Die vorliegende Arbeit diente vor allem der Untersuchung, ob es im Gehirn vergleichbare Lymphabflusswege wie im übrigen Körper gibt und falls dies zutrifft, wo diese Abflusswege des Gehirns verlaufen. Denn für größere Proteine und Moleküle müsste es eine geeignete Route geben, um das ZNS verlassen zu können, da diese zum Passieren der Bluthirnschranke (BHS) zu groß sind. In dieser Arbeit konnte erstmals gezeigt werden, dass es auch eine Art lymphatischen Drainageweg aus der Hypophyse (HVL = Adenohypophyse) zu den tiefen und superfizialen, zervikalen Lymphknoten gibt. Daneben konnten auch die Abflussrouten des CSF und über die Nase bestätigt werden. Darüber hinaus wurde versucht zu ermitteln, wie schnell über die jeweiligen Drainagemöglichkeiten extrazelluläre Substanzen und Flüssigkeiten (Liquor) aus dem Gehirn gelangen und weiter in die peripheren Lymphknoten des Halses abtransportiert werden können. Hierbei sollte auch dargestellt werden, ob diese Mechanismen nur passiven Vorgängen zuzuordnen sind, oder ob es auch Hinweise auf aktive, zellulär gesteuerte Prozesse gibt. Wahrscheinlich spielen hier Makrophagen, die hirneigene Proteine und Antigene aufnehmen und in Lymphknoten transportieren und präsentieren, eine wesentliche Rolle. Obwohl es die BHS gibt, die als eine physiologische Barriere- und Filterfunktion zwischen dem Blutkreislauf und dem ZNS fungiert, existieren dennoch autoimmun bedingte Krankheitsbilder des ZNS wie die Autoimmun-Hypophysitis oder die MS. Es ist daher wahrscheinlich, dass es möglicherweise auch mehrere Mechanismen (passiv und aktiv) geben könnte, über die hirneigene Proteine und Substanzen aus dem Gehirn zu den Lymphknotenstationen gelangen können. Über das Lymphsystem wäre wiederum eine Aktivierung des Immunsystems naheliegend, sodass die aus dem ZNS entstammenden Proteine eine Immunantwort initiieren und so autoimmune Krankheitsprozesse einleiten könnten. Für das Verständnis von Erkrankungen wie der MS, der Autoimmunhypophysitis oder aber auch des Morbus Alzheimer wären genauere Kenntnisse über die funktionellen Hintergründe eines „hirneigenen lymphatischen Systems“ von großer klinischer und therapeutischer Relevanz. Auf der Grundlage der Ergebnisse dieser Arbeit könnte das Entstehen von Autoimmunerkrankungen des ZNS und eben auch der Hypophyse eine Erklärung finden, da auch Antigene dem Immunsystem über die beschriebenen Abflusswege zu den peripheren Lymphknotenstatioen des Halses gelangen und präsentiert werden können. Weiterhin besteht die Vermutung, dass zusätzlich auch Makrophagen aktiv durch ihre antigenpräsentierenden Eigenschaften an solchen Immunreaktionen beteiligt sind, jedoch sehr wahrscheinlich in verzögerter Weise im Vergleich zu den schnelleren passiven Drainagerouten des ZNS.

Com base nos conceitos da obra de Bakhtin e seu Círculo, defendemos a tese de que a hipertextualidade pode ser considerada uma modalidade de relação dialógica entre enunciados colocados em rede, tanto em meio digital como impresso, por algum mecanismo de remissão. Considerando as coerções de cada meio e partindo do pressuposto de que a internet é capaz de abrigar um conjunto de esferas, selecionamos reportagens de divulgação científica da FSP e da FO, no período de 2000 a 2008, para compor o corpus da pesquisa. O modelo teórico-metodológico adotado foi formulado a partir da proposta de análise Metalinguística apresentada por Bakhtin em Problemas da Poética de Dostoiévski (2010 [1963]), e desenvolveu-se por meio dos seguintes passos: primeiramente, uma contextualização sócio-histórica dos enunciados; em seguida, a descrição e análise dos elementos constitutivos do gênero reportagem conteúdo temático, forma composicional e estilo e, finalmente, a observação das características dos meios impresso e digital. A análise revelou não somente os efeitos semântico-axiológicos encontrados nas relações dialógicas hipertextuais entre os enunciados, mas também levou-nos a delimitar os planos e mecanismos de remissão em que tais relações ocorrem. Os nós remissivos, que podem ser de natureza verbal ou verbo-visual, auxiliam na formação de uma complexa rede dialógica hipertextual no interior de um enunciado e na sua relação com enunciados externos, favorecendo a criação de diferentes conteúdos temáticos em cada meio. Em relação ao gênero discursivo, pudemos compreender que a sua conclusibilidade também difere de acordo com as relações dialógicas estabelecidas no jornal impresso ou no jornal digital. Enquanto a FSP admite reportagens mais extensas formadas por enunciados fragmentados ou mesmo pelo conjunto de vários enunciados, seja em sua dimensão verbal ou verbo-visual, os enunciados veiculados na FO possuem caráter mais autônomo, não retomando as mesmas relações dialógicas hipertextuais do jornal impresso. / Based on the concepts of Bakhtin and his Circle, we defend the thesis that hypertextuality is a kind of dialogic relation between utterances, both in digital and printed media. Considering the constraints of each media and assuming that the Internet holds a set of spheres that are overlapped by the digital sphere, we have selected reports of scientific divulgation of Folha de S. Paulo and Folha Online in the period between 2000 to 2008, to compose the corpus of the research. The theoretical and methodological model adopted was inspired by the metalinguistic analysis formulated by Bakhtin, considering the following steps: first, a deep socio-historical contextualization of the utterances, the description and analysis of the constitutive elements of the genres thematic content, compositional form and style - and the observation of the characteristics of each media. The analysis revealed not only the axiological-semantic effects found in the dialogical hypertextual relations between utterances, but also led us to refine the plans and mechanisms of remission in which such relations occur. The remissive nodes, which may be verbal or verbovisual, assist in the formation of a dialogical hypertextual complex within an utterance and its relationship with external utterances, favoring the creation of different thematic content in each media. Regarding the genre, we understand that its conclusibility also differs according to the dialogical relations established in printed or online newspaper. While FSP allows more extensive reports consisted of fragmented utterances or even a whole set of statements, either verbal or verbovisual, the statements conveyed in FO are more autonomous, not generating the same dialogical hypertextual relations.

Células reticulares fibroblásticas (FRCs, gp38+ e CD31-) e células duplo negativas (DNCs, gp38- e CD31-) são células estromais encontradas em órgãos linfoides secundários, como linfonodos. Enquanto as FRCs têm sido amplamente estudadas, pouco se sabe ainda sobre DNCs. Apesar da função estrutural das FRCs nos linfonodos já estar bem estabelecida, estudos recentes indicam que as FRCs também desempenham um papel fundamental em processos imunológicos, por exemplo, migração celular, ativação e qualidade da resposta imune, além da participação na tolerância periférica. Outra célula estromal em constante estudo são as células-tronco mesenquimais (CTMs), principalmente encontradas na medula óssea. Estas células compartilham similaridades, como por exemplo; são células estromais encontradas em órgãos linfoides, apresentam morfologia e características semelhantes quando cultivadas in vitro e estão envolvidas na resposta imune por mecanismos semelhantes. As CTMs são provenientes de um órgão linfoide primário, cuja função principal não está relacionada à resposta imunológica, entretanto, de acordo com inúmeros trabalhos, estas células possuem capacidade de interferir na ativação de várias células do sistema imunológico. Portanto, nossa hipótese é de que as FRCs e DNCs, que se encontram em um órgão linfoide secundário, cuja função principal remete a resposta imunológica, apresentem também um papel regulador, descrito na literatura como tolerância periférica e contração de uma resposta imunológica já estabelecida. Em nosso estudo mostramos que FRCs e DNCs foram isoladas a partir de linfonodos humanos e devidamente caraterizadas. Evidenciamos que FRCs e DNCs atendem todos os critérios mínimos propostos pela sociedade internacional de terapia celular para serem consideradas células-tronco estromais. Além disso, mostramos que FRCs e DNCs influênciam a proliferação e a expressão de moléculas de homing em linfócitos alogênicos in vitro. Portanto, contribuimos de forma inédita para o entendimento funcional das FRCs e DNCs, visto que estudos em humanos envolvendo estas células são escassos / Fibroblastic reticular cells (FRCs, gp38+ e CD31-) and double-negative cells (DNCs, gp38- e CD31-) are stromal cells found in secondary lymphoid organs, such as lymph nodes. While the FRCs has been widely studied, little is known about DNCs. Despite the structural function of FRCs on lymph nodes is well established, recent studies indicate that FRCs also play a key role in immunological processes, for example, cell migration, immune response activation and quality, beyond their involvement in peripheral tolerance. Another stromal cell type in constant study are mesenchymal stem cells (MSCs), mainly found in bone marrow. These cells share similarities with FRCs and DNCs, for example; they are estromal cells found in lymphoid organs, they present similar morphology and characteristics when cultured in vitro and they are involved in the immune response by similar mechanisms. MSCs are derived from a primary lymphoid organ which the major function is not related to immune response, but according to numerous studies these cells have the capacity of the interfere on activation of various immune cells. Consequently, our hypothesis is that FRCs and DNCs, usually found in secondary lymphoid organ, display immune regulatory roles, which were described in the literature as peripheral tolerance and immune response contraction. In our study we showed that FRCs and DNCs were isolated from human lymph nodes and adequately characterized. We evidenced that FRCs and DNCs meet all minimum criteria proposed by the International Society of Cell Therapy to be considerate a stromal stem cell. Therefore, we contributed in an unpublished manner to the functional understanding of FRCs and DNCs, since human studies involving these cells are scarce

A brucelose causada pela B. canis constitui uma infecção sistêmica e zoonótica que acomete principalmente os cães, causando problemas reprodutivos. O diagnóstico da infecção é difícil, sendo necessária a associação do diagnóstico clínico aos métodos laboratoriais diretos e indiretos para sua confirmação. Um dos problemas relativos ao diagnóstico laboratorial está relacionado à ausência de marcadores que possibilitem a identificação acurada de cães em ausência de bacteremia. A partir do exposto, foi realizado um estudo com o objetivo de avaliar o desempenho de testes laboratoriais diretos e indiretos como marcadores da infecção por B. canis em cães e determinar a combinação de testes que possibilite o diagnóstico da brucelose canina com maiores valores de sensibilidade e especificidade. Foram coletadas amostras de sangue, soro e aspirado de linfonodo de 92 cães, sem distinção de sexo, idade ou raça, incluindo cães reprodutores e não reprodutores. A hemocultura e a reação em cadeia pela polimerase (PCR) foram previamente realizadas nas amostras de sangue e, com base nos resultados, os 92 animais foram divididos em dois grupos: infectados (n=37) e não infectados (n= 55). Em seguida, as amostras de aspirado de linfonodo foram submetidas à PCR e ao cultivo microbiológico e as amostras de soro foram testadas por um ensaio imunocromatográfico (EIC). A partir dos resultados obtidos, a sensibilidade e especificidade diagnóstica dos testes foram calculadas utilizando os grupos infectados e não infectados, respectivamente. O coeficiente Kappa foi usado para calcular a concordância entres os testes laboratoriais e suas combinações. A proporção de resultados positivos foi de 40,2% (37/92) para os testes diretos em amostras de sangue, 29% (27/92) e 25% (23/92) para PCR e cultivo em amostras de aspirado de linfonodo, respectivamente, e 43% (40/92) para o EIC. A concordância entre os testes variou de moderada a quase perfeita. A sensibilidade e especificidade diagnóstica foram, respectivamente, 65% e 95% para PCR em amostras de aspirado de linfonodo, 62% e 100% para o cultivo microbiológico em amostras de aspirado de linfonodo e 92% e 89% para o EIC. A PCR em amostras de aspirados de linfonodos apresentou maior sensibilidade em relação ao cultivo aplicado a estas amostras, sendo uma alternativa ao diagnóstico microbiológico. A associação entre os testes de PCR em amostras de aspirados de linfonodos e de sangue e o EIC possibilitou um aumento da sensibilidade diagnóstica, por possibilitar a identificação de cães na ausência e na presença de bacteremia, com maior rapidez. / Brucellosis caused by B. canis is a systemic and zoonotic infection characterized by prolonged bacteremia that affects mainly dogs causing reproductive problems. The diagnosis of the infection is quite difficult, being necessary the association of the clinical diagnosis with direct and indirect laboratory methods to confirm the infection. The main drawback regarding the laboratory diagnosis relies on the lack of markers that allow the accurate identification of non bacteremic dogs. From the above, a study was carried out to evaluate the performance of direct and indirect laboratory tests as markers for B. canis infection in dogs and to determine the combination of tests that allows the diagnosis of the infection with higher values of sensitivity and specificity. Samples of blood, serum and lymph node aspirates were collected from 92 dogs, regardless the sex, age or breed, including pet and breeding dogs. All the dogs were tested using culturing and the polymerase chain reaction (PCR) in blood samples and, based on the results, they were divided into two groups: infected (n = 37) and non-infected (n = 55). Lymph node aspirates were tested through PCR and microbiological culturing, and serum samples using an immunochromatographic assay (EIC). The infected and uninfected groups were used to calculate, respectively, the sensitivity and specificity of the tests. The agreement between the tests was calculated using Kappa coefficient. The proportion of positive results was 40.2% (37/92) for the direct tests in blood samples, 29% (27/92) and 25% (23/92) for PCR and lymph node culturing, respectively, and 43% (40/92) for the EIC. The agreement between the tests ranged from moderate to near perfect. The sensitivity and specificity was, respectively, 65% and 95% for PCR in lymph node aspirates, 62% and 100% for lymph node culturing, and 92% and 89% for EIC. The PCR in lymph node aspirates showed a higher sensitivity when compared to the lymph node culturing, being an alternative to the microbiological diagnosis. The association between PCR in blood and lymph node aspirates and the EIC enabled an increased sensitivity in the diagnosis with the identification of non-bacteremic dogs more rapidly.

Global shutter pixels are indispensable for applications wherein the minimisation of motion artefacts is of critical importance. However, these pixels are more complex than the common rolling shutter type pixels and require some form of per-pixel storage. They are almost invariably reliant upon metal light shielding in order to protect their in-pixel memory nodes and this prevents them from taking advantage of some of the latest developments in CMOS image sensor technology. Backside-illumination is the most prominent example of such a technology. The greater sensitivity afforded by the reduced optical stack height is indispensable for many applications, particularly in the mobile market where form factor and power consumption are constrained. The design challenge is to exploit these advantages offered by backside-illumination without making use of metal shielding of the per-pixel memory. The research in this thesis covers the design, implementation and characterisation of a back-illuminated voltage-domain global shutter pixel. The pixel architecture is a novel 10 transistor-per-pixel architecture with dual independent in-pixel storage nodes. Beginning with the pixel architecture, the design is developed through TCAD-driven photodiode and pixel layout co-optimisation. The behaviour of pixels with differential parasitic light sensitivity (PLS) behaviour is analysed in greater detail than previously reported and a prediction model is developed based upon this. The 10T pixel is characterised and found to have excellent PLS of -73:5 dB native and -82:5 dB differential PLS at 940 nm. The dual in-pixel storage enables the pixel to operate either in a low noise correlated double sampling mode with differential PLS, or in an exposure-bracketed high dynamic range imaging (HDR) mode. This HDR mode is successfully demonstrated and yields substantial enhancement of the pixel dynamic range.

INTRODUÇÃO: A endometriose é uma doença crônica de natureza benigna e de alta prevalência, definida pela presença de tecido endometrial fora da cavidade uterina. Dentre os principais sintomas, destacam-se a dor pélvica crônica, dismenorreia e infertilidade. Clinicamente, apresenta-se de três formas distintas: endometriose peritoneal ou superficial, endometriose ovariana - endometrioma - e endometriose profunda (EP). A EP apresenta um padrão de comportamento semelhante ao das doenças malignas, com capacidade de crescimento infiltrativo e destrutivo em diferentes sítios. Lesões endometrióticas já foram identificadas em linfonodos pélvicos, evidenciando a disseminação linfática das células endometrióticas. Em neoplasias malignas, as quimiocinas e seus receptores desempenham papel soberano no processo de metástase e na disseminação linfática das células tumorais. OBJETIVOS: 1) avaliar a expressão das quimiocinas que no câncer estão relacionadas ao processo de metástase - CXCL12-CXCR4, CCL19/CCL21-CCR7 - na EP do compartimento posterior da pelve e nos respectivos linfonodos-sentinela (LS); 2) avaliar a concentração dessas quimiocinas no líquido peritoneal (LP) de pacientes com e sem endometriose; 3) avaliar a expressão da proteína BAF250a, relacionada à transformação maligna, na endometriose, com ênfase na EP do compartimento posterior da pelve. MÉTODOS: 123 pacientes foram incluídas neste estudo. Nós realizamos a coloração imuno-histoquímica para avaliar a expressão das quimiocinas - ligantes e receptores - nas lesões de EP retovaginal/do compartimento posterior da pelve (n=27), nos respectivos LS (n=27) e no endométrio de pacientes-controle sem endometriose (n=20); a concentração das quimiocinas no LP foi avaliada por meio da tecnologia multiplex - Luminex® xMAP® Technology - em um subgrupo de pacientes com (n=36) e sem (n=27) endometriose; a possibilidade de transformação maligna também foi avaliada por meio da imuno-histoquímica para analisar a expressão da proteína BAF250a dentre as lesões de endometriose - EP retovaginal (n=30), lesões de endometriose nos LS (n=7), endometriose ovariana (n=20), sarcoma do estroma endometrial extragenital (SEEE) de intestino (n=2) e no endométrio de pacientes sem endometriose (n=20). RESULTADOS: o padrão de coloração IHQ das quimiocinas relacionadas à metástase no câncer foi caracterizado pela primeira vez na EP do compartimento posterior da pelve e nas lesões de endometriose acometendo os LS; a expressão de CXCR4 foi diretamente relacionada ao tamanho da lesão de EP; CCL19, CCL2 e CXCL8 apresentaram concentrações no LP estatisticamente maiores em mulheres com endometriose comparadas aos controles sem doença e a associação delas aumentou a probabilidade de identificar pacientes com endometriose; além disso, nós identificamos a perda clonal da expressão da BAF250a em 36% (9/25) dos casos de EP, 40% (2/5) das lesões de endometriose nos LS, 30% (6/20) dos endometriomas e em 25% (5/20) no endométrio tópico das pacientes-controle. CONCLUSÕES: quimiocinas parecem estar envolvidas no mecanismo de disseminação da endometriose e algumas mostraram potencial para serem utilizadas como marcadores da doença; a perda clonal da expressão da proteína BAF250a na EP possa talvez representar um marcador de risco para transformação maligna nessas lesões. O valor desses achados precisa ser ainda esclarecido em futuras análises / INTRODUCTION: Endometriosis is a chronic disease of benign nature and of high prevalence, defined by the presence of endometrial tissue outside the uterine cavity. Among the main symptoms are highlighted chronic pelvic pain, dysmenorrhea and infertility; clinically, it may appear in three distinct ways: peritoneal endometriosis, ovarian endometriosis - endometriomas - and deep infiltrating endometriosis (DIE). DIE presents a behavioral pattern in many ways similar to that of malignancies, as capacity of infiltrative and destructive growth in different sites. Endometriotic lesions have already been identified in pelvic lymph nodes, showing the possibility of lymphatic dissemination of endometriotic cells. In malignancies, chemokines play a sovereign role in the process of metastasis and lymphatic spread of tumor cells. OBJECTIVES: 1) to evaluate the expression of cancer-related chemokines - CXCL12-CXCR4, CCL19/CCL21-CCR7 - in rectovaginal DIE (or endometriosis of the posterior compartment of the pelvis) and the respective pelvic sentinel lymph node (PSLN); 2) to evaluate the concentration levels of those chemokines in the peritoneal fluid (PF) of patients with and without endometriosis; 3) to evaluate the expression of protein BAF250a, related to malignant transformation, in endometriosis, with emphasis in rectovaginal DIE. METHODS: 123 patients were enrolled in this study. We performed immunohistochemical staining to assess the expression of all chemokines - ligands and receptors - in rectovaginal DIE (n=27), PSLN (n=27) and eutopic endometrium (EE) from patients without endometriosis as controls (n=20); chemokine concentration in the PF was assessed with multiplexing technology - Luminex® x-MAP® Technology - in a subgroup of patients with (n=36) and without (n=27) endometriosis; the possibility of malignant transformation was also assessed by means of immunohistochemistry to evaluate the expression of BAF250a protein among endometriosis lesions - rectovaginal DIE (n=30), compromised PSLN (n=7), ovarian endometriosis (n=20), extragenital endometrial stromal sarcoma (EESS) affecting the bowel (n=2) and EE from controls without the disease (n=20). RESULTS: the staining pattern of cancer metastasis-related chemokines was characterized for the first time in rectovaginal DIE and lesions compromising the PSLN; CXCR4 expression was directly correlated with the size of the DIE lesions; CCL19, CCL2 and CXCL8 presented higher statistically significant PF concentrations in women with endometriosis compared with controls and their association improved the likelihood of identifying patients with endometriosis; furthermore, we identified the clonal loss of BAF250a expression in 36% (9/25) of DIE, 40% (2/5) of endometriotic lesions in the PSLN, 30% (6/20) of endometriomas and in 25% (5/20) of EE from controls. CONCLUSIONS: chemokines might be involved in the mechanism of dissemination of endometriosis and some have shown potential to be used as markers of the disease; clonal loss of protein BAF250a in DIE might represent a marker for malignant transformation in these lesions. The value of these findings needs to be clarified in further analysis

Com base nos conceitos da obra de Bakhtin e seu Círculo, defendemos a tese de que a hipertextualidade pode ser considerada uma modalidade de relação dialógica entre enunciados colocados em rede, tanto em meio digital como impresso, por algum mecanismo de remissão. Considerando as coerções de cada meio e partindo do pressuposto de que a internet é capaz de abrigar um conjunto de esferas, selecionamos reportagens de divulgação científica da FSP e da FO, no período de 2000 a 2008, para compor o corpus da pesquisa. O modelo teórico-metodológico adotado foi formulado a partir da proposta de análise Metalinguística apresentada por Bakhtin em Problemas da Poética de Dostoiévski (2010 [1963]), e desenvolveu-se por meio dos seguintes passos: primeiramente, uma contextualização sócio-histórica dos enunciados; em seguida, a descrição e análise dos elementos constitutivos do gênero reportagem conteúdo temático, forma composicional e estilo e, finalmente, a observação das características dos meios impresso e digital. A análise revelou não somente os efeitos semântico-axiológicos encontrados nas relações dialógicas hipertextuais entre os enunciados, mas também levou-nos a delimitar os planos e mecanismos de remissão em que tais relações ocorrem. Os nós remissivos, que podem ser de natureza verbal ou verbo-visual, auxiliam na formação de uma complexa rede dialógica hipertextual no interior de um enunciado e na sua relação com enunciados externos, favorecendo a criação de diferentes conteúdos temáticos em cada meio. Em relação ao gênero discursivo, pudemos compreender que a sua conclusibilidade também difere de acordo com as relações dialógicas estabelecidas no jornal impresso ou no jornal digital. Enquanto a FSP admite reportagens mais extensas formadas por enunciados fragmentados ou mesmo pelo conjunto de vários enunciados, seja em sua dimensão verbal ou verbo-visual, os enunciados veiculados na FO possuem caráter mais autônomo, não retomando as mesmas relações dialógicas hipertextuais do jornal impresso. / Based on the concepts of Bakhtin and his Circle, we defend the thesis that hypertextuality is a kind of dialogic relation between utterances, both in digital and printed media. Considering the constraints of each media and assuming that the Internet holds a set of spheres that are overlapped by the digital sphere, we have selected reports of scientific divulgation of Folha de S. Paulo and Folha Online in the period between 2000 to 2008, to compose the corpus of the research. The theoretical and methodological model adopted was inspired by the metalinguistic analysis formulated by Bakhtin, considering the following steps: first, a deep socio-historical contextualization of the utterances, the description and analysis of the constitutive elements of the genres thematic content, compositional form and style - and the observation of the characteristics of each media. The analysis revealed not only the axiological-semantic effects found in the dialogical hypertextual relations between utterances, but also led us to refine the plans and mechanisms of remission in which such relations occur. The remissive nodes, which may be verbal or verbovisual, assist in the formation of a dialogical hypertextual complex within an utterance and its relationship with external utterances, favoring the creation of different thematic content in each media. Regarding the genre, we understand that its conclusibility also differs according to the dialogical relations established in printed or online newspaper. While FSP allows more extensive reports consisted of fragmented utterances or even a whole set of statements, either verbal or verbovisual, the statements conveyed in FO are more autonomous, not generating the same dialogical hypertextual relations.

INTRODUÇÃO: A endometriose é uma doença crônica de natureza benigna e de alta prevalência, definida pela presença de tecido endometrial fora da cavidade uterina. Dentre os principais sintomas, destacam-se a dor pélvica crônica, dismenorreia e infertilidade. Clinicamente, apresenta-se de três formas distintas: endometriose peritoneal ou superficial, endometriose ovariana - endometrioma - e endometriose profunda (EP). A EP apresenta um padrão de comportamento semelhante ao das doenças malignas, com capacidade de crescimento infiltrativo e destrutivo em diferentes sítios. Lesões endometrióticas já foram identificadas em linfonodos pélvicos, evidenciando a disseminação linfática das células endometrióticas. Em neoplasias malignas, as quimiocinas e seus receptores desempenham papel soberano no processo de metástase e na disseminação linfática das células tumorais. OBJETIVOS: 1) avaliar a expressão das quimiocinas que no câncer estão relacionadas ao processo de metástase - CXCL12-CXCR4, CCL19/CCL21-CCR7 - na EP do compartimento posterior da pelve e nos respectivos linfonodos-sentinela (LS); 2) avaliar a concentração dessas quimiocinas no líquido peritoneal (LP) de pacientes com e sem endometriose; 3) avaliar a expressão da proteína BAF250a, relacionada à transformação maligna, na endometriose, com ênfase na EP do compartimento posterior da pelve. MÉTODOS: 123 pacientes foram incluídas neste estudo. Nós realizamos a coloração imuno-histoquímica para avaliar a expressão das quimiocinas - ligantes e receptores - nas lesões de EP retovaginal/do compartimento posterior da pelve (n=27), nos respectivos LS (n=27) e no endométrio de pacientes-controle sem endometriose (n=20); a concentração das quimiocinas no LP foi avaliada por meio da tecnologia multiplex - Luminex® xMAP® Technology - em um subgrupo de pacientes com (n=36) e sem (n=27) endometriose; a possibilidade de transformação maligna também foi avaliada por meio da imuno-histoquímica para analisar a expressão da proteína BAF250a dentre as lesões de endometriose - EP retovaginal (n=30), lesões de endometriose nos LS (n=7), endometriose ovariana (n=20), sarcoma do estroma endometrial extragenital (SEEE) de intestino (n=2) e no endométrio de pacientes sem endometriose (n=20). RESULTADOS: o padrão de coloração IHQ das quimiocinas relacionadas à metástase no câncer foi caracterizado pela primeira vez na EP do compartimento posterior da pelve e nas lesões de endometriose acometendo os LS; a expressão de CXCR4 foi diretamente relacionada ao tamanho da lesão de EP; CCL19, CCL2 e CXCL8 apresentaram concentrações no LP estatisticamente maiores em mulheres com endometriose comparadas aos controles sem doença e a associação delas aumentou a probabilidade de identificar pacientes com endometriose; além disso, nós identificamos a perda clonal da expressão da BAF250a em 36% (9/25) dos casos de EP, 40% (2/5) das lesões de endometriose nos LS, 30% (6/20) dos endometriomas e em 25% (5/20) no endométrio tópico das pacientes-controle. CONCLUSÕES: quimiocinas parecem estar envolvidas no mecanismo de disseminação da endometriose e algumas mostraram potencial para serem utilizadas como marcadores da doença; a perda clonal da expressão da proteína BAF250a na EP possa talvez representar um marcador de risco para transformação maligna nessas lesões. O valor desses achados precisa ser ainda esclarecido em futuras análises / INTRODUCTION: Endometriosis is a chronic disease of benign nature and of high prevalence, defined by the presence of endometrial tissue outside the uterine cavity. Among the main symptoms are highlighted chronic pelvic pain, dysmenorrhea and infertility; clinically, it may appear in three distinct ways: peritoneal endometriosis, ovarian endometriosis - endometriomas - and deep infiltrating endometriosis (DIE). DIE presents a behavioral pattern in many ways similar to that of malignancies, as capacity of infiltrative and destructive growth in different sites. Endometriotic lesions have already been identified in pelvic lymph nodes, showing the possibility of lymphatic dissemination of endometriotic cells. In malignancies, chemokines play a sovereign role in the process of metastasis and lymphatic spread of tumor cells. OBJECTIVES: 1) to evaluate the expression of cancer-related chemokines - CXCL12-CXCR4, CCL19/CCL21-CCR7 - in rectovaginal DIE (or endometriosis of the posterior compartment of the pelvis) and the respective pelvic sentinel lymph node (PSLN); 2) to evaluate the concentration levels of those chemokines in the peritoneal fluid (PF) of patients with and without endometriosis; 3) to evaluate the expression of protein BAF250a, related to malignant transformation, in endometriosis, with emphasis in rectovaginal DIE. METHODS: 123 patients were enrolled in this study. We performed immunohistochemical staining to assess the expression of all chemokines - ligands and receptors - in rectovaginal DIE (n=27), PSLN (n=27) and eutopic endometrium (EE) from patients without endometriosis as controls (n=20); chemokine concentration in the PF was assessed with multiplexing technology - Luminex® x-MAP® Technology - in a subgroup of patients with (n=36) and without (n=27) endometriosis; the possibility of malignant transformation was also assessed by means of immunohistochemistry to evaluate the expression of BAF250a protein among endometriosis lesions - rectovaginal DIE (n=30), compromised PSLN (n=7), ovarian endometriosis (n=20), extragenital endometrial stromal sarcoma (EESS) affecting the bowel (n=2) and EE from controls without the disease (n=20). RESULTS: the staining pattern of cancer metastasis-related chemokines was characterized for the first time in rectovaginal DIE and lesions compromising the PSLN; CXCR4 expression was directly correlated with the size of the DIE lesions; CCL19, CCL2 and CXCL8 presented higher statistically significant PF concentrations in women with endometriosis compared with controls and their association improved the likelihood of identifying patients with endometriosis; furthermore, we identified the clonal loss of BAF250a expression in 36% (9/25) of DIE, 40% (2/5) of endometriotic lesions in the PSLN, 30% (6/20) of endometriomas and in 25% (5/20) of EE from controls. CONCLUSIONS: chemokines might be involved in the mechanism of dissemination of endometriosis and some have shown potential to be used as markers of the disease; clonal loss of protein BAF250a in DIE might represent a marker for malignant transformation in these lesions. The value of these findings needs to be clarified in further analysis

This dissertation presents methods of extending the network lifetime of multi-hop wireless sensor networks (WSNs) through routing that uses cooperative transmission (CT), referred to as cooperative routing. CT can have a signal-to-noise ratio (SNR) advantage over non-CT schemes through cooperative diversity and simple aggregation of transmit power, and one of its abilities is to extend the communication range of a wireless device using this SNR advantage. In this research, we use the range-extension ability of CT as a tool to mitigate the energy-hole problem of multi-hop WSNs and extend the network lifetime. The main contributions of this research are (i) an analytical model for a cooperative routing protocol with a deployment method, (ii) cooperative routing protocols that can extend the network lifetime, and (iii) formulating the lifetime-optimization problem for cooperative routing. The analytical model developed in this research theoretically proves that, in a situation where non-CT routing cannot avoid the energy-hole problem, our CT method can solve the problem. PROTECT, a CT method based on the analytical model, provides a very simple way of doing cooperative routing and can improve the lifetime of non-CT networks significantly. REACT, a cooperative routing protocol that uses the energy information of nodes, overcomes some of the limitations of PROTECT and can be applied to any existing non-CT routing protocol to improve the network lifetime. Using REACT and analytical approaches, we also show that cooperative routing can be beneficial in multi-hop energy-harvesting WSNs. By formulating and solving the lifetime-optimization problem of cooperative routing, which requires a much more sophisticated formulation than that of non-CT routing, we explore the optimal lifetime bounds and behaviors of cooperative routing. Finally, we study and design online cooperative routing methods that can perform close to the optimal cooperative routing.

In this study, we examined survival for patients with micrometastases greater than 0.2mm but less than 2mm (pN1a) in comparison to node-negative (pN0) and macrometastatic node-positive (pN1b) patients. Data for patients diagnosed from 1988 to 1998 with TNM pathological T1-2 stage, pN0, and pN1a-b breast cancer with no distant metastasis was provided by Dr. P. Truong from BC Cancer Agency. Results obtained from the Kaplan-Meier estimators and the multivariable Cox Proportional Hazards Model analyses suggested that micrometastatic node-positive patients had worse survival than the node-negative patients, but better survival in comparison to the macrometastatic node-positive patients. Increasing number of positive nodes and larger values of the ratio of positive to excised nodes were significantly associated with worse survival.