Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Educação Física, Programa de Pós-Graduação Stricto-Sensu em Educação Física, 2012. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2012-12-06T11:19:34Z No. of bitstreams: 1 2012_MarianneLucenadaSilva.pdf: 580187 bytes, checksum: a7abc1204cddc00a2798676b5fbc66b5 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2012-12-07T13:55:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_MarianneLucenadaSilva.pdf: 580187 bytes, checksum: a7abc1204cddc00a2798676b5fbc66b5 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-12-07T13:55:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_MarianneLucenadaSilva.pdf: 580187 bytes, checksum: a7abc1204cddc00a2798676b5fbc66b5 (MD5) / OBJETIVO: Avaliar o efeito agudo da estimulação elétrica nervosa transcutânea (TENS) ganglionar na função endotelial utilizando o método de tonometria de aplanação (TA) em indivíduos saudáveis adultos (AD) e meia-idade (MA). MÉTODOS: Estudo do tipo experimental e transversal. Doze AD (27,25 ± 5,53 anos; 81,08 ± 11,48 kg; 177 ± 0,03 cm) e doze de MA (54,83 ± 5,10 anos; 75,24 ± 10,37 kg; 171 ± 0,06 cm). Cada voluntário realizou dois protocolos –TENS e placebo, sendo a TENS aplicado sob a região do gânglio supratorácico (C7 a T4) (Frequência = 80 Hz, Largura de Pulso 150ms, dose ajustada em limiar sensitivo máximo, por 45 minutos), e o grupo placebo recebeu a mesma intervenção sem fornecimento de corrente. Os protocolos foram aleatorizados e aplicados em dias distintos com intervalo mínimo de 48 horas. Foi analisada pressão arterial sistólica (PAS), pressão arterial diastólica (PAD), freqüência cardíaca (FC), índice de incremento (AI), AI corrigido para uma frequência de 75bpm (AI75%), pressão arterial sistólica no primeiro pico (SBP 1) e pressão arterial sistólica no primeiro pico (SBP2). RESULTADOS: Foi encontrada redução significativa no comportamento de pressão de ejeção do ventrículo esquerdo na intervenção TENS no grupo AD (p ≤ 0, 045). E diferença entre a PAS2 e a PAS1 no grupo MA sem intervenção (p ≤ 0, 027). As demais variáveis da TA tiveram respostas semelhantes em ambas as populações (AD e MA), sem alteração significativa. CONCLUSÃO: A aplicação aguda da TENS ganglionar é capaz de produzir um efeito vasodilatador e modular a função endotelial em indivíduos adultos podendo emergir como terapêutica eficaz no manejo da pressão arterial periférica. Novos estudos são necessários para avaliar melhor os impactos desta intervenção aplicada de forma aguda e longitudinal. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / OBJECTIVE: To evaluate the acute effect of transcutaneous electrical nerve stimulation (TENS) on ganglionic endothelial function using the method of applanation tonometry (AT) in healthy adults (AD) and middle-aged ones (MA). METHODS: Experimental cross-sectional study. Twelve AD (27.25 ± 5.53 years old, 81.08 ± 11.48 kg, 177 ± 0.03 cm) and twelve MA (54.83 ± 5.10 years old, 75.24 ± 10, 37 kg, 171 ± 0.06 cm). Each individual performed two protocols - TENS and placebo TENS was applied in the supra thoracic ganglion (C7 to T4) (frequency = 80 Hz, Pulse Width 150mms, sensory threshold dose adjusted maximum of 45 minutes), and the placebo group received the same intervention without power supply. The protocols were randomized and applied on different days with minimum interval of 48 hours. We analyzed systolic blood pressure (SBP), diastolic blood pressure (DBP), heart rate (HR), increment index (AI), AI fixed to a frequency of 75bpm (AI75%), First peak of systolic blood pressure (SBP1) and Second peak of systolic blood pressure (SBP2). RESULTS: We found significant reduction in the pressure behavior of left ventricular ejection TENS intervention in AD group (p ≤ 0, 045). And difference between SBP1 and SBP2 at rest in MA group (p ≤ 0, 027). All other variables of AT responses were similar in both populations (AD and MA) without significant modification. CONCLUSION: The acute application of TENS ganglionic is able to produce a vasodilatory effect and modulate endothelial function in adults possibly emerging as effective therapy in the management of peripheral arterial pressure. Further studies are needed to better assess the impacts of this intervention applied acutely and longitudinally.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós Graduação em Ciências da Saúde. 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-06-07T13:35:32Z No. of bitstreams: 1 2013_KeiteOliveiraLima.pdf: 1712033 bytes, checksum: b1aa9424b615c04bbc49d2f427543621 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-06-10T11:12:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_KeiteOliveiraLima.pdf: 1712033 bytes, checksum: b1aa9424b615c04bbc49d2f427543621 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-06-10T11:12:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_KeiteOliveiraLima.pdf: 1712033 bytes, checksum: b1aa9424b615c04bbc49d2f427543621 (MD5) / Introdução- A neuromodulação experimental ou terapêutica com utilização da estimulação transcraniana por corrente contínua (ETCC) pode produzir potenciais efeitos adversos sobre o sistema nervoso autônomo. Essa possibilidade foi pouco estudada.Objetivo- Nossa pesquisa objetivou avaliar os possíveis efeitos sobre pressão arterial, frequência respiratória e valores de VO2 e CO2 em sujeitos normais após ETCC.Metodologia- Foram selecionados 20 sujeitos sadios e divididos em grupos pesquisa e sham; ambos foram submetidos à ETCC na região dorsolateral pré frontal esquerda, sendo avaliados nas fases de repouso, estimulação e recuperação. Foi utilizado o equipamento K4b2, que é uma analisador de gases, para os dados espirométricos.Resultados- os dados obtidos não evidenciaram alterações significativas dos parâmetros avaliados.Na pressão arterial sistólica os resultados obtidos quando relacionado ao fator grupo foi de (F 1, 28 =0,342, p=0,566),na pressão arterial diastólica não foram encontrados efeitos significativos dos fatores(F<2,161,p>0,145), na frequência Respiratória (F<2,334,p>0,130) ,na variável de VO2 o resultado do fator grupo (F 1, 28 =0,125, p=0,022),da mesma forma, no caso da variável VCO2 o resultado do fator grupo foi de (F 1, 28 =0,675, p=0,422).Conclusão- A ETCC, quando aplicada nos padrões descritos na pesquisa, apresenta-se como uma forma segura de estimulação, não apresentando efeitos deletérios agudos. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction - The modulation of cortical excitability by transcranial direct current stimulation (tDCS), acting through cortico-subcortical connections, has the potential to produce side effects on the autonomic nervous system.Objective - Our research aimed at evaluating possible acute effects o tDCS on blood pressure, respiratory rate and VO2 and CO2 values in normal volunteers.Methodology - We selected 20 healthy volunteers, who were divided into two groups: sham stimulation (placebo) and real stimulation; both underwent tDCS of the left dorsolateral prefrontal region and were evaluated at baseline (“rest”), during stimulation and after it (“recovery”). A gas analyzer spirometer (K4b2) was used.Results - No significant changes on respiratory gases and respiratory rate were detected that could be attributable to the tDCS procedure.In systolic blood pressure when the results related to factor group was (F1, 28 = 0.342, p = 0.566), diastolic blood pressure were not found significant effects of the factors (F <2.161, p> 0.145), respiratory frequency (F <2.334, p> 0.130) in the outcome variable VO2 factor group (F1, 28 = 0.125, p = 0.022), as in the case of variable the result of VCO2 factor group was (F1, 28 = 0.675, p = 0.422).Conclusion - TDCS, when applied as described in this research, is a safe non-invasive form of neuromodulation devoid of significant autonomic side effects.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2013. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2014-03-18T14:41:33Z No. of bitstreams: 1 2013_OswaldoRibeiroMarquezNeto.pdf: 21563065 bytes, checksum: adaf1d2ee7035c2b869f7f18f335eb52 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-03-18T15:36:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_OswaldoRibeiroMarquezNeto.pdf: 21563065 bytes, checksum: adaf1d2ee7035c2b869f7f18f335eb52 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-03-18T15:36:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_OswaldoRibeiroMarquezNeto.pdf: 21563065 bytes, checksum: adaf1d2ee7035c2b869f7f18f335eb52 (MD5) / Introdução: Há diversas situações médicas que exigem a descompressão aguda do nervo facial (NF), inclusive lesões traumáticas ou neoplásicas. No entanto, o NF é altamente vulnerável às oscilações térmicas e/ou mecânicas, as quais podem vir a ocorrer durante procedimentos cirúrgicos que requerem a utilização de brocas. Objetivos: Avaliar possíveis lesões térmicas ocasionadas por brocas de alta e baixa rotação, bem como comparar suas peculiaridades durante a mastoidectomia radical para descompressão do NF. Método: Oito espécimes de osso temporal obtidos de cadáveres foram submetidos à descompressão do NF pela técnica de mastoidectomia radical, usando brocas de alta rotação e baixa rotação, com irrigação contínua ou sob demanda. As oscilações de temperatura transoperatórias foram medidas através de sensores térmicos ligados ao osso temporal. Estes sensores seguiam o trajeto do NF, à distâncias de 10, 5 e 2mm, utilizando-se ponteiras cortantes de 2,4 milímetros ou ponteiras rombas diamantadas de 2,1mm. Resultados: O uso de brocas de alta velocidade com irrigação sob demanda provocou uma oscilação significativa de temperatura no NF quando comparadas às brocas de baixa velocidade sob irrigação contínua (p < 0,05). As temperaturas mais elevadas foram diretamente proporcionais a suas distâncias do NF. No entanto, nenhuma das brocas apresentou níveis de temperaturas altas o suficiente para causar dano ao NF. Conclusões: As oscilações térmicas secundárias ao uso de brocas em mastoidectomias radicais são consideradas um fator de risco potencial ao NF. Porém, as brocas de alta e de baixa velocidade atualmente disponíveis, sob condições adequadas, usando irrigação contínua e à uma distância limitada do NF, mostraram oscilações térmicas transoperatórias seguras. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Introduction: There are many medical situations that demand facial nerve decompression, including traumatic or neoplastic lesions. However, the facial nerve is highly vulnerable to thermal oscillations, which can be observed during surgical procedures that demand the use of drills. Objectives: To assess potential thermal injuries caused by drills of high and low speed, and compare their peculiarities during radical mastoidectomy for facial nerve decompression. Methods: Eight temporal bone flaps obtained from cadavers were submitted to facial nerve decompression by the radical mastoidectomy technique, using both high- and low-speed drills with continuous irrigation or irrigation on demand. The temperature oscillations during all of the procedures were measured using thermal sensors attached to the temporal bone, following the path of the facial nerve, at distances of 10, 5, and 2mm, using cutting burrs of 2.4mm or diamond ball burrs of 2.1mm. Results: High-speed drilling with irrigation on demand generated a higher temperature rise in the facial nerve when compared to low-speed drilling under continuous irrigation (p < 0.05). The closer the burrs were to the facial nerves, the higher the temperatures measured. Neither the high-powered drill nor the low-powered drill presented levels of temperatures high enough to cause facial nerve damage. Conclusions: Thermal oscillations secondary to the use of drills in radical mastoidectomies should be considered a potential risk factor in surgical procedures for facial nerve decompression. However, the recently developed disposable devices, high- or lowpowered drills were safely used in these procedures under adequate conditions, by using continuous irrigation and a limited distance from the facial nerve.

Análise da expressão de neurotrofinas durante a regeneração de nervo periférico de rato por enxerto venoso Enxertos de veias têm sido empregados para preencher lacunas em nervos periféricos transeccionados para melhor recuperação funcional. No entanto, vários inconvenientes, como a constrição do enxerto secundário foram observados. Uma nova alternativa para esta técnica foi desenvolvida. Simplesmente invertendo a veia de dentro para fora, chamado do Inside- out vein graft. As neurotrofinas são uma família de fatores neurotróficos conhecidos por desempenhar um papel significativo na regeneração de nervos periféricos. A família da neurotrofina é constituído por fator de crescimento nervoso (NGF), fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF), Neurotrofina-3 (NT-3) e Neurotrofina-4 (NT-4). No campo da neurobiologia, vários autores têm utilizado a técnica de PCR a fim de obter mais informações sobre os nervos regenerados. Neste estudo, foi utilizada a técnica de biologia molecular para explorar o papel e o nível das neurotrofinas durante a regeneração de nervos periféricos com enxerto de veia. O nervo isquiático de ratos foi seccionado e reparado com enxerto de veia invertida (IOVG) e técnicas de enxerto de veia padrão (SVG). No grupo controle, os ratos foram operados e o nervo isquiático foi mantido intacto. Os animais foram sacrificados após 6 e 12 semanas e os enxertos foram colhidos para observar o nível das neurotrofinas. Músculos EDL e Sóleo foram excisados e pesados para determinar a diferença de peso entre os grupos. Um pequeno segmento dos cotos distais de ambos os grupos SVG e IOVG também foram excisados e foram processados histologicamente para examinar a quantidade de axónios regenerados. Além disso, um outro pequeno segmento do coto distal foi processado para RT-PCR para analisar o nível das neurotrofinas nesta área.A tecnica do walk track analysis foi realizada para determinar o índice funcional do nervo isquiático nos grupos. Em 6 semanas, não ocorreu crescimento neuronal significativo no coto distal dos dois tipos de enxertos, porém um crescimento foi observado em 12 semanas. Não houve diferença significativa na massa muscular entre IOVG e SVG em ambos os períodos de tempo. No entanto, um aumento significativo na massa muscular foi observado a partir de 6 a 12 semanas nos grupos IOVG e SVG. Um aumento significativo na produção de NT-3 foi observado no grupo de SVG em ambos, enxerto e o coto distal quando comparados a partir de 6 a 12 semanas, no entanto, não houve aumento observado no nível de neurotrofinas dos outros tipos (NGF e NT-4) . Surpreendentemente, não houve aumento significativo da NT-3 no grupo IOVG. Conclui-se que, entre as neurotrofinas avaliadas neste estudo, não há nenhuma diferença significativa no seu nível de RNAm entre os dois grupos, exceto NT-3. Finalmente, uma vez que o nível de RNAm de NT-3 aumenta significativamente entre 6 e 12 semanas no grupo SVG e não no IOVG, observado por estas duas técnicas de nível molecular, estudos adicionais necessitam serem feitos para decifrar o mecanismo exato. / Vein grafts have been employed to bridge the gap in transected peripheral nerves to produce better functional recovery. However several disadvantages such as secondary graft constriction were observed and a new alternative to this technique was developed by simply reversing the vein inside out. Both inside out and standard vein grafts were successfully used in recovering the sensory segmental defect in humans. Neurotrophins are a family of eurotrophic factors known to play an important role in the regeneration of peripheral nerves. The neurotrophin family consists of Nerve Growth Factor (NGF), Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF), Neurotrophin-3 (NT-3) and Neurotropinh-4 (NT-4). In the neurobiology field, several authors have been using PCR technique in order to gain more information regarding regenerated nerves. In this study, we employed this molecular biology technique to explore the role and level of the neurotrophins during the peripheral nerve regeneration with vein graft. The sciatic nerve of rats were sectioned and repaired with Inside out vein graft (IOVG) and standard vein graft techniques (SVG). In the control group the rats were sham operated wherein the sciatic nerve was kept intact. The animals were euthanized at 6 and 12 weeks and the grafts were harvested to observe the level the neurotrophins. EDL and Sol muscles were excised and measured to determine any weight difference between the groups. A small segment of the distal stumps from both the SVG and IOVG groups were also excised and were subjected to histological process to examine the amount of regenerated axon. In addition, another small segment of the distal stump was processed for RT-PCR to further examine the level of the neurotrophins in this area. At 6 weeks, no significant neuronal growth was observed in the distal stump of both graft types but a distinct growth was seen at 12 weeks. Walk track analysis showed poor motor function recovery in the experimental groups during both time intervals. Morphometric analysis demonstrated no significant differences in the amount of myelination between both the groups. There was no significant difference in the muscle mass between IOVG and SVG in both time periods. However, a significant increase in both the muscle mass was observed from 6 to 12 weeks in the IOVG and SVG groups. A significant increase in the production of NT-3 was observed in SVG group in both the distal stump and graft segment when compared from 6 to 12 weeks; however there was no observed increase in the level of other neurotrophins (NGF and NT-4). Surprisingly, no significant increase of NT-3 was noticed in the IOVG group. We conclude that amongst the neurotrophins evaluated in this study, there is no significant difference in their mRNA level between both groups except NT-3. Also, since mRNA level of NT-3 increases significantly between 6 and 12 weeks in SVG and not in IOVG, it suggests that the mechanism by which these two techniques operate at a molecular level may differ and further studies need to be done to decipher the exact mechanism.

A maioria das lesões nervosas periféricas em humanos, afeta a extremidade superior e o maior aspecto incapacitante dessa lesão é a perda dos movimentos da mão. As lesões do plexo braquial apresentam um índice de morbidade elevado que é representado por graves sequelas sensorio-motoras devido à fibrose que se desenvolve ao longo do tempo após a lesão. Evidências indicam que o tipo e a intensidade da atividade física induzem o remodelamento morfológico e eletrofisiológico da junção neuromuscular influenciando no reparo do nervo. No presente trabalho, um programa de treinamento de equilíbrio e coordenação, de repetição na esteira e uma associação desses treinamentos foram utilizados, por 4 semanas, após a lesão por esmagamento do nervo mediano em ratos para verificar a influência dessas atividades sobre os parâmetros morfométricos do nervo lesionado (área axonal, densidade axonal, diâmetro das fibras mielinizadas, diâmetro axonal e espessura da bainha de mielina da porção distal do nervo mediano), além de analisar a recuperação funcional dos membros anteriores lesados. Análises histológicas e morfométricas do nervo mediano foram utilizadas para avaliar a regeneração do nervo no final do tratamento. Os resultados do teste de motricidade sobre grade revelaram que houve uma recuperação funcional acelerada em todos os grupos lesionados após lesão do plexo braquial. No teste de suspensão no arame e no teste do cilindro, entretanto, os grupos tratados não apresentaram diferença significativa comparada ao grupo controle. O treinamento de equilíbrio e coordenação mostrou melhores resultados comparado ao treinamento de repetição e a associação dos treinamentos para a densidade axonal e o diâmetro axonal igualando-se estatisticamente aos resultados do grupo sham sedentário. Esses dados fornecem evidências de que o treinamento de equilíbrio e coordenação acelerou a regeneração do nervo mediano após lesão traumática experimental, apesar dos testes funcionais não demonstrarem diferenças entre os tratamentos.

Os exercícios físicos têm sido empregados em estudos clínicos experimentais com o propósito de estimular a regeneração nervosa periférica, entretanto estas pesquisas não examinam os efeitos de tipos específicos de exercícios sobre a regeneração das fibras nervosas periféricas. Neste estudo, testamos os possíveis efeitos de um programa de treinamento aeróbico, de resistência muscular e a combinação de ambos os programas (durante 5 semanas) na regeneração do nervo ciático em ratos após lesão nervosa por compressão, utilizando análises funcional e morfométrica. Os resultados obtidos neste estudo indicam que o treinamento aeróbico melhora a recuperação funcional, desde a primeira semana de treino, e a diferenciação morfológica do nervo ciático em regeneração após 5 semanas de treinamento quando comparado com os animais lesionados sedentários. Por outro lado, o treinamento de resistência muscular e a combinação dos treinos aeróbico e de resistência, ou seja, treinamento concorrente, retardam a recuperação funcional, embora não a impeçam. Além disso, 5 semanas de treinamento de resistência muscular e concorrente não melhoram a diferenciação morfológica do nervo ciático em regeneração quando comparado com os animais do treinamento aeróbico. Neste estudo, a diferenciação dos nervos em regeneração dos ratos que realizaram treinamento de resistência muscular e concorrente foi similar à dos animais lesionados sedentários. Estes dados provêm evidências de que o treinamento aeróbico tem um grande potencial para promover a recuperação funcional e melhorar a diferenciação do nervo ciático em regeneração após lesões traumáticas experimentais, e que os treinamentos de resistência muscular e concorrente parecem retardar a recuperação funcional e não interferir na diferenciação das fibras nervosas em regeneração do nervo ciático lesionado.

O objetivo deste estudo foi descrever os efeitos do treinamento físico sobre a regeneração nervosa periférica no diabetes experimental. Ratos Wistar machos foram aleatoriamente distribuídos nos grupos não-diabético (ND; n=6), não-diabético treinado (NDT; n=6), não-diabético com lesão isquiática por esmagamento (NDE; n=6), não-diabético com lesão isquiática por esmagamento e treinado (NDET; n=6), diabético (D; n=6), diabético treinado (DT; n=8), diabético com lesão isquiática por esmagamento (DE; n=9) ou diabético com lesão isquiática por esmagamento e treinado (DET; n=7). O diabetes foi induzido pela injeção intravenosa de estreptozotocina (50 mg/kg) e o treinamento na esteira ergométrica (2X ao dia, 5 dias/semana/10 semanas) foi iniciado 4 semanas após o esmagamento cirúrgico do nervo isquiático direito. Semanalmente após o procedimento cirúrgico a recuperação funcional da marcha foi monitorada através do índice de funcionalidade no nervo isquiático (IFI). Testes de esforço máximo foram realizados para cada rato antes (TEM 1), durante (TEM 2) e após o término do protocolo de treinamento físico (TEM 3). A glicemia capilar e o peso corporal foram monitorados desde o início até o final do protocolo experimental. Os animais foram mortos e porções do nervo isquiático (segmento proximal e segmento distal à lesão) e do músculo sóleo foram retiradas, seccionadas transversalmente e usadas para análises histomorfométricas. Adicionalmente também foram realizadas análises ultraestruturais de secções transversais e longitudinais do músculo sóleo. Os TEM 1 dos grupos DE e DET foram menores que os valores do grupo ND (p=0,001) e os grupos NDET e DET mostraram progressivo aumento nos valores de TEM ao longo do período de treinamento (p<0,05). Não houve alterações nos valores de TEM nos grupos sedentários. Os grupos NDE, NDET, DE e DET atingiram valores normais de IFI na 4ª, 4a, 9ª e 7a semana após a lesão nervosa, respectivamente. Após 13 semanas da lesão isquiática por esmagamento, o segmento distal do nervo de todos os grupos lesionados e o segmento proximal do grupo DE apresentaram parâmetros histomorfométricos anormais, como diminuição do diâmetro de fibras nervosas mielínicas (~7,4±0,3μm vs ~4,8±0,2μm), do diâmetro axonal (~5±0,2μm vs ~3,5±0,1μm) e da espessura da bainha de mielina (~1,2±0,07μm vs ~0,65±0,07μm) e um aumento do percentual de área ocupada conjuntamente por endoneuro, tecido de degeneração e fibras amielínicas (~28±3% vs ~60±3%). Em adição, no grupo NDE, o segmento proximal do nervo mostrou uma diminuição do diâmetro das fibras mielinizadas (7,4±0.3μm vs 5,8±0.3μm) e da espessura da bainha de mielina (1,29±0,08μm vs 0,92±0,08μm). As alterações histomorfométricas do segmento proximal dos grupos DE e NDE foram prevenidas/revertidas a valores similares aos atingidos pelo grupo ND pela prática do treinamento físico. Foram observadas maiores densidades e menores áreas de fibras musculares nos grupos DE (468 fibras/mm2; 1647,1 μm2) e DET (385 fibras/mm2; 1839,4 μm2) quando comparados com os outros grupos (p<0,05). No grupo DET a densidade de fibras musculares e o percentual de pequenas fibras musculares foram menores que no grupo DE. O grupo DE mostrou desalinhamento dos sarcômeros das linhas-Z, alterações estruturais nos vasos sanguíneos, sarcolema e na forma do núcleo e de mitocôndrias. No grupo DET as fibras musculares e os vasos sanguíneos apresentaram aspecto muito similar ao normal. Adicionalmente este grupo apresentou polirribossomos, retículo sarcoplasmático rugoso, complexo de Golgi desenvolvido e novas miofibrilas localizadas entre condensações de mitocôndrias localizadas próximas ao sarcolema e ao núcleo. Nossos achados indicam que em ratos com lesão por esmagamento do nervo isquiático, o diabetes causa atraso na regeneração nervosa assim como atrofia e alterações ultraestruturais no músculo sóleo. O treinamento físico pode acelerar a recuperação funcional da marcha em ratos diabéticos lesionados, prevenir/reverter alterações histomorfométricas do segmento proximal do nervo isquiático de ratos não-diabéticos e diabéticos lesionados e reverter parcialmente as alterações morfológicas do músculo sóleo de ratos diabéticos lesionados. / The aim of this study was to describe the effects of physical training in the peripheral nerve regeneration in experimental diabetic. Male Wistar rats were assigned to either a non-diabetic (N; n=6), trained non-diabetic (TN; n=6), non-diabetic with sciatic nerve crush (NC; n=6), trained non-diabetic with sciatic nerve crush (TNC; n=6), diabetic (D; n=6), trained diabetic (TD; n=8), diabetic with sciatic nerve crush (DC; n=9) or trained diabetics with sciatic nerve crush group (TDC; n=7). Diabetes was induced by intravenous injection of streptozotocin (50 mg/kg) and treadmill training (twice a day, 5 days/week/10 weeks) was begun 4 weeks after right sciatic nerve crush, realized surgically. Over the period after surgical procedures, functional recovery was monitored weekly using the sciatic functional index (SFI). Maximal exercise tests were performed for each rat before (MET 1), at the middle (MET 2) and at the end of the training protocol (MET 3). Glycemia and body weight were monitored since began until the end of experimental protocol. Animals were killed and the right proximal and distal sciatic nerve portions (PS and DS, respectively) and soleus muscle portions were cross-sectioned and used in histomorphometrical analysis. In addition, soleus muscle transverse and longitudinal sections were used to ultrastructural analyses. The MET1 of the DC and TDC groups was lower than the values of the N group (p=0.001) and the TNC and TDC groups showed a progressive increase in MET values along the training period (p<0.05).There were no significant alterations in MET values in the sedentary groups over time. The NC, TNC, DC and TDC groups attained normal SFI from the 4th, 4th, 9th to the 7th week after injury, respectively. At post-injury week 13, the distal nerve portion of all injured groups and the proximal nerve portion of the diabetic with sciatic nerve crush group presented altered morphometric parameters, such as decreased myelinated fiber diameter (~7.4±0.3μm vs ~4.8±0.2μm), axonal diameter (~5±0.2μm vs ~3.5±0.1μm) and myelin sheath thickness (~1.2±0.07μm vs ~0.65±0.07μm) and an increase in the percentage of area occupied by endoneurium (~28±3% vs ~60±3%). In addition, in the non-diabetic with sciatic nerve crush group the proximal nerve portion showed a decreased myelinated fiber diameter (7.4±0.3μm vs 5.8±0.3μm) and myelin sheath thickness (1.29±0.08μm vs 0.92±0.08μm). Morphometric alterations in the proximal nerve portion of the diabetic with sciatic nerve crush and non-diabetic with sciatic nerve crush groups were either prevented/reverted to values similar to the non-diabetic group by treadmill training. The soleus muscle showed higher fiber density and a smaller average muscle fiber area in both the DC (468 fiber/mm2; 1647.1 μm2) and TDC (385 fiber/mm2; 1839.4 μm2) groups when compared with the others groups (p<0.05). Furthermore, in the TDC group the muscle fiber density and percentage of small muscle fiber area were lower than in the DC. The DC group showed misalignment of the sarcomeres and Z-lines, and structural alterations in the blood vessels, sarcolemma and in the shape of the nucleus and mitochondria. In the TDC group the myofibers and blood vessels were seen to have a similar, normal aspect. Additionaly, polyribosomes, rough sarcoplasmic reticulum, developed Golgi apparatus and new myofibrils were observed located among condensed mitochondria near of the sarcolemma. We conclude that in rats with sciatic nerve crush nerve, the diabetic condition promoted delay in sciatic nerve regeneration and soleus muscle atrophy and ultrastructural alterations. The physical training could accelerate motor functional recovery of injured diabetic rats, prevent/revert morphometric alterations in proximal nerve portions in non-diabetic and diabetic injured rats and partially revert the morphologic alterations of the soleus muscle in diabetic injured rats.

Uma das questões mais intrigantes acerca da mobilidade vocal é o paradigma morfológico/funcional que existe sobre a organização do músculo tireoaritenóideo (TA) em relação à prega vocal. Funcionalmente, o músculo TA é responsável por ajustes seletivos em diferentes partes da prega vocal; contudo, esse padrão funcional somente seria possível se suas fibras não se situassem paralelamente em toda a extensão da prega vocal. Dessa forma, as fibras do músculo TA não teriam uma única orientação. Esse padrão morfológico se assemelharia a organização histológica da musculatura da língua. Portanto, a primeira hipótese desta tese é de que assim como a língua apresenta inúmeras possibilidades de movimento em função de sua organização muscular, o músculo TA também poderia apresentar uma organização muscular similar à musculatura da língua, assim como sua inervação; e dessa forma, propiciaria inúmeras possibilidades de movimento à prega vocal. Portanto, o objetivo do primeiro trabalho desta tese foi investigar em humanos as similaridades na organização histológica entre as fibras do músculo TA e da musculatura da língua, assim como diferentes parâmetros histomorfométricos em seus respectivos nervos, laríngeo recorrente (NLR) e hipoglosso (XII); com relevância clínica para uma técnica de reinervação da prega vocal, baseada na anastomose XII-NLR. Com o auxilio de técnicas estereológicas específicas, nós verificamos em doze cadáveres adultos que a organização histológica do músculo TA é similar à organização histológica da musculatura da língua. No entanto, não existem semelhanças nos parâmetros histomorfométricos quantificados entre o NLR e o XII. Dessa forma, no primeiro trabalho desta tese, conclui-se que a organização histológica das fibras do músculo TA, assemelha-se a musculatura da língua em termos de orientação. Presumivelmente, essa característica morfológica propicia uma maior diversidade/possibilidade de movimentos (ajustes seletivos em diferentes partes) à prega vocal. Baseado na diversidade do padrão vocal de um recém nascido, a segunda hipótese desta tese é de que já no período fetal todas as estruturas associadas à prega vocal (prega vocal falsa, ventrículo da laringe, epitélio, glândulas mucosas, vasos sanguíneos e ligamento vocal) já estão completamente estabelecidas, e assim como no adulto, as fibras do músculo TA não estão situadas paralelamente e lateralmente em toda a extensão da prega vocal. Desse modo, seguindo os mesmos protocolos morfométricos, nós também demonstramos que em um feto humano de 25 semanas de idade, além das estruturas associadas à prega vocal já estarem completamente estabelecidas, as fibras do músculo TA fetal, assim como no adulto, apresentam diferentes orientações: transversal, indefinida e longitudinal, ao longo de toda a extensão da prega vocal. Adicionalmente, o aspecto clínico/fisiológico nas diferenças de timbres sonoros entre homens e mulheres e suas especificidades, é um tema que ainda permanece pouco esclarecido. Embora alguns autores tenham reportado a existência do dimorfismo sexual em estruturas nervosas envolvidas com o controle vocal no sistema nervoso central; na atual literatura não existe nenhum estudo que evidencie a presença ou ausência do dimorfismo sexual no sistema nervoso periférico, especialmente no NLR e no músculo TA. Da mesma forma, existem vários estudos em animais descrevendo o dimorfismo sexual em regiões do sistema nervoso envolvidas com o controle da vocalização; no entanto, pouco se conhece sobre esse tema em humanos. Desse modo, a terceira hipótese desta tese é de que os tecidos (NLR e TA) que controlam as pregas vocais também poderiam apresentar dimorfismo sexual. Portanto, o objetivo do terceiro trabalho foi investigar, em humanos, através de análises morfométricas a presença do dimorfismo sexual no NLR e músculo TA. Análises com 14 cadáveres adultos revelaram que existe dimorfismo sexual em relação aos aspectos histomorfométricos do NLR; contudo, não foi verificado dimorfismo sexual em relação à organização histológica das fibras do músculo TA. Frente a esses resultados, conclui-se que os humanos, assim como outras espécies, também apresentam dimorfismo sexual em estruturas nervosas envolvidas com o controle vocal, tanto no sistema nervoso central, já relatada por outros autores, quanto no sistema nervoso periférico (NLR), mostrada em nosso estudo. Finalmente, nós podemos supor que as diferenças entre os timbres sonoros de homens e mulheres e suas especificidades, talvez não possam ser explicadas somente por diferenças na massa das pregas vocais ou no tamanho do trato vocal; mas também por diferenças que abrangem a organização de todo o sistema nervoso. / One of the most intriguing questions concerning vocal mobility is the morphological/functional paradigm regarding the organization of the thyroarytenoid muscle (TA) in relation to the vocal fold. Functionally, the TA is responsible for selective adjustments in different parts of the vocal fold. Yet, such a functional pattern would be only possible if its fibers were situated throughout the entire length of the vocal fold. Thus, TA muscle fibers would need to have more than one orientation. This morphological pattern would resemble the histological organization of the tongue musculature. Thus, the first hypothesis of this thesis is that as the tongue presents numerous opportunities for movement due to its muscular organization, muscle organization as well as innervation in the TA could be similar to that of the tongue, which would thus provide numerous opportunities for vocal fold motion. Therefore, the aim of the first study of this thesis was to investigate in humans the similarities between the histological organization of the TA muscle fibers and the tongue muscle, as well as different histomorphometric parameters in their respective nerves, the recurrent laryngeal nerve (RLN) and the hypoglossal nerve (XII); clinically relevant for a vocal fold reinnervation technique based on XII-RLN anastomosis. With the help of specific stereological techniques, we found the histological organization of the TA muscle to be similar to the histological organization of the tongue musculature in twelve cadavers. However, there are no similarities between the histomorphometric parameters quantified in the RLN and XII. Thus, in the first study of this thesis, it was concluded that the histological organization of the TA muscle fibers is similar to that of the tongue muscles in terms of orientation. Presumably, this morphological characteristic provides the vocal fold with a greater diversity/possibility of movement (selective adjustments in different parts). Based on the diversity of vocal patterns of a newborn, the second hypothesis of this thesis is that during the fetal period all the structures associated with the vocal folds (false vocal fold, ventricle of the larynx epithelium, mucous glands, blood vessels and vocal ligament) are already fully established and, as in adults, the TA muscle fibers are not situated in parallel and laterally throughout the length of the vocal fold. Hence, using the same stereological protocols, we also show that in a human fetus aged 25 weeks, besides the structures already associated with vocal fold being fully established, the TA fetal muscle fibers, as in adults, have different orientations: transverse, undefined and longitudinal, throughout the length of the vocal fold. Additionally, the role of clinical/physiological aspects in relation to differences in the tonal qualities of men and women voices and their specificities remains to be clarified. Although some authors have reported the existence of sexual dimorphism in the neural structures involved in vocal control at the level of the central nervous system, in the current literature there is no study that shows the presence or absence of sexual dimorphism at the level of the peripheral nervous system, especially the RLN and the TA muscle. Likewise, while there are numerous animal studies describing sexual dimorphism in the nervous system of regions involved with vocalization control, little is known about this aspect in humans. Thus, the third hypothesis of this thesis is that the tissues (RLN and TA) that control the vocal folds could also present sexual dimorphism. Therefore, the aim of the third study was to use morphometric analysis to investigate the presence of sexual dimorphism in the NLR and TA muscle in humans. Analyses of fourteen cadavers show that there is sexual dimorphism in relation to histomorphometric aspects of the RLN, although no such sexual dimorphism was observed in relation to the histological organization of the TA muscle fibers. Given these results, we conclude that humans, like other species, also exhibit sexual dimorphism in the neural structures involved in vocal control, both at the central level, as reported by other authors, and at the peripheral level (RLN), as shown in our study. Finally, we can assume that the differences between tonal qualities men and women voices and their specificities, may be not only explained by differences in the vocal fold mass or vocal tract size, but also by differences that include the organization of full the nervous system.

As regiões orofacial e craniana são densamente inervadas pelo nervo trigêmeo e suas ramificações. Condições patológicas, como cefaléias e dores orofaciais, têm sua fisiopatogenia relacionada ao funcionamento do sistema trigeminal. Existem poucos modelos experimentais de avaliação comportamental para estudo da nocicepção mediada pelo nervo trigêmeo. Essa dissertação teve por objetivo realizar estudos comportamentais sobre a modulação da nocicepção mediada por vias trigeminais, em modelo animal correlacionável com os quadros de dores orofaciais e cefálicas em seres humanos. Para tal, foi promovida a ativação do sistema trigeminovascular de modos periférico (dor orofacial induzida por formalina) e sistêmico (modelo neurovascular de ativação sistêmica por administração de nitroglicerina). Após essa ativação, avaliaram‐se comportamentos de auto‐limpeza, motricidade e orientação espacial, em campo aberto, e resposta reflexa a estímulo nociceptivo, por meio da medida de latência de retirada da cauda. Entre as respostas comportamentais avaliadas, o tempo despendido em reflexo de auto‐limpeza foi considerado o parâmetro representativo da resposta nociceptiva no modelo de dor orofacial induzida pela formalina. A administração de nitroglicerina, por si só, não foi capaz de promover alterações comportamentais sugestivas de atividade nociceptiva. A medida de latência de retirada da cauda não foi capaz de aferir alterações nociceptivas potencialmente desencadeadas pelos dois modelos empregados nessa Dissertação. Na associação desses dois modelos, observou‐se que a nitroglicerina foi capaz de promover redução do tempo gasto no reflexo de auto‐limpeza desencadeado pela formalina administrada por via subcutânea. É possível que a nitroglicerina participe modulando e/ou ativando os mecanismos envolvidos na nocicepção trigeminal, porém mais estudos necessitam ser realizados para delinear melhor sua ação nesse processo. / The orofacial and cranium regions are densely innervated by the trigeminal nerve and their branches. Pathological states as headache and orofacial pain have their pathogenesis related to the trigeminal functions. There are few experimental models for behavioral evaluation of the nociception mediated by the trigeminal nerve. The present work aimed to study the behavioral parameters related to the modulation of trigeminal system, using an animal model capable of simulating orofacial and cephalic pain in human beings. Afterwards, it was performed the activation of trigeminovascular system using regional (through the orofacial formalin test) and/or systemic models (through intraperitoneal administration of nitroglycerine). In open field, it was evaluated grooming, crossing, and rearing behaviors. In tail-flick test, it was evaluated the nociceptive response to the noxious stimulus. In the present study, grooming was considered the representative behavior of the nociceptive response in the orofacial pain model (induced by formalin). Nitroglycerine was not capable to determine behavioral changes that suggest nociception reaction in the open field. The tail‐flick latency did not detect potential nociceptive effects occurred in the evaluated models. In the association of the two models of regional and systemic trigeminal activation, nitroglycerine reversed the increase of grooming induced by the subcutaneous administration of formalin. The result suggests that nitroglycerine could act modulating and/or activating mechanisms involved in the trigeminal nociception. However, more studies are needed.

Lesões experimentais do nervo ciático, seguidas de exercício físico, têm sido usadas para induzir à degeneração nervosa periférica, como um modelo de neuropatia periférica, e estudar as alterações degenerativas e os processos regenerativos que ocorrem após a lesão. Entretanto, parâmetros como tempo e especificidade do exercício e seus efeitos sobre a regeneração ainda não estão bem esclarecidos. Neste estudo, analisamos os efeitos do exercício físico moderado na água aquecida durante cinco semanas, na regeneração do nervo ciático, após uma lesão nervosa por compressão, sendo para isso utilizado análises funcional, bioquímica e morfométrica. Os ratos foram divididos em 3 grupos, sendo um controle, um sedentário e um nado livre. Os grupos sedentário e nado livre foram submetidos a lesão do nervo ciático direito por esmagamento, sendo que, o grupo nado livre, após a lesão, foi submetido a cinco semanas de treinamento na água aquecida 31° C, iniciado com 10 minutos até alcançar 1 hora de nado livre. Os resultados obtidos neste estudo indicam que o exercício físico na água aquecida não interfere na recuperação funcional dos ratos, visto que, tanto os animais treinados quanto os animais sedentários recuperaram a função do membro posterior direito. A atividade da enzima acetilcolinesterase nos grupos experimentais não apresentou diferença significativa entre eles, porém foram diferentes do controle. Este resultado se repetiu em relação a diferenciação morfológica dos nervos em regeneração, onde os grupos sedentário e nado livre não apresentaram diferença significativa, mas permaneceram diferentes do grupo controle.