Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The aim of this study was to characterize the ependymal cells and neural population in the Tropidurus hispidus medial cortex. It s well known nowadays that the nervous system isn t so constant the way was believed and detains morphological and functional properties that was influenced by environmental, sexual, age alterations and origin of the lesion like others. There s a vast literature about studies of amphibians, birds, reptiles even mammals brains, but one of the major difficulties found in the nervous system s plasticity research area is the appropriated experimental model. The medial cortex of Tropidurus hispidus specimens was studied by several techniques as TIMM, Nissl, immunostainings to BrDU, GABA, EC40, by Lectin and mainly the Golgi method. The test results showed the existence of 17 neuronal types in the T. hispidus medial cortex, with the major prevalence of the unipolar granular neuron, showed 12 ependymal cells, showed the positive reactivity to the GABA, BrDU and EC40 immunostainings too, the two lasts shows a post-natal neurogenic activity in the cortical region of this animal. Also was positive reactivity to the Lectin utilization in the microglia visualization. With the analysis of all this aspects, the study in the Tropidurus hispidus medial cortex showed a structural complexity as other characteristics that turn this animal a viable experimental model to the neurogenic processes studies. / O objetivo deste trabalho foi caracterizar a população neural e de células ependimárias no córtex medial do lagarto Tropidurus hispidus. Sabe-se atualmente que o sistema nervoso não é tão constante como se pensava e que detêm propriedades morfológicas e funcionais que são influenciadas por alterações ambientais, sexuais, etárias, da natureza da lesão dentre outras. Toda essa problemática vem sendo analisada tendo como base a regeneração do sistema nervoso. Há vasta literatura sobre estudo dos cérebros desde anfíbios, aves répteis até mamíferos e mesmo humanos, mas uma das maiores dificuldades para a pesquisa na área de plasticidade do sistema nervoso é um modelo experimental adequado. Para isto, no presente estudo o córtex medial dos espécimes de Tropidurus hispidus foi estudado por diversas técnicas como TIMM, Nissl, imunohistoquímicas para BrDU, GABA, EC40, pela Lectina e principalmente pelo método de Golgi. Os resultados dos testes demonstraram a existência de 17 tipos de neurônios no córtex medial do cérebro do T. hispidus, sendo que o tipo de maior prevalência foi o do neurônio granular unipolar, o teste de Golgi também mostrou 12 tipos de ependimócitos, verificando-se reatividade positiva à imunohistoquímica para GABA, para BrDU e para EC40, esses dois últimos demonstraram uma atividade neurogênica pós-natal na região cortical desse animal. Também houve uma reatividade positiva à utilização da Lectina na visualização da micróglia. Haja vista aos aspectos analisados, o estudo no córtex medial do T. hispidus denotou uma complexidade estrutural bem como características que o tornam um modelo experimental viável para os estudos dos processos neurogênicos.

O carcinoma hepatocelular (CHC) é a principal causa de morte em pacientes com cirrose hepática. O prognóstico para o CHC é muito pobre; trata-se de um tumor agressivo que progride rapidamente e, portanto, o diagnóstico precoce é o único meio de aumentar a sobrevida dos pacientes. O presente estudo sugere a tioacetamida (TAA) como modelo experimental de carcinogênese no microambiente cirrótico e busca identificar os mecanismos iniciais do desenvolvimento tumoral durante a cirrose. Neste trabalho, ratos Wistar machos foram injetados com TAA i.p. 3 vezes/semana por 14, 21 e 35 semanas. Foram examinados os efeitos sobre a função hepática, morfologia, desenvolvimento e características de lesões pré-neoplásicas (LPNs), bem como expressão tecidual e gênica dos marcadores tumorais mais comuns no CHC. O tratamento com TAA promoveu alterações que compreenderam a deposição de tecido cicatricial com desenvolvimento de cirrose hepática, inflamação, aumento da proliferação celular e da apoptose, desenvolvimento de LPNs e modificações na expressão dos marcadores tumorais. As alterações celulares e estruturais do tecido hepático resultaram em redução do ganho de peso dos animais e aumento do peso e do volume do fígado, proporcional ao tempo de tratamento. O índice de atividade histológica foi maior no fígado cirrótico e alcançou maior valor após 35 semanas de tratamento. Marcadores sanguíneos de lesão hepática aumentaram nos animais tratados ao passo que os marcadores de função mostraram melhora com o passar do tempo. Os níveis de alfa-fetoproteína foram maiores após 14 semanas de tratamento. A administração de TAA por 21 semanas resultou em maior número de LPNs, com predomínio de lesões persistentes sobre remodelantes em número e tamanho. A proliferação celular foi exacerbada nos fígados cirróticos sendo mais elevada em 14 semanas e apresentando redução significativa após 35 semanas. O número de corpúsculos apoptóticos foi maior no tecido cirrótico e a apoptose foi mais pronunciada em 21 semanas. O painel imuno-histoquímico composto por GPC3, HSP70 e GS demonstrou maior positividade para a combinação HSP70+GS, uma vez que a expressão de GPC3 foi baixa em todos os grupos. A análise dos marcadores moleculares GPC3, survivina e LYVE1 concordou com os resultados das LPNs. A expressão gênica de survivina foi maior em 14 semanas, quando foi observada também maior proliferação, e diminuiu ao longo do tratamento. A expressão de LYVE1 diminuiu nos grupos de 14 e 21 semanas, porém, foi significativamente elevada em 35 semanas. A partir desses resultados, concluímos que o modelo da TAA foi adequado para a indução de cirrose e para o desencadeamento da hepatocarcinogênese. As fases de iniciação e promoção foram identificadas em todos os períodos avaliados, entretanto, a TAA mostrou-se uma importante ferramenta para a fase de promoção aumentando a proliferação celular e o tamanho das LPNs. O tratamento por 21 semanas foi o mais eficaz em aliar a iniciação e promoção da hepatocarcinogênese, como mostrado pelo número e pelo tamanho das lesões. Contudo, nenhum grupo desenvolveu CHC indicando que a TAA, provavelmente, necessita ser associada com outras substâncias tendo em vista seu principal efeito como agente promotor. / Hepatocellular carcinoma (HCC) is the main cause of death in patients with liver cirrhosis. The prognosis for HCC is very poor; it is an aggressive tumor that progresses rapidly and therefore early diagnosis is the only way to increase the survival of these patients. This study suggests the thioacetamide (TAA) as experimental model of carcinogenesis in cirrhotic microenvironment and seeks to identify the initial mechanisms of tumor development during cirrhosis. In this study, male Wistar rats were injected ip with TAA 3 times / week for 14, 21 to 35 weeks. We examined the effects on liver function, morphology, characteristics and development of preneoplastic lesions (PNLs), as well as tissue gene expression and the most common tumor markers in HCC. Treatment with TAA made changes that comprised the deposition of scar tissue in the liver cirrhosis, inflammation, increased cell proliferation and apoptosis, PNLs development and changes in the expression of tumor markers. The cellular and structural changes of the liver tissue resulted in reduced weight gain of the animals and an increase in liver weight and volume proportional to the treatment time. The histological activity index was higher in cirrhotic liver and achieved greater value after 35 weeks of treatment. Blood markers of liver damage in the treated animals increased while the function markers showed improvement over time. The alpha-fetoprotein levels were higher after 14 weeks of treatment. The administration of TAA for 21 weeks resulted in a greater number of PNLs, with a predominance of persistent lesions over remodeling lesions in number and size. Cell proliferation was exacerbated in cirrhotic livers and was higher in 14 weeks with a significant reduction after 35 weeks. The number of apoptotic corpuscles was higher in cirrhotic tissue and apoptosis was more pronounced in 21 weeks. Immunohistochemical panel of GPC3, HSP70 and GS showed higher rates of HSP70 + GS combination, since GPC3 expression was low in all groups. The analysis of molecular markers GPC3, surviving, and LYVE1 agreeded with the results obtained in the PNLs. Survivin gene expression was higher in 14 weeks, when it was observed also increased proliferation and decreased during treatment. The expression of LYVE1 decreased in groups of 14 and 21 weeks, however, was significantly higher in 35 weeks. From the results obtained, we conclude that the TAA model was suitable for induction of cirrhosis and the onset of hepatocarcinogenesis. The stages of initiation and promotion were identified in all periods, however, the TAA proved to be an important tool for the promotion phase increasing cell proliferation and size of PNLs. Treatment for 21 weeks was more effective in combining the initiation and promotion of hepatocarcinogenesis, as shown by the number and size of the lesions. However, no group has developed HCC indicating that the TAA probably needs to be associated with other substances because its primary effect is like promoting agent.

Introdução: Apesar de todos os esforços, as taxas de mortalidade na sepse ainda são inaceitavelmente altas, por isso, é importante a busca por novos tratamentos. O óxido nítrico tem um papel fundamental na fisiopatologia da sepse e sua modulação poderia ser uma alternativa de tratamento para algumas das complicações hemodinâmicas, de perfusão tecidual e inflamatórias desta síndrome. Objetivos: Avaliar o efeito do nitroprussiato e do inibidor da iNOs (1400W) nos parâmetros hemodinâmicos, de perfusão tecidual e na inflamação, em modelo experimental de choque séptico. Métodos: Utilizou-se 20 suínos anestesiados e monitorados através do cateter de artéria pulmonar, cateter de tonometria e cateter de artéria femoral. Eles foram randomizados e tratados da seguinte maneira. Sham - somente anestesia; Choque - anestesia, infusão de bactérias (E.coli, 4,5x109ufc/mL) e tratamento padrão (fluidos e noradrenalina, guiados pela PVC, PAM e SvO2); NO/iNOs mesmos tratamentos do Choque, associado ao tratamento específico com nitroprussiato e inibidor da iNOs. Foram avaliados parâmetros hemodinâmicos, de perfusão tecidual, ventilatórios, gasométricos e inflamatórios a cada 1 hora, a partir do Tbasal até 240 minutos. Resultados: Verificou-se alterações clínicas características da sepse, após a infusão de bactérias, como taquicardia, hipotensão arterial, depressão miocárdica, hipertensão pulmonar, aumento do lactato, comprometimento da perfusão tecidual regional e indução das citocinas pró-inflamatórias. A administração do nitroprussiato associado ao inibidor da iNOs ao grupo NO/iNOs, promoveu melhora significante em relação ao grupo Choque, com aumento do IC (6,0 ± 1,9 vs 4,1 ± 2,3 e p<0,024), da FE (31 ± 13 vs 17 ± 6 e p<0,001), do ITSVE (30 ± 8 vs 20 ± 9 e p<0,026) e do IVS (35 ± 13 vs 24 ± 11 p< 0,033) e diminuição da PAP (40 ± 6 vs 48 ± 6 p<0,001) e do IRVP (460 ± 148 vs 906 ± 405 p<0,001). A perfusão tecidual melhorou, com diminuição do PCO2 intestinal (83 ± 11 vs 94 ± 16 p<0,041), diferença entre o PCO2 intestinal/ arterial (38 ± 8 vs 55 ± 27 e p< 0,039) e aumento do pH intestinal (7,07 ± 0,06 vs 6,99 ± 0,09 p< 0,032), SvO2 (79 ± 6 vs 65 ± 12 p<0,002) e DU (167 ± 89 vs 66 ± 45 p<0,001). Houve melhora da são2 (97 ± 2 vs 93 ± 7 p< 0,027) e da IL1-&beta; (340 ± 147 vs 1306 ± 238 e p< 0,001).Discussão: o tratamento proposto melhorou a função cardíaca, oxigenação, perfusão tecidual e inflamação sem apresentar efeitos adversos. Conclusão: O modelo proposto foi representativo da sepse clínica e o tratamento com nitroprussiato e inibidor da iNOs melhorou a função do miocárdio, a hemodinâmica pulmonar, a perfusão tecidual e modulou a resposta inflamatória. / Introduction: Despite all efforts, the mortality rates in sepsis are still unacceptably high, so it is important to search for new treatments. Nitric oxide plays a key role in the pathophysiology of sepsis and its modulation could be an alternative treatment for some hemodynamic, tissue perfusion and inflammatory complications of this syndrome. Objectives: Evaluate the effect of nitroprusside and iNOs inhibitor (1400W) on hemodynamic, tissue perfusion and inflammation parameters, in an experimental model of septic shock. Methods: We used 20 anesthetized pigs and monitored them via the pulmonary artery catheter, tonometry catheter and the femoral artery catheter. They were randomized and treated as follows. Sham - anesthesia only; Shock - anesthesia, infusion of bacteria (E.coli, x109ufc/mL 4.5) and standard treatment (fluids and norepinephrine, guided by CVP, MAP and SvO2) NO/iNOs - same treatments of Shock, associated to specific treatment with iNOs inhibitor and nitroprusside. We evaluated hemodynamic, tissue perfusion, ventilation, blood gas and inflammatory parameters every 1 hour from Tbasal up to 240 minutes. Results: There were clinical changes typical of sepsis, after the infusion of bacteria, such as tachycardia, hypotension, myocardial depression, pulmonary hypertension, increase of lactate, impairment of regional tissue perfusion and induction of pro inflammatory cytokines. The administration of nitroprusside associated with the iNOs inhibitor to the NO/iNOs group, caused a significant improvement in relation to the Shock group, with increase of CI (6.0 ± 1.9 vs. 4.1 ± 2.3 p <0.024), EF (31 ± 13 vs 17 ± 6 p <0.001), LVSWI (30 ± 8 vs 20 ± 9 p <0.026) and SVI (35 ± 13 vs 24 ± 11 p <0.033) and decrease of PAP (40 ± 6 vs 48 ± 6 p <0.001) and PVRI (460 ± 148 vs 906 ± 405 p <0.001). The tissue perfusion improved, with a decrease of intestinal PCO2 (83 ± 11 vs 94 ± 16 p <0.041), intestinal/arterial PCO2 gap (38 ± 8 vs 55 ± 27 p <0.039) and increase of intestinal pH (7.07 ± 0.06 vs 6, 99 ± 0.09, p <0.032), SvO2 (79 ± 6 vs 65 ± 12 p <0.002) and urinary output (167 ± 89 vs 66 ± 45 p <0.001). There was improvement in SaO2 (97 ± 2 vs 93 ± 7 p <0.027) and IL1-&beta; (340 ± 147 vs. 1306 ± 238 p <0.001). Discussion: The proposed treatment improved cardiac function, oxygenation, tissue perfusion and inflammation without producing adverse effects. Conclusion: The proposed model was representative of clinical sepsis and the treatment with nitroprusside and iNOs inhibitor improved myocardial function, pulmonary hemodynamics, tissue perfusion and modulated the inflammatory response.

Made available in DSpace on 2016-04-29T13:18:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Luciana Roberta Donola Cardoso.pdf: 1323389 bytes, checksum: 152237ce34951aabd58677f712755d06 (MD5) Previous issue date: 2008-05-14 / The Chronic Mild Stress (CMS) is an experimental animal model of depression induced by the exposure of rats to a set of moderate and uncontrollable aversive stimuli in a long and uninterrupted period of time. The purpose of this study was to investigate the relationship between performance in variable interval schedule of behavior and exposure to the protocol of stress (daily consumption of food and water, changes in body weight, frequency of answers issued in each bar and the frequency of reinforcements obtained when submitted to the same scheme competitor). The study design was composed of three experimental conditions: test consumption and preferably liquid; sessions operating on schedule competitor VI 10 (water) VI 10 (sucrose) and protocol of stress (CMS). Six male rats were used. One subject was used to control weight, not involved in any of the three experimental conditions. Five subjects were submitted to the protocol of stress and tests of consumption and preference of liquids throughout the experiment. Two subjects were submitted to the working sessions (VI competitor VI) before and after CMS and two subjects were submitted to the working sessions before, during and after the CMS. The results were: 1) all subjects showed loss of body weight during the exposure to stressors. 2) The four subjects submitted to the working sessions showed recovery of body weight after the suspension of the protocol. 3) All subjects showed an increase in daily consumption of water and feed during the CMS, despite the loss of weight in this period. 4) Liquid consumption and the percentage of sucrose intake was higher during the CMS for the four subjects submitted to the working sessions, featuring a reduction in the last week of exposure to the protocol of stress. 5) All subjects expressed a greater number of responses in the bar corresponding to sucrose before exposure to CMS. Meanwhile, during and after CMS, a preference for water became outstanding. 6) The subjects received almost all of the planned reinforcements of both magnitudes (sucrose solution or pure water) in the three periods of assessment. We conclude that: 1) the loss of weight during the CMS seems to be related to the combination of aversive stimuli compound by the Protocol of stress and deprivation of water and food intermittent making up this protocol 2) the increase in the total consumption of liquids during the CMS appear to be related to the submission to the working sessions in variable interval before submission to the Protocol 3) the exposure of the subject to a scheme of variable interval, before CMS, slows the decline in the consumption of liquid and increases consumption of fluids during the CMS / O Chronic Mild Stress (CMS) é um modelo animal experimental de depressão induzida por meio da exposição de ratos a um conjunto de estímulos aversivos moderados e incontroláveis, apresentados por um longo e ininterrupto período de tempo. O objetivo deste estudo foi investigar a possível relação entre o desempenho em esquema de intervalo variável e a exposição ao protocolo de estresse, quanto ao consumo diário de ração e água e as subseqüentes alterações no peso corporal; no consumo e na preferência de líquidos; na freqüência de respostas emitidas em cada barra e na freqüência de reforços obtidos nas mesmas quando submetidos ao esquema concorrente. O delineamento foi composto por três condições experimentais: teste de consumo e de preferência de líquidos; sessões operantes em esquema concorrente VI 10 (água) VI 10 (sacarose) e protocolo de estresse (CMS). Foram utilizados seis ratos machos, sendo que um sujeito foi utilizado para controle de peso, não submetido a nenhuma das três condições experimentais. Cinco sujeitos foram submetidos ao protocolo de estresse e aos testes de consumo e preferência de líquidos durante todo o experimento. Dois sujeitos foram submetidos às sessões operantes (concorrente VI VI) antes e depois do CMS e dois sujeitos foram submetidos às sessões operantes, antes, durante e depois do CMS. Os resultados obtidos foram: 1) todos os sujeitos apresentaram perda de peso corporal durante a exposição aos estressores. 2) Os quatro sujeitos submetidos às sessões operantes apresentaram recuperação do peso corporal após a suspensão do protocolo; 3) todos os sujeitos apresentaram aumento no consumo diário de água e ração durante o CMS, apesar da perda de peso neste período; 4) consumo total de líquidos e a porcentagem de sacarose ingerida foi maior durante o CMS para os quatro sujeitos submetidos as sessões operantes, apresentando uma redução na última semana de exposição ao protocolo de estresse; 5) todos os sujeitos emitiram um maior número de respostas na barra correspondente a sacarose antes da exposição ao CMS. Entretanto, durante e depois do CMS a preferência por água se tornou sobressalente; 6) os sujeitos obtiveram a quase totalidade de reforços programados de ambas as magnitudes (solução de sacarose ou água pura ) nos três períodos de avaliação. Conclui-se que: 1) a perda de peso corporal durante o CMS parece estar relacionada à combinação dos estímulos aversivos compostos pelo protocolo de estresse e à privação de água e ração intermitente que compõem este protocolo 2) o aumento no consumo total de líquidos durante o CMS parecem estar relacionados à submissão às sessões operantes em intervalo variável antes da submissão ao protocolo 3) a exposição dos sujeitos a um esquema de intervalo variável, antes do CMS, não só teria um efeito de retardar a diminuição no consumo de líquidos, como aumentar o consumo de líquidos durante o CMS

Orientadores: Ricardo Barini, Lourenço Sbragia Neto / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-11-27T12:29:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bueno_MarciaPereira_D.pdf: 2898828 bytes, checksum: 2c6dcaa4a20ec185bea4b47114c30a0e (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A restrição do crescimento intrauterino (RCIU) limita o desenvolvimento fetal adequado aumentando a morbidade e mortalidades perinatais. Os mecanismos fetais adaptativos na RCIU podem desencadear alterações endócrinas e metabólicas que explicariam a ocorrência de doenças na idade adulta. O objetivo do estudo foi avaliar na RCIU experimental pela ligadura da artéria uterina se existem alterações na morfometria e histologia do fígado, intesti no e rins e se existem diferenças na expressão dos receptores de insulina, IR-(3, IRS-1, IRS-2, IGF-IR(3 no grupo de fetos submetidos à RCIU. O presente experimento foi submetido ao Comitê de Ética e Experimentação Animal da Universidade Estadual de Campinas (CEEA-UNICAMP) e aprovado como projeto de pesquisa N° 1644-1. Para realização do estudo utilizamos fetos de ratas Sprague Dawley divididos em 3 grupos. Grupo I (RCIU) - 40 fetos submetidos à ligadura da artéria uterina unilateral com 18,5 dias de gestação, Grupo II (Controle-RCIU) - 40 fetos do corno oposto ao da ligadura da artéria uterina e Grupo III (Controle Externo) - 40 fetos sem procedimento cirúrgico ou alimentar. Os resultados mostraram no modelo experimental de RCIU uma diminuição do peso corporal (PC), hepático (PH) e intestinal (PI) (p<0,01) no grupo RCIU, as relações entre PH/PC, PI/PC, PR/PC foram mantidas, fetos RC IU tem diminuição das camadas submucosas e mucosas intestinais (p<0,05); diminuição da camada cortical renal e do número de glomérulos, com aumento do volume glomerular (p<0,05). Na RCIU encontramos menor expressão hepática do IR-(3, IRS-1 e IRS-2, menor expressão do IRS-2 no intestino e rins e maior expressão do IGF-IR(3 em todos os tecidos. O modelo experimental estudado causou uma RCIU simétrica com alterações morfométricas e do metabolismo da glicose que poderiam justificar no futuro um maior risco de doenças metabólicas / Abstract: Intrauterine growth restriction (IUGR) limits appropriate fetal development increasing morbidity and perinatal mortality. Adaptive mechanisms in fetal IUGR may leave to endocrine and metabolic alterations that could explain the occurrence of diseases in adulthood. The aim of this study was to evaluate whether experimental IUGR by uterine artery ligation causes changes in morphology and histology of the liver, intestines and kidneys. We also evaluated if there were differences in the expression of insulin receptors, IR-(3, IRS-1, IRS-2, IGF-IR(3 of fetuses subjected to IUGR. This experiment was submitted to the Ethics and Animal Experimentation of the Campinas State University (UNICAMP CEEA) and was approved as a research project No. 1644-1. The study used fetuses Sprague-Dawley rats divided into 3 groups. Group I (IUGR) - 40 fetuses who underwent uterine artery ligation sided with 18.5 days of pregnancy Group II (Control-IUGR) - 40 fetuses of the horn opposite to the uterine artery ligation, and Group III (External Control) - 40 fetuses without surgery or food The results showed the experimental model of IUGR, a reduction in body weight (BW), liver (PH) and intestine (PI) (p <0.01) in IUGR, the relationship between PH/PC, PI/PC, PR/PC have been retai ned, IUGR fetuses have reduced layers of the intestinal mucosa and submucosa (p<0,05), decreased renal cortical layer and the glomerular number and increased volume rate (p<0,05). In IUGR found lower hepatic expression of IR-(3, IRS-1 and IRS-2, reduced expression of IRS-2 in the intestine and kidney and increased expression of IGF-IR(3 in all tissues. The experimental model studied caused a symmetrical IUGR with histological changes and glucose metabolism that could justify a greater risk of metabolic diseasesin the future / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Tocoginecologia

As queimaduras são eventos comuns e recorrentes no dia a dia dos atendimentos médicos. Há uma constante busca para entender a sua fisiopatologia, no intuito de minimizar seus resultados devastadores. Plasma rico em plaquetas (PRP) é um concentrado de plaquetas com capacidade de liberação local de múltiplos fatores de crescimento (FC) que aceleram a cicatrização. Este estudo consiste em dois experimentos: o primeiro visa validar um modelo experimental para a criação de queimaduras de tamanho e profundidade padronizados e, o segundo, avalia o uso de PRP em queimaduras. Para o desenvolvimento de queimaduras na validação do modelo experimental, foi idealizado um equipamento que permitisse o controle preciso da temperatura, além da utilização em conjunto de uma técnica inovadora de fixação que garante pressão constante no momento das queimaduras. Para o primeiro experimento, foram utilizados 12 ratos, por grupo, submetidos a queimaduras de 60 oC, 70 oC ou 80 oC por dez segundos, com um equipamento que desenvolvemos. Metade dos animais de cada grupo foi morta no terceiro dia e suas feridas foram analisadas por histologia, e, na outra metade, a ferida foi mensurada e acompanhada até o seu fechamento. No uso de PRP em queimaduras, foram avaliadas queimaduras de segundo grau (SG), segundo grau com diabetes mellitus induzido (SGD) e queimaduras de terceiro grau (TG). Noventa animais foram distribuídos em três grupos (SG, SGD e TG), onde, em cada um, dez animais foram tratados, dez serviram de controle e dez foram utilizados para o preparo do PRP. As áreas das feridas foram acompanhadas até o vigésimo primeiro dia, quando os animais foram mortos e biópsias de pele foram realizadas. Os resultados da validação do modelo mostram que as queimaduras produzidas com 60 oC foram de SG superficial (28% da derme envolvida); com 70 oC foram de SG profundo (72% da derme envolvida); e com 80 oC foram de TG (100% da derme envolvida). Em relação ao uso de PRP em queimaduras, observou-se que nos grupos tratados SG e SGD houve aceleração do fechamento da ferida e redução no número de células CD31, CD163, CD68, MPO e TGF-&#946; positivas, e aumento do número de células MMP2 positivas. A neoepiderme foi mais fina nos controles dos grupos SG e SGD, e o tecido de granulação foi reduzido nos controles SGD e TG. O modelo utilizado é seguro e confiável para produzir queimaduras regulares e uniformes, de diâmetros variados, pela capacidade do controle fino da temperatura e pelo posicionamento do animal, e reprodutíveis. PRP parece acelerar a cicatrização de queimaduras de SG e SGD, mas não de TG. / Burns are common and recurring events in the daily lives of medical care. There is a constant search to understand itsphysiopathology, in order to minimize its devastating results. Platelet-rich plasma (PRP) is a platelet concentrate with capacity of local release of multiple growth factors (FC) that accelerate healing. This study consists in two experiments: the first to validate an experimental model for the creation of standardized burns in size and depth and the second to evaluate the use of PRP in burns. The burns were achieved in an experimental burn model using an equipment that we developed and allows precise temperature control and in association with a innovative fixation technique that creates a constant pressure. Twelve rats per group underwent burns at 60oC, 70oC or 80oC for 10 seconds, with a device that we developed. Half of the animals of each group was killed on the third day and their wounds were analyzed by histology, and in the other half the wounds were measured and monitored until their closure. In the use of PRP in burns, second degree burns (SD), second degree burns with induced diabetes mellitus (SDD) and third degree burns (TD) were evaluated. Ninety animals were divided into three groups (SD, SDD, and TD) and in each one10 animals were treated, 10 animals served as controls, and 10 animals were used for PRP preparation. The wound areas were accompanied until the twenty-first day, when the animals were killed and skin biopsies were obtained. The results of the validation of the model show that the burns derived from 60oC were of superficial SD (28% of the dermis involved); for 70 C they were deep SD (72% of the dermis involved); and for 80oC they were TD (100% of the dermis involved). Regarding the use of PRP in burns, it was observed that in the SD and SDD treated groups the wound closure was accelerated and there was reduction in the number of CD31, CD163, CD68, MPO, and TGF-&#946; positive cells, and increasing of the number of MMP2 positive cells. The neoepidermis was thinner in control of both SD and SDD groups, and the granulation tissue was reduced in both control SDD and TD. The model used is safe and reliable to produce regular and uniform burns of varying diameters, by its ability of the fine control of temperature, by the animal positioning, and by its reproducibility. PRP appears to accelerate the healing of burns of SD and SDD, but not TD.

Made available in DSpace on 2017-07-10T19:24:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcia_texto.pdf: 2638877 bytes, checksum: 43437bc40d15ec7df358c7a26ec72a0a (MD5) Previous issue date: 2011-06-18 / One of the biggest problems in the production of soya is to get a vigorous seed that can emerge under wide range of conditions in the field. If some factor threatens seed germination and seedling emergence, it threatens also the stand of crop. Thus, the objective of this work was to compare the tests used to identify vigor in soybean seeds relating after comparison, tests that can be used with lower cost and faster results, and establish a model that correlates seeds vigor given in the laboratory with field emergence. The work was conducted at the Laboratory for Seeds and Plants Evaluation (LASP), Unioeste - Campus Cascavel and in field at the COODETEC Central Cooperative for Agricultural Research, in Cascavel. Soybean seeds were harvested with mechanical harvesters. Five cultivars of soybeans produced in crop year 08/09 from COODETEC, under the same conditions of management and harvesting and with different morphological characteristics were used. The tests used included determination of moisture content, germination, emergence in sand, purity, immersion in sodium hypochlorite, accelerated aging, controlled deterioration, cold test, seedling growth, electrical conductivity, tetrazolium, emergence percentage and seedling length in field and seedling dry weight. The experimental design used for tests was randomized and the resulting means were compared by the Tukey test at 5% significance level. It was observed from the results that the three cultivars that stood out in most of tests also showed better field emergence. Among the analyzed tests, it can be concluded that the controlled deterioration, tetrazolium, purity, germination speed index emergence speed and emergence speed coefficient in sand showed closer to the emergency response in field. A multiple regression model was then adjusted to account for the emergence in the field, which included the emergence speed in sand (ES), the germination speed index (GSI) and the emergence speed index in sand as variables correlating better seed vigor with field emergence. / Um dos maiores problemas na produção de sementes de soja é obter uma semente vigorosa que possa emergir sob larga faixa de condições no campo. Se algum fator compromete a germinação das sementes e a emergência das plântulas, compromete, também, o estande da cultura. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi comparar testes utilizados para a identificação de vigor em sementes de soja, relacionando, após a comparação, testes que possam proporcionar resultados mais rápidos, e estabelecer um modelo que correlacione o vigor das sementes determinado em laboratório com a emergência em campo. O trabalho foi realizado no Laboratório de Avaliação de Sementes e Plantas (LASP) da Unioeste campus de Cascavel e em campo, na COODETEC Cooperativa Central de Pesquisa Agrícola, no município de Cascavel. Foram utilizados cinco cultivares de soja, produzidos no ano agrícola 08/09, oriundos da COODETEC, sob iguais condições de manejo e colheita (mecânica) e com características morfológicas diferenciadas. Os testes empregados foram determinação do teor de água, germinação, emergência em areia, pureza, imersão em hipoclorito de sódio, envelhecimento acelerado, deterioração controlada, teste de frio, crescimento de plântulas, condutividade elétrica, tetrazólio, porcentagem de emergência e comprimento das plântulas no campo e massa seca de plântula. O delineamento experimental, utilizado para os testes foi inteiramente casualizado e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Observou-se a partir dos resultados que as três cultivares que se destacaram na maioria dos testes, também apresentaram melhor emergência em campo. Dentre os testes analisados pode-se concluir que envelhecimento acelerado, deterioração controlada e tetrazólio, apresentaram respostas mais próximas a emergência em campo. Pela análise de correlação pode-se concluir que as melhores correlações com emergência em campo foram observadas pelos testes de deterioração controlada, velocidade de emergência em areia, coeficiente de velocidade de emergência em areia, envelhecimento acelerado, índice de velocidade de germinação e tetrazólio para sementes sem danos. O modelo de regressão múltipla ajustado para explicar a emergência em campo contemplou a velocidade de emergência em areia (VE), o índice de velocidade de germinação (IVG) e o índice de velocidade de emergência em areia (IVE), como variáveis que correlacionam melhor o vigor das sementes com a emergência em campo.

Made available in DSpace on 2017-05-12T14:48:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Marcia_texto.pdf: 2638877 bytes, checksum: 43437bc40d15ec7df358c7a26ec72a0a (MD5) Previous issue date: 2011-06-18 / One of the biggest problems in the production of soya is to get a vigorous seed that can emerge under wide range of conditions in the field. If some factor threatens seed germination and seedling emergence, it threatens also the stand of crop. Thus, the objective of this work was to compare the tests used to identify vigor in soybean seeds relating after comparison, tests that can be used with lower cost and faster results, and establish a model that correlates seeds vigor given in the laboratory with field emergence. The work was conducted at the Laboratory for Seeds and Plants Evaluation (LASP), Unioeste - Campus Cascavel and in field at the COODETEC Central Cooperative for Agricultural Research, in Cascavel. Soybean seeds were harvested with mechanical harvesters. Five cultivars of soybeans produced in crop year 08/09 from COODETEC, under the same conditions of management and harvesting and with different morphological characteristics were used. The tests used included determination of moisture content, germination, emergence in sand, purity, immersion in sodium hypochlorite, accelerated aging, controlled deterioration, cold test, seedling growth, electrical conductivity, tetrazolium, emergence percentage and seedling length in field and seedling dry weight. The experimental design used for tests was randomized and the resulting means were compared by the Tukey test at 5% significance level. It was observed from the results that the three cultivars that stood out in most of tests also showed better field emergence. Among the analyzed tests, it can be concluded that the controlled deterioration, tetrazolium, purity, germination speed index emergence speed and emergence speed coefficient in sand showed closer to the emergency response in field. A multiple regression model was then adjusted to account for the emergence in the field, which included the emergence speed in sand (ES), the germination speed index (GSI) and the emergence speed index in sand as variables correlating better seed vigor with field emergence. / Um dos maiores problemas na produção de sementes de soja é obter uma semente vigorosa que possa emergir sob larga faixa de condições no campo. Se algum fator compromete a germinação das sementes e a emergência das plântulas, compromete, também, o estande da cultura. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi comparar testes utilizados para a identificação de vigor em sementes de soja, relacionando, após a comparação, testes que possam proporcionar resultados mais rápidos, e estabelecer um modelo que correlacione o vigor das sementes determinado em laboratório com a emergência em campo. O trabalho foi realizado no Laboratório de Avaliação de Sementes e Plantas (LASP) da Unioeste campus de Cascavel e em campo, na COODETEC Cooperativa Central de Pesquisa Agrícola, no município de Cascavel. Foram utilizados cinco cultivares de soja, produzidos no ano agrícola 08/09, oriundos da COODETEC, sob iguais condições de manejo e colheita (mecânica) e com características morfológicas diferenciadas. Os testes empregados foram determinação do teor de água, germinação, emergência em areia, pureza, imersão em hipoclorito de sódio, envelhecimento acelerado, deterioração controlada, teste de frio, crescimento de plântulas, condutividade elétrica, tetrazólio, porcentagem de emergência e comprimento das plântulas no campo e massa seca de plântula. O delineamento experimental, utilizado para os testes foi inteiramente casualizado e as médias foram comparadas pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade. Observou-se a partir dos resultados que as três cultivares que se destacaram na maioria dos testes, também apresentaram melhor emergência em campo. Dentre os testes analisados pode-se concluir que envelhecimento acelerado, deterioração controlada e tetrazólio, apresentaram respostas mais próximas a emergência em campo. Pela análise de correlação pode-se concluir que as melhores correlações com emergência em campo foram observadas pelos testes de deterioração controlada, velocidade de emergência em areia, coeficiente de velocidade de emergência em areia, envelhecimento acelerado, índice de velocidade de germinação e tetrazólio para sementes sem danos. O modelo de regressão múltipla ajustado para explicar a emergência em campo contemplou a velocidade de emergência em areia (VE), o índice de velocidade de germinação (IVG) e o índice de velocidade de emergência em areia (IVE), como variáveis que correlacionam melhor o vigor das sementes com a emergência em campo.

INTRODUÇÃO: Os macrófagos são tipos celulares envolvidos na progressão do enfisema pulmonar e podem assumir funções diferentes, dependendo dos estímulos que recebem e do microambiente. Na presença de interferon-? (IFN-y) ocorre a polarização de macrófagos M1, reconhecidos como pró-inflamatórios. Entretanto em presença de interleucinas (IL) -4 e IL-13 ocorre a polarização alternativa de macrófagos do tipo M2, reconhecidos por exercerem ação anti-inflamatória e com boa ação fagocítica para microrganismos e células apoptóticas (eferocitose). A progressão do enfisema está associada à redução da atividade da eferocitose e a resposta pulmonar na presença de poluentes depende da ação efetiva dos macrófagos para eliminação destas partículas. OBJETIVO: verificar a participação dos diferentes fenótipos de macrófagos envolvidos no processo de desenvolvimento do enfisema em camundongos submetidos a poluentes. MÉTODOS: Camundongos C57BL/6 machos receberam instilação intranasal de elastase pancreática de porco (PPE) para indução de enfisema e os grupos Controle receberam salina e ambos foram expostos ao ar poluído (PPE+POL e SAL+POL) ou filtrado (PPE+AF e SAL+AF) por 60 dias de acordo com os grupos. Avaliamos mecânica respiratória, perfil inflamatório no lavado broncoalveolar (LBA), intercepto linear médio (Lm), fibras elásticas e de colágeno e também avaliamos a expressão de citocinas IL-12, TNF-alfa, IFN-y, IL-4, IL-10 e IL-13 pela técnica de ELISA em homogenato de pulmão. RESULTADOS: Os grupos SAL+POL e PPE+AF mostraram um aumento no aumento intecepto alveolar, macrófagos, linfócitos e células epiteliais no LBA, e nas fibras elásticas e colágenas e nas quantidades de células Caspase 3 positivas e estas respostas foram exacerbadas em animais que receberam PPE e foram expostos a partículas exauridas de diesel. A análise da mecânica respiratória revelou uma diminuição na Htis (resistência tecidual) e Gtis (elastância tecidual) apenas nos grupos PPE, enquanto a expressão de IL-4, IL-10 e IL-13 foi aumentada apenas nos grupos expostos a poluição. RT-PCR e citometria de fluxo mostraram um aumento para os marcadores fenotípicos M2 nos grupos PPE+ AF e SAL+ POL e estas respostas foram exacerbadas no grupo PPE + POL. CONCLUSÃO: A associação entre instilação de PPE e exposição ao diesel exarcebou a resposta inflamatória e o enfisema em camundongos. Além disso, apenas a exposição ao às partículas poluentes exauridos da queima do diesel já induziu uma resposta inflamatória com desenvolvimento de enfisema mesmo em concentrações que estão de acordo com os padrões internacionais de qualidade do ar ambiente. Ambos os fatores induziram uma polarização do fenótipo M2, provavelmente devido à alta demanda por fagocitose de células apoptóticas / BACKGROUND: Macrophages are cells involved on progression of pulmonary emphysema and may assume different functions depending on microenvironment. stimuli. In presence of Interferon-? (IFN-y) occurs the polarization of macrophages M1, recognized as pro-inflammatory. However, in presence of interleukins-4 (IL-4) and -13 (IL-13), there is an alternative polarization of M2-type macrophages, recognized as anti-inflammatory action and good phagocytic action for microorganisms and apoptotic cells. Considering that the progression of emphysema is associated with the reduction of eferocytosis activity and that the pulmonary response on presence of pollutants depends on the effective action of the macrophages to eliminate these particles. AIM: To perform a temporal analysis of inflammation progression mediated by immune verify the participation of the different macrophages phenotypes involved in the process development of emphysema in mice submitted to pollutants. METHODS: C57BL/6 mice received intranasal instillation of elastase for emphysema induction on control groups received saline and exposed to polluted or filtered air for 60 days according to the groups. We evaluated respiratory mechanics, elastic and collagen fibers and in the amounts of Caspase 3 positive cells and inflammatory profile in BAL and evaluation of the mean linear intercept, we also evaluated the expression of IL-12, TNF-alpha, IFN-y, IL-4, IL-10 and IL-13 cytokines by ELISA in lung homogenate. RESULTS: The SAL + POL and PPE + AF groups showed an increase in alveolar intelect enhancement, macrophages, lymphocytes and epithelial cells in BAL, and in elastic and collagen fibers and in the amounts of Caspase 3 positive cells and these responses were exacerbated in animals receiving PPE and were exposed to diesel exhausted particles. The analysis of respiratory mechanics revealed a decrease in tissue elastance and tissue damping only in the PPE groups, whereas IL-4, IL-10 and IL-13 expression was increased only in the groups exposed to pollution. RT-PCR and flow cytometry showed an increase for the M2 phenotypic markers in the PPE + AF and SAL + POL groups and these responses were exacerbated in the PPE + POL group. CONCLUSION: The association between PPE instillation and diesel exposure exacerbated the inflammatory response and emphysema in mice. In addition, only exposure to particulate pollutants exhausted from diesel burning has already induced an inflammatory response with the development of emphysema even at concentrations that are in line with international ambient air quality standards. Both factors induced a polarization of the M2 phenotype, probably due to the high demand for phagocytosis of apoptotic cells

Um modelo experimental de arco dentário, moldado em epóxi, foi utilizado para estudar o comportamento mecânico do copolímero de etileno e acetato de vinila (EVA), na forma de placa plana e protetor bucal. O modelo experimental foi investigado, usando-se um sistema configurado em duas formas diferentes: suporte + arco + placa plana e suporte + arco + protetor bucal. O comportamento mecânico do copolímero de etileno e acetato de vinila foi estudado em função de três variáveis: espessura, temperatura e na ausência e presença de saliva artificial. A avaliação do comportamento mecânico do EVA, na forma de placa e protetor, foi feita usando-se dois planejamentos estatísticos fatoriais, 3x2x2 e 23, respectivamente, numa máquina universal de tração. As propriedades mecânicas do EVA, ao esforço compressivo, avaliadas nas duas configurações (suporte + arco + placa e suporte + arco + protetor) foram: energia aparente absorvida (J.mm-1), tensão máxima (N.mm-1), deslocamento máximo (mm) e força máxima (N). Os efeitos das variáveis, espessura, temperatura e presença ou ausência da saliva artificial foram modelados, matematicamente, usando-se as propriedades mecânicas do EVA ao esforço compressivo, como parâmetros de resposta. Os polinômios ortogonais foram ajustados em função das variáveis e de suas interações significantes, fixando-se o nível de significância igual ou menor de 0,05 ou 5%. Um mecanismo de oclusão do modelo experimental, para explicar a resposta mecânica do EVA, no sistema suporte + arco + placa e suporte + arco + protetor, consistiu em três eventos acoplados: 1) deformação compressiva longitudinal; 2) escorregamento entre os arcos e 3) travamento mecânico ao atingir a máxima oclusão. As variáveis, espessura da placa ou do protetor, temperatura (ambiente e bucal) e saliva (ausência ou presença), bem como algumas interações significantes entre elas, modificaram as propriedades mecânicas do EVA, no sentido de aumentar ou reduzir a resistência oferecida, por este material, ao esforço compressivo, dependendo de como os níveis das respectivas variáveis eram combinados. A resposta mecânica do EVA no sistema suporte + arco + protetor diferiu do sistema suporte + arco + placa, pois os intervalos de espessuras médias dos protetores e das placas foram significativamente diferentes. O mecanismo de oclusão do modelo experimental proposto justifica as diferenças de comportamento mecânico observadas para as duas configurações estudadas. Para placas ou protetores mais finos, da ordem de 2mm, o escorregamento acoplado ao travamento mecânico foram dois eventos determinantes. Para as placas mais espessas, da ordem de 4 mm, o comportamento mecânico pode ser explicado por três eventos acoplados: deformação compressiva longitudinal, escorregamento entre os arcos e travamento mecânico, ao atingir a máxima oclusão. / An experimental model of dental arch, moulded in epoxy, was used to study the mechanic behaviour of a copolymer of ethylene and vinyl acetate (EVA), in the form of a flat plaque or mouth protector in function of three variables: thickness, temperature and the absence or presence of artificial saliva. The evaluation of the mechanical behaviour of EVA, as a plaque or as a mouth protector, was made with the use of two factorial statistical projection, 3x2x2 and 23, respectively, in a universal test machine. The mechanic properties of EVA, at compressive effort, evaluated in two configurations (support + arch + plaque and support + arch + mouth protector) were: maximum absorbed energy (J.mm-1), maximum strain (N.mm-1), maximum displacement (mm) and maximum force (N). The effect of the variables (thickness, temperature and absence or presence of artficial saliva) were shaped, mathematically, by using the mechanical properties of EVA to compressive effort as a reply parameter. The orthogonal polynomials were adjusted in function of the variables and their significant interactions, fixing the level of significancy as 0,05 (5%) or less. A mechanism of occlusion of the experimental model, to explain the mechanic answer of EVA in the system support + arch + plaque and support + arch + protector, consisted of three connected events: 1) longitudinal compressive deformation; 2) sliding between the arches and 3) mechanic lockage on maximum occlusion. The variables, thickness of the plaque or mouth protector, temperature (local or mouth) e saliva (presence or absence), as well as some significant interactions between them, modified the mechanic properties of EVA, in the sense of increasing or reducing the resistence of this material to the compressive effort, depending on the way these variables were combined. The mechanic answer of EVA in the system support + arch + mouth protector differed from the system support + arch + plaque, as the intervals of average thickness of the mouth protectors and of the plaque were significantly distinct. The mechanism of occlusion of the experimental model proposed justifies the differences of mechanical behaviour observed in both configurations studied. In thinner plaques or mouth protectors, approximately of 2 mm, the sliding connected to the mechanic lockage were two determinant events. For thicker plaques, approximately of 4 mm, the mechanical behaviour can be explained by three linked events: longitudinal compressive deformation, sliding between the arches and mechanic locakge, on the maximum occlusion.