Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-06-07Bitstream added on 2014-06-13T18:20:50Z : No. of bitstreams: 1 xavier_acc_me_sjc.pdf: 1016350 bytes, checksum: a962a7e714de7e776f6fedbac277efc6 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este estudo avaliou in vivo a ação do extrato glicólico de própolis 12%, como substância química auxiliar em tratamentos endodônticos de dentes com necrose pulpar e lesão periapical. A avaliação foi realizada através da cultura e detecção de microrganismos por Reação em Cadeia Polimerase (PCR) e da quantificação de endotoxinas. Além disso, foi avaliada a correlação entre o tamanho da lesão periapical e a quantidade de endotoxinas presente. Foram selecionados 30 dentes, os quais foram divididos em 3 grupos (n=10), de acordo com a substância química auxiliar utilizada para a instrumentação: NaOCl) Hipoclorito de sódio 1%; CLX) Clorexidina gel 2%, intercalada com solução salina; PRO) Extrato glicólico de própolis 12%, intercalado com solução salina. As radiografias iniciais foram digitalizadas e as lesões periapicais foram medidas através de software específico. Foram realizadas 3 coletas do conteúdo do canal radicular: após a abertura coronária, após instrumentação e após 14 dias da medicação intracanal. A medicação intracanal utilizada foi o hidróxido de cálcio com propilenoglicol. Em todas as coletas realizou-se: detecção de microrganismos por PCR; avaliação do crescimento microbiológico em diferentes meios de cultura e quantificação de endotoxinas através do teste cinético cromogênico (LAL). Os resultados foram analisados através dos testes de Kruskal Wallis, Dunn (nível de significância 5%) e correlação linear de Pearson. A quantidade de microrganismos e endotoxinas, nas 2ª e 3ª coletas, diminuiu em relação à 1ª coleta, em todas as soluções avaliadas (p<0,05). Os canais apresentaram diversidade microbiana, com predominância de Parvimonas micra, Tanerella forsythia e Prevotella nigrescens. Concluiu-se que o extrato glicólico de própolis 12% apresentou atividade antimicrobiana e antiendotóxica semelhante aos demais... / The aim of this study was in vivo evaluated of 12% propolis glycolic extract action in root canal treatments, through the culture of microorganisms, quantification of endotoxins and detection of microorganisms by molecular method of polymerase chainreaction (PCR). A total of 30 human teeth were divided into 3 groups (n=10) according to the auxiliary chemical solution used for biomechanical preparation: NaOCl) sodium hypoclorite 1%; CLX) 2% chlorhexidine gel; PRO) 12% propolis glycolic extract. Collections were performed immediately after coronary open, after instrumentation and after 14 days with intracanal medication. For all collections were performed the following tests: microorganisms detection by PCR; assessment of microbiological growth and analyzing the amount of endotoxi (Limulus amoebocyte lysate). The results showed a decrease in the amount of microorganisms and endotoxins in the 2nd and 3rd collections of all irrigation solutions. The canals showed microbial diversityy, but Parvimonas micra was predominantly. It was concluded thar all solutions are evaluated antimicrobial and anti-endotoxic similar. The most common microorganism present in root canals with pulp necrosis and periapical lesion was Parvimonas microns. There is a evidence that the higher amount of endotoxins is in the biggest lesions

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:33:42Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:04:00Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Dissertação (Mestrado) / IPEN/D / Instituto de Pesquisas Energéticas e Nucleares - IPEN-CNEN/SP

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:46:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 263642 bytes, checksum: 195cdf514e6803579fcdd159348f0be0 (MD5) Previous issue date: 2008-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objectives of this study were to verify if the propolis and ascorbic acid contain effect on plasmatic membrane integrity of goats spermatozoa as well as investigate the potential of these antioxidants on the use of goats spermatozoa cryopreservation extenders. Semen from five adults goats were used, totalizing 5 semen samples for each one. After semen collection, the evaluation consisted of physical and morphological exam, live and dead cells (supravital test) and hyposmotic swelling test. Afterwards, the fresh semen was diluted, homogenized, divided on 5 equal parts and centrifuged. The spermatozoa pellet was raised with respective treatment: T1 (BIOXCELL® - CONTROL); T2 (BIOXCELL® + 0,25% of propolis extract); T3 (BIOXCELL® + 0,5% of propolis extract); T4 (BIOXCELL® + 0,05% of ascorbic acid); e T5 (BIOXCELL® + 0,25% of ascorbic acid). After final dilutions, it was evaluated the sperm motility and vigor on each treatment, and posterior seal. The straws were cooled at 4 - 5 °C during 35 minutes in a plastic container containing methyl alcohol and 25 minutes out of container. The pre-freezing was done in liquid nitrogen vapour, during 14 minutes. Then, the straws were immersed in nitrogen. The thawing of the samples was made by immersion of the straws in a 37 °C water-bath for 30 minutes to evaluate the sperm motility and vigor, supravital test, hyposmotic swelling test and thermoresistence test. In fresh semen, the physical and morphological aspects, supravital test and hyposmotic swelling test not differ (P>0,05) between animals and between races. There was no correlation of appearance and whirlpool with other variables. There was mean and negative correlation (r = -0,46) between the volume and hyposmotic swelling test. The sperm motility showed average and positive correlation with sperm vigor (r = 0,52) and supravital test (r = 0,55). There was high and positive correlation (r = 0,73 and 0, 69) between major and minor defects sperm with defects totals. There was mean and negative correlation (r = -0,40) between major defects sperm and hyposmotic swelling test, not being seen with the minor defects. The average sperm motility of the diluted semen (pre-cooling) of all treatments, showed no difference between them (P>0,05), however, the averages of sperm vigor of diluted semen showed difference (P<0,05) among treatments, where the T1 and T3 were different from T4 and equals to T2 and T5. The general average of motility and vigor sperm on treatments immediately after thawing and after three hours of thermoresistence test differed among themselves (P<0,05), where the T4, T5 and T1 were similar and higher than T2 and T3. The general average values observed in supravital test and hyposmotic swelling test post-thawing differed (P<0,05) among treatments, in which the T4, T5 and T1 were similar and higher than T2 and T3. The values observed on supravital test showed high and positive correlation with sperm motility in all treatments. In T1, T4 and T5 had high and positive correlation (r = 0,63; r = 0,64; r = 0,71; respectively) between the values in supravital test and hyposmotic test. The values observed in the hyposmotic test and sperm motility showed high and positive correlation in T1 (r = 0,78) and T5 (r = 0,65) and correlation mean and positive in T4 (r = 0,44). Both at the time of thawing (0 hour) as the end of the thermoresistence test (3 hours), the supravital test and sperm motility showed no correlation with the motility sperm of treatments this study. But at the time of thawing, the average values observed in hyposmotic test of fresh semen showed average and positive correlation with sperm motility of T1 and T2, and high and positive correlation with the T5 motility sperm. Similarly, at 3 hours of thermoresistence test, there was average and positive correlation with sperm motility of T1, T4 and T5. It was concluded that: the ascorbic acid maintained structure integrity of the spermatozoa membrane during cryopreservation process as well as its viability after thermoresistence test, and may be an alternative in the composition of extenders for cryopreservation of semen goats; the propolis was not effective in maintaining the integrity and viability sperm after thawing, showing to be toxic to spermatozoa at concentrations of 0,25 and 0,5%; and the hyposmotic test in fresh semen was effective in predicting the semen freeze, as well as, its viability in the end of the thermoresistence test of three hours. / Os objetivos deste estudo foram verificar se a própolis e o ácido ascórbico têm efeito sobre a integridade da membrana plasmática dos espermatozóides de caprinos, bem como, investigar o potencial destes antioxidantes no uso de meios diluidores de criopreservação de sêmen caprino. Foram utilizados cinco bodes adultos das raças Alpina (n = 2) e Saanen (n = 3). Para as coletas de sêmen, utilizou-se a vagina artificial, onde se obteve cinco ejaculados por animal. Após a coleta, fez-se o exame físico do sêmen e morfológico dos espermatozóides, teste supravital e teste hiposmótico. Em seguida, o sêmen in natura foi diluído, homogeneizado, dividido em cinco alíquotas iguais e centrifugados. O sobrenadante foi desprezado e cada pellet de espermatozóides foi ressuspendido com diluente, de acordo com os tratamentos: T1 (BIOXCELL® - CONTROLE); T2 (BIOXCELL® + 0,25% de extrato liofilizado de própolis); T3 (BIOXCELL® + 0,5% de extrato liofilizado de própolis); T4 (BIOXCELL® + 0,05% de ácido ascórbico; e T5 (BIOXCELL® + 0,25% de ácido ascórbico). Após as diluições finais, foram avaliados a motilidade e o vigor espermático de cada tratamento, e posterior envase. As palhetas foram resfriadas a 4 - 5 ºC, durante 35 minutos em refil de plástico contendo álcool metílico, e posteriormente, 25 minutos fora do mesmo. O pré-congelamento foi realizado em vapor de nitrogênio líquido, durante 14 minutos. Após esse período, as palhetas foram imersas no nitrogênio para o congelamento final do sêmen. As doses foram descongeladas em banho-maria a 37 °C por 30 segundos, e acondicionadas em tubos plásticos de 1,5 mL e homogeneizados para análise imediata de motilidade e vigor espermático, teste supravital, teste hiposmótico e teste de termo-resistência. No sêmen in natura, os aspectos físicos e morfológicos, teste supravital e teste hiposmótico não diferiram (P>0,05) entre os animais e entre raças. Não houve correlação do aspecto e do turbilhonamento com as demais variáveis. Houve correlação média e negativa (r= -0,46) entre o volume e o teste hiposmótico. A motilidade espermática apresentou correlação média e positiva com vigor (r = 0,52) e o teste supravital (r = 0,55). Houve correlação alta e positiva (r = 0,73 e 0, 69) entre defeitos espermáticos maiores e menores com os defeitos totais. Houve relação média e negativa (r = -0,40) entre os defeitos espermáticos maiores e o teste hiposmótico, não sendo observado com os defeitos menores. Não houve diferença (P>0,05) entre as médias da motilidade espermática do sêmen diluído (pré- resfriamento), em todos os tratamentos, porém, as médias do vigor espermático do sêmen diluído apresentaram diferença (P<0,05) entre os tratamentos, onde o T1 e T3 foram diferentes do T4 e iguais aos T2 e T5. As médias gerais da motilidade e do vigor espermático nos tratamentos logo após o descongelamento e após três horas de TTR diferiram entre si (P<0,05), onde T4, T5 e T1 foram similares e superiores aos T2 e T3. Os valores médios gerais observados no teste supravital e no teste hiposmótico pós- descongelamento diferiram (P<0,05) entre os tratamentos, em que T4, T5 e T1 foram similares e superiores ao T2 e ao T3. Os valores obtidos no teste supravital apresentaram correlação alta e positiva com a motilidade espermática, em todos os tratamentos. Nos T1, T4 e T5 houve correlação alta e positiva (r = 0,63; r = 0,64; r = 0,71; respectivamente) entre os valores registrados nos testes supravital e hiposmótico. Os valores observados no teste hiposmótico e a motilidade espermática apresentaram correlação alta e positiva nos T1 (r = 0,78) e T5 (r = 0,65) e correlação média e positiva no T4 (r = 0,44). Tanto no momento do descongelamento (0 hora) quanto ao final do TTR (3 horas), o teste supravital e a motilidade espermática do sêmen in natura não apresentaram correlação com as motilidades espermáticas dos tratamentos deste estudo. Porém, no momento do descongelamento, os valores médios observados no teste hiposmótico do sêmen in natura apresentaram correlação média e positiva com a motilidade espermática do T1 e T2, e correlação alta e positiva com a motilidade espermática do T5. Da mesma forma, às 3 horas de TTR, verificou-se correlação média e positiva com a motilidade espermática do T1, T4 e T5. Concluiu-se que: o ácido ascórbico manteve a integridade estrutural da membrana dos espermatozóides durante o processo de criopreservação, bem como sua viabilidade após o teste de termo-resistência, podendo ser uma alternativa na composição de diluentes para criopreservação de sêmen caprino; a própolis não se mostrou eficaz na manutenção da integridade e viabilidade espermática pós-descongelamento, mostrando ser tóxica aos espermatozóides nas concentrações de 0,25 e 0,5 %; o teste hiposmótico realizado no sêmen in natura se mostrou eficaz em predizer a congelabilidade da amostra de sêmen, bem como, sua viabiliadade ao final do teste de termo-resistência de três horas.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:47:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 01 - capa_abstract.pdf: 19129 bytes, checksum: 1e58914583822904d4f755738e608933 (MD5) Previous issue date: 2005-08-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The healing and antimicrobial effects of the honey, propolis in gel and allantoin cream were evaluated during the treatment of the rabbit s wounds. The lesions were infected experimentally with Staphilococcus aureus coagulase positive, Pseudomonas aeruginosa and Pasteurella multocida in the concentration of 108 colony forming units (CFU)/mL. Significant differences were not observed (p < 0.05) among the treatments for the variables intensity of the edema and size of the erythematosus halo. The treatments with saline solution, honey and allantoin cream did not also present difference (p < 0.05) for the variable time of cicatrization. These results do not contest the antiphlogistic activity of the honey, propolis and allantoin cream, but demonstrates equivalent contribution with the cleaning of the lesions for the reduction of the local inflammation. In a contrary way, the propolis gel resulted in larger worsening of the infection and retard of the cicatrization of the wounds, when compared to the other treatments. The sensibility in vitro of the samples of S. aureus coagulase positive, P. aeruginosa and P. multocida to honey and propolis, in the same concentration inoculated in the lesions of the rabbits, was also evaluated by the technique of formation of the inhibition halo in middle of culture. The results showed that all the bacterial samples were sensitive to honey and propolis. However, these results diverge of most of the works that use honey and propolis, describing them as possessing low effect antimicrobial against P. aeruginosa and P. multocida. All these results stimulate the pursuit of new researches about the use of honey and propolis in the cicatrization of infected wounds, elucidating the real spectrum of antibacterial action of these composed and their affinity with the cellular differentiation during the reepithelization process. / O efeito cicatrizante e antimicrobiano do mel, própolis em gel e creme a base de alantoína foram avaliados durante o tratamento de feridas de coelhos, infectadas experimentalmente com Staphilococcus aureus coagulase positivos, Pseudomonas aeruginosa e Pasteurella multocida na concentração de 108 unidades formadoras de colônias (UFC)/mL. Não foram observadas diferenças significativas (p<0,05) entre os tratamentos para as variáveis intensidade do edema e tamanho do halo eritematoso. Os tratamentos com solução salina, mel e creme a base de alantoína também não apresentaram diferença (p<0,05) para a variável tempo de cicatrização. Estes resultados não contestam a atividade antiflogística do mel, da própolis e do creme a base de alantoína, mas demonstra contribuição equivalente com a limpeza das lesões para a redução da inflamação local. De forma contrária, o gel de própolis resultou em maior agravamento da infecção e retardo da cicatrização das feridas, quando comparado aos demais tratamentos. A sensibilidade, in vitro, das amostras de S. aureus coagulase positivos, P. aeruginosa e P. multocida, ao mel e à própolis, na mesma concentração inoculada nas lesões dos coelhos, também foi avaliada pela técnica de formação de halo de inibição em meio de cultura. Os resultados mostraram que todas as amostras bacterianas foram sensíveis ao mel e à própolis. Entretanto, estes resultados divergem da maior parte dos trabalhos que utilizam o mel e a própolis, descrevendo-os como possuindo baixo efeito antimicrobiano contra P. aeruginosa e P. multocida. Todos estes resultados estimulam o prosseguimento de novas pesquisas sobre a utilização do mel e da própolis na cicatrização de feridas infectadas, que elucidem o real espectro de ação antibacteriano destes compostos e sua relação com a diferenciação celular durante o processo de reepitelização.

Made available in DSpace on 2016-09-27T13:39:55Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-28. Added 1 bitstream(s) on 2016-09-27T13:45:03Z : No. of bitstreams: 1 000869156.pdf: 1761304 bytes, checksum: 503fb29625e54aaf5743540f6223d20b (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Células dendríticas (DCs) são essenciais para o reconhecimento de patógenos e apresentação de seus antígenos aos linfócitos T, desempenhando papel fundamental no elo entre as respostas imunes inata e adaptativa. A própolis é um produto resinoso, elaborado pelas abelhas a partir de diversas partes das plantas, e tem despertado a atenção dos pesquisadores em virtude de suas inúmeras propriedades biológicas, destacando sua ação imunomoduladora. Assim, o presente projeto de pesquisa teve como objetivo investigar o efeito da própolis sobre a maturação e função de DCs humanas. Foi analisado o efeito da própolis na ativação do NF-кB, expressão de micro-RNAs e marcadores de superfície celular (TLR-4, MHC-II, CD80, CD86 e CD40), produção de citocinas (TNF-, IL-6, IL-10 e IL-12), e atividade bactericida das DCs humanas contra Streptococcus mutans. Tomados em conjunto, os dados sugerem o perfil ativador da própolis em DCs, visto que este produto apícola manteve a ação induzida por LPS tanto na ativação do fator de transcrição NF-кB como na produção de TNF-α, IL-6 e IL-10. Ademais, a inibição na expressão de hsa-miR-148a e hsa-miR-148b aboliu o efeito inibitório dos mesmos sobre a expressão de HLA-DR e também pode ter favorecido a produção de citocinas pró-inflamatórias. O aumento na expressão de hsa-miR-155 pode estar correlacionado ao aumento na expressão de TLR-4 e CD86, além de manter a ativação induzida pelo LPS de HLA-DR e CD40. Estes parâmetros podem estar envolvidos com o aumento na atividade bactericida de DCs contra Streptococcus mutans. Estes dados sugerem que a própolis pode modular positivamente a maturação e função de DCs / Dendritic cells (DCs) represent a heterogeneous population of professional antigen presenting cells (APCs) and are essential for recognition and presentation of pathogens to T cells. Propolis, a resinous material produced by bees from various plant sources, exhibits numerous biological properties, highlighting its immunomodulatory action. Here, we assayed the effects of propolis on the maturation and fuction of human DCs, assessing the activation of the transcription factor NF-kB, micro-RNAs and cell markers expression (TLR-4, HLA-DR, CD80, CD86, CD40), cytokines production (TNF-α, IL-6, IL-10, IL-12), and the bactericidal activity against Streptococcus mutans. DCs were generated from monocytes treated with IL-4 and GM-CSF and incubated with propolis and LPS. NF-κB in nuclear extract and cytokines were determined by ELISA. microRNAs expression was analysed by RT-qPCR and cell markers by flow cytometry. Colony-forming units were counted to assess the bactericidal activity of propolis-treated DCs. Propolis activated human DCs, inducing the NF-kB signaling pathway and TNF-, IL-6 and IL-10 production. The inhibition of hsa-miR-148a and hsa-miR-148b abolished the inhibitory effects on HLA-DR and pro-inflammatory cytokines. The increased expression of hsa-miR-155 may be correlated to the increase in TLR-4 e CD86 expression, maintaining LPS-induced expression of HLA-DR and CD40. Such parameters may be involved in the increased bactericidal activity of DCs against Streptococcus mutans. These studies are particularly important to develop DC-based modulation strategies for the identification of promising sources for drug discovery / FAPESP: 2012/14176-0

A própolis vermelha brasileira tem atraído interesses científicos e econômicos devido às suas variadas atividades biológicas. Este produto natural possui composição química variada de acordo com a região na qual é encontrado, sendo necessária uma completa caracterização química para cada tipo de própolis, a fim de se elucidar os compostos presentes e responsáveis pela atividade biológica observada. Neste trabalho, buscou-se caracterizar quimicamente os extratos da própolis vermelha brasileira, avaliar sua atividade antitumoral, bem como alguns mecanismos de morte celular, além de investigar o padrão proteico de células tumorais de laringe (Hep-2) e não tumorais de rim (Hek-293) tratadas e não tratadas com extratos da própolis vermelha através da análise proteômica comparativa. A caracterização química mostrou que a própolis apresenta moléculas complexas, principalmente isoflavonoides, que possuem importantes atividades biológicas, dentre elas a atividade antitumoral. A atividade citotóxica de duas frações e do extrato hidroalcoólico da própolis foi avaliada na linhagem tumoral Hep-2, a qual se revelou mais citotóxica nos tratamentos com as frações investigadas. Os ensaios de citometria mostraram que as células que receberam tratamento apresentaram menor potencial de membrana mitocondrial, maior quantidade de células em apoptose tardia (TUNEL e Anexina-V/PI), menor geração de espécies reativas do oxigênio e o aumento de fragmentação do DNA. Além disto, as colorações revelaram a presença de corpos apoptóticos e condensação de cromatina. A análise proteômica permitiu a comparação dos mapas proteicos da linhagem Hep-2, na ausência ou presença de extratos da própolis vermelha, com a linhagem não tumoral Hek-293. Estas proteínas foram classificadas de acordo com os processos biológicos as quais estão envolvidas. Além disto, doze proteínas identificadas na linhagem Hep-2 apresentaram expressão reduzida comparada ao grupo controle, dentre as quais muitas estão presentes em grande quantidade em outros tumores e são consideradas biomarcadores tumorais. Os resultados, de forma geral, mostram que a própolis interfere em um conjunto de eventos intracelulares e, assim, passa a ser uma candidata promissora para inibir o crescimento celular e contribuir para os diferentes passos relacionados com o processo de carcinogênese. Embora os mecanismos moleculares pelos quais a própolis vermelha interaja com o metabolismo das células permaneçam ainda desconhecidos, estudos adicionais servirão para melhor elucidar a atividade antitumoral da própolis vermelha brasileira e de suas frações. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2017-04-18T16:59:16Z No. of bitstreams: 1 Tese Caroline Olivieri da Silva Frozza.pdf: 11179534 bytes, checksum: b2ae6a4dfa6013728ea3f7c81bc40380 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-18T16:59:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese Caroline Olivieri da Silva Frozza.pdf: 11179534 bytes, checksum: b2ae6a4dfa6013728ea3f7c81bc40380 (MD5) Previous issue date: 2017-04-18 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES. / The Brazilian red propolis has attracted scientific and economic interests due to its varied biological activities. This natural product has diversify chemical composition according to the region in which it is found, then it is necessary a complete chemical characterization for each type of propolis, in order to elucidate the present compounds and responsible for the biological activity observed. In this work, we attempted to chemically characterize the extracts of Brazilian propolis, evaluate their antitumor activity as well as some cell death mechanisms, and to investigate the protein profile of larynx tumor cells treated and not treated with propolis extracts through comparative proteomic analysis. The chemical characterization showed that propolis has complex molecules, particularly isoflavones, which present significant biological activities, such as antitumor activity. The cytotoxic activity of two fractions and of the hydroalcoholic extract of propolis was assessed in Hep-2 tumor cell line, which proved to be more cytotoxic treatments in the investigated fractions. Flow cytometric assays showed that treated cells had lower mitochondrial membrane potential, increased amount of cells in late apoptosis (TUNEL and Annexin-V / PI), less generation of reactive oxygen species and increase in DNA fragmentation. Furthermore, the staining revealed the presence of apoptotic bodies and chromatin condensation. The proteomic analysis has allowed comparison of the maps of the protein Hep-2 cell line, in the absence or presence of propolis extracts, with non-tumor cell line Hek-293. These proteins were classified according to the biological processes which they are related. Besides, twelve identified proteins in Hep-2 showed reduced expression from the control group. Between them, many are presented in large quantities in other tumors and are considered tumor biomarkers. The results in general show that propolis interferes with a series of intracellular events and hence becomes a promising candidate to inhibit cell growth and contribute to the different steps relating to the process of carcinogenesis. Although the molecular mechanisms by which propolis interact with the metabolism of the cells remain unknown, further study will serve to better elucidate the antitumor activity of Brazilian propolis and its fractions.

A própolis vermelha é uma resina natural produzida por abelhas do gênero Apis a partir de exsudados vegetais e tem atraído a atenção dos pesquisadores de todo o mundo devido à sua potente atividade em diversos modelos biológicos. Essa resina natural é rica em polifenóis e compostos voláteis, sendo que mais 300 compostos químicos já foram identificados em amostras de diferentes regiões. Técnicas de identificação química de alta precisão são imprescindíveis para a correta elucidação dos compostos químicos presentes nas amostras e para o entendimento dos efeitos biológicos. Neste estudo, buscou-se utilizar técnicas de fracionamento como uma metodologia capaz de ser explorada em estudos envolvendo amostras de própolis vermelha, buscando-se a identificação e caracterização de frações ativas, bem como o uso de modelos celulares de câncer de cólon para o screening de moléculas bioativas. As frações ativas foram identificadas por meio HPLC-MS e ESI-MS/MS, evidenciando uma composição química complexa baseada em compostos fenólicos e flavonoides. Entre os resultados obtidos, destacam-se as frações 05 e 06, as quais foram capazes de produzir inibição significativa sobre as linhagens tumorais HT-29 e HCT-116, respectivamente, com menores efeitos sobre as células não-tumorais. As frações obtidas no estudo apresentaram menor diversidade química do que a encontrada no extrato total da própolis, favorecendo a sua bioatividade in vitro, e, como resultado, esta técnica pode favorecer a descoberta e o desenvolvimento de novos fármacos utilizando a própolis como fonte de potencial de moléculas contra o câncer. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2017-04-26T12:12:54Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Denis Amlton dos Santos.pdf: 1867020 bytes, checksum: 9a2b6e047762ce4edebdc69379893739 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-26T12:12:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Denis Amlton dos Santos.pdf: 1867020 bytes, checksum: 9a2b6e047762ce4edebdc69379893739 (MD5) Previous issue date: 2017-04-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior, CAPES. / Red propolis is a natural resin produced by bees of the genus Apis from plant exudates and has attracted the attention of researchers worldwide due to its potent activity in several biological models. This natural resin is rich in polyphenols and volatile compounds and more than 300 chemical compounds have been identified in samples from different regions. High precision chemical identification techniques are essential for the correct elucidation of the chemical compounds present in the samples and for the understanding of the biological effects. In this study, we sought to use fractionation techniques as a methodology able to be explored in studies involving samples of red propolis, seeking the identification and characterization of active fractions, as well as the use of cellular models of colon cancer for screening of bioactive molecules. The active fractions were identified by techniques of HPLC-MS and ESI-MS/MS, evidencing a complex chemical composition based on phenolic compounds an flavonoids. Among the obtained results, we highlight the fractions 05 and 06, which are able to produce significant inhibition on the HT-29 and HCT-116 tumor lines.The fractions obtained in this study showed lower chemical diversity than that found in the total extract of propolis, favoring its bioactivity, and as a result, this technique may favor the discovery and development of new drugs using propolis as a potential source of molecules against cancer.

Orientador: José Maurício Sforcin / Banca: Ethel Lourenzi Barbosa Novelli / Banca: Rodrigo Tavanelli Hernandes / Resumo: Não disponível / Abstract: Baccharis dracunculifolia is the most important vegetal source of propolis in southeast Brazil, and researchers have been investigating its biological properties. Propolis is a complex resinous hive product collected by bees from several plants, showing a very complex chemical composition. It has been employed since ancient times, due to its therapeutic properties, such as antimicrobial, antiinflammatory, antioxidant, immunomodulatory and antitumoral activities, among others. The goal of this work was to compare the cytotoxic action of B. dracunculifolia, propolis and 2 isolated compounds (caffeic and cinnamic acids) on HEp-2 cells in vitro. These cells were incubated with different concentrations of each variable, and cell viability was assessed by crystal violet method. Lower concentrations of B. dracunculifolia (extract and essential oil), propolis as well as caffeic and cinnamic acids, showed no cytotoxic activity against HEp-2 cells. On the other hand, elevated concentrations (50 and 100 μg/100μL) exerted a cytotoxic action, and propolis showed a more efficient action than its vegetal source and isolated compounds. Further investigation is still needed in order to explore the potential of these variables as antitumor agents and to understand their mechanisms of action. Baccharis dracunculifolia is the most important botanical source of the southeastern Brazilian propolis, and its potential for the development of new phytotherapeutic medicines has been investigated. Propolis is commonly used for its antimicrobial and immunomodulatory activities. Nevertheless, B. dracunculifolia and propolis effects on poliovirus type 1 (PV1) were not investigated yet. Thus, the aim of this work was to evaluate the antiviral activities of B. dracunculifolia (extract and essential oil), propolis and some isolated compounds (caffeic and cinnamic acids) against PV1 replication in HEp-2 cells in three... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Daisy Maria Fávero Salvadori / Banca: Jose Mauricio Sforcin / Banca: Edson L. Maistro / Banca: Mario A. Spano / Banca: Lusânia M. G. Antunes / Resumo: Propolis é uma mistura complexa composta de resina, extratos vegetais, cera, óleos essências (10%), pólen (5%) e outras substâncias (5%). Alguns estudos têm mostrado, no entanto, que a composição da própolis pode variar de acordo com a flora e região onde é coletada e permitido a identificação de sua origem vegetal por análise comparativa química e taxonômica testes. Esses compostos foram identificados no exsudado das folhas da Baccharis dracunculifolia e são específicos da própolis brasileira, sendo encontrado em concentrações semelhantes, demonstrando que a Baccharis ssp é a principal fonte para composição da própolis. Assim, por possuir uma complexa e altamente variável composição química (cerca de 300 compostos já foram identificados), a qual está intimamente relacionada com a ecologia da flora de cada região visitada pelas abelhas, a própolis tem sido utilizada como medicamento natural desde os tempos antigos. Estudos têm comprovado sua ação benéfica à saúde devido a sua atividade antiinflamatória, hepatoprotetora, antimicrobiana, além de propriedades antioxidantes. Além disso, o própolis é utilizada em cosméticos bem como na alimentação. Assim, o efeito terapêutico da própolis sobre algumas doenças, devido ao seu uso popular como medicamento, tem suscitado o interesse na compreensão das propriedades biológicas desta substância relacionadando-as com sua composição química. Em vista desse potencial terapêutico proeminente da própolis e o pequeno número de estudos sobre os seus mecanismos de ação, o objetivo do presente estudo foi avaliar o possível potencial antigenotóxico e antimutagênico das frações de própolis em células de ovário de hamster chinês (CHO) e células de hepatobastoma humano (HepG2) pelo ensaio cometa e teste do micronúcleo com boqueio da citocinese (CBMN). Tratamentos com a própolis... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Propolis is a complex mixture of plant resins, bee wax, essential oils and pollen. The specific chemical compounds of Brazilian propolis have allowed the identification of its plant source by comparative chemical analysis (infrared measurements) and taxonomic tests. These compounds have been identified in the exudate of Baccharis dracunculifolia leaves and are specific of Brazilian propolis, being even found at similar concentrations, demonstrating that Baccharis is the main plant source of propolis. Thus, by possessing highly complex and variable chemical composition of propolis (more than 300 components have been identified), which is intimately related to the ecology of the flora of each region visited by the bees, propolis is a natural remedy that has been used since ancient times. It is widely recommended by phytotherapists due to its anti-inflammatory, hepatoprotective, antimicrobial, and antioxidant properties. Also, propolis is used in cosmetic products and as a food constituent. Thus, the therapeutic effect of propolis on some human diseases claimed by folk medicine has raised the interest in the understanding of the biological properties of this substance related to its chemical composition. In view of the prominent therapeutic potential of propolis and the small number of studies regarding its mechanisms of action, the aim of the present investigation was to evaluate the possible antigenotoxic and antimutagenic effects of a propolis fractions on Chinese hamster ovary (CHO) cells and células de hapatobastoma humano (HepG2) by comet assay and cytokinesis-block micronucleus assay (CBMN). Treatments with propolis, at concentrations 25, 50, and 100 μg/ml, were done prior to, simultaneously and post-treatment with mutagens (direct- and indirect-acting) with different mode of action. Under these conditions, by comet assay our data clearly showed the capability of propolis compounds... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Ricardo de Oliveira Orsi / Banca: Margarida Maria Barros / Banca: Lidia Maria Ruv C Barreto / Resumo: O cultivo intensivo de peixes em tanque-rede pode induzir ao estresse fisiológico, promovendo queda de desempenho do animal e da imunocompetencia. A utilização de imunoestimulantes, como a própolis, pode melhorar a imunidade inata dos animais e fornecer resistência a patogenos durante períodos de estresse elevado. Os objetivos deste trabalho foram avaliar o efeito da própolis em juvenis de pacu, criados em tanques-rede e arraçoados com baixas e altas frequências alimentares, por meio do desempenho produtivo e das enzimas intestinais. Foram utilizados juvenis de pacu (Piaractus mesopotamicus), distribuídos em 18 tanques-rede com estocagem de 90 alevinos/m3 com peso médio inicial de 27,57±7,21 g. Foram utilizados três níveis de própolis incorporada na ração comercial, nos seguintes tratamentos: 0,0; 1,0 e 10,0 g de própolis/kg de ração, fornecidas em duas frequências alimentares: quatro e 24 vezes ao dia em um delineamento fatorial (3x2) e com taxa de alimentação de 7,0%. Os resultados foram analisados por ANOVA, seguida do teste de Tukey para comparação de médias. A suplementação de própolis na dieta melhorou o ganho de peso dos animais, na frequência alimentar de 24 vezes ao dia. Entretanto, quando a frequência alimentar foi menor os níveis de própolis não melhoraram o ganho de peso / Abstract: Intensive fish farming in net cages can lead to physiological stress, thus impairing animal performance and resistance to diseases. The use of immunostimulants, such as propolis, can bring benefits mainly in the initial phases of the culture. This work aimed at evaluating the effect of propolis in juveniles of Pacu, reared in net cages and fed high and low feeding frequencies, by analyzing their performance and digestive enzmes. Pacus were distributed in 18 cages with 90 fish/m3 and 27.57±7.21 g. Three levels of propolis were added in fish diet (0.0; 1.0 and 10.0g/kg) supplied in two feeding frequencies (four and 24/day) in a factorial arrangement (3x2) and a feeding rate corresponding to 7% of fish weight. Results were analyzed by ANOVA and Tukey test comparison of averages.Fish diet with propolis with a feeding frequency of 24 times a day resulted in improved weight gain / Mestre