Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 442001.pdf: 1823261 bytes, checksum: 10761416aa58c3d7680e6ff4e42ce20f (MD5) Previous issue date: 2012-08-23 / Microcystins (MCs) constitute a family of cyanobacterial toxins, with more than 80 variants. These toxins are able to induce hepatotoxicity in several organisms, mainly through the inhibition of protein phosphatases PP1 and PP2A and oxidative stress generation. Recent evidence shows that MCs can either accumulate in brain or alter behavior patterns of fish species. Thus, this thesis aimed to study the effects of MC-LR (with the variable amino acids leucine (L) and arginine (R)) exposure on biochemical parameters in zebrafish, emphasizing the cholinergic and purinergic signaling, as well as to evaluate the behavioral patterns and whole-body cortisol levels. In vivo studies showed that 100 μg/L MC-LR for 24 h led to a significant increase in the AChE activity (27%) when zebrafish were exposed to the toxin dissolved in water, but did not cause any significant changes when injected intraperitoneally. In addition, semiquantitative RT-PCR analysis demonstrated that 100 μg/L MC-LR exposure also increased ache mRNA levels in zebrafish brain. The in vitro assays did not reveal any significant changes in AChE activity. We also assessed behavioral patterns and whole-body cortisol levels of adult zebrafish exposed to cell culture of the microcystin-producing cyanobacterium Microcystis aeruginosa. MC-LR exposure (100 μg/L) decreased by 63% the distance traveled and increased threefold the immobility time when compared to the control group. Interestingly, no significant alterations in the number of line crossings were found at the same MC-LR concentration and time of exposure. When animals were exposed to 50 and 100 μg/L, MC-LR promoted a significant increase (around 93%) in the time spent in the bottom portion of the tank, suggesting an anxiogenic effect. In addition, the results also showed that none of the MC-LR concentrations tested promoted significant alterations in absolute turn angle, path efficiency, social behavior, or whole-body cortisol level. Moreover, we evaluated the acute effects of different concentrations of MC-LR on NTPDases (nucleoside triphosphate diphosphohydrolases) and 5 - nucleotidase in adult zebrafish (Danio rerio) brain membranes. The results have shown no significant changes in ATP, ADP and AMP hydrolysis in zebrafish brain membranes. MC-LR in vitro also did not alter ATP, ADP and AMP hydrolysis in the concentrations tested. These findings show that acute exposure to MC-LR did not modulate ectonucleotidases activity in the tested conditions. Taken together these findings provide the first evidence that brain AChE is another potential target for MCs and that MC-LR exposure significantly impairs animal's exploratory performance. Nevertheless, further studies including long-time exposure should be performed in order to achieve a better understanding about MCLR toxicity mechanisms in the central nervous system / Microcistinas (MCs) constituem uma fam?lia de toxinas, com mais de 80 variantes. Estas toxinas s?o capazes de induzir hepatotoxicidade em diversos organismos, principalmente atrav?s da inibi??o das fosfatases PP1 e PP2A e gera??o de estresse oxidativo. Evid?ncias recentes mostram que MCs podem acumular no c?rebro e alterar padr?es comportamentais em diferentes esp?cies de peixes. Portanto, a presente tese teve por objetivo estudar os efeitos da exposi??o ? MC-LR (com os amino?cidos vari?veis leucina (L) e arginina (R)) sobre par?metros bioqu?micos em zebrafish, enfatizando os sistemas colin?rgicos e purin?rgicos, bem como, avaliar padr?es comportamentais e n?veis de cortisol corporal. Resultados do estudo in vivo mostraram que a exposi??o a 100 μg/L de MC-LR durante 24 h causaram um aumento significativo na atividade da AChE (27%) quando zebrafish foi exposto ? toxina dissolvida em ?gua; por?m, a toxina n?o causou mudan?as significativas quando injetada intraperitonealmente. Al?m disso, a an?lise semiquantitativa de RT-PCR demonstrou que a exposi??o ? 100 μg/L de MC-LR tamb?m aumentou os n?veis de RNAm da ache em c?rebro de zebrafish. Os ensaios in vitro n?o revelaram nenhuma altera??o significativa na atividade da AChE. N?s tamb?m avaliamos padr?es comportamentais e n?veis de cortisol corporal de zebrafish adultos expostos ? cultura de c?lulas de Microcystis aeruginosa produtoras de MC-LR. A exposi??o ? MC-LR (100 μg/L) diminuiu em 63% a dist?ncia viajada e aumentou tr?s vezes o tempo de imobilidade quando comparado ao grupo controle. Interessantemente, n?o houve altera??o no n?mero de linhas cruzadas na mesma concentra??o e tempo de exposi??o ? MC-LR. Quando animais foram expostos a 50 e 100 μg/L, a MCLR promoveu um aumento significante (aproximadamente 93%) no tempo gasto na por??o inferior do aqu?rio teste, sugerindo um efeito ansiog?nico. Adicionalmente, os resultados tamb?m mostraram que nenhuma das concentra??es de MC-LR testadas promoveu altera??es significativas nas mudan?as de ?ngulo, efici?ncia de rota e intera??o social ou, no n?vel de cortisol corporal total. Al?m disso, tamb?m foi avaliado o efeito de diferentes concentra??es de MC-LR na atividade das NTPDases (nucleos?deo trifosfato difosfoidrolase) e 5 nucleotidase em membranas cerebrais de zebrafish (Danio rerio) adultos. Os resultados mostraram que n?o houve altera??o nas hidr?lises de ATP, ADP e AMP. Nos experimentos in vitro tamb?m n?o houve altera??o nas hidr?lises dos nucleot?deos nas concentra??es testadas. Estes achados mostram que exposi??o aguda ? MC-LR n?o modulou a atividade das ectonucleotidases nas condi??es testadas. Ademais, fornecem a primeira evid?ncia que a AChE cerebral ? um outro alvo potencial das MCs e que exposi??o ? MC-LR prejudica significativamente a performance explorat?ria do animal. Estudos futuros incluindo exposi??o de longo prazo dever ser feitos para um melhor entendimento dos mecanismos de toxicidade das MCs no Sistema Nervoso Central

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 442629.pdf: 4545565 bytes, checksum: 75785599771804ca3f6535bc606e1454 (MD5) Previous issue date: 2012-08-09 / The clinical depression treatment faces serious obstacles as the disease mechanism is not fully elucidated. In addition, there are no effective means to predict and prevent depression as well as any biological method of diagnosis. The use of antidepressants is still the basis of the treatments for depression. Lithium has been used clinically as effective drug to treat all phases of bipolar disorder, including major depression. The Selective serotonin re-uptake inhibitors (SSRIs), such as fluoxetine and citalopram, and Tricyclic antidepressant (TCA) as clomipramine are drugs constantly used for depression treatment. Recent evidence has shown an involvement of adenosine and its receptors in the pathophysiology of depression. ATP can be stored and co-released with other neurotransmitters like serotonin and can be hydrolyzed by a cell-surface enzyme family known as ectonucleotidases. Among these members, we highlight the nucleoside triphosphate diphosphohtdrolases (NTPDases) and ecto-5'-nucleotidase. They are able to control the availability of ligands such as ATP and adenosine to its specific receptors. Adenosine deaminase (ADA) can promote the hydrolytic deamination of adenosine to inosine, modulating the extracellulr levels of this neuromodulator. In cholinergic signaling, after its release, acetylcholine (ACh) promotes the activation of specific muscarinic or nicotinic receptors and thus, it promotes diverse cellular responses. ACh is hydrolyzed by acetylcholinesterase (AChE) in acetate and choline in synaptic cleft. The zebrafish has been used in research behavioral neuroscience and is also a choice model for elucidating the development and function of neuronal circuitry. Considering the cholinergic and purinergic signaling are important participation in the CNS and these neurotransmitter pathways have been identified and characterized in zebrafish, the objective of this study was to evaluate the effect of antidepressants on ectonucleotidases, ADA and ACh activities, which are essential enzymes in the modulation of these signaling pathways in the zebrafish brain. We evaluated the ex vivo effects of fluoxetine (1-10 ?M), clomipramine (1-10 ?M), citalopram (70-300 ?M) on ectonucleotidases and ADA activities. It has been also analyzed the in vitro (1 to 1000 ?M) and ex vivo (1 to 10mg/L) effect of lithium on ectonucleotidases and AChE activities and gene expression. There was a significant inhibition of ADP hydrolysis after ex vivo exposure to lithium at 5 and 10 mg/L, whereas an inhibitory effect was observed for AMP hydrolysis only at 10 mg/L. The same treatment decreased the AChE activity in a concentration of 10mg/L. Lithium did not induce significant changes in the analysis of gene expression patterns in the concentrations tested. In vivo treatment, there were no significant changes inectonucleotidases and AChE activities. Treatment with clomipramine promotes an inhibition ecto-5'-nucleotidase activities at the concentration of 5?M when compared to the control group. For ADA activity, we also observed a significant inhibition in the treatment with clomipramine at concentrations of 5 and 10 ?M in membrane fractions of zebrafish brain. However, treatment with fluoxetine and citalopram did not alter ectonucleotidases and ADA activities in the zebrafish brain. Our findings may contribute to a better understanding of pharmacology of antidepressants and their interaction with the cholinergic and purinergic neurotransmission. / O tratamento cl?nico da depress?o enfrenta s?rios obst?culos j? que o mecanismo da doen?a n?o ? totalmente elucidado. Al?m disso, n?o existem meios eficazes para prever e prevenir a depress?o bem como nenhum m?todo biol?gico de diagn?stico. O uso de f?rmacos antidepressivos ainda ? a base dos tratamentos para depress?o. O l?tio tem sido usado clinicamente como f?rmaco eficaz para tratar todas as fases do transtorno bipolar, incluindo depress?o aguda. Os inibidores seletivos da recapta??o de serotonina (ISRSs), como fluoxetina e citalopram, e os antidepressivos tric?clicos (TCA), como a clomipramina, s?o f?rmacos constantemente utilizados para o tratamento da depress?o. Evid?ncias recentes mostram o envolvimento da adenosina e seus receptores na patofisiologia da depress?o. O ATP pode ser armazenado e co-liberado, juntamente com outros neurotransmissores, como serotonina e noradrenalina, e pode ser hidrolisado at? adenosina por uma fam?lia de enzimas de superf?cie celular, conhecidas como ectonucleotidases. Dentre elas, destacam-se as Nucleos?deo Trifosfato Difosfoidrolases (NTPDases) e a ecto-5?-nucleotidase, capazes de controlar a disponibilidade de ligantes como ATP e adenosina aos seus receptores espec?ficos. A Adenosina desaminase (ADA) pode promover a desamina??o hidrol?tica da adenosina em inosina, modulando os n?veis extracelulares deste neuromodulador. Na sinaliza??o colin?rgica, a acetilcolina (ACh), ap?s liberada, promove a ativa??o de receptores muscar?nicos ou nicot?nicos, e desta maneira a ACh promove diversas respostas celulares. A ACh que permanece na fenda sin?ptica ? hidrolisada pela acetilcolinesterase (AChE) em acetato e colina. O peixe-zebra tem sido utilizado na pesquisa da neuroci?ncia comportamental, sendo tamb?m um modelo de escolha para elucidar o desenvolvimento e a fun??o do circuito neuronal. Considerando que as sinaliza??es purin?rgica e colin?rgica t?m importante participa??o no sistema nervoso central e que essas vias de neurotransmiss?o j? est?o caracterizadas em peixe-zebra, o objetivo desse estudo foi avaliar o efeito de f?rmacos antidepressivos na atividade das ectonucleotidases, ADA e AChE, enzimas essenciais na modula??o destas vias de sinaliza??o em c?rebro de peixe-zebra. Foram avaliados os efeitos ex vivo da fluoxetina (1-10 ?M), clomipramina (1-10 ?M) e citalopram (70-300 ?M) na atividade das ectonucleotidases e ADA. Foi analisado tamb?m o efeito in vitro (1 a 1000 ?M) e ex vivo (1-10mg/L) do l?tio sobre a atividade e express?o g?nica das ectonucleotidases e AChE.A exposi??o ao l?tio inibiu a hidr?lise de ADP nas concentra??es de 5 e 10mg/L e inibiu a hidr?lise de AMP na concentra??o de 10mg/L quando comparado ao grupo controle. Este mesmo tratamento diminuiu a atividade da AChE na concentra??o de 10mg/L.O l?tio n?o induziu altera??es significativas na an?lise do padr?o de express?o g?nica. No tratamento in vitro, n?o foram observadas altera??es na atividade das ectonucleotidases e AChE. O tratamento com a clomipramina mostrou uma inibi??o na atividade da ecto-5?-nucleotidase na concentra??o de 5 ?M quando comparado ao grupo controle. Na atividade da ADA tamb?m observamos uma inibi??o significativa no tratamento com a clomipramina nas concentra??es de 5 e 10 ?M em fra??es de membrana de c?rebro de peixe-zebra. Entretanto, o tratamento com fluoxetina e citalopram n?o alterou a atividade das ectonucleotidases e ADA no c?rebro do peixe-zebra. Nossos resultados podem contribuir para uma melhor compreens?o da farmacologia dos f?rmacos antidepressivos e a sua intera??o com a neurotransmiss?o colin?rgica e purin?rgica.

O núcleo acumbens (Acb) é envolvido em comportamentos adaptativos e emocionais. A maioria dos neurônios do Acb são neurônios de projeção (MSNs) que contém a fosfoproteína DARPP-32 e são modulados por distintos tipos de interneurônios. Há pouca informação sobre os receptores de glutamato (Glu) expressos no Acb. Este estudo investiga, através de técnicas de imunohistoquímica, a distribuição e co-localização de marcadores do sistema dopaminérgico, dos receptores de Glu do tipo AMPA (GluR1-GluR4) e NMDAR1 e marcadores de interneurônios. Nossos resultados mostram que o Acb possui uma neuroquímica semelhante ao estriado dorsal. Porém, detectamos uma distribuição distinta de alguns dos marcadores no Acb. Os estudos de co-localização revelam que quase todos os neurônios no Acb expressam GluR2/3 ou GluR2. Em contraste, GluR1 e GluR4 são fracamente expressas e co-localizam com parvalbumina. Esses resultados indicam que GluR2 e GluR2/3 são expressas em MSNs DARPP-32+ e na maioria dos interneurônios do Acb enquanto GluR1 e GluR4 são exclusivamente expressas em interneurônios. / The nucleus accumbens is involved in adaptive and emotional behaviors. The majority of neurons in the Acb are projection neurons that express the phosphoprotein DARPP-32 and are modulated by distinct types of interneurons. There is little information about the glutamate receptors expressed in the Acb. This study investigates by immunohistochemical methods the distribution and co-localization of markers of the dopaminergic system, AMPA (GluR1-4) and NMDAR1 type Glu receptor subunits and specific markers of interneurons. Our results show that the neurochemistry of the Acb is similar to that of the dorsal striatum. However, we detected a distinct distribution of some markers in the Acb. Our co-localization studies reveal that almost all neurons of the Acb express GluR2/3 or GluR2. In contrast, GluR1 and GluR4 are weakly expressed and are co-localized with parvalbumin. These results indicate that GluR2 and GluR2/3 are expressed by MSNs DARPP-32+ and by the majority of interneurons of the Acb, whereas GluR1 and GluR4 are exclusively expressed by interneurons.

Fipronil é um inseticida fenilpirazol de amplo espectro, desenvolvido para inibir seletivamente receptores GABA associados a canais de cloreto de insetos; tanto em Medicina Veterinária, como em Agricultura tem sido utilizado para o controle de pragas. Embora vários estudos procurem compreender os mecanismos da toxicidade neuronal dos praguicidas em mamíferos, há poucos relacionados aos efeitos neurocomportamentais. Assim, o presente estudo investigou os efeitos da exposição prolongada de ratos ao fipronil, observando-se alguns comportamentos ligados ao sistema GABAérgico, como atividade no campo aberto, no labirinto em cruz elevado (LCE), bem como na convulsão induzida por picrotoxina e pentilenotetrazol; avaliou-se ainda os níveis cerebrais de alguns neurotransmissores, como GABA, dopamina, noradrenalina, serotonina e seus respectivos metabólitos. Além disso, foram realizadas análises anátomo-histopatológicas em fígado, cérebro e rins dos animais. Ratos Wistar receberam, por via intragástrica (gavage), durante 28 dias um dos seguintes tratamentos: fipronil (0,1; 1,0 ou 10,0 mg/Kg/dia) ou água destilada 1 mL/Kg/dia. Após uma hora da última administração do fipronil ou água destilada, os ratos tiveram seu comportamento avaliado no campo aberto e no LCE com auxílio do sistema computadorizado EthoVision®. Observou-se no campo aberto apenas redução significante do nº de levantamentos nos animais tratados com 10,0 mg/Kg de fipronil, quando comparados com os ratos do grupo controle. No LCE, a exposição prolongada de ratos ao fipronil nas doses de 1,0 e 10,0 mg/Kg provocou redução na distância percorrida pelos animais e o tempo de permanência dos animais nos braços abertos, além de aumentar o tempo de permanência nos braços fechados. Para o cálculo da dose convulsivante mínima, seguiu-se o mesmo protocolo de tratamento, sendo observada diminuição significante na dose de picrotoxina e de pentilenotetrazol necessária para a indução da convulsão em animais tratados com 10,0 mg/Kg fipronil. A determinação dos níveis de neurotransmissores e seus respectivos metabólitos mostrou aumento dos níveis de dopamina no córtex frontal de ratos tratados com 10,0 mg/Kg de fipronil, redução nos níveis de GABA no striatum de ratos tratados com 1,0 mg/Kg de fipronil. Em relação à serotonina houve aumento de seus níveis no córtex frontal de ratos tratados com 1,0 mg/Kg e seu metabólito, ácido 5 (5HIAA), foi observado redução de seus níveis no córtex frontal de ratos tratados com 0,1 e 1,0 mg/kg p.c. de fipronil. No striatum também houve redução de seus níveis em ratos tratados com 0,1 e 1,0 mg/Kg de fipronil. O estudo anátomo-histopatológico revelou que a exposição prolongada ao fipronil pode causar hepatotoxicidade, caracterizada por aumento dos pesos absoluto e relativo do fígado e tumefação celular de hepatócitos. Em conclusão, os resultados mostraram que a exposição de ratos por 28 dias, via gavage, ao fipronil pode causar efeitos comportamentais relacionados a alterações em sistemas centrais de neurotransmissão e também hepatotoxicidade. / Fipronil is a phenylpyrazole insecticide with broad spectrum, developed to selectively inhibit insect GABA-gated chloride channels; both in Veterinary Medicine, and in Agriculture it has been used for the control of nuisances. Although several studies try to understand the mechanism of neuronal toxicity of pesticide in mammalian, there are few studies related to neurobehavioral effects. Thus, the present study investigated the effects of fipronil long term exposure in rats, being observed some behaviors connected to GABAergic system, as activity in open field, in elevated plus maze (EPM), as well as in the seizures induced by picrotoxinin and pentylenotetrazole. In addition, this study determinated the brain levels of some neurotransmitter as GABA, dopamine, noradrenaline, serotonin and metabolic levels and investigated liver, brain and kidney damage. Wistar rats received by intragastric (gavage) way during 28 days one of this treatment: fipronil (0,1, 1,0 or 10,0 mg/Kg) or distilled water; the rats behavior were evaluated in open field and elevated plus maze apparatus with system computer EthoVision®. There was a significant reduction of rearing in open field in rats treated with 10,0 mg/Kg of fipronil when compared with control rats. In the EPM, there was a decrease of distance moved in open arms and increase of time spent in closed arms to rats treated with 1,0 and 10,0 mg/Kg of fipronil when compared to control. It was still noticed the reduction in the time spent in open arms EPM in rats treated with 1,0 and 10,0 mg/Kg of fipronil when compared to control group. To calculate the minimum convulsant dose, was used the same treatment protocol and it was observed a significant reduction in picrotoxinin and pentylenotetrazole necessary dose to induction of seizure in animals treated with fipronil 10,0 mg/Kg. The level determination of neurotransmitters and their metabolites, it was observed the dopamine increasing in forebrain from fipronil treated rats by 10,0 mg/Kg. GABA levels decreased in fipronil treated rats striatum by 1,0 mg/Kg. Serotonin neurotransmitter was increased in fipronil treated rats forebrain by 1,0 mg/Kg to and its metabolite, 5HIAA, it was observed a levels decrease in fipronil forebrain treated rats by 0,1 e 1,0 mg/kg. There was decrease of 5HIAA levels in fipronil treated rats striatum by 0,1 e 1,0 mg/Kg. According to organ analyses, it was observed dose-response liver damage such as swelling liver cells. In conclusion, the data showed that fipronil administered in rats by 28 days caused behavioral effects related to central neurotransmitter alterations and hepatotoxicity.

A ivermectina é uma lactona macrocíclica utilizada para o tratamento de parasitoses na espécie humana e amplamente empregada em medicina veterinária como endectocida. Em mamíferos, diversas evidências indicam que as lactonas macrocíclicas interagem com canais de cloro mediados pelo ácido gama-aminobutírico (GABA). Sabe-se que o sistema GABAérgico está envolvido com a manifestação do comportamento sexual. Assim, no presente trabalho foram estudados, em ratos, os efeitos da ivermectina na coordenação motora, na motivação e no desempenho sexual de machos, bem como no comportamento sexual de fêmeas; além disso, avaliaram-se os níveis séricos de testosterona e as concentrações de diferentes neurotransmissores e seus metabólitos no hipotálamo e estriado, áreas do sistema nervoso central relacionadas, respectivamente, com o comportamento sexual e atividade motora. No presente estudo foram usadas as doses de 0,2 e 1,0 mg/kg, por via intraperitoneal, de uma formulação comercial de ivermectina; estas doses foram escolhidas considerando que a primeira é a dose usualmente empregada terapeuticamente e a segunda baseada em achados prévios que mostraram interferência no comportamento sexual de ratos machos. Os resultados mostraram que a administração de ivermectina em ratos: promoveu prejuízo na coordenação motora de machos; não interferiu na motivação sexual e na ereção peniana de machos; prejudicou o comportamento sexual de ratas; não alterou o peso relativo dos testículos, epidídimos, próstata e vesícula seminal, porém aumentou o peso relativo do fígado; não alterou o índice gonadossomático de machos, bem como não foram observadas alterações no estudo histopatológico dos diferentes órgãos; reduziu os níveis séricos de testosterona de machos; diminuiu os níveis de GABA hipotalâmico e estriatal, bem como reduziu a atividade dos sistemas serotoninérgico e dopaminérgico hipotalâmicos e, no estriado, reduziu a atividade do sistema dopaminérgico. Os resultados foram discutidos considerando a interferência da ivermectina nos sistemas de neurotransmissores central. / Ivermectin is a macrocyclic lactone used for the treatment of parasitic infections in humans and widely used in veterinary medicine as endectocide. In mammals, a number of evidence indicate that interact with the macrocyclic lactones chloride channels mediated by gamma-aminobutyric acid (GABA). It is known that the GABAergic system is involved in the manifestation of sexual behavior. Thus, in the present work were studied in rats, the effects of ivermectin on motor coordination, motivation and sexual performance of males and females in sexual behavior; furthermore, evaluated the serum levels of testosterone and different concentrations of neurotransmitters and their metabolites in the hypothalamus and striatum areas of the central nervous system related, respectively, sexual behavior and motor activity. In the present study doses of 0.2 and 1.0 mg / kg were used, intraperitoneally, a commercial formulation of ivermectin; these doses were chosen considering that the first dose is usually employed therapeutically and the second based on previous findings have shown that interference with sexual behavior of male rats. The results showed that administration of ivermectin in rats: impairment in motor coordination promoted male; did not interfere on the sexual motivation and the penile erection in male; impaired sexual behavior of female rats; did not alter the relative weight of the testes, epididymis, prostate and seminal vesicles, but increased the relative liver weight; did not alter the gonadosomatic index (GSI) of males and no changes were observed in the histopathological study of different organs; reduced serum testosterone levels of male; decreased levels of hypothalamic and striatal GABA and reduced the activity of the serotonergic and dopaminergic systems hypothalamic and the, reduced the activity of the dopaminergic system striatal. The results were discussed considering the interference of ivermectin in central neurotransmission systems.

O glifosato é um herbicida utilizado na agricultura para o controle de plantas daninhas. No Brasil o glifosato é comercializado com vários nomes, dentre eles Roundup®; esses produtos são acrescidos de ingredientes ditos inertes que permitem a penetração do glifosato através da membrana plasmática da planta, potencializando a sua ação, além de propiciar maior estabilidade e potencial de bioacumulação. Considerando que a presença de certas substâncias químicas em formulações comerciais de glifosato pode aumentar sua toxicidade e que há carência de estudos sobre a toxicologia do desenvolvimento com essas formulações, o presente estudo investigou os efeitos da exposição perinatal de ratos ao Roundup®, a fim de avaliar o comportamento e neuroquímica cerebral materna, bem como o desenvolvimento físico e neurocomportamental da prole, desde o nascimento até a idade adulta. Para tanto, ratas prenhes receberam 50, 100 e 150 mg/kg do 15° dia de gestação até o 7° dia da lactação. Os resultados mostraram que o glifosato- Roundup® não alterou o peso materno durante os períodos de exposição ao herbicida e tampouco o consumo de água e ração das ratas, sugerindo ausência de toxicidade materna. Por outro lado, observou-se que o número de filhotes vivos de todos os grupos de ratas expostas ao herbicida foi menor do que aquele das fêmeas do grupo controle. Nas ratas expostas ao glifosato-Roundup® observou-se redução de atividade geral no campo aberto na maior dose, prejuízo no comportamento materno (CM) e no comportamento materno agressivo (CMA), bem como no hipotálamo aumento da atividade do sistema dopaminérgico e redução da atividade do sistema serotoninérgico, enquanto no hipocampo e estriato houve diminuição da atividade do sistema dopaminérgico. Esses achados sugerem que o aumento da atividade do sistema dopaminérgico hipotalâmico, por reduzir a liberação de prolactina, um hormônio essencial para a expressão do CM, prejudicou a manifestação desse comportamento. No mesmo sentido, a serotonina e dopamina por modularem os efeitos da ocitocina, um peptídeo importante no controle e na eliciação do CM e CMA, podem ter contribuído para os presentes achados. Quanto ao estudo dos parâmetros de desenvolvimento físico e neurocomportamental da prole, não foram modificados pela administração do herbicida. No presente trabalho foi avaliada também a atividade geral da prole na infância e na idade adulta, mostrando que as alterações foram pontuais tanto na prole masculina como na feminina, não caracterizando alterações motoras ou emocionais. Quanto ao comportamento de brincar de luta, a administração do glifosato-Roundup® reduziu apenas o pinning tanto de ratos machos como de fêmeas, sem alterar outros parâmetros deste comportamento. A duração e frequência do pinning são consideradas como parâmetros que expressam o início do comportamento social do rato. Desta forma, nestes animais não foram estabelecidos os padrões de comportamento social durante o desenvolvimento, porém aqueles relacionados com o comportamento de luta e sexual foram preservados. Na idade adulta, não foram observadas alterações na interação social de ratos e ratas expostos ao herbicida, ou seja, não promoveu efeitos em longo prazo no comportamento social. Quanto aos achados de neuroquímica cerebral da prole adulta exposta ao herbicida, foram encontradas alterações nos diferentes sistemas de neurotransmissão, contudo a ausência de alterações relevantes na atividade geral e na interação social das proles masculina e feminina adultas, não foi possível especular sobre o envolvimento desses sistemas de neurotransmissão com esses comportamentos. Esses achados em conjunto, mostraram que a exposição perinatal a diferentes doses de glifosato- Roundup® promoveu prejuízo no comportamento materno, os quais foram associados aos sistemas de neurotrnasmissão cerebrais, e na prole, embora não tenham sido observados efeitos no desenvolvimento físico e neurocomportamental, ocorreram alterações comportamentais na infância que se estenderam até a idade adulta. / Glyphosate is a herbicide used in agriculture to control weeds. In Brazil glyphosate is marketed under several names, including Roundup ®. Ingredients considered inert are added to these products in order to allow the penetration of glyphosate across the plasma membrane of the plant, increasing its action, as well as providing greater stability and bioaccumulation potential. Considering that the presence of certain chemicals in commercial formulations of glyphosate may increase its toxicity and that there are insufficient data on the toxicology of development using these formulations, the present study investigated the effects of perinatal exposure of rats to Roundup®, to assess behavior and maternal brain neurochemistry, as well as physical and neurobehavioral development of the offspring from birth to adulthood. To this end, pregnant rats received 50, 100 and 150 mg/kg from the 15th gestation day to the 7th lactation day. The results showed that glyphosate-Roundup® did not alter maternal weight during neither periods of exposure to the herbicide nor the consumption of water and feed the rats, suggesting the absence of maternal toxicity. On the other hand, it was observed that the number of living offspring of all groups of rats exposed to herbicide was smaller than that of the female control group. In rats exposed to glyphosate-Roundup® it was possible to observe a reduction in general activity in the open field at the highest dose, impairment in maternal behavior (CM) and maternal aggressive behavior (CMA), as well as in the hypothalamus there was an increase in the dopaminergic system activity and a reduction of the serotonergic system activity, whereas the hippocampus and striatum showed decreased activity of the dopaminergic system. These findings suggest that the increased activity of the hypothalamic dopaminergic system by reducing the release of prolactin, an essential hormone for the expression of CM, damaged the manifestation of this behavior. Similarly, serotonin and dopamine, which modulate the effects of oxytocin, an important peptide in the control and elicitation of the CM and CMA, may have contributed to the present findings. Regarding the study of the parameters of physical and neurobehavioral offsprings development, no modification was caused by the administration of the herbicide. The present study also evaluated the overall activity of the offspring in childhood and adulthood, showing that the changes were punctual in both male and female offspring in not characterizing motor or emotional changes. Regarding the behavior of play fighting, the presence of glyphosate-Roundup® reduced only the pinning from both male and female rats, without changing other parameters of this behavior. The duration and frequency of pinning are considered parameters which express the beginning of the social behavior of the rats. Thus, during the development of these animals, the patterns of social behavior have not been established, but those related to fighting and sex behavior were preserved. In adulthood, no changes were observed in the social interaction of male and female rats exposed to the herbicide, i. e., it did not promote long-term effects on social behavior. In the present study, considering the findings of brain neurochemistry of adult offspring exposed to the herbicide, it was possible to observe in the hypothalamus an increase in dopamine turnover in both male and female adult offspring and an increased turnover of serotonin only in male offspring. In the hippocampus, the most relevant findings were increased turnover of serotonin in males and in females the opposite effect. In the striatum an increased turnover of serotonin was found in both males and females, and dopamine only in females. Taking these data together and considering the absence of material changes in general activity measured in the open field and social interaction of male and female adult offspring, it is not possible to speculate about the relation of these neurotransmitter systems with these behaviors.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 451666.pdf: 1289575 bytes, checksum: 022edd4e2e930676c57fc69c0dc3e849 (MD5) Previous issue date: 2013-07-24 / Superparamagnetic iron oxide nanoparticles (SPIONs) are of great interest in nanomedicine due to their capability to act simultaneously as a contrast agent in magnetic resonance imaging and as a targeted drug delivery system with good biocompatibility. At present, one of the biggest concerns about the use of SPIONs remains around its toxicity. For this reason, it is important to establish the safe upper limit for each use. In the present study, SPION coated with cross-linked and aminated dextran (CLIO-NH2) were synthesized by the co-precipitation method and characterized by transmission electron microscopy (TEM) and light scattering dynamics. The analysis of the elementary composition of the solution at the end of the synthesis was also performed. The magnetite core size was 5.5 ? 1.4 nm, on a concentration of 10 mg Fe-NPs/ml. We have evaluated the effects of different CLIO-NH2 doses (20, 50, 100, 140 and 200 mg/kg) as a function of time after exposure (one, 16, 24 and 48 hours) on AChE activity and ache expression in zebrafish brain. At tested concentrations, only the animals exposed to 200 mg/kg, and assessed 24 h after administration of the nanoparticles, have shown decreased AChE activity. These values returned to control levels after 48 h of exposition, indicating a transitory toxical effect. The RT-qPCR results suggested that inhibition of brain AChE is not directly related with the transcriptional control, and it was probably due to post-transcriptional events. Once ACh is recognized to play an important role in the regulation of locomotor control, we further evaluated parameters of zebrafish swimming activity. CLIO-NH2 at 200mg/kg, evaluated after 24 h, also impaired all the tested parameters of zebrafish swimming activity, i.e. decreased traveled distance, mean speed, number of line crossings, and turn angle. We further investigated the iron accumulation in zebrafish brain by ICP-MS, and a significant higher level of ferric iron was found in zebrafish brains exposed to CLIO-NH2. In summary, the results presented herein provide further experimental evidence that exposure to high doses of dextran-coated iron oxide nanoparticles can be transiently neurotoxic. / Nanopart?culas superparamagn?ticas de ?xido de ferro (SPIONs) s?o de grande interesse na nanomedicina, devido ? sua capacidade para agir, simultaneamente, como um agente de contraste em imagem por resson?ncia magn?tica e como um sistema de entrega de f?rmacos espec?ficos, possuindo boa biocompatibilidade. Atualmente, uma das maiores preocupa??es com a utiliza??o de SPIONs permanece em torno da sua toxicidade e, por esta raz?o, ? importante estabelecer um limite de seguran?a para sua utiliza??o. Neste estudo, SPIONs revestidas com dextran-aminado (CLIO-NH2) foram sintetizados pelo m?todo de co-precipita??o e caracterizadas por microscopia eletr?nica de transmiss?o (MET) e din?mica de espalhamento de luz. A an?lise da composi??o elementar da solu??o no final da s?ntese foi tamb?m realizada. O tamanho do n?cleo de magnetite foi de 5,5 ? 1,4 nm, com uma concentra??o de 10 mg Fe-NPs/ml. Foram avaliados o efeito de diferentes doses de CLIO-NH2 (20, 50, 100, 140 e 200 mg/kg), ap?s a exposi??o de CLIO-NH2 (em uma, 16, 24 e 48 h), sobre a atividade de AChE e sobre a express?o de ache em c?rebro de peixe-zebra. Nas concentra??es testadas, apenas os animais expostos a 200 mg/kg, testados 24 h ap?s a administra??o das nanopart?culas, demonstraram diminui??o da atividade da AChE. Quarenta e oito horas ap?s exposi??o a CLIO-NH2 os valores voltaram aos n?veis controle, indicando um efeito t?xico transit?rio. Os resultados de RT-qPCR sugerem que a inibi??o da AChE no c?rebro n?o est? diretamente relacionada com o controle da transcri??o e que esta relacionada com a modula??o de eventos p?s-transcricionais. Uma vez que a ACh ? reconhecida por desempenhar um papel importante na regula??o do controle locomotor, foram avaliados par?metros da atividade da nata??o do peixe-zebra. CLIO-NH2, ? 200 mg/kg, ap?s 24 h de tratamento, tamb?m prejudicou todos os par?metros testados de comportamento de nado, ocorrendo diminui??o da dist?ncia percorrida, velocidade, n?mero de cruzamentos de linha e ?ngulo de virada. Ainda foi analisado o ac?mulo de ferro no c?rebro de peixe-zebra, por ICP-MS, onde um n?vel significativamente maior de ferro f?rrico foi encontrado nos c?rebros de peixe-zebra expostos a CLIO-NH2 nas mesmas condi??es experimentais (200 mg/kg e 24 h de exposi??o). Concluindo, os resultados apresentados fornecem evid?ncias de que doses elevadas de nanopart?culas de ?xido de ferro, revestidas com dextran-aminado, podem produzir neurotoxicidade transit?ria, coincidente com n?veis cerebrais elevados de ferro, bem como as altera??es comportamentais.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 457610.pdf: 991749 bytes, checksum: d91843d27688e0357561bae1a127e7a1 (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 / This study investigated whether the spinal or systemic treatment with the lipid resolution mediators resolvin D1 (RvD1), aspirin-triggered resolvin D1 (AT-RvD1) and resolvin D2 (RvD2) might interfere with behavioral and neurochemical changes in the mouse fibromyalgia-like model induced by reserpine. Acute administration of AT-RvD1 and RvD2 produced a significant inhibition of mechanical allodynia and thermal sensitization in reserpine-treated mice, whereas RvD1 was devoid of effects. A similar antinociceptive effect was obtained by acutely treating animals with the reference drug pregabalin. Noteworthy, the repeated administration of AT-RvD1 and RvD2 also prevented the depressive-like behavior in reserpine-treated animals, according to assessment of immobility time, although the chronic administration of pregabalin failed to affect this parameter. The induction of fibromyalgia by reserpine triggered a marked decrease of dopamine and serotonin (5-HT) levels, as examined in total brain, spinal cord, cortex and thalamus. Reserpine also elicited a reduction of glutamate levels in total brain, and a significant increase in the spinal cord and thalamus. Chronic treatment with RvD2 prevented 5-HT reduction in total brain, and reversed the glutamate increases in total brain and spinal cord. Otherwise, AT-RvD1 led to a recovery of dopamine levels in cortex, and 5-HT in thalamus, whilst it diminished brain glutamate contents. Concerning pregabalin, this drug prevented dopamine reduction in total brain, and inhibited glutamate increase in brain and spinal cord of reserpine-treated animals. Our data provide novel evidence, showing the ability of D-series resolvins AT-RvD1, and mainly RvD2, in reducing painful and depressive symptoms allied to fibromyalgia in mice. / O presente estudo investigou o poss?vel efeito do tratamento central ou sist?mico com os mediadores lip?dicos de resolu??o da inflama??o, Resolvina D1 (RvD1), RvD1 ativada pela aspirina (AT-RvD1) e Resolvina D2 (RvD2) sobre mudan?as comportamentais e neuroqu?micas em um model de fibromialgia induzido por reserpina em camundongos. A administra??o aguda de AT-RvD1 e RvD2 produziu um efeito inibit?rio significativo sobre a alod?nia mec?nica e a hipersensibiliza??o t?rmica nos animais tratados com reserpina, sendo que nenhum efeito foi observado quando os animais foram tratados com RvD1. A administra??o aguda de pregabalina, f?rmaco de refer?ncia para o tratamento da fibromialgia, apresentou um efeito antinociceptivo similar ?quele observado para AT-RvD1 e RvD2. Interessante, a administra??o repetida e sist?mica de AT-RvD1 e RvD2 tamb?m preveniu o comportamento depressivo nos animais que receberam reserpina, de acordo com a avalia??o do tempo de imobilidade, enquanto que a administra??o cr?nica de pregabalina n?o apresentou efeito sobre esse par?metro. A indu??o de fibromialgia pela reserpina produziu uma redu??o marcante dos n?veis de dopamina e serotonina (5-HT), quando avaliados no c?rebro total, medula espinhal, c?rtex e t?lamo. A reserpina tamb?m promoveu uma redu??o nos n?veis de glutamato no c?rebro total e, um aumento significativo na medula espinhal e no t?lamo. O tratamento cr?nico com RvD2 preveniu a redu??o de 5-HT no c?rebro total e, reverteu o aumento do glutamato no c?rebro total e medula espinhal. Por outro lado, AT-RvD1 restaurou os n?veis de dopamina no c?rtex e de 5-HT no t?lamo, ao mesmo tempo em que, reduziu os n?veis de glutamato no c?rebro. Em rela??o ? pregabalina, ela preveniu a redu??o de dopamina no c?rebro total e inibiu o aumento do glutamato no c?rebro e na medula espinhal dos animais tratados com reserpina. Nossos resultados fornecem novas evid?ncias quanto aos efeitos da AT-RvD1 e, principalmente RvD2 na redu??o da dor e, ainda, da depress?o, no modelo de fibromialgia induzida por em camundongos.

Made available in DSpace on 2015-04-14T14:51:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 391140.pdf: 3891847 bytes, checksum: a692cff7af22978c19d6e2954a337d26 (MD5) Previous issue date: 2007-05-16 / A depress?o ? a manifesta??o mais comum dos dist?rbios afetivos. ? uma das doen?as mais debilitadoras e causa problemas tanto para o indiv?duo quanto para a sociedade e, se n?o for tratada, pode levar ao aumento da morbidade e mortalidade. O uso de f?rmacos antidepressivos ? a base dos tratamentos para depress?o. Os inibidores seletivos da recapta??o de serotonina, como a fluoxetina e a sertralina, e os antidepressivos tric?clicos, nortriptilina e clomipramina, s?o constantemente utilizados no tratamento para a depress?o. Evid?ncias t?m demonstrado o importante papel desempenhado pelo ATP e a adenosina no sistema nervoso central. O ATP pode ser armazenado e co-liberado juntamente com outros neurotransmissores, tais como a noradrenalina e a serotonina. O ATP extracelular pode ser hidrolisado at? adenosina pela a??o de um grupo de ecto-nucleotidases. Estas ecto-enzimas promovem a convers?o enzim?tica de ATP, controlando os n?veis deste nucleot?deo e do seu nucleos?deo adenosina. Dentro do grupo das ecto-nucleotidases, podemos destacar a fam?lia das NTPDases (Nucleos?deo trifosfato difosfoidrolases) e a ecto-5?- nucleotidase. Considerando que: (i) a adenosina exerce um importante papel neuromodulador, (ii) o ATP pode ser co-liberado com serotonina e noradrenalina e (iii) as ecto-nucleotidases representam a principal rota de forma??o de adenosina extracelular atrav?s do catabolismo do ATP, torna-se importante avaliar o efeito de f?rmacos antidepressivos sobre a via das ecto-nucleotidases. Fluoxetina, sertralina, nortriptilina e clomipramina foram testadas no tratamento in vitro, nas concentra??es de 100, 250 e 500 ?M no soro e em sinaptossomas de hipocampo e c?rtex cerebral de ratos. A hidr?lise de ATP e ADP foram inibidas de maneira dose-dependente no tratamento in vitro realizado com os quatro f?rmacos em sinaptosomas de hipocampo e c?rtex cerebral de ratos, mas a hidr?lise de AMP n?o foi alterada. O tratamento in vitro em soro de ratos n?o afetou nenhuma das atividades enzim?ticas estudadas. Fluoxetina e nortriptilina foram testadas no tratamento in vivo, na dose de 10mg/Kg. O tratamento agudo (1 hora ap?s a administra??o) com nortriptilina provocou uma inibi??o na hidr?lise de ATP em soro de ratos. Entretanto, o tratamento cr?nico (14 dias) com ambas as drogas provocou uma inibi??o na atividade das NTPDases e da ecto-5?-nucleotidase em soro. O tratamento agudo com fluoxetina n?o alterou a atividade das enzimas em sinaptossomas de hipocampo e c?rtex cerebral. Entretanto, o tratamento agudo com nortriptilina levou a um aumento na hidr?lise de ADP no c?rtex cerebral e induziu uma diminui??o na hidr?lise de ATP e ADP no hipocampo. O tratamento cr?nico com fluoxetina provocou uma inibi??o na hidr?lise de ATP no hipocampo e no c?rtex cerebral e aumentou a hidr?lise de ADP e AMP no c?rtex cerebral. Ap?s tratamento cr?nico com nortriptilina, houve uma diminui??o da hidr?lise de ATP no hipocampo, mas foi observado um aumento nas atividades destas enzimas no c?rtex cerebral. A express?o g?nica das NTPDases e ecto-5?-nucleotidase foi alterada ap?s os tratamentos agudo e cr?nico com fluoxetina e nortriptilina em hipocampo e c?rtex cerebral de ratos. Os resultados demonstram que estes f?rmacos antidepressivos podem influenciar as enzimas envolvidas na forma??o do neuromodulador adenosina, sugerindo que o sistema purin?rgico pode ser alvo dos efeitos neuroqu?micos promovidos por estes f?rmacos

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-11-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-11T03:25:31Z : No. of bitstreams: 1 Publico-00387.pdf: 2025016 bytes, checksum: 1d807dcd8112ef82a43a87d394716763 (MD5) / Objetivos: 1- Investigar o efeito imediato (01 sessão) e mediato (10 sessões) da acupuntura no tratamento da síndrome de apnéia-hipopnéia obstrutiva do sono (SAHOS) de grau moderado. 2- Avaliar a especificidade da técnica, comparando acupuntura manual, eletroacupuntura 2 Hz e eletroacupuntura 10 Hz. 3- Avaliar o envolvimento da serotonina neste mecanismo de ação da acupuntura. Método: Um ensaio clínico, randomizado, controlado, simples cego, foi conduzido no Departamento de Fisiologia, no Setor de Distúrbios do Sono, no Setor de Medicina Chinesa-Acupuntura e no Laboratório de Rim e Hormônios da Universidade Federal de São Paulo - Escola Paulista de Medicina, no período de Janeiro de 2004 a outubro de 2006. Foram recrutados 43 pacientes previamente diagnosticados clínica e polissonograficamente como portadores de SAHOS moderada {índice de apnéia-hipopnéia (IAH) > 15/hora < 30/hora}. Os pacientes foram randomizados em quatro grupos: grupo controle (CTRL), grupo acupuntura manual, grupo eletroacupuntura 2 Hz e grupo eletroacupuntura 10 Hz. O grupo controle não recebeu qualquer tipo de intervenção. Os grupos acupuntura manual e eletroacupuntura receberam tratamento por 05 semanas (2 aplicações por semana). Todos os pacientes foram avaliados pré e pós-tratamento através de exame polissonográfico e da dosagem de serotonina. A dosagem de serotonina foi feita por HPLC-ED (Cromatografia Líquida acoplada a Detecção Eletroquímica). Resultados: Em relação ao efeito imediato (01 sessão) da acupuntura, houve diminuição significativa do IAH (P=0,006; P=0,009), dos eventos respiratórios (P=0,012; P=0,005), dos microdespertares (P=0,046; P=0,05) e da saturação de O2 (P=0,006; P=0,035) nos grupos acupuntura manual e eletroacupuntura 10 Hz, antes e depois de uma aplicação de acupuntura. O índice de apnéia (P=0,028) e o índice de hipopnéia (P=0,046) tiveram diminuição significativa apenas no grupo eletroacupuntura 10 Hz. Não houve alterações significativas nos grupos eletroacupuntura 2 Hz e grupo controle quando foram comparados polissonograficamente antes e após a sessão de acupuntura. Quando todos os grupos foram comparados ao grupo controle, apenas o grupo eletroacupuntura 10 Hz apresentou diminuição significativa do IAH. Em relação ao efeito mediato (10 sessões) da acupuntura houve diminuição significativa do tempo de início do sono (P=0,011; P=0,005), do IAH (P=0,011; P=0,006), do índice de apnéia (P=0,042; P=0,005) dos eventos respiratórios (P=0,011; P=0,009) e dos microdespertares (P=0,011; P=0,021) nos grupos acupuntura manual e eletroacupuntura 10 Hz, antes e depois do tratamento. O índice de hipopneia (P=0,021) teve diminuição significativa apenas no grupo eletroacupuntura 10 Hz. O tempo de inicio do sono (P=0,005; P=0,005) dimimuiu significativamente tanto no grupo controle quanto no grupo eletroacupuntura 2 Hz. A exceção deste dado, nenhum outro evento se modificou significativamente nestes grupos. Quando todos os grupos foram comparados ao grupo controle, apenas o grupo eletroacupuntura 10 Hz apresentou diminuição significativa do IAH e dos microdespertares (P=0,004; P=0,008). Em relação ao envolvimento da serotonina no mecanismo de ação imediato da acupuntura na SAHOS Moderada, não observamos significância estatística entre grupos quando comparados ao Controle: Acupuntura Manual (P=0,7674), Eletroacupuntura 2 Hz (P=0,9849) e Eletroacupuntura 10 Hz (P=0,1042). Em relação ao envolvimento da serotonina no mecanismo de ação mediato da acupuntura na SAHOS Moderada o grupo Acupuntura Manual apresentou significância estatística quando comparado ao grupo Controle (P=0,0067) e o grupo Eletroacupuntura 10 Hz, apresentou tendência à significância estatística quando comparado ao grupo Controle (P=0,0984). A não significância estatística destes resultados parece estar relacionada à variabilidade inicial da 5HT e ao pequeno tamanho da amostra. Conclusões: A acupuntura manual e a eletroacupuntura 10 Hz são mais eficazes que a eletroacupuntura 2 Hz em melhorar o IAH e outros eventos respiratórios do sono de pacientes portadores de SAHOS Moderada. Esta eficácia foi observada tanto no efeito imediato (01 sessão de acupuntura), como no efeito mediato (10 sessões de acupuntura). Os resultados preliminares relacionados à serotonina, já apontam para uma direção neurofisiológica que possa justificar a eficácia da acupuntura no tratamento de pacientes portadores da SAHOS. / STUDY OBJECTIVES: 1 - To investigate the immediate (single session) and mediate (ten sessions) effect of acupuncture over the sleep pattern of patients with moderate obstructive sleep hypopnea apnea (OSHA). 2 - To compare manual acupuncture (MA) and electroacupuncture (EA) with different stimulation frequencies (2 Hz and 10 Hz). 3 - To determine the role of endogenous serotonin in this mechanism. SETTING: Department of Physiology, Sleep Division of Department of Psychobiology, Chinese Medicine Division and Department of Nephrology, Federal University of São Paulo, Brazil. INTERVENTIONS: Acupuncture applied in true acupoints accompanied by needle manipulations or electroacupunture 2 hz and 10 Hz for 30 minutes in all patients, except control group pacients. DESIGN: In a randomized, placebo-controlled and single blind study, fourty-three patients with an apnea-hypopnea index (AHI) of 15 to 30 per hour were randomly assigned to 4 groups: control group, MA group, EA 2Hz group and EA 10Hz group. The control group received no intervention. The MA group, EA 2Hz group and EA 10Hz group received treatment for five weeks (02 acupuncture aplications per week). All the patients were evaluated pre-treatment and pos-treatment by polissomnography recordings and assessment of serotonin levels. The 5HT measurement was made with a HPLC-ED (Liquid Chromatografy coupled with Electrochemical Detection). MEASUREMENTS AND RESULTS: 1 – Immediate effect: when compared before and after treatment, the AHI (P=0,006; P=0,009), respiratory events (P=0,012; P=0,005), microarousals (P=0,046; P=0,05) and mean O2 saturation (P=0,006; P=0,035) showed significant improvement in both the manual and electroacupuncture 10 Hz respectively. The apnea index (P=0,028) and the hipopneia index (P=0,046) showed significant improvement only in EA 10 Hz group. There were no significant changes in the electroacupuncture 2 Hz as well as in the control group when compared before and after (first and second for controls) PSG recordings. When compared each group and control group, AHI significantly decreased only in the EA 10 Hz. 2 – Mediate effect: When compared before and after treatment, sleep onset (P=0,011;P=0,005), AHI (P=0,011;P=0,006), apnea index (P=0,042;P=0,005), respiratory events (P=0,011;P=0,009) and microarousals (P=0,011;P=0,021 ) significantly improved in MA and EA 10 Hz respectively. Hipopnea-index (P=0,021) decreased only in the EA 10Hz. Latency for sleep onset (P=0,005;P=0,005) decreased in both EA 2Hz and control group. Except for this change, there were no other significant changes in EA 2 Hz, or in control group after treatment. When compared to the control group the only significant differences were AHI and microarousals that were decreased in EA 10 Hz group (P=0,004;P=0,008). As concerned to the levels of seric serotonin we could not evidence an involvement of this neurotransmitter (as measured in blood) with the immediate effects of acupuncture for OSHA (MA vs. controls [P=0,7674], EA 2 Hz vs controls [P=0,9849]) despite a tendency for a difference for EA 10 Hz as compared to controls (P=0,1042). With regard to an effect of mediate acupuncture in moderate OSHA we found that seric serotonin levels were signficantly different form controls for MA (P=0,0067) with a tendency for group EA 10 Hz (P=0,0984). The lack of more robust differences for seric serotonin levels might have been influcenced by a smaller numeber of subjects as that required for this sort of evaluations. Conclusions: MA and EA 10 Hz have greater efficacy as compared to EA 2 Hz in improving AHI and other respiratory events in patients with moderate OHSA. This effect was shown to hold for both in the immediate (1 acupuncture session) as in the mediate (10 sessions) acupuncture application. The preliminary serotonin results indicate a possible mechanistic link between acupuncture treatment and its beneficial effects for the treatment of patients with moderate OHSA. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações