Objetivo. Este estudo teve como objetivo analisar os resultados de um programa de triagem auditiva neonatal em recém-nascidos pré-termos de um hospital público do município de Itapetininga, Estado de São Paulo. Métodos. A triagem auditiva neonatal foi realizada em 230 neonatos com idade gestacional variando de 28 a 37 semanas, por meio do exame de emissão otoacústica evocada produto de distorção, utilizando-se o equipamento AUDX Biologics. Foram analisados os seguintes aspectos do programa: a) as condições operacionais da realização da triagem auditiva no hospital pesquisado; b) as características da prematuridade presentes na população estudada; c) os resultados do programa de triagem em relação à identificação de casos com alterações auditivas; d) as amplitudes médias de resposta da emissão otoacústica evocada produto de distorção encontradas na população avaliada. Resultados. Foram avaliados 90,55% dos prematuros nascidos num período de 15 meses de coleta. Verificou-se que as condições operacionais para a realização do programa foram adequadas. Não foram encontrados casos de alterações auditivas. As amplitudes médias de respostas da emissão otoacústica evocada produto de distorção (PD-RF) variaram de 11 a 17 dBNPS, nas freqüências de 2 a 5 kHz; tendo sido observadas respostas superiores para as orelhas direitas do sexo feminino. Conclusões. Os prematuros constituíram uma população de baixo risco para deficiência auditiva. As amplitudes de respostas da emissão otoacústica com equipamento portátil mostraram-se semelhantes às obtidas com equipamentos clínicos. O programa de triagem auditiva neonatal pode ser realizado no hospital estudado. Porém, modificações na rotina devem ser realizadas para que possa ser implantado um programa universal. / Objective. The aim of this paper is to analyze the results of a newborn hearing screening programme applied to preterm infants from the city of Itapetininga, state of São Paulo. Methods. Newborn hearing screening was performed to 230 preterm newborns with gestational age from 28 to 37 weeks. The equipment used was AUDX Biologics performing the registry of otoacoustic emissions distortion product. The presence of cocleopalpebral reflex was performed too. It were analyzed: a) operational conditions of newborn hearing screening programme; b) the characteristics of infant?s prematurity; c) incidence of hearing impairment; d) amplitude of otoacoustic emissions distortion product responses (PD-NR). Results. The operational conditions of newborn hearing screening are suitable. No hearing impairment was identified, probably because the prematurity characteristics had load this group to low risk for hearing loss. The mean values from amplitude (PD-NR) extended from 11 to 17 dBSPL from 2 to 5 kHz. They were observed superior values to right ears of the female group. Conclusions. Newborn?s characteristics of prematurity showed low risk for hearing impairment in this study. Portable equipment responses are similar to clinic ones. Newborn hearing screening programme is feasible to be implemented at that kind of hospital. However, some adjusts need to be done in order to extends it to the universal protocol.

Diagnosis of fetal alcohol spectrum disorders (FASD) is challenging and typically requires confirmation of in utero alcohol exposure. Due to the poor reliability of maternal self-reports, biomarkers have emerged to address the problem of obtaining exposure history. A relatively novel method for detecting prenatal alcohol exposure is analysis of meconium for fatty acid ethyl esters (FAEEs), which are non-oxidative ethanol metabolites. Screening newborns using meconium FAEEs may facilitate early diagnosis and intervention in alcohol-affected individuals. The overall objective of this thesis is to further investigate, validate, and assess the clinical utility of meconium FAEE analysis as a screening tool for the identification of neonates at-risk for FASD. This objective was addressed in four separate studies. The first study assessed whether meconium FAEE concentrations can be predictive of ethanol-induced organ injury in fetal sheep, and determined that the levels of these esters could be used to identify fetuses at-risk for organ dysfunction that do not display overt physical signs of ethanol teratogenicity. The second study investigated the effect of delayed meconium collection and contamination with postnatal stool on FAEE analysis, and determined it to be a risk factor for false positive test results. In the third study, maternal willingness to partake in an open meconium screening program was assessed and found to be low enough to diminish the utility of meconium FAEE testing for population-based open screening. Lastly, a systematic review examining the capacity for FAEE synthesis and the enzymology of this non-oxidative metabolic pathway in mammalian organs and tissues revealed that FAEE synthesis is mediated by numerous enzymes and isoenzymes, many of which have other primary physiological functions, and that their contribution to overall FAEE-synthesis may be tissue-specific. Overall, the results of this research provide new information on the benefits, limitations, and utility of meconium FAEE testing as a screening tool for identifying prenatal alcohol exposure − a test that may be of great clinical value in the diagnosis and management of FASD.

Diagnosis of fetal alcohol spectrum disorders (FASD) is challenging and typically requires confirmation of in utero alcohol exposure. Due to the poor reliability of maternal self-reports, biomarkers have emerged to address the problem of obtaining exposure history. A relatively novel method for detecting prenatal alcohol exposure is analysis of meconium for fatty acid ethyl esters (FAEEs), which are non-oxidative ethanol metabolites. Screening newborns using meconium FAEEs may facilitate early diagnosis and intervention in alcohol-affected individuals. The overall objective of this thesis is to further investigate, validate, and assess the clinical utility of meconium FAEE analysis as a screening tool for the identification of neonates at-risk for FASD. This objective was addressed in four separate studies. The first study assessed whether meconium FAEE concentrations can be predictive of ethanol-induced organ injury in fetal sheep, and determined that the levels of these esters could be used to identify fetuses at-risk for organ dysfunction that do not display overt physical signs of ethanol teratogenicity. The second study investigated the effect of delayed meconium collection and contamination with postnatal stool on FAEE analysis, and determined it to be a risk factor for false positive test results. In the third study, maternal willingness to partake in an open meconium screening program was assessed and found to be low enough to diminish the utility of meconium FAEE testing for population-based open screening. Lastly, a systematic review examining the capacity for FAEE synthesis and the enzymology of this non-oxidative metabolic pathway in mammalian organs and tissues revealed that FAEE synthesis is mediated by numerous enzymes and isoenzymes, many of which have other primary physiological functions, and that their contribution to overall FAEE-synthesis may be tissue-specific. Overall, the results of this research provide new information on the benefits, limitations, and utility of meconium FAEE testing as a screening tool for identifying prenatal alcohol exposure − a test that may be of great clinical value in the diagnosis and management of FASD.

Objectives: The introduction of neonatal screening programs (NSP) led to an increased in detection of congenital hypothyroidism (CH). This increase may be due to ethnic composition (predominance of Iberian and Asian people), environmental factors (temperature and iodine intake) and inclusion of cases of transient CH and hyperthyrotropinemia, defined by moderate elevation of TSH with normal T4. The main objectives of this study were to evaluate, in children with altered neonatal screening tests in the NSP in the Northeastern Brazilian Sergipe state, the evolution for permanent or temporary condition and to evaluate the mean incidence of permanent CH, hyperthyrotropinemia and transient TSH elevation. Subjects and methods: Review of medical records of children with altered neonatal and confirmatory TSH from 2004 to 2010 (levels more than 5.2 μU/ml and 4.2 μU/ml, respectively), followed at the Clinic of Pediatric Endocrinology of the University Hospital of the Federal University of Sergipe. From the confirmatory serum TSH values, children were classified as initial CH: serum TSH > 10.0 μU/ml; or suspect CH: serum TSH > 4.2 μU/ml and ≤ 10.0 μU/ml. According to follow-up parameters, the final diagnosis included three categories. Permanent CH: Serum TSH > 10.0 μU/ml, independent of T4 levels or current use of thyroxine; or without l-thyroxine use serum TSH level between 4.2 μU/ml and 10.0 μU/ml, but with low free T4 or total T4. Hyperthyrotropinemia: children without l-thyroxine use with serum TSH level between 4.2 μU/ml and 10.0 μU/ml with normal free T4 and total T4. Transient TSH elevation: Initial CH or suspect CH children which normalized in the follow up without l-thyroxine treatment (serum TSH ≤ 4.2 μU/ml, free T4 ≥ 0.79 ng/dl and total T4 ≥ 7.2 μg/dl). The mean incidence of permanent CH, hyperthyrotropinemia and transient TSH elevation in the period was calculated by dividing the number of children with each category for the total number of children screened. Results: The initial diagnosis included 37 cases of initial CH (18.1%) and 167 suspect CH (81.9%). The final diagnosis included 46 cases of permanent CH (22.5%); 56 hyperthyrotropinemia (27.5%) and 102 transient TSH elevation (50.0%). Out of the 37 cases of initial CH, it was found 23 (62.2%) of permanent CH; 9 (24.3%) of hyperthyrotropinemia; and 5 (13.5%) of transient TSH elevation. Out of the 167 suspects, it was found 23 (13.8%) of permanent CH, 47 (28.1%) of hyperthyrotropinemia and 97 (58.1%) of transient TSH elevation. We found a mean incidence of 1:4166 of permanent CH, 1:3448 of hyperthyrotropinemia and 1:1887 of transient TSH elevation. 86.5% of children with an initial diagnosis of CH and 41.9% of suspicions have permanent condition (CH or hyperthyrotropinemia). Conclusions: The follow-up of children with initial diagnosis and suspicion is necessary to characterize the permanence or not of the disorder, since the prediction of the evolution of children with initial CH or suspect is difficult. / Objetivos: A introdução dos programas de triagem neonatal (PTN) propiciou o aumento na detecção do hipotireoidismo congênito (HC). Este aumento pode estar ligado à composição étnica (predomínio em ibéricos e asiáticos), fatores ambientais (temperatura e ingestão de iodo) e inclusão de casos de HC transitório e da hipertirotropinemia, definida pela elevação moderada do TSH com T4 normal. Os objetivos principais deste estudo foram avaliar em crianças com teste de triagem neonatal alterado no PTN em Sergipe, no nordeste do Brasil, a evolução para condição permanente ou transitória e avaliar a incidência média do HC permanente, da hipertirotropinemia e da elevação transitória do TSH. Sujeitos e métodos: Foi realizada revisão dos prontuários das crianças convocadas no período de 2004 a 2010, com TSH neonatal e confirmatório alterados (maior que 5,2 μU/ml e 4,2 μU/ml, respectivamente), acompanhados no Ambulatório de Endocrinologia Pediátrica do Hospital Universitário da Universidade Federal de Sergipe. A partir dos valores do TSH sérico confirmatório, as crianças foram classificadas como HC inicial: TSH sérico > 10,0 μU/ml; ou suspeito HC: TSH sérico > 4,2 μU/ml e ≤ 10,0 μU/ml. De acordo com parâmetros do seguimento, o diagnóstico final incluiu três categorias. HC permanente: TSH sérico > 10,0 μU/ml, independente de valores de T4 ou do uso de l-tiroxina; ou sem l-tiroxina com TSH sérico entre 4,2 μU/ml e 10,0 μU/ml, mas com T4 livre ou T4 total baixos; Hipertirotropinemia: Criança sem l-tiroxina, com TSH sérico entre 4,2 μU/ml e 10,0 μU/ml, com T4 livre e T4 total normais; Elevação transitória do TSH: Criança HC inicial ou suspeito HC que normalizou no seguimento, sem a l-tiroxina (TSH sérico ≤ 4,2 μU/ml, T4 livre ≥ 0,79 ng/dl e T4 total ≥ 7,2 μg/dl). A incidência média do HC permanente, da hipertirotropinemia e da elevação transitória do TSH no período foi calculada dividindo-se o número de crianças com cada uma das três condições pelo número total de crianças triadas. Resultados: No diagnóstico inicial tivemos 37 casos de HC inicial (18,1%) e 167 suspeitos HC (81,9%). No diagnóstico final tivemos 46 casos de HC permanente (22,5%); 56 de hipertirotropinemia (27,5%) e 102 de elevação transitória do TSH (50,0%). Dos 37 casos HC inicial encontramos 23 (62,2%) de HC permanente; 9 (24,3%) de hipertirotropinemia; e 5 (13,5%) de elevação transitória do TSH. Dos 167 suspeitos encontramos 23 (13,8%) de HC permanente, 47 (28,1%) de hipertirotropinemia e 97 (58,1%) de elevação transitória do TSH. Encontramos uma incidência média de 1:4166 de HC permanente, 1:3448 de hipertirotropinemia e 1:1887 de elevação transitória do TSH. 86,5 % das crianças com diagnóstico inicial de HC e 41,9 % das suspeitas apresentam condição permanente (HC ou hipertirotropinemia). Conclusões: O seguimento das crianças seja com o diagnóstico inicial de HC ou de suspeição é necessário para caracterizar a permanência ou transitoriedade do distúrbio, haja vista que a predição da evolução destas crianças é difícil.

Objectives: The introduction of neonatal screening programs (NSP) led to an increased in detection of congenital hypothyroidism (CH). This increase may be due to ethnic composition (predominance of Iberian and Asian people), environmental factors (temperature and iodine intake) and inclusion of cases of transient CH and hyperthyrotropinemia, defined by moderate elevation of TSH with normal T4. The main objectives of this study were to evaluate, in children with altered neonatal screening tests in the NSP in the Northeastern Brazilian Sergipe state, the evolution for permanent or temporary condition and to evaluate the mean incidence of permanent CH, hyperthyrotropinemia and transient TSH elevation. Subjects and methods: Review of medical records of children with altered neonatal and confirmatory TSH from 2004 to 2010 (levels more than 5.2 μU/ml and 4.2 μU/ml, respectively), followed at the Clinic of Pediatric Endocrinology of the University Hospital of the Federal University of Sergipe. From the confirmatory serum TSH values, children were classified as initial CH: serum TSH > 10.0 μU/ml; or suspect CH: serum TSH > 4.2 μU/ml and ≤ 10.0 μU/ml. According to follow-up parameters, the final diagnosis included three categories. Permanent CH: Serum TSH > 10.0 μU/ml, independent of T4 levels or current use of thyroxine; or without l-thyroxine use serum TSH level between 4.2 μU/ml and 10.0 μU/ml, but with low free T4 or total T4. Hyperthyrotropinemia: children without l-thyroxine use with serum TSH level between 4.2 μU/ml and 10.0 μU/ml with normal free T4 and total T4. Transient TSH elevation: Initial CH or suspect CH children which normalized in the follow up without l-thyroxine treatment (serum TSH ≤ 4.2 μU/ml, free T4 ≥ 0.79 ng/dl and total T4 ≥ 7.2 μg/dl). The mean incidence of permanent CH, hyperthyrotropinemia and transient TSH elevation in the period was calculated by dividing the number of children with each category for the total number of children screened. Results: The initial diagnosis included 37 cases of initial CH (18.1%) and 167 suspect CH (81.9%). The final diagnosis included 46 cases of permanent CH (22.5%); 56 hyperthyrotropinemia (27.5%) and 102 transient TSH elevation (50.0%). Out of the 37 cases of initial CH, it was found 23 (62.2%) of permanent CH; 9 (24.3%) of hyperthyrotropinemia; and 5 (13.5%) of transient TSH elevation. Out of the 167 suspects, it was found 23 (13.8%) of permanent CH, 47 (28.1%) of hyperthyrotropinemia and 97 (58.1%) of transient TSH elevation. We found a mean incidence of 1:4166 of permanent CH, 1:3448 of hyperthyrotropinemia and 1:1887 of transient TSH elevation. 86.5% of children with an initial diagnosis of CH and 41.9% of suspicions have permanent condition (CH or hyperthyrotropinemia). Conclusions: The follow-up of children with initial diagnosis and suspicion is necessary to characterize the permanence or not of the disorder, since the prediction of the evolution of children with initial CH or suspect is difficult. / Objetivos: A introdução dos programas de triagem neonatal (PTN) propiciou o aumento na detecção do hipotireoidismo congênito (HC). Este aumento pode estar ligado à composição étnica (predomínio em ibéricos e asiáticos), fatores ambientais (temperatura e ingestão de iodo) e inclusão de casos de HC transitório e da hipertirotropinemia, definida pela elevação moderada do TSH com T4 normal. Os objetivos principais deste estudo foram avaliar em crianças com teste de triagem neonatal alterado no PTN em Sergipe, no nordeste do Brasil, a evolução para condição permanente ou transitória e avaliar a incidência média do HC permanente, da hipertirotropinemia e da elevação transitória do TSH. Sujeitos e métodos: Foi realizada revisão dos prontuários das crianças convocadas no período de 2004 a 2010, com TSH neonatal e confirmatório alterados (maior que 5,2 μU/ml e 4,2 μU/ml, respectivamente), acompanhados no Ambulatório de Endocrinologia Pediátrica do Hospital Universitário da Universidade Federal de Sergipe. A partir dos valores do TSH sérico confirmatório, as crianças foram classificadas como HC inicial: TSH sérico > 10,0 μU/ml; ou suspeito HC: TSH sérico > 4,2 μU/ml e ≤ 10,0 μU/ml. De acordo com parâmetros do seguimento, o diagnóstico final incluiu três categorias. HC permanente: TSH sérico > 10,0 μU/ml, independente de valores de T4 ou do uso de l-tiroxina; ou sem l-tiroxina com TSH sérico entre 4,2 μU/ml e 10,0 μU/ml, mas com T4 livre ou T4 total baixos; Hipertirotropinemia: Criança sem l-tiroxina, com TSH sérico entre 4,2 μU/ml e 10,0 μU/ml, com T4 livre e T4 total normais; Elevação transitória do TSH: Criança HC inicial ou suspeito HC que normalizou no seguimento, sem a l-tiroxina (TSH sérico ≤ 4,2 μU/ml, T4 livre ≥ 0,79 ng/dl e T4 total ≥ 7,2 μg/dl). A incidência média do HC permanente, da hipertirotropinemia e da elevação transitória do TSH no período foi calculada dividindo-se o número de crianças com cada uma das três condições pelo número total de crianças triadas. Resultados: No diagnóstico inicial tivemos 37 casos de HC inicial (18,1%) e 167 suspeitos HC (81,9%). No diagnóstico final tivemos 46 casos de HC permanente (22,5%); 56 de hipertirotropinemia (27,5%) e 102 de elevação transitória do TSH (50,0%). Dos 37 casos HC inicial encontramos 23 (62,2%) de HC permanente; 9 (24,3%) de hipertirotropinemia; e 5 (13,5%) de elevação transitória do TSH. Dos 167 suspeitos encontramos 23 (13,8%) de HC permanente, 47 (28,1%) de hipertirotropinemia e 97 (58,1%) de elevação transitória do TSH. Encontramos uma incidência média de 1:4166 de HC permanente, 1:3448 de hipertirotropinemia e 1:1887 de elevação transitória do TSH. 86,5 % das crianças com diagnóstico inicial de HC e 41,9 % das suspeitas apresentam condição permanente (HC ou hipertirotropinemia). Conclusões: O seguimento das crianças seja com o diagnóstico inicial de HC ou de suspeição é necessário para caracterizar a permanência ou transitoriedade do distúrbio, haja vista que a predição da evolução destas crianças é difícil.

Deficiency of glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) is a hereditary recessive disease associated with X-chromosome, in which carriers of this deficiency can develop hemolytic anemia during oxidative stress induced by food, medicines and infections. The prevalence of this deficiency is not fully established in the country. In the state of Sergipe, this study aimed to establish this prevalence, through analyzes of blood samples collected on filter paper, of newborns (NB) attended by the State Neonatal Screening Program. The results obtained are presented in the form of two scientific articles (chapter 1 and chapter 2). The first article aimed to identify interferences in the quantitative technique for the diagnosis of G6PD deficiency in samples collected on filter paper of newborns collected from May to October of 2016 at health posts in the state of Sergipe. Divided into five groups, the samples were analyzed under preanalytical and analytical conditions, evaluating the frequency of positive results before and after standardization of the technique. The main interferences observed in the preanalytical phase were the quality of the sample, the time between collection and examination and the temperature during transportation. In the analytical phase the interference in the elution of the samples was observed. The second scientific article refers to the detection of the prevalence of G6PD deficiency in samples of newborns from the state of Sergipe (Chapter 2). Blood samples of newborns collected on filter paper from health posts throughout the state were analyzed between August 2016 and January 2017. In part of the positive samples, the G6PD dosage repetition and complementary tests were performed to evaluate anemia: blood count, reticulocyte count and bilirubin dosage. Confirmed cases were called for clinical evaluation and genetic counseling. Of the 9,040 initial samples, 3,274 were excluded due to poor quality, leaving 5,766 valid samples remaining. The prevalence of G6PD deficiency found in the state of Sergipe was 9.35%, 3.33% female and 4.87% male, with the highest prevalence in the Sergipe State (6.40%). Only 39.99% of the samples followed the Ministry of Health's recommendation for collection between 3 and 7 days after birth. The use of antibiotics that can trigger hemolytic reactions were reported in only 0.35% of the female NBs and 0.64% of the male sex. Of the 473 positive results, 100 newborns were summoned, of whom 50 attended with the parents. Of these, 20 NB presented confirmation of the positive tests, as well as 4 mothers and one father. Four NB presented reduced results for red blood cells, hemoglobin and hematocrit, and two patients presented bilirubin dosage above the reference value. Patients who had the deficiency of the confirmed enzyme participated in a clinical evaluation and genetic counseling, to elucidate the disease, prophylaxis and care with food and use of medicines that can trigger a hemolytic crisis. With this study, it can be concluded that the prevalence of G6PD deficiency in the state of Sergipe is 9.35%, considered high, but consistent with the world literature, mainly due to the influence of African peoples. Likewise, the highest prevalence was in the male sex, and the boys were homozygous that manifested the deficiency associated with the mutation in the G6PD gene. / A deficiência de glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PD) é uma doença hereditária recessiva associada ao cromossomo X, na qual portadores dessa deficiência podem desenvolver anemia hemolítica durante estresse oxidativo induzido por alimentos, medicamentos e infecções. A prevalência dessa deficiência não está totalmente estabelecida no país. No estado de Sergipe este estudo teve como objetivo estabelecer essa prevalência, por meio de análises de amostras de sangue colhidas em papel de filtro, de recém-nascidos (RN) atendidos pelo Programa de Triagem Neonatal do estado. Os resultados obtidos estão apresentados na forma de dois artigos científicos (capítulo 1 e capítulo 2). O primeiro artigo teve como objetivo identificar interferências na técnica quantitativa para o diagnóstico da deficiência da G6PD em amostras colhidas em papel de filtro de recém-nascidos, coletadas de maio a outubro de 2016 em postos de saúde do estado de Sergipe. Divididas em cinco grupos, as amostras foram analisadas em condições pré-analíticas e analíticas, avaliando-se a frequência de resultados positivos antes e depois da padronização da técnica. Os principais interferentes observados na fase pré-analítica foram a qualidade da amostra, o tempo entre coleta e exame e a temperatura durante o transporte. Na fase analítica foi observada a interferência na eluição das amostras. O segundo artigo científico refere-se à detecção da prevalência da deficiência da G6PD em amostras de recém-nascidos do estado de Sergipe (Capítulo 2). Foram analisadas amostras de sangue de recém-nascidos colhidos em papel filtro, provenientes dos postos de saúde de todo o estado, entre agosto de 2016 a janeiro de 2017. Em parte das amostras positivas, foram realizadas a repetição da dosagem de G6PD e exames complementares para avaliação da anemia: hemograma, contagem de reticulócitos e dosagem de bilirrubinas. Os casos confirmados foram convocados para avaliação clínica e aconselhamento genético. Das 9.040 amostras iniciais, 3.274 foram excluídas por má qualidade, restando 5.766 amostras válidas. A prevalência da deficiência da G6PD encontrada no estado de Sergipe foi de 9,35%, 3,33% do sexo feminino e 4,87% do sexo masculino, sendo a maior prevalência no Leste Sergipano (6,40%). Apenas 39,99% das amostras seguiram a recomendação do Ministério da Saúde para realização da coleta entre 3 a 7 dias após o nascimento. O uso de antibióticos que podem desencadear reações hemolíticas foram relatados em apenas 0,35% dos RN do sexo feminino e 0,64% do sexo masculino. Dos 473 resultados positivos, foram convocados 100 recém-nascidos, dos quais compareceram 50 juntamente com os pais. Destes, 20 RN apresentaram confirmação dos testes positivos, bem como 4 mães e um pai. Quatro RN apresentaram resultados reduzidos para hemácias, hemoglobina e hematócrito, e dois pacientes apresentaram dosagem de bilirrubinas acima do valor de referência. Os pacientes que tiveram a deficiência da enzima confirmada participaram de uma avaliação clínica e aconselhamento genético, para elucidação da doença, profilaxia e cuidados com alimentação e uso de medicamentos que possam desencadear uma crise hemolítica. Com este estudo pode-se concluir que a prevalência da deficiência da G6PD no estado de Sergipe é de 9,35%, considerada alta, porém condizente com a literatura mundial, principalmente pela influência dos povos africanos. Da mesma forma, a maior prevalência foi no sexo masculino, sendo os meninos homozigotos que manifestam a deficiência associada à mutação no gene da G6PD. / São Cristóvão, SE

Orientador: Carmen Silvia Bertuzzo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T19:43:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pollice_ErikaLourenco_D.pdf: 2177498 bytes, checksum: 0cac25634d3fc74eb0d114647ac766a7 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: A fenilcetonúria (PKU) é uma doença autossômica recessiva que na sua forma clássica é causada pela deficiência da enzima hidroxilase da fenilalanina (PAH), cuja função é catalisar a reação de hidroxilação da fenilalanina em tirosina. Uma alteração no gene da PAH leva a deficiência de hidroxilase da fenilalanina. O diagnóstico precoce é de suma importância, uma vez, que se não tratada, pode ocasionar retardo mental. A dieta pobre em fenilalanina previne esse retardo, tornando o diagnóstico precoce fundamental. Mais de 500 mutações que causam algum grau de hiperfenilalaninemia foram descritas no gene PAH. O conjunto e freqüências das mutações variam conforme a população. A população brasileira apresenta mistura étnica complexa, a freqüência das mutações varia muito conforme a região estudada. No Brasil, foram estudadas amostras de São Paulo (SP) e Rio Grande do Sul (RS) e Minas Gerais (MG). A grande variação observada nos níveis de fenilalanina nos primeiros meses de vida e sua correlação diminuída com o diagnóstico aponta para o seu valor prognóstico baixo, reforçando a necessidade da triagem de mutações. Este estudo teve como objetivo investigar as mutações mais freqüentes e estabelecer o perfil gênico de pacientes com PKU diagnosticados em serviços de triagem neonatal e que estejam em acompanhamento no Serviço Regional de Triagem Neonatal da UNICAMP. Foram analisadas as mutações V388M, IVS10nt11, IVS12nt1, R408W, através da técnica de PCR e digestão com enzima de restrição específica. Nos casos onde não foi detectada nenhuma dessas mutações, foi realizada a técnica de DHPLC com posterior sequenciamento dos pacientes com padrão de eluição alterado. As mutações R408W, IVS10-11G?A, IVS12+1G?A e V388M, não foram encontradas com grande freqüência em nossa amostra de fenilcetonúricos da região de Campinas. As demais mutações identificadas foram bem variadas. Os pacientes analisados neste trabalho possuem um perfil gênico distinto de indivíduos pertencentes a outras regiões do Brasil e relatados na literatura, refletindo na grande miscigenação existente na população brasileira / Abstract: Phenylketonuria (PKU) is an autosomal recessive genetic disorder caused by deficiency of the hepatic phenylalanine-4-hydroxylase (PAH), which catalyzes hydroxylation of phenylalanine to tyrosine. Deficiency of PAH is caused by mutations in the PAH gene, resulting in high serum levels of phenylalanine and mental retardation. Restriction of phenylalanine intake prevents neurological impairments of PKU. Mutation screening of PAH gene is a very useful strategy for accurate diagnosis, newborn phenotype prediction and to implement a dietary without phenylalanine. To date, almost 500 mutations have been identified in the PAH gene. The PAH mutation frequency could change with the studied population. The Brazilian population is compound by a great ethnic variation and the PAH mutation frequency could be very different depending on witch Brazilian region was studied. Previous studies in Brazilian patients were performed at São Paulo (SP), Rio Grande do Sul (RS) and Minas Gerais (MG) and the mutation frequency can be changed according to the population studied. The aim of this work was to analyze the most frequent PAH mutations previously described in other populations and determine the PKU molecular characterization in patients identified in the neonatal service of the Regional Newborn Screening Service/Campinas. The V388M, IVS10nt11, IVS12nt1 and R408W mutations were analyzed by PCR and RFLP. In addition, DHPLC and automatic sequencing were performed for patients whose initial screening was negative. Any of the R408W, IVS10-11G?A, IVS12+1G?A and V388M mutations was found in great frequency in our sample from Campinas region. The other mutations that could be detected in this sample were diversified. The genetic characteristics in these patients were different than others Brazilian populations / Doutorado / Ciencias Biomedicas / Doutor em Ciências Médicas

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Por ser de interesse à saÃde pÃblica, o teste do reflexo vermelho, tambÃm conhecido como teste do olhinho, vem se firmando como estratÃgia de prevenÃÃo da cegueira infantil com participaÃÃo multiprofissional, particularmente do enfermeiro. Tecnologias aplicadas a esse contexto devem ser estimuladas com vistas a ser utilizadas como ferramentas integrantes de atuaÃÃo profissional com a finalidade de facilitar e melhorar a qualidade da assistÃncia. Objetivou-se avaliar um gradiente de cores direcionado para a avaliaÃÃo do teste do reflexo vermelho em recÃm-nascidos quanto à validade de conteÃdo e de aparÃncia, verificar a confiabilidade interobservadores na aplicaÃÃo da tecnologia desenvolvida e investigar a opiniÃo dos enfermeiros quanto à aplicabilidade do instrumento apÃs a experiÃncia da sua utilizaÃÃo. Trata-se de uma pesquisa metodolÃgica, quantitativa, cuja coleta de dados ocorreu de maio a agosto de 2010 em duas etapas metodolÃgicas. Na primeira, a tecnologia proposta foi analisada por trÃs juÃzes especialistas, os quais, por meio de um questionÃrio de avaliaÃÃo na forma de escala Likert, opinaram sobre aspectos relacionados aos objetivos, estrutura e apresentaÃÃo, aparÃncia e relevÃncia. Para emitir suas opiniÃes, os especialistas responderam aos itens avaliativos entre cinco nÃveis de respostas: Totalmente adequado; Adequado com pequenas ressalvas; Parcialmente adequado, Inadequado; NÃo se aplica. ApÃs a anÃlise dos especialistas e inclusÃo das sugestÃes à tecnologia avaliada, na segunda etapa buscou-se averiguar a confiabilidade entre os examinadores na aplicaÃÃo do gradiente de cores para avaliaÃÃo do teste do reflexo por enfermeiros. Para isso, uma amostra constituÃda por sessenta recÃm-nascidos internados na unidade neonatal de baixo risco de uma maternidade pÃblica de referÃncia, em Fortaleza, foi avaliada por dois examinadores (a pesquisadora e um enfermeiro) de modo simultÃneo e independente. Os dados receberam tratamento descritivo e com o auxÃlio do PASW versÃo 18.0 calculou-se a confiabilidade do gradiente de cores por meio do coeficiente de correlaÃÃo intraclasse. A tecnologia recebeu ajustes atà sua aprovaÃÃo, em duas etapas de avaliaÃÃo. Sobre as avaliaÃÃes de conteÃdo e aparÃncia, foi consenso entre os especialistas o julgamento quanto ao excesso de quantidade de gradientes, a sugestÃo de retirar as nuances de cores muito prÃximas, como tambÃm de rever aquelas com o centro esbranquiÃado, pois poderiam ser confundidas com reflexo alterado. Sugeriu-se o acrÃscimo de uma nova nuance de cor e a complementaÃÃo no tÃtulo da tecnologia da expressÃo gradiente de cores do teste do olhinho. A maioria das respostas dos juÃzes ficou entre totalmente adequado e adequado com pequenas ressalvas. Os juÃzes especialistas consideraram a tecnologia desenvolvida um recurso didÃtico complementar à prÃtica do teste do reflexo vermelho e Ãtil no treinamento de profissionais para a realizaÃÃo do teste. Observaram-se bons Ãndices de confiabilidade (0,928 e 0,894) estimados pelo coeficiente de correlaÃÃo intraclasse. Diante das consideraÃÃes, o gradiente de cores mostrou-se uma tecnologia vÃlida para ser adotada como um recurso facilitador para a aprendizagem sobre o teste e aplicÃvel à prÃtica do cuidado em saÃde ocular como ferramenta complementar. Espera-se que a aplicaÃÃo do conhecimento adquirido nesse estudo proporcione impacto positivo na divulgaÃÃo e realizaÃÃo do teste do reflexo vermelho. / Due to its relevance for public health, the red reflex test, also known as little eye test, has become an established strategy to prevent infant blindness within a multi professional team work, involving the nurse in particular. Applied technologies in this context constitute a useful tool for the professional and their use has to be stimulated aiming the assistance improvement. The main goal of this work is to assess a color gradient projected to measure the red reflex test in newborns regarding contents and appearance validation, accordance among different observers and nurseâs opinion on the tool applicability after its use. This is a methodological research, quantitative, whose data acquisition happened between May and August 2010 in two methodological steps. Firstly, the proposed instrument was analyzed by three judges. These specialists gave their opinions by means of an evaluation questionnaire in the Likert scale format. The survey covered subjects like goals, structure and presentation, appearance and relevance. In order to quantify their opinions, the answers were restricted to five levels: Absolutely adequate; Adequate with little observations; Partially adequate; Inadequate; It does not apply. In the second step, after collecting the answers and taking into account suggestions from the specialists, we checked the test accordance among different nurses in the color gradient application top the red reflex test. This was made by using a sixty newborns sample. These neonates were in the low risk neonatal sector of a reference public maternity hospital in Fortaleza. Each newborn was examined by two examiners (the researcher and a nurse) simultaneously and independently. The data were treated within PASW 18.0 software. The gradient reliability was calculated by means of the intraclass correlation coefficient. Adjustments were applied to the instrument until its approval. Regarding the contents and appearance evaluation, the judges agreed about the excessive number of gradient colors and they suggested the elimination of several similar patterns. They also recommended to reconsider those patterns with a white center since they could be confused with an altered reflex. Additional suggestions from the specialists pointed to the inclusion of a new color in the instrument as well as a new title to the gradient: color gradient for the little eye test. Most of the answers from the judges were between Absolutely adequate and Adequate with little observations. The specialists considered the developed technology as a complimentary to the practice of the red reflex test, as well as a useful tool for training of professionals to do this test. Good reliability indices were observed (0,928 e 0,894). Such numbers were estimated by the intraclass correlation coefficient. After these considerations, the color gradient was shown to be a valid technology suitable to be considered as a pedagogical tool and as a useful additional instrument on the visual health care. It is expected that the knowledge constructed in this work results in a positive impact on the red reflex test propagation and application.

O objetivo do presente estudo foi estimar a especificidade e taxa de falso-positivo de protocolos de triagem auditiva neonatal (TAN), realizados com os procedimentos emissões otoacústicas evocadas transientes-módulo triagem (EOAet) e potenciais evocados auditivos de tronco encefálico automático (PEATEa), de forma isolada ou combinada, aplicados em uma ou duas etapas. Participaram deste estudo 200 recém-nascidos, selecionados aleatoriamente, submetidos à triagem auditiva, no período entre Março/2006 e Julho/2006. A estimativa da taxa de falso-positivo e da especificidade foi realizada com a TAN em uma etapa e com três protocolos: protocolo 1, TAN realizada em duas etapas com EOAet; protocolo 2, TAN realizada em duas etapas com PEATEa; e protocolo 3, TAN realizada em uma etapa com dois procedimentos - teste com EOAet seguido de reteste com PEATEa para os recém-nascidos que não passaram no primeiro procedimento. Os resultados mostraram alta taxa de falso-positivo na triagem auditiva realizada em uma etapa para ambos os procedimentos. Apesar de não ter havido diferença estatisticamente significante quando comparadas as taxas de encaminhamento para diagnóstico audiológico obtidos nos protocolos com EOAet e com PEATEa, o protocolo com EOAet encaminhou 4 vezes mais recém-nascidos. O protocolo com EOAet e PEATEa apresentou a maior taxa de encaminhamento (6%), com diferença estatisticamente significante ao ser comparado com os protocolos 1 (EOAet) e 2 (PEATEa). Concluiu-se que a triagem auditiva neonatal deve ser realizada em duas etapas (teste-reteste), a fim de reduzir a taxa de falso-positivo e de encaminhamento, aumentando a especificidade; a taxa de falso-positivo e conseqüentemente a especificidade foram melhores no protocolo com PEATEa, seguido dos protocolos com EOAet e com EOAet e PEATEa. / O objetivo do presente estudo foi estimar a especificidade e taxa de falso-positivo de protocolos de triagem auditiva neonatal (TAN), realizados com os procedimentos emissões otoacústicas evocadas transientes-módulo triagem (EOAet) e potenciais evocados auditivos de tronco encefálico automático (PEATEa), de forma isolada ou combinada, aplicados em uma ou duas etapas. Participaram deste estudo 200 recém-nascidos, selecionados aleatoriamente, submetidos à triagem auditiva, no período entre Março/2006 e Julho/2006. A estimativa da taxa de falso-positivo e da especificidade foi realizada com a TAN em uma etapa e com três protocolos: protocolo 1, TAN realizada em duas etapas com EOAet; protocolo 2, TAN realizada em duas etapas com PEATEa; e protocolo 3, TAN realizada em uma etapa com dois procedimentos - teste com EOAet seguido de reteste com PEATEa para os recém-nascidos que não passaram no primeiro procedimento. Os resultados mostraram alta taxa de falso-positivo na triagem auditiva realizada em uma etapa para ambos os procedimentos. Apesar de não ter havido diferença estatisticamente significante quando comparadas as taxas de encaminhamento para diagnóstico audiológico obtidos nos protocolos com EOAet e com PEATEa, o protocolo com EOAet encaminhou 4 vezes mais recém-nascidos. O protocolo com EOAet e PEATEa apresentou a maior taxa de encaminhamento (6%), com diferença estatisticamente significante ao ser comparado com os protocolos 1 (EOAet) e 2 (PEATEa). Concluiu-se que a triagem auditiva neonatal deve ser realizada em duas etapas (teste-reteste), a fim de reduzir a taxa de falso-positivo e de encaminhamento, aumentando a especificidade; a taxa de falso-positivo e conseqüentemente a especificidade foram melhores no protocolo com PEATEa, seguido dos protocolos com EOAet e com EOAet e PEATEa.

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Minas Gerais por meio da Fundação Centro de Hematologia e Hemoterapia (Hemominas) é pioneira na implantação de uma política de atenção aos portadores de DF, sendo que, desde 1998 a doença foi incluída na triagem neonatal (TN), enquanto que no Programa Nacional tal vinculação só ocorreu a partir de 2001. No Brasil, dos seus 27 estados apenas 18 realizam a TN para a DF. A implantação de uma triagem precoce para hemoglobinopatias não garante por si só o sucesso do Programa, pois é necessário acompanhar constantemente a rede de atenção a DF, visando avaliar e promover melhorias desde a atenção básica à saúde, com o “teste do pezinho”, até o tratamento em serviços de maior complexidade. Trata-se de um estudo quantitativo que se propôs a avaliar o espaço cronológico entre as etapas da TN, assim como a frequência e caracterização socioeconômica dos casos de portadores de DF matriculados no Hemocentro Regional de Juiz de Fora (HRJF) - Hemominas, durante o período de 1998 a 2007. No período proposto, foram triados em Minas Gerais 2.549.097 recém-nascidos, sendo que, 210.696 nascidos nas 34 cidades que referenciam o HRJF como centro de tratamento da DF. As cidades que melhor representam a incidência estadual de DF são Juiz de Fora e Ubá. Das crianças estudadas com DF não houve diferença significativa entre os gêneros. Em relação ao perfil hematológico dos acompanhados pelo HRJF (n=109) a HbSS esteve presente em 42,2% pacientes, a HbFC em 27,5%, a HbFS em 23,8% e a HbS/B-talassemia em 6,4%, sendo o percentual de meninos HbSS de 48,2% para 35,8% meninas HbSS. A maioria das famílias relatou viver com renda familiar menor que um salário mínimo por mês (37%). Em relação a fonte de renda foi identificado que o pai trabalha com carteira assinada em 44,9% e as mães em apenas 18,3%. Em 7,33% das famílias o pai está desempregado e as mães em 32,1%, fato que reforça a vulnerabilidade social das crianças portadoras de DF. Outro aspecto importante é a presença da DF em mais de um filho na mesma família, constatando a presença de 56% dos irmãos com a doença, sendo que deste, em 41% o diagnóstico é de anemia falciforme. Quanto ao traço falciforme, 36,7% possuem ao menos mais um filho com traço falciforme e 6,4% desconhece a presença do traço entre os irmãos da criança entrevistada, o que demonstra a necessidade de orientação aos pais quanto ao planejamento familiar. O espaço cronológico entre a coleta de sangue e o cadastro no HRJF foi de 17 dias, período este considerado ideal. Como produto geral da pesquisa, obteve-se um maior conhecimento dos programas integrais de atenção à DF implementados pelo HRJF propiciando uma compreensão mais ampla da situação da DF no nosso Estado na tentativa de favorecer num futuro bem próximo o planejamento de políticas públicas e outras ações que possam contribuir para reduzir a morbimortalidade e melhorar a qualidade de vida do doente falciforme. Além disso, como o Programa Nacional de TN está em alguns estados brasileiros em fase inicial de implantação, em muito contribuiria para esta iniciativa uma ampla divulgação dos estudos, para que medidas de prevenção e controle sejam melhor implementadas. / Hemoglobinopathies are the most frequent genetic disease in humans, and sickle cell disease (SCD), especially for sickle cell anemia, the most clinical impact, social and epidemiological. Due to the racial characteristics of Brazil these genetic disorders now represent a serious public health problem. Minas Gerais through the Foundation Center of Hematology (Hemominas) is pioneer in implementing a policy of care for patients with SCD, and since 1998 the disease was included in newborn screening (NS), while in this National Program Binding occurred only after 2001. In Brazil, the 27 states only 18 do the NS to perform the SCD. The implementation of an early screening for hemoglobinopathies is not in itself guarantee the success of the program, it is necessary to constantly monitor the care net SCD, to evaluate and promote improvement since the primary health care, with the "Guthrie test" to the treatment services of greater complexity. This is a quantitative study aimed to evaluate the space between the chronological stages of NS, as well as the frequency and socioeconomic characteristics of the cases of patients with SCD enrolled in Regional Blood Center of Juiz de Fora (RBCJF) - Hemominas during the period 1998 to 2007. The proposed period, were screened in Minas Gerais 2,549,097 newborns, and that 210,696 newborns in 34 cities that reference the RBCJF as a center for treatment of SCD. The cities that best represent the incidence of SCD are state Juiz de Fora and Uba. From these children with SCD did not differ between genders. Regarding the hematological profile of RBCJF accompanied by (n = 109) to HbSS was present in 42.2% patients, HBFCs by 27.5% to 23.8% and HbFS HbS / B thalassemia in 6.4 %, the percentage of boys HbSS 48.2% to 35.8% HbSS girls. Most families reported living with family income less than one minimum wage per month (37%). Regarding the source of income was identified as the father works with a formal contract in 44.9% and mothers in only 18.3%. In 7.33% of families the father is unemployed and mothers in 32.1%, a fact that reinforces the social vulnerability of children with SCD. Another important aspect is the presence of SCD in more than one child in the family, noting the presence of 56% of the siblings with the disease, and this, in 41% the diagnosis is sickle cell anemia. As for the sickle cell trait, 36.7% have at least one child with sickle cell trait and 6.4% were unaware of the presence of the trait among the siblings of children interviewed, which demonstrates the need for guidance to parents about family planning. The space between the chronological collection of blood and register for RCBJF was 17 days, a period considered ideal. As a product of the research, we obtained a greater knowledge of comprehensive attention to SCD RCBJF implemented by providing a broader understanding of the situation in our state of the SCD in trying to promote in the near future planning policies and other actions that may help reduce morbidity and improve quality of life of sickle cell patients. Moreover, as the National Program for NS is in some Brazilian states in the initial deployment, greatly contribute to this initiative a wide dissemination of studies, so that prevention and control measures are best implemented.