El projecte principal d'aquesta tesi és la valoració de la resposta immune induïda per la vacuna RUTI®en el context d'un estudi de Fase 1. La hipòtesi fromulada fou que la RUTI®, per ser una vacuna generada a partir dels fragments de M.tuberculosis cultivats en estrès, pot generar una resposta poliantigènica segura en pacients no infectats. Per això, l'objectiu fou dissenyar i dur a terme l'avaluació de la immunogenicitat de la vacuna RUTI®per primera vegada en humans. L'estudi va implicar dues fases: la preparació i l'execució, d'un any i mig de duració, que foren seguides d'un altre any per a analitzar les dades obtingudes i la conseqüent redacció dels documents pertinents. La preparació va incloure el treball conceptual de disseny de l'estudi; l'elecció i l'establiment de tècniques que serien utilitzades en l'execució; l'organització logistíca de l'execució i el redactat dels procediments específics referents a les tècniques. Durant la planificació varen sorgir dubtes conceptuals que es varen haver de resoldre i varen generar dos estudis menors, que també s'han inclòs: 1) l' avaluació de la producció d'autoanticossos en sèrum de ratolins vacunats amb RUTI® i 2) la detecció d' ITBL durant l'screening: avaluació de la influència del TST sobre les respostes immunològiques mesurades per TIGRA. El primer estudi va demostrar que la vacunació amb RUTI® no indueix ANA detectables en sèrum però que la infecció per M.tuberculosis sí, i de forma independent del tractament administrat. La conclusió de l'estudi número 2 fou que en realitzar el TST quinze dies abans de començar el seguiment dels voluntaris, no es podia excloure en absolut detectar mitjançant TIGRA unes respostes immunològiques alterades fictíciament, fins i tot tractant-se d'individus sans. Els resultats obtinguts foren suficientment alarmants com per a decidir no incloure el TST a l'screening de l'assaig de Fase 1. El veritable cos del projecte, l'avaluació de la immunogenicitat de RUTI®en humans, es descriu al text com a estudi número 3. Dut a terme en el context d'un assaig clínic de Fase 1, pretenia avaluar la immunogenicitat de 4 dosis diferents de la vacuna en individus sans. Testades seqüencialment per tal de detectar qualsevol efecte secundari que pugués posar en perill la seguretat dels voluntaris, cadascuna de les dosis fou assajada en 4 voluntaris sans dins d'un grup en què també participaven 2 voluntaris que foren vacunats amb placebo. La vacuna es va administrar dues vegades separades per 28 dies, i el seguiment dels participants es va allargar a 6 mesos cadascun. Donat que abans de començar l'assaig de Fase 1, es desconeixien els possibles efectes de la vacuna RUTI®en humans i que aquesta havia estat dissenyada per al tractament de la ITBL, es desconeixia si en població sana la RUTI®tindria la força suficient per a generar una resposta específica en contra de M.tuberculosis que fos mesurable. Per això es va incloure un rang tan ampli de tècniques amb dues finalitats: 1) per a avaluar l'impacte de la vacunació sobre les respostes immunològiques, per tal de detectar qualsevol resposta deguda a la RUTI®, i 2) determinar quins assajos serien útils en els futurs estudis del desenvolupament clínic. Els resultats de les tècniques que avaluaven la resposta cel·lular van demostrar una tendència dosi-resposta per la majoria d'assajos, assenyalant la dosi de 25µg de FCMtb com la més poliantigènica. L'avaluació de la resposta humoral va demostrar una pauta d'increment d'IgM enfront els antígens de M.tuberculosis amb uns nivells d'IgG baixos similar a la que existeix en individus contactes de malalts tuberculosos. En quant a relació entre els resultats de l'avaluació de seguretat i la d'immunogenicitat, si bé els EA locals semblaren mantenir certa correlació amb l'assaig de memòria únicament, una resposta immunològica específica deguda a la vacunació amb RUTI®no va implicar una més alta incidència d'EA. Les conclusions del treball serien que: 1) la vacuna RUTI®és immunogènica en individus sans, 2) les respostes immunològiques de tipus cel·lulars aconseguides en general seguiren una tendència dosi-resposta, obtenint la resposta més poliantigènica amb la dosi de 25µg de FCMtb; i 3) com a experiència de l'estudi, en la realització en assajos futurs caldria incloure en el desenvolupament clínic de la vacuna: a) l'avaluació de la immunitat cel·lular mitjançant ELISPOT enfront PPD i els antígens de M.tuberculosis ESAT-6, 85B, i 16 i 38kDa; b) l'assaig de memòria; i c) l'avaluació de la resposta humoral enfront els mateixos antígens. / The original project of this thesis was the evaluation of the immune response induced by the antituberculous vaccine named RUTI¨ in the context of a Phase 1 Clinical Trial. The hypothesis of the study was that RUTI¨, for being generated from fragments of M.tuberculosis grown in stressed cultures, could trigger a safe and poliantigenic response in healthy volunteers. To prove the hypothesis, the objective was to design and perform the evaluation of RUTI¨'s immunogenicity in humans, for the first time. The study implied two phases: the preparation, which lasted 1 and a half years, and another year and a half for the execution and analyisis of all data, with the subsequent reporting. The preparation included the design of the study, the selection and set-up of all the techniques, the organisation, and the generation of the specific procedures for all the assays. During the planning, some conceptual doubts arisen, thus 2 minor studies were designed and performed to solve them, both of them being included in the thesis: 1) evaluation of the autoantibodies' production in the serum of RUTI¨ vaccinated mice; and 2) detection of ITBL by TIGRA during the screening: evaluation of TST influence on the immune responses measured by TIGRA. The first study demonstrated the vaccination with RUTI®does not generate detectable ANA in serum, but M.tuberculosis itself does regardless the treatment. The conclusion of study number 2 was that to perform the TST fifteen days before starting the follow-up of the volunteers could influence the results of the immune responses measured by TIGRA, even in healthy people. The results obliged us to exclude the TST from the screening of the volunteers to be included in the Phase 1 CT. The original project -the evaluation of the immunogenicity of RUTI®when administered to humans-has been included in the thesis as study 3. Performed in the context of a Phase 1 CT, it aimed to evaluate the immunogenicity of 4 different doses of the vaccine in healthy volunteers. Sequencially tested (in order to detect any adverse effect who could impair the safety), every dose was administered to 4 volunteers of a group of 6, where the other 2 received placebo. The vaccine was administered twice (28 days apart), and the follow-up of each participant lasted 6 months. As no effect of RUTI®in humans was previously known and the vaccine was designed to treat the LTBI, the doubt was if the vaccine could be able to generate a sufficient specific response against M.tuberculosis to be detected. To determine this, a wide range of assays were included, with 2 aims: 1) to evaluate the impact of the vaccination on the immune responses and 2) to determine which assays could be useful in future clinical trials to be conducted during the development plan of the vaccine. The results of the assays intending to evaluate the cellular immune response demonstrated a dose-response tendency for most of them, signaling the dose of 25µg of FCMtb as the most poliantigenic one. The evaluation of the humoral response demonstrated a pattern with an increase of IgM antibodies against M.tuberculosis antigens together with IgG antibodies levels, similar to the one found in contact people of M.tuberculosis patients. Regarding the relationship between the results obtained in both the evaluation of the safety and of the immunogenicity, even if the local AE seemed to have some correlation with the memory assay, a specific immune response due to the vaccination did not imply a higher incidence of AE. The conclusion of the study are: 1) the vaccine RUTI®is immunogenic in healthy individuals; 2) the immune responses obtained in general followed a dose-response tendency, the dose of 25µg of FCMtb being the most poliantigenic; and 3) as result of the study, we would recommend to include the following assays in future clinical trials: a)the evaluation of cellular immune response by ELISPOT against PPD and the following M.tuberculosis antigens: ESAT-6, 85B, and 16 and 38kDa; b) the memory assay; and c) the evaluation of the humoral immune response against the same M.tuberculosis antigens.

L'objectiu d'aquesta tesi doctoral és l'anàlisi de l'expressió de l'RNA de citocines en la glàndula salival menor de pacients amb la síndrome de Sjögren primària (SSp).S'han analitzat 42 biòpsies de glàndula salival menor de pacients amb la SSp, 12 amb una SSp probable i 30 amb una SSp definida. L'anàlisi de l'RNA total es va realitzar per normalització amb retrotranscripció i reacció en cadena de polimerasa (RT-PCR), utilitzant oligo-dt com a sonda per a la RT i sondes específiques per a l'amplificació d'IL-2, IFN- g, IL-12, IL-18, IL-4, IL-10, TGF-b i TNF- a. Els resultats van ser analitzats en relació al: 1.- Diagnòstic de la SSp probable (12 pacients) i SSp definida (30 pacients), seguint els critèris diagnòstics europeus. 2.- Grau d'afectació histológica, d'acord amb la classificació de Chisholm i Mason. 3.- Temps d'evolució clínica, des de l'inici de la simptomatologia clínica fins al moment de realitzar la biòpsia de glàndula salival menor, fent un tall arbitrari als 12 mesos d'evolució clínica.Aquesta tesi doctoral demostra la presència d'un patró predominant Th1 d'expressió limfocitària en la glàndula salival menor de pacients amb la SSp, com demostra la presència d'IL-2 i IFN- g; i dels inductors d'aquest patró Th1, la IL-12 i IL-18, en la majoria dels pacients amb la SSp. No es detecta IL-4 en cap de les mostres estudiades, descartant la presència d'un patró Th2. Tambè hi havia, en la majoria de les mostres, IL-10, TGF- b i TNF- a, citocines pro-inflamatòries. No es va detectar diferències estadísticament significatives en la comparació del perfil de citocines entre els pacients amb una SSp definida i probable, en relació amb el grau d'afectació histológica, ni en relació a la formació o no de focos d'infiltració limfocitària. En canvi, hi havia un increment en l'expressió de la IL-2 i de l'IFN-g, amb significat estadístic, en els pacients amb més de 12 mesos d'evolució clínica.Conclusions: 1.- No hi han diferències en l'expressió de l'RNAm de citocines en la glàndula salival menor de pacients amb la síndrome de Sjögren primària definida i probable. 2.- El patró predominant d'expressió de citocines en la glàndula salival menor en pacients amb la síndrome de Sjögren primària és un patró Th1. 3.- La IL-12 i IL-18 són inductors del patró Th1 en la síndrome de Sjögren. 4.- L'expressió de l'RNAm de citocines no varia en relació al grau d'afectació histológica, ni en relació amb el número total de formació de focos. 5.- Els pacients amb la síndrome de Sjögren primària amb més temps d'evolució clínica presenten un increment significatiu en l'expressió del patró Th1. / El objetivo de esta tesis doctoral fue el análisis de la expresión del RNA de citoquinas en la glándula salival menor de pacientes con el síndrome de Sjögren primario (SSp). Se ha analizado 42 biopsias de glándula salival menor de pacientes con el SSp, 12 con un SSp probable y 30 con un SSp definido. El análisis del RNA total se realizó por normalización con retrotranscripción y reacción en cadena de polimerasa (RT-PCR), utilizando oligo-dt como sonda para la RT y sondas específicas para la amplificación de IL-2, IFN- g, IL-12, IL-18, IL-4, IL-10, TGF-b y TNF- a. Los resultados fueron analizado en relación al: 1.- Diagnóstico de SSp probable (12 pacientes) y SSp definido (30 pacientes), siguiendo los criterios diagnósticos europeos. 2.- Grado de afectación histológico, de acuerdo con la clasificación de Chisholm y Mason. 3.- Tiempo de evolución clínica, des del inicio de la sintomatología clínica hasta el momento de realizar la biopsia de glándula salival menor, realizando un corte arbitrario a los 12 meses de evolución clínica.Esta tesis doctoral demuestra la presencia de un patrón predominante Th1 de expresión linfocitario en la glándula salival menor de pacientes con el SSp, con la detección de IL-2 y IFN- g; y de los inductores de este patrón Th1, IL-12 y IL-18 en la mayoría de los pacientes con el SSp. No se detecto IL-4 en ninguna de las muestras estudiadas, descartando la presencia de un patrón Th2. También se detecto en la mayoría de las muestras IL-10, TGF- b y TNF- a, citoquinas pro-inflamatorias. No se detecto diferencias estadísticamente significativas en la comparación del perfil de citoquinas entre los pacientes con un SSp definido y probable, en relación con el grado de afectación histológica ni en relación a la formación o no de focos de infiltración linfocitario. En cambio, hay un incremento en la expresión de la IL-2 y del IFN-g, con significado estadístico, en los pacientes con más de 12 meses de evolución clínica.Conclusiones: 1.- No hay diferencias en la expresión del RNAm de citoquinas en la glándula salival menor en pacientes con el síndrome de Sjögren primario definida y probable. 2.- El patrón predominante de expresión de citoquinas en la glándula salival menor en pacientes con el síndrome de Sjögren primario es un patrón Th1. 3.- La IL-12 y la IL-18 son inductores del patrón Th1 en el síndrome de Sjögren. 4.- La expresión del RNAm de citoquinas no varía en relación al grado de afectación histológica ni en relación con el nombre de formación de focos. 5.- Los pacientes con el síndrome de Sjögren primario con más tiempo de evolución clínica presentaron un incremento significativo en la expresión del patrón Th1. / Objectives of this study were to examine the cytokine mRNA expression in minor salivary glands from patients with primary Sjögren's syndrome (pSS), searching for possible correlation with clinical parameters and to identify the dominant cytokine pattern in the different groups. Oral mucosa biopsy samples from 42 pSS patients were studied. Total RNA was analysed by normalized RT-PCR using oligo-dT as the RT primer and IL-2, IFN-gamma, IL-12, IL-18, IL-4, IL-10, TGF-beta and TNF-alpha-specific primers for amplification. Results were analysed taking into account: (1) biopsy grade I to IV (Chisholm's classification); (2) diagnosis of either definite pSS (n=30) or probable pSS (n=12), following the European classification criteria (ECC), and (3) length of disease evolution from the beginning of symptoms to the time of biopsy, using an arbitrary cut-off point of 12 months. This studied showed that Th1-related cytokines (IL-2, IFN-gamma, IL-12, IL-18, TNF-alpha) were present in most samples. IL-4 (Th2) was totally absent. Other regulatory cytokines (IL-10, TGF-beta) were detected in the majority of samples. No significant differences were found between definite and probable pSS nor between grades II, III, IV and fibrous tissue biopsies. A statistically significant increase of IL-2 (P=0.012) and IFN-gamma (P=0.019) was observed in samples from patients with longer disease evolution, whereas the two Th1-inducer cytokines IL-12 and IL-18 were equally and highly expressed in all samples. In conclusion, a predominant Th1 pattern of cytokines was observed in all pSS samples, irrespective of biopsy classification. In addition, a significant increase of Th1 cytokine expression frequency was associated with longer disease evolution.

Les metal·loproteïnases de matriu (MMPs) són uns enzims de gran rellevància biològica en totes les accions relacionades amb la reorganització de la matriu extracel·lular i també en la regulació de molts processos cel·lulars. Els limfòcits produeixen petites quantitats de gelatinases (MMP2 i MMP9) que són essencials en la migració a través dels teixits, tant en situacions fisiològiques com en els fenòmens patològics d'inflamació i disseminació tumoral. Prèviament vam demostrar que la interacció amb proteïnes de la matriu extracel·lular a través de receptors integrina era un dels mecanismes més efectius no només en la producció sinó també en l'activació de gelatinases en cèl·lules limfoïdes T. No obstant, els mecanismes que modulen la producció de MMPs a través d'integrines en els limfòcits no estaven identificats. En el conjunt d'aquests treballs hem volgut aprofundir en diferents aspectes de la producció de gelatinases pels limfòcits derivada del contacte cel·lular. Primerament hem estudiat les vies de transducció de senyals involucrades en aquest procés i després hem analitzat les seves implicacions en dos processos fisiopatològics que tenen un vincle important amb el microentorn matricial: una malaltia inflamatòria invasiva (arteritis de cèl·lules gegants) i una patologia neoplàsica (síndromes limfoproliferatives).Els resultats obtinguts en aquests treballs ens han permès arribar a les següents conclusions:1. La senyalització a través d'integrines en resposta a estímuls del microentorn (proteïnes de la matriu extracel·lular, concretament fibronectina) és un mecanisme molt eficient per a la producció i activació de gelatinases (MMP2 i MMP9) i MMP14 pels limfòcits T i B.2. La unió a fibronectina provoca un alliberament post-transcripcional ràpid de gelatinases en aquestes cèl·lules. La secreció d'aquests enzims és necessària per al procés d'invasió. 3. Els mecanismes de senyalització integrina estan modulats per FAK i la seva interacció amb Src. FAK, a través de l'acoblament de senyals duals, coordina l'alliberament de gelatinases i els processos d'adhesió cíclica necessaris per a la migració, suggerint que FAK adaptaria la secreció pulsàtil de gelatinases als canvis del citoesquelet en el procés invasiu limfocitari.4. La inflamació de les artèries de pacients d'arteritis de cèl·lules gegants s'acompanya d'un increment en l'expressió i activació de gelatinases i es troba en relació topogràfica amb l'expressió d'integrines leucocitàries. Aquest fet suggereix que la progressió de l'infiltrat limfocitari està relacionat amb l'expressió i l'activació de les gelatinases, les quals a més contribuirien a la destrucció de l'estructura arterial. El tractament amb corticoids s'acompanya d'una disminució en l'expressió de MMPs. 5. La talidomida redueix la producció de gelatinases induïda per fibronectina en cèl·lules limfoïdes B interferint amb diferents vies de senyalització mitjançada per integrines. Aquest podria ser un dels mecanismes d'acció d'aquest fàrmac que explicaria la seva eficàcia en el tractament del mieloma múltiple en el microentorn medul·lar. Com a conclusió general, les integrines leucocitàries poden coordinar la producció de gelatinases amb els mecanismes de migració cel·lular, afavorint el procés d'invasió cel·lular. Els processos inflamatoris i tumorals utilitzen aquest mecanisme, i la seva disrupció podria beneficiar l'evolució terapèutica d'aquestes patologies.

La arteritis de células gigantes (ACG) afecta arterias de mediano y gran calibre. La inflamación de la carótida y sus ramas da lugar a los síntomas craneales típicos de la enfermedad. Las lesiones inflamatorias expresan gran cantidad de mediadores que provocan la muerte celular y la destrucción de fibras elásticas. El remodelado de la pared arterial puede dar lugar a alteraciones estructurales vasculares, como la aparición de estenosis arteriales que producen síntomas isquémicos o el desarrollo de aneurismas o disección aórticos. La inflamación vascular se acompaña de una respuesta inflamatoria sistémica (RIS) de intensidad variable entre pacientes. Se liberan a la circulación mediadores inflamatorios que actúan sobre órganos a distancia dando lugar a las manifestaciones sistémicas de la enfermedad y a la síntesis de proteínas de fase aguda. La variabilidad en la intensidad de la RIS permite diferenciar entre subgrupos de pacientes que tienen unas características clínicas y un pronóstico distinto. Así, los pacientes con una RIS más intensa suelen presentar más recidivas y precisan mayores requerimientos terapéuticos.El tratamiento con corticoides mejora los síntomas y disminuye la síntesis de mediadores inflamatorios en pocas horas. Sin embargo, un porcentaje elevado de pacientes presenta recidivas durante el seguimiento. Por otra parte, algunos pacientes que alcanzan la remisión, continúan presentando una moderada elevación de mediadores inflamatorios tiempo después del diagnostico. A pesar del tratamiento, es posible que persista un cierto grado de actividad inflamatoria latente a nivel arterial, lo que podría justificar el desarrollo de complicaciones vasculares tardías. Entre los principales objetivos de esta tesis se encuentra valorar si la persistencia de actividad inflamatoria subclínica puede tener consecuencias para el paciente.Hemos comprobado que los niveles séricos de citocinas proinflamatorias, concretamente IL-6 y TNFα, persisten elevados años después del diagnostico, incluso en pacientes que están en remisión y no precisan tratamiento. Los niveles de ambas citocinas se relacionaron con más recidivas clínicas y mayores necesidades terapéuticas. Sin embargo, no mostraron diferencias entre pacientes que durante el seguimiento desarrollaron o no complicaciones vasculares o efectos adversos derivados del tratamiento corticoideo. Mediante un protocolo de estudio fue posible detectar aneurismas o dilatación aórticos en el 22,2 % de pacientes con una mediana de seguimiento de 5'4 años. Curiosamente, las complicaciones aórticas fueron mas frecuentes en pacientes que presentaban una RIS débil en el momento del diagnostico y en pacientes que no presentaron recidivas durante el seguimiento y pudieron suspender antes el tratamiento.En los últimos anos se ha intentado buscar nuevos fármacos que permitan reducir la exposición del paciente al tratamiento corticoideo. Aunque la expresión de TNFα se correlacionó con una enfermedad más refractaria y mayores necesidades terapéuticas, el tratamiento con Infliximab no mejoró el pronóstico de la enfermedad. Una posible explicación seria la existencia de citocinas redundantes que compensarían la función del TNFα bloqueado. En los últimos años se han identificado diversos sistemas de citocinas que tienen gran similitud estructural con el TNFα y comparten vías de señalización comunes. Entre ellos, el RANKL y sus receptores (OPG y RANK), fundamentales en la regulación del metabolismo óseo. Estudios in vitro sugieren que también podrían intervenir en la regulación de la respuesta inmune y en biología vascular.Hemos visto que el RANKL se expresa de forma intensa en las lesiones inflamatorias vasculares y su expresión es mayor en pacientes con una RIS intensa en el momento del diagnostico. A pesar de ello, la expresión de RANKL no se relacionó ni con el número de rebrotes ni con los requerimientos terapéuticos. Algunos hallazgos sugieren que el sistema RANKL/OPG podría intervenir en el remodelado vascular que tiene lugar tras la agresión inflamatoria. / Giant cell arteritis (GCA) is a granulomatous large- and mediumsized vessel vasculitis. Infiltrating macrophages and structural vascular cells secret inflammatory mediators leading to vascular damage and abnormal vascular remodelling, that may eventually have clinical consequences for patients, such as luminal narrowing with ischemic symptoms or development of aortic aneurysms.GCA-patients experience a rapid relief of symptoms with treatment but 40-60% relapse when glucocorticosteroids are tappered. In addition, vascular complications may appear during follow-up. It is not clear whether these complications arise from subclinical vascular inflammation or result from maladaptive remodelling driven by the initial inflammatory injury. Our study indicates that circulating pro-inflammatory cytokines IL-6 and TNFα remain elevated in a substantial proportion of patients with GCA after long-term follow-up. Although patients with higher cytokine levels experienced a more relapsing disease and required higher doses of glucocorticosteroids, persistent elevation of circulating cytokines was not associated with clinically relevant vascular complications or glucocorticosteroid side effects. Systematic screening revealed aortic aneurysm or dilatation in 22,2% of patients after a median follow-up of 5.4 years. Our data did not support that, aortic aneurysm formation resulted mainly from persistent disease activity and suggested interplay of heterogeneous factors.In spite of TNFα expression in GCA-temporal arteries correlated with a more relapsing disease and higher glucocorticosteroid requirements, treatment with infliximab did not improve disease outcome, suggesting that other mediators might be involved in the regulation of the inflammatory response. RANKL and its receptors (RANK and osteoprotegerin) are members of the TNFα superfamily and share common signalization pathways with TNFα. They play a central role in bone metabolism but studies "in vitro" also suggest regulatory functions over immune and vascular responses. RANKL, RANK and OPG were highly expressed in GCA-inflammatory lesions and correlated with the expression of other inflammatory mediators. Although RANKL expression was higher in patients with an intense systemic inflammatory response at diagnosis, it was not correlated with number of relapses or glucocorticosteroid requirements. Several data suggest a possible role of these cytokines in vascular remodelling after the inflammatory injury.

Las cardiopatías congénitas son las malformaciones congénitas más frecuentes. A pesar de los avances técnicos y de manejo clínico y farmacológico alcanzados en las tres últimas décadas, la cirugía de la cardiopatía congénita en la edad pediátrica se asocia a una morbilidad y mortalidad elevadas. La taquiarritmia cardiaca es una de las complicaciones más graves en el postoperatorio inmediato de cirugía de cardiopatía congénita. De todas ellas, la taquicardia ectópica de la unión, es la más frecuente, con una incidencia de hasta el 15% según las series estudiadas y una mortalidad que puede alcanzar el 11.4%(5). La etiología de la taquiarritmia en el contexto del postoperatorio cardiaco es multifactorial con la participación de factores intraoperatorios y extraoperatorios. Las opciones terapéuticas son, a día de hoy, todavía limitadas y, en las últimas tres décadas se han producido pocos avances en el manejo y prevención de éstas. A pesar de que no ha sido demostrado, la activación del sistema simpático y la liberación masiva de catecolaminas plasmáticas, consecuencia de la respuesta al estrés quirúrgico, podrían tener un papel clave en la etiopatogenia de la taquiarritmia postquirúrgica. La modulación de la respuesta simpática en el perioperatorio de cirugía de cardiopatía congénita podría ser beneficioso para la restauración de la función orgánica. Recientemente, algunos estudios sugieren los beneficios de los agentes agonistas α-2 adrenérgicos en el perioperatorio de. La utilización de agonistas α-2 bloquea la respuesta simpática catecolaminérgica pudiendo así atenuar la disfunción hemodinámica perioperatoria minimizando las complicaciones cardiacas asociadas a la cirugía de la cardiopatía congénita y, en concreto, la incidencia de arritmia. Dexmedetomidina, un agonista α-2 selectivo, es un sedoanalgésico con un perfil hemodinámico que lo hace atractivo para la cirugía cardiaca. A través de la estimulación de los receptores imidazólicos del locus coeruleus provoca un nivel de sedoanalgesia adecuado sin deprimir el centro respiratorio, lo que permite avanzar en el destete respiratorio del paciente de forma precoz y disminuir así los tiempos de ventilación mecánica y como consecuencia, la estancia media en unidades de cuidados intensivos. A través de la estimulación de los receptores del sistema simpático periférico α-2 , dexmedetomidina disminuye la liberación de catecolaminas endógenas. El bloqueo de la respuesta catecolaminérgica endógena podría tener un papel determinante en la disminución de las complicaciones cardiacas y más en concreto las arritmias asociadas a la cirugía de cardiopatía congénita. Existen referencias aisladas en la literatura científica del efecto antiarrítmico de dexmedetomidina. Hayashi y colaboradores en un estudio experimental con perros, objetivaron que la infusión continua de dexmedetomidina aumentaba 4 veces el umbral arritmogénico de la adrenalina en los animales anestesiados con halotane. Esta tesis doctoral presentada en formato de compendio de publicaciones reúne la primera evidencia científica del papel de dexmedetomidina en el manejo y prevención de la taquiarritmía en pediatría. Se presentan tres publicaciones que demuestran: primero que dexmedetomidina es un fármaco sedante útil y seguro en neonatos y lactantes en el postoperatorio de cirugía cardíaca; segundo, que dexmedetomidina parece poseer propiedades antiarritmogénicas útiles para la finalización de episodios de taquicardia paroxística supraventricular y, tercero, que la utilización de dexmedetomidina en el perioperatorio de cirugía cardiaca pediátrica se asocia con una disminución significativa de la taquiarritmia. Las propiedades sedoanalgésicas particulares de dexmedetomidina junto a sus propiedades antiarritmogénicas la convierten en un fármaco ideal para el control de la sedación y analgesia en el postoperatorio de cirugía cardíaca pediátrica. / Congenital heart disease constitutes the most frequent group of congenital defects. Over the last two decades, advances in the management of patients with congenital heart disease have made an impact on their overall prognosis. Survival is now expected in many patients with lesions previously considered untreatable. Tachyarrythmias are a frequent and severe complication in the immediate postoperative period of congenital heart disease surgery. The etiology of tachyarrhythmia in the setting of congenital heart disease surgery is multifactorial, therapeutic options are limited and no significant advances have been made over the last two decades. Surgical stress response and its endogenous cathecolaminergic surge have a leading role in the onset of the postoperative arrhythmia. Therefore, modulation of the sympathetic response in the perioperative period of congenital heart disease surgery might play a significant role in the arrhythmia prevention. Alpha-2 agonists block the sympathetic response, thereby reducing the catecholaminergic surge associated with surgery. Thus, α-2 agonists might play a major role in reducing the incidence of tachyarrhythmias. Dexmedetomidine, a selective α-2 agonist, is a novel sedative with a safe hemodynamic profile. Dexmedetomidine is currently administered for its sedative and anxiolysis properties. Sedation and anxiolysis effects of dexmedetomidine are mediated via non-GABAergic pathways. Thus, dexmedetomidine provides an appropriate level of sedation without depression of the respiratory drive, thereby allowing earlier weaning from mechanical ventilation and shortening intensive care unit stay. Interestingly, dexmedetomidine has a sympatholytic effect. It has been shown to lower plasma catecholamine levels in healthy volunteers and in patients undergoing vascular surgery and congenital heart disease surgery with cardiopulmonary bypass. The α-2 agonist potently inhibits the neuronal firing rate from the locus coeruleus, leading to a decrease in sympathetic outflow. This action may reduce noradrenaline release at the cardiac neuroeffector junction, thereby mimicking the action of class II antiarrhythmic drugs. Dexmedetomidine use has gained interest among pediatric cardiac intensive care units however, information on its use in patients younger than 1 year old is lacking and its potential antiarrhythmogenic effect has not been proven. This thesis (compendium of works) presents the first evidence on the utility of dexmedetomidine in the management and prevention of tachyarrhythmia in the setting of pediatric heart surgery. We present data demonstrating: First, that dexmedetomidine is a safe drug for infants and children under the age of one. Second, that dexmedetomidine is a useful drug in the treatment of supraventricular paroxystic tachycardia provably exerting a direct effect on AV node conduction and third, that dexmedetomidine effectively control postoperative tachyarrhytmias provably via its sympathicolitic effect. Therefore, the sedoanalgesic properties of dexmedetomidine together with its antiarrhythmic effects render it the ideal drug for sedation and analgesia control post-cardiac surgery and the prevention of postoperative tachyarrhythmia.

Tesi realitzada a l'Institut d'Investigació Biomèdica de Bellvitge (IDIBELL) / El sarcoma de Ewing (SE) es el segundo tumor óseo maligno infantil más frecuente y presenta una alta incidencia de enfermedad metastásica. Este tipo de tumores presentan una translocación génica característica que da origen a una proteína de fusión, normalmente EWS/FLI1. Esta proteína de fusión actúa como factor de transcripción aberrante, regulando la expresión de diferentes genes implicados en la iniciación, mantenimiento y progresión del tumor. Nuestro grupo describió como uno de estos genes diana a caveolina 1 (CAV1), describiendo además su papel determinante en el fenotipo maligno del SE, en la tumorigénesis, en la angiogénesis y en la resistencia a apoptosis inducida por quimioterapia. Para investigar el papel concreto de CAV1 en el proceso metastásico de este sarcoma, se creó un modelo de baja expresión de CAV1 en líneas celulares de SE y se determinaron cambios en su capacidad migratoria, invasiva y metastásica. En los ensayos in vitro se halló una menor capacidad migratoria de las células con silenciamiento de CAV1 y una reducción en la expresión de metaloproteinasa 9 (MMP-9) y en la actividad de MMP-2, ambas MMPs implicadas en el proceso de invasión. La regulación de la actividad de MMP-2 parece estar relacionada con la posible regulación que ejerce CAV1 en la función de la MMP de membrana tipo 1 (MT1-MMP), proteína fundamental para la activación de MMP-2. Por otro lado, en este estudio se propone que CAV1 promueve la expresión de MMP-9 transcripcionalmente a través de la regulación de la activación de la vía de señalización de ERK1/2 (Extracellular signal-regulated kinase 1/2). En nuestro modelo, ERK1/2 activo translocaría al núcleo donde activaría los factores de transcripción responsables de la activación del promotor de MMP-9. Por otro lado, la fosforilación de RSK2 (Ribosomal S6 kinase 2) por parte de ERK1/2 en el citoplasma, produciría la activación de RSK2 que a su vez activaría la proteína ribosomal rpS6, uno de los responsables de la iniciación de la traducción, por lo que también podría estar influyendo a la producción de MMP-9 a este nivel. Según nuestros resultados, CAV1 estaría influyendo en la capacidad migratoria de las células de SE mediante dos mecanismos: 1) a través de la activación de la vía de ERK1/2 y 2) mediante la unión a diferentes proteínas con dominio SH2 a través de la fosforilación de CAV1 en la tirosina 14. ERK1/2 influye en la regulación de la capacidad migratoria de una forma de pendiente o independiente de RSK1. Además, en los ensayos de metástasis experimental in vivo las células con inhibición de CAV1 presentaron una menor incidencia de metástasis pulmonar, hecho que correlacionó con una disminución en la expresión de SPARC (Secreted protein acidic and rich in cysteine), una proteína de adhesión importante en procesos metastásicos. En resumen, nuestros resultados evidencian la importancia de CAV1 en el proceso metastásico del SE. / Ewing’s sarcoma (ES) is the second most common bone tumor in childhood and occurs with a high incidence of metastatic disease. Such tumors have a characteristic gene translocation that gives rise to a fusion protein, most commonly EWS/FLI1. This fusion protein acts as an aberrant transcription factor regulating the expression of different target genes involved in the initiation, maintenance and progression of the tumor. Our group described caveolin 1 (CAV1) as one of these target genes, describing its role in the malignant phenotype, tumorigenicity and resistance to chemotherapy-induced apoptosis of ES cell lines. To investigate the specific role of CAV1 in the metastatic process of this sarcoma, we established a model of low expression of CAV1 in cell lines of ES. Then, we measured changes in their migratory capacity, invasiveness and metastatic potential. In vitro, we found a lower migratory capability of CAV1 knockdown cells and a reduction in MMP-9 expression and MMP-2 activity. The regulation of MMP-2 activity seems to be related to the possible regulation that CAV1 exerts on the function of MT1- MMP, an essential protein for the activation of MMP-2. On the other hand, we suggest that CAV1 promotes the expression of MMP-9, both transcriptionaly and post-transcriptionaly, through regulating ERK1/2 signaling pathway. In our model, activated ERK1/2 would translocate to the nucleus where it would activate the transcription factors responsible for MMP-9 promoter activation. At the cytoplasm, activated ERK1/2 would phosphorylate and activate RSK2, which, in turn, would promote rpS6 activation, leading to protein translation initiation. Our results indicate that CAV1 is regulating migratory capability of ES cells by two different mechanisms; 1) through ERK1/2 pathway activation, 2) by linking several proteins bearing SH2 domains trough phosphorylated Tyr14 of CAV1. ERK1/2 seems to regulate cell migration in both RSK1-dependent and independent manner. In addition, experimental metastasis assays in vivo showed that, CAV1 knockdown cells had a lower incidence of pulmonary metastasis, a fact that correlated with a decrease in the expression of SPARC, a major adhesion protein in metastatic processes. In summary, our results demonstrate the importance of CAV1 in the metastatic process on ES tumors.

Los tumores germinales testiculares (TCGT) son una neoplasia poco frecuente, ya que sólo representa alrededor del 2% de los cánceres que afectan al varón. Sin embargo, son el tumor más frecuente en hombres caucásicos de entre 15 y 40 años, siendo la principal causa de muerte en este rango de edad. Aunque un elevado porcentaje de estos tumores (alrededor del 80%) presentan una alta sensibilidad a la quimioterapia basada en cisplatino (CDDP), incluso en casos de enfermedad diseminada, aún existe un porcentaje no menospreciable de pacientes que no lograrán una respuesta completa duradera debido al desarrollo de recidivas resistentes a la quimioterapia y que acabarán falleciendo a causa de la enfermedad. Por este motivo, el estudio y la comprensión de los mecanismos mediante los cuales los tumores consiguen evadir los efectos citotóxicos del CDDP es de vital importancia para mejorar la efectividad de las terapias actuales, así como para definir nuevas estrategias de tratamiento. Partiendo de esta base, el presente trabajo se ha centrado en dos objetivos principales: a) el estudio de las mutaciones y cambios genéticos relevantes en el proceso de adquisición de resistencia al CDDP en estos tumores, y b) desarrollo y evaluación de la eficacia de una nueva terapia combinada basada en CDDP y un inhibidor de poli (ADP-ribosa) polimerasas, olaparib, para tratar tumores testiculares refractarios a la quimioterapia convencional. Para abordar el primer objetivo, se realizó un estudio mutacional de la línea celular de cáncer testicular SuSa mediante secuenciación de última generación (NGS). Utilizando esta técnica, se compararon las mutaciones presentes en el genoma de la línea celular original sensible al fármaco y su derivada resistente. Una vez seleccionadas las mutaciones potencialmente implicadas en el proceso de adquisición de resistencia, se evaluó la relevancia de los genes candidatos mediante un screen con siRNAs. Esta técnica también nos permitió estudiar la implicación de otros genes que, aún no presentando mutaciones en su secuencia, pudiesen estar relacionados con la resistencia debido a otros tipos de desregulaciones funcionales. Paralelamente, gracias a la generación en nuestro grupo de un modelo murino de xenoinjertos ortotópicos de cáncer testicular, se pudo conseguir mimetizar in vivo el fenómeno de adquisición de resistencia a CDDP, tratando tumores sensibles de origen humano implantados en los testículos de ratones con concentraciones crecientes de fármaco, hasta obtener tumores resistentes. Esto nos permitió la realización de otro experimento de NGS para comparar el exoma de tumores primarios humanos sensibles y sus derivados resistentes al CDDP, con el objetivo de estudiar los cambios producidos in vivo en el proceso de adquisición de resistencia utilizando un modelo más cercano a la clínica. En cuanto al segundo objetivo, partiendo de la base de que los TCGTs son tumores cuya sensibilidad se caracteriza por niveles reducidos de mecanismos de reparación de lesiones en el DNA, y que durante el proceso de adquisición de resistencia parece ser que estos tumores son capaces de incrementar esta capacidad de reparación, pensamos que sería muy interesante utilizar un fármaco cuya actividad estuviera dirigida a inhibir la reparación en el DNA. Así, evitando una reparación eficiente, podríamos potenciar el efecto citotóxico producido por las lesiones en el DNA causadas por el CDDP. De esta manera, se estudió el efecto del olaparib sólo o en combinación con el CDDP sobre diferentes líneas celulares de TCGT, tanto a nivel molecular como in vitro, y, posteriormente, in vivo en ratones xenoinjertados con tumores que habían demostrado su resistencia en la clínica, obteniendo unos resultados altamente prometedores. / Testicular germ cell tumors (TGCTs) are the most common malignancy in young Caucasian men. Despite the generally favorable outcome for TGCTs treated with cisplatin (CDDP)-based chemotherapy, it is still the leading cause of cancer deaths in this group of age. Hence, the study and comprehension of the mechanisms underlying the acquisition of resistance is crucial to improve the effectiveness of current therapies, as well as to define new treatment strategies. The present study has focused in two main goals: identification of mutations relevant to the process of resistance acquisition in TGCTs, and efficacy evaluation of a novel drug combination to treat refractory tumors. Using next generation sequencing (NGS) technology we studied the mutational profile in a CDDP sensitive testicular cell line and its resistant counterpart. Potentially relevant mutations were selected and siRNA screens were carried out both to validate the role of those changes in the onset of resistance and to study other genes not mutated but potentially deregulated and, thus, involved in the process. Results pointed out 4 candidates frequently mutated or deregulated capable of modifying the response of the tumors to CDDP: FANCA, SMARCB1, ALX4 and PARP6. Additionally, we generated a murine orthoxenograft model of testicular cancer, which allowed us to reproduce and study in vivo the onset of resistance, using an approach closer to the clinic scenario. Nude mice engrafted with sensitive human tumor samples were treated with increasing CDDP concentrations until they were completely unresponsive to the drug. We next used NGS technology to compare paired sensitive and resistant tumor samples and studied their mutational profile, obtaining a list of candidates potentially relevant to the development of resistance. Finally, we assessed the effectiveness of a new drug combination to overcome resistance in testicular tumors. The treatment was based on a multi-target approach, damaging DNA with CDDP and inhibiting its repair with a PARP inhibitor, aka olaparib, at the same time. Both in vitro and in vivo results where highly promising, producing a great decrease in tumor viability while showing no major side effects. More research will shed light on the potential of this novel combination as a feasible option for non-responding or relapsed patients.

La hemorragia intracerebral (HIC) se define como la extravasación de sangre al parénquima encefálico. Aunque la HIC presenta una elevada tasa de mortalidad y discapacidad, muchos de los mecanismos moleculares implicados en esta patología aún se desconocen. Su diagnóstico y pronóstico se basa en las pruebas de neuroimagen, siendo en ocasiones poco accesibles y específicas. Por ello, el objetivo principal de esta tesis se centra en la identificación de moléculas implicadas en la patología de la HIC que pudieran emplearse en mejorar las aproximaciones diagnósticas y terapéuticas de esta enfermedad. Por ello, la primera parte de la tesis se basó en encontrar biomarcadores de etiología de HIC primaria (arteriosclerosis hipertensiva y/o angiopatía amiloide cerebral (AAC), mediante el análisis transcriptómico de células sanguíneas. A pesar de que no fuimos capaces de identificar ningún biomarcador que diferenciara ambas etiologías, encontramos que la expresión del gen GOLGA8A (Golgin A8 Family, Member A), así como los niveles de la proteína en sangre, estaban incrementados en pacientes con HIC respecto a controles. En segundo lugar, nos centramos en identificar moléculas implicadas en una de las causas de HIC secundaria, como es la transformación hemorrágica (TH) en el ictus isquémico tras el tratamiento trombolítico. A pesar de la eficacia del Activador Tisular del Plasminógeno recombinante (r-tPA), el uso de esta terapia en el ictus isquémico agudo sigue limitado en parte por la estrecha ventana terapéutica y la presencia ocasional de hemorragias sintomáticas. Por ello, nuestro estudio in vitro se centró en la identificación masiva de transcritos expresados por el tratamiento con r-tPA en condiciones de privación de oxígeno y glucosa (POG) a nivel endotelial. Identificamos el factor de transcripción nuclear Nurr1 (NR4A2, del inglés Nuclear receptor subfamily 4 groupA member 2) como molécula implicada en la muerte celular y la inflamación. Además, pudimos establecer una asociación entre los niveles basales de Nurr1 séricos y la posterior aparición de TH sintomática en pacientes con ictus isquémico que habían recibido r-tPA. Por último, en un tercer estudio, evaluamos cómo las apolipoproteínas ApoJ y ApoA1 recombinantes humanas modulaban el transporte del péptido β–amiloide (1-40) a través de un modelo in vitro de barrera hematoencefálica, como posible aproximación terapéutica para la AAC. En resumen, consideramos que esta tesis doctoral contribuye a definir mejor la fisiopatología de la HIC, al desarrollo de posibles aplicaciones de diagnóstico y pronóstico de los pacientes que sufren hemorragias cerebrales, así como a proponer nuevas aproximaciones terapéuticas para diferentes subtipos de HIC. / Intracerebral hemorrhage (ICH) is a focal bleeding from a blood vessel in the brain parenchyma. Despite the high ratio of ICH severity and mortality, the molecular mechanisms involved in this disease are still unknown. Therefore, the main objective of this thesis is focused on the identification of molecules involved in the pathology of the ICH that might be candidates for a better diagnosis, treatment and prognosis of the disease. Primary ICH is caused by hypertensive arteriosclerosis and/or cerebral amyloid angiopathy (CAA). The diagnosis and prognosis is based on neuroimaging criteria, but these techniques remain inaccessible and not enough specific. Therefore, our first study was based on the search of biomarkers of primary ICH etiology through the transcriptome analysis of blood cells using microarray technology. Although we were unable to identify biomarkers to differentiate between CAA associated-ICH and hypertensive associated-ICH, we found that GOLGA8A (Golgin A8 Family, Member A) gene expression and the corresponding plasma protein levels were increased in patients with ICH in comparison to controls. Secondly, we aimed to identify molecules involved in a cause of secondary ICH, such as the hemorrhagic transformation (HT) in the ischemic stroke after the thrombolytic therapy. Despite the effectiveness of recombinant tissue plasminogen activator (r-tPA), its therapeutic window remains limited, mainly by occasional vascular deleterious effects. Thus, we focused our study on the discovery of molecules altered by the combination of r-tPA and ischemic conditions in endothelial cells in vitro. We identified the nuclear transcription factor Nurr1 (NR4A2, Nuclear receptor subfamily 4 groupA member 2) as a candidate molecule involved in cell death and inflammation. In addition, we established an association between baseline serum levels of Nurr1 and the subsequent development of symptomatic HT in patients with ischemic stroke who received r-tPA. Finally, in a third study, we planned to determine the modulation of β-amyloid (Aβ) trafficking by the chaperones apolipoproteins ApoA1 and ApoJ across the BBB. In this regard, we confirmed that both recombinant human ApoA1 and ApoJ proteins influenced the Aβ(1-40) clearance through different mechanisms in a mouse in vitro BBB model. Our results suggest that the modulation of the balance of these apolipoproteins between the periphery and the brain may be a future strategy to develop an effective therapy for CAA. In summary, we consider that our studies contribute to the understanding of some mechanism involved in the ICH pathology and propose new preclinical and therapeutic approaches for different ICH subtypes.

Foi realizada uma revisão integrativa da literatura com o objetivo de caracterizar as pesquisas na área de enfermagem oncológica. O levantamento bibliográfico abrangeu as publicações nacionais em enfermagem oncológica, de 1980 a 2004, disponível nos bancos de dados Lilacs e BDENF. Foram identificados 91 artigos, dos quais 84 compuseram a amostra final do estudo. A análise dos estudos permitiu identificar que os mesmos foram publicados com maior freqüência na Revista Brasileira de Cancerologia e que as publicações se intensificaram após o ano 2000. Em relação à identificação dos autores, a maioria é docente (41,5%); 85,3% dos pesquisadores são enfermeiros; 33,4% procedem da Escola de Enfermagem de Ribeirão Preto da Universidade de São Paulo e da Universidade Federal de São Paulo. Os estudos, em sua maioria, foram desenvolvidos na região Sudeste e 52,4% deles foram localizados na base de dados Lilacs; as palavras-chave mais utilizadas foram enfermagem e câncer (72,6%); 66,7% dos estudos apresentaram os objetivos de forma clara, 23,8% não apresentaram objetivos, 9,5% não apresentaram adequadamente os objetivos e 19,0% eram derivados de dissertação ou tese. Entre os desenhos de pesquisa, 36,9% utilizaram a abordagem metodológica qualitativa e 21,4% a quantitativa; 9,5% realizaram estudos quanti-qualitativos e 32,1% não discriminaram o método utilizado. Em relação à ética, 41,7% dos estudos não fizeram nenhuma referência; 65,5% apresentaram as características da amostra estudada e 34,5% não apresentaram; 45,2% dos estudos investigaram pacientes com diferentes tipos de câncer, sendo a enfermagem em ginecologia a área com maior número de investigações. Em relação à área temática destacam-se os estudos referentes à atuação do enfermeiro com 16,6%; 39,3% apresentavam quadro teórico; 97,6% apresentavam revisão de literatura em todas as etapas do processo de pesquisa; 89,3% apresentavam considerações finais ou conclusões; 65,5% responderam aos objetivos e 71,4% fizeram recomendações para o desenvolvimento da profissão. Identificamos o grande interesse da enfermagem pela abordagem metodológica qualitativa, devido ao grande número de estudos. Entretanto, como os resultados apontaram a falta de esclarecimentos importantes para demonstrar o rigor dos estudos analisados, consideramos que ainda não há um corpus de estudos que possibilite a metanálise ou metassíntese desse conhecimento. Destacamos que esse corpus dificulta a aplicação dos resultados de pesquisa para a prática assistencial de enfermagem em oncologia. Além disso, sugerimos identificar prioridades de pesquisa em enfermagem oncológica; refinar estratégias de síntese de resultados de pesquisa; criar uma cultura de pesquisa dentro das instituições de saúde; desenvolver estudos relacionados aos tipos de câncer mais incidentes; replicar estudos em outros contextos; conduzir com rigor os estudos respeitando-se as etapas do método científico e melhor elaboração dos relatórios encaminhados para publicação, a fim de que a pesquisa em enfermagem oncológica possa promover cuidados efetivos e com qualidade. / An integrative review of the literature was performed with the aim of characterizing the researches produced by the Brazilian oncology nursing. The bibliographic research covered national nursing publications, from 1980 to 2004, on the Lilacs and BDENF data bases; from which 91 articles were identified and, of the total, 84 composed the final sample of the study. The analysis of the studies allowed identify that they have been published most frequently on the Brazilian Journal of Carncerology and that the publications were increased after the year 2000. In relation to the identification of the authors, most are university professors (41.5%), 85.3% of the researchers are nurses, 33.4% are from the Ribeirão Preto School of Nursing of the University of São Paulo and from the Federal University of São Paulo. Most of the studies were developed in the Southeast region of Brazil. Of the total studies, 52.4% were found by using Lilacs; the most used keywords were nursing and cancer (72.6%); 66.7% made a clear statement, 23.8% did not present any goals, and 9.5% did not present their goals appropriately and 19,0% were derived from dissertations or thesis. Among the research schemes, 36.9% used the qualitative methodological approach, 21.4% used the quantitative methodological approach, 9.5% performed quanti-qualitative studies, and 32.1% did not state the used method. In terms of ethics, 41.7% of the studies did not make any statement. Of the studies, 65.5% presented characteristics of the studied samples, and 34.5% did not. A total of 45.2% of the studies investigated patients with different types of cancer, being nursing in gynecology the area with the highest number of investigations. In relation to the thematic area, nursing actuation stands out with a total of 16,6%. Of the total, 39.3% of the studies presented a theoretical background, 97.6% presented literature reviews in all steps of the research process, 89.3% presented final considerations or conclusions, 65.5% comply with the goals, and 71.4% made recommendations for the profession’s development. We identified the great interest of nursing on the qualitative methodological approach, due to the high number of studies. However, since the results showed there is a lack of important elucidations to demonstrate the rigor of the analyzed studies, we consider that there still isn’t a corpus of studies that allow the meta-analysis or metasynthesis of knowledge. We point out that this corpus increases the difficulty of applying the research results to the practice of nursing aid in oncology. In addition, we suggest identifying priorities in research on oncology nursing, refining the strategies of synthesis of research results, creating a research culture within health institutions, developing studies related to the most incident types of cancer, replicate studies in other contexts, conducting studies rigorously by respecting the steps of the scientific method and enhancing the development of reports forwarded for publication, in a way that research on oncology nursing may promote effective and quality care.

Orientador: Cegina Célia Popim / Resumo: Objetivo: Elaborar um produto que contenha as competências e habilidades para o ensino da oncologia na graduação de enfermagem no Brasil. Método: Trata-se de pesquisa metodológica, com aplicação da técnica Delphi. A pesquisa foi realizada em duas fases. Na fase A, realizou-se revisão integrativa da literatura sobre o tema proposto, adotando como critérios de inclusão artigos completos, com resumos disponíveis e relacionados ao objeto de pesquisa, oriundos de periódicos nacionais e internacionais, indexados nas bases de dados referidas, no período de cinco anos, incluindo as Diretrizes Curriculares Nacionais do Curso de Graduação em Enfermagem, assim como, a Estrutura de Carreira e Educação para Enfermagem Oncológica do Royal College of Nursing e da Oncology Nursing Society e, ao final, elaborou-se um produto preliminar. Este, por sua vez, foi submetido para apreciação dos peritos através do link (http://www3.fmb.unesp.br/questionarios/index.php/488282/lang-pt-BR) realizado pelo Núcleo de Estudo a Distância - Nead.Tis da Faculdade de Medicina de Botucatu (FMB), com questionário com oito tópicos. Tais tópicos são: Contexto da enfermagem oncológica; Ciência básica e tratamento do câncer; Avaliação e Intervenções de Enfermagem no manejo de pessoas afetadas pelo câncer; Câncer como doença crônica; compreendendo o impacto do câncer no indivíduo, famílias e profissionais da saúde; Informação e comunicação no tratamento do câncer; Liderança clínica e gestão de recursos; Pesquisa base... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Goal: To elaborate a product that includes the skills and abilities for teaching of Oncology in Nursing undergraduate courses in Brazil. Method: this is a methodological type of research, with the application of the Delphi method. The research has been carried out in two steps. In phase A, it has been conducted an integrative literature review about the proposed subject of study, with the use of complete articles as inclusion criteria, with available abstracts related to the subject of study, from national and international journals, indexed in the referred database, within five years, including the national curriculum guidelines for the Undergraduate Nursing Course, as well as the career structure and education for Oncological Nursing of the Royal College of Nursing and Oncology Nursing Society and, in the end, it has been elaborated a preliminary product. This, in turn, was submitted for examination by the experts through the link (http://www3.fmb.unesp.br/questionarios/index.php/488282/lang-pt-BR), carried out by the Distance Learning Center – NEaD.Tis (in Portuguese) of the Medical School of Botucatu (FMB, in Portuguese), with a questionnaire containing eight topics. These topics are: Context of Oncological Nursing; Basic science and treatment of cancer; Evaluation and Nursing Interventions when handling people affected by cancer; Cancer as a chronicle disease; encompassing the impact of cancer in the individual, families and healthcare practitioners; Information and comm... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre