INTRODUCCIÓN Y OBJETIVOS: La causa fundamental de la trombosis en la policitemia vera y la trombocitemia esencial es el aumento de la viscosidad sanguínea secundaria a la eritrocitosis así como el incremento del número de plaquetas y las alteraciones funcionales de las mismas. Sin embargo, estudios recientes sugieren un posible papel al respecto de los granulocitos. Se desconoce si, al igual que en la PV y la TE, los pacientes con mielofibrosis primaria tienen un riesgo aumentado de trombosis. El objetivo de la presente tesis consiste en analizar la activación de los granulocitos, las plaquetas y la interacción leucocito-plaqueta en pacientes con SMPC con y sin trombosis a fin de contribuir al conocimiento de los mecanismos que intervienen en la patogenia de la trombosis en dichos enfermos.En este contexto, nos planteamos realizar tres trabajos de investigación con los siguientes objetivos:1. Analizar la activación de los granulocitos y la interacción leucocito-plaqueta en pacientes con PV, con y sin trombosis del eje esplenoportal o síndrome de Budd-Chiari, a fin de contribuir al conocimiento de los mecanismos que intervienen en la patogenia de la trombosis en dichos enfermos. 2. Determinar la incidencia de trombosis en los pacientes con MFP, comparándola con la de la población general, y analizar los factores de riesgo para su aparición.3. Investigar si los pacientes con MFP presentan una activación leucocitaria, plaquetaria, endotelial y de la coagulación similar a la existente en la PV y la TE. 4. Determinar si en la MFP la posible sobreexpresión de dichos parámetros de activación se correlaciona con la presencia de la mutación del gen JAK2.RESUMEN TRABAJO 1:La policitemia vera (PV) se caracteriza por una intensa proliferación de la serie eritroide y, a veces, de la megacariocítica y granulocítica, siendo las complicaciones trombóticas la causa fundamental de morbilidad y mortalidad en estos pacientes. Dentro de las trombosis de la PV, las que afectan a las venas suprahepáticas (síndrome de Budd-Chiari, SBC) o a las del eje esplenoportal (TP) se encuentran entre las complicaciones más graves de la enfermedad, siendo, de hecho, la PV la principal causa de este tipo de trombosis.La causa fundamental de la trombosis en la PV es el aumento de la viscosidad sanguínea, debido al incremento en el número de hematíes y plaquetas, junto a las alteraciones funcionales de éstas. Sin embargo, estudios recientes sugieren un posible papel de los granulocitos. Así, se ha descrito un aumento de la activación leucocitaria en los pacientes con PV, demostrado por un incremento en la expresión del antígeno CD11b en la membrana de los neutrófilos y de la fosfatasa alcalina granulocitaria, así como del contenido de elastasa celular y plasmática. En estos enfermos se observó asimismo un aumento de ciertos marcadores plasmáticos de hipercoagulabilidad, en concreto, el complejo trombina-antitrombina, el fragmento 1+2 de la protrombina (F1+2) y el dímero-D. Con la finalidad de dilucidar los mecanismos involucrados en la génesis del SBC y la TP de los pacientes con PV, en el presente trabajo de investigación se estudió la expresión de CD11b granulocitario, el metabolismo oxidativo de los neutrófilos y el porcentaje de complejos leucocito-plaqueta circulantes en 17 pacientes afectos de PV que habían presentado SBC o TP. Como grupos control se estudiaron 16 pacientes con PV sin ningún antecedente de trombosis, 20 pacientes con SBC/TP en los que se había descartado la existencia de un síndrome mieloproliferativo crónico concomitante y 20 individuos sanos. Los resultados obtenidos mostraron que la expresión del antígeno CD11b granulocitario, el metabolismo oxidativo de los neutrófilos y el porcentaje de complejos leucocito-plaqueta circulantes eran significativamente más altos en los pacientes con PV que en los pacientes sin síndrome mieloproliferativo o los controles sanos. Además, la expresión de CD11b granulocitario, tanto basal como tras estímulo con F-MLP, fue significativamente más elevada en los pacientes con PV y trombosis que en los pacientes con PV sin trombosis. Estos resultados sugieren que la activación leucocitaria, y en concreto la sobreexpresión del antígeno CD11b, pueden desempeñar un papel en la patogenia del SBC y la TP en la PV. RESUMEN TRABAJO 2:La policitemia vera (PV), la trombocitemia esencial (TE) y la mielofibrosis primaria (MFP) son síndromes mieloproliferativos crónicos cromosoma Filadelfia negativos que comparten ciertas características clínicas y biológicas. En este sentido, el reciente descubrimiento de la mutación V617F del gen JAK2 en el 95% de los pacientes con PV y en la mitad de los enfermos con TE y MFP ha venido a apoyar la agrupación de estas tres entidades en una posición nosológica común.Desde el punto de vista clínico, dos de estos SMPC, la PV y la TE, se asocian a un riesgo aumentado de trombosis, siendo las complicaciones trombóticas la principal causa de morbilidad y mortalidad en estos pacientes. Así, en torno al 40% de los pacientes con PV y al 30% de los enfermos con TE presentan trombosis, bien en el momento del diagnóstico o a lo largo de la evolución de la enfermedad.Con respecto a la MFP, no existen trabajos realizados en series amplias en los que se haya estudiado de forma específica la incidencia real de trombosis y los factores de riesgo asociados a la aparición de dicha complicación. A partir de estudios realizados en series de escaso tamaño y de la observación de que los pacientes con MFP podían presentar trombosis tras la esplenectomía, algunos autores han sugerido que los pacientes con MFP podrían tener un mayor riesgo de trombosis. Sin embargo, el aumento en la incidencia de trombosis podría estar en relación con la edad avanzada de la mayoría de los pacientes con MFP, por lo que podría no existir una diferencia real con respecto a la población general. Por otro lado, se ha referido en la MFP que la presencia de la mutación V617F de JAK2 se asocia a un mayor riesgo trombótico, lo cual sugiere que, al igual que en la PV y la TE, los mecanismos involucrados en la patogénesis de la trombosis descritos en estas enfermedades también podrían intervenir en la MFP.El objetivo del presente estudio fue determinar la frecuencia y el tipo de trombosis en la MFP, así como los factores asociados a su aparición. Para ello se revisaron las historias clínicas de 155 pacientes diagnosticados de forma consecutiva en el servicio de Hematología del Hospital Clínic. Con un seguimiento mediano de 4,2 años, se observaron un total de 31 complicaciones trombóticas (19 arteriales y 12 venosas) en 18 pacientes. En 6 enfermos la trombosis fue simultánea al diagnóstico de MFP o la precedió en pocos meses, mientras que en 14 la trombosis constituyó una complicación que apareció en el curso evolutivo de la enfermedad. Con respecto a la población general, los pacientes con MFP presentaron un riesgo significativamente incrementado de presentar trombosis venosa profunda y accidentes vasculares cerebrales. La trombocitosis, la presencia de factores de riesgo cardiovascular y la fase celular de la mielofibrosis fueron las variables que se asociaron de forma significativa a un riesgo mayor de trombosis en el análisis multivariado. La probablidad actuarial de trombosis a los 5 años fue del 9,6% para la serie global, 19,4% para los pacientes con plaquetas > 450x109/L, 17,4% para los pacientes con algún factor de riesgo vascular y 14,9% para los pacientes con mielofibrosis en fase celular. Estos resultados indican que los pacientes con MFP presentan un riesgo incrementado de desarrollar complicaciones trombóticas, siendo el riesgo más alto en las formas hiperproliferativas de la enfermedad y en los pacientes con factores de riesgo cardiovascular. RESUMEN TRABAJO 3:En la PV y la TE se ha demostrado la existencia de un aumento en los marcadores de activación leucocitaria y plaquetaria, correlacionándose el grado de activación de algunos de estos marcadores con la presencia de la mutación V617F de JAK2 y el antecedente de trombosis. El hecho de que las tres enfermedades compartan una etiopatogenia común, a partir de la adquisición de la mutación de JAK2, y que recientemente hayamos descrito que en la MFP existe también un aumento de complicaciones trombóticas sugieren que en esta enfermedad podría existir asimismo una sobreexpresión de dichos marcadores de activación. Con la finalidad de determinar si en la MFP existe un aumento en la activación leucocitaria, plaquetaria, endotelial y de la coagulación, se estudió una cohorte constituida por 26 pacientes afectos de MFP y un grupo control formado por 22 sujetos sanos. Las parámetros evaluados incluyeron la determinación de la P-selectina (basal y tras estímulo con agonistas plaquetarios), la expresión del antígeno CD11b granulocitario, los complejos leucocito-plaqueta circulantes y la concentración plasmática de P-selectina, CD40L, factor tisular, trombomodulina, fragmento 1+2 de la protrombina (F1+2) y dímero-D. Los pacientes con MFP mostraron una expresión de P-selectina basal más elevada y un porcentaje mayor de complejos monocito-plaqueta que los controles sanos, siendo las diferencias estadísticamente significativas. La expresión de CD11b en neutrófilos y monocitos fue significativamente más alta en los pacientes con MFP JAK2 positiva que en los pacientes con MFP JAK2 negativa o en los controles. Además, la concentración plasmática de trombomodulina y de F1+2 fue significativamente más alta en la MFP que en los individuos sanos, mostrando, a su vez, los pacientes con la mutación un valor de F1+2 significativamente mayor que los pacientes sin la mutación. De los anteriores resultados se puede concluir que los pacientes con MFP presentan parámetros de activación leucocitaria, plaquetaria, endotelial y de la coagulación similares a los observados en la PV y la TE y que algunos de estos parámetros se correlacionan con la presencia de la mutación V617F del gen JAK2. CONCLUSIONES:1. La expresión del antígeno CD11b granulocitario está notablemente incrementada en los pacientes con PV que presentan síndrome de Budd-Chiari o trombosis del eje esplenoportal. Dicha alteración podría intervenir en la patogenia de la trombosis de la PV al facilitar la adhesión de los granulocitos al endotelio y las plaquetas. 2. En comparación con la población general, los pacientes con MFP presentan un riesgo aumentado de presentar trombosis venosas profundas e infarto cerebral. 3. En los sujetos con MFP el riesgo de trombosis es mayor en aquellos con formas hiperproliferativas de la enfermedad y en los que presentan factores de riesgo cardiovascular concomitantes.4. Los pacientes con MFP presentan datos de activación leucocitaria, plaquetaria, endotelial y de la coagulación similares a los previamente descritos en los enfermos con PV y TE. 5. En la MFP la presencia de la mutación V617F del gen JAK2 se asocia a una sobreexpresión del antígeno CD11b y a una concentración plasmática elevada del fragmento 1+2 de la protrombina.

L'arteritis de cèl·lules gegants (ACG) és una vasculitis sistèmica de caràcter granulomatós que afecta vasos de calibre mitjà i gran. Per aprofundir en els mecanismes que intervenen en el desenvolupament de la hiperplasia intimal i la inflamació en l'ACG, vam dissenyar un nou mètode d'obtenció de cèl·lules miointimals (HTAMC) a partir de biòpsies d'artèries temporals dels pacients. Vam analitzar l'efecte de PDGF-AB, FGF-2, VEGF, EGF, TGFβ, CCL2, IL-6 i IL-1β sobre la proliferació i migració de les HTAMC. El PDGF va ser el principal agent mitogènic, seguit pel FGF-2. Respecte a la migració, només el PDGF i l'EGF van demostrar una acció quimiotàctica. Probablement el comportament d'aquestes cèl·lules in vivo és el resultat d'un balanç de diferents estímuls, per tant, caldrà plantejar-se el disseny de teràpies dirigides i combinades.Donat que el PDGF va ésser el factor que més influencia el comportament de les HTAMC, vam estudiar els efectes de l'imatinib mesylate (Gleevec®), un inhibidor del receptor del PDGF. Vam demostrar que l'imatinib bloqueja les vies de senyalització del PDGF, i conseqüentment, inhibeix la proliferació i la migració de les HTAMC estimulades amb PDGF. També vam estudiar altres funcions del PDGF i vam observar que incrementa l'expressió dels col·làgens tipus I i III i també augmenta la producció de fibronectina en les HTAMC. L'imatinib va inhibir l'estimulació en la producció d'aquestes proteïnes de matriu extracel·lular. D'altra banda, vam demostrar que el PDGF estimulava la secreció de CCL2 i d'angiogenina en les HTAMC i que l'imatinib contrarestava també aquests efectes. Donat que no es disposa d'un model animal de la malaltia, el cultiu de seccions d'artèria temporal sobre Matrigel® és un mètode que ens permet analitzar tota la complexitat d'aquest sistema, ja que conté tots els tipus cel·lulars de l'artèria més l'infiltrat inflamatori. Als set dies, s'inicia el creixement de les HTAMC fins a formar un cultiu confluent. L'imatinib inhibeix el creixement de les HTAMC a partir de l'artèria. Aquests resultats in vitro i ex vivo són encoratjadors demostrant que l'imatinib podria ser terapèuticament útil per contrarestar el procés inflamatori i el desenvolupament de la hiperplàsia intimal que es produeix en les artèries en l'ACG, però només un assaig clínic podria comprovar la utilitat de l'imatinib in vivo.En el segon estudi ens vam plantejar esbrinar quin és el paper de l'endotelina (ET) en l'ACG. Primerament, vam quantificar els nivells d'ET en el plasma dels pacients i van concloure que els pacients que patien fenòmens isquèmics tenien significativament més ET circulant que els que no tenien aquestes complicacions. A les biòpsies d'artèria temporal, els pacients van presentar nivells més alts de totes les proteïnes del sistema (ET-1, ECE-1 i ambdós receptors A i B). Mentre que a nivell d'expressió d'ARNm, els pacients tenien nivells més baixos de tots els components. Davant d'aquesta regulació negativa de tot el sistema, ens vam plantejar l'existència d'un mecanisme de retroalimentació negativa degut a l'excés d'ET. Els experiments in vitro amb cèl·lules endotelials i miointimals van demostrar que l'ET no regula negativament la seva pròpia expressió. En canvi, el PDGF i l'IL1β van regular negativament l'expressió de l'ARNm de l'ET en HTAMC.Als pacients tractats durant 8 dies de mitjana amb glucocorticoides, el tractament d'elecció de l'ACG, va disminuir l'ECE-1 i ETAR però no van disminuir els nivells d'ET-1, que és la molècula amb activitat funcional vasoconstrictora. Les nostres dades experimentals indiquen que el PDGF i l'endotelina poden estar implicats en la progressió de les lesions arterials dels pacients amb ACG i pensem que aquests resultats poden ser útils pel disseny d'assaigs clínics de teràpies més dirigides. / Giant Cell Arteritis (GCA) is a chronic inflammatory disease involving large and medium-sized vessels. Vascular remodeling in response to inflammation leads to intimal hyperplasia resulting in lumen occlusion and ischemia of supplied tissues. To gain a better understanding of the mechanisms leading to vascular occlusion in GCA, we developed a system to obtain and culture myointimal cells from temporal arteries (HTAMC) in order to assess the effects of various mediators on proliferation, migration and extracellular matrix production. Among the factors tested, PDGF exhibited the strongest activity in our system. Given that imatinib mesylate is an inhibitor of the PDGF receptor, we tested the effect of this compound in our model. We found that imatinib inhibited HTAMC biologic responses related to the development of intimal hyperplasia. Our findings suggest that imatinib might be a therapeutic option to limit occlusive vasculopathy in large-vessel vasculitis.Fifteen to 20% of our patients develop vascular occlusive events often preceded by transient ischemia. The aims of the second study were to investigate the expression of the endothelin (ET) system in GCA lesions, to assess its relationship with the development of ischemic complications, and to analyze the effects of glucocorticoid treatment on this system.Plasma ET was significantly elevated in GCA patients with ischemic complications. ET-1, endothelin converting enzyme (ECE-1) and both ET receptors (ETAR and ETBR) were increased in temporal arteries from GCA patients compared to controls. Intriguingly, mRNA expression of ET-1, ECE-1 and both receptors was significantly reduced in GCA patients. In order to investigate mechanisms underlying these results, we performed in vitro studies with endothelial cells and HTAMC. ET did not downregulate its own expression. In contrast, PDGF and IL-1β decreased ET expression by HTAMC. Glucocorticoid treatment for 8 days did not efficiently result in decreased ET concentration in tissue. In conclusion, the expression of the ET system components is increased at the protein level in GCA lesions creating a microenvironment prone to development of vasoconstrictive occlusive events which may contribute to ischemic complications. Recovery induced by glucocorticoids is not complete, indicating persistent exposure to the effects of ET during initial treatment.

DEL PROYECTO:Las enfermedades cardiovasculares constituyen la principal causa de muerte en los países desarrollados. Su impacto en las enfermedades sistémicas, como la Artritis Reumatoide y el Lupus ha sido ampliamente estudiado. Su papel en el síndrome de Sjögren es desconocido.El objetivo de nuestro estudio fue analizar la prevalencia y relevancia clínica de la enfermedad cardiovascular en una amplia serie de pacientes no seleccionados con SSp. Se incluyeron 505 pacientes consecutivos diagnosticados de SSp entre 1980 y 2007 fueron evaluados. Analizamos la prevalencia de los factores de riesgo cardiovascular, ateroesclerosis subclíncia (evaluado mediante ecografía-Doppler en arterias carótidas), LSB (evaluado mediante RMN cerebral) y los características clínicas de la enfermedad cardiovascular. Se comparó con un grupo control apareado por edad y sexo. La edad media fue de 57 años. El 80% presentaban algún factor de riesgo cardiovascular. Estos pacientes presentaban menor frecuencia de inmunidad positiva (FR, anti-Ro/SS-A, anti-La/ SS-B), en comparación con los pacientes sin factores de riesgo. La eco-Doppler carotídea se realizó en 58 pacientes, en 42 (79%) se objetivaron placas de ateroma. Tras un seguimiento medio de 9 años, 42 pacientes (11%), 37 mujeres y 5 varones, desarrollaron algún evento cardiovascular (48 totales): 37 coronarios y 11 cerebrovasculares, con un tiempo medio de seguimiento de 8.63 años. En el 90% de los episodios la edad era >60 años.La enfermedad cardiovascular debe ser considerada como una de las principales comorbilidades asociadas al SSp. / PROJECT SUMMARY:Cardiovascular diseases are the leading cause of death in developed countries. The impact on systemic diseases such as rheumatoid arthritis and lupus has been extensively studied. Its role in Sjögren's syndrome (SS) is unknown.The aim of our study was to assess the prevalence and clinical relevance of cardiovascular disease in a large series of unselected patients with primary Sjögren's syndrome (pSS).We included 505 consecutive patients diagnosed with pSS between 1980 and 2007 were evaluated. We analyzed the prevalence of cardiovascular risk factors, atherosclerosis subclíncia (evaluated by Doppler ultrasound in carotid arteries), LSB (as assessed by brain MRI) and clinical features of disease cardiovascular. It was compared with a control group matched by age and sex. The mean age was 57 years. 80% had a cardiovascular risk factor. These patients had lower frequency of positive immunity (FR, anti-Ro/SS-A, anti-La / SS-B) compared with patients without risk factors. The carotid Doppler ultrasound was performed in 58 patients, 42 (79%) plaques objectified. After a mean of 9 years, 42 patients (11%), 37 women and 5 men, developed a cardiovascular event (48 total): 37 coronary and 11 strokes, with a mean follow up of 8.63 years. In 90% of cases age > 60 years.Cardiovascular disease should be considered as a major comorbidities associated with pSS.

En aquesta tesi es presenten un seguit de treballs on s'estudien aspectes patogènics de diferents taupaties tals com l'estrès oxidatiu, la fosforil·lació de la proteína tau, la malfunció de la degradació proteosomal, l'acúmul de factors de transcripció en les inclusions pròpies d'aquestes malalties i el truncatge i degradació de proteïnes.L'objectiu general de la tesi has estat el d'esbrinar els components proteics que, a més de la proteína tau, es troben segrestats en les inclusions de tau en les diferents taupaties. Les diferents taupaties estudiades han estat la malaltia d'Alzheimer, la paràlisi supranuclear progressiva, la malaltia de Pick i la malaltia dels grans argiròfils.La tesi mostra com la majoria de procesos neurodegenratius estudiats són compartits per totes aquestes malalties. / The aim of this thesis has been focused on the study of the common factors that may lead to neuronal degeneration in a bunch of the most frequent tauopathies. We studied oxidative stress, tau phosphorylation and truncation, glia activation, and protein trapping inside tau inclusions.We have seen that most of the neurodegenerative factors studied are quite similar among tauopathies, suggesting a common pathogenic process.

Tesi realitzada a l'Institut d'Investigacions Biomèdiques August Pi i Sunyer (IDIBAPS) / Antiretroviral therapy has dramatically reduced morbidity and mortality associated with HIV-1 infection and converted AIDS into a manageable chronic disease. During the past 15 years, antiretroviral drugs have become less toxic, more potent and more convenient, allowing the possibility of early treatment. Changing regimens in patients with viral suppression is an approach that can be contemplated to simplify treatment and improve adherence reducing the number of pills and frequency of dosing, to prevent toxicity in the short or long term, to minimize drug interactions, and also to preserve future treatment options and even to reduce costs. We conclude that the efficacy of protease inhibitors boosted with ritonavir (PI / r) monotherapy in clinical practice is consistent with data from clinical trials. Moreover, the combination of etravirine plus raltegravir is well tolerated and maintains durable viral suppression in selected patients with virological suppression. Regarding modification of PI / r regimens in virologically suppressed patients, we found that the change of PI / r for raltegravir leads to significant changes in biomarkers associated with cardiovascular inflammation, insulin resistance, and hypercoagulability. In this context abacavir / lamivudine exhibits similar efficacy and tolerability of tenofovir / emtricitabine. Replacing the drug involved is one of the strategies to handle complications of antiretroviral therapy. However, for patients with underlying resistance mutations this approach may not be feasible. In adults receiving PI / r with hypercholesterolemia and increased cardiovascular risk, we found that rosuvastatin produced greater decreases in total cholesterol and low density than switching PI / r. Finally, we observed that 11% of patients treated with raltegravir developed significant elevation of creatine kinase during treatment with raltegravir. Symptoms were rare and unrelated to the degree of creatine kinase elevation. While knowledge about non-infectious complications of HIV-1 infection continues to prosper together with the continuous improvement of antiretroviral therapy, it is possible to develop new strategies to limit their impact on people living with HIV and to assure they can age with health and quality of life. / El tratamiento antirretroviral ha reducido drásticamente la morbilidad y la mortalidad asociada al VIH-1 y ha transformado el SIDA en una enfermedad crónica manejable. Durante los últimos 15 años, los medicamentos antirretrovirales se han hecho menos tóxicos, más potentes y más convenientes, lo que permite la posibilidad de un tratamiento temprano y de por vida. Modificación de los regímenes en pacientes con supresión viral es un enfoque que se puede contemplar para simplificar el tratamiento y mejorar la adherencia reduciendo la cantidad de pastillas y la frecuencia de dosificación, para prevenir la toxicidad a corto o largo plazo y mejorar la tolerabilidad, para minimizar interacciones farmacológicas, y también para preservar futuras opciones de tratamiento e incluso visando reducción de costes. La hipótesis de trabajo es que en pacientes infectados por VIH que reciben tratamiento antirretroviral eficaz es posible simplificar el tratamiento y hacerlo más tolerable mediante el uso de nuevos fármacos y de nuevas estrategias sin comprometer su eficacia virológica. En cuanto a la estrategia de simplificación, concluimos que la eficacia de los inhibidores de la proteasa potenciados con ritonavir (IP/r) en monoterapia en la práctica clínica es consistente con los datos de los ensayos clínicos. Por otra parte, la combinación de etravirina más raltegravir es bien tolerada y mantiene la supresión viral duradera en pacientes con supresión virológica seleccionados. Con respecto a la modificación de los regímenes con PI/r en pacientes virológicamente suprimidos se observó que el cambio de PI/r para raltegravir conduce a cambios significativos en biomarcadores cardiovasculares asociados con la inflamación, resistencia a la insulina, y la hipercoagulabilidad. En este contexto abacavir/lamivudina exhibe eficacia y tolerabilidad similar a tenofovir/emtricitabina. Sustitución de un fármaco implicado por otro que está mejor indicado y exhibe una potencia similar es una de las estrategia indicada para manejar las complicaciones del tratamiento antiretroviral. Sin embargo, para los pacientes con mutaciones de resistencia subyacentes este enfoque puede no ser factible. En adultos en uso de IP/r con hipercolesterolemia y aumento del riesgo cardiovascular, se encontró que la rosuvastatina produce mayores descensos en el colesterol total y el colesterol de baja densidad que la sustitución de IP/r. Finalmente, hemos observado que 11% de los pacientes tratados con raltegravir desarrolla elevación significativa de creatina quinasa durante el tratamiento con raltegravir. Sin embargo, los síntomas son poco comunes y no están relacionados con el grado de elevaciones de creatina quinasa. Mientras el conocimiento sobre las complicaciones no infecciosas de la infección por VIH-1 sigue prosperando juntamente con la mejora continua de la terapia antirretroviral, es posible desarrollar nuevas estrategias para limitar su impacto en las personas que viven con el VIH y para asegurarles que puedan envejecer con salud y calidad de vida.

El melanoma metastásico es un modelo de tumor especialmente agresivo y resistente a inmuno, radio y quimioterapia. La pobre prognosis de los pacientes y el preocupante incremento de casos en los últimos años hacen necesario el diseño y desarrollo de nuevos y mejorados agentes anticancerígenos, así como nuevas estrategias más eficaces. Las células de melanoma presentan alteraciones genéticas y moleculares que alteran el control de la proliferación y supervivencia celular. Estas alteraciones permiten superar las barreras de control del crecimiento y migración celular, aspectos asociados no sólo con la inmortalización y adquisición de las propiedades invasivas, sino que también les confieren resistencia frente a tratamientos quimioterapéuticos. Tanto la vía PI3K/AKT/mTOR, como la vía mitogénica mediada por MAPKs, son claves en la supervivencia y crecimiento celular. Ambas vías, a través de GSK-3 se encuentran implicadas en la sobreexpresión de proteínas anti-apoptóticas de la familia BCL-2. La sobreexpresión de esta familia de proteínas facilita que la célula escape a los mecanismos apoptóticos inducidos por agentes citotóxicos convencionales. Por esta razón, estrategias terapéuticas basadas en la inhibición de estas vías han mostrado su potencial en estudios clínicos. Este potencial radica en la activación simultánea de dos mecanismos de muerte celular: apoptosis y autofagia. De entre la familia de compuestos anticancerosos conocidos como prodigininas (PGs), en un principio, prodigiosina destacó por su marcado efecto pro-apoptótico en diferentes líneas tumorales. Actualmente, un derivado sintético de las PGs, obatoclax, que fue diseñado como molécula BH3 mimética, está siendo evaluado en ensayos clínicos en fase III. Sin embargo, los estudios realizados en melanoma muestran la modesta eficacia de obatoclax como agente individual, lo que hacía necesario estudios más exhaustivos sobre los mecanismos de acción de esta molécula. Un efecto citotóxico más marcado se ha obtenido mediante el tratamiento con prodigiosina. A pesar de que ambas moléculas han mostrado desencadenar similares mecanismos moleculares, las diferencias estructurales entre ambas moléculas serían críticas en su actividad. Los nuevos datos aportados contribuyen a un mejor entendimiento de los eventos moleculares que desencadenan la actividad anticancerosa y antimetastásica de las PGs. En este aspecto, la caracterización de PGs como inhibidores duales de mTORC1 y mTORC2 pone en evidencia la relevancia que estas moléculas podrían tener en un futuro en la terapia contra el cáncer. La interacción de PGs al centro activo de mTOR se confirmó mediante técnicas de resonancia de plasmón superficial (SPR), monitorizando las interacciones a tiempo real, usando biosensores ópticos. Los parámetros cinéticos y de afinidad mostraron que ambas moléculas forman complejos estables, específicos, y de alta afinidad a concentraciones nanomolares. Los ensayos de competición con ATP revelaron que no existe competición entre ATP y las PGs por su lugar de unión, sugiriendo que las PGs actúan como inhibidores ATP no miméticos. Un valor añadido de estas moléculas son sus probadas propiedades antimetastásicas. En este aspecto, demostramos que la inhibición de mTOR promueve la desestabilización del complejo ILK/rictor con la consecuente pérdida de señalización a través de la vía de las integrinas, crítica para el movimiento celular. Observamos que, todo ello conlleva a la desorganización del citoesqueleto, pérdida de los contactos focales y pérdida de la capacidad migratoria de las células. Finalmente, estrategias análogas fueron utilizadas para llevar a cabo estudios de relación estructura-actividad de las PGs. La estructura tripirrólica de prodigiosina (PG) contiene grupos amino y metoxi comunes en obatoclax (OBX) relacionados con su actividad citotóxica. El bloqueo de estos grupos mediante la adición del grupo aniónico F2B resultó en la pérdida de actividad de esta molécula. Estos resultados ponen de manifiesto la importancia de estos grupos en la actividad de PGs, y aportan nuevos datos para el diseño de nuevos derivados sintéticos más efectivos y menos tóxicos. / MECHANISMS OF ACTION INVOLVED IN THE ANTICANCER AND ANTIMETASTATIC PROPERTIES OF PRODIGININES. Identification of mTOR as a molecular target in melanoma cells. Because of high chemotherapeutic resistance of metastatic melanoma are necessary new strategies with improved drugs, more effectives with lower toxicity. Anticancer activity of prodiginines has been described in vitro and in vivo in different cancer cell models, including melanoma. Prodiginines are tripyrrolic molecules from bacterial metabolism under pre-clinical and clinical evaluation. In this study we have focused our efforts on identified the molecular mechanisms of prodiginines involved in their cytotoxic effects. In melanoma cells, we have observed the activation of both cell death mechanisms: apoptosis and autophagy after prodigiosin treatment. Our results demonstrate that prodigiosin is a BH3-mimetic drug, as it was previously described for obatoclax (GX15-070). Obatoclax is a synthetic prodiginine derivative actually in clinical trials in phase III. Moreover, we have identified mTOR as a new molecular target of prodigiosin and obatoclax. PI3K/AKT/mTOR pathway is involved in cell survival, proliferation and migration. Different cross-talks and feedback loops regulate this pathway and, also, are involved in different compensatory mechanisms that confer chemoresistance to melanoma cells. Dual inhibition of mTORC1 and mTORC2 mediated by both prodiginines disrupted the negative feedback loop S6K/IRS-1. The interaction of both prodiginines in the active site of mTOR was monitorized by Surface Plasmon Resonance (SPR) assays. Nanomolar kinetic and affinity parameters indicated high affinity, stability and specificity of these interactions. Nevertheless, results showed that both prodiginines are not ATP-mimetic drugs. In silico models showed the detailed atomic view of the complexes indicating the critical residues involved in these interactions. Moreover, structure-activity relationship (SAR) studies corroborated the importance of pyrrole amino groups in the cytotoxic prodiginines activity mediated by mTOR inhibition. Finally, we observed that mTOR inhibition by prodiginines promotes actin filaments desorganization, decrease of focal adhesions and inhibition of cell migration. Our results suggest that prodiginines might inhibit integrin signalling through ILK/rictor complex. Alltogether, these results contribute to further understanding the molecular mechanisms of prodiginines and, also, their chemotherapeutical potential. Moreover, we provide new data about their structural properties that will allow the development of more-effective anticancer molecules.

INTRODUCCIÓ: El dolor lumbar és una síndrome d'etiologia multifactorial que afecta al 80% de la població com a mínim una vegada al llarg de la vida. Degut a la manca de coneixement de l'element causal del dolor, aquest també s'anomena lumbàlgia crònica inespecífica (CLBP). Existeixen en la literatura múltiples estudis respecte les disfuncions musculars de la població amb CLBP, però amb resultats molt diferents i fins i tot oposats. Per altra banda, no existeix una opció clara i unificada en la valoració i el control d'aquestes disfuncions. OBJECTIUS: Presentar i valorar dues eines pel control i valoració de la musculatura del tronc: una eina per a valorar la força isomètrica màxima voluntària (MVC) i una eina per a valorar les múltiples i subtils activacions i desactivacions musculars que es donen en un procés d'estabilització muscular. Al mateix temps, revisar pràctiques metodològiques utilitzades freqüentment en la valoració de la població amb CLBP: utilització d'un pes proporcional a la MVC com a càrrega relativa a l'individu i utilització d'un pes calculat a partir de les mesures antropomètriques d'aquest. Posteriorment, valorar a partir de l'electromiografia (EMG) de superfície algunes de les disfuncions associades a la població amb CLBP que més controvèrsia mostren en la literatura: fatigability i patrons d'activació muscular alterats. Igualment, valorar la similitud d'algunes d'elles amb les disfuncions que la població sana pugui presentar en situació de fatiga. DISSENY: Estudi de validació i fiabilitat de les dues eines desenvolupades i comparació de les dues metodologies revisades en aquest treball. Igualment, estudi transversal amb grup control (comparació de CLBP vs població sana). Anàlisi mitjançant dos tests: un test de fatiga (contracció isomètrica mantinguda, Sorensen Test) i un test per a valorar les característiques de reacció muscular davant d'una pertorbació sobtada. Enregistrament de la musculatura mitjançant EMG de superfície i control de la postura durant els tests amb un sistema d'enregistrament per càmeres de vídeo. Valoració de paràmetres electromiogràfics de fatiga, amplitud de senyal i latències d'activació de la musculatura de tronc i les extremitats, a la vegada que valoració d'angles, alçades i alienacions corporals. PARTICIPANTS: 26 subjectes amb lumbàlgia crònica 26 subjectes sans en edats compreses entre 25 i 55 anys. RESULTATS: Ambdues eines van mostrar una alta fiabilitat i validesa comparativament al gold standard utilitzat en cada cas. Ambdues metodologies utilitzades van mostrar resultats oposats en la determinació de l'existència de fatígabílity en la població amb CLBP respectivament a la població sana. La població amb CLBP, a partir de la utilització de les eines presentades en aquest treball i el mètode considerat més adequat (càrrega relativa a partir de les mesures antropomètriques), va mostrar presentar nivells de fatígability similars a la població sana igualment que uns patrons musculars diferenciats a aquesta població tant en les seves característiques temporals (major latència d'activació entre altres) com en les seves característiques d'amplitud (major activitat muscular). El patró muscular utilitzat pels CLBP davant la càrrega inesperada, presentava similituds amb el patró muscular utilitzat per la població sana amb fatiga pel que fa a les característiques temporals. DISCUSSIÓ I CONCLUSIONS: Les eines i la metodologia desenvolupades en aquest treball representen una millora en l'estudi de la musculatura de la columna. A més a més, es demostra la importància de les metodologies utilitzades, ja que poden afectar en els resultats d'una forma considerable. El comportament muscular de la població amb CLBP tant en una situació d'isometria mantinguda com en l'estabilització d'una pertorbació es diferencia de la població sana podent ser una disfunció que porti a la cronificació del dolor. La població amb CLBP podria presentar un estat neuromuscular inicial als test similar a la població sana fatigada, tot i que la velocitat de fatigar-se durant un esforç isomètric (fatigabilíty) no va mostrar diferències significatives entre poblacions. / INTRODUCTION: Back pain is a syndrome with multifactorial etiology that affects 80% of the population at least once in their lifetime. Due to the lack of knowledge concerning its causal factors, it is also known as non-specific chronic low back pain (CLBP). There are multiple studies in research literature regarding muscle dysfunctions of CLBP subjects, but very different results have been observed, which can even be contradictory at times. Furthermore, there is no clear and unified direction regarding the assessment and monitoring of this dysfunction. OBJECTIVES: To present and evaluate two tools for monitoring and assessing trunk muscles: a tool to evaluate maximum voluntary isometric strength (MVC) and a tool to evaluate the multiple subtle muscle activations and deactivations that occur during the process of muscular stabilization. At the same time, the study aims to review some of the methodological practices commonly used in the assessment of CLBP subjects: using a weight proportional to the MVC as the load to be applied to the individual and using a weight calculated from the individual's anthropometric measurements. Subsequently, some of the dysfunctions associated with CLBP subjects which are most controversial in research will be evaluated using surface electromyography (EMG) procedures: fatigability and altered muscle activation patterns. The study will equally address the similarity of some of these with dysfunctions which healthy subjects may experience in situations of fatigue. DESIGN: A validation and reliability study of the two tools developed, together with a comparison of the two methods are reviewed in this paper. At the same time, the study is transversal with the inclusion of a control group (CLBP subjects compared to healthy subjects). The analysis was carried out using two tests: a fatigue test (maintained isometric contractions, Sorensen test) and a test to evaluate the characteristics of muscular reaction to a sudden increased load. Muscles were recorded by surface EMG, and posture control during the tests was filmed by a video camera recording system. EMG fatigue parameters, EMG signal amplitude and latencies of trunk and limb muscle activation were evaluated together with body angles, heights and positions. PARTICIPANTS: 26 subjects with chronic low back pain and 26 healthy subjects, all between the ages of25 and 55. RESULTS: Both tools showed high reliability and validity in comparison to the gold standard used in each case. Both methodologies used showed opposite results in the determination of the existence of fatigability in CLBP subjects compared to healthy subjects. From the use of the tools presented in this work and the method considered most appropriate, (proportionate loads based on anthropometric measurements) CLBP subjects showed increased levels of fatigability similar to those of the healthy subjects, as well as demonstrating muscular patterns that were different from the healthy subjects both in their temporal characteristics (higher latency activation among others) and their amplitude characteristics (greater muscular activity). The muscular pattern used by CLBP subjects when faced with the unexpected load was similar to that of the fatigued healthy subjects fatigue as far as temporary characteristics were concerned. DISCUSSION AND CONCLUSIONS: The tools and methodology developed in this work represent an advance in the study of spinal muscles. Furthermore, the importance of the different methodologies used is demonstrated, as this can affect the results obtained in a significant way. The muscular behaviour ofCLBP subjects, both in a maintained isometric situation as well as in the stabilization process following an increased load, differs from the healthy population, which could well be a dysfunction that leads to the pain becoming chronic. CLBP subjects present an initial neuromuscular state in the test which is similar to that of the fatigued healthy subjects, although the rate of fatigue during isometric effort (fatigability) showed no significant differences between the two groups.

El càncer es un conjunt de més de 100 malalties que es caracteritzen per l'acumulació de múltiples alteracions genètiques. Nosaltres ens hem centrat en l'estudi de tres tipus de tumors sòlids epitelials: tumors esporàdics de bufeta, tumors hereditaris o familiars de càncer colorectal i de càncer ronyó.Per aquests estudis la tècnica més àmpliament utilitzada ha estat la Hibridació Genòmica Comparada (CGH), que permet fer un anàlisi global del genoma tumoral, i dona informació sobre quins desequilibris es produeixen més freqüentment, indicant quines regions serien susceptibles de contenir gens supressors de tumors o oncògens; a més també permet portar a terme estudis de clonalitat i detectar patrons d'evolució cromosòmica.Pel que fa als tumors de bufeta, vàrem observar que el dany genòmic augmenta a mida que augmenta l'estadi i grau tumoral, sent els desequilibris més freqüents, les pèrdues de 9q,9p,5q,8p i els guanys de 1q, Xq,17q,8q i 20q. Hi ha però una sèrie d'alteracions que presenten diferencies significatives entre els diferents estadis, entre pTa i pT1 són les pèrdues de 5q, 9p, 9q, 10q, 8p, 11q, 18q i els guanys de 8q,10p. Mentre que entre pT1 i pT2-T4, són els guanys a 5p,7p,3p,10p i pèrdua de 6q.Un elevat nombre dels tumors estudiats eren tumors superficials o mínimament infiltrants, els quals els vàrem classificar en base als patrons de desequilibris genòmics observats, de manera que es va posar de manifest l'existència de tres subgrups: el primer caracteritzat per la predominança de guanys, essent 1q,1p,17q,19p els més freqüents, el segon caracteritzat per pèrdues afectant principalment a 9q,9p,11q,8p,5q,11p, i un tercer grup caracteritzat per la presència d'un nombre baix de desequilibris. El fet de trobar dos subgrups amb cariotips complexes podria suggerir que l'evolució d'aquests tumors es produiria com a mínim per dues vies una caracteritzada per guanys i l'altre per pèrdues. Per altra banda, el 30% dels tumors urotelials presenten multifocalitat, fet que converteix aquests tumors en un model excepcional per l'anàlisi de les diferents relacions entre tumors esporàdics sincrònics. L'estudi d'aquests tumors sincrònics d'un mateix pacient ens va confirma el seu origen monoclonal i ens va permet traçar vies d'evolució a partir d'un únic tumor original.Pel que fa a l'estudi de tumors sincrònics familiars, vàrem fer dos estudis, un amb tumors de pacients afectats de Càncer Renal Papil·lar Hereditari (HPRC), i un altre amb tumors de pacients afectats de Poliposi Adenomatosa Familiar (FAP); l'estudi d'aquests tumors proporciona un model natural excel·lent per estudiar les alteracions presents en estadis primerencs de la evolució tumoral i proporcionar alhora important informació sobre el dinamisme de formació de les alteracions en aquests tumors.Pel que fa a l'estudi de HPRC es va observar la presència d'alteracions cromosòmiques estructurals idèntiques en diferents tumors d'un mateix pacient fet que suggereix un origen embrionari comú, o que la predisposició genètica pot condicionar l'adquisició d'alteracions a regions cromosòmiques específiques. També es va estudiar el comportament de MET (els pacients que pateixen aquesta malaltia presenten la mutació d'aquest proto-oncogen en la línia germinal, fet que predisposa a HPRC); vàrem observar que la duplicació del gen MET portador de la mutació germinal va associada a la trisomia 7. En aquells tumors amb tetrasomia 7 s'observava la duplicació tant de l'al·lel normal com del mutat.Pel que fa a l'estudi de patrons d'evolució en càncer colorectal a partir de l'anàlisi dels desequilibris presents en adenomes i carcinomes procedents de tumors de pacients afectes de FAP; vàrem observar que els diferents adenomes d'un mateix pacient mostren una clara relació genètica indicant un patró comú d'evolució. Aquest fet suggereix, de nou, que la predisposició genètica pot condicionar l'addquisició d'alteracions genòmiques en subregions cromosòmiques específiques. / Under the concept of cancer there is a group of more than a hundred illness that are caracterized by the accumulation of multiple genetic alterations. We have focused our study in three different kinds of epithelial solid tumours: sporadic bladder tumours, hereditary or familial colorectal cancer and kidney cancer. In order to analyze these tumours, we applied the Comparative Genomic Hybridization (CGH) technique. The global analysis of the tumoral genome allowed by this technique provides information about the frequency of unbalances, the regions where these unbalances are located and about which of these regions could be more susceptible to contain tumour supressor genes or oncogenes. Moreover, this technique also allows us to perform clonality studies and to detect different patterns of chromosomal evolution.In the bladder tumours, we observed that the genomic damage increases with the tumoral stage and grade. The unbalances that were more frequently found were the losses of 9q, 9p, 5q, 8p and the gains of 1q, Xq, 17q, 8q and 20q. However, there is a group of abnormalities that present significant differences among the different tumoral stages. Between pTa and pT1, are the losses of 5q, 9p, 9q, 10q, 8p, 11q, 18q and the gains of 8q and 10p. Between pT1 and pT2-4, are the gains of 5p, 7p, 3p, 10p and the loss of 6q.The classification of the superficial or minimally invasive tumours according to their observed patterns of genomic unbalances allowed us to subclassify them in three different subgroups. The first subgroup was characterized for the predominance in gains, being +1q, +1p, +17q and +19p the most frequents. The second subgroup was characterized for the losses of 9q, 9p, 11q, 8p, 5q, 11p and the third subgroup was characterized for a low number of unbalances. The fact of finding two subgroups with complex karyotypes could suggest that these tumours could have evolved from two different pathways, one characterized for gains and the other for losses.On the other hand, 30% of the bladder tumours present multiplex damages, and this fact makes these tumours an excellent model for the analysis of the different relations between sincronous sporadic tumours. The study of sincronic tumours from the same patient confirmed their monoclonal origin and allowed us to design the evolutive pathway from a single original tumour.We performed two analysis, one in tumours of patients affected of Hereditary Papilary Renal Cancer (HPRC) and one in tumours of patiens affected of Familiar Adenomatose Poliposi (FAP). These kind of tumours provides an excellent natural model to study the chromosomal aberrations in primary stages of tumoral evolution. In addition, they provide important information about the dynamics of formation of these aberrations in the tumours.Identic structural chromosomal aberrations were found in different tumours of the same patient affected of HPRC. This fact suggest either a common embrionary origin or conditioned adquisition of alterations in specific chromosomal regions due to the genetic predisposition. The behaviour of the MET gen was also studied in these patients. The duplication of the MET gen was found to be associated with the trisomy of chromsome 7. In those tumours with tetrasomy of chromosome 7, both normal and mutated alleles were found to be duplicated.The analysis of unbalances present in adenomes and carcinomes from patients affected of FAP allowed the establishment of evolution patterns of colorectal cancers. We observed that the different adenomes from a same patient affected of FAP display a strong genetic relation, which indicates a common evolution pattern. Again, this fact suggest that the genetic predispostion may direct the adquisition of genomic alterations in specific chromosomal subregions.

INTRODUCCIÓN.- El beneficio a corto plazo de la angioplastia coronaria (ACTP) ha sido demostrado y su efectividad a largo plazo parece también mantenida. Sin embargo, su mayor limitación es el problema de la reestenosis. La respuesta fibrocelular, que es el principal mecanismo de la reestenosis, es uno de los eventos básicos en el desarrollo de las lesiones avanzadas de la aterosclerosis. Aunque el curso en el tiempo de la reestenosis post-angioplastia y de la progresión en la aterosclerosis coronaria son diferentes, la similitud en los mecanismos pueden sugerir una relación entre ambos y algunos estudios han descrito el desarrollo acelerado de estenosis coronarias en localizaciones proximales a los segmentos donde se habían efectuado dilataciones. Adicionalmente, en los pacientes sin reestenosis post-angioplastia, la evolución anatómica a más largo plazo de la estenosis residual no es bien conocida. No ha sido descrito si, durante el seguimiento, la estenosis residual permanece estable, disminuye, o aumenta progresivamente su severidad. OBJETIVOS DEL ESTUDIO.- Se realizó un estudio angiográfico secuencial en una serie consecutiva de pacientes que habían sido sometidos a una angioplastia coronaria eficaz para determinar la relación existente entre la presencia inicial de reestenosis post-angioplastia y la aparición posterior de progresión en la aterosclerosis coronaria y para evaluar la evolución anatómica a largo plazo de la estenosis residual de la lesión dilatada en un grupo de pacientes sin reestenosis inicial. MATERIAL Y MÉTODO.- Noventa y ocho pacientes en los que se realizó una ACTP eficaz sobre 110 lesiones de arterias nativas fueron incluidos en el estudio para evaluar la relación entre reestenosis post-angioplastia y progresión de la aterosclerosis.. Sesenta y tres pacientes sin reestenosis precoz fueron incluidos en un estudio angiográfico seriado para determinar la evolución en la estenosis residual post-ACTP a largo plazo.La valoración de los cambios en la severidad de la lesión producidos mediante la angioplastia, y la evolución de la estenosis residual en los diferentes controles angiográficos fueron analizados mediante un sistema de análisis angiográfico cuantitativo. Se consideró reestenosis post-angioplastia cuando un segmento dilatado mostraba en la coronariografía de control una estenosis de una severidad igual o superior al 50 %. Se consideró que se había producido progresión de la enfermedad coronaria cuando por análisis visual se documentó una disminución +/- 20% en el diámetro del vaso que inicialmente mostraba una estenosis +/- al 50%, o una reducción +/- 30% de la luz cuando la estenosis inicial fue < al 50%. Una serie de variables clínicas, angiográficas y de procedimiento fueron evaluadas prospectivamente en cada paciente. RESULTADOS.- Progresión de la aterosclerosis y angioplastia coronaria.- Un seguimiento angiográfico precoz fue realizado tras un intervalo medio de 5 ± 2 meses después de la ACTP. El diagnóstico de reestenosis fue realizado en 39 lesiones (35%) pertenecientes a 37 pacientes (38%). Treinta y siete pacientes con reestenosis fueron sometidos a un estudio angiográfico tardío 32 ± 10 meses después de la primera angioplastia. Cincuenta y ocho pacientes sin reestenosis fueron sometidos a un reestudio angiográfico tardío a los 34 ± 12 meses post-ACTP. Se observó progresión de la aterosclerosis coronaria en 53 segmentos de 31 pacientes (34%) después de los 18 meses post-angioplastia. En la valoración de la relación existente entre reestenosis post-angioplastia y progresión de la aterosclerosis coronaria, se observó progresión en el estudio angiográfico tardío en 22 (38%) de los 58 pacientes sin reestenosis, en comparación a 9 (33%) de los 27 pacientes con reestenosis (p= NS). En relación al momentos cronológicos de reestenosis post-angioplastia y progresión de la aterosclerosis: En las lesiones con reestenosis, el diámetro de la estenosis aumentó desde el 35 ± 8 % hasta el 73 ± 11 % (p< 0.001) en el reestudio angiográfico inicial. Por el contrario, el diámetro de la estenosis aumentó mucho más lentamente en las lesiones con progresión, desde el 9 ± 18 % hasta el 20 ± 28 % (p< 0.001) en el reestudio inicial y hasta el 53 ± 21 % (p<0.001) en el reestudio tardío. La velocidad de empeoramiento de las lesiones expresada como cambio en el porcentaje de estenosis dividido por los meses entre estudios angiográficos, fue mucho más rápida para las lesiones con reestenosis que para las lesiones con progresión: 12.3 ± 10 %/mes versus 1.1 ± 0.7 %/mes (p<0.0001). El sexo masculino (p= 0.01), el tabaquismo )p= 0.06) y la ausencia de disección post-angioplastia (p< 0.05) fueron identificados como factores predictivos de reestenosis. Entre las diferentes variables analizadas, únicamente el antecedente de diabetes y una historia previa de infarto de miocardio mostraron diferencias significativas entre los pacientes con y sin progresión (p<0.05, y p= 0.05, respectivamente). Nuevas estenosis adyacentes a los segmentos dilatados.-. Se observó progresión de la aterosclerosis en segmentos no dilatados en 16 (17%) de 94 vasos dilatados en comparación a 25 (14%) de 176 vasos no dilatados (p= ns). Entre los 31 pacientes con progresión de la aterosclerosis se observó progresión en 16 (48%) de 33 vasos dilatados y en 25 (41%) de 60 vasos no dilatados (p= ns).Evolucion de la estenosis residual post-angioplastia.- En el grupo de pacientes en el que se analizó la evolución de la estenosis residual de la lesión dilatada se efectuaron controles angiográficos precoces y tardíos de seguimiento, 5 ± 1 meses y 37 ± 20 meses después del procedimiento, respectivamente. La angioplastia produjo inicialmente una disminución de la severidad de la estenosis desde un porcentaje de estenosis pre-ACTP de 72 ± 13 % hasta un porcentaje de 41 ± 14 % (p< 0.0001) inmediatamente post-ACTP. En el control angiográfico realizado a los 5 ± 1 meses post-angioplastia, la estenosis residual mostró una severidad del 31 ± 14 % (p<0.001 vs post-ACTP inmediata). Asimismo, en el control angiográfico realizado a los 37 ± 20 meses después de la angioplastia, la estenosis había experimentado una nueva reducción hasta una severidad del 23 ± 15 % (p<0.001 vs post-angioplastia inmediato y p<0.001 vs 5 meses). El análisis multivariado de regresión logística por pasos identificó que el empleo durante el procedimiento de una elevada relación entre los diámetros balón/arteria (p= 0.001), la ausencia de diabetes mellitas (p= 0.008) y la presencia del antecedente de hipertensión arterial (p= 0.01) fueron predictores de la reducción producida en la estenosis residual. CONCLUSIONES: La aparición de la reestenosis post-angioplastia es un fenómeno independiente de la progresión de la arteriosclerosis coronaria. La instrumentalización realizada en los vasos coronarios durante la angioplastia, no acelera el desarrollo de lesiones ateroscleróticas en la arteria dilatada. Un número significativo de pacientes con lesiones coronarias que han sido dilatadas de forma eficaz mediante angioplastia y que no presenta reestenosis en el control angiográfico inicial muestran, durante el seguimiento posterior, una progresiva reducción en la severidad de la estenosis residual. / "ATHEROSCLEROSIS PROGRESSION AND EVOLUTION OF THE RESIDUAL STENOSIS AFTER CORONARY ANGIOPLASTY: LONG-TERM ANGIOGRAPHIC STUDY"ABSTRACT:BACKGROUND.- The major limitation of coronary angioplasty (PTCA) is the problem of restenosis. The fibrocelular response is the principal mechanism of restenosis and is also the main component of the development of atherosclerotic lesions. Furthermore, the long-term evolution in the residual estenosis in patients without early restenosis in not completely known. STUDY OBJECTIVES.- To determine the relationship between early restenosis post-PTCA and the long-term atherosclerosis progression, an angiographic study was performed in a series of consecutive patients who underwent a successful PTCA. In the same cohort of patients, the long-term evolution of the residual stenosis was evaluated. METHODS.- Ninety eight patients whom underwent a successful PTCA were included to evaluate the relationship between restenosis and progression, and 63 patients, without early restenosis, were included in a sequential study to determine the long-term evolution of the residual estenosis post-PTCA. Changes in the stenosis severity were analysed by quantitative coronary angiography. Restenosis was defined as a stenosis +/- 50 % during the follow-up. Atherosclerosis progression was defined as a more 20% decrease in the diameter of a vessel initially narrowed by +/- 50% or a +/- 30% decrease when the initial stenosis was < 50%.RESULTS.- Atherosclerosis progression and coronary angioplasty.- An early angiographic follow-up was performed 5 ± 2 months after angioplasty. Restenosis was documented in 37 patients (38%). These patients were again angiographically evaluated 32 ± 10 months post-PTCA. A new angiographic study was performed in 58 patients without restenosis, 34 ± 12 months post-procedure. Coronary progression was observed in 53 segments from 31 patients (34%) more than 18 months post-angioplasty. In the evaluation of the relationship between restenosis post-angioplasty and atherosclerosis progression, long-term progression was documented in 22 (38%) of the 58 patients without restenosis, in comparison to 9 (33%) of 27 patients with restenosis (p= NS). Long-term evolution of the residual stenosis post-angioplasty.- In the group of patients evaluated to determine the evolution of the residual stenosis, an angiographic study was performed 5 ± 1 month and 37 ± 20 months after the procedure. Coronary angioplasty produced an initial reduction in the percentage of stenosis from 72 ± 13 % pre-PTCA to 41 ± 14 % (p< 0.0001) immediately post-PTCA. In the early angiogram 5 ± 1 month post-angioplasty, the residual stenosis showed a severity of 31 ± 14 % (p<0.001 vs immediately post-PTCA). Additionally, in the control performed 37 ± 20 months after, the residual stenosis experienced a further reduction to 23 ± 15 % (p<0.001 vs 5 months). CONCLUSIONS: Restenosis post-angioplasty and progression of atherosclerosis are independent phenomena. In patients without restenosis, the residual stenosis post-angioplasty shows a long-term reduction during the follow-up.

La infecció tuberculosa latent (ITBL) afecta actualment a un terç de la humanitat, és a dir, a 2.500 milions de persones. L'interès en el seu estudi i tractament es basa en el fet que en un 10% dels casos tindrà lloc un recreixement bacil·lar, que donarà lloc a una tuberculosi (TB) activa.Aquest fet és especialment perillós perquè encara es desconeixen els mecanismes implicats en aquesta reactivació, o sigui que ens manquen factors pronòstics. I perquè, a més a més, el tractament de la ITBL és extremadament llarg (9 mesos d'isoniazida), i això fa que moltes vegades aquesta mesura terapèutica ni es plantegi a nivell de mesura sanitària.A partir de les observacions obtingudes en l'estudi de l'evolució de les lesions en el model de TB experimental en el ratolí, es va generar un model de TB "humanitzat" que generava necrosi intragranulomatosa pulmonar (INPG). Inicialment, la INPG s'originava mitjançant la inoculació de LPS intranasal, però degut a l'elevada taxa de mortalitat dels animals, el model es va estandarditzar portant a terme la infecció per aerosol amb soques de M. tuberculosis capaces de desenvolupar INPG de manera espontània.Gràcies a aquest model humanitzat es va poder provar un nou règim terapèutic basat en la hipòtesi que la inoculació, després d'una pauta curta de tractament antibiòtic, amb fragments de M. tuberculosis cultivats en condicions d'estrès i detoxificats (vacuna RUTI) seria capaç de controlar la reactivació bacil·lar, i ser una eina terapèutica eficaç per reduir el temps de tractament actual de la ITBL. En aquest sentit, els estudis inicials mostraven la reactivitat de diferents subtipus d'IgG contra proteïnes presents en la vacuna, i la capacitat bactericida de la resposta immune generada, en soques de ratolí resistent (C57BL/6) i susceptible (DBA/2).Portant a terme estudis més amplis sobre la resposta immune generada mitjançant la immunoteràpia amb RUTI després d'una pauta curta de tractament antibiòtic, s'ha volgut avaluar tant el component humoral, com el cel·lular.Realitzant sèrum-teràpia passiva amb anticossos, obtinguts després de portar a terme aquest tractament combinat en ratolins DBA/2, es va veure que el model de ratolí severament immunodeprimit SCID era capaç de controlar la reactivació bacil·lar i presentava un nombre inferior d'abscessos pulmonars. Pel que fa a l'avaluació de la resposta cel·lular, els resultats obtinguts mitjançant el mateix esquema de tractament confirmen el que s'observa en els estudis anteriors.I finalment, cal destacar una total absència de toxicitat deguda a la inoculació de la vacuna RUTI, ni en el model de ratolí, ni en el conill porquí. / It has been estimated that one third of mankind harbors a latent infection with Mycobacterium tuberculosis. In a 10% of cases a reactivation in the bacillary load will generate active tuberculosis (TB).This is especially dangerous because we don't know the mechanisms implicated in this reactivation process. In other words, we don't have prediction factors. Furthermore, the chemotherapy treatment is 9 months of isoniazida.Studies about evolution of the lung lesions in the experimental TB model in mice allowed us to generate a TB "humanized" model. The main purpose of this model was to generate pulmonary intragranulomatous necrosis (INPG). Initially, necrosis was generated with intranasal inoculation of LPS, but there was a high mortality associated (up to 20%). Then "humanized" model were standardized with aerosol infection with Mycobacterium tuberculosis strains that develop necrosis spontaneously.The new "humanized" model allow us to test a new immunotherapeutic strategy based on the hypothesis that after a short-term chemotherapy the vaccine RUTI (Mycobacterium tuberculosis fragmented and detoxified) is able to control bacillary reactivation, and it could be a good immunotherapeutic tool to reduce the duration of treatment.In this sense, initial studies showed that all subtypes of IgG against proteins contained in the vaccine were implied. And the immune response generated with RUTI implied a bactericidal activity in resistant (C57BL/6) and susceptible (DBA/2) mice strains.Further studies were carried out in order to evaluate humoral and cellular components of immune response generated with RUTI.Passive serum-therapy with polyclonal antibodies obtained from DBA/2 mice immunized with RUTI in immunodepressed mice model (scid) revealed a capacity to control bacillary reactivation by humoral immune response and a reduction in the presence of granulomas and abscesses. And RUTI-immunotherapy treated mice revealed the same capacity.Finally, any toxicity effects were found in RUTI vaccinated animals.Our data suggest that RUTI would be useful immunotherapeutic vaccine against Mycobacterium tuberculosis infection by triggering a wide response against a lot of peptides present both in growing and non growing bacilli.