyalella kaingang, a very recent described species and so far not very studied, was used on this study of seasonal variation, and the objective of the present work was to analyze the metabolic behavior, the metabolic allocation, the levels of lipid peroxidation and the activity of antioxidant enzymes of the species. Thirty animals from each sex were used each season of the year, which were collected at Centro de Pesquisa e Conservação da Natureza (CPCN) Pró-Mata, located at São Francisco de Paula, Rio Grande do Sul. In the field, animals were euthanized by cryoanesthesia and in the laboratory they were homogenized in order to quantify levels of total proteins, glycogen, lipids, triglycerides, glycerol lipid peroxidation and the activity of the antioxidant enzymes superoxide dismutase, catalase and glutathione S- transferase. There was significative difference in the levels of glycogen, lipids, triglycerides, lipoperoxidation and in the activity of the enzymes superoxide dismutase and glutathione S-transferase over a full seasonal cycle in both males and females. The results of biomarkers from energetic metabolism and from oxidative stress indicate a feeding trend directed to the ingestion of proteins, and it is also suggested that the reproductive period of the species may be long-lasting, with this hypothesis being based also on the observation of pregnant females in many of the analyzed seasons. It is also suggested that there may be a reproductive peak during autumn. However, more studies must be done with this species so that the knowledge about its reproductive biology, general ecology and physiology can be increased. The present work also reinforces the idea that must be a greater interaction between different scientific fields so that a more precise profile of any given organism can be stated. / Atualmente, a realização de levantamentos biológicos que sejam capazes de classificar e caracterizar a biodiversidade e suas relações ecológicas tem sido cada vez mais importante e necessária na busca da conservação ambiental. A fisiologia da conservação preocupa-se em estudar e qualificar diversas variáveis relacionadas a um organismo, para que assim seja possível ampliar os conhecimentos acerca do funcionamento de determinada espécie e detalhar necessidades básicas ambientais ou estabelecer períodos de vulnerabilidade natural. O gênero Hyalella, de distribuição americana, tem uma grande importância nas cadeias tróficas onde ocorrem, tornando-se uma ligação fundamental em processos de transferência energética. O anfípodo Hyalella kaingang, uma espécie recentemente descrita e pouco estudada, foi utilizada nas pesquisas referentes às análises sazonais, e o objetivo do presente trabalho foi analisar o funcionamento metabólico, a alocação energética, os níveis de lipoperoxidação e atividades de enzimas antioxidantes da espécie. Foram utilizados 30 animais de cada sexo em cada estação do ano, os quais foram coletados dentro do Centro de Pesquisa e Conservação da Natureza (CPCN) Pró-Mata, no município de São Francisco de Paula, Rio Grande do Sul. Em campo, os animais foram eutanaziados por crioanestesia e no laboratório, homogeneizados para a quantificação dos níveis de proteínas, glicogênio, lipídios, triglicerídeos, glicerol, lipoperoxidação e a atividade das enzimas superóxido dismutase, catalase e glutationa S-transferase. Houve diferença significativa nos níveis de glicogênio, lipídios, triglicerídeos, lipoperoxidação e na atividade das enzimas superóxido dismutase e glutationa S-transferase ao longo de um ciclo sazonal, tanto em machos como em fêmeas. Os resultados encontrados a partir dos biomarcadores de metabolismo energético e do estresse oxidativo indicam tendências alimentares direcionadas ao consumo predominantemente de proteínas, e também que o período reprodutivo da espécie seja longo, hipótese baseada também na observação de fêmeas ovígeras em muitas estações. Sugere-se também, que exista um pico de atividade reprodutiva no outono. Contudo, mais estudos devem ser realizados com a espécie para que possam ser aprofundados os conhecimentos acerca da biologia reprodutiva, ecologia geral e fisiologia desta espécie. O presente trabalho reforça a ideia de que deve haver uma maior integração entre diferentes campos científicos para que se possa obter um perfil mais preciso de um determinado organismo.

Made available in DSpace on 2015-12-10T01:04:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000476575-Texto+Completo-0.pdf: 1094891 bytes, checksum: ee0be971c01fb37fae36fa4f70aa88b0 (MD5) Previous issue date: 2015 / Since the principles of management in agriculture by man, technology has increased exponentially, allowing rapid development of this sector. However, many improvements are linked to use of chemically synthesized compounds, with the environment and the human being exposed to these pollutants, often harmful. Nevertheless, the amount of these herbicides is increasing. The herbicide based on quinclorac, as Facet® acts as a growth inhibitor, immediately absorbed by germinated seeds, roots and leaves and then transported to the plant. This agent is commonly applied in rice fields and in southern Brazil, the quinclorac is most often detected in studies with agrochemical residues used on these crops and is considered a major water contaminant. Several animal studies have demonstrated the negative biological effect of this xenobiotic, as changes in behavior, development and production of corticosteroids, which may cause malformations, cell differentiation and reproduction problems. Given the high sensitivity of tadpoles to environmental stressors, we choose as model Lithobates catesbeianus species, which has, among ranídae family, a great plasticity and toughness, due probably to be an introduced species in Brazil. To perform this study were acquired 79 tadpoles with 4 months old, on stage 25 (pro metamorphic) of the Gosner table. Animals were divided into tanks of 60L of water with constant aeration in natural photoperiod and temperature, pH of 7. 4, fed ad libitum on chow. Since there was manipulation and euthanasia of animals, the study was submitted to the Ethics Committee on Animal Use (CEUA) of PUCRS. The herbicide was added at day 8 in X1 concentrations (0,05μg/L), X2 (0,1μg/L), X3 (0,2μg/L) and X4 (0,4μg/L). The objective of the research was to analyze the possible alterations in the activity of antioxidant enzymes and levels of lipid peroxidation (LPO) liver; as well as the levels of corticosterone (CORT), glucose and uric acid (UA) in plasma after exposure of the herbicide. Since there was no difference between groups control 7 days (C7) and control 14 days (14), except for the UA as the groups were compared with the C14, where they show the same development time of exposed. The results showed significant differences in LPO, especially in animals exposed concentration 0. 1 μ g/L (X1) of the herbicide; also induces the increased activity of GST, SOD and CAT; After it followed by a decrease in this activity where noticed in the case of SOD, CAT and GST, an inverse relationship between the concentration of the pesticide and the response of the enzyme system. However, these results did not determine an increase in lipoperoxidation and even cause death to the animal suggesting a high constitutive activity of these enzymes and / or the presence of a non-enzymatic antioxidant system rather desenvolvido. The plasma corticosterone levels showed differences between the groups X1 (0,05μg/L) and X4 (0,4μg/L), a decrease in X4, deducting a decreased responsiveness of animals to prolonged exposure front seven days, at higher concentrations of the pesticide; this response being coupled to increased glucose levels in X3. The UA levels showed a significant reduction in X4 group, however, for further findings on the use of this molecule and its role as an antioxidant by the non-enzymatic system will require new studies. / Desde os princípios do manejo com agricultura pelo homem, a tecnologia tem aumentado de modo exponencial, permitindo a rápida evolução deste setor. Porém, muitas melhorias estão atreladas a utilização de compostos quimicamente sintetizados, sendo o meio ambiente e o próprio ser humano expostos a estes poluentes, muitas vezes nocivos. Mesmo assim, a quantidade desses herbicidas é crescente. Herbicidas a base de quinclorac, como o Facet® atuam como inibidores do crescimento, sendo imediatamente absorvidos por sementes germinadas, raízes e folhas e então translocados para a planta. Este agente é comumente aplicado em lavouras de arroz e, no sul do Brasil, o quinclorac é o mais frequentemente detectado em estudos com resíduos de agroquímicos utilizados nestas lavouras, sendo considerado um grande contaminante de águas. Diversos estudos com animais tem demostrado o efeito biológico negativo de xenobiontes, como alterações no comportamento, desenvolvimento e produção de corticoides, podendo acarretar malformações, problemas de diferenciação celular e reprodução. Tendo em vista a alta sensibilidade de girinos a estressores ambientais, escolhemos como modelo a espécie Lithobates catesbeianus, que possui, dentre a família ranídea, uma grande plasticidade e resistência, sendo uma espécie introduzida no Brasil. Para a realização deste estudo foram adquiridos 79 girinos com 4 meses de vida, no estágio 25 (pró-metamórfico) da tabela de Gosner. Os animais foram divididos em aquários com 60L de água, com aeração constante em fotoperíodo e temperatura naturais, pH de 7,4, alimentados ad libitum com ração. Uma vez que houve manipulação e eutanásia dos animais, a pesquisa foi submetida à Comissão de Ética no Uso de animais (CEUA) da PUCRS.O herbicida foi adicionado no 8º dia nas concentrações X1(0,05μg/L), X2(0,1μg/L), X3(0,2μg/L) e X4(0,4μg/L). O objetivo da pesquisa foi analisar as possíveis alterações da atividade das enzimas antioxidantes e níveis de lipoperoxidação (LPO) hepática; assim como, dos níveis de corticosterona (CORT), glicose e ácido úrico (AU) no plasma frente à exposição do herbicida. Uma vez que não houve diferença entre os grupos controle 7 dias (C7) e controle 14 dias (C14), com exceção da medida de AU, assim os grupos foram comparados com o C14, onde os animais apresentam o mesmo tempo de desenvolvimento dos expostos. Os resultados mostraram diferenças significativas na LPO, principalmente nos animais expostos a concentração 0,1μg/L (X1) do herbicida; induzindo também, a aumento da atividade da GST, da SOD e da CAT; após seguiu-se uma diminuição desta atividade onde verificamos, no caso da SOD, CAT e GST, uma relação inversa entre a concentração do pesticida e a resposta do sistema enzimático. Porém, estes resultados não determinaram um aumento na lipoperoxidação e nem causam mortalidade aos animais o que sugere uma atividade constitutiva alta destas enzimas e/ou a presença de um sistema antioxidante não enzimático bastante eficiente. Os níveis de corticosterona plasmático apresentaram diferença entre os grupos X1(0,05μg/L) e X4(0,4μg/L), com decréscimo no X4, deduzindo uma diminuição da capacidade de resposta do animal frente à exposição prolongada, sete dias, a concentrações mais elevadas do pesticida; estando esta resposta aliada a um aumento da glicemia em X3. Os níveis de AU apresentaram uma redução significativa no grupo X4, porém, para maiores conclusões sobre o uso desta molécula como antioxidante e seu papel junto ao sistema não enzimático serão necessários novos estudos.

Submitted by VANESSA DE CÁSSIA MARTINS PIRES FERREIRA (vanessapires.lds@gmail.com) on 2018-04-25T16:27:59Z No. of bitstreams: 2 Dissertação de mestrado projeto metformina.pdf: 1241718 bytes, checksum: 57f3c86c906bfcdd00e17fd79b26db9a (MD5) Dissertação de mestrado projeto metformina (1).pdf: 1241718 bytes, checksum: 57f3c86c906bfcdd00e17fd79b26db9a (MD5) / Rejected by ROSANGELA APARECIDA LOBO null (rosangelalobo@btu.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: problema 1: no arquivo submetido não consta abstract (resumo em inglês), item obrigatório de acordo com as normas do seu programa de pós. Assim que tiver efetuado essa correção submeta o arquivo, em PDF, novamente. Agradecemos a compreensão. on 2018-04-26T18:01:54Z (GMT) / Submitted by VANESSA DE CÁSSIA MARTINS PIRES FERREIRA (vanessapires.lds@gmail.com) on 2018-05-07T13:07:58Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de mestrado projeto metformina REPOSITÓRIO.pdf: 1252280 bytes, checksum: 4ad269b53a70756d64e305bf791b0405 (MD5) / Approved for entry into archive by Sulamita Selma C Colnago null (sulamita@btu.unesp.br) on 2018-05-07T18:47:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 pires_vcm_me_bot_int.pdf: 1252280 bytes, checksum: 4ad269b53a70756d64e305bf791b0405 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-07T18:47:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 pires_vcm_me_bot_int.pdf: 1252280 bytes, checksum: 4ad269b53a70756d64e305bf791b0405 (MD5) Previous issue date: 2018-02-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Introdução: A exposição à fumaça de cigarros (EFC) não só aumenta o risco para doenças cardiovasculares como, também, lesa diretamente o miocárdio. Estudos experimentais e clínicos mostram que EFC está associada com hipertrofia e disfunção miocárdica, independentemente de fatores vasculares. Pouco se sabe sobre os mecanismos envolvidos com a lesão miocárdica induzida pela EFC. Dentre estes mecanismos estão as alterações no metabolismo energético. Em um coração normal, 60 a 90% do adenosina trifosfato (ATP) são provenientes da oxidação de ácidos graxos (AG). Em condições patológicas, existem alterações na utilização dos substratos, na biogênese mitocondrial e por fim na produção de ATP, que podem comprometer a morfologia e função cardíaca. Estudos mostram que o tabagismo pode levar a resistência insulínica, que por sua vez pode comprometer a bioenergética cardíaca. Entretanto, não é sabido se há comprometimento do metabolismo energético cardíaco associado à resistência insulínica induzida pela EFC. Adicionalmente, em estudos experimentais, a metformina tem se mostrado eficiente em atenuar a remodelação cardíaca, principalmente atuando sobre o metabolismo energético. Objetivos: Os objetivos do trabalho foi avaliar o papel da metformina na remodelação cardíaca induzida pela fumaça de cigarro, por meio da avaliação morfofuncional cardíaca, do estresse oxidativo, do metabolismo energético, e expressão de proteínas que participam do metabolismo da glicose. Material e Métodos: Foram utilizados 60 animais alocados em 4 grupos de 15 animais cada: grupo EFC (n=15), formado por animais expostos à fumaça do cigarro; EFC-MET (n=15) formado por animais expostos à fumaça do cigarro e com ingestão de metformina diluida na água; grupo controle C (n=15) e grupo MET (n=15) que recebeu metformina diluida em água. Após 2 meses os animais foram submetidos a: a) estudo bioquímico para avaliação da exposição ao cigarro, b) estudo ecocardiográfico para avaliação morfofuncional; c) aferição da pressão arterial caudal; d) estudo histológico utilizando imunofluorescência para avaliação de hipertrofia, angiogenese e translocação de GLUt-4; e) Western Blot para avaliação da expressão de proteínas envolvidas com resistência insulínica e metabolismo da glicose; f) avaliação espectrofotométrica para avaliação da atividade de enzimas do metabolismo energético e da quantidade de glicogênio cardíaco. Resultados: Os animais EFC tiveram aumento do átrio esquerdo (AE), do diâmetro do ventrículo esquerdo (DDVE), da massa do ventrículo esquerdo (IMVE), da espessura relativa da parede posterior (ERP) seguido de disfunção diastólica. A metformina atenuou o tamanho do AE, a ERP, a disfunção diastólica em animais EFC. Em relação aos mecanismos potencialmente envolvidos, observou-se que a EFC aumentou a formação de hidroperóxido de lipídeos, mas a associação com metformina e fumo aumentou ainda mais. Porém a metformina, independentemente da EFC aumentou a atividade das enzimas antioxidantes catalase e superóxido dismutase. Em relação ao metabolismo energético, observou-se que o fumo independentemente da metformina reduziu a atividade do complexo I e ATP sintase. Já a metformina aumentou a atividade do complexo I, II e ATP sintase, independentemente da EFC. Não houve interação entre fumo e metformina para o metabolismo energético. Em relação a expressão de proteínas do metabolismo da glicose observou-se que AKT fosforilado/AKT total e GLUT-4 da membrana diminuíram com o fumo e foram atenuados pela metformina. Conclusão: A metformina atenua os danos gerados pela EFC, provavelmente este fato não ocorre por redução do estresse oxidativo. Existe a possibilidade da EFC induzir alteração do metabolismo da glicose, que no tecido cardíaco fora atenuada pela metformina, talvez por aumentar a fosforilação da AKT e aumento do GLUT-4 na membrana. / Introduction: Exposure to cigarette smoke (ECS) not only increases the risk for cardiovascular disease but also directly damages the myocardium. Experimental and clinical studies show that ECS is associated with hypertrophy and myocardial dysfunction, regardless of vascular factors. Little is known about the mechanisms involved with myocardial injury induced by ECS. Among these mechanisms are the changes in energy metabolism. In a normal heart, 60 to 90% of the adenosine triphosphate (ATP) comes from the fatty acid oxidation (FA). In pathological conditions, there are alterations in the use of substrates, in mitochondrial biogenesis and finally in the production of ATP, which may compromise morphology and cardiac function. Studies show that smoking can lead to insulin resistance, which in turn can compromise cardiac bioenergetics. However, it is not known whether there is impairment of the cardiac energy metabolism associated with the insulin resistance induced by the ECS. Additionally, in experimental studies, metformin has been shown to be effective in attenuating cardiac remodeling, mainly by acting on energy metabolism. Objectives: The objective of this study was to evaluate the role of metformin in cardiac remodeling induced by cigarette smoke through cardiac morphofunctional evaluation, oxidative stress, energy metabolism, and expression of proteins that participate in glucose metabolism. Material and Methods: Sixty animals were allocated to four groups of 15 animals each: ECS group (n = 15), composed of animals exposed to cigarette smoke; ECS-MET (n = 15) consisting of animals exposed to cigarette smoke and with ingestion of metformin diluted in water; group C (n = 15) and MET group (n = 15) who received metformin diluted in water. After 2 months the animals were submitted to: a) biochemical study to evaluate the exposure to cigarette; b) echocardiographic study for morphofunctional evaluation; c) measurement of caudal blood pressure; d) histological study using immunofluorescence to evaluate hypertrophy, angiogenesis and GLUt-4 translocation; e) Western Blot for evaluation of the expression of proteins involved with insulin resistance and glucose metabolism; f) spectrophotometric evaluation to evaluate the activity of energy metabolism enzymes and the amount of cardiac glycogen. RESULTS: ECS animals had left atrial enlargement (AE), left ventricular diameter (LVDD), left ventricular mass (LVMI), relative posterior wall thickness (ERP) followed by diastolic dysfunction. Metformin attenuated the size of AE, ERP, diastolic dysfunction in ECS animals. Regarding the potentially involved mechanisms, it was observed that the ECS increased the formation of lipid hydroperoxide, but the association with metformin and smoke increased even more. However, metformin, independently of the ECS increased the activity of the antioxidant enzymes catalase and superoxide dismutase. Regarding energetic metabolism, it was observed that smoking independently of metformin reduced the activity of complex I and ATP synthase. On the other hand, metformin increased the activity of complex I, II and ATP synthase, independently of the ECS. There was no interaction between smoking and metformin for energy metabolism. Regarding the expression of glucose metabolism proteins, it was observed that phosphorylated AKT / total AKT and membrane GLUT-4 decreased with smoke and were attenuated by metformin. Conclusion: Metformin attenuates the damage generated by the ECS, probably not by reducing oxidative stress. There is a possibility that ECS may induce altered glucose metabolism, which in cardiac tissue has been attenuated by metformin, perhaps by increasing the phosphorylation of AKT and increasing GLUT-4 in the membrane. / 2016/14547-0

Orientador: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Resumo: O aumento da atividade dos radicais livres e da produção de citocinas pró-inflamatórias por monócitos pode estar envolvido na patogênese da pré-eclâmpsia. A silibinina é o componente mais ativo da silimarina (Silybum marianum), um flavonóide polifenólico que possui efeitos anti-oxidante e anti-inflamatório. O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da silibinina sobre a produção de citocinas pró e anti-inflamatórias, bem como sobre a liberação de ânion superóxido (O2 -) por monócitos de gestantes com pré-eclâmpsia.Foram selecionadas 30 gestantes com préeclâmpsia (PE), 30 gestantes normais (GN) e 30 mulheres normais nãográvidas (NG). Monócitos de sangue periférico foram incubados na presença ou ausência de silibinina nas concentrações de 5 e 50 g/mL por 60min e, estimulados ou não com ester de forbol (PMA) para determinação de O2 -. Estes monócitos também foram estimulados ou não com lipopolissacáride (LPS) por 18h e, no sobrenadante das culturas foram determinadas, pela técnica de ELISA, as seguintes citocinas: fator de necrose tumoral-alfa (TNF- ), Interleucinas (IL-) IL-6, IL-10, IL-12, IL-15, fator estimulador de colônias de granulócitos e monócitos (GM-CSF) e fator de crescimento e transformação (TGF- . A atividade da enzima superóxido dismutase (SOD) foi avaliada em hemolisado de eritrócitos dos três grupos estudados.Níveis significativamente maiores de O2 - foram liberados por monócitos de gestantes com PE quando comparados com GN e NG, confirmando o estado ativado dessas células. A atividade da SOD foi significativamente maior no grupo de gestantes com PE. Os níveis endógenos de TNFforam significativamente mais elevados nas pacientes com PE, quando comparados com os grupos GN e NG, enquanto os níveis de IL-10 foram significativamente menores nas gestantes com PE. A capacidade de produção de citocinas pelos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Increased free radical activity and high proinflammatory cytokine production by monocytes may be implicated in the pathogenesis of preeclampsia. Silibinin is a major active component of silymarin (Silybum marianum), a polyphenolic plant flavonoid that has antioxidant and anti-inflammatory effects. This study investigated the in vitro effect of silibinin on monocyte production of pro- and anti-inflammatory cytokines, as well as on superoxide anion (O2-) release in pregnant women with preeclampsia.Thirty preeclamptic (PE), 30 healthy pregnant (HP) and 30 healthy non-pregnant (NP) women were included. Peripheral blood monocytes were incubated with or without silibinin at 5 and 50ug/mL for 60 min, and stimulated with or without phorbol myristate acetate (PMA) for the assessment of O2-. These cells were also cultured with or without lipopolysaccharide (LPS) for 18h and tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha), interleukin (IL)-6, IL-10, IL-12p40, IL-15, granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF) and transforming growth factor-beta1 (TGF- 1) in monocyte culture supernatants were determined by ELISA. The activity of the enzyme superoxide dismutase (SOD) was evaluated in erythrocyte lisates of the three groups studied.Monocytes of preeclamptic patients release significantly higher levels of O2 - in comparison to HP and NP women confirming the activation state of these cells. SOD activity in erythrocytes was significantly higher in preeclamptic patients. The endogenous levels of TNFwere significantly higher in PE patients than in HP and NP groups, while IL-10 production was significantly lower in PE women. The levels of IL-6, IL-12 and GM-CSF spontaneously produced by monocytes were higher in HP and PE groups than in NP women. The capacity of cytokine production by LPS-stimulated monocytes was preserved in all the three groups studied... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre