Orientador: Maricilda Palandi de Mello / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-26T06:06:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lau_IvyFreitas_M.pdf: 6541042 bytes, checksum: dce5fa2949eadea9991df6afa662f0ad (MD5) Previous issue date: 1999 / Mestrado

Orientador: Sara Teresinha Olalla Saad / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-28T15:25:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leite_RobertaCampaniledeAlmeida_M.pdf: 2956595 bytes, checksum: 95ba2c0e0e8e28a5d1c7b0dc0252ede6 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: O presente estudo teve por objetivo a análise molecular de 28 pacientes não relacionados, atendidos no Hemocentro-UNICAMP, portadores de Esferocitose Hereditária (EsH) diagnosticada a partir de dados clínicos, esfregaço de sangue periférico e curva de fragilidade osmótica. Na maioria destes casos, a quantificação das proteínas de membrana das hemácias através da densitometria de gel de políacrilamida-SDS corado pelo azul de Coomassie, detectou deficiência de espectrina e/ou anquirina. O rastreamento de mutações foi feito através de SSCP e confirmadas por sequenciamento. Duas novas mutações foram encontradas em nossa população, ambas tratando-se de substituição de um nucleotídeo com alteração do aminoácido. A primeira no exon 9 (His -> Arg, CAC->CGC) e a segunda no exon 28 (lle->Thr ATC->ACC), totalizando uma frequência de 7.2% de mutações no gene da anquirina na população com Esferocitose Hereditária estudada. Foram também encontrados dois novos polimorfismos: no exon 6 (codon 197, CCG ->CCA) e no exon 29 (codon 1162, AGT -> AGC), além de outros polimorfismos já descritos, no exon 4 (codon 105, AAT->AAC), no exon 16 (codon 594, TCC -> TC A), e no exon 18 (codon 691, GGT -> GGC). Foi ainda realizada a análise da expressão de RNAm do gene da anquirina através de SSCP. Um paciente apresentou defeito na transcrição de um dos alelos, conforme evidenciado pela análise da repetição de nucleotídeos AC na região 3' não transcrita. Assim nossos dados indicam que, diferente da literatura, mutações no gene da anquirina podem não ser frequente em todas as populações / Abstract: In this study, we carried out the molecular analysis of 28 unrelated patients seen at the Hemocentro-UNICAMP with Hereditary Spherocytosis diagnosed by clinical data, peripheral blood smear and osmotic fragility test. Spectrin and/or ankyrin deficiency was detected in these patients, by densitometry of SDS-PAGE stained by Coomassie blue. By SSCP and DNA sequencing, two novel mutations were identified: In exon 9 (His ->Arg, CAC->CGC) and in exon 28 (lle-*Thr ATC->ACC) totalizing a frequency of 7,2% of ankyrin mutations in the Hereditary Spherocytosis population studied. Two novel polymorphisms were also observed: in exon 6 (codon 197,CCG ->CCA) and in exon 29 (codon 1162, AGT -" AGC), besides other polymorphisms already described in exon 4 (codon 105, AAT -> AAC), exon 16 (codon 594, TCC -> TCA), and exon 18 (codon 691, GGT -> GGC). Expression of ankyrin mRNA by SSCP-PCR of the AC repeat at the 3'ut region showed, in one patient, a defect in the transcription of one allele. Then, our data indicated that ankyrin defects might be not frequent in all populations / Mestrado / Mestre em Ciências Médicas

Orientadores: Maricilda Palandi de Mello, Margaret de Castro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-29T00:07:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Penachioni_JuniaYara_M.pdf: 27459097 bytes, checksum: 48ce0c0d888072b75af2d77ad2cb5166 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A hiperplasia congênita da adrenal (HCA) é uma das heredopatias mais comuns. Mais de 90% dos casos são devido à deficiência da 21-0H e 5-8% são causados pela deficiência da 11'beta'-OH. Ambas envolvem a incapacidade para sintetizar cortisol, sendo a última uma falha na conversão de 11-desoxicortisol a cortisol. ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Congenital adrenal hyperplasia (CAR) is one of the most common inherited endocrine diseases. More than 90% of cases are due to steroid 21-0H deficiency, where as 5-8% are caused by 11'beta'-hydroxylase (11'beta'-0H) deficiency, the inherited inability to synthesize cortisol (failure to convert 11-deoxycortisolto cortisol). ... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Genetica Medica / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Fernando Ferreira Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-12T02:54:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_RodrigoFranco_M.pdf: 3057488 bytes, checksum: cb959542187ac7e8cd6b5b095813ad77 (MD5) Previous issue date: 2000 / Mestrado

Orientadores: Margaret de Castro, Maricilda Palandi Mello / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T06:46:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Torres_Natalia_M.pdf: 1866447 bytes, checksum: 8703fb4eb0e03b2794a2485e136c4f58 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: A hiperplasia adrenal congênita (HAC) constitui um grupo de doenças hereditárias decorrentes da deficiência de uma das enzimas necessárias para a esteroidogênese adrenal. A forma mais comum de HAC é decorrente da deficiência da 21-hidroxilase (21-OH), correspondendo a 90-95% de todos os casos, cuja herança é autossômica recessiva. Mutações no gene CYP21 são responsáveis pelas diferentes formas da doença. O gene CYP21 codifica a enzima 21-OH e se alternam em tanden com o pseudogene CYP21P, ambos apresentando 98% de homologia, favorecendo o emparelhamento desigual dos cromossomos durante a meiose, levando ao aparecimento de duplicações, deleções ou conversões destes genes. Estudos de mutagênes e in vitro permitiram quantificar a atividade enzimática de cada mutação e sua correlação com as diferentes formas clínicas da doença. O objetivo deste estudo foi delinear o perfil do complexo gênico 21-OH em famílias com pelo menos um membro portador de HAC por deficiência da 21-OH, determinar as freqüências de haplótipos com mutações de ponto no gene CYP21 e estabelecer uma correlação entre genótipo e fenótipo dos indivíduos afetados. Foram estudadas 50 famílias não correlacionadas, sendo 20 indivíduos portadores da forma clássica perdedora de sal (PS), 17 da forma clássica virilizante simples (VS) e 13 da forma não clássica (NC) de deficiência de 21-OH. Utilizamos DNA genômico para amplificação do gene CYP21 por PCR alelo-específico. Mutações foram identificadas em 93 alelos, sendo mais freqüentemente encontrada a mutação I172N (20,4%), seguida da V281L (18,2%), IVS2, A/C>G,-12 (Sp2) (14,0%) e R356W (6,5%), Q318X (1,1%), P30L (1,1%) e 706_713del8 (D8) (1,1%). Os genótipos foram divididos em grupos A, B e C, em ordem crescente da atividade enzimática, e foram comparados com as formas clínicas de HAC: PS, VS e NC, respectivamente. Em nossa amostragem, houve, ainda, uma forte correlação do genótipo com o fenótipo (100% para o C grupo, 100% para o B e 88,8% para o A). A freqüência de microconversões encontrada neste estudo foi semelhante à observada na população mundial e brasileira / Abstract: Congenital adrenal hyperplasia due to 21-hydroxylase deficiency (CAH-21OHD) is one of the most common inborn metabolism errors. It presents a wide spectrum of clinical manifestations, varying from a severe form with prenatal virilization and neonatal dehydration to a mild form in which the signs appear around puberty onset. It presents recessive autosomal inheritance and occurs due to mutations in the CYP21 gene, which codifies the 21-hydroxylase enzyme. Mutations leading to less enzymatic activity are related to the classical form and those with more enzymatic activity with nonclassical form of the disease. We studied the frequency of the 7 most frequent point mutations reported in CYP21 gene in 50 families with CAH-21OHD, 21 with classic salt wasting patients (SW), 17 with classic simple virilizing patients (SV) and 13 with nonclassic form (NC). In addition, we correlated the phenotype with the genotype observed in all patients studied. We used genomic DNA to amplify CYP21 gene by allele-specific PCR. Mutations had been identified in 93 alleles. The more frequent mutation found was I172N (21.5%) followed by V281L (18.2%), IVS2, A/C>G,-12 (Sp2) (14.0%) and R356W (6.5%), Q318X (1.1%) and P30L (1.1%) and 706_713del8 (D8) (1.1%). The genotype was divided in groups A, B and C, in an increasing order of enzymatic activity. These three groups were compared to the SW, SV and NC forms, respectively. There was a strong correlation of phenotype with the genotype (100% for C group, 100% for B group and 88.8% for A group). In conclusion, the frequency of microconversions found in this study was similar to those observed in the worldwide and in a Brazilian sub population / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientadores : Maria de Fatima Sonati, Monica Barbosa de Melo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T14:43:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Jorge_SimoneBordignonde_M.pdf: 1672707 bytes, checksum: 1ca1b039159c022f6091792558490b00 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Mutações de ponto e pequenas inserções ou deleções nos genes da globina a humana podem produzir variantes estruturais de cadeia a e a-talassemia. As mutações podem ser identificadas tanto pelo sequenciamento total dos genes, como por métodos de triagem, os quais selecionam o exon mutado para, então, ser seqüenciado. Embora sejam pequenos (cerca de 1Kb, com 3 exons e 2 introns), os genes da globina a são duplicados (a2 and a1) e extremamente ricos em ligações G-C, o que torna difícil a desnaturação e reduz a eficiência do sequenciamento, causando freqüentes artefatos e necessidade de repetições. Como o sequenciamento é ainda um método demorado e de custo elevado para muitos laboratórios, nós modificamos algumas condições do Single Strand Conformation Polymorphism (SSCP) com o intuito de otimizar a triagem de mutações nos genes da globina a humana / Abstract: Point mutations and small insertions or deletions in the human a-globin genes may produce a-chain structural variants and a-thalassemia. Mutations can be detected either by direct sequencing of the whole gene or by screening methods, which select the mutated exon for sequencing. Although small (around 1 Kb, 3 exons and 2 introns), the a-globin genes are duplicate (a2 and a1) and extremely G-C rich, what makes them difficult to denature and reduces sequencing efficiency, causing frequent artifacts and the need of repetitions. As DNA sequencing is still a time-consuming and expensive method for many laboratories, we modified some conditions of the Single Strand Conformation Polymorphism (SSCP) in order to optimize mutation detection in the a-globin genes / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientadores: Edi Lucia Sartorato, Andrea T. Maciel Guerra / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:24:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brianti_MitsueTaukeuti_M.pdf: 3392678 bytes, checksum: 88dc15b47c9245c79d493f2070d20835 (MD5) Previous issue date: 2003 / Mestrado

Orientadores: Iscia Lopes Cendes, Fernando Cendes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:07:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_PatriciaAlineOliveiraRibeirodeAguiar_M.pdf: 6980410 bytes, checksum: a30b4048981d48a03f1d0feb8a745b57 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: As epilepsias generalizadas idiopáticas (EGI) perfazem aproximadamente 50% de todas as epilepsias e possuem em sua etiologia fatores genéticos envolvidos. A epilepsia mioclônica juvenil (EMJ), uma das formas mais comuns de EGI, foi a primeira síndrome epiléptica a ter um locus mapeado, em 1988 e, desde então, vários estudos foram realizados mas a localização de um ou mais loci para a EMJ e outras formas de EGI permanece ainda uma questão aberta e muito atual. o objetivo deste projeto foi mapear loci envolvidos na predisposição para a EMJ e outras formas de EGI por estudos de ligação e associação em pacientes brasileiros. Os estudos de ligação foram realizados utilizando-se seis famílias não relacionadas, com pelo menos dois pacientes com EGI, sendo o probando com EMJ. Para os estudos de associação foram utilizados 44 pacientes com EMJ, não relacionados e, como grupo controle, 63 indivíduos sem história pessoal ou familiarde epilepsia. Para ambos os estudos foram genotipados oito marcadores microssatélites nas regiões cromossômicas 6p21 e 6p12 e quatro marcadores que flanqueassem o locus 5q34. Para o estudo de ligação foram realizadas as análises de dois pontos e de múltiplos pontos com o aplicativo LINKAGE. Para a análise de associação foram utilizados os testes Qui-quadrado e exato de Fisher, quando indicado, e o cálculo de odds ratio com intervalo de confiança de 95%. Também foi realizada uma pesquisa direta de mutação do exon 9 do gene GABRA1, localizado em 5q34, pela análise de SSCP em 71 pacientes e 82 controles e subseqüentemente foi realizado seqüenciamento das variantes encontradas. Os nossos resultados do estudo de ligação não evidenciaram a presença de um gene principal nas regiões 6p21, 6p12 ou 5q34. No entanto, a análise de associação demonstrou a possível presença de genes de suscetibilidade (menor efeito) ou genes modificadores, nos pacientes com EMJ estudados, nas três regiões. A análise de mutação do exon 9 do gene GARRA] não revelou qualquer variante potencialmente patológica. Em conclusão, os nossos dados vêm contribuir para o melhor entendimento da EMJ e das EGI em geral, reforçando o conceito de doenças complexas, nas quais existe possivelmente uma herança poligênica e a presença de heterogeneidade genética / Abstract: The idiopathic generalized epilepsies (IGE), for which a genetic cause is widely accepted, account for approximately 50% of all epilepsies. Juvenile myoclonic epilepsy (JME), one of the most common forms of IGE, was the first epileptic syndrome to be mapped to a chromosome (ch) region, in 1988, and since then, although several studies were carried out, the localization of one or more loci for the JME and other forms of IGE remains still an open and very current question. The objective of this project was to map loci involved in the predisposition for JME and other forms of lGE, using linkage and association studies, in Brazilian patients. Linkage studies were carried out using six non-related families, with at least two patients with IGE, with the proband having JME. For the association studies 44 on-related individuals were genotyped. In addition, 63 normal controls without epilepsy, were studied. For both studies we genotyped eight microsatellite markers in ch 6p21 and ch 6p12 and four markers in ch 5q34. For linkage studies we used the LINKAGE software to calculate two-point and multipoint lod scores. For the association analyses, we used qui-square and Fisher's exact tests, when it was indicated, and odds ratio with 95% confidence intervalo. We also performed a mutation screening on exon 9 of the GABRA1 gene, on ch 5q34, for 71 patients and 82 controls using SSCP analysis and, subsequently,sequencing of the variants found. Our linkage results showed no evidence of a major locus on cromossomal regions 6p21, 6p12 or 5q34. However, association studies found some evidence for susceptibility genes (minor effect) or modifier genes in all three regions. Mutation screening of exon 9 of the GABRA1 gene did not identify any potential pathological variant. In conclusion,our data contribute for the general view of JME and other forms of IGE as complex trait, in which polygenic inheritance and genetic heterogeneity are probably / Mestrado / Neurociencias / Mestre em Fisiopatologia Médica

Orientadores: Maria Cecilia Barisson Vilares, Marcelo de Carvalho Ramos / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:36:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pavan_EricaMary_M.pdf: 4511784 bytes, checksum: f18e2ccff3e501d32cd9bb36915d1074 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: A isoniazida, a rifampicina e a pirazinarnida, têm sido utilizadas no tratamento da Tuberculose em muitos países, inclusive no Brasil. A resistência das cepas de Mycobacterium tuberculosis aos antibióticos tem resultado em falência do tratamento e aumento do custo para o sistema de saúde. As Mycobacterium tuberculosis resistentes às drogas de primeira linha tem emergido e estas tem sido reportadas mundialmente. Nas mutações no gene rpo? têm se evidenciado o mecanismo de resistência prevalente das cepas de Mycobacterium tuberculosis resistentes à rifampicina. A fim de caracterizar as bases genéticas da resistência às drogas, do Mycobacterium tuberculosis, foram analisadas mutações envolvendo a resistência à rifampicina utilizando os métodos SSCP (Single Strand Conformation Polymorphism) e sequenciamento. As cepas de MTB (Mycobacterium tuberculosis) foram genotipadas e avaliadas quanto à suscetibilidade a rifampicina. Como resultado, foram encontradas 13 cepas sensíveis a rifampicina e 65 resistentes. O DNA genômico foi obtido de cada cepa e um fragmento constando de 157pb do gene rpo? foi amplificado, submetido ao SSCP e ao sequenciamento. As mutações identificadas pertenciam a região do gene rpo? entre o códon 511 e 533. A S531L (44%) foi a mutação de maior prevalência, seguida das mutações H526D (21%), H526Y (3%), L533P (3%), D516V (3%) e a inserção Phe514 e Met515 (3%) / Abstract: Isoniazid, rifampin, and pyrazinamide, have been used as the standard treatment for tuberculosis in many countries, including Brazil. Antimicrobial resistance among Mycobacterium tuberculosis strains results in increased morbidity, mortality and costs of health care. Control of tuberculosis is thus threatened by widespread emergence of drug resistance in Mycobacterium tuberculosis as reported worldwide. Mutations in the rpo? gene seems to be the most prevalent mechanism involved in rifampin resistance among M. tuberculosis strains. To characterize the genetic basis of drug resistance in Mycobacterium tuberculosis in Brazil, mutations involved in rifampin resistance were detected using single strand conformation polymorphism (SSCP) and sequencing studies. A sample consisting of 73 isoniazid resistant and 5 isoniazid sensitive isolates recovered from August, 1999 through September, 2000 was screened for susceptibility to rifampin. As a result, 13 susceptible, and 65 resistant strains were detected. Genomic DNA was obtained from each isolate, and a fragment consisting of 157 bp of the rpo? gene was amplified, and submitted to SSCP and sequencing studies. Mutations involving codon 511 through codon 533 were identified. S531L (44%) was the most prevalent mutation found, followed by H526D (21%), and H526Y, L533P, D516V, Ins Phe514, Met515 (3% each). Our study corroborates previous studies done in Brazil which identified S531L as the most prevalent mutation, and several other mutations on the same gene segment (codon 511 through 533) / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Yong Kun Park / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-24T09:31:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Contado_JoseLuis_D.pdf: 5265713 bytes, checksum: d8b1e9c15dba1c02f381597ff13b0f09 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Frutooligossacarídeos, ou Neosugar, são oligômeros de sacarose, constituídos de uma molécula de glicose unida com 2, 3 ou 4 unidades de frutose por ligação ß-2,1, resultando em estruturas designadas como 1-kestose (GF2), nistose (GF3) e 1f-frutofuranosil nistose (GF4), respectivamente. Sabe-se que os frutooligossacarídeos existem naturalmente em muitos tipos de plantas. Podem também ser obtidos a partir de sacarose através da transfrutosilação catalisada pela enzima ß-frutofuranosidase (E.C.3.2.1.26) de microrganismos. Frutooligossacarídeos têm-se tomado de grande interesse por estimular o crescimento de bifidobactérias benéficas do trato digestivo, diminuir o teor do colesterol total e lipídeos no soro sanguíneo, reduzir a constipação intestinal, e em geral melhorar a saúde humana. Neosugar é uma mistura de frutooligossacarídeos, 1-kestose (GF2), nistose (GF3) e 1f-frutofuranosil nistose (GF4) e é comercialmente produzido a partir de sacarose usando a ß-frutofuranosidase obtida de A. niger. O objetivo deste trabalho foi induzir um mutante de Aspergillus niger, utilizando o reagente N-Metil N' -Nitro N-Nitrosoguanidina (M.N.N.G.) e raios ultravioleta (UV), que produzisse uma ß-frutofuranosidase com maior atividade de transfrutosilação para produção de frutooligossacarídeos do que a linhagem parental e comparar as características das duas enzimas. Uma linhagem mutante (nº 12) de A. niger, obtida pelo tratamento com M.N.N.G.-UV, foi selecionada por apresentar mais que o dobro da atividade ß-frutofuranosidase que a linhagem parental. Esta linhagem mutante produziu menos conídea em PDA e mostrou-se morfologicamente diferente apresentando colônias bege. A ß-frutofuranosidase extracelular da linhagem mutante foi purificada cerca de 15,8 vezes em relação a enzima bruta sendo obtido 39,2 % de rendimento. A enzima purificada apresentou atividade específica de 4,26 unidades/mg de proteína. A enzima apresentou pH e temperatura ótima de atividade na faixa de 5,5-6,0 e 50-55°C, respectivamente. A enzima mostrou-se estável na faixa de pH 5,0 a 6,0 e a temperaturas inferiores a 55°C. Os valores de km e Vmáx da ß-frutofuranosidase para sacarose foram 0,47 M e 1,02 µmol/ml/min, respectivamente. A atividade enzimática foi inibida com 1 mM de N-bromosuccinimida, ß-mercaptoetanol, HgCl2 e I2, e com 10 mM de AgNO3, após 30 minutos a 55°C. A ß-frutofuranosidase extracelular da linhagem mutante foi purificada cerca de 15,4 vezes em relação a enzima bruta sendo obtido 31,7 % de rendimento. A enzima purificada apresentou atividade específica de 1,66 unidades/mg de proteína. A enzima apresentou pH e temperatura ótima de atividade na faixa de 5,0-6,0 e 50-55°C, respectivamente. A enzima mostrou-se estável na faixa de pH 5,0 a 6,0 e a temperaturas inferiores a 55°C. Os valores de Km e Vmáx da ß-frutofuranosidase para sacarose foram 0,37 M e 1,12 µmol/ml/min, respectivamente. A atividade enzimática foi inibida com 1 mM de N-bromosuccinimida, ß-mercaptoetanol, HgCl2 e I2. e com 10 mM de AgNO3, após 30 minutos à 55°C.O maior rendimento de frutooligossacarídeos (54,41%) em relação aos açúcares totais foi obtido utilizando-se ß-frutofuranosidase e 30% substrato sacarose em tampão citrato-fosfato pH 5,5 após 6 horas de incubação a 55°C. A concentração de substrato e o tempo de incubação são importantes para obter a proporção de GF2/GF3/GF4 desejada / Abstract: Fructooligosaccharides (or Neosugar) are sucrose oligomers, which are composed of glucose attached via a ß-(2-1) linkage to 2, 3 or 4 fructose units. The resulting structures are designated as l-kestose (GF2), nystose (GF3) and lf-fructofuranosylnystose (GF4), respectively. It is known that fructooligosaccharides exist naturally in many kinds of plants. They can also be prepared from sucrose through the transfructosylating action of enzyme ß-fructofuranosidase (E.C. 3.2.1.26) obtained from microorganisms. Fructooligosaccharides have become of major interest due to their growth stimulation of beneficial bifidobacteria in the digestive tract, decrease of total cholesterol and lipid in the serum, relief of constipation, and general improvement of human health. Neosugar is a mixture of the fructooligosaccharides, l-kestose (GF2), nystose (GF3) and 1f-fructofuranosylnystose (GF4), and is commercially produced from sucrose using the enzyme ß-frutofuranosidase enzyme obtained from A. niger ATCC 20611. The objective of this work was to induce a mutant of Aspergillus niger, using M-Methyl N'-Nitro N-Nitrosoguanidine (M.N.N.G.) and ultraviolet ligth (UV) producing higher ß-fructofuranosidase activity for the production of fructooligosaccharides than the parent strain and to study the characteristics of the enzyme. A mutant strain(nº 12) of A. niger, obtained by treatment with M.N.N.G.-UV, was selected, producing 100% more ß-fructofuranosidase than the parent strain. The mutant produced less conidia on PDA and was morphologically different: brownish white colonies. The extracellular ß-fructofuranosidase of the mutant strain was purified about 15.8-fold (40.2% yield) with respect to the crude enzyme preparation, showing a specific activity of 4.26 units/mg protein. It was found that the optimum pH and temperature for activity were 5.5-6.0 and 50-55°C, respectively. The enzyme was stable from pH 5.0 to 6.0 and at temperatures below 55°C. The Km and Vmáx values of the ß-fructofuranosidase for sucrose were 0.47 M and 1.02 µmol/ml/min., respectively. The activity of the enzyme was inhibited by 1 mM by N-bromosuccinimide, ß-mercaptoethanol, HgCl2 and I2, and by 10 mM AgNO3 after 30 minutes at 55°C. The extracellular ß-fructofuranosidase parent strain was purified about 15.4-fold (38.6 % yield) with respect to the crude enzyme preparation showing a specific activity of 1.66 units/mg protein. It was found that the optimum pH and temperature for activity were 5.0-6.0 and 50-55°C, respectively. The enzyme was stable from pH 5.0 to 6.0 and at temperatures below 55°e. The enzyme was stable from pH 5.0 to 6.0 and at temperatures below 55 °e. The Km and Vmax values of the ß -fructofuranosidase for sucrose were 0.37 M and 1.12 µmol/ml/min.., respectively. The activity of the enzyme was inhibited by 1 mM by N-bromosuccinimide, ß-mercaptoethanol, HgCl2 and I2, and by 10 mM AgNO3 after 30 minutes at 55°C. Maximum conversion yeld from sacarose to fructo-oligosaccharides (54.41%) was obtained when added ß-frutofuranosidase in 30% sucrose, at 55°C and pH 5,5, for 6 hrs incubation. The production efficienceis of GF2/GF3/GF4 depending on sucrose concentration and the reaction time / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos