The difficulty of increasing taxane production and reducing its costs has prompted a search for new biotechnological sources. The unexpected discovery of taxanes in Corylus avellana has generated considerable interest in studying this plant and its derived cell cultures. We therefore focused this work on the study of cell suspension cultures of C. avellana as a new biotechnological approach to the production of taxol and related taxanes. With this goal, we optimized a scale-up process, the type of elicitor and moment of elicitation, cell culture growth, and an analytical technique to detect the compounds of interest. Also, C. avellana tree extracts were analyzed, leading to the identification of compounds with antiproliferative activity against cancer cell lines. These results provide new insights into cell suspension cultures of C. avellana and how to increase taxane production. / La dificultat d’incrementar la producció de taxans i de reduir els seus costos ha promogut la cerca de noves fonts biotecnològiques. El fet de trobar taxol i taxans a Corylus avellana ha incrementat l’ interès en el seu estudi. Per aquesta raó, hem focalitzat aquest treball en trobar noves estratègies per la producció de taxans en suspensions cel•lulars de C. avellana. Amb aquest objectiu, hem optimitzat el procés d’escalat, l’elicitació i el creixement dels cultius, així com la tècnica analítica per identificar i quantificar els compostos d’interès. A més, hem estudiat diversos extractes de l’arbre, fet que ens ha permès trobar altres compostos amb activitat antiproliferativa en línies cel•lulars cancerígenes. Tots els resultats proporcionen noves eines pel cultiu de suspensions cel•lulars de C. avellana i per a l’increment de la producció de taxans.

Steroid receptors (SRs) are hormone-induced transcription factors that regulate gene expression by their concerted actions with coregulatory proteins. Performing a quantitative mass spectrometry-based interaction screen in breast cancer cells, we identified Polo-like kinase 1 to interact with progesterone receptor (PR) and estrogen receptor (ER) in presence of their respective hormone stimuli. PLK1 is recruited to chromatin and regulates SR-dependent and –independent gene transcription. Global gene expression analysis let us observe that PLK1-coactivated genes are enriched in developmental functions and linked to good clinical prognosis in breast cancer patients. Using large-scale phosphoproteomics with MCF7 breast cancer cells treated with estradiol in presence or absence of the specific PLK1 inhibitor BI2536, we observed that 28% of estradiol-induced phosphorylation sites depended on PLK1 activity. Among proteins with PLK1-dependent phosphorylation sites, we identified several transcriptional regulators including the ER-associated histone H3K4-methylase MLL2. As PLK1 inhibition reduced the estradiol-mediated induction of H3K4 methylation levels at MLL2 target genes, together these results propose a role of PLK1 in the regulation of MLL2 activity. Finally, in a targeted approach using recombinant histone proteins as substrate of PLK1, we observed a specific phosphorylation of histone H2B at serine 36. In summary, we conclude that PLK1 affects SR-dependent and SR-independent gene transcription by phosphorylating several transcriptional regulators and chromatin components.

No description available.

Acute myeloid leukemia (AML) is frequently linked to epigenetic abnormalities and deregulation of gene transcription, which lead to aberrant cell proliferation and accumulation of undifferentiated precursors. ZRF1, a recently characterized epigenetic factor involved in transcriptional regulation, is highly overexpressed in human AML, but it is not known whether it plays a role in leukemia progression. In this thesis, we have investigated the function of ZRF1-mediated transcriptional regulation in AML. We demonstrate that ZRF1 depletion decreases cell proliferation, increases apoptosis and induces cell differentiation in human AML cells. Treatment with retinoic acid (RA), a differentiating agent currently used to treat certain AMLs, leads to a functional switch of ZRF1 from a negative regulator to an activator of differentiation. At the molecular level, ZRF1 controls the RA-regulated gene network through its interaction with the RA receptor α (RARα) and its binding to RA target genes. Our genomewide expression study reveals that ZRF1 regulates the transcription of nearly half of RA target genes. Consistent with our in vitro observations that ZRF1 regulates proliferation, apoptosis, and differentiation, ZRF1 depletion strongly inhibits leukemia progression in xenograft mouse models. Finally, ZRF1 knockdown cooperate with RA treatment in leukemia suppression in vivo. Taken together, our results show that ZRF1 is a key transcriptional regulator in leukemia progression and suggest that ZRF1 inhibition could be a novel strategy to be explored for AML treatment. / La leucèmia mieloide aguda (LMA) està relacionada freqüentment amb anomalies epigenètiques i desregulació de la transcripció gènica, que provoquen una proliferació cel·lular aberrant i l'acumulació de precursors indiferenciats. ZRF1, un factor epigenètic caracteritzat recentment i implicat en la regulació transcripcional, es troba altament sobreexpressat en la LMA humana, però es desconeix si juga cap paper en la progressió de la malaltia. En aquesta tesi, s'ha investigat la funció de ZRF1 en la regulació transcripcional en la LMA. Es demostra que el silenciament de ZRF1 provoca una disminució de la proliferació, un increment de l'apoptosi i una inducció de la diferenciació en cèl·lules de LMA humana. El tractament amb àcid retinoic (AR), un inductor de la diferenciació que es fa servir actualment per a tractar determinades LMAs, produeix un canvi funcional en ZRF1, que passa de repressor a activador de la diferenciació. A nivell molecular, ZRF1 controla la xarxa de gens regulada per l’AR a través de la seva interacció amb el receptor de l'AR α (RARα) i la seva unió als gens diana de l'AR. El nostre estudi d'expressió a nivell de tot el genoma revela que ZRF1 regula la transcripció de gairebé la meitat dels gens diana de l'AR. En concordança amb les nostres observacions in vitro que mostren que ZRF1 regula la proliferació, l'apoptosi i la diferenciació, el silenciament de ZRF1 provoca una forta inhibició en la progressió de la leucèmia en models de xenotrasplantament en ratolí. Finalment, el silenciament de ZRF1 coopera amb el tractament amb AR en la supressió de la leucèmia in vivo. Conjuntament, aquests resultats mostren que ZRF1 és un regulador transcripcional clau en la progressió de la leucèmia i suggereixen que la inhibició de ZRF1 podria ser una nova estratègia a explorar en al tractament de la LMA.

Given the complexity and heterogeneity of cancer, the development of new high-throughput wide-genome technologies has open new possibilities for its study. Several projects around the globe are exploiting these technologies for generating unprecedented amount of data for cancer genomes. Its analysis, integration and exploration are still a key challenge in the field. In this dissertation, we first present Gitools, a tool for accessing databases in biology, analysing high-throughput data, and visualising multi-dimensional results with interactive heatmaps. Then, we show IntOGen, the methodology employed for collection and organization of the data, the methods used for its analysis, and how the results and analysis were made available to other researchers. Finally, we compare several methods for impact prediction of non-synonymous mutations, showing that new tools specifically designed for cancer outperform those traditionally used for general diseases, and also the need for using other sources of information for better prediction of cancer mutations. / Davant de la complexitat i heterogeneitat del cancer, el desenvolupament de noves tecnologies per l'estudi de genomes, ha obert noves posibilitats. Diversos projectes al voltant del mon les fan servir per generar quantitats de dades de genomes de cancer mai vistes abans. En aquest treball, primer presentem Gitools, una eina que permet obtenir dades de bases de dades en biologia, anal itzar dades genomiques, i visual itzar els resul tats multidimensionals mitjançant mapes de calor interactius. Després mostrem IntOGen, les metodologies per obtenir i organitzar les dades, els metodes per el seu analisi, i com es van possar a disposició d'altres investigadors. Finalment, comparem diversos metods de predicció de l'impacte de les mutacions no sinonimes, que ens mostra com nou metods desenvolupats per cancer funcionen millor que els utilitzats tradicionalment per enfermetats generals, aixis com la necesitat de recorrer a altres fonts d'informació per tenir millor prediccions per mutacions de cancer.

Made available in DSpace on 2015-11-11T12:04:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 28.pdf: 750831 bytes, checksum: 6338a562297a02ad07db0c104ba8a16f (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / A pesquisa analisou como os gestores da Secretaria Estadual de Saúde de Pernambuco e gerentes das unidades de oncologia sob a gestão estadual têm utilizados os resultados das auditorias operacionais na qualificação da rede de atenção situada no território do Recife no período de 2010 a 2012. Trata-se de um estudo de caso, com triangulação de técnicas (entrevistas semi-estruturadas e análise documental), tendo como sujeitos: gestores do nível central da SES de Pernambuco, diretores de 03 unidades auditadas e um representante do Conselho Estadual de Saúde de Pernambuco. Utilizou-se da análise temática de conteúdo com a mediação de categoria de análise controle público. Em termos da análise da produção e faturamento, evidenciou-se a desproporcionalidade entre o número de leitos de algumas unidades e o número de internações no período estudado, a exemplo do Hospital Universitário Oswaldo Cruz (HUOC), segundo maior hospital em número de leitos em oncologia, só realizou 18 por cento do total de internações. Por outro lado, verificou-se que o Instituto de Medicina Integral Prof. Antônio Figueira (IMIP) foi a unidade que apresentou o maior número de internações 35,82 por cento e também o maior faturamento de produção ambulatorial (34,33 por cento) e hospitalar (57,60 por cento), quando se compara 2010 e 2012. Quanto à análise dos resultados das auditorias, verificou-se que as inconformidades na área de recursos humanos ocuparam o 1º lugar, seguidas consecutivamente de estrutura física e processo de trabalho. Os hospitais universitários apresentaram os quadros mais críticos em todas as áreas, principalmente o HUOC que só conseguiu 12 por cento de aprovação entre a 1ª e a 2ª visita, apesar de oncologia representar 56 por cento da sua produção geral. O IMIP aparece como unidade que alcançou o maior percentual de implementação, sendo uma unidade filantrópica com crescimento no atendimento em oncologia, tanto hospitalar quanto ambulatorial, apresentou uma ampliada governabilidade financeira, sobretudo, para contratação de recursos humanos. Aspecto, que indiscutivelmente, tem limitado a maioria das unidades analisadas no cumprimento das recomendações. Conclui-se que o objetivo de analisar como a gestão estadual da saúde tem utilizado os resultados da auditoria operacional foi alcançado. Tendo evidenciado que a auditoria operacional é uma ferramenta potente de qualificação da atenção, porém insuficiente para mudar a realidade encontrada nas unidades se não vier acompanhada de um plano de investimento e não compor a agenda dos dirigentes, tanto das unidades quanto do nível central, no que diz respeito à implementação das recomendações nos quesitos recursos humanos e estrutura física

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Enfermagem, 2017. / Submitted by Raquel Almeida (raquel.df13@gmail.com) on 2017-11-07T14:26:56Z No. of bitstreams: 1 2017_MarianadosSantosRibeiro.pdf: 2820921 bytes, checksum: c93cc9ebe23e1e684662afb0a38602ad (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-01-05T20:21:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_MarianadosSantosRibeiro.pdf: 2820921 bytes, checksum: c93cc9ebe23e1e684662afb0a38602ad (MD5) / Made available in DSpace on 2018-01-05T20:21:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_MarianadosSantosRibeiro.pdf: 2820921 bytes, checksum: c93cc9ebe23e1e684662afb0a38602ad (MD5) Previous issue date: 2018-01-05 / Introdução: o envelhecimento é um fenômeno universal e também o principal fator de risco para o desenvolvimento de doenças oncológicas. A trajetória de vida de cada pessoa influencia na maneira como ela lida com a experiência do estresse. Nos cuidados paliativos, a história pessoal de cada pessoa deve ser valorizada, favorecendo a prestação de um cuidado individualizado. Objetivo: Analisar as estratégias de enfrentamento acerca do envelhecer e adoecer de pessoas em cuidados paliativos. Método: pesquisa exploratória, descritiva de abordagem qualitativa. A Coleta de dados foi realizada no Centro de Alta Complexidade em Oncologia e na Clínica Médica de um Hospital Universitário, com idosos em cuidados paliativos por meio de questionário sociodemográfico e entrevista semiestruturada. O corpus das entrevistas foi submetido à análise de conteúdo com auxílio do software ALCESTE. Resultados: foram realizadas onze entrevistas com seis homens e cinco mulheres. A faixa etária variou de 60 a 87 anos e a média foi de 68,9 anos; a média da escolaridade foi de 4,54 anos. Da análise de conteúdo emergiram dois eixos de significados. O primeiro formado pelas categorias Envelhecer, e Desenvolvimento saudável, remete a uma estrutura de personalidade resiliente que se forjou ao longo do ciclo da vida. Nele, os discursos sinalizam para um processo de desenvolvimento permeado por variadas situações adversas e perdas . Pode-se inferir que para fazer frente a essas dificuldades, os idosos lançaram mão de estratégias de enfrentamento que forjaram uma personalidade resiliente. No segundo eixo, formado pela categoria denominada Fatores estressores, foram mencionadas as situações vivenciadas ao longo da trajetória da doença. Apreendeu-se que os fatores de stress foram: os sinais da doença, a suspeita da doença, o anúncio da má notícia e, sobretudo, a dificuldade de acesso ao tratamento. Para manejar os estressores advindos no processo do adoecer, os participantes utilizaram estratégias de enfrentamento resilientes como o suporte espiritual, a reestruturação cognitiva e a aceitação. Conclusão: o processo de viver dos participantes foi permeado por eventos que propiciaram o desenvolvimento da capacidade de lidar com situações adversas, superar pressões e obstáculos reagindo positivamente a eles, características de uma personalidade resiliente. Frente ao envelhecimento e adoecimento, utilizaram estratégias de enfrentamento capazes de manejar favoravelmente os estressores. O estudo aponta que a maneira como cada idoso enfrentou as adversidades ao longo de sua trajetória de vida, pode significar uma oportunidade de fortalecimento pessoal, favorecendo o enfrentamento positivo de novos estressores, a exemplo de uma doença incurável. Espera-se sensibilizar profissionais da saúde para a necessidade da escuta qualificada das pessoas idosas, buscando compreendê-las a partir de sua trajetória de vida e, assim, serem capazes de fornecer um cuidado de qualidade, personalizado e alinhado com a filosofia paliativista. / Introduction: aging is a universal phenomenon and also the main risk factor for the development of oncological diseases. The life trajectory of each person influences the way to deal with the stress experience. On palliative care, the personal life history must be valued in order to provide an individualized care. Objective: To analyze the coping strategies that people in palliative care use to deal with aging and illness. Method: exploratory, descriptive and qualitative research. We conducted the data collection at the Center of High Complexity in Oncology and at the Medical Clinic of the University Hospital of Brasília, with aged people in palliative care through a sociodemographic questionnaire and semi-structured interview. We used the software ALCESTE in order to support the content analysis of the interviews. Results: We interviewed eleven older people, six men and five women. The age ranged from 60 to 87 years with an average age of 68,9 years; the average education was 4,54 years. From content analysis emerged two axes of meanings. The first has two categories Aging and Healthy development, which refers to a resilient personality structure that has been forged throughout the life cycle. In this axis, we identified that the participants had many adverse situations and losses throughout their lives. To manage these difficulties, we believe that the participants used coping strategies, which forged a resilient personality. The second axis is composed by the category Stress factors, which the participants mentioned the situations experienced throughout the illness. The main stressors we highlight were: the signs of the disease, the suspect of being ill, the bad news, and the difficulty in accessing treatment. In the management of the stressors arising from the illness process, the participants reported using resilient coping strategies as spiritual support, cognitive restructuring and acceptance. Conclusion: the events throughout the participants’ life allowed the development of a capacity to deal with adverse situations, to overcome pressures and obstacles, and to become able to react positively to them. Those are characteristics of a resilient personality. Faced with aging and illness, the participants used coping strategies capable of managing the stressors in a positive way. The study points out that the way each aged person has faced adversities throughout their life can mean an opportunity for personal growth, which can favor the positive confrontation of new stressors, as an incurable disease. We expect to sensitize health professionals to the need of attentive listening to aged people, in order to understand their life trajectory and, thus, being able to provide a qualified and personalized care, aligned with the palliative philosophy. / Introducción: el envejecimiento es un fenómeno universal y también el principal factor de riesgo para el desarrollo de las enfermedades oncológicas. La trayectoria de la vida de cada persona influye en la manera en que aborda la experiencia de estrés. En cuidados paliativos, la historia personal de vida debe evaluarse con el fin de proporcionar cuidado individualizado. Objetivo: analizar las estrategias de afrontamiento para lidiar con el envejecimiento y la enfermedad de las personas en cuidados paliativos. Método: descriptivo, exploratorio y de investigación en un enfoque cualitativo. Los datos fueron recogidos en el centro de alta complejidad en oncología y medicina interna en el Hospital de la Universidad de Brasilia, con personas de edad avanzada en cuidados paliativos a través del cuestionario sociodemográfico y entrevista semiestructurada. El corpus de las entrevistas fue sometido a análisis de contenido con la ayuda de software ALCESTE. Resultados: se realizaron once entrevistas con seis hombres y cinco mujeres. La edad varió de 60 a 87 años de edad y el promedio fue de 68,9 años; la escolaridad promedio fue de 4,54 años. El análisis de contenido surgió dos ejes de significados. El primero formado por dos categorías El envejecimiento, y El desenvolvimiento sano, se refiere a una estructura de personalidad resistente que se forjó durante el ciclo de vida. En él, uno puede aprender que el proceso de desarrollo de los participantes fue permeado por diferentes situaciones adversas y por pérdidas. Uno puede deducir que para hacer frente a tales dificultades, utilizaron estrategias resistentes que forjaron una personalidad resistente. El segundo eje, formado por la categoría denominada Factores de estrés fueron mencionados las situaciones que experimentaron a lo largo de la trayectoria de la enfermedad. Se encontró que los factores de estrés más importantes fueron: los signos de la enfermedad, la sospecha de la enfermedad, el anuncio de malas noticias y la dificultad de acceso al tratamiento. En el manejo de estresores derivados del proceso de enfermarse, los participantes dijeron el uso de estrategias flexibles como apoyo espiritual, reestructuración cognitiva y aceptación. Conclusión: el proceso de vida de los participantes fue permeados por los acontecimientos que condujeron al desarrollo de la capacidad de afrontar situaciones adversas, superar obstáculos y reaccionando positivamente a ellos, unas características de personalidad resistente. El estudio señala que la forma de que cada anciano enfrentó las adversidades en su camino de vida puede significar una oportunidad de empoderamiento personal, favoreciendo la confrontación de nuevos factores de estrés, como una enfermedad incurable. Se espera sensibilizar a profesionales de la salud a la necesidad de escuchar ancianos, tratando de entender de su camino de vida y así poder ofrecer atención de calidad, personalizada y alineada con la filosofía paliativista.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-30Bitstream added on 2014-06-13T18:09:08Z : No. of bitstreams: 1 lago_ar_me_botfm.pdf: 686937 bytes, checksum: bf3207ac9af78684b885e65c7b4ac7c6 (MD5) / Fundação Pio Xii - Barretos / A gestão administrativa e de informação são ferramentas indispensáveis nas empresas e contribuem decisivamente para um melhor desempenho e otimização de recursos, podendo melhorar a estratégia e visão de futuro, possibilitando projetar cenários diferenciados e privilegiados para tomadas de decisão. Presente no país há duas décadas aproximadamente, a Pesquisa Clínica em oncologia pouco utiliza estas ferramentas. É indiscutível a importância e necessidade de definição da unidade de pesquisa clínica como ponto estratégico de uma entidade médico/hospitalar. Em 2006, após reestruturação de área física e profissional da unidade de Pesquisa Clínica do Hospital de Câncer de Barretos foi implementado um modelo de gestão profissionalizado, sendo designado a gerência geral e tomada de decisão para um profissional atuante em administração médico/hospitalar. Foi necessária a criação de um sistema informatizado capaz de monitorar, controlar e gerenciar todos os processos na condução de estudos clínicos oncológicos. Este software foi desenvolvido pelo departamento de tecnologia da informação da instituição e contou com a participação de um analista de sistemas, um programador e um analista de negócios, utilizando banco de dados e ferramentas de desenvolvimento Oracle®. O programa computacional demonstrou atender as necessidades mínimas do departamento, além de se revelar como perfeitamente aplicável em estrutura e recursos de uma instituição médico/hospitalar em oncologia / The management of business and information are indispensable tools in companies and contribute decisively for a better performance and optimization of resources, which can improve the performance and vision of future, allowing to project differential and privileged sceneries for decision-making. Oncology Clinical Research is present in our country for about two decades and makes very little use of those tools. The importance and necessity of definition of Clinical Research Unit as a strategic item of a medical/hospital entity is unquestionable. In 2006, after area and professional re-structuration of the Clinical Research Unit of Hospital de Cancer de Barretos, a professional pattern of administration, general management and decision-making was designated to a professional who was used to act on medical/hospital administration. It was necessary the creation of a computerized system, able to monitoring, controlling and managing all the process on the conduction of oncology clinical trials. This software was developed by the information technology department of the institution, with participation of a systems analyst, a programmer and a business analyst, using database and Oracle® development tools. It was observed that the computational program attended the minimal necessities of the department. Besides, it was considered perfectly applied on structure and resources of an oncology medical/hospital institution

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Biologia, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2014. / Submitted by Larissa Stefane Vieira Rodrigues (larissarodrigues@bce.unb.br) on 2014-11-18T13:36:48Z No. of bitstreams: 1 2014_LuisHenriqueToshihiroSakamoto.pdf: 6099924 bytes, checksum: 61370c042c99b145dcfa9011ddb7a1cf (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2014-11-26T18:35:13Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_LuisHenriqueToshihiroSakamoto.pdf: 6099924 bytes, checksum: 61370c042c99b145dcfa9011ddb7a1cf (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-26T18:35:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_LuisHenriqueToshihiroSakamoto.pdf: 6099924 bytes, checksum: 61370c042c99b145dcfa9011ddb7a1cf (MD5) / As leucemias linfóides agudas (LLA) são o tipo mais comum de neoplasia maligna da infância, correspondendo a 25-30% de todos os cânceres nesse grupo e constituem um exemplo de sucesso terapêutico em oncologia pediátrica. Hoje, os mais eficazes centros de tratamento são capazes de gerar taxas de sobrevida global em 5 anos de cerca de 80-90% na população assistida. Apesar de várias características clínicas, citogenéticas e moleculares já serem sabidamente definidoras de prognóstico, marcadores mais robustos ainda necessitam ser descobertos, tendo em vista que, mesmo em países desenvolvidos, cerca de 20% das crianças com LLA ainda evoluirão ao óbito pela neoplasia. Uma das alterações citogenéticas mais conhecidas consiste nos rearranjos da região cromossômica 11q23 que fusionam o gene MLL com diversos outros genes localizados em outros cromossomos. A presença desses rearranjos, de maneira geral, sinalizam um pior prognóstico em LLA. Tendo em vista que a proteína Mll consiste em uma metiltransferase de lisina, com função já sabidamente alterada no contexto das LLAs, foi aventada a hipótese da existência de alterações de expressão gênica em outros genes codificadores de metiltransferases de proteínas nesse tipo de neoplasia. Foram comparadas, após estudo-piloto para seleção dos melhores genes candidatos, 83 amostras de medula óssea de crianças com LLA ao diagnóstico com 8 controles não neoplásicos do mesmo tecido. Verificou-se, através de PCR em tempo real, que 8 dos 22 genes investigados (SMYD2, SMYD5, SETD1B, SETD2, SETD3, SETD4, SETD8 e SETMAR) apresentavam hiperexpressão nas amostras leucêmicas. Além disso, as expressões aumentadas de SMYD2, SETD2, SETD4 e SETD8 relacionaram-se com um pior prognóstico na análise univariada. No modelo multivariado, o gene SMYD2 mantinha-se como fator prognóstico independente, juntamente com as variáveis idade e a presença de blastos no 29º dia de quimioterapia. Foi observado, ainda, que pacientes com hiperexpressão de SMYD2 ao diagnóstico, apresentavam redução progressiva desses níveis no 15º e 29º dias de quimioterapia. A hiperexpressão de SMYD2 ainda se correlacionou com idade e hiperleucocitose na coorte estudada, o que sugeriu um possível papel dessa metiltransferase no controle da proliferação celular. Através de experimento com siRNA e citometria de fluxo com CFSE, observou-se que a taxa de proliferação da linhagem Nalm6, derivada de LLA, sofreu redução significativa após silenciamento específico de SMYD2. Neste trabalho demonstrou-se, portanto, a existência de alteração da expressão de outros genes codificadores de metiltransferases de lisina em LLA da infância, além da já bem descrita para o gene MLL. Além disso, verificou-se que a expressão aumentada de alguns desses genes teve relação com pior prognóstico na coorte estudada. Finalmente, comprovou-se, em linhagem celular de leucemia, que o silenciamento do gene SMYD2 é capaz de reduzir a taxa de proliferação celular, o que pode ser causado por alterações da atividade de metiltransferase desse gene tanto ao nível de proteínas histonas quanto não-histonas. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is the most common childhod malignancy, accounting for 25-30% of all cancers in this group and constitutes an example of successful treatment in pediatric oncology. Nowadays, the most effective treatment centers are able to generate 5-years overall survival rates between 80 and 90%. Although several clinical, cytogenetic and molecular characteristics are already known to defining prognosis, more robust markers still need to be discovered, given that, even in developed countries, about 20% of treated children still die because of ALL. One of these alterations are rearrangements of chromosome region 11q23 that fuses the MLL gene with several other genes located in other chromosomes. The presence of these rearrangements, in general, indicates a worse prognosis in ALL. Given that MLL protein consists of a lysine methyltransferase with altered function in ALL we hypothesized the existence of gene expression alterations in other lysine methyltransferases encoding genes in this type of neoplasm. After a pilot-study for selection of the best candidate genes, we compared 83 bone marrow samples from children with ALL at diagnosis with 8 nonneoplastic controls. It was found, by real-time PCR, that 8 of the 22 investigated genes (SMYD2, SMYD5, SETD1B, SETD2, SETD3, SETD4, SETD8 and SETMAR) showed overexpression in leukemic samples. Furthermore, the increased expressions of SMYD2, SETD2, SET4 and SETD8 genes were related to a worse prognosis in the univariate analysis. In the multivariate model, SMYD2 gene remained as an independent prognostic factor, together with age and the presence of blasts on 29th day of chemotherapy. It was also observed that those patients who had SMYD2 overexpression at diagnosis, showed progressive reduction of these levels in 15th and 29th days of chemotherapy. The overexpression of SMYD2 gene was still correlated with age and hyperleukocytosis in our cohort, suggesting a possible role of this methyltransferase in the cell proliferation control. Through siRNA and CFSE flow cytometry experiments, it was observed that the proliferation rate of Nalm6 cell line was reduced after specific silencing of SMYD2. Therefore, it was demonstrated that other key lysine methyltransferases encoding genes are also abnormally expressed in childhood ALL, in addition to the already well described MLL gene. Furthermore, it was found that increased expression of some of these genes was correlated with a bad prognosis in our cohort. Finally, it has been found that the knockdown of SMYD2 gene is capable of reducing the rate of leucemia cell lines proliferation.

Dissertação (mestrado)-Universidade de Brasília, Instituto de Psicologia, 2011. / Submitted by wiliam de oliveira aguiar (wiliam@bce.unb.br) on 2011-06-16T18:50:13Z No. of bitstreams: 1 2011_RobertaAlbuquerqueFerreira.pdf: 2177752 bytes, checksum: fdc74c55e36a4e4a3385fa7d3fe42c7a (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2011-06-16T20:23:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_RobertaAlbuquerqueFerreira.pdf: 2177752 bytes, checksum: fdc74c55e36a4e4a3385fa7d3fe42c7a (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-16T20:23:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_RobertaAlbuquerqueFerreira.pdf: 2177752 bytes, checksum: fdc74c55e36a4e4a3385fa7d3fe42c7a (MD5) / Apesar da relevância dos cuidadores à continuidade do processo de atendimento integral às crianças e adolescentes com neoplasias e fora de possibilidades terapêuticas de cura, a atenção dos profissionais de saúde ainda é voltada, na maior parte das vezes, à pessoa em tratamento, sendo poucos os estudos, no país, que identificam necessidades psicossociais de familiares-acompanhantes e que utilizam instrumentos padronizados de avaliação. Cuidar de um paciente próximo ao final da vida constitui uma tarefa complicada e angustiante, que pode gerar no cuidador alterações físicas, emocionais e sociais. Destaca-se ainda que, considerando que os cuidados paliativos têm como um de seus objetivos o aumento da qualidade de vida dos pacientes e dos seus familiares, a identificação precoce e avaliação do distress behavior, isto é, dos comportamentos indicadores de sofrimento físico e psicossocial, deveria constituir uma atividade prioritária desse contexto. Além disso, também são poucos os estudos que avaliam a percepção de oncologistas pediátricos acerca dos cuidados paliativos e suas dificuldades em encaminhar pacientes para essa modalidade de atenção. O objetivo da primeira etapa do presente estudo foi avaliar o bem-estar global de doze cuidadores de crianças e adolescentes com câncer, atendidos em um ambulatório de cuidados paliativos, bem como seu nível de distress, em termos de sintomas de estresse pós-traumático. Para avaliação do bem-estar global e do nível de distress, foram aplicados os instrumentos General Comfort Questionnaire (GCQ) e Impact of Event Scale-Revised (IES-R), respectivamente. Já o objetivo da segunda etapa foi avaliar, por meio de entrevistas, a percepção de sete médicos da equipe, de um total de dez, acerca dos cuidados paliativos e das dificuldades no encaminhamento dos pacientes para o serviço. As entrevistas foram gravadas em áudio e submetidas à análise de conteúdo. Em relação à primeira etapa, os dados apontados pelo GCQ mostram que a crença na ajuda de Deus, a constatação de tranquilidade no quarto da criança ou adolescente e a percepção de que sua vida valia a pena naquele momento são os fatores que mais afetam positivamente o bem-estar dos cuidadores, enquanto a preocupação com a família, os pensamentos em relação ao desconforto do paciente e seu futuro incerto o afetam negativamente. Os dados da IES-R apontam que o nível de angústia gerado pelo encaminhamento para o ambulatório não foi uniforme. Em relação à segunda fase, verificou-se demanda por maior integração entre os ambulatórios curativo e paliativo, o que aumentaria a fluidez entre as equipes e a manutenção de vínculos entre pacientes, famílias e profissionais. Os resultados evidenciam a necessidade de desenvolvimento de intervenções voltadas ao bem-estar dos cuidadores, que analisem funcionalmente as variáveis apontadas pelo GCQ e pela IES-R. Também destaca-se a necessidade de maior uniformização de critérios de encaminhamento de pacientes para o ambulatório de cuidados paliativos, tornando o serviço mais sistemático, precoce e integrado. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Despite the importance of caregivers to the continuity of the process of comprehensive care to children and adolescents with cancer and out of therapeutic possibilities of cure, the attention of health professionals is still facing, in most cases, the person in treatment, with few studies in the country, which identify the psychosocial needs of family caregivers from standardized assessment instruments. Caring for a patient near the end of life is complicated and painful, which can cause changes in caregiver physical, emotional and social domains. Is also noted that, considering that palliative care one of its goals is increasing the quality of life of patients and their families, early identification and assessment of distress behavior, this is, behaviors indicators of suffering physical and psychosocial, should be a priority activity within this context. In addition, there are few studies that assess the perception of pediatric oncologists about palliative care and their difficulties in referring patients for this kind of attention.The goal of the first stage of this study was to evaluate the global well-being of twelve caregivers of children and adolescents with cancer, treated on an outpatient palliative care, as well as their distress level in terms of symptoms of posttraumatic stress. To assess the overall well-being and the distress level, the instruments were applied General Comfort Questionnaire (GCQ) and Impact of Event Scale - Revised (IES-R), respectively. The goal of the second step was to assess, through interviews, the perception of seven staff physicians, a total of ten, about palliative care and difficulties in referring patients to the service. The interviews were audio recorded and submitted to content analysis. On the first stage, the data pointed to by GCQ show that belief in God's help, the realization of tranquility in the bedroom of the child or adolescent and the realization that his life was worth at that time are the factors that most positively affect the well being of caregivers, while the concern with the family, the thoughts in relation to patient discomfort and its uncertain future affect him negatively. Data from the IES-R showed that the distress level generated by referral to the clinic was not uniform. Regarding the second phase, there was demand for more integration between curative and palliative clinics, which would increase the fluidity between the teams and the maintenance of links between patients, families and professionals. The results highlight the need to develop interventions aimed at well-being of carers, to analyze functionally the variables suggested by GCQ and the IES-R. It was also indicated the need for greater integration especially among medical staff, with the aim of making the referral of patients for the service more systematic, early and integrated.