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Can green synthesized propolis loaded silver nanoparticulate gel enhance wound healing caused by burns?Patil, S.S., Desai, N., Mahadik, K.R., Paradkar, Anant R January 2015 (has links)
No / Nanotechnology can offer new opportunities in the fight against infection. The aim of current work was to investigate an eco-friendly method for synthesis of silver nanoparticles (AgNP) which have the ability to load lipophilic compounds onto their surface.
Pharmaceutically acceptable hydrophilic lipid (Gelucire® 50/13) has been used as a reducing agent for in situ reduction of silver nitrate so as to obtain silver nanoparticles. Propolis is used as model molecule for loading onto surface of AgNP owing to its well reported broad range of pharmacological activities including anti-inflammatory, antioxidant and antimicrobial activity. Propolis loaded silver nanoparticles (PLSN) were prepared and characterized for silver content, surface plasmon resonance, particle size, XRD, FTIR, TEM, antibacterial activity and burn wound healing in wistar rats.
Propolis constituents were successfully loaded onto surface of AgNP using the proposed conceptual method. The formation of PLSN having size 24.3 ± 2.5 nm was confirmed using surface plasmon resonance, FTIR, XRD and TEM. The combination of propolis with AgNP significantly reduced minimum inhibitory concentration of AgNP alone when tested against Staphylococcus aureus. PLSN gel showed comparable burn wound healing in wistar rats when tested against marketed silver sulfadiazine gel.
The use of Gelucire® as solubilizing agent for lipophillic drugs was effectively utilized for loading lipophillic constituents of propolis onto the AgNP. This potentially provides an effective method for the green synthesis of AgNP which can be used to load lipophillic molecules onto their surface whenever such combination is required.
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Desenvolvimento de nanoemulsões catiônicas contendo benzofenonas da propolis vermelha brasileira visando ao tratamento de infecções fúngicas mucocutâneasFasolo, Daniel January 2016 (has links)
Os compostos lipofílicos da própolis vermelha brasileira (PVB) têm recebido atenção especial devido a interessantes relatos referentes às suas atividades biológicas. Neste contexto, este estudo teve três etapas: a primeira objetivou investigar a atividade do extrato bruto etanólico da PVB e respectivas frações (obtidas com solventes de polaridade crescente, por meio de maceração em temperatura ambiente) contra cepas de Candida não-albicans (CNA) - C. krusei, C. glabrata, C. tropicalis e C. parapsilosis. A concentração inibidora mínima (CIM) foi determinada pelo método de microdiluição em caldo, com concentrações variando entre 1,9 a 500 μg/mL. Dentre as frações testadas, a fração hexânica (HEX) apresentou maior potencial antifúngico, alcançando valor de CIM de 1,95 μg/mL contra espécies de C. parapsilosis. Para cepas de C. glabrata, C. krusei e C. tropicalis, os valores de CIM obtidos foram variáveis (1,95-250 μg/mL). Ensaio colorimétrico de MTT foi utilizado para confirmar o dano celular e os resultados variaram de 80,66 a 94,44%, com extensa morte celular causada pela HEX, incluindo efeitos contra cepas resistentes de CNA, principalmente C. glabrata e C. parapsilosis. Esta potencial capacidade antifúngica está relacionada com compostos lipofílicos, provavalmente benzofenonas polipreniladas (BPPs), anteriormente descritas para PVB. A segunda etapa teve como objetivo avaliar a composição química do extrato hexânico da PVB (HEXred) por CLUE-DAD-EM. A investigação química resultou, principalmente, na identificação de BPPs (oblongifolina A, gutiferona E e/ou xantochimol). Após, um método de CLAE-UV isocrático foi validado para a determinação do teor total de BPPs (a 260 nm) expresso como garcinol, um diasterorisômero da gutiferona E disponível comercialmente. O método mostrou ser específico, exato, preciso e linear (0,1 a 10 μg/mL) para a determinação de BPPS na HEXred e na nanoemulsão (NE) contendo HEXred, bem como em amostras de pele e mucosa suínas, após estudos de permeação/retenção. O efeito matriz foi determinado para todas as matrizes complexas, demonstrando baixo efeito durante a análise. A estabilidade do método foi verificada por meio da exposição da HEXred às condições de estresse ácida, alcalina, oxidativa e térmica. Não houve interferência dos produtos de degradação durante a análise, indicando que o método analítico/bioanalítico proposto provou ser simples e confiável para a determinação de BPPs na presença de diferentes matrizes. Como terceiro passo nós buscamos otimizar a incorporação de BPPs em NE destinada ao tratamento de infecções fúngicas mucocutâneas. A otimização da NE foi realizada por meio de experimento de Box-Behnken, que permitiu avaliar simultaneamente a influência das concentrações do fosfolipídeo da lecitina de gema de ovo, do lípido catiónico DOTAP e das BPPs nas propriedades físico-químicas da NE, bem como na eficiência de associação (EA) das BPPs. Utilizando o software Mini-Tab®, a formulação ótima foi selecionada com base no menor tamanho de gotícula e maiores potencial zeta e eficiência de associação, exibindo um tamanho médio de 140,56 ± 5,22 nm, potencial zeta de + 60,72 ± 3,07 e 99,55 ± 1,09% de EA. Células de difusão do tipo Franz foram usadas para avaliar a distribuição das BPPs através da pele e mucosa suínas, sendo encontradas BPPs nas camadas de ambos os tecidos (principalmente na derme). Uma maior quantidade de BPPs (até 3 vezes) foi detectada na pele e mucosa lesadas o que demonstra o efeito da integridade do tecido na distribuição das BPPs, como sugerido por imagens de microscopia confocal de fluorescência. As BPPs foram detectadas no fluido receptor apenas quando a mucosa esofágica foi lesada. A atividade antifúngica das formulações foi investigada contra espécies de CNA - C. krusei, C. glabrata, C. tropicalis e C. parapsilosis. Os valores de CIM variaram de 0,654 a 2,617 μg/mL, com dano celular superior a 78% como verificado por ensaio de MTT. Tais resultados sugerem que a NE otimizada possui potencial promissor para ser utilizada topicamente para o tratamento de infecções fúngicas mucocutâneas causadas por espécies de CNA. / Lipophilic compounds of Brazilian red propolis (BRP) have received increasing attention due to some interesting findings regarding their biological activities. This study had three steps: first we aimed to investigate the activity of BRP crude ethanolic extract and their fractions (obtained with increasing polarity solvents, through maceration at room temperature) against non-albicans Candida (NAC) strains. Minimal inhibitory concentration (MIC) was determined by the broth microdilution method, with concentrations ranging from 1.9 to 500 μg/mL. Among the tested fractions, n-hexane fraction (HEX) showed higher antifungal potential, achieving MIC values of 1.95 μg/mL against C. parapsilosis strains. On C. glabrata, C. krusei and C. tropicalis strains, variable MIC values were obtained (1.95 to 250 μg/mL). MTT colorimetric assay was employed to confirm the cell damage and the results ranged from 80.66 to 94.44%, with extensive cell death caused by HEX, including the effects against NAC resistant strains, mainly C. glabrata and C. parapsilosis. This potential antifungal capacity showed by HEX is related to the lipophilic compounds, probably polyprenylated benzophenones (PPBs), previous described for BRP. In the second step we aimed to evaluate the chemical composition of BRP n-hexane extract (HEXred) by UPLC-PDA-MS. Chemical investigation mainly resulted in the identification of PPBs in this extract, named oblongifolin A, guttiferone E, and/or xanthochymol. After that, an isocratic HPLC-UV method was validated for the determination of total content of PPBs (at 260 nm) expressed as garcinol, a commercially available guttiferone E diastereoisomer. The method showed to be specific, precise, accurate, and linear (0.1 to 10 μg/mL) for the determination of PPBs in HEXred, BRP-loaded nanoemulsions (NE), as well as, in porcine skin and mucosa samples after permeation/retention studies. The matrix effect was determined for all complex matrices, demonstrating low effect during the analysis. The stability-indicating method was verified by submitting HEXred to acidic, alkaline, oxidative, and thermal stress conditions. No interference of degradation products was detected during analysis, indicating that the proposed analytical/bioanalytical method proved to be simple and reliable for the determination of PPBs in the presence of different matrices. As third step we aimed to optimize the incorporation of PPBs into NE intended for the treatment of mucocutaneous fungal infections. The optimization of NE was performed by means of a Box-Behnken Design, which allowed evaluating simultaneously the influence of the phospholipid egg-lecithin, the cationic lipid DOTAP and PPBs concentrations on the physicochemical properties of NE, as well as on the association efficiency (AE) of PPBs. By using the Mini Tab® software, the optimal formulation was selected based on the smallest droplet size and highest zeta potential and AE, exhibited a mean average size of 140.56±5.22 nm, zeta potential of +60.72±3.07 and AE of 99.55±1.09%. Franz-type diffusion cells were used to evaluate PPBs distribution through porcine skin and mucosa being PPBs found in both mucosa and skin layers (mainly in the dermis). A higher amount of PPBs (up to 3-fold) was detected in impaired skin and mucosa demonstrating the effect of the integrity of the tissue on PPBs distribution, as suggested by confocal fluorescence microscopy images. PPBs were detected in the receptor fluid only when esophageal mucosa was impaired. The antifungal activity of the formulations was investigated against NAC species – C. krusei, C. glabrata, C. tropicalis and C. parapsilosis. MIC values varied from 0.654 to 2.617 μg/mL, with cell damage higher than 78 % as verified by MTT assay. Such results suggest that the optimized NE have promising potential to be used topically for the treatment of mucocutaneous fungal infections caused by NAC strains.
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Puskiečių sistemų su bičių produktais gamyba ir biofarmacinis vertinimas / Semisolid systems with bees products manufacturing and biopharmaceutical evaluationStankevičiūtė, Ineta 30 June 2014 (has links)
Tyrimo tikslas: sumodeliuoti puskietes sistemas su bičių produktais ir įvertinti jų kokybę biofarmaciniais tyrimais.
Uždaviniai: 1. Atrinkti tinkamą propolio, kaip veikliosios medžiagos, formą įvedimui į modeliuojamas puskietes sistemas; 2. Pagaminti stabilias puskietes formas su bičių produktais (bičių vašku, propoliu, medumi) ir įvertinti jų kokybę, tiriant šiuos parametrus: vienalytiškumas, pH reikšmė, antioksidacinis aktyvumas; 3. Atlikti puskiečių sistemų su bičių produktais biofarmacinį vertinimą ir identifikuoti veiksnius, darančius įtaką bendro fenolinių junginių kiekio atpalaidavimui; 4. Įvertinti puskiečių formų su bičių produktais kokybę, remiantis atliktais veikliųjų junginių (fenolinių rūgščių, vanilino) atpalaidavimo in vitro tyrimo rezultatais.
Bičių produktų puskiečių sistemų analizei pasirinktas fenolinių junginių nustatymas spektrofotometriniu ir ESC metodais bei spektrofotometrinis metodas laisvųjų DPPH• radikalų surišimo aktyvumui pagal troloksą nustatyti. Vaisto formų kokybė vertinta nustatant pH reikšmę ir atliekant veikliųjų junginių atpalaidavimo tyrimą in vitro. Į puskietes sistemas veiklioji medžiaga (propolis) įterpiama tirštojo arba skystojo (gelyje) ekstrakto forma. Stabilios I grupės sistemos pagaminamos tada, kai bičių vaško ir saulėgrąžų aliejaus santykis ne didesnis kaip 1:5. Bičių vaškas ir medus daro įtaką atpalaiduojamam veikliųjų junginių kiekiui – didėjant vaško kiekiui, veikliųjų junginių iš sistemų atsipalaiduoja mažesnis kiekis, o iš... [toliau žr. visą tekstą] / The aim of work: Formulate and analyze semisolid preparations with bees products and evaluate their quality by biopharmaceutical researches.
Main tasks: 1. Select the proper form of propolis as an active material in formulated semisolid systems; 2. Formulate stable semisolid systems with bees products (beeswax, propolis, honey) and evaluate their quality by investigation of these parameters: homogenity, pH value, antioxidant activity; 3. Perform biopharmaceutical evaluation of semisolid systems with bees products and identify the factors that influence release the total amount of phenolic compounds; 4. Evaluate quality of semisolid systems with bees products based on active compounds (phenolic acids, vanillin) in vitro release test results.
Semisolid systems with bees products are analyzed by using spectrophotometric and capillary HPLC methods for analysis of total phenolic compounds measuring, DPPH• free radical scavenging activity measuring according to trolox. Quality of the systems was evaluated by measuring pH values and by testing release of active compounds in vitro. The active substance propolis is inserted into semisolid systems by thick or liquid (in gels) extract form. Stable system of the Group I semisolid systems is formulated when beeswax and sunflower oil ratio is less than 1:5. Beeswax and honey in systems affect the release of active compounds - increasing the wax content, the active compounds release of the systems is reduced, adequate quantity of honey... [to full text]
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Parâmetros genéticos para características produtivas e comportamentais em abelhas africanizadas Apis mellifera via abordagem bayesianaPadilha, Alessandro Haiduck January 2011 (has links)
O objetivo desse estudo foi estimar parâmetros genéticos para características produtivas e comportamentais em uma população de abelhas Apis mellifera africanizadas por meio de inferência Bayesiana. Os dados foram submetidos a análises uni e bicaracterística utilizando o programa MTGSAM. Os modelos consideraram os efeitos (fixos) de local do apiário, mês-ano ou estação-ano e o número de caixilhos com abelhas aderentes como covariável linear. As estimativas de herdabilidade apresentaram magnitudes de moderada a alta para comportamento higiênico (0,81 ± 0,17), produção de própolis (0,83 ± 0,16), produção de mel (0,37 ± 0,22) e taxa de coleta de xarope (0,39 ± 0,22) e magnitude baixa para a percentagem de ácaros em abelhas adultas (0,12 ± 0,13). A rapidez de coleta de xarope apresentou correlação genética de 0,21 ± 0,51 com produção de mel, de 0,45 ± 0,33 com produção de própolis, e de 0,05 ± 0,43 com comportamento higiênico. As correlações genéticas entre produção de mel, produção de própolis e comportamento higiênico foram de 0,20 ± 0,43, de -0,11 ± 0,41 e de 0,23 ± 0,31, respectivamente. As correlações genéticas foram negativas entre percentagem de ácaros em abelhas adultas e as características produção de mel (-0,63 ± 0,39), produção de própolis (-0,07 ± 0,50), comportamento higiênico (-0,19 ± 0,51) e rapidez de coleta de xarope (- 0,41 ± 0,51). As características produção de mel, produção de própolis e comportamento higiênico apresentam potencial para seleção genética. A menor percentagem de ácaros em abelhas adultas está relacionado a maior produção de mel e maior comportamento higiênico, mas não deve ser usado como único critério de seleção devido a baixa herdabilidade. A seleção de abelhas que coletam xarope mais rapidamente, prevendo maior produção de mel, promoverá pequeno ganho genético. Ao selecionar abelhas que produzem mais própolis haverá pequenos ganhos genéticos para comportamento higiênico ou maior produção de mel. / This study was carried out to estimate genetic parameters for productive and behavioural traits in Africanized honey bees Apis mellifera. The data were submitted uni and bicharacter analysis using the software MTGSAM. The fixed effects considered in the models were localization of the hive, month-year or season-year and number of frames covered with bees as covariate. The heritability estimates were moderate to high for hygienic behaviour (0,81 ± 0,17), propolis production (0,83 ± 0,16), honey production (0,37 ± 0,22) and syrup-collection rate (0,39 ± 0,22) and lower for percentage of mites on adult bees (0,12 ± 0,13). Syrup-collection rate showed genetic correlation values of 0,21 ± 0,51 with honey production, 0,45 ± 0,33 with propolis production and 0,05 ± 0,43 with hygienic behaviour. Genetic correlation between honey and propolis was 0,20 ± 0,43, between honey production and hygienic behaviour was -0,11 ± 0,41 and between propolis production and hygienic behaviour was 0,23 ± 0,31. Genetic correlations were negative between percentage of mites on adult bees and other traits honey production (-0,63 ± 0,39), propolis production (-0,07 ± 0,50), hygienic behaviour (-0,19 ± 0,51) and syrup-collection rate. Honey production, propolis production and hygienic behavior traits have potential for genetic selection. The lower percentage of mites on adult bees increase honey production or hygienic behaviour, but it is not recommended as the only criterion for selection, due to its low heritability. Selection for syrupcollection rate will promote small genetic gain for honey production. Propolis production is positively correlated to hygienic behaviour or honey production.
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Desenvolvimento de nanoemulsões catiônicas contendo benzofenonas da propolis vermelha brasileira visando ao tratamento de infecções fúngicas mucocutâneasFasolo, Daniel January 2016 (has links)
Os compostos lipofílicos da própolis vermelha brasileira (PVB) têm recebido atenção especial devido a interessantes relatos referentes às suas atividades biológicas. Neste contexto, este estudo teve três etapas: a primeira objetivou investigar a atividade do extrato bruto etanólico da PVB e respectivas frações (obtidas com solventes de polaridade crescente, por meio de maceração em temperatura ambiente) contra cepas de Candida não-albicans (CNA) - C. krusei, C. glabrata, C. tropicalis e C. parapsilosis. A concentração inibidora mínima (CIM) foi determinada pelo método de microdiluição em caldo, com concentrações variando entre 1,9 a 500 μg/mL. Dentre as frações testadas, a fração hexânica (HEX) apresentou maior potencial antifúngico, alcançando valor de CIM de 1,95 μg/mL contra espécies de C. parapsilosis. Para cepas de C. glabrata, C. krusei e C. tropicalis, os valores de CIM obtidos foram variáveis (1,95-250 μg/mL). Ensaio colorimétrico de MTT foi utilizado para confirmar o dano celular e os resultados variaram de 80,66 a 94,44%, com extensa morte celular causada pela HEX, incluindo efeitos contra cepas resistentes de CNA, principalmente C. glabrata e C. parapsilosis. Esta potencial capacidade antifúngica está relacionada com compostos lipofílicos, provavalmente benzofenonas polipreniladas (BPPs), anteriormente descritas para PVB. A segunda etapa teve como objetivo avaliar a composição química do extrato hexânico da PVB (HEXred) por CLUE-DAD-EM. A investigação química resultou, principalmente, na identificação de BPPs (oblongifolina A, gutiferona E e/ou xantochimol). Após, um método de CLAE-UV isocrático foi validado para a determinação do teor total de BPPs (a 260 nm) expresso como garcinol, um diasterorisômero da gutiferona E disponível comercialmente. O método mostrou ser específico, exato, preciso e linear (0,1 a 10 μg/mL) para a determinação de BPPS na HEXred e na nanoemulsão (NE) contendo HEXred, bem como em amostras de pele e mucosa suínas, após estudos de permeação/retenção. O efeito matriz foi determinado para todas as matrizes complexas, demonstrando baixo efeito durante a análise. A estabilidade do método foi verificada por meio da exposição da HEXred às condições de estresse ácida, alcalina, oxidativa e térmica. Não houve interferência dos produtos de degradação durante a análise, indicando que o método analítico/bioanalítico proposto provou ser simples e confiável para a determinação de BPPs na presença de diferentes matrizes. Como terceiro passo nós buscamos otimizar a incorporação de BPPs em NE destinada ao tratamento de infecções fúngicas mucocutâneas. A otimização da NE foi realizada por meio de experimento de Box-Behnken, que permitiu avaliar simultaneamente a influência das concentrações do fosfolipídeo da lecitina de gema de ovo, do lípido catiónico DOTAP e das BPPs nas propriedades físico-químicas da NE, bem como na eficiência de associação (EA) das BPPs. Utilizando o software Mini-Tab®, a formulação ótima foi selecionada com base no menor tamanho de gotícula e maiores potencial zeta e eficiência de associação, exibindo um tamanho médio de 140,56 ± 5,22 nm, potencial zeta de + 60,72 ± 3,07 e 99,55 ± 1,09% de EA. Células de difusão do tipo Franz foram usadas para avaliar a distribuição das BPPs através da pele e mucosa suínas, sendo encontradas BPPs nas camadas de ambos os tecidos (principalmente na derme). Uma maior quantidade de BPPs (até 3 vezes) foi detectada na pele e mucosa lesadas o que demonstra o efeito da integridade do tecido na distribuição das BPPs, como sugerido por imagens de microscopia confocal de fluorescência. As BPPs foram detectadas no fluido receptor apenas quando a mucosa esofágica foi lesada. A atividade antifúngica das formulações foi investigada contra espécies de CNA - C. krusei, C. glabrata, C. tropicalis e C. parapsilosis. Os valores de CIM variaram de 0,654 a 2,617 μg/mL, com dano celular superior a 78% como verificado por ensaio de MTT. Tais resultados sugerem que a NE otimizada possui potencial promissor para ser utilizada topicamente para o tratamento de infecções fúngicas mucocutâneas causadas por espécies de CNA. / Lipophilic compounds of Brazilian red propolis (BRP) have received increasing attention due to some interesting findings regarding their biological activities. This study had three steps: first we aimed to investigate the activity of BRP crude ethanolic extract and their fractions (obtained with increasing polarity solvents, through maceration at room temperature) against non-albicans Candida (NAC) strains. Minimal inhibitory concentration (MIC) was determined by the broth microdilution method, with concentrations ranging from 1.9 to 500 μg/mL. Among the tested fractions, n-hexane fraction (HEX) showed higher antifungal potential, achieving MIC values of 1.95 μg/mL against C. parapsilosis strains. On C. glabrata, C. krusei and C. tropicalis strains, variable MIC values were obtained (1.95 to 250 μg/mL). MTT colorimetric assay was employed to confirm the cell damage and the results ranged from 80.66 to 94.44%, with extensive cell death caused by HEX, including the effects against NAC resistant strains, mainly C. glabrata and C. parapsilosis. This potential antifungal capacity showed by HEX is related to the lipophilic compounds, probably polyprenylated benzophenones (PPBs), previous described for BRP. In the second step we aimed to evaluate the chemical composition of BRP n-hexane extract (HEXred) by UPLC-PDA-MS. Chemical investigation mainly resulted in the identification of PPBs in this extract, named oblongifolin A, guttiferone E, and/or xanthochymol. After that, an isocratic HPLC-UV method was validated for the determination of total content of PPBs (at 260 nm) expressed as garcinol, a commercially available guttiferone E diastereoisomer. The method showed to be specific, precise, accurate, and linear (0.1 to 10 μg/mL) for the determination of PPBs in HEXred, BRP-loaded nanoemulsions (NE), as well as, in porcine skin and mucosa samples after permeation/retention studies. The matrix effect was determined for all complex matrices, demonstrating low effect during the analysis. The stability-indicating method was verified by submitting HEXred to acidic, alkaline, oxidative, and thermal stress conditions. No interference of degradation products was detected during analysis, indicating that the proposed analytical/bioanalytical method proved to be simple and reliable for the determination of PPBs in the presence of different matrices. As third step we aimed to optimize the incorporation of PPBs into NE intended for the treatment of mucocutaneous fungal infections. The optimization of NE was performed by means of a Box-Behnken Design, which allowed evaluating simultaneously the influence of the phospholipid egg-lecithin, the cationic lipid DOTAP and PPBs concentrations on the physicochemical properties of NE, as well as on the association efficiency (AE) of PPBs. By using the Mini Tab® software, the optimal formulation was selected based on the smallest droplet size and highest zeta potential and AE, exhibited a mean average size of 140.56±5.22 nm, zeta potential of +60.72±3.07 and AE of 99.55±1.09%. Franz-type diffusion cells were used to evaluate PPBs distribution through porcine skin and mucosa being PPBs found in both mucosa and skin layers (mainly in the dermis). A higher amount of PPBs (up to 3-fold) was detected in impaired skin and mucosa demonstrating the effect of the integrity of the tissue on PPBs distribution, as suggested by confocal fluorescence microscopy images. PPBs were detected in the receptor fluid only when esophageal mucosa was impaired. The antifungal activity of the formulations was investigated against NAC species – C. krusei, C. glabrata, C. tropicalis and C. parapsilosis. MIC values varied from 0.654 to 2.617 μg/mL, with cell damage higher than 78 % as verified by MTT assay. Such results suggest that the optimized NE have promising potential to be used topically for the treatment of mucocutaneous fungal infections caused by NAC strains.
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Parâmetros genéticos para características produtivas e comportamentais em abelhas africanizadas Apis mellifera via abordagem bayesianaPadilha, Alessandro Haiduck January 2011 (has links)
O objetivo desse estudo foi estimar parâmetros genéticos para características produtivas e comportamentais em uma população de abelhas Apis mellifera africanizadas por meio de inferência Bayesiana. Os dados foram submetidos a análises uni e bicaracterística utilizando o programa MTGSAM. Os modelos consideraram os efeitos (fixos) de local do apiário, mês-ano ou estação-ano e o número de caixilhos com abelhas aderentes como covariável linear. As estimativas de herdabilidade apresentaram magnitudes de moderada a alta para comportamento higiênico (0,81 ± 0,17), produção de própolis (0,83 ± 0,16), produção de mel (0,37 ± 0,22) e taxa de coleta de xarope (0,39 ± 0,22) e magnitude baixa para a percentagem de ácaros em abelhas adultas (0,12 ± 0,13). A rapidez de coleta de xarope apresentou correlação genética de 0,21 ± 0,51 com produção de mel, de 0,45 ± 0,33 com produção de própolis, e de 0,05 ± 0,43 com comportamento higiênico. As correlações genéticas entre produção de mel, produção de própolis e comportamento higiênico foram de 0,20 ± 0,43, de -0,11 ± 0,41 e de 0,23 ± 0,31, respectivamente. As correlações genéticas foram negativas entre percentagem de ácaros em abelhas adultas e as características produção de mel (-0,63 ± 0,39), produção de própolis (-0,07 ± 0,50), comportamento higiênico (-0,19 ± 0,51) e rapidez de coleta de xarope (- 0,41 ± 0,51). As características produção de mel, produção de própolis e comportamento higiênico apresentam potencial para seleção genética. A menor percentagem de ácaros em abelhas adultas está relacionado a maior produção de mel e maior comportamento higiênico, mas não deve ser usado como único critério de seleção devido a baixa herdabilidade. A seleção de abelhas que coletam xarope mais rapidamente, prevendo maior produção de mel, promoverá pequeno ganho genético. Ao selecionar abelhas que produzem mais própolis haverá pequenos ganhos genéticos para comportamento higiênico ou maior produção de mel. / This study was carried out to estimate genetic parameters for productive and behavioural traits in Africanized honey bees Apis mellifera. The data were submitted uni and bicharacter analysis using the software MTGSAM. The fixed effects considered in the models were localization of the hive, month-year or season-year and number of frames covered with bees as covariate. The heritability estimates were moderate to high for hygienic behaviour (0,81 ± 0,17), propolis production (0,83 ± 0,16), honey production (0,37 ± 0,22) and syrup-collection rate (0,39 ± 0,22) and lower for percentage of mites on adult bees (0,12 ± 0,13). Syrup-collection rate showed genetic correlation values of 0,21 ± 0,51 with honey production, 0,45 ± 0,33 with propolis production and 0,05 ± 0,43 with hygienic behaviour. Genetic correlation between honey and propolis was 0,20 ± 0,43, between honey production and hygienic behaviour was -0,11 ± 0,41 and between propolis production and hygienic behaviour was 0,23 ± 0,31. Genetic correlations were negative between percentage of mites on adult bees and other traits honey production (-0,63 ± 0,39), propolis production (-0,07 ± 0,50), hygienic behaviour (-0,19 ± 0,51) and syrup-collection rate. Honey production, propolis production and hygienic behavior traits have potential for genetic selection. The lower percentage of mites on adult bees increase honey production or hygienic behaviour, but it is not recommended as the only criterion for selection, due to its low heritability. Selection for syrupcollection rate will promote small genetic gain for honey production. Propolis production is positively correlated to hygienic behaviour or honey production.
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Desenvolvimento de nanoemulsões catiônicas contendo benzofenonas da propolis vermelha brasileira visando ao tratamento de infecções fúngicas mucocutâneasFasolo, Daniel January 2016 (has links)
Os compostos lipofílicos da própolis vermelha brasileira (PVB) têm recebido atenção especial devido a interessantes relatos referentes às suas atividades biológicas. Neste contexto, este estudo teve três etapas: a primeira objetivou investigar a atividade do extrato bruto etanólico da PVB e respectivas frações (obtidas com solventes de polaridade crescente, por meio de maceração em temperatura ambiente) contra cepas de Candida não-albicans (CNA) - C. krusei, C. glabrata, C. tropicalis e C. parapsilosis. A concentração inibidora mínima (CIM) foi determinada pelo método de microdiluição em caldo, com concentrações variando entre 1,9 a 500 μg/mL. Dentre as frações testadas, a fração hexânica (HEX) apresentou maior potencial antifúngico, alcançando valor de CIM de 1,95 μg/mL contra espécies de C. parapsilosis. Para cepas de C. glabrata, C. krusei e C. tropicalis, os valores de CIM obtidos foram variáveis (1,95-250 μg/mL). Ensaio colorimétrico de MTT foi utilizado para confirmar o dano celular e os resultados variaram de 80,66 a 94,44%, com extensa morte celular causada pela HEX, incluindo efeitos contra cepas resistentes de CNA, principalmente C. glabrata e C. parapsilosis. Esta potencial capacidade antifúngica está relacionada com compostos lipofílicos, provavalmente benzofenonas polipreniladas (BPPs), anteriormente descritas para PVB. A segunda etapa teve como objetivo avaliar a composição química do extrato hexânico da PVB (HEXred) por CLUE-DAD-EM. A investigação química resultou, principalmente, na identificação de BPPs (oblongifolina A, gutiferona E e/ou xantochimol). Após, um método de CLAE-UV isocrático foi validado para a determinação do teor total de BPPs (a 260 nm) expresso como garcinol, um diasterorisômero da gutiferona E disponível comercialmente. O método mostrou ser específico, exato, preciso e linear (0,1 a 10 μg/mL) para a determinação de BPPS na HEXred e na nanoemulsão (NE) contendo HEXred, bem como em amostras de pele e mucosa suínas, após estudos de permeação/retenção. O efeito matriz foi determinado para todas as matrizes complexas, demonstrando baixo efeito durante a análise. A estabilidade do método foi verificada por meio da exposição da HEXred às condições de estresse ácida, alcalina, oxidativa e térmica. Não houve interferência dos produtos de degradação durante a análise, indicando que o método analítico/bioanalítico proposto provou ser simples e confiável para a determinação de BPPs na presença de diferentes matrizes. Como terceiro passo nós buscamos otimizar a incorporação de BPPs em NE destinada ao tratamento de infecções fúngicas mucocutâneas. A otimização da NE foi realizada por meio de experimento de Box-Behnken, que permitiu avaliar simultaneamente a influência das concentrações do fosfolipídeo da lecitina de gema de ovo, do lípido catiónico DOTAP e das BPPs nas propriedades físico-químicas da NE, bem como na eficiência de associação (EA) das BPPs. Utilizando o software Mini-Tab®, a formulação ótima foi selecionada com base no menor tamanho de gotícula e maiores potencial zeta e eficiência de associação, exibindo um tamanho médio de 140,56 ± 5,22 nm, potencial zeta de + 60,72 ± 3,07 e 99,55 ± 1,09% de EA. Células de difusão do tipo Franz foram usadas para avaliar a distribuição das BPPs através da pele e mucosa suínas, sendo encontradas BPPs nas camadas de ambos os tecidos (principalmente na derme). Uma maior quantidade de BPPs (até 3 vezes) foi detectada na pele e mucosa lesadas o que demonstra o efeito da integridade do tecido na distribuição das BPPs, como sugerido por imagens de microscopia confocal de fluorescência. As BPPs foram detectadas no fluido receptor apenas quando a mucosa esofágica foi lesada. A atividade antifúngica das formulações foi investigada contra espécies de CNA - C. krusei, C. glabrata, C. tropicalis e C. parapsilosis. Os valores de CIM variaram de 0,654 a 2,617 μg/mL, com dano celular superior a 78% como verificado por ensaio de MTT. Tais resultados sugerem que a NE otimizada possui potencial promissor para ser utilizada topicamente para o tratamento de infecções fúngicas mucocutâneas causadas por espécies de CNA. / Lipophilic compounds of Brazilian red propolis (BRP) have received increasing attention due to some interesting findings regarding their biological activities. This study had three steps: first we aimed to investigate the activity of BRP crude ethanolic extract and their fractions (obtained with increasing polarity solvents, through maceration at room temperature) against non-albicans Candida (NAC) strains. Minimal inhibitory concentration (MIC) was determined by the broth microdilution method, with concentrations ranging from 1.9 to 500 μg/mL. Among the tested fractions, n-hexane fraction (HEX) showed higher antifungal potential, achieving MIC values of 1.95 μg/mL against C. parapsilosis strains. On C. glabrata, C. krusei and C. tropicalis strains, variable MIC values were obtained (1.95 to 250 μg/mL). MTT colorimetric assay was employed to confirm the cell damage and the results ranged from 80.66 to 94.44%, with extensive cell death caused by HEX, including the effects against NAC resistant strains, mainly C. glabrata and C. parapsilosis. This potential antifungal capacity showed by HEX is related to the lipophilic compounds, probably polyprenylated benzophenones (PPBs), previous described for BRP. In the second step we aimed to evaluate the chemical composition of BRP n-hexane extract (HEXred) by UPLC-PDA-MS. Chemical investigation mainly resulted in the identification of PPBs in this extract, named oblongifolin A, guttiferone E, and/or xanthochymol. After that, an isocratic HPLC-UV method was validated for the determination of total content of PPBs (at 260 nm) expressed as garcinol, a commercially available guttiferone E diastereoisomer. The method showed to be specific, precise, accurate, and linear (0.1 to 10 μg/mL) for the determination of PPBs in HEXred, BRP-loaded nanoemulsions (NE), as well as, in porcine skin and mucosa samples after permeation/retention studies. The matrix effect was determined for all complex matrices, demonstrating low effect during the analysis. The stability-indicating method was verified by submitting HEXred to acidic, alkaline, oxidative, and thermal stress conditions. No interference of degradation products was detected during analysis, indicating that the proposed analytical/bioanalytical method proved to be simple and reliable for the determination of PPBs in the presence of different matrices. As third step we aimed to optimize the incorporation of PPBs into NE intended for the treatment of mucocutaneous fungal infections. The optimization of NE was performed by means of a Box-Behnken Design, which allowed evaluating simultaneously the influence of the phospholipid egg-lecithin, the cationic lipid DOTAP and PPBs concentrations on the physicochemical properties of NE, as well as on the association efficiency (AE) of PPBs. By using the Mini Tab® software, the optimal formulation was selected based on the smallest droplet size and highest zeta potential and AE, exhibited a mean average size of 140.56±5.22 nm, zeta potential of +60.72±3.07 and AE of 99.55±1.09%. Franz-type diffusion cells were used to evaluate PPBs distribution through porcine skin and mucosa being PPBs found in both mucosa and skin layers (mainly in the dermis). A higher amount of PPBs (up to 3-fold) was detected in impaired skin and mucosa demonstrating the effect of the integrity of the tissue on PPBs distribution, as suggested by confocal fluorescence microscopy images. PPBs were detected in the receptor fluid only when esophageal mucosa was impaired. The antifungal activity of the formulations was investigated against NAC species – C. krusei, C. glabrata, C. tropicalis and C. parapsilosis. MIC values varied from 0.654 to 2.617 μg/mL, with cell damage higher than 78 % as verified by MTT assay. Such results suggest that the optimized NE have promising potential to be used topically for the treatment of mucocutaneous fungal infections caused by NAC strains.
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Parâmetros genéticos para características produtivas e comportamentais em abelhas africanizadas Apis mellifera via abordagem bayesianaPadilha, Alessandro Haiduck January 2011 (has links)
O objetivo desse estudo foi estimar parâmetros genéticos para características produtivas e comportamentais em uma população de abelhas Apis mellifera africanizadas por meio de inferência Bayesiana. Os dados foram submetidos a análises uni e bicaracterística utilizando o programa MTGSAM. Os modelos consideraram os efeitos (fixos) de local do apiário, mês-ano ou estação-ano e o número de caixilhos com abelhas aderentes como covariável linear. As estimativas de herdabilidade apresentaram magnitudes de moderada a alta para comportamento higiênico (0,81 ± 0,17), produção de própolis (0,83 ± 0,16), produção de mel (0,37 ± 0,22) e taxa de coleta de xarope (0,39 ± 0,22) e magnitude baixa para a percentagem de ácaros em abelhas adultas (0,12 ± 0,13). A rapidez de coleta de xarope apresentou correlação genética de 0,21 ± 0,51 com produção de mel, de 0,45 ± 0,33 com produção de própolis, e de 0,05 ± 0,43 com comportamento higiênico. As correlações genéticas entre produção de mel, produção de própolis e comportamento higiênico foram de 0,20 ± 0,43, de -0,11 ± 0,41 e de 0,23 ± 0,31, respectivamente. As correlações genéticas foram negativas entre percentagem de ácaros em abelhas adultas e as características produção de mel (-0,63 ± 0,39), produção de própolis (-0,07 ± 0,50), comportamento higiênico (-0,19 ± 0,51) e rapidez de coleta de xarope (- 0,41 ± 0,51). As características produção de mel, produção de própolis e comportamento higiênico apresentam potencial para seleção genética. A menor percentagem de ácaros em abelhas adultas está relacionado a maior produção de mel e maior comportamento higiênico, mas não deve ser usado como único critério de seleção devido a baixa herdabilidade. A seleção de abelhas que coletam xarope mais rapidamente, prevendo maior produção de mel, promoverá pequeno ganho genético. Ao selecionar abelhas que produzem mais própolis haverá pequenos ganhos genéticos para comportamento higiênico ou maior produção de mel. / This study was carried out to estimate genetic parameters for productive and behavioural traits in Africanized honey bees Apis mellifera. The data were submitted uni and bicharacter analysis using the software MTGSAM. The fixed effects considered in the models were localization of the hive, month-year or season-year and number of frames covered with bees as covariate. The heritability estimates were moderate to high for hygienic behaviour (0,81 ± 0,17), propolis production (0,83 ± 0,16), honey production (0,37 ± 0,22) and syrup-collection rate (0,39 ± 0,22) and lower for percentage of mites on adult bees (0,12 ± 0,13). Syrup-collection rate showed genetic correlation values of 0,21 ± 0,51 with honey production, 0,45 ± 0,33 with propolis production and 0,05 ± 0,43 with hygienic behaviour. Genetic correlation between honey and propolis was 0,20 ± 0,43, between honey production and hygienic behaviour was -0,11 ± 0,41 and between propolis production and hygienic behaviour was 0,23 ± 0,31. Genetic correlations were negative between percentage of mites on adult bees and other traits honey production (-0,63 ± 0,39), propolis production (-0,07 ± 0,50), hygienic behaviour (-0,19 ± 0,51) and syrup-collection rate. Honey production, propolis production and hygienic behavior traits have potential for genetic selection. The lower percentage of mites on adult bees increase honey production or hygienic behaviour, but it is not recommended as the only criterion for selection, due to its low heritability. Selection for syrupcollection rate will promote small genetic gain for honey production. Propolis production is positively correlated to hygienic behaviour or honey production.
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Gaps in Propolis Research: Challenges Posed to Commercialisation and the Need for an Holistic ApproachKatekhaye, S., Fearnley, H., Fearnley, J., Paradkar, Anant R 30 May 2019 (has links)
Yes / Both the season and region in which propolis is collected influence its chemical composition, resulting in variations in biological activity. Significant differences in composition and concentration of certain chemical compounds in propolis make standardisation and quality control challenging. In addition, the lack of uniformity in evaluation methodology and analytical techniques, make it extremely difficult to correlate data across the climatic zones. In this report, we focus on the gaps in propolis research and the challenges they pose for commercialisation, with suggestions as to how we might address them. We hope to stimulate further research which explores the holistic nature of propolis in order to derive a propolis bioactivity standard.
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Métodos de controle químico de amostras de própolis / Chemical control methods of propolis samplesRio, Ricardo Gomide Woisky Do 22 November 1996 (has links)
Propõe-se um conjunto de parâmetros e respectivos métodos para análise de amostras de própolis bruta e tinturas de própolis, com vistas ao seu controle químico. Para amostras de própolis bruta, propõe-se a determinação dos teores de fenóis totais, flavonóides, ácidos fenólicos, ceras, cinzas, substâncias voláteis e resíduo seco. Para a análise de tinturas, propõe-se a determinação dos quatro primeiros ítens acima, acrescidos do teor de álcool etílico e densidade. A adequação dos métodos apresentados para a determinação de fenóis totais, flavonóides e ácidos fenólicos foi avaliada através de sua aplicação a uma mistura contendo quantidades conhecidas de flavonóides e ácidos fenólicos. O percentual das diferenças entre os teores reais e os teores medidos na mistura padrão situaram-se sempre abaixo de 10,0%. O emprego do conjunto de análises propostas é exemplificado, através da determinação dos parâmetros em amostras de própolis bruta, coletadas em distintas localidades do Brasil, e em amostras de tinturas etanólicas e hidroalcoólicas de própolis. Todos os ensaios foram realizados em triplicata, o que permitiu verificar que os métodos propostos apresentam boa reprodutibilidade. As amostras de própolis analisadas apresentam teores de fenóis totais cerca de 30% inferiores à média dos resultados relatados para amostras de origem européia. Os teores de flavonóides encontrados são muito pequenos, se comparados com os valores geralmente reportados para amostras de própolis de regiões temperadas. / A number of parameters and respective methods of analysis for chemical control of samples and tinctures of propolis is presented. It is suggested the determination of the contents of total phenolics, flavonoids, phenolic acids, waxes, ashes, volatile substances and dry residue for chemical control of samples of crude propolis. For propolis tinctures, in addition to the first four parameters it is proposed the determination of the density and the content of ethyl alcohol. The validity of the proposed methods for quantification of total phenolics, flavonoids and phenolic acids was evaluated by means of analysis of a mixture containing known quantities of several flavonoids and phenolic acids. The percentages of the differences between the actual contents and the measured quantities in the standard mixture remained always below 10,0%. The utility of the proposed methods is shown by the determination of the proposed parameters in samples of crude propolis collected in distinct localities of Brasil, and also in samples of ethanolic and hydroalcoholic tinctures of propolis. Because all assays were conducted as triplicates it was possible to demonstrate that all methods present good reproducibility. The samples of crude propolis assayed showed contents of total phenolics 30% below the average of the values reported for samples of propolis from Europe. The contents of flavonoids are also relatively small when compred with the contents generally reported for samples of propolis from temperate regions.
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