Submitted by Fabio Sobreira Campos da Costa (fabio.sobreira@ufpe.br) on 2017-05-25T13:40:41Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Tese_Anivaldo_Pereira_Duarte_Junior.pdf: 10191822 bytes, checksum: 646b55c8dd337a59ccd673e84bb95f92 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-25T13:40:41Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) Tese_Anivaldo_Pereira_Duarte_Junior.pdf: 10191822 bytes, checksum: 646b55c8dd337a59ccd673e84bb95f92 (MD5) Previous issue date: 2016-05-20 / CAPES / Carreadores lipídicos nanoestruturados (CLN) são sistemas coloidais que apresentam potencial de uso tópico. A utilização de constituintes de origem natural se apresenta como alternativa aos lipídios sintéticos, por isso a cera de carnaúba e óleo de pracaxi foram utilizados na preparação de CLN contendo dexametasona (DXM) com finalidade de tratar inflamações cutâneas. A caracterização do óleo foi realizada através da determinação da composição de ácidos graxos por cromatografia gasosa acoplada a detector de ionização de chama (CG-FID), densidade, viscosidade dinâmica e cinemática utilizando viscosímetro rotacional e EHL requerido. A elaboração de diagrama pseudoternário de fases (óleo/tensoativos/água), avaliação da mistura de cera/óleo por DSC e DRX, determinação do coeficiente de partição da DXM em óleo de pracaxi/água e a solubilidade em óleo de pracaxi também foram realizadas. A metodologia analítica por CLAE acoplada a detector UV para quantificação da DXM foi validada e um planejamento experimental fracionado seguido de composto central foi executado com objetivo de obter CLN em torno de 200nm, PDI ≤ 0,4 e maior eficiência de incorporação da DXM. O perfil e modelo cinético da liberação in vitro foi estabelecido e avaliou-se a penetração e/ou permeação cutânea in vitro da DXM em pele de orelha de porco utilizando células de difusão de Franz. O óleo de pracaxi contém 17% de ácido behênico e densidade de 0,90 −0,85g/cm3, viscosidade dinâmica de 65,75 −7,77mPa/s e cinemática de 72,99−9,09mm2/s entre 30−100℃. O EHL requerido do óleo de pracaxi foi 8,8 para Tween® 80 e Span® 60 (40:60) e o diagrama pseudoternário apresentou região de emulsão liquida leitosa com proporção de água a partir de 38% e a ocorrência de nanoemulsão (tamanho de 131,6 −258,3nm) com proporção de água de 87,5%. As misturas lipídicas apresentaram índice de cristalinidade de 71,88% e 31,93% em comparação com a cera de carnaúba. O método analítico apresentou parâmetros de validação adequados e a solubilidade da DXM em óleo de pracaxi foi de 190,16µg/mL. O log P da DXM em óleo de pracaxi/água foi de -0,4250. O CLN composto por DXM (0,15%), lipídios 10% (40% de óleo de pracaxi), tensoativos 5%, obtido com um ciclo de homogeneização e pressão de 600bar apresentou tamanho de 173,26nm, PDI 0,166 e eficiência de incorporação de DXM de 49,30%. O perfil cinético das formulações CLN-DXM e Gel DXM foi ajustado por modelo linear, com velocidades de 11,59 ± 0,49 µg/cm2/h e 2,42 ± 0,25µg/cm2/h, respectivamente. Entretanto, a formulação Gel CLNDXM apresentou perfil cinético melhor ajustado ao modelo de Higuchi, de acordo com a equação Q=15,64.t0,5 (2−12h)−18,432 (r 2 =0,9903). Os ensaios em pele não apresentaram absorção percutânea. A retenção da DXM no estrato córneo foi de 0,80 ± 0,13, 0,77± 0,15 e 0,16 ± 0,03µg/cm2 e na pele remanescente de 0,96± 0,17, 0,49± 0,18 e 0,13± 0,03 µg/cm2 para as formulações Gel CLN-DXM, Gel DXM e Creme DXM, respectivamente. A formulação Gel CLN-DXM promoveu penetração significativamente maior da DXM nas camadas profundas da pele em comparação às demais formulações, apresentando assim, possibilidade de exercer maior eficácia terapêutica da DXM. / Nanostructured lipid carriers (NLC) are colloidal systems that have potential for topical drug delivery. The use of natural lipids is an alternative to synthetic lipids and therefore carnauba wax and pracaxi oil were used to obtain dexamethasone-loaded NLC to treat skin inflammation. Pracaxi oil characterization was performed by fatty acids determination using gas chromatography coupled to a flame ionization detector (GC-FID). Density, kinematic and dynamic viscosities using a rotational viscometer and required HLB value were determined. Furthemore, pseudo ternary phase diagram (oil/surfactants/water), dispersed systems evaluation, wax/oil lipid mixture investigation by x-ray difraction and DSC, DXM partition coeficient in pracaxi oil/water and DXM solubility in pracaxi oil were determined. Analytical method for determining DXM content using HPLC coupled to an UV detector was validated. A fractional factorial and central composite designs to determine a CLN formulation with size around 200nm, PDI ≤ 0.4 and the best DXM incorporation efficiency was developed. The DXM in vitro release kinetic profile was evaluated and a kinetic model established. In vitro penetration and/or permeation in porcine ear skin using Franz diffusion cells was evaluated. Pracaxi oil contains 17% of behenic acid and presents a density, dynamic and kinematic viscosities, between 30 −100℃, of 0.90 −0.85g/cm3, 65.75−7.77mPa/s and 72.99−9.09mm2/s, respectively. Pracaxi oil required HLB was 8.8 using Tween® 80 and Span® 60 (40:60) surfactants. Pseudo ternary phase diagram presented a milky liquid emulsion region starting with 38% of water and the occurrence of nanoemulsion (size of 131.6 −258.3nm) at 87.5% of water. Lipid mixtures of pracaxi oil/carnauba wax showed crystallinity index varying from 71.88% to 31.93% comparedwithcarnaubawax.TheanalyticalmethodwassuitableforDXMdeterminations and the DXM solubility in pracaxi oil was 190.16µg/mL. The log P value of DXM in pracaxi oil/water was −0.4250. The CLN consisted of DXM 0.15%, 10% lipids (40% pracaxi oil), 5% surfactants was obtained with one homogenisation cycle and 600bar pressure, presented a particle size of 173.26nm, PDI of 0.166 and DXM encapsulation efficiency of 49.30%. The kinetic profile of CLN-DXM and DXM gel formulations was fitted by linear model, with speeds of 11.59 ± 0.49µg/cm2/hr, and 2.42± 0.25µg/cm2/hr, respectively. However, the CLN-DXM gel formulation presented kinetic profile best fitted to Higuchi model, according to the equation Q=15,64.t0,5 (2−12h)−18,432 (r 2 =0,9903). Skin penetration/permeation studies showed no percutaneous absorption. The formulations DXM-NLC/gel, DXM-gel and DXM cream showed DXM retention in stratum corneum layer of 0.80 ± 0.13, 0.77± 0.15 e 0.16± 0.03µg/cm2, and in remaining skin of 0.96± 0.17, 0.49 ± 0.18 e 0.13± 0.03µg/cm2, respectively. From these findings DXM-NLC/gel promoted significantly higher DXM penetration in deep skin in comparison with other DXM formulations, thus demonstrating a possible better DXM-NLC/gel therapeutic efficacy.

Made available in DSpace on 2018-08-01T21:35:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_12334_Dissertação_Gisele Pereira Diniz Schuenck.pdf: 3345641 bytes, checksum: 72a76070052bd5a46fdb845951b416b3 (MD5) Previous issue date: 2018-04-19 / As nanopartículas de ouro (AuNPs) tem se mostrado uma plataforma atraente para combinar uma variedade de propriedades biofisicoquímicas em um nanodispositivo unificado com grande potencial terapêutico. Neste estudo investigamos a capacidade do polifenol natural, epigalocatequina-3-galato (EGCG), de permitir a redução química de sais de ouro em nanopartículas de ouro e a estabilização em uma única etapa. As nanopartículas de ouro foram sintetizadas por oxirredução, com base em um Planejamento Fatorial Fracionado (triagem) e em seguida um Planejamento Composto Central (otimização) com o objetivo de determinar os pontos ótimos para a síntese. A caracterização do coloide sintetizado foi realizada com análises de UV-Vis, Infravermelho, Raman, Potencial Zeta, ICP-MS e Microscopia Eletrônica de Transmissão. Além disso, foi examinada a atividade citotóxica em modelo de macrófagos de camundongos. O pico de absorbância ocorreu em 533 nm e o diâmetro médio das nanopartículas foi de 14,54 nm. A nanoformulação apresentou boa estabilidade in vitro ao longo de mais de 6 meses e seu potencial zeta foi de -34,89 mV, sugerindo que o revestimento da EGCG previne a agregação. A análise de ICP-MS mostrou que a concentração de ouro reduzida com a síntese verde foi de 29,05 mg/L. Os dados obtidos pela espectroscopia do Infravermelho e Raman confirmaram a presença da EGCG nas nanopartículas de ouro. O coloide não apresentou efeito citotóxico para o modelo testado. A concentração inibitória referente a 50% de sobrevivência das células (IC50) para AuNPs-EGCG foi de 156,9 mg/L. Não foram utilizados produtos químicos, com exceção dos sais de ouro, neste processo verde de nanotecnologia biogênica, abrindo excelentes oportunidades para aplicações biomédicas.

Made available in DSpace on 2018-08-01T21:36:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_10812_Dissertação de mestrado - Paulo Matheus - Final.pdf: 3772847 bytes, checksum: e98aacba0bfddcbca0b83aa9f2b9c46c (MD5) Previous issue date: 2017-04-05 / Membranas poliméricas são definidas como uma interface entre duas fases adjacentes atuando como barreiras seletivas regulando o transporte de substâncias entre dois compartimentos, são obtidas a partir de estruturas poliméricas, e outros tipos, como materiais cerâmicos. Neste trabalho foi utilizado o biopolímero quitosana (QUI), proveniente de cascas de camarão pré-processadas cuja última etapa de purificação foi realizada utilizando ácido acético a 0,5 mol/L e poliacrilonitrila (PAN), que foi sintetizada utilizando peróxido de benzoíla e o monômero acrilonitrila. O objetivo deste trabalho inicialmente foi investigar a produção de membranas híbridas de poliacrilonitrila e quitosana, agregada com nanopartículas de óxido de zinco, que foi adicionado em uma solução ácida de quitosana com agitação utilizando ultrassom e aquecimento a 70 ºC, e, posteriormente analisar as características dessas membranas. Os resultados obtidos mostraram que as membranas de PAN pura são duras e quebradiças, e, conforme o teor de QUIT aumenta, elas vão se tornando mais maleáveis, ao mesmo tempo em que os poros vão sendo fechados e tornam-se menores e menos frequentes. Com relação à adição do óxido de zinco, os poros das membranas com a presença deste assumem um aspecto intermediário entre os apresentados pela membrana de PAN pura e PAN/QUIT. Quando observadas em sua seção transversal, as membranas com QUIT apresentam grandes cavidades, diferentemente do observado para a PAN pura e, novamente, as membranas com presença de óxido de zinco exibem comportamento intermediário, podendo-se observar uma espécie de rede polimérica. Observou-se ainda em todas as membranas o efeito mais efetivo da evaporação do solvente, que provocou a quebra ou alteração considerável nas membranas, numa temperatura acima de 120 °C.

Orientadores: Nelci Fenalti Hoehr, Nelson Durán / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-16T15:22:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_ThiagoMatosFerreirade_M.pdf: 9733852 bytes, checksum: 27ee6ec2038e928ab267ba8fb4ece0f8 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O Diabetes Mellitus é uma patologia cujos casos têm aumentado, devido aos maus hábitos de vida da sociedade. Inúmeras estratégias vêm sendo desenvolvidas para o tratamento do diabetes, especialmente a liberação controlada de fármacos. A utilização errônea da insulina como tratamento base do diabetes assume uma problemática, visto que a dose elevada do fármaco pode levar a quadros graves de hipoglicemia. O emprego do encapsulamento de fármaco por polímeros biodegradáveis e biocompatíveis vem sendo uma boa estratégia na liberação controlada de fármacos, permitindo que o agente seja liberado de modo contínuo e sustentado. Nesse contexto, a produção e caracterização de nanopartículas contendo insulina se apresentam como uma estratégica de liberação controlada desse hormônio. Sendo assim, este projeto consistiu na preparação e caracterização de nanopartículas biodegradáveis de poli (e-caprolactona) (PCL) como carreador de insulina e sua aplicação in vivo e in vitro. As nanopartículas foram preparadas pelo método de dupla emulsão a/o/a e evaporação de solvente. A caracterização das nanopartículas foi realizada pelo Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV), observando-se nanopartículas esféricas e com diferentes tamanhos. A eficiência de encapsulação foi de 90,6% (±1,6), analisada por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) por via indireta. O diâmetro médio das nanopartículas foi de 796 nm (P.D.I. = 0,49) e o potencial zeta, medido através da mobilidade eletroforética, de -29,4 ± 2,7 mV. O estudo de viabilidade celular foi realizado em células (3 tumorais pancreáticas (MIN 6) em diferentes concentrações e tempos usando o método MTS. Observamos uma redução da viabilidade celular somente em 72h em todas as concentrações. A avaliação da liberação sustentada do fármaco foi realizada através de estudos in vivo, com ratos Wistar machos diabéticos tipo 1, os resultados confirmaram que as nanopartículas contendo insulina apresentam liberação contínua e sustentada se comparadas a insulina não encapsulada. Além disso, verificamos que o tratamento com as nanopartículas contendo insulina não promoveram hepatotoxicidade, através da avaliação da morte celular (clivagem da caspase 3), e estresse oxidativo (catalase, superóxido dismutase e peroxiredoxina). O emprego do nanoencapsulamento de insulina apresenta vantagens farmacocinéticas em relação ao uso de insulina livre, além de não apresentar hepatotoxicidade. Sendo assim, nossos resultados agregam valores importantes no tratamento clínico do diabetes tipo 1, levando a futuro promissor na utilização dessas nanopartículas poliméricas contendo insulina. / Abstract: Diabetes Mellitus is a disease whose cases have increased due to the bad habits of life of society. Several strategies have been developed for the treatment of diabetes, especially the controlled release of drugs. The erroneous use of insulin as basal treatment of diabetes takes a problem, since the high dose of the drug can lead to severe hypoglycemia. The use of drug encapsulation by biocompatible and biodegradable polymers has been a good strategy for the controlled release of drugs, allowing the agent to be released on a continuous and sustained. In this context, the production and characterization of nanoparticles containing insulin are presented as a strategy of controlled release of this hormone. Thus, this project consisted of the preparation and characterization of biodegradable nanoparticles of poly (e-caprolactone) (PCL) as a carrier of insulin and its application in vivo and in vitro. The nanoparticles were prepared by the method of double emulsion w / o / a and solvent evaporation. The characterization of nanoparticles was performed by Scanning Electron Microscope (SEM), observing and spherical nanoparticles with different sizes. The encapsulation efficiency was 90.6% (± 1.6), analyzed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) via indirect. The average diameter of nanoparticles was 796 nm (PDI = 0.49) and zeta potential as measured by photon correlation spectroscopy (PCS) of -29.4 ± 2.7 mV. The cell viability was performed in tumoral pancreatic (3 cells (6 min) at different concentrations and times using the MTS. A decrease in cell viability only at 72 at all concentrations. The evaluation of sustained release of drug was performed by in vivo studies with male Wistar rats with type 1 diabetes, results confirmed that the nanoparticles containing insulin present continuous and sustained release as compared to non-encapsulated insulin. Furthermore, we found that treatment with nanoparticles containing insulin did not cause liver toxicity by evaluating cell death (caspase 3 cleavage), and oxidative stress (catalase, superoxide dismutase and peroxiredoxins). The use of insulin nanoencapsulated pharmacokinetic advantages over the use of insulin free, and no reported hepatotoxicity. Thus, our results add important values in the clinical treatment of type 1 diabetes, leading to a promising future in the use of these polymeric nanoparticles containing insulin. / Mestrado / Ciencias Biomedicas / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Marcelo Knobel / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Fisica Gleb Wataghin / Made available in DSpace on 2018-07-26T19:11:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_FabioCesarSiqueirada_D.pdf: 1575771 bytes, checksum: aedeb8f599f29d9b404e115c6e82444d (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Nesta tese discutimos os processos de formação e controle de nanoestruturas magnéticas nas ligas binárias de composição Cu90Co10 e Cu85Co15 e na liga amorfa de composição Fe86Zr7Cu1 B6 através da técnica de tratamento térmico por aquecimento Joule. Duas formas de ministrar o aquecimento Joule são apresentadas: através da aplicação direta da corrente de tratamento e por variação linear da corrente de tratamento. Também discutimos os efeitos das nanoestruturas formadas nas propriedades magnéticas dos materiais acima mencionados com ênfase nas aplicações técnicas destes materiais. Em particular, estudamos em detalhe o efeito da distribuição de tamanho dos grâos nanocristalinos e das interações entre eles. As conclusões se baseiam em resultados de medidas estruturais (difração de raio-X e microscopia eletrônica de transmissão e magnéticas (curvas de histerese, magnetotransporte, susceptibilidade AC) além de simulações numéricas usando modelos da literatura e desenvolvidos no nosso grupo / Abstract: In this thesis, we discuss the processes of formation and control of magnetic nanostructures in binary alloys of composition Cu90 Co10 and Cu85 Co15, and in the amorphous alloy of composition Fe86 Zr7 Cu1 B6 through thermal annealing using the Joule heating technique. We present two diferent ways to control the Joule heating: by directly applying the annealing current, and through linearly varying the applied current. Also, we discuss the effects of the nanostructures on the magnetic properties of the above mentioned materials always stressing the importance of these properties for technical applications. In particular, we studied, in detail, the effect of the grain size distribution and the interaction between grains. The conclusions are based on structural (X-ray diraction, and transmission electron microscopy), and magnetic (hysteresis curves, magnetotransport, and AC susceptibility) measurements. We also performed numerical simulations using existing models and new models developed in our grou / Doutorado / Física / Doutor em Ciências

Orientador: Fernando Galembeck / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-13T13:50:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Valadares_LeonardoFonseca_D.pdf: 5562061 bytes, checksum: d5e017f5fce1f4bbe1cae2649c437d34 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A adesão de fases nanométricas é um tópico de crescente interesse científico por ter implicações na fabricação e nas propriedades de novos materiais nanoestruturados. A hipótese explorada nesse estudo é: fases imiscíveis mas molháveis pela água podem aderir desde que sejam misturadas e secas a partir de dispersões aquosas e possuam cargas em sua superfície. Esta hipótese é detalhada no seguinte mecanismo: primeiro, durante o processo de secagem, as partículas são aproximadas até o contato por forças de adesão capilar. Em segundo lugar, no sólido seco, as partículas, mesmo que tenham mesma carga, são atraídas pelos cátions provenientes do soro, que formam pontes iônicas entre as superfícies e originam a adesão eletrostática. Para verificar esta hipótese, pares de diversos tipos de nanopartículas foram misturados em meio aquoso e deixados secar, sendo o resultado da secagem analisado por microscopia eletrônica e de sonda. A microscopia eletrônica de transmissão por energia filtrada (EFTEM) foi explorada intensamente, utilizando um novo protocolo experimental que possibilita a análise de partículas e agregados espessos (> 500 nm). Em todos os casos observados, partículas das diferentes fases permanecem em contato após a secagem, revelando que as forças capilares são eficazes para unir nanopartículas molháveis. No caso de misturas de montmorilonita cálcica e látex estirenoacrílico foi observado que os íons Ca estão localizados em domínios onde a argila e o látex estão superpostos, evidenciando a formação de pontes iônicas. A contribuição da energia eletrostática para a adesão de interfaces carregadas foi calculada utilizando um modelo formado por três superfícies paralelas, no qual uma superfície com cargas positivas está disposta entre duas superfícies que possuem cargas negativas. Os cálculos mostraram que em condições análogas às de uma interface formada por látex estireno-acrílico e montmorilonita, a contribuição eletrostática na interface pode alcançar valores de -200 kJ.mol. Esses valores verificam resultados experimentais obtidos em ensaios de tração. O modelo de adesão eletrostática foi empregado no preparo de materiais nanocompósitos de PET e argila, obtendo-se materiais com tensão na ruptura superior à do polímero puro. Uma outra parte da tese descreve a síntese de nanomotores autoimpulsionados. Estes são dubletos formados por uma partícula de sílica aderida a uma partícula de platina. A superfície da platina catalisa a decomposição do peróxido de hidrogênio em solução aquosa criando gradientes de tensão superficial que impelem os dubletos, produzindo movimentos não-Brownianos / Abstract: The adhesion of nanometric phases is a topic of increasing scientific interest due to its importance for the production and properties of new nanostructured materials. This study explores the following hypothesis: immiscible and wettable particles carrying charges with same signal can adhere provided that they are mixed in aqueous dispersion and dried out. This hypothesis is detailed in the following mechanism: first, during the drying process the particles are attracted and placed in close contact due to the capillary adhesion forces. Second, the evenly charged particles in the resulting dry solid are counterbalanced by counter-ions from the serum, forming ionic bridges between the surfaces, that account for electrostatic adhesion. To verify this hypothesis, pairs of many nanoparticles types were mixed in aqueous medium and dried out. The resulting samples were analyzed by electron and probe microscopy. The energy filtered transmission electron microscopy (EFTEM) was extensively explored thanks to a new experimental protocol that allows the analyses of thick particles and aggregates (> 500 nm). In every case, the different phases remain in contact with each other after drying, showing that electrostatic forces are able to unite evenly charged particles. In the case of calcium montmorillonite and styrene-acrylic latex, Ca ions are located in domains in which the clay and the latex are superimposed, evidencing ionic bridge formation. The contribution of the electrostatic energy to the adhesion of charged interfaces was calculated using a model of three parallel surfaces, in which a positively charged surface is in between two negatively charged surfaces. Calculations have shown that in conditions analogous to the styrene-acrylic latex and montmorillonite interface, the electrostatic contribution in the interface can reach values as high as -200 kJ.mol and these results are verified using experimental data from mechanical testing. The electrostatic adhesion model was used to prepare PET and clay nanocomposite materials, obtaining materials with tensile strength higher than the pristine polymer. The final section of the thesis describes self-propelled nanomotors synthesis. These are doublets made of a silica particle adhered to a platinum particle. Platinum surface catalyses the hydrogen peroxide decomposition in aqueous solution creating a surface tension gradient that propels the dimers, producing non-Brownian motion / Doutorado / Físico-Química / Doutor em Ciências

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-05-04T12:57:11Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rubens Antônio Guerra - 2015.pdf: 3165498 bytes, checksum: 27681d41c9e8e06efd209215333de23b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-05-04T12:59:03Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rubens Antônio Guerra - 2015.pdf: 3165498 bytes, checksum: 27681d41c9e8e06efd209215333de23b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-04T12:59:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Rubens Antônio Guerra - 2015.pdf: 3165498 bytes, checksum: 27681d41c9e8e06efd209215333de23b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-02-12 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / (Sem resumo em outra língua) / O objetivo deste trabalho de mestrado é o estudo das interações entre porfirina de base livre (TMPP) e seu complexo metálico (ZnTMPP) com nanopartículas magnéticas biocompatíveis com diferentes camadas de cobertura. O sistema em estudo mostrou potencial para possíveis aplicações na medicina moderna, particularmente na terapia fotodinâmica ou como marcador fluorescente na magnetohipertermia. O presente sistema foi investigado através do uso de técnicas espectroscópicas de onde foram obtidas constantes de ligação, supressão, anisotropia e constante de velocidade bimolecular.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-07-31T13:23:03Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-07-31T13:23:17Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-07-31T13:23:38Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-31T13:23:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) Previous issue date: 2017-03-30 / Leishmaniasis is a disease that affects around 12 million people worldwide, being prevalent in 5 continents and considered endemic in 98 countries. The cutaneous form is the most common and can be caused by approximately 20 species. In Brazil, the antimony drug is used as the first choice in the treatment of leishmaniasis. After intravenous administration, it is rapidly absorbed and almost 90% of the antimony is excreted within the first 48 hours by the kidneys. As a consequence, the administration of high doses is indispensable, which generates many side effects, including cardiorespiratory and renal alterations. In this sense, the general objective of this work was the development of pure maghemite nanoparticles and coated with glucuronic and fructose acid, shortwave, aiming to generate an innovative treatment protocol, via hyperthermia for the treatment of cutaneous leishmaniasis lesions. In addition to the synthesis of nanoparticles, characterization tests were performed, including field emission gun microscopy (FEG); X-ray diffraction; Fourier-transformed infrared spectroscopy (FTIR); Möusbauer spectroscopy and magnetic measurements (ZFC). Short-wave parameter definition tests and in vitro cell viability assays, with and without the use of short waves, were also performed. Results: The results of the FEG revealed a well ordered structure of nanoparticles, with an average diameter of 60nm. X-ray diffraction data, together with Möusbauer, indicated the oxidation state and crystalline phase of the iron oxide compatible with a pure sample of maghemite. The FTIR measurements indicated adsorption of the binders to the nanoparticles, especially when coated with glucuronic acid. The magnetization measurements by ZFC indicated, in all samples, magnetic properties compatible with ferromagnetic regime and saturation magnetization between 56 and 59 emu /g, indicating that these materials when exposed to an alternating electromagnetic field will allow hyperthermia. Finally, the in vitro assays indicated a real leishmanicidal effect when the pure or coated nanoparticles were exposed to the alternating magnetic field of the short waves for 30 minutes, which generated hyperthermia and consequent death of the pathogen. In view of the above, it is possible to conclude that the application of the proposed leishmanicide method indicated a high potential of use for the treatment of cutaneous leishmaniasis lesions / A leishmaniose é uma patologia que afeta cerca de 12 milhões de pessoas em todo mundo, sendo prevalente em 5 continentes e considerada endêmica em 98 países. A forma cutânea é a mais comum e pode ser causada por aproximadamente 20 espécies. No Brasil, o medicamento à base de antimônio é utilizado como primeira escolha na terapêutica da leishmaniose. Após administração endovenosa, ele é rapidamente absorvido e praticamente 90% do antimônio é excretado nas primeiras 48h pelos rins. Em conseqüência, faz-se indispensável a administração de doses elevadas, o que gera muitos efeitos colaterais, incluindo alterações cardiorrespiratórias e renais. Nesse sentido, o objetivo geral do presente trabalho constituiu-se como o desenvolvimento e caracterização de nanopartículas de maghemita puras e revestidas com ácido glicurônico e frutose, atrelado a aplicação de ondas curtas, visando a geração de um protocolo de tratamento inovador, via hipertermia, para o tratamento de lesões de leishmaniose cutânea. Para tanto, foram realizados, além da síntese das nanopartículas, ensaios de caracterização, que incluem, entre outros, microscopia de varredura, via FEG; difração de Raio-X; espectroscopia na região do infravermelho (FTIR); espectroscopia de Möusbauer e medidas magnéticas (ZFC). Ensaios de definição de parâmetro de ondas-curtas e ensaios de viabilidade celular in vitro, com e sem o uso de ondas curtas, também foram realizados. Os resultados do FEG revelaram uma estrutura bem ordenada de nanopartículas, com diâmetro médio na ordem de 60nm. Os dados de difração de raio-X, juntamente com Möusbauer, indicaram o estado de oxidação e fase cristalina do oxido de ferro compatível com uma amostra pura de maghemita. As medidas do FTIR indicaram adsorção dos ligantes às nanopartículas, sobretudo quando revestidas com ácido glicurônico. As medidas de magnetização por ZFC indicaram, em todas as amostras, propriedades magnéticas compatíveis com regime ferromagnético e magnetização de saturação entre 56 e 59 emu/g, indicando que esses materiais quando expostos à um campo eletromagnético alternado permitirão a hipertermia. Por fim, os ensaios in vitro indicaram um real efeito leishmanicida quando as nanopartículas puras ou revestidas foram expostas ao campo magnético alternado do ondas-curtas por 30 minutos, o que gerou hipertermia e consequente morte do patógeno. Diante do exposto, é possível concluir que a aplicação do método leishmanicida proposto indicou um alto potencial de utilização para o tratamento de lesões de leishmaniose cutânea via hipertermia por ondas-curtas com nanopartículas de maghemita.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-22T18:06:42Z No. of bitstreams: 2 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-22T18:07:46Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-08-22T18:08:41Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Reprodução Não Autorizada.pdf: 47716 bytes, checksum: 0353d988c60b584cfc9978721c498a11 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-22T18:08:42Z (GMT). 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A new detection tool for enterotoxigenic E. coli bacteria was developed in the present work. Initially, the best antigenic sequence of the chimeric EtpA protein was determined by in silico prediction assays. After the construction of the recombinant antigen, we evaluated the production of anti-EtpA polyclonal antibodies in mice that were stimulated with this antigen. The mapping of epitopes using synthetic peptides demonstrated that only the 1.1 peptide was reactive to the pool of sera from the immunized animals. Specific recognition of anti-EtpA antibodies were assessed by flow cytometry. The results showed that the developed antibody was able to recognize the native EtpA protein. The evaluation of the specificity of anti-EtpA antibodies against different strains of diarrheogenic E. coli demonstrated the highest percentage and specificity for the ETEC strain (7.2%). The antibodies were then coupled into magnetic beads for the capture and detection of ETEC isolates. The results by cytometry showed high sensitivity, specificity and the efficacy of the method of separation and detection of these pathogens by magnetic beads bound to anti-EtpA antibodies. / As doenças diarreicas totalizam a segunda principal causa de morte em crianças menores de cinco anos de idade, perdendo apenas para a pneumonia. A cada ano a diarreia mata cerca de 760.000 crianças nessa faixa etária. A linhagem de E. coli enterotoxigênica (ETEC) é considerada como um dos agentes causadores mais frequentes da diarreia infantil e da diarreia dos viajantes nos países de baixa e média renda. Dentre os fatores de virulência secretados por ETEC, a exoproteína EtpA foi descrita como uma importante proteína que se interage com as regiões altamente conservadas do flagelo bacteriano. Essas interações são críticas para a adesão, colonização e entrega das toxinas nos enterócitos por ETEC. Foi desenvolvido no presente trabalho uma nova ferramenta de detecção para a bactéria E. coli enterotoxigênica. Inicialmente foi determinado a melhor sequência antigênica da proteína quimérica EtpA por ensaios de predição in silico. Após a construção do antígeno recombinante, avaliamos a produção de anticorpos policlonais anti-EtpA em camundongos que foram estimulados com esse antígeno. O mapeamento de epítopos utilizando peptídeos sintéticos demonstrou que apenas o peptídeo 1.1 foi reativo ao pool de soros dos animais imunizados. O reconhecimento específico dos anticorpos anti-EtpA foram avaliados por citometria de fluxo. Os resultados mostraram que o anticorpo desenvolvido foi capaz de reconhecer a proteína EtpA nativa. A avaliação da especificidade dos anticorpos anti-EtpA contra diferentes cepas de E. coli diarreiogênicas demonstrou a maior porcentagem e especificidade para um isolado de ETEC (7.2%). Em seguida, os anticorpos foram acoplados em beads magnéticas para a captura e detecção de isolados de ETEC. Os resultados por citometria evidenciaram alta sensibilidade, especificidade e a eficácia do método de separação e detecção desses patógenos por beads magnéticas ligadas aos anticorpos anti-EtpA.

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No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese_Fabiane Veloso Soares_2017.pdf: 10987048 bytes, checksum: 4d648cdcf1bd7c3458e8993b00a110b2 (MD5) Previous issue date: 2017-07-11 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Cutaneous leishmaniasis is a neglected disease, endemic in tropical and subtropical areas, and Brazil is one of the countries most affected by the disease. Treatment with pentavalent antimonials has been used for over 70 years as the first choice drug in the country and has been shown to be ineffective against some Leishmania species. In addition to toxic, it presents in injectable form, offers a wide spectrum of adverse effects and still represents a high acquisition cost for the country. Consequently, there is an immediate need for research into new antileishmania compounds in order to combat resistance to the drugs used and to demonstrate efficacy and safety in order to facilitate the treatment of the disease. Nanoparticles (NPs) promise an alternative approach to new drugs in the treatment of infectious diseases because their small size and large surface area provide an opportunity for them to interact with vital components of infectious agents, and are more effective than traditional therapies. In this study, pentavalent antimony NPs (Sb+5 NPs) were produced and characterized in order to evaluate their effect in vitro and in vivo in the treatment of cutaneous leishmaniasis. The concentration of Sb+5 was determined by graphite furnace atomic absorption spectrometry; The NPs were characterized by dynamic light scattering (DLS) and transmission electron microscopy (TEM), submitted to in vitro bioassays against promastigotes and amastigotes of Leishmania amazonensis, by the direct counting method in the Neubauer chamber and To cytotoxic activity in J774 lineage macrophages. In the in vivo assay, the hamsters (Mesocricetus auratus) experimentally inoculated with L. amazonensis were grouped to receive intralesional (snout) treatment, with subsequent euthanasia for removal of tissue fragments for analysis by impression by apposition, culture of lesion biopsy, histopathology And MET. The results obtained in this study showed NPs with mean size of 42 nanometers and zeta potential around -49.8 mV, spherical shape, smooth surface and dispersed in suspensions. Bioassays indicated that these NPs showed cytotoxicity at the highest concentrations tested. The most promising suspension was ETSbL2, which had the highest antileishmania activity, with EC50 of 1.05 mg/mL in 72h. The persistence of infection in experimentally infected macrophages when treated with Sb5 + NPs was not noted. After 26 days of experimental treatment, the animals had statistically significant differences between the control group and the groups treated with NPs, regarding the area and clinical aspect of the lesion, and regarding the parasitic control. The histological findings of the lesions of the groups treated with these Sb+5 NPs showed intense inflammatory infiltrate, compromising both the dermosuperficial layer and the dermoprofound of the tissue. Histological changes were also observed in the liver, spleen and kidney. However, ETSbL1[b] (18.6 mg/Sb5+/kg/day) showed greater efficiency in clinical cure regarding reduction in lesion size and parasitic load among the NPs tested. These results suggest the continuity of this study with new tests in animals less susceptible to infection (mice) aiming at a possible clinical and parasitological cure, as well as the evaluation of toxicological and biochemical parameters after treatment. / A leishmaniose tegumentar é uma doença negligenciada, sendo endêmica em áreas tropicais e subtropicais do mundo. O Brasil é um dos países mais acometidos pela doença. O tratamento com antimoniais pentavalente é utilizado há mais de 70 anos como medicamento de primeira escolha no país e tem se mostrado ineficaz contra algumas espécies de Leishmania. Além de tóxico, este se apresenta na forma injetável, oferece um amplo espectro de efeitos adversos e representa ainda alto custo de aquisição para o país. Consequentemente, existe uma necessidade imediata de pesquisas para novos compostos antileishmania, a fim de combater a resistência aos medicamentos utilizados, e que demonstre eficácia e segurança, visando de facilitar o tratamento da doença. Nanopartículas (NPs) prometem uma abordagem alternativa para novas drogas no tratamento de doenças infecciosas, pois sua pequena dimensão e grande área de superfície proporcionam uma oportunidade para que elas interajam com componentes vitais de agentes infecciosos, apresentando-se mais eficazes que as terapias tradicionais. Neste estudo NPs de antimônio pentavalente (NPs Sb+5) em fase aquosa foram produzidas e caracterizadas, com o objetivo de avaliar seu efeito in vitro e in vivo no tratamento da leishmaniose cutânea. A concentração do Sb+5 foi determinada por espectrometria de absorção atômica em forno de grafite; as NPs foram caracterizadas por espalhamento dinâmico de luz (Dinamic Light Scattering – DLS) e microscopia eletrônica de transmissão (MET) e submetidas a bioensaios in vitro contra formas promastigotas e amastigotas de Leishmania amazonensis, pelo método da contagem direta em câmara de Neubauer e quanto à atividade citotóxica em macrófagos de linhagem J774. No ensaio in vivo, os hamsters (Mesocricetus auratus) experimentalmente inoculados com L. amazonensis foram agrupados para receber tratamento intralesional (focinho), com posterior eutanasia para retirada de fragmentos de tecidos para análise por impressão por aposição, cultivo de biópsia de lesões, histopatologia e MET. Os resultados obtidos neste estudo mostraram NPs com tamanho médio de 42 nanomêtros e potencial zeta em torno de -49,8 mV, formato esférico, superfície lisa e dispersas nas suspensões. Os bioensaios indicaram que essas NPs apresentaram citotoxicidade nas concentrações mais altas testadas. A suspensão mais promissora foi a ETSbL2 que apresentou maior atividade antileishmania, com CE50 de 1.05 mg/mL em 72h. Não foi notada a permanência de infecção nos macrófagos experimentalmente infectados quando tratados com NPs Sb5+. Após 26 dias de tratamento experimental, os animais apresentaram diferenças estatísticas significantes entre o grupo controle e os grupos tratados com NPs, quanto à área e aspecto clínico da lesão, e quanto ao controle parasitário. Os achados histológicos das lesões dos grupos tratados com essas NPs Sb+5mostraram infiltrado inflamatório intenso, comprometendo tanto a camada dermosuperficial como a dermoprofunda do tecido. Alterações histológicas também foram observadas no fígado, baço e rim. Contudo, ETSbL1[b] (18,6mg/Sb5+/kg/dia) apresentou maior eficiência quanto a cura clínica referente a redução no tamanho da lesão e na carga parasitária entre as NPs testadas. Estes resultados sugerem a continuidade deste estudo com novos testes em animais menos suscetíveis a infecção (camundongos) objetivando uma possível cura clínica e parasitológica, bem como a avaliação dos parâmetros toxicológicos e biquimicos após o tratamento.