Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-04T22:34:35Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Maria Daniela Silva Buonafina.pdf: 2571387 bytes, checksum: 3b91c5c44005747001c4eeed0e5d1cf4 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-17T23:01:54Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Maria Daniela Silva Buonafina.pdf: 2571387 bytes, checksum: 3b91c5c44005747001c4eeed0e5d1cf4 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-17T23:01:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Maria Daniela Silva Buonafina.pdf: 2571387 bytes, checksum: 3b91c5c44005747001c4eeed0e5d1cf4 (MD5) Previous issue date: 2014-02-26 / CNPq / A otomicose, infecção do conduto auditivo externo, tendo como agentes mais comuns espécies de Aspergillus e Candida. No tratamento, tem se verificado crescente resistência antifúngica. Fatores relacionados aos fungos como constituição da parede celular e formação de biofilmes podem propiciar maior dano e extensão da lesão. Assim, esta pesquisa objetivou caracterizar agentes de otomicose quanto ao perfil de carboidratos da parede celular, capacidade de formar biofilme, selecionar a cepa mais virulenta e avaliar tratamento experimental com ciclopirox olamina. As lectinas Com A, WGA, UEA-I e PNA conjugadas à peroxidase foram utilizadas para marcação dos carboidratos em 28 isolados. E foram crescidos em Sabouraud e RPMI para análise do biofilme com leitura visual e quantificada. Foram testados cetoconazol, anfotericina B e ciclopirox olamina através da microdiluição em caldo com leitura visual e absorbância. Otomicose experimental foi reproduzida com o isolado mais virulento e o tratamento seguiu com cetoconazol e ciclopirox olamina. Marcação com lectinas variou intra e interespecífica na expressão de carboidratos, sendo WGA a que marcou mais intensamente e também variou quanto ao biofilme. A inibição com anfotericina B variou entre 0,125-16μg/ mL; cetoconazol 0,5-8μg/ mL e ciclopirox olamina 0,25-8μg/ mL. A infecção foi confirmada pela visualização de estruturas em parasitismo e isolamento do fungo. A composição da superfície dos isolados com expressão de N-acetil-glicosamina contribuiu para o biofilme, proporcionando resistência antifúngica e maior capacidade de infecção, porém ciclopirox olamina pode ser uma nova alternativa para o tratamento da otomicose. / Otomycosis, infection of the external auditory canal, having Aspergillus and Candida as the most common agents. In treatment, there has been increasing antifungal resistance. Factors related to fungi such as constitution of the cell wall and formation of biofilms can provide greater damage and extension of the lesion. The aim of this research was to characterize otomycosis agents in relation to carbohydrate profile of the cell wall, ability to form biofilm, select the most virulent strain and evaluate experimental treatment with cyclopirox olamine. The lectins with A, WGA, UEA-I and PNA conjugated to peroxidase were used to label carbohydrates in 28 isolates. And were grown in Sabouraud and RPMI for biofilm analysis with visual and quantified reading. Ketoconazole, amphotericin B and cyclopirox olamine were tested by broth microdilution with visual readout and absorbance. Experimental otomycosis was reproduced with the most virulent isolate and treatment followed with ketoconazole and cyclopirox olamine. Markings with lectins varied intra and interspecific in the expression of carbohydrates, being WGA the one that marked more intensely and also varied as for the biofilm. Inhibition with amphotericin B ranged from 0.125-16 μg/mL; Ketoconazole 0.5-8 μg/mL and cyclopirox olamine 0.25-8 μg/mL. The infection was confirmed by the visualization of structures in parasitism and fungus isolation. The surface composition of N-acetyl-glycosamine-like isolates contributed to biofilm, providing antifungal resistance and increased infectivity, but cyclopirox olamine may be a new alternative for the treatment of otomycosis.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:39Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-11-28Bitstream added on 2014-06-13T19:24:57Z : No. of bitstreams: 1 carvalho_fm_me_botfm.pdf: 667343 bytes, checksum: cf2805112d3bb1292cba3553dd03ef7c (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Gap / O tratamento da PCM, micose sistêmica causada Paracoccidioides brasiliensis, continua sendo objeto de pesquisa clínica e experimental. Este trabalho avaliou a eficácia de diferentes esquemas terapêuticos com cotrimoxazol (CMX), na dose diária de 200 mg/kg de peso corporal, em dose diária única, no tratamento da PCM murina. Os resultados revelaram que o tratamento com CMX por tempo prolongado foi eficaz quando iniciado precoce ou tardiamente. O tratamento com curta duração foi ineficaz, pois não determinou diminuição da carga fúngica, durante as 20 semanas de seguimento. O efeito do CMX foi o mesmo em pulmões e baço, nos diferentes esquemas terapêuticos utilizados, eficazes ou não. A mortalidade cumulativa entre os grupos 1, 2 e 4 não diferiram entre si, os grupos 3 e 5 apresentaram a melhor taxa de sobrevida. Os níveis séricos de anticorpos específicos foram detectados a partir da segunda semana, apresentando maiores índices nos animais do G2, sendo que nesses os níveis aumentaram até a oitava semana e permanecendo estáveis por todo o experimento. No G3 houve uma flutuação durante todo o experimento apresentando níveis altos na 20a semana. Os grupos 4 e 5 permaneceram estáveis durante todo o experimento. Os efeitos benéficos do tratamento foram observados com a administração de CMX em dose única diária, cujos níveis séricos se mantiveram adequados por menos de 12 horas. Esses resultados, bastante satisfatórios, demonstram que o modelo experimental murino é bom método de avaliação da eficácia do CMX no tratamento da PCM e sugerem a avaliação de outros esquemas terapêuticos, como a administração a cada 12 horas. / Paracoccidioidomicosis (PCM) treatment, a systemic mycosis caused by Paracoccidioides brasiliensis, has been a clinical and experimental research issue. This work evaluated the efficacy of different therapeutic protocols with cotrimoxazole (CMX) on a daily dosage of 200mg/kg body weight, in a single daily dosage on murine PCM treatment. The results showed that CMX treatment for a prolonged period was efficient when started early or late. The short duration treatment was inefficient once it did not determine fungus load decrease during 20 weeks of following. CMX effect was the same in lungs and spleen under different therapeutic protocols used, whether efficient or not. Cumulative death tends to be different among studied groups. Death frequency was smaller in prolonged treated groups with an early or late protocol starting. Specific antibodies blood levels were detected from the second week and did not differ among experimental groups. Beneficial effects of treatment were observed with CMX administration on a daily single dosage and blood levels remained satisfactory for less than 12 hours. These results, quite satisfactory, show that murine experimental protocol is a good evaluation method of MCX effectiveness on PCM treatment and it suggests the evaluation of other therapeutic protocols, as an administration at every 12 hours.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002Bitstream added on 2014-06-13T19:15:40Z : No. of bitstreams: 1 barbosa_fh_me_botfm.pdf: 692507 bytes, checksum: a7f91088d5074d8d040c054c5989981c (MD5) / O fungo dimórfico Paracoccidioides brasiliensis (Pb) é o agente etiológico da paracoccidioidomicose (PCM), a micose sistêmica mais importante da América Latina. A espécie de tatu Dasypus novemcinctus mostrou ser um importante reservatório do fungo e o estudo de isolados destes animais será útil para uma melhor compreensão da ecologia e epidemiologia desta doença. O objetivo deste trabalho foi comparar a virulência e variabilidade genética de isolados de tatus e de pacientes para melhor compreender a importância do tatu na PCM. Os isolados animais foram obtidos da área endêmica de Botucatu, São Paulo, Brasil, com exata informação dos locais de coleta. Os isolados clínicos, exceto a cepa padrão Pb265, foram obtidos de pacientes residentes nos municípios de Pratânia, Manduri e Botucatu. A virulência foi avaliada no modelo experimental do hamster através da contagem de UFC (Unidades Formadoras de Colônias), histopatologia e dosagem de anticorpos específicos e a caracterização molecular por meio da técnica de RAPD e sequenciamento do DNA ribossômico. Todos isolados de tatus foram virulentos, disseminando-se para vários órgãos. A cepa Pb265, isolada de paciente, apresentou baixa virulência. A contagem de UFC nos diferentes órgãos permitiu uma classificação do fungo em 4 categorias: virulência muito alta, virulência alta, virulência intermediária e baixa virulência. A análise molecular mostrou grande diversidade genética entre os isolados, porém não houve separação entre os fungos isolados de pacientes e de tatu. Estes resultados indicam que tanto o homem quanto o tatu podem estar sendo infectados por patógenos com mesmo genótipo, provavelmente localizados em foco ambiental comum. Portanto, os tatus como reservatórios do P. brasiliensis na natureza, representam importantes elos na cadeia da doença... / Paracoccidioides brasiliensis is the etiologic agent of paracoccidioidomycosis (PCM), the most important systemic mycosis in Latin America. The armadillo Dasypus novemcinctus has been confirmed as the first natural reservoir of this fungus and its geographic distribution is similar to the distribution of human PCM. This work analysed the virulence profiles and genetic diversity of P. brasiliensis isolates from different armadillos and clinical isolates. The animal isolates were obtained from the Botucatu endemic area of PCM, with exact information of the collection sites. The clinical isolates, except Pb265, were obtained from patients that live in the same endemic area (Pratânia, Manduri and Botucatu county). Virulence was evaluated in an experimental hamster model by colony-forming units (CFU) and histopathological analysis in the testis, liver, spleen, lung and circulating specific antibodies measured by ELISA. Molecular characterisation was evaluated by RAPD methods and sequencing analyses of the internal transcribed spacer regions (ITS 1 and ITS 2) and 5.8 S ribosomal gene. All isolates from armadillos were virulent, with dissemination to many organs. The clinical isolate Pb 265 was less virulent. The isolates were classified into four categories according to number of CFU per gram of tissue: very high, high, intermediate and low virulence. Molecular analysis showed large genetic similarity between all isolates and did not separate armadillos from clinical isolates. This study confirms that armadillos harbor pathogenic genotypes of P. brasiliensis, probably the same ones that infect man. Thus, the armadillos are very important animals in the epidemiology this disease.

Submitted by Rafael Santana (rafael.silvasantana@ufpe.br) on 2018-02-20T19:05:38Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Dissertacao TIAGO FRANCA BARRETO versao final revisada com ficha.pdf: 1881406 bytes, checksum: 12e01eebda9019e211cef41ad935a421 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-02-20T19:05:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Dissertacao TIAGO FRANCA BARRETO versao final revisada com ficha.pdf: 1881406 bytes, checksum: 12e01eebda9019e211cef41ad935a421 (MD5) Previous issue date: 2015-08-04 / CAPES, CNPQ, FACEPE / Cryptococcus gattii é um dos principais agentes da criptococose em indivíduos saudáveis, e para o tratamento da infecção, drogas antimicóticas em monoterapia ou em associação são utilizadas. Todavia, à toxicidade dessas drogas e o crescente aparecimento de linhagens resistentes impulsiona a busca por novas terapias que sejam eficientes e que causem menos efeitos colaterais. Para isso, estudos in vitro e modelos experimentais no desenvolvimento de novas estratégias terapêuticas são utilizadas. Assim, este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito imunomodulador de pCramoll em modelo de infecção intratraqueal por C. gattii, analisando parâmetros como carga fúngica nos órgãos alvos, quantificação nos níveis dos fatores inflamatórios envolvidos na doença, como a influência da pCramoll na fagocitose de C. gatti. Após escolha terapêutica mais efetiva, na qual pCramoll sozinha ou combinada a fluconazol a 20mg.kg-1 aumentam a sobrevida dos animais infectados, foi observado uma influência expressiva na morbidade dos animais tratados, melhorando aspectos como (estado neuropsiquiátrico, comportamento motor, função autonômica, tônus e força muscular e função reflexo/sensorial). Com os tratamentos propostos também houve diminuição de carga fúngica pulmonar e cerebral com 15 e 35 dias pós-infecção. E modulação nos níveis de CXCL/KC, IL-10 e IL-17 como do infiltrado inflamatório. In vitro, pCramoll estimulou a fagocitose de C. gattii por macrófagos de medula, com grande produção de espécies reativas do oxigênio, diminuindo a proliferação intracelular fúngica. Os achados mostram que a combinação de pCramoll com fluconazol é uma alternativa terapêutica viável frente a criptococose, aumentando a sobrevida e principalmente melhorando a morbidade dos animais infectados. / Cryptococcus gattii is the main agent of cryptococcosis in healthy individuals and for the treatment of infection antimycotic drugs in monotherapy or in association are utilized. However, the toxicity these drugs and the increasing appearance of resistant strains, driven the search for news therapy that are more effectives and the cause fewer collateral effects. For this, in vitro studies and experimental models for development of new therapeutic strategies are used. Thus, this work aimed to evaluate the immunomodulatory effect of pCramoll in intratracheal infection model with C. gattii, analyzing parameters as fungal charge in the target organs, quantifying the levels of inflammatory factors involved in the disease, as influence of pCramoll in C. gattii phagocytosis. After choosing the most effective therapy, in which pCramoll alone or in combination with fluconazole the 20 mg.kg-1 increase survival of infected animals, an expressive influence on the morbidity of treated animals was observed, improving aspects such as (neuropsychiatric state, motor behavior, autonomic function, tone and muscle strength and reflex / sensory function). With the treatments there was also decrease pulmonary and cerebral fungal charge with 15 and 35 days post-infection, as well as modulation levels of CXCL / KC, IL-10 and IL-17 and the inflammatory infiltrate. In vitro, pCramoll stimulated C. gattii phagocytosis by marrow macrophages with large production of reactive oxygen species, and decreasing the intracellular fungal proliferation. The findings show that a combination of pCramoll fluconazole is a viable alternative therapeutic to crytococosis, increasing survival and especially improving morbidity of infected animals.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-04-07Bitstream added on 2014-06-13T19:53:57Z : No. of bitstreams: 1 angella_af_me_botib.pdf: 1771008 bytes, checksum: 49bffe6b87df00a6ffab3e65cd19bdaa (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O fungo termo dimórfico, Paracoccidioides brasiliensis é o agente etiológico da Paracoccidioidomicose (PCM), a micose sistêmica mais prevalente da América Latina. Este fungo vem sendo frequentemente isolado de amostras clínicas, tecidos de tatu (Dasypus novemcinctus) e recentemente foi também isolado de cão. Este trabalho avaliou a transição de micélio para levedura (M-L), a termo tolerância e o perfil de virulência em nove isolados de P. brasiliensis (quatro de pacientes humanos, quatro de tatus e um de cão), bem como a sua relação com a seqüência parcial e expressão do gene hsp70 (Heat Shock Protein 70) através de Real Time RT-PCR. Tanto os dados morfológicos como moleculares se mostraram variáveis dentre os diferentes isolados. Alguns destes dados, como sequenciamento e morfologia leveduriforme corroboram com a divisão de nossos isolados nas duas espécies crípticas simpátricas previamente propostas por Matute et al (2006). Nossos resultados confirmam que a HSP70 pode ser um importante fator de virulência por estar associado à termo tolerância, mas sua expressão parece não ser diretamente associada a altos padrões de virulência. / The thermo dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis is the etiological agent of Paracoccidioidomycosis (PCM), the most prevalent systemic mycosis in Latin America. The previous phylogenetic species recognition proved the existence of, at least, three cryptic species in this pathogen. In this work we evaluated the mycelia to yeast (M-Y) transition, thermo tolerance and virulence profiles of nine isolates of P. brasiliensis, (including members of two of the three species) as well as its relation to the partial sequence and expression of hsp70 gene. It was observed a large phenotypic variability concerning the M-Y transition. The isolates Bt84 and T10 took more time to convert to the yeast form. These same isolates presented stretched yeast cells at 36°C, instead of the typical round cells. It was also observed arthroconidia production during the M-Y transition for some of the nine isolates studied. The hsp70 expression showed to be variable among our isolates. The partial sequencing of hsp70 gene resulted in a Neighbour Joining tree that divided our isolates in two main groups. Conclusions: Our data confirm that hsp70 gene might be an important virulence factor, associated with the thermo tolerance, but its expression does not seem to be directly related to high virulence profiles. We also presented some preliminary results about mycological characters that could be important candidates for morphologic markers for species recognition, as well as the partial sequencing of one member of the hsp70 gene family that allowed the separation of our isolates in two clusters, that correspond to the two sympatric cryptic species that occur in our PCM hyper endemic area (Botucatu, SP, Brazil).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-02-27Bitstream added on 2014-06-13T20:14:33Z : No. of bitstreams: 1 theodoro_rc_me_botib.pdf: 1627532 bytes, checksum: 84aa1424194b14fdd0953c57c4c5c2a6 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O fungo termo dimórfico, Paracoccidioides brasiliensis é o agente etiológico da Paracoccidioidomicose (PCM), a micose sistêmica mais prevalente da América Latina. Este fungo vem sendo frequentemente isolado de amostras clínicas, tecidos de tatu (Dasypus novemcinctus) e recentemente foi também isolado de cão. Este trabalho avaliou a transição de micélio para levedura (M-L), a termo tolerância e o perfil de virulência em nove isolados de P. brasiliensis (quatro de pacientes humanos, quatro de tatus e um de cão), bem como a sua relação com a seqüência parcial e expressão do gene hsp70 (Heat Shock Protein 70) através de Real Time RT-PCR. Tanto os dados morfológicos como moleculares se mostraram variáveis dentre os diferentes isolados. Alguns destes dados, como sequenciamento e morfologia leveduriforme corroboram com a divisão de nossos isolados nas duas espécies crípticas simpátricas previamente propostas por Matute et al (2006). Nossos resultados confirmam que a HSP70 pode ser um importante fator de virulência por estar associado à termo tolerância, mas sua expressão parece não ser diretamente associada a altos padrões de virulência. / The thermo dimorphic fungus Paracoccidioides brasiliensis is the etiological agent of Paracoccidioidomycosis (PCM), the most prevalent systemic mycosis in Latin America. The previous phylogenetic species recognition proved the existence of, at least, three cryptic species in this pathogen. In this work we evaluated the mycelia to yeast (M-Y) transition, thermo tolerance and virulence profiles of nine isolates of P. brasiliensis, (including members of two of the three species) as well as its relation to the partial sequence and expression of hsp70 gene. It was observed a large phenotypic variability concerning the M-Y transition. The isolates Bt84 and T10 took more time to convert to the yeast form. These same isolates presented stretched yeast cells at 36°C, instead of the typical round cells. It was also observed arthroconidia production during the M-Y transition for some of the nine isolates studied. The hsp70 expression showed to be variable among our isolates. The partial sequencing of hsp70 gene resulted in a Neighbour Joining tree that divided our isolates in two main groups. Our data confirm that hsp70 gene might be an important virulence factor, associated with the thermo tolerance, but its expression does not seem to be directly related to high virulence profiles. We also presented some preliminary results about mycological characters that could be important candidates for morphologic markers for species recognition, as well as the partial sequencing of one member of the hsp70 gene family that allowed the separation of our isolates in two clusters, that correspond to the two sympatric cryptic species that occur in our PCM hyper endemic area (Botucatu, SP, Brazil).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002Bitstream added on 2014-06-13T19:23:19Z : No. of bitstreams: 1 alcantara_tm_dr_botfm.pdf: 920701 bytes, checksum: 3964c80e93a3f0ffd43c1b9743c630cc (MD5) / A paracoccidioidomicose (Pbmicose) é micose sistêmica na qual complexos eventos inflamatórios e imunológicos são desencadeados pela interação fungo-hospedeiro, resultando em duas características importantes da doença: freqüente instalação de distúrbios imunorregulatórios e reação inflamatória granulomatosa. Este trabalho teve por objetivo estudar em pacientes portadores da forma crônica multifocal da Pbmicose, na fase pré-tratamento, as características da resposta granulomatosa em lesões de pele e mucosa, considerando suas populações celulares e a presença in situ de citocinas de padrão Th1 e Th2. Estes achados foram correlacionados com a gravidade clínica, níveis de competência imunológica humoral e celular e níveis séricos dessas mesmas citocinas. Foram estudados 27 pacientes com gravidade clínica moderada (13 pacientes), moderada/grave (8 pacientes), grave (5 pacientes) e não avaliada (1 paciente). As biópsias foram realizadas por punch de lesões de pele ou mucosa. Os soros foram separados de sangue obtido por punção venosa, e o teste cutâneo realizado pela paracoccidioidina. Nas biópsias foram analisados o número e padrão de distribuição de neutrófilos, eosinófilos, células gigantes, plasmócitos, linfócitos T CD3+ e CD8+, linfócitos B e células NK (estes três últimos caracterizados pela imuno-histoquímica), contagem de fungos e a detecção imuno-histoquímica de IL-4, IFN- , IL-10, TNF- e TGF- . No soro dos pacientes foram realizadas dosagens de IL-2, IL-4, IL-10 e TGF- e de anticorpos específicos anti-Pb por ensaio imunoenzimático (ELISA)... / Paracoccidioidomycosis (Pbmycosis) is a systemic mycosis in which a complex inflammatory and immunological events are unchained by the interaction of the fungus (Pb) with the host tissues, resulting in two important characteristics of the disease: frequent immunoregulatory disturbances and a granulomatous inflammation. The aim of this work was to study in patients with the chronic multifocal form of Pbmycosis, before treatment, the characteristics of the granulomatous response in skin and mucosal lesions, considering the cellular populations and the presence in situ of Th1 and Th2 cytokines patterns. These results were correlated with the clinical severity, the levels of humoral and cellular immune competence and serum levels of those cytokines. Twenty seven patients were studied, distributed accordingly to clinical severity: moderate (13 patients), moderate/severe (8 patients), severe (5 patients), and not evaluated (1 patient). Punch biopsies were collected from skin or mucosal lesions, the serum obtained from venous blood samples to measured antibodies levels, and the skin test accomplished by the paracoccidioidin. In biopsies the following parameters were evaluated: the number and distribution pattern of neutrophils, eosinophils, giant cells, plasma cells, T CD3+ and CD8+ cells, B cells and NK cells (the last three characterized by immunohistochemistry), number of fungi, and detection of IL-4, IFN- , IL-10, TNF- and TGF- by immunohistochemistry. It was also measured the serum levels of IL-2, IL-4, IL-10 and TGF- and the level of specific antibodies anti-Pb by ELISA test. Specific granulomatous lesions, composed with epithelioid, well organized granuloma together with epithelioid loose, ill organized granuloma were observed in the same lesion of the dermis and submucosa. Neutrophils... (Complete abstract, click electronic address below)

Submitted by Ginamara Lima (ginaj@pucrs.br) on 2012-10-22T12:17:09Z No. of bitstreams: 1 442944.pdf: 2331033 bytes, checksum: b130d8539a518de2335d49422e1a70fa (MD5) / Made available in DSpace on 2012-10-22T12:17:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 442944.pdf: 2331033 bytes, checksum: b130d8539a518de2335d49422e1a70fa (MD5) / O presente estudo teve por objetivo analisar características histomorfométricas, imunoistoquímicas e clínicas de lesões orais da paracoccidioidomicose. A amostra foi composta por 50 prontuários e 50 blocos de parafina contendo espécimes biopsiados de lesões orais, ambos provenientes de pacientes portadores de paracoccidioidomicose diagnosticados no Serviço de Estomatologia do Hospital São Lucas da PUCRS no período compreendido entre os anos de 1977 e 2010. Informações sobre tempo de evolução da doença, número e tamanho das lesões orais, bem como contagem de eritrócitos, leucócitos, linfócitos, hematócrito, hemoglobina e eritrossedimentação foram coletadas dos prontuários dos pacientes. Cortes histológicos obtidos a partir dos espécimes em parafina foram submetidos às colorações de hematoxilina e eosina (H&E), Gomori-Grocott e processamento imunoistoquímico. As amostras foram agrupadas de acordo com a intensidade de compactação do granuloma, e as variáveis número de fungos, número de brotamentos, diâmetro dos fungos, diâmetro dos brotamentos, expressão imunoistoquímica de IL-2, TNF-alfa e IFN-gama foram avaliadas e correlacionadas. O diâmetro dos brotamentos foi significativamente maior nos granulomas de compactação intermediária quando comparados aos granulomas de maior compactação. As demais variáveis (número de brotamentos, número e diâmetro dos fungos, expressão de IL-2, TNF-alfa e IFN-gama, características clínicas e hematológicas) não exibiram alteração significativa de acordo com o grau de compactação dos granulomas. Foi observada correlação positiva entre número de brotamentos e número de fungos (r=0.834); diâmetro dos brotamentos e diâmetro do fungo (r=0.496); eritrócitos e número de fungos (r=0.420); eritrócitos e número de brotamentos (r=0.408); leucócitos e número de brotamentos (r=0.396). A correlação negativa ocorreu entre diâmetro e número de fungos (r=-0.419); diâmetro dos brotamentos e compactação do granuloma (r=-0.367); expressão de TNF-alfa e número de fungos (r=-0.372); expressão de TNF-alfa e número de brotamentos (r=-0.300). As características histológicas, imunológicas e clínicas das lesões orais da paracoccidioidomicose crônica não diferiram significativamente entre os pacientes da amostra avaliada. Os níveis de TNF-alfa nas lesões orais estão inversamente relacionados à intensidade da infecção. / The present study aimed at analyzing histomorphometric, immunohistochemical and clinical features of oral lesions of paracoccidioidomycosis. The sample comprised 50 medical charts and 50 paraffinized blocks of biopsed specimens of oral leisons, both from paracoccidioidomycosis patients diagnosed at Stomatology Department of Hospital São Lucas, PUCRS from 1977 to 2010. Data regarding disease duration, and size and number of oral lesions, as well as erythrocytes, leukocytes, lymphocytes, hematocrit, hemoglobin and erythrocyte sedimentation rate, were collected from medical charts. Histological cuts were obtained from the paraffinized specimens and subjected to hematoxylin and eosin (H&E), Gomori-Grocott and immunohistochemical staining. The sample was classified according to the density of granulomas, and the variables number and diameter of fungi, number and diameter of buds, and IL-2, TNF-alpha and IFN-gamma expression were analyzed and correlated. Bud diameter was significantly greater in intermediate density granulomas compared to higher density granulomas. The other variables (bud number, number and diameter of fungi, expression of IL-2, TNF-alpha and IFN-gamma, and clinical and hematological features) did not significantly change with the density of granulomas. There was a positive correlation between bud number and fungal cell number (r=0.834), bud diameter and fungal cell diameter (r=0.496), erythrocytes and number of fungi (r=0.420), erythrocytes and bud number (r=0.408), and leukocytes and bud number (r=0.396). Negative correlation occurred between number and diameter of fungal cells (r=-0.419), bud diameter and granuloma density (r=-0.367), TNF-alpha expression and number of fungal cells (r=-0.372), TNF-alpha expression and bud number (r=-0.300). Histological, immunological and clinical characteristics of oral lesions of chronic paracoccidioidomycosis did not differ significantly between patients in our sample. TNF-alpha levels in oral lesions were inversely correlated with intensity of infection.

Com o objetivo de avaliar os linfócitos do sangue periférico na micose fungóide, foram realizados hemograma e imunofenotipagem por citometria de fluxo de 40 doentes e de 26 indivíduos saudáveis. Verificou-se que células de Sézary acima de 7% e linfócitos pleomórficos acima de 24% estiveram presentes apenas na doença. Alterações quantitativas, qualitativas, perda de marcadores imunofenotípicos e presença de populações linfocitárias com tamanhos distintos, na citometria, foram verificadas nos doentes mais precocemente que alterações numéricas e morfológicas do hemograma / Aiming to evaluate peripheral blood lymphocytes in mycosis fungoides, we have performed hemogram and immunophenotyping by flow cytometry in about 40 patients and 26 healthy people. We have noticed that only diseased patients presented Sézary cells higher than 7% and pleomorphic cells higher than 24%. Quantitative and qualitative changes, loss of immunophenotyping markers and the presence of lymphocytes populations with different size, on flow cytometry, were firstly verified on patients rather than numeric and morphologic changes in

Com o objetivo de avaliar os linfócitos do sangue periférico na micose fungóide, foram realizados hemograma e imunofenotipagem por citometria de fluxo de 40 doentes e de 26 indivíduos saudáveis. Verificou-se que células de Sézary acima de 7% e linfócitos pleomórficos acima de 24% estiveram presentes apenas na doença. Alterações quantitativas, qualitativas, perda de marcadores imunofenotípicos e presença de populações linfocitárias com tamanhos distintos, na citometria, foram verificadas nos doentes mais precocemente que alterações numéricas e morfológicas do hemograma / Aiming to evaluate peripheral blood lymphocytes in mycosis fungoides, we have performed hemogram and immunophenotyping by flow cytometry in about 40 patients and 26 healthy people. We have noticed that only diseased patients presented Sézary cells higher than 7% and pleomorphic cells higher than 24%. Quantitative and qualitative changes, loss of immunophenotyping markers and the presence of lymphocytes populations with different size, on flow cytometry, were firstly verified on patients rather than numeric and morphologic changes in