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Efeito do tratamento da H. pylori na expressão de citocinas e microRNAs associados ao processo inflamatórioRossi, Ana Flávia Teixeira [UNESP] 15 March 2015 (has links) (PDF)
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000844048_20160312.pdf: 733130 bytes, checksum: 4c63392d725a9495e9543a2df54d0223 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-03-14T11:16:23Z: 000844048_20160312.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-14T11:17:05Z : No. of bitstreams: 1
000844048.pdf: 7529493 bytes, checksum: 9dd7b812bf35ed642076bb8874768278 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Infecção persistente pela Helicobacter pylori (H. pylori) promove inflamação crônica que resulta em danos na mucosa e o consequente desenvolvimento de lesões gástricas, como a gastrite crônica. Esta bactéria e seus fatores de virulência vacA e cagA influenciam na resposta imune do hospedeiro, desregulando a expressão de mediadores inflamatórios e microRNAs (miRNAs), assim ativando vias relacionadas ao processo carcinogênico. Portanto, a erradicação da H. pylori pode ter um papel importante para reverter lesões precursoras, prevenindo a transformação maligna. O presente estudo avaliou a influência da terapia de erradicação da bactéria na expressão do RNAm e da proteína de mediadores inflamatórios (TNFA, IL6, IL1B, IL12A, IL2 e TGFBRII) e de miRNAs (hsa-miR-103a-3p, hsa-miR-181c-5p, hsa-miR-370-3p, hsa-miR-375 e miR-223-3p) em pacientes com gastrite crônica H. pylori positivos (Hp+), em comparação com pacientes com gastrite não infectados (Hp-). Também avaliou a relação entre os níveis de expressão dos miRNAs e os dos RNAm e proteínas e a participação em redes de interação, assim como a influência dos fatores de virulência bacteriano cagA e vacA sobre estes mediadores. A quantificação relativa (RQ) do RNAm e dos miRNAs foi realizada por PCR quantitativa em tempo real (qPCR) usando ensaio TaqMan® em 20 pacientes Hp- e 31 Hp+, os quais foram também avaliados três meses após o tratamento de erradicação da bactéria. A genotipagem de cagA e vacA foi realizada pela técnica de PCR, enquanto que a expressão protéica foi avaliada por imuno-histoquímica. Pacientes Hp+ apresentaram níveis aumentados do RNAm de TNFA, IL6, IL1B e IL12A, enquanto que IL2 e TGFBRII bem como os miRNAs miR-103, miR-181c, miR-370 e miR- 375 mostraram expressão reduzida. Após o tratamento, o RNAm de TNFA e IL6 apresentouse significantemente reduzido e de TGFBRII aumentado em pacientes... / Persistent infection by Helicobacter pylori (H. pylori) promotes chronic inflammation resulting in damage to the mucosa and the consequent development of gastric lesions as chronic gastritis. This bacterium and its virulence factors vacA and cagA influence the host immune response, deregulating the expression of inflammatory mediators and microRNAs (miRNAs), and activate pathways related to carcinogenic process. Thus, H. pylori eradication may have a key role to reverse precursor lesions, preventing malignant transformation. In the present study evaluated whether the eradication therapy of bacterium influences the mRNA and protein expression of inflammatory mediators (TNFA, IL6, IL1B, IL12A, IL2 and TGFBRII) and miRNAs (hsa-miR-103a-3p, hsa-miR-181c-5p, hsa-miR-370-3p, hsa-miR-375 and miR-223-3p) in H. pylori-positive chronic gastritis patients (Hp+) and compared with non-infected gastritis patients (Hp-). We also evaluated the relationship between the expression levels of miRNAs with of mRNA and protein and participation in interaction networks, as well as the influence of bacterial virulence factors cagA and vacA on these mediators. Relative quantification (RQ) of mRNA and miRNAs was performed by qPCR-real time using TaqMan® assay in 20 patients Hp- and 31 Hp+, which were also evaluated three months after eradication treatment of the bacterium. Genotyping of cagA and vacA was performed by PCR, while the protein expression was assessed by immunohistochemistry. Hp+ patients showed increased mRNA levels for TNFA, IL6, IL1B and IL12A, while for IL2 and TGFBRII as well as for the miRNAs miR-103, miR-181c, miR-370 and miR-375 it were decreased. After treatment, only TNFA and IL6 mRNA were significantly reduced and TGFBRII increased in eradicated patients (p<0.05). On the other hand, all miRNAs, except to miR-223, were significantly increased after bacterium eradication (p<0.05). In general, the...
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Avaliação dos mecanismos de ação envolvidos na atividade antiulcerogênica de Serjania marginata frente á doença ulcerosa péptica experimentalPérico, Larissa Lucena [UNESP] 20 February 2014 (has links) (PDF)
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000788247_20160220.pdf: 848107 bytes, checksum: 6c5ff4abdf4768e09bac95e4edfb9485 (MD5) Bitstreams deleted on 2016-02-22T11:12:50Z: 000788247_20160220.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-02-22T11:13:42Z : No. of bitstreams: 1
000788247.pdf: 1924233 bytes, checksum: 49d63d00c84744fcdb3dce3181f3bb97 (MD5) / Úlceras pépticas abrange tanto as úlceras gástricas, quanto as úlceras duodenais e tem sido uma grande ameaça para a população mundial ao longo dos últimos dois séculos. A patogênese complexa e multifatorial desta doença ocorre devido a um desequilíbrio entre os fatores agressores (ácido clorídrico, pepsina, etanol, DAINEs, estresse, Helicobacter pylori, entre outros) e os protetores (muco, bicarbonato, prostaglandinas, fluxo sanguíneo) da mucosa do estômago ou duodeno. Numa tentativa de proteger a mucosa gástrica do ácido clorídrico, melhorar a cicatrização da úlcera, e prevenir a sua recorrência, o controle farmacológico da secreção ácida tem representado durante muito tempo um objetivo dos fármacos antiulcerogênicos. Dentre as opções disponíveis no mercado, temos os antagonistas de receptores H2 e os inibidores da bomba de prótons. Algumas destas drogas podem promover não somente uma gama de efeitos colaterais, mas também uma menor eficácia no tratamento de úlceras e principalmente não evita a sua recidiva. Assim, a necessidade de agentes mais efetivos e seguros é premente. Por isso, esforços científicos têm sido dirigidos para encontrar o tratamento adequado a partir de produtos naturais, como nova fonte de fármacos antiúlcera. Serjania marginata Casar., uma espécie comumente encontra no Cerrado brasileiro, tem sido descrito por sua indicação popular no tratamento de dores gástricas, porém, não existem estudos sobre suas atividades farmacológicas para o tratamento ou prevenção das úlceras pépticas. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade gastroprotetora do extrato hidroalcoólico das folhas de Serjania marginata (EHSM) em diferentes modelos experimentais in vivo. Foi inicialmente realizado um teste de toxicidade aguda e da performance motora para avaliar a possível toxicidade e efeitos neurotóxicos do extrato, porém este não causou nenhuma alteração nestes ... / Peptic ulcer disease includes both gastric and duodenal ulcers and has been a major threat to the world’s population over the past two centuries. The complex and multifactorial pathogenesis of this disease occurs due to an imbalance between aggressive (hydrochloric acid, pepsin, ethanol, NSAIDs, stress, Helicobacter pylori, among others) and protective factors (mucus, bicarbonate, prostaglandins, blood flow) of the mucosa of stomach or duodenum. In an attempt to protect the gastric mucosa from hydrochloric acid, improve ulcer healing and prevent recurrence, the pharmacological control of acid secretion has long represented an aim of antiulcerogenic drugs. Among the options available in the market, we have the H2 receptor antagonists and proton pump inhibitors. Some of these drugs can promote not only a range of side effects, but also a decrease in effectiveness in the treatment of ulcers and primarily not prevent its recurrence. Thus, the necessity of more effective and safe agents is clearly pressing. Hence, scientific efforts are conduct to find the adequate treatment from natural products, such as source of drugs. Serjania marginata Casar., a specie commonly found in the Brazilian Cerrado, has been described by its popular indication to treat stomach aches, however, there are no studies on their pharmacological activities for the treatment or prevention of peptic ulcers. Therefore, the aim of this study was to evaluate the gastroprotective activity of the hydroalcoholic extract from leaves of Serjania marginata (EHSM) in different experimental models. It was initially performed a test of acute toxicity and motor performance to evaluate the possible toxicity and neurotoxic effects of the extract, however this did not cause any changes in these experimental models, thus demonstrating the safety of use for continuing studies with this species. It was observed that EHSM, orally administered, has a protective action against the gastric ...
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Expressão gênica e proteica e cinética celular no processo inflamatório induzido pela Helicobacter pylori antese após terapia de erradicaçãoCadamuro, Aline Cristina Targa [UNESP] 27 June 2014 (has links) (PDF)
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000790886.pdf: 4471637 bytes, checksum: 719bf442a98affa2f654603ac2d00a13 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Helicobacter pylori (H. pylori) é o principal patógeno associado ao câncer, devido mudanças inflamatórias e atróficas na mucosa gástrica, que por meio de progressão pode culminar no adenocarcinoma gástrico. A erradicação da H. pylori é considerada um tratamento de primeira linha para reverter as lesões préneoplásicas e prevenir a progressão maligna. Poucos estudos avaliaram a ocorrência de alterações genéticas antes e após a erradicação da bactéria, que possam evidenciar mudanças importantes relacionadas à resposta a terapia. Portanto, os objetivos deste estudo foram: avaliar a expressão do RNAm de genes que atuam na resposta inflamatória e imune e processos biológicos como proliferação celular, migração, invasão, apoptose, regeneração e angiogênse (TLR2, TLR4, IL-8, TGF-β, REG3A, PLAT, PAI-1 e IFITM1) em pacientes com lesões gástricas antes e após a terapia de erradicação da H. pylori; investigar a expressão proteica dos respectivos genes; avaliar a influência dos genótipos bacterianos CagA e VacA na resposta à erradicação da bactéria e nos níveis de expressão gênica, e avaliar a cinética celular, como o índice de proliferação celular (PI) e o índice apoptótico (AI). Foram estudadas 38 biópsias gástricas de pacientes com gastrite crônica-Hp+ (GC-Hp+) antes do tratamento padrão de erradicação da bactéria e, 3 meses após a terapia. Como controle, foram obtidas quatro biópsias de mucosa gástrica normal-Hp- (MN-Hp). A quantificação relativa (RQ) do RNAm foi avaliada pelo ensaio TaqMan e a expressão proteica, proliferação celular e apoptose por imuno-histoquímica. Antes do tratamento foram observados níveis de expressão relativa aumentados do RNAm de TLR2, TLR4, IL-8, TGF-β, REG3A e IFITM1 em pacientes GC-Hp+ em relação a MNHp- (p< 0,0001), exceto para PLAT e PAI-1, que apresentaram expressão reduzida (p< 0,0001). Os receptores TLR2 e TLR4, assim como TGF-β e IFITM1 ... / Helicobacter pylori is the main pathogen associated with cancer due inflammatory and atrophic changes in the gastric mucosa, which through of progression may result in gastric adenocarcinoma. The eradication of H. pylori is considered a first-line treatment to reverse precancerous lesions and prevent malignant progression, but a portion of patients has no effective response to therapy. Few studies have evaluated the occurrence of genetic changes before and after eradication of the bacteria, which can evidence important changes related to response to therapy. Therefore, the objectives of this study were to assess the mRNA expression of genes that participate in the inflammatory and immune response and biological processes such as cell proliferation, migration, invasion, apoptosis, regeneration and angiogenesis (TLR2, TLR4, IL-8, TGF-β, REG3A, PLAT, PAI-1 and IFITM1) in dyspeptic patients before and after eradication therapy of H. pylori; to investigate the protein expression of the respective genes; to evaluate the influence of bacterial CagA and VacA genotypes in response to H. pylori eradication and levels of gene expression, and assess cell kinetics, as cell proliferation index (PI) and apoptotic index (AI). 38 gastric biopsies from patients with chronic gastritis-Hp+ (CG-Hp+) before the standard treatment for eradication of the bacteria, and 3 months after therapy were studied. As control, four biopsies from normal gastric mucosa without infection (NM-Hp-) were obtained. Relative quantification (RQ) of mRNA was assessed by TaqMan assay and protein expression, cell proliferation and apoptosis by immunohistochemistry. Before treatment increased mRNA relative expression levels of TLR2, TLR4, IL-8, TGF-β, REG3A and IFITM1 were observed in CG-Hp+ compared to NM-Hp- (p <0.0001), except for PLAT and PAI-1, which showed reduced expression (p <0.0001). The TLR2 and TLR4 receptors, as well as TGF-β and IFITM1 showed increased expression of ... / FAPESP: 12/15036-8
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Atividade antiulcerogenica do extrato bruto hidroalcooloco da Luehea divaricata Martus et Zuccarini / Antiulcerogenic activity of a crude hydroalcoholic extract of Luehea divaricata Martus et ZuccariniSiqueira, Marina Guimarães 20 October 2006 (has links)
Orientador: João Ernesto de Carvalho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T21:32:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2006 / Resumo: A Luehea divaricata Martus et Zuccarini (Tiliaceae) geralmente é encontrada em alguns estados do Brasil como Rio de Janeiro, Bahia, São Paulo, Minas Gerais, Goiás e Mato Grosso do Sul. Trata-se de uma árvore de 16 metros de altura, com casca fina, de coloração pardo-acinzentada, com numerosos e pequenos sulcos longitudinais e que floresce de dezembro a fevereiro. Conhecida popularmente como "Açoita-cavalo", sua casca é empregada na medicina popular, na forma de decocto, como antiinflamatório, diurético e anti-reumático. Este trabalho teve como objetivo avaliar a atividade antiulcerogênica de extratos obtidos da Luehea divaricata, determinar o possível mecanismo de ação e identificar prováveis substâncias ativas. Para a obtenção do extrato bruto hidroalcoólico (EBH 70%), foram utilizadas as cascas secas e moídas da espécie acima, coletada na reserva florestal de Leme. Esse extrato foi avaliado em modelos de úlcera gástrica induzida por indometacina e etanol. Para estudo do mecanismo de ação avaliou-se a participação de grupos sulfidrila, prostaglandinas, inibição da secreção ácida gástrica e quantificação de muco gastroprotetor. Uma triagem fitoquímica foi realizada para identificar substâncias presentes no EBH 70% e placas de CCD também foram feitas para comparar os extratos testados e seus constituintes. O EBH 70% de L. divaricata reduziu o índice de lesões ulcerativas produzido por indometacina e etanol. Esse mecanismo de ação antiulcerogênico está parcialmente relacionado com a atividade de radicais sulfidrila e pela precipitação de proteínas produzida pela presença de polifenóis (flavonóides, catequinas, antocianinas, taninos), identificados entre os princípios ativos dessa espécie. Além de polifenóis a triagem fitoquímica identificou a presença saponinas, esteróides triterpênicos e antracenosídeos / Abstract: The Luehea divaricata Martus et Zuccarini (Tiliaceae) is generally found in some States of Brazil such as Rio de Janeiro, Bahia, São Paulo, Minas Gerias, Goiás and Mato Grosso do Sul. It is a sixteen-metre-tall tree with fine bark and greyish colour which blossoms from December to February. It is popularly known as "açoita-cavalo" and its bark is used in popular medicine in the form of decoctation as an antiinfiamatory, diuretic and rheumatic drug. This work aimed at evaluating the anti-ulcerative activity of the hydro-alcoholic extract and the fractions obtained from the Luehea divaricata as well determine the probable mechanism of the action involved. Dried-milled bark was used in order to obtain the hydro-alcoholic extract of Luehea divaricata Martus et Zuccarini (EBH 70%). The EBH 70% was evaluated in models of indomethacin and ethanol induced ulcer in a dose of lg/kg. For the study of the mechanism action participation of sulfhydryl, prostaglandin, acid gastric secretion and quantification of mucus protector was evaluated. A phytochemical screening was also carried out to identify the components present in EBH 70%. The result showed that the EBH 70% of Luehea divaricata performs an important anti-ulcerative action and that its mechanism of action may be related to the participation of the sulfhydrylic non-protein substances. Moreover, this protective action should be consequence to condensed tannins presents in this extract. These compounds have been described in the literature as responsible for this antioxidan and cicatrizing local action / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica
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Expressão de genes relacionados ao ciclo celular e proteção da mucosa gástrica em metaplasia intestinal e ulcera gástrica em comparação com câncer gástricoDuarte, Márcia Cristina [UNESP] 09 October 2009 (has links) (PDF)
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duarte_mc_dr_sjrp.pdf: 1624040 bytes, checksum: 20ecff772fa883fe77038e593b4fc422 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A carcinogênese gástrica apresenta um modelo de múltiplas etapas, que pode iniciar a partir de uma gastrite crônica, frequentemente associada à infecção pela bactéria Helicobacter pylori, e progredir para atrofia gástrica, metaplasia intestinal, displasia e câncer gástrico. Outra via, trata do surgimento do câncer gástrico a partir de um sítio de úlcera péptica benigna. Há relatos de algumas alterações genéticas bem estabelecidas nos estágios iniciais e avançados da carcinogênese gástrica, mas em lesões benignas precursoras como a metaplasia intestinal e a úlcera gástrica, relativamente pouco é conhecido. Deste modo, estudos genéticos destas lesões poderão fornecer informações importantes sobre os eventos iniciais da carcinogênese do estômago e contribuir para estratégias de diagnóstico precoce e prevenção. A partir de dados da literatura foram selecionados genes envolvidos com a carcinogênese do estômago como TERT, COX-2, NOS2, HGF, MET, KRAS, TFF1 e CLDN18, que atuam na manutenção dos telômeros, processos celulares e proteção da mucosa gástrica. Diante do exposto, este trabalho teve por objetivos avaliar mudanças de expressão gênica e protéica destes genes selecionados, em metaplasia intestinal (MI - 37 casos) e úlcera gástrica (UG - 30 casos), comparadas com suas respectivas mucosas normais (MN) e com adenocarcinoma gástrico (CG - 22 casos) e verificar possíveis correlações entre a expressão destes genes nos três grupos estudados, bem como associações entre os níveis de expressão gênica e protéica e fatores como infecção pela H. pylori e tipo histológico de MI e CG. A expressão relativa do RNAm dos referidos genes foi analisada pela técnica de PCR em tempo real, enquanto a expressão das respectivas proteínas foi avaliada por imuno-histoquímica. A avaliação da expressão gênica revelou níveis médios relativos do RNAm... / Gastric carcinogenesis presents a model of multiple steps, which can be triggered by a chronic gastritis, often associated with infection caused by the bacterium Helicobacter pylori, and progress to gastric atrophy, intestinal metaplasia, dysplasia and gastric cancer. However, another pathway has attracted interest in recent decades and refers to origin of gastric cancer from one site of benign peptic ulcer. There are reports of some well-established genetic alterations in the early stages and advanced gastric carcinogenesis, however, in precursor benign lesions as intestinal metaplasia and gastric ulcer, relatively little is known. Thus, genetic studies of these lesions may provide important information regarding the initial events of carcinogenesis of the stomach and contribute to strategies for early diagnosis and prevention. The genes selected for this study TERT, COX-2, NOS2, HGF, MET, KRAS, TFF1 and CLDN18, act, usually, in cell cycle processes, telomere maintenance and protection of the gastric mucosa. So, this study aimed to evaluate changes in gene and protein expression of these genes, altered in intestinal metaplasia (IM- 37 cases) and gastric ulcer (GU- 30 cases), compared with their corresponding normal mucosa (NM) and gastric cancer (GC - 22 cases) and to verify possible correlations between the expressions of these genes among the three groups studied, and also examine associations between gene and protein expression levels and factors such as H. pylori infection and histological type of IM and GC. The relative mRNA expression of these genes was analyzed by real time PCR, while the expression of respective proteins was assessed by immunohistochemistry. Evaluation of gene expression showed mRNA relative mean levels, increased in GC compared to NM to TERT (17.3-fold), COX-2 (27.6-fold), NOS2 (12.8-fold), HGF (1.8-fold), MET (3.5-fold) and KRAS (1.7-fold). For TFF1, there was... (Complete abstract click electronic access below)
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