Orientador: Gustavo Antonio de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T06:20:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Leme_LuisHenriquedaSilva_M.pdf: 672538 bytes, checksum: 6c248014ebbe5a2b7317c82f15549b91 (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Introdução: O câncer de mama masculina é neoplasia rara, pouco conhecida e pouco estudada, apresentando uma incidência aproximada de 1500 casos novos por ano, nos Estados Unidos, estimando-se que para cada cem casos novos de câncer feminino teremos um caso de neoplasia masculina. Trata-se de um tumor que apresenta alta morbi-mortalidade, porque na grande maioria das vezes o seu diagnóstico é mais tardio, fato que interfere, piorando o prognóstico desta doença. Objetivo: Avaliar os aspectos epidemiológicos, clínicos e terapêuticos do câncer de mama em homens. Sujeitos e métodos: Foi realizado um estudo descritivo, retrospectivo, onde foram estudados 25 casos de neoplasia de mama masculina no município de Campinas, diagnosticados no Hospital e Maternidade Celso Pierro (PUC-Campinas), no Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher (CAISM-Unicamp) e no Laboratório de Anatomia Patológica da Maternidade de Campinas, no período de 1992 a 2005. Os dados foram coletados dos prontuários médicos dos sujeitos com o intuito de avaliar a história clínica, antecedentes pessoais e familiares, diagnóstico anatomopatológico, tratamentos realizados e evolução. Resultados: Por ser um estudo descritivo, de patologia rara, com pequena casuística, não foi realizada análise estatística deste trabalho, sendo que os dados foram apresentados através de freqüências e médias das variáveis estudadas. Com relação à faixa etária foram identificados três casos com idade até 40 anos, sete casos na faixa de 41 a 60 anos e 15 casos com idade acima dos 60 anos. No presente estudo, 22 pacientes eram de cor branca, um de cor negra e dois de cor parda. A distribuição percentual, segundo o tempo decorrido a partir dos sintomas iniciais até o momento do diagnóstico, mostrou que sete pacientes tiveram seu diagnóstico até o sexto mês após iniciados os sintomas, seis pacientes foram diagnosticados no período de sete a 12 meses após o início dos sintomas, cinco pacientes diagnosticados no segundo ano e sete pacientes tiveram o seu diagnóstico em um período superior a dois anos após iniciados os primeiros sintomas. A totalidade dos casos apresentou como sintoma inicial a presença de nódulo, e o padrão histológico dominante foi o Carcinoma Ductal Invasivo, presente em 23 casos. O tratamento cirúrgico de escolha foi a mastectomia, tendo sido realizadas seis mastectomias radicais, 17 mastectomias radicais modificadas, uma mastectomia simples e uma setorectomia. Conclusões: Corroborando os dados da literatura, a ocorrência do câncer de mama no homem foi identificada mais tardiamente, e apresentou um retardo significativo no tempo decorrido entre as queixas iniciais até o momento do diagnóstico do câncer, situação esta demonstrada pelo fato de que mais da metade dos pacientes estudados encontravam-se em estádios avançados da doença / Abstract: Introduction: Carcinoma of the male breast is a rare malignancy. Little is known about the disease and few research studies have been conducted on it. Approximately 1500 new cases of male breast cancer are diagnosed per year in the United States. It is estimated that for every one hundred new cases of female breast cancer, there is one case of male breast cancer. The tumor can cause significant morbidity and mortality, because of delayed diagnosis in the majority of cases, contributing to a worse prognosis of the disease. Objectives: To assess epidemiology, clinical aspects and treatment of breast cancer in men. Subjects and methods: A descriptive retrospective study was carried out to investigate 25 cases of male breast cancer in the municipality of Campinas, diagnosed at the Celso Pierro General and Maternity Hospital (PUC-CAMPINAS), in the Women¿s Integral Healthcare Center (CAISM-UNICAMP) and in the Laboratory of Anatomic Pathology of the Campinas Maternity Hospital, from 1992 to 2005. Data was collected from patient medical records with the purpose of evaluating clinical history, personal and family history, anatomic pathology diagnosis, treatment performed and clinical course. Results: Since this was a descriptive study of a rare disease with a small case study, statistical analysis was not conducted. Data was reflected in the frequencies and means of the variables studied. Regarding the age group, three patients were identified as being less than 40 years of age, seven patients were aged from 41 to 60 years and 15 patients were aged over sixty years. In the present study, 22 patients were white, one was black and two were mulatto. The percentage distribution according to the time since the first symptoms appeared until the time of diagnosis showed that seven patients were diagnosed no longer than six months after symptoms appeared, six patients were diagnosed from seven to 12 months after the first symptoms appeared, five patients were diagnosed two years after the first symptoms appeared and seven patients were diagnosed more than two years after the first symptoms appeared. The presenting complaint in all patients was a breast lump, and the predominant histologic pattern observed was Invasive Ductal Carcinoma, present in 23 cases. The surgical treatment of choice was mastectomy. Six radical mastectomies, 17 modified radical mastectomies, one simple mastectomy and one lumpectomy were performed. Conclusion: The current study corroborates data obtained from the literature, indicating that breast cancer was identified at a later stage in men. There was a significant delay in diagnosing cancer after the first symptoms appeared. More than half of the patients studied were diagnosed with breast cancer at an advanced stage of the disease / Mestrado / Tocoginecologia / Mestre em Tocoginecologia

Orientador: Jacks Jorge Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-09T19:45:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pulhez_DawtonAbranches_D.pdf: 1061767 bytes, checksum: 2995fbdc5aa9b93180a1ead1803497dd (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Os cânceres de pele não-melanoma são os tumores malignos mais freqüentemente encontrados na população brasileira. Dentre estes tipos de tumores encontra-se o carcinoma espinocelular, que também pode estar presente em regiões de mucosa revestidas por epitélio escamoso. Na região bucal, incluindo o lábio inferior, os carcinomas espinocelulares também apresentam altas taxas de incidência e morbidade. O estudo do comportamento biológico dos diversos tipos de cânceres tem sido alvo de numerosos estudos relatados na literatura. Recentemente, estes estudos têm demonstrado o importante papel de enzimas como a ácido graxo sintase (FAS) e de fatores a ela relacionados, como o receptor c-erbB2, o oncogene Skp2 e o gene supressor de tumor p27 durante a proliferação celular e a progressão do câncer. Estas proteínas têm sido consideradas como importantes alvos terapêuticos para o tratamento do câncer. O presente estudo teve como objetivo avaliar a expressão imuno-histoquímica de FAS, c-erbB2, p27 e Skp2 em carcinomas espinocelulares de pele, intra-orais e de lábio inferior, considerando-se que há diferenças no comportamento biológico destes tumores, e contribuindo desta forma para o melhor entendimento destas lesões e do papel biológico destas proteínas durante a progressão do câncer. Os carcinomas intra-orais expressaram os maiores valores para FAS, c-erb-B2 e skp2 e esses valores apresentaram-se diretamente proporcionais entre si nos tumores analisados. Os carcinomas em lábio inferior apresentaram valores de expressão intermediários, enquanto que os maiores valores de p27 foram encontrados nos carcinomas de pele. Estes resultados suportam a tese de que a co-expressão de FAS, c-erb-B2 e skp2 é importante durante a progressão do câncer e desempenha papel contrário ao da expressão da proteína p27. Além disso, essas proteínas são expressadas de forma diferente dentre carcinomas oriundos de diferentes regiões anatômicas e esse comportamento pode influenciar as características clínicas de cada tumor / Abstract: Nonmelanoma skin cancers are the most frequent among Brazil¿s population. Squamous cells carcinoma is among their subtypes and occurs in skin and mucosa. In oral cavity, including lower lip, squamous cells carcinoma is very frequent and shows much damage to the patients. The study of biological behavior of many types of cancer has been used for many researches. Recentely, these researches showed the important role of proteins, like fatty acid synthase (FAS), cerb-B2 receptor, skp2 oncogene and p27 tumor suppressor gene during cellular proliferation and cancer progression. These proteins have been considered important therapeutic aims to cancer treatment. The present study evaluated immunohistochemical expression of FAS, c-erb-B2, p27 and skp2 in oral, lower lip and skin squamous cell carcinomas. Oral carcinomas expressed higher levels of FAS, c-erb-B2 and skp2 and their levels were proportional. Lower lip carcinomas showed intermediary values. The levels of p27 were higher in skin carcinomas. These results support that the co-expression of FAS, c-erb-B2 and skp2 is important in cancer proliferation and has different role of p27 protein. They are different between carcinomas in different regions of the body and their expression may play role in clinical manifestation of tumors / Doutorado / Patologia / Doutor em Estomatopatologia

Doctorado en Salud Pública / No disponible a texto completo / Introducción El tabaquismo es un hábito prevalente en Latino América. Entre sus enfermedades asociadas se encuentra el Cáncer de Pulmón. La asociación causal está documentada, pero se desconoce el impacto epidemiológico en el país. Objetivo Objetivo Determinar la fuerza de asociación e impacto epidemiológico del tabaquismo en los tipos histológicos Adenocarcinoma y Epidermoide de cáncer pulmonar. Método Método Estudio caso-control pareado por edad. Se estimó la fracción atribuible (FA) y la fracción atribuible poblacional (FAP), crudas y ajustadas por potenciales variables confundentes e interacción. Resultados Resultados El número de pacientes con Escamoso fue 47 y 68 con Adenocarcinoma. La mediana edad de los casos con Adenocarcinoma fue 63 y 4 años más para los con Epidermoide. Para las mujeres fue 63 y 67 en los hombres. Los casos tienen mayor prevalencia de tabaquismo (fumar al menos 100 cigarrillos durante la vida: Adenocarcinoma 62.7 vs. 42.7; Escamosos 93.6 vs. 57.4; mujeres: 64.5 vs. 39.7; hombres: 95.8 vs. 67.1); la proporción de grandes fumadores es 4 veces mayor, fuman entre 5 y 10 años más y consumen 3 veces más cigarrillos al día. La FA para Adenocarcinoma fue de 60.47% y 98.43 para Esacamosos (ambos sexos), de 64.4% para las mujeres y para los hombres llegó a 90.4% (ambos tipos histológicos). La FAP fue de 55.44 y 93.24% para Adenocarcinoma y Escamoso; y de 41.99 y 86.36% para mujeres y hombres. Si estos parámetros se proyectaran a nivel poblacional alrededor de 1975 personas por año serán diagnosticadas con Cáncer de Pulmón debido al consumo de cigarrillo en el país. Conclusiones Conclusiones El impacto epidemiológico del consumo de tabaco en la población con cáncer pulmonar es alto, siendo especialmente importante para el tipo histológico Epidermoide y en los hombres.

Orientador: Carlos Frazatto Jr / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-18T19:19:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carvalho_MarcosBrasilinode_D.pdf: 3538369 bytes, checksum: 44e9e476ecd55e600fe5e5d0397aad13 (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: Estudo prospectivo de 115 pacientes consecutivos portadores de carcinoma epidermóide da laringe ou da hipofaringe, atendidos no período de maio de 1981 a janeiro de 1988, no Serviço de Cirurgia de Cabeça e Pescoço do Complexo Hospitalar Heliópolis, São Paulo, Brasil. Todos os pacientes foram submetidos a tralamento cirúrgico que compreendia um esvaziamento cervical completo e laringectomia ou faringolaringectomia. Os casos foram dirigidos alealóriamente para um dos dois tipos de esvaziamento: com ou sem conservação da veia jugular interna, do músculo esternocleidomaslóideo e do nervo espinal acessório. O principal pré-requisito para a inclusão do caso neste estudo era que, no linfonodo metastático, a neoplasia deveria estar confinada ao seu interior e não deveria apresentar transposição macroscópica da cápsula. O objetivo deste trabalho foi avaliar: 1. a importância da recidiva cervical homolateral; 2. a influência da conservação da veia jugular interna, do músculo esternoclei domastóideo e do nervo espinal acessório sobre os índices de recidivas e de sobrevida; 3. quais os fatores que devem ser considerados na escolha de uma cirurgia mais conservadora. Os cálculos da sobrevida atuarial foram feitos através da técnica de KAPLAN & MEIER (1958) e as comparações entre as distribuições de sobrevida para categorias de urna mesma variável foram feitas através do teste de Mantel-Cox (MANTEL, 1966; COX, 1972). Os resultados observados mostraram que o esvaziamento cervical oferece uma taxa de controle das metástases cervicais homolaterais em 95.1 % dos casos. A conservação de estruturas não linfáticas (veia músculo e nervo) não compromete a radicalidade oncológica da cirurgia mas deve-se estar a tento à cadeia da veia jugular interna que é preferencial para o desenvolvimento de metástases homo ou contralateral. A idade do paciente, a sede da lesão primária, o grau de diferenciação histológica do tumor, o estadiamento clínico, o diâmetro e o número dos linfonodos comprometidos e o estado microscópico da cápsula linfonodal não estiveram correlacionadas aos resultados observados para os dois lipos de esvaziamento. / Abstract: A prospective study of 115 consecutive patients with epidermoid carcinoma of the larynx or hypopharynx aclmitted to the Head and Neck Service of the Heliópolis Hospital Complex, São Paulo, Brasil, from May 1981 through January 1988. All patients underwent surgical treatment which consisted of comprehensive neck dissection and laryngectomy or pharyngolaryngectomy. The cases were chosen at random to undergo one of two types of neck dissection: with or without internal jugular vein, sternocleidomastoid muscle and spinal accessory nerve preservation. The main condition to be included in this protocol was: no patient with macroscopic extracapsular spread of carcinoma in cervical lymph nodes should be admitted. The purpose of this study was to analyze: 1. the importance of homolateral cervical relapse; 2. the influence of preservation of the interna I jugular vein, sternocleidomastoid muscle and spinal accessory nerve on the rates of reccurences and survival; 3. which factors should be considered in order to indicate a more conservative surgery. The actuarial survival was determined by the KAPLAN & MEIER (1958) method and the Mantel-Cox test was used to compare the .distribution of survival for categoJi'ies of the same variable (MANTEL, 1966; COX, 1972). The rates of homolateral cervical metastasis control were 95.1%. The preselvation of nonlymphatic structures (vein, muscle and nerve) do not compromise the oncologycal radicality and we should be careful with the dissection of jugular nodes that are regularly involved with homolateral or contralateral metastatic carcinoma. This study showed no statistically significant differences for the patients treated by one of the two types of neck dissection as the rates were adjusted for age, primary site, histologic differentiation, stage, size and number of metastatic nodes and degree of microscopic capsular involvement. / Doutorado / Doutor em Cirurgia

Uma parcela significativa dos casos de câncer de mama e ovário é consequência de variantes patogênicas germinativas em genes de alta e moderada penetrância, e o diagnóstico molecular é fundamental para definir o manejo adequado dos pacientes e suas famílias. Variantes patogênicas nos genes BRCA1 e BRCA2 (BRCA) são a causa mais comum da síndrome de predisposição hereditária ao câncer de mama e ovário (HBOC), embora outros genes também possam estar envolvidos neste fenótipo. No Brasil, o acesso ao teste genético ainda é muito limitado, e o espectro mutacional de genes relacionados à HBOC é pouco conhecido. Assim, o objetivo deste trabalho foi caracterizar o perfil clínico, as alterações moleculares e somáticas em indivíduos com síndromes de predisposição hereditária ao câncer de mama e/ou ovário no Brasil. Inicialmente, avaliamos a utilidade clínica de um painel de baixo custo para genotipagem de variantes patogênicas hispânicas recorrentes em BRCA (HISPANEL), visando superar uma das principais limitações de acesso ao teste: o custo. Embora seja eficaz em outras populações da América Latina, o painel avaliado apresentou uma baixa capacidade de detecção na nossa população. Apesar de não ser efetivo em seu formato atual, o HISPANEL poderia ser customizado com as variantes patogênicas mais frequentes no Brasil. Assim, buscando identificar estas alterações e caracterizar o perfil mutacional de BRCA no Brasil, realizamos uma compilação de 649 mutações reportadas em 11 estados brasileiros. No entanto, os resultados deste trabalho mostraram que são poucas as mutações recorrentes e/ou fundadoras presentes na nossa população. Em um próximo passo, mostramos que a mutação fundadora portuguesa BRCA2 c.156_157insAlu está presente em 0,65% dos 1.380 probandos testados (com critérios HBOC) não sendo, portanto, tão frequente no Brasil quanto em Portugal. No entanto, ela é a terceira mutação mais frequente de BRCA2 na nossa população, e tem sido negligenciada no diagnóstico molecular de HBOC. Assim, estes dados ressaltam a importância de sua inclusão nos testes de rotina para este gene. Em um grupo de famílias HBOC do Rio Grande do Sul, caracterizamos o perfil e a prevalência de mutações em BRCA, e avaliamos a sensibilidade dos 12 critérios de testagem empregados atualmente. Ao todo, 19,1% de todos os 418 probandos com critérios HBOC apresentavam mutações em BRCA, enquanto 5,7% dos casos possuíam ao menos uma variante de significado incerto (VUS). Além disso, este trabalho demonstrou a importância do detalhamento da história familiar e revelou um subgrupo de critérios com maior chance de identificar uma mutação patogênica em BRCA. Em um contexto de recursos limitados, estes critérios podem ser utilizados como uma ferramenta para priorizar a testagem de indivíduos com maior risco. Através da análise dos dados de painéis multigênicos testados por sequenciamento de nova geração, avaliamos a contribuição de outros genes no fenótipo HBOC, além de BRCA. Entre os 358 probandos com critérios HBOC testados, 18,2% apresentavam uma variante patogênica em genes de alto e moderado risco, incluindo BRCA1, BRCA2, PALB2, TP53, ATM, CHEK2 e MUTYH. Embora essa abordagem apresente algumas desvantagens, como o alto número de VUS (identificadas em 35,5% dos probandos), a utilização de painéis multigênicos permite a identificação de mutações em genes não-BRCA, beneficiando assim um número maior de pacientes. O papel destes e outros genes, envolvidos no fenótipo HBOC através de sua atuação no reparo de quebras bifilamentares no DNA por recombinação homóloga, foi detalhado em um artigo de revisão. Finalmente, realizamos um estudo inédito com o objetivo de caracterizar o perfil de alterações somáticas de tumores de mama diagnosticados em pacientes com síndrome de Li-Fraumeni, isto é, portadores de mutações germinativas em TP53. Este trabalho mostrou que estes tumores apresentam poucas mutações recorrentes, e uma carga mutacional alta, em comparação com tumores de mama esporádicos. Além disso, os tumores de mama relacionados à mutações germinativas em TP53 possuem uma contribuição significativa da assinatura 3 (típica de tumores relacionados à perda de função em BRCA1 e BRCA2), além de assinaturas mutacionais nunca descritas em tumores de mama esporádicos. Juntos, esses resultados sugerem que tumores de mama de pacientes com mutações germinativas em TP53 podem ser deficientes na via de recombinação homóloga. / An important fraction of all breast and ovarian cancers can be attributed to germline mutations in high and moderate penetrance cancer genes, and the identification of such mutations is essential to define the management and genetic counseling of these patients and their families. Germline mutations in BRCA1 and BRCA2 (BRCA) are the most common cause of hereditary breast and ovarian cancer syndrome (HBOC), but mutations in other genes can also be associated with this phenotype. In Brazil, there is very limited access to genetic testing, and the mutational profile of HBOC-related genes is largely unknown. Thus, in this work we aimed to characterize the clinical profile, the germline and somatic mutations in individuals at-risk for hereditary breast and/or ovarian cancer predisposition in Brazil. We evaluate the clinical utility of a low-cost panel designed to genotype BRCA1 and BRCA2 recurrent Hispanic mutations (HISPANEL). Although this is a sensitive tool in other Latin-American populations, the HISPANEL had a low mutation detection-rate among our cohort, precluding its use as a screening tool in its current composition. This panel, however, could be customized to include recurrent Brazilian mutations which would likely increase its sensitivity. Thus, we next sought to identify recurrent and/or founder mutations, and characterized the mutational landscape of BRCA variants in Brazil. We compiled data from 649 BRCA mutations reported in patients from 11 Brazilian States, and these results showed a highly heterogeneous profile, and only few recurrent mutations. Next, we screened 1,380 HBOC probands for the Portuguese founder mutation BRCA2 c.156_157insAlu, and found a mutational prevalence of 0.65%, far less than observed in Portugal. Despite its overall low frequency, this is the third most frequent BRCA2 mutation in Brazil, and it has been neglected in the molecular testing of HBOC, since a specific protocol is required for its detection. This data highlights the importance of including specific testing for this mutation in routine HBOC testing in Brazil. The characterization of the BRCA molecular profile of probands from Southern Brazil showed a prevalence of pathogenic mutations variants of 14 uncertain significance (VUS) of 19.1% and 5.7% of 418 tested HBOC probands, respectively. We also characterize the clinical profile of this cohort, and the evaluation of international testing criteria revealed a set of high-sensitivity criteria, which enables the prioritization of high-risk individuals as a first step towards offering testing in a scenario of limited resources. Aiming to access the contribution of germline mutations in cancer predisposing genes to the HBOC phenotype, we evaluated multigene panel sequencing results from 358 probands. Among them, 18.2% carried a pathogenic germline mutation in high and moderate risk genes, including BRCA1, BRCA2, PALB2, TP53, ATM, CHEK2 and MUTYH. Although this approach has some caveats, such as the high number of VUS (reported in 35.5% of all probands), the use of multigene panels allows the identification of mutations in several non-BRCA genes, and may benefit a large number of patients. Finally, considering the paucity of information about breast cancers arising in carriers of TP53 germline mutations (i.e. Li-Fraumeni syndrome patients), we sought to define the repertoire of somatic genetic alterations and the mutational signatures underpinning these tumors. The analyses revealed that these breast tumors harbored only few recurrent mutations, and present an increased burden of somatic mutations and copy number alterations. Interestingly, most tumors had a significant contribution of Signature 3, and many had a high large-scale transitions score. Breast cancers from germline TP53 mutation carriers might have an impairment in the homologous recombination repair pathway.

Orientador: Andrigo Barboza De Nardi / Resumo: Os anti-inflamatórios não esteroidais (AINEs) COX-2 seletivos possuem efeito antitumoral mais potente que os AINEs tradicionais e desencadeiam menos efeitos colaterais. Dentre estes efeitos indesejáveis cabe citar alterações gastrintestinais e da perfusão renal, quando administrados por longos períodos para o tratamento auxiliar da dor ou do próprio câncer. Com estes preceitos hipotetizou-se que o carprofeno como AINEs seletivo usado por um período de três meses tem um efeito benéfico em pacientes afetados por carcinoma mamário e que os efeitos sobre o sistema renal vão ser moderados e apenas ligados à alteração da perfusão renal e não à alteração de sua função, assim, objetivou-se avaliar a hemodinâmica renal por meio das técnicas ultrassonográficas Doppler e ultrassonografia contrastada por microbolhas (CEUS), os parâmetros clínicos e laboratoriais rotineiros de função renal e a evolução clínica de cadelas com carcinomas mamário, submetidas à mastectomia, e tratadas ou não com carprofeno. Foi realizado um estudo clínico prospetivo, aleatorizado em 26 cadelas, distribuídas equitativamente em um grupo tratado que recebeu carprofeno 4,4 mg/kg/dia por 90 dias e um grupo controle que não recebia medicação anti-inflamatória. Foram obtidos os parâmetros Dopplerfluxométricos da artéria renal, caraterísticas da perfusão renal pela CEUS, análises celulares e bioquímicas hematológicas e analise clínicas uma vez por mês durante seis meses. Estes dados foram submetidos a comparação entr... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Selective COX-2 nonsteroidal anti-inflammatory drugs (NSAIDs) have a more potent antitumoral effect than traditional NSAIDs and trigger fewer side effects. Among these undesirable effects, it is important mentioning gastrointestinal and renal perfusion changes, when administered for long periods in the auxiliary treatment of pain or cancer. With these precepts, it was hypothesized that carprofen as selective NSAIDs used for a period of three months has a beneficial effect on patients affected by breast carcinoma and that the effects on the renal system will be moderate, linked only to renal perfusion alteration and not to function alteration, consequently, the objective was to evaluate renal hemodynamics by Doppler ultrasound and microbubbles contrast enhancement ultrasound (CEUS) techniques, routine clinical and laboratorial parameters of renal function and clinical evolution of bitches with breast carcinomas, submitted to mastectomy, and treated or not with carprofen. A prospective, randomized clinical study was carried out on 26 bitches, equally distributed in a treated group that received carprofen 4.4 mg/kg/day for 90 days and a control group that did not receive NSAIDs medication. Dopplerfluxometric parameters of the renal artery, CEUS renal perfusion characteristics, cell and biochemical hematological analysis and clinical analysis were obtained once a month for six months. These data were subjected to comparison between groups and moments by analysis of variance (ANOV... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Presentada a la Universidad de Chile para optar al Grado de Doctor en Farmacología / El cáncer de mama es el cáncer más frecuentemente diagnosticado y la principal causa de muerte en mujeres en el mundo. Este cáncer es una enfermedad heterogénea compuesta por varios sub-tipos biológicamente distintos, en los cuales la participación del metabolismo en la proliferación celular permanecen pobremente entendido. Además, las células tumorales exhiben una alta capacidad de remodelar su metabolismo frente a cambios en la disponibilidad de sustratos o algún estrés metabólico, siendo una respuesta adaptativa que promueve la sobrevida celular. Sin embargo, la participación del metabolismo mitocondrial en la proliferación y la inducción de un remodelamiento metabólico mediante la inhibición farmacológica de la cadena transportadora de electrones (CTE) para obtener efectos anti-proliferativos permanecen escasamente explorados en células de cáncer de mama. Los resultados sugieren que las líneas celulares de cáncer de mama, comparadas con las células no-tumorales, presentan diferencias en el metabolismo mitocondrial, exhibiendo reducida capacidad de reserva y funcionando su CTE en su máxima velocidad. Además, las células de cáncer de mama exhiben diferentes dependencias sobre la disponibilidad de glucosa y glutamina para mantener la proliferación y frente a la privación de glucosa, pueden remodelar la organización bioenergética hacia el metabolismo mitocondrial. De forma interesante, estos datos sugieren que el funcionamiento de la CTE en células tumorales podría ser esencial para funciones celulares y que su bloqueo podría tener efectos anti-tumorales selectivos. A partir de una serie de compuestos con estructura química de tipo quinona/hidroquinona, se identificó un compuesto (Cpd.7) con efecto anti-proliferativo selectivo hacia células de cáncer de mama murinas y humanas. Cpd. 7 fue identificado como un inhibidor no-competitivo de la actividad del complejo I, con un sitio de unión putativo en el brazo hidrofóbico cercano al sitio de unión de ubiquinona. Este compuesto inhibió la respiración mitocondrial dependiente del complejo I, disminuyó la razón NAD+/NADH, produjo despolarización mitocondrial, afectando solo a tiempos tempranos los niveles de ATP. En células tumorales, Cpd. 7 produjo un selectivo remodelamiento metabólico hacia un fenotipo glicolítico dependiente de AMPK, siendo un mecanismo de sobrevida. De forma interesante, la disponibilidad de sustratos y la flexibilidad metabólica exhibida por células tumorales son factores que determinan el efecto de Cpd. 7, variando entre un efecto citotóxico o anti-proliferativo. Cpd. 7 afecta selectivamente la proliferación de células de cáncer de mama, induciendo detención del ciclo celular y senescencia. Este efecto es debido los cambios en la razón NAD+/NADH producida por la inhibición de la respiración mitocondrial, alterando la síntesis de amino ácidos (especialmente aspartato), los cuales son requeridos como precursores para la síntesis de nucleótidos durante la proliferación. En conclusión, en este trabajo se demuestra que la inhibición de la CTE a nivel del complejo I por pequeñas moléculas produce efectos anti-proliferativos, los cuales son mediados por la inducción de un selectivo remodelamiento metabólico en células de cáncer de mama / Breast cancer is the most frequently diagnosed cancer and the leading cause of death from cancer in women worldwide. This cancer is a heterogeneous disease comprised of several biologically distinct sub-types, in which the participation of the metabolism in the proliferation remain poorly understood. In addition, cancer cells exhibit a high capacity to remodel the metabolism in response to changes in the substrate availability or some metabolic stress, being an adaptive response that promote the cell survival. However, the participation of mitochondrial metabolism in the proliferation and the induction of a metabolic remodeling though the pharmacologic inhibition of the electron transport chain (ETC) to obtain anti-proliferative effect remains scarcely explored in breast cancer cells. Results suggest that the cell lines of breast cancer, compared to the non-tumoral cells, show differences in the mitochondrial metabolism, exhibiting reduced spare capacity and a high ETC activity. Moreover, breast cancer cells exhibit different dependence on glucose and glutamine availabilities to maintain the proliferation and under glucose deprivation, they can remodel the bioenergetic organization toward the mitochondrial metabolism. Interestingly, these data suggest that the ETC function in breast cancer cells may be essential for cellular functions and blocking may have selective anti-cancer effects. From a series of new compounds with chemical structure with quinone/hydroquinone scaffold, it was identified a compound (Cpd.7) with selective anti-proliferative effect toward murine and human breast cancer cells. Cpd. 7 was identified as a non-competitive inhibitor of complex I activity with a putative binding site in the hydrophobic arm next the binding site of ubiquinone. This compound inhibited the Complex I-dependent mitochondrial respiration, decreased the NAD+/NADH ratio, induced mitochondrial deporalization, affecting the ATP levels only at short time of exposition. In cancer cells, Cpd. 7 induced a selective metabolic remodeling toward a AMPK-dependent glycolytic phenotype, being a survival mechanism. Interestingly, the substrate availability and metabolic flexibility exhibited by breast cancer cells are determinants of the anti-cancer effect of Cpd.7, ranging from cytotoxic and anti-proliferative effects. Cpd. 7 selectively affects the proliferation of breast cancer cells, inducing cell cycle arrest and senescence. This effect occurs due changes in the NAD+/NADH ratio produced by the inhibition of the mitochondrial respiration, altering the amino acid synthesis (especially aspartate), which are required as precursors in the nucleotide synthesis during the proliferation. In conclusion, this work shows that the inhibition of ETC function at complex I level by small molecules produces anti-proliferative effects, which are mediated by the induction of a selective metabolic remodeling in breast cancer cells / Fondecyt; Fondap

Muitos pacientes com câncer de pulmão possuem tumores em estágio avançado, sendo que a principal droga utilizada para o seu tratamento é a cisplatina (CDDP). O uso da CDDP é limitado, pois tumores podem adquirir resistência a sua ação. Vesículas extracelulares (VEs) apresentam funções na transferência de quimiorresistência entre células tumorais, sendo que proteínas participam desse efeito. O estudo do perfil proteico de VEs de células tumorais sensíveis e resistentes a drogas permite compreender melhor os mecanismos dessa transferência. Portanto, este trabalho focou na investigação dos possíveis papéis de VEs e suas proteínas na transferência intercelular de resistência entre células humanas de adenocarcinoma de pulmão sensíveis e resistentes à CDDP. Sublinhagem celular com resistência (RA-A549) foi estabelecida, expondo a linhagem A549 a concentrações de CDDP. Após, foram realizados cocultivos transwell entre as células RA-A549 com células A549 para verificar a internalização celular de VEs e para avaliar a transferência de resistência entre as linhagens. No ensaio de transferência, células A549 foram cocultivadas com células A549 ou RA-A549 na presença ou não de CDDP por 72 h e, após, marcadas com FDA. As VEs foram isoladas do sobrenadante de cultivo pelo método de centrifugação diferencial e ultracentrifugação e analisadas por diferentes técnicas. As proteínas de VEs isoladas de RA-A549 e A549 foram analisadas por LC-MS/MS. A sublinhagem RA-A549 apresentou valor de IC50 superior ao da linhagem A549 (cerca de 4,5 vezes). Células A549 cocultivadas com RA-A549 foram capazes de internalizar as VEs de RA-A549 e apresentaram uma menor sensibilidade a CDDP (p < 0,001), sugerindo transferência intercelular de quimiorresistência. As VEs isoladas apresentaram diâmetro variável (10-420 nm), com predominância de ~100 nm, sendo que a sua presença foi ainda confirmada por detecção da proteína CD63. Foram identificadas 225 proteínas diferentes nas VEs das células A549 e RA-A549, entre essas, marcadores clássicos de VEs, como CD9, CD8, Alix, anexinas, Rab GTPases e HSPs. Foram identificadas proteínas nas VEs potencialmente envolvidas na transferência de resistência a CDDP e associadas com a proliferação e adesão celular, o bloqueio de fluxo da droga, invasão e migração celular, evasão de apoptose, atenuação do sistema imune e da coagulação, angiogênese, regulação do ciclo celular, o reparo de DNA, modulação do metabolismo energético, o efluxo ou a neutralização da droga, degradação proteica, reorganização da estrutura e formato das células tumorais. / Many patients with lung cancer have tumors in advanced stage and the main drug used for their treatment is cisplatin (CDDP). The CDDP use is limited, because tumors may become resistant to their action. Extracellular vesicles (EVs) have functions in chemoresistance transfer between tumor cells and proteins participate in this effect. The study of VEs protein profile from drug–sensitive and –resistant tumor cells allows a better understanding of the mechanisms of this transfer. Therefore, this work focused on the investigation of the possible roles of EVs and their proteins in the resistance intercellular transfer between CDDP–resistant and –sensitive lung adenocarcinoma human cells. Cell subline with resistance (RA-A549) was established, exposing the A549 line to CDDP concentrations. After, transwell co-cultures were performed between RA-A549 cells with A549 cells to verify EVs cell uptake and to assess the resistance transfer between the lines. In the transfer assay, A549 cells were co-cultivated with the A549 cells or RA-A549 with CDDP or not by 72 h and thereafter labeled with FDA. The EVs were isolated from culture supernatant by the differential centrifugation and ultracentrifugation method and analyzed by different techniques. The isolated EVs protein from RA-A549 and A549 were analyzed by LC-MS/MS. The RA-A549 subline showed IC50 value greater than of A549 line (about 4.5 fold). A549 cells co-cultivated with RA-A549 were able to RA-A549 EVs uptake and showed a lower sensitivity to CDDP (p < 0,001), suggesting chemoresistance intercellular transfer. The isolated EVs showed a variable diameter (10-420 nm) with a predominance of ~100 nm, and their presence was further confirmed by detection of CD63 protein. Two hundred and twenty-five different proteins were identified in the A549 and RA-A549 cell EVs, among these EVs classic protein markers, such as CD9, CD8, Alix, annexins, Rab GTPases e HSPs. Proteins were identified in the EVs potentially involved in the CDDP-resistance transfer and associated with cell proliferation and adhesion, drug flow blockage, cell invasion and migration, apoptosis evasion, attenuation of immune system and coagulation, angiogenesis, cell cycle regulation, DNA repair, modulation of energy metabolism, efflux or neutralization of the drug, protein degradation, reorganization of the tumor cell structure and shape.

O câncer colorretal (CCR) é o terceiro tipo de neoplasia maligna mais frequente no mundo, o qual apresenta elevadas taxas de mortalidade. Os compostos organotelurados (OT) possuem interessantes efeitos biológicos, como potenciais antioxidantes e ações antiproliferativas. O ditelureto de difenila (DTDF), um composto OT, simples e estável, atualmente é investigado quanto aos seus efeitos biológicos. Em estudos anteriores, o DTDF apresentou ação antigenotóxica e antimutagênica em baixas concentrações. No entanto, em concentrações mais elevadas, o DTDF mostrou-se citotóxico em células de mamífero (V79) pela indução de genotoxicidade, parada do ciclo celular e inibição de topoisomerase I (TopoI). Por conseguinte, a citotoxicidade dos compostos OTs tem sido explorada em diversos estudos, assim como sua ação como agentes antiproliferativos em terapias anticâncer é também investigada. O objetivo deste estudo é avaliar o potencial antiproliferativo, genotóxico e análise de ciclo celular do DPDT em linhagens de células humanas HCT116 (carcinoma) e HT-29 (adenocarcinoma). Os resultados mostraram diminuição da viabilidade celular após exposição ao DTDF por 72 horas em ambas as linhagens celulares, avaliadas por MTT e ensaio clonogênico. Os valores de IC50 obtidos foram de 10,74 e 2 μM para MRC5 e HCT116, respectivamente, no ensaio MTT. No ensaio cometa, o DTDF mostrou capacidade de induzir aumento de índice de dano (ID) no DNA com 10 μM após 3 e 24 horas de exposição, em MRC5 e HCT116. Para 24 horas de exposição, o aumento no ID ocorre apenas em células HCT116, em concentrações ≤ 5 μM de DTDF. Para uma melhor compreensão, foi avaliado se DTDF foi capaz de causar quebras ou interações diretas com DNA pelas análises de quebra de DNA plasmidial e de dicroísmo circular (DC). Não foram detectadas quebras duplas ou simples em concentrações que vão de 0 a 400 μM de DTDF pela análise de quebra de DNA plasmidial. No experimento de DC, na mesma faixa de concentrações, não foi possível detectar interações diretas de DTDF com o DNA plasmidial. Por citometria de fluxo, foi realizada a análise de ciclo celular, onde foi observado a parada em G2/M após 24, 48 e 72 horas de exposição em 5 e 10 μM de DTDF. Foi avaliado pelo método TARDIS se o DTDF foi capaz causar a inibição da enzima topoisomerase II (TopoII) em HCT116 e MRC5. Em 3 horas de exposição, em 5 e 10 μM, o DTDF não foi capaz de induzir formação de complexos DNA-TopoII. Os resultados mostraram que a linhagem HCT116 foi mais sensíveis aos efeitos citotóxicos do DTDF do que as células MRC5. Como foi demonstrado que o DTDF não é capaz de interagir diretamente com DNA, essa diferença pode estar relacionada com os efeitos genotóxicos indiretos, como estresse oxidativo ou inibição de TopoI, que levaram a parada em G2/M. Esses resultados fortalecem a hipótese de inibição de TopoI, visto que os mecanismos celulares do DTDF estão relacionados com seu efeito genotóxico e parada no ciclo celular. Assim, os resultados desse trabalho abrem possibilidades de estudos futuros para investigações mais aprofundadas de possíveis mecanismos de ação moleculares do DTDF em células de câncer colorretal. / Colorectal cancer is the third more frequent type of cancer worldwide and has high mortality rates. Diphenyl ditelluride (DPDT) is an organotellurium (OT) compound with biological effects, such as potential antioxidant, antigenotoxic and antimutagenic at low concentrations. However, higher concentrations of DPDT showed cytotoxic effects in mammalian V79 cells by inducing oxidative damage, DNA strand breaks, cell cycle arrest and topoisomerase I (TopoI) inhibition. In this sense, the cytotoxicity of OT compounds has been reported, and the observed effects attributed for anticancer therapy application. Thus, the objective of this study is to investigate the antiproliferative, genotoxic and cell cycle arrest potential of DPDT in human colon cancer cells (HCT116) and human fibroblast cells (MRC5). The results showed a decrease in cell viability after DPDT exposition for 72 h in both cell lines, as evaluated by MTT and clonogenic assays. The IC50 values obtained were 10.74 and 2 μM for MRC5 and HCT116, respectively in MTT assay. In the comet assay, DPDT at concentrations ≤ 5 μM was able to increase DNA strand breaks induction only in HCT116 cells after 24 h of exposure. For a better understanding, we evaluated if DPDT was able to cause strand breaks in direct interaction with plasmidial DNA breakage analysis. No single or double strand breaks were detected in a range of concentrations from 0 to 400 μM. By circular dichroism analysis, no direct interactions with DNA were found at the same concentrations. Furthermore, cell cycle arrest in G2/M phase detected by flow cytometry was more pronounced in the HCT116 than MRC5 cell lines after 24, 48 and 72 h of exposure. By the TARDIS method, we evaluate if DPDT was able to inhibit topoisomerase II. For 3 h exposure, in 5 and 10 μM, DPDT does not shows topoisomerase II inhibition. Taken together, HCT116 colon cancer cells were more sensitive to DPDT biological effects than MRC5 cells. This difference may be related to the stronger indirect genotoxic effects induced by DPDT in HCT116 cells, which probably triggered the cell cycle arrest. The action of DPDT apparently occurs in the S phase, taking place to cell cycle arrest in G2/M, reinforcing the hypothesis of TopoI inhibition. Thus, the results of this work open up possibilities for future studies on further investigation of possible mechanisms of molecular action of DTDF in colorectal cancer cells.

El aumento de las expectativas de vida a nivel mundial es un claro indicador de los avances que ha tenido la medicina científica en el control y cura de enfermedades y epidemias que hace un siglo eran causas comunes de muerte. En chile la esperanza de vida para hombres es de 72,3 años mientras que para mujeres es de 78,26 años. A esto se suma la clara tendencia al envejecimiento de la población del país situandonos en un estadio de transición demografica. Esto plantea al sector salud la necesidad de asegurar la prestación de servicios tanto en la prevención, recuperación, rehabilitación y Paliación en salud, sobre todo en los adultos mayores. Para el caso del cáncer la situación es aun mas delicada, ya que no existe cura para este mal una vez que se propaga masivamente, y su detección en la mayoría de los casos es tardía, a causa de una falta de educación sobre el control periódico que debería efectuar la población para prevenir la propagación de este mal. Es en este punto donde la medicina abre un nuevo campo de acción destinado a la atención de los enfermos terminales y sus familias, que se conoce como Medicina Paliativa, la cual tiene como objetivo mitigar las dolencias físicas en cuanto sea posible, ayudar, educar y asesorar al enfermo y sus familiares antes de la hora de la partida, haciéndola mas digna y llevadera. En Chile la Medicina Paliativa entra como especialidad reconocida a partir del año 2005, existiendo antes solo como una opción en la auto formación de médicos y personal de la salud. Actualmente El Alivio del Dolor y Los Cuidados Paliativos en enfermos terminales están incluidos en el plan de salud AUGE(2), lo que asegura los plazos y garantías de atención a través del sistema de salud pública. El proyecto se define como un intermedio entre los polos hospital y casa, una simbiosis que sea capaz de brindar nuevas herramientas que le permitan al enfermo y la familia, conjugar los aspectos positivos de cada polo, asumir la partida de un ser querido de manera mas digna y mas sana viendo la muerte realmente como un proceso natural del ser humano. Se busca la creación de un programa de espacios conexos que favorezcan la comunicación horizontal entre el paciente-familia, pacientepaciente y paciente -personal de salud dándole al usuario la posibilidad de libre interacción con el entorno, generando espacios que aporten a la privacidad y reflexión individual, la comunicación familiar, y la participación social de manera que el paciente se sienta protagonista activo del entorno en donde hace a otros participe de sus experiencias sintiéndose valorado hasta sus últimos momentos; un lugar apto para iniciar La despedida.