Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:20Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-06-26Bitstream added on 2014-06-13T19:35:17Z : No. of bitstreams: 1 matos_rpa_me_sjrp_parcial.pdf: 383851 bytes, checksum: 3c576084c4efddd486e9b74decec3dfd (MD5) Bitstreams deleted on 2015-04-01T12:51:13Z: matos_rpa_me_sjrp_parcial.pdf,Bitstream added on 2015-04-01T12:51:47Z : No. of bitstreams: 1 000714307.pdf: 713319 bytes, checksum: f56b3217968c59297b03b085e207b381 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A Papilomatose Respiratória Recorrente (PRR) é uma doença caracterizada pela presença de tumores benignos no trato respiratório superior, sendo a laringe o sítio de lesão mais comum. Esta doença tem uma distribuição de idade bimodal, permitindo sua classificação em papilomatose juvenil ou adulta. O principal agente etiológico da PRR é o Papilomavírus Humano (HPV), um grupo de vírus de DNA, dos quais mais de 150 tipos já foram identificados. HPV-6 e HPV-11 são os tipos mais encontrados em PRR. Há poucos estudos sobre a distribuição das variantes moleculares de HPV de baixo risco. Desta maneira, o objetivo deste estudo foi avaliar a variabilidade genética do gene E6 entre isolados de HPV-6 e HPV-11 detectados em amostras de papilomatose respiratória recorrente (PRR) obtidas em uma coorte de pacientes brasileiros. A fim de comparar as sequências de nucleotídeos identificados em nosso estudo com isolados previamente reportados provenientes de outras partes do mundo, e de diferentes sítios anatômicos (papilomatose de laringe, verrugas genitais, câncer cervical e esfregaço anal), foi realizada a análise filogenética para determinar as relações filogenéticas das variantes detectadas no Brasil com as variantes isoladas em outras regiões do mundo. A região codificante completa do gene E6 de 25 amostras foi clonada e sequenciada. Em 18 isolados foi detectado o DNA do HPV-6 (72%), e em 7 isolados o DNA do HPV-11 (28%). Um total de quatro variantes genômicas diferentes de HPV-6 e duas variantes genômicas de HPV-11 foram identificadas e nenhuma variante pode ser associada com o quadro clínico do paciente. Para a reconstrução filogenética foram utilizadas as sequências de E6 detectadas neste estudo adicionalmente às sequências anteriormente publicadas originárias da Eslovênia e da África do Sul. Devido ao pequeno... / Recurrent respiratory papillomatosis (RRP) is a disease characterized by benign neoplasms and can occur anywhere within the upper respiratory tract, but the most common lesion site is the larynx. This disease has a bimodal age distribution which forms the basis of its classification as juvenile or adult. The main etiological agent of RRP is Human Papillomavirus virus (HPV), a group of DNA virus with more than 150 identified types. HPV-6 and 11 are the most common types identified in RRP. There are few studies about the distribution of natural molecular variants of low-risk HPVs. So, the aim of this study was to evaluate the E6 early gene variability among HPV-6 and HPV-11 isolates detected in recurrent respiratory papillomatosis (RRP) samples obtained in a cohort of Brazilian patients. In order to compare nucleotide sequences identified in our study with previously reported sequences isolates from different anatomic sites (laryngeal papillomas, genital warts, cervical cancer and anal swabs) obtained from other parts of the world was performed phylogenetic analysis to determine the phylogenetic relationships of variants detected in Brazil with variants isolated in others regions of world. The complete coding region of the E6 gene of 25 samples were cloned and sequenced. HPV-6 DNA was detect in 18 isolates (72%) and HPV-11 DNA in 7 isolates (28%). A total of four different HPV-6 genomic variants and two HPV-11 genomic variants were identified and any variant could not be associated with the clinical outcome. Phylogenetic trees for both HPV types were reconstructed enclosing E6 sequences detected in our study in addition to formerly published sequences from Slovenia and South Africa. The small number of samples analyzed prevents the evaluation of the association between specific molecular variants and the... (Complete abstract click electronic access below)

Objetivo: Determinar la relación que existe entre el nivel de conocimiento y las actitudes preventivas sobre la infección por Virus del Papiloma Humano en usuarias del Centro de Salud “Chancas de Andahuaylas” de Santa Anita durante el primer semestre del 2015. Diseño: estudio de tipo aplicativo, descriptivo correlacional, prospectivo, de corte transversal. Lugar: Centro de Salud “Chancas de Andahuaylas” de Santa Anita. Participantes: se trabajó con 144 usuarias que acudieron al Centro de Salud “Chancas de Andahuaylas” durante el primer semestre del año 2015. Intervenciones: Se realizó un muestreo probabilístico aleatorio simple, para medir las variables de estudio se utilizó como instrumento un cuestionario que fue recolectado mediante la técnica de la encuesta. Para el análisis descriptivo de las variables cuantitativas se estimó medidas de tendencia central y dispersión y para el análisis de variables cualitativa se estimó frecuencias absolutas y relativas. Para el análisis inferencial se utilizó el coeficiente de correlación de Spearman. Principales medidas: se describió, midió y relacionó el nivel de conocimientos y las actitudes preventivas sobre la infección por el virus del papiloma humano. Resultados: El nivel de conocimiento respecto a la infección del virus papiloma humano es: “Medio” (69.4%), “Alto” (15.3%) y “Bajo” (15.3%). Las actitudes sobre medidas preventivas para la infección por VPH es: “Buena” (88.9%) y “Regular” (11.1%). Respecto a la relación entre el nivel de conocimiento y las actitudes preventivas, se observa que el 71.9% de las usuarias que alcanzaron un conocimiento “medio” tuvieron una actitud “buena” sobre las medidas preventivas acerca del virus papiloma humano y el 50% con conocimiento “bajo” tuvieron una actitud “regular”, observándose un coeficiente de correlación de Rho de Spearman=0.320 y una significancia de 0.01 (p), evidenciándose que existe una relación directa (positiva) y significativa entre el nivel de conocimiento y las actitudes preventivas sobre la infección por VPH. Conclusión: El nivel de conocimientos se encuentra relacionado directa y significativamente con las actitudes preventivas sobre la infección por Virus del Papiloma Humano en usuarias que acuden al Centro de Salud “Chancas de Andahuaylas” de Santa Anita durante el primer semestre del 2015. / --- Objective: To determine the relationship between the level of knowledge and preventive attitudes infection Human Papillomavirus in users of the Health Center "Chancas de Andahuaylas" Santa Anita during the first half of 2015. Design: study of type applicative, descriptive correlational, prospective, cross-sectional. Place: Health Center "Chancas de Andahuaylas" Santa Anita. Participants: It is worked with 144 clients who attended the Health Center "Chancas de Andahuaylas" during the first half of the year 2015.Intervenciones: simple random probability sampling was conducted to measure the study variables, it were used as an instrument a questionnaire gathered by the survey technique. For the descriptive analysis of quantitative variables and measures of central tendency and dispersion it was estimated for analyzing qualitative variables absolute and relative frequencies were estimated. For the inferential analysis the Spearman correlation coefficient was used. Main measures: described, measured and correlated the level of knowledge and preventive attitudes infection human papillomavirus. Results: The level of awareness of users regarding human papillomavirus infection is "Medium" (69.4%), "High"(15.3%) and "Low" (15.3%). Attitudes of users on preventive measures for infection with human papilloma virus are "good" (88.9%) and "Regular" (11.1%). Regarding the relationship between the level of knowledge and preventive attitudes, it shows that 71.9% of users who reached a "middle" knowledge had a “good” attitude about preventive measures of human papillomavirus and 50% "low" knowledge had a "regular" attitude, being observed a correlation coefficient of Spearman rho = 0.320 and a significance p=0.01, demonstrating a relationship direct (positive) and significative between the level of knowledge and preventive attitudes about HPV infection. Conclusion: The level of knowledge is directly and significantly related to preventive attitudes infection Human Papillomavirus in users who come to the health center "Chancas of Andahuaylas" Santa Anita during the first half of 2015. Keywords: Human Papilloma Virus, knowledge, preventive attitudes. / Tesis

Introducción: Los carcinomas cutáneos son las neoplasias más frecuentes en los receptores de un trasplante renal (RTRs). Hasta el momento, los datos existentes sobre los factores de riesgo para el desarrollo de estos carcinomas y su posible relación con la infección por el virus del papiloma humano (VPH) en los RTRs son controvertidos.Objectivos : Investigar, prospectivamente, la incidencia acumulada de lesiones cancerosas y precancerosas así como sus factores de riesgo en un grupo RTRs con un estrecho seguimiento del área mediterránea de España. Evaluación del espectro de tipos de VPH detectados en las lesiones cutáneas de los RTRs comparándolo con los que se observen en las lesiones de los pacientes inmunocompetentes.Pacientes y métodos: Se incluyeron en el estudio 174 RTRs que fueron revisados en el momento del trasplante y cada 6 meses. Se calculó la incidencia acumulada y para analizar el papel potencial de los diferentes factores de riesgo (edad en el momento del trasplante, causa del fallo renal, duración de la diálisis previa al trasplante, tipo de régimen inmunosupresor, fototipo e historia de exposición solar ocupacional se utilizó la regresión de Cox.Resultados : Tras una media de seguimiento de 72 meses (rango 12-140), 39 pacientes (25,3%) desarrollaron 142 tumores [84 carcinomas basocelulares (CB) y 58 carcinomas escamosos (CE)]. El ratio CB/ CE fue de 1,4 : 1. La incidencia acumulada para los carcinomas cutáneos fue del 13% a los 3 años del trasplante incrementándose a un 27,5% a los 6 años y un 48% a los 10 años. Sólo la edad en el momento del trasplante y la exposición solar ocupacional demostraron ser factores de riesgo estadísticamente demostrados (P < 0,001). Hemos detectado el VPH en un 22% del total de las lesiones analizadas, el 42% de las lesiones fueron positivas y sólo se detectó VPH en 2 queratosis precancerosas y 1 un carcinoma basocelular.Conclusiones: Nuestro estudio confirma la elevada incidencia de carcinomas cutáneos de nuestro medio siendo la exposición solar ocupacional y la edad en el momento del trasplante los factores de riesgo principales para su desarrollo. Nosotros creemos que esto justifica que todos los pacientes receptores de un órgano trasplantado sean incluidos en un programa educacional sobre la prevención de los factores de riesgo y al mismo tiempo se realice un seguimiento por dermatólogos para facilitar el diagnóstico y tratamiento precoz. Creemos que a baja sensibilidad demostrada por la técnica que hemos utilizado para la detección del virus del papiloma humano no nos permite obtener conclusiones a este respecto. / Background Skin cancer is the most common malignancy occurring in kidney transplant recipients (KTRs). Available data concerning the detection of human papillomavirus in cutaneous lesions of KTRs are conflicting.Objectives: Our purpose was to investigate, prospectively, the cumulative incidence of cancerous and precancerous skin lesions as well as their risk factors in a close follow-up population of KTRs from a Mediterranean area of Spain. Evaluate the spectrum of HPV-types in cutaneous lesions from KTRs comparing it with those observed in immunocompetent patient.Patients and methods: One hundred and seventy-four consecutive KTRs were examined at the moment of transplant and then at 6-month intervals. The cumulative incidence of skin cancer was computed. To analyse the role of potential risk factors (age at transplantation, cause of renal failure, duration of pretransplant dialysis, type of immunosuppressive regimen, sun-reactive skin type and history of occupational sun exposure), the Cox regression method was used. HPV was studied, using consensus primers of L1, in 184 skin biopsy specimens corresponding to 64 KTRs and 43 immunocompetent.Results: After a median follow-up of 72 months (range, 12-140), 39 patients (25,3%) developed 142 tumours [84 basal cell carcinoma (BCC) and 58 squamous cell carcinoma (SCC)]. The BCC/SCC ratio was 1,4 : 1. The cumulative incidence for skin cancer was 13% after 3 years of graft survival, increasing to 27·5% at 6 years and 48% at 10 years. Only age at the time of transplantation and occupational sun exposure had statistical significance as risk factors (P < 0,001). We found HPV in 22% of total of cutaneous lesions tested, 42% of warts were positives and only in 2 precancerous keratoses and 1 basal cell carcinomas HPV was detected. Conclusions: Our study confirms the high incidence of non-melanoma skin cancer among KTRs in a Mediterranean population with occupational sun exposure and the patient's age at the time of transplantation being the main risk factors. We believe that all organ transplant programs should provide educational information about protecting oneself from the sun as well as include follow-up visits by dermatologists in order to facilitate early diagnosis and treatment of skin cancer.In relation to the HPV, we believe that the low sensitivity of the method used do not allow us to dispute the role of HPV in skin cancer of KTRs.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-08-26Bitstream added on 2014-06-13T20:53:57Z : No. of bitstreams: 1 rosa_lar_me_botib.pdf: 11902043 bytes, checksum: 7d277e227cad445bcadea5a4d8bee914 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Os relatos em literatura que relacionam preditores biológicos de resposta à radioterapia e ou quimioterapia em carcinomas de orofaringe (CEO) são limitados e a maioria se baseia em grupos de tumores de diferentes sítios anatômicos. Os objetivos deste estudo foram investigar marcadores biológicos que poderiam atuar como potenciais preditores de resposta à quimioterapia de indução seguido de radioterapia, e associá-los com o padrão de infecção pelo HPV e dados clínico-patológicos. Trinta e sete casos de CEO foram avaliados quanto à infecção pelo HPV, 32 casos para alterações no número de cópias (CNAs) por CGH-array e 22 casos tiveram seu perfil de expressão gênica avaliado em relação ao tecido normal e adjacente da orofaringe. O subtipo HPV16 foi o mais prevalente entre eles (8/37), seguido do HPV18 (2/37) e HPV26 (2/37) e HPV16/18 (1/37). As análises de CGH-array foram realizadas na plataforma 4x180k (Agilent). A análise dos dados foi realizada usando o programa Nexus Copy Number v5.0 (Biodiscovery) e seguido de comparação com o Database of Genomic Variants. Foram identificadas 3222 alterações no número de cópias genômicas (CNAs) com prevalência de perdas heterozigotas (46,6%), seguida de ganhos (40,7%), alto nível de ganhos (7,9%) e perdas homozigotas (4,8%). As alterações mais frequentes envolveram ganhos em 3q, 5p, 8q, 9q e 11q e perdas em 3p, 5q, 8p, 9p e 18q. Os casos HPV negativos (20) apresentaram um maior número de CNAs (média 117 CNAs/caso) comparadas aos pacientes HPV positivos (12), os quais apresentaram um perfil genômico menos complexo (média 73 CNAs/caso). Foram identificadas regiões genômicas capazes de diferenciar os tumores HPV positivos e negativos (P<0,05), entre elas as perdas em 7q22.1 e 14q12 presentes exclusivamente nos tumores HPV... / There are few reports relating biological predictors of response to radiotherapy and or chemotherapy in oropharyngeal squamous cell carcinomas (OSCC), and most of them are based on different head and neck anatomical sites. The aims of this study were to investigate biological markers that could act as potential predictors of response to chemotherapy of induction followed by radiotherapy, and its association with HPV infection and clinicopathological data. Thirty-seven OSCC were evaluated for HPV genotyping, 32 cases for copy number alterations (CNAs) by array CGH and 22 cases were investigated by large scale transcription analysis. The subtype HPV16 was the most prevalent among them (8/37), followed by HPV18 (2/37) and HPV26 (2/37), and HPV16/18 (1/37). The array CGH analysis were performed using the 4x180k platform (Agilent). Data analysis were done by Nexus Copy Number v5.0 (Biodiscovery) software and compared with Database of Genomic Variants. A total of 3222 copy number alterations (CNAs) were identified with a prevalence of heterozygous loss (46.6%), followed by gains (40.7%), high level of gains (7.9%) and homozygous loss (4.8%). The most frequent gains involved 3q, 5p, 8q, 9q and 11q and losses on 3p, 5q, 8p, 9p and 18q. The HPV-negative cases (20) showed a higher number of CNAs (average 117 CNAs/case) compared to HPV-positive cases (12), which showed a less complex genomic profile (in average 73 CNAs/case). Genomic regions were able to differentiate between HPV positive and negative cases (P<0.05), including losses on 7q22.1 and 14q12, which were detected exclusively in HPVpositive tumors (P=0.044). A comparative analysis between the cases treated with carboplatin associated with RT (22 cases) was done aiming to identify chromosomal regions that could... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-11-28Bitstream added on 2014-06-13T18:42:58Z : No. of bitstreams: 1 demathe_a_dr_araca.pdf: 333527 bytes, checksum: 481be7a0ed0bfcb0e04dcdc9c8824129 (MD5) / O papilomavirus humano (HPV) tem sido relacionado com a etiologia dos carcinomas epidermóides de cabeça e pescoço, em análise de tecidos cerca de 60% destes carcinomas podem ser HPV positivos. O objetivo deste trabalho foi analisar a presença do HPV em material genético obtidos de tecidos, secreção salivar e sangue de pacientes portadores de carcinoma epidermóide (CEC) de orofaringe e controles e a correlação da presença viral com as váriáveis sexo, idade, tabagismo, etilismo e perfil anatomopatologico do tumor. Foi realizada uma análise do material genético de 46 pacientes com diagnóstico de CEC de orofaringe e 40 pacientes sem carcinoma. A extração do DNA dos espécimes foi realizada utilizando o kit de extração de DNA QuiAMP. O DNA isolado foi submetido a PCR para beta-globina para confirmar a presença e integridade do DNA, em seguida, foram realizadas novas reações para detecção do DNA do HPV. Para análise estatística foram empregados o teste Qui-quadrado e teste exato de Fisher. A idade média de idade foi de 60 anos para os casos e 58,2 anos para os controles e a mediana foi de 59 e 56 anos, respectivamente. Os resultados obtidos com a metodologia descrita permitiram concluir que não houve diferenças estatisticamente significativas na análise das variáveis em relação à presença do papilomavírus humano nas amostras de tecidos biológicos dos pacientes estudados / Human papillomavirus (HPV) it has been related with head and neck SCC etiology, about 60% of these carcinomas tissues can be HPV positive. The aim of this study was to analyze the HPV presence in genetic material obtained from tissues, salivary secretion and blood of oropharyngeal SCC patients and controls and correlate the virus presence with variables: sex, age, smoking, alcoholism and pathological profile of the tumours.It was made molecular and statistical analysis of genetic material of 46 oral and oropharyngeal SCC patients and 40 controls patients without carcinoma. The DNA extraction of all specimens was accomplished using the DNA extraction kit QuiAMP. The isolated DNA was submitted PCR for beta-globin to confirm the DNA presence and integrity, after new reactions it was accomplished for HPV DNA detection. Chi-square test and Fisher exact test were used for statistical analysis. The average age was 60 years for cases and 58.2 years for controls and the median age was 59 and 56 years respectively. The results obtained with the described methodology shows there was no statistically significant differences between HPV presence in samples of biological tissues and the analyzed variables

Made available in DSpace on 2015-07-13T12:10:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-10. Added 1 bitstream(s) on 2015-07-13T12:25:45Z : No. of bitstreams: 1 000838217.pdf: 2068210 bytes, checksum: 7cc196b4afd9c4a009cb398bc82c6339 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O câncer de colo uterino (ou câncer cervical) é uma neoplasia maligna que tem a infecção pelo HPV como o principal fator de risco para o seu surgimento. As terapias atuais para o tratamento do câncer cervical têm como maior desvantagem a excisão substancial do estroma cervical e muitos efeitos adversos associados aos quimioterápicos, principalmente a cisplatina. Nesse cenário, a terapia fotodinâmica (TFD) vem se mostrando uma alternativa promissora, especialmente se combinada a tratamentos convencionais. A técnica é baseada na administração de um agente fotossensibilizador não tóxico ao paciente com posterior exposição a uma fonte de luz de comprimento de onda específico, resultando em resposta citotóxica via dano oxidativo. Diante disso, o presente estudo teve como objetivo avaliar, in vitro, a citotoxicidade, o tipo de morte induzido e os efeitos genotóxicos e mutagênicos da TFD em monoterapia e associada à cisplatina sobre as linhagens SiHa, C-33 A e HaCaT, utilizando os fotossensibilizadores Photogem e azul de metileno. Observou-se que tanto a terapia fotodinâmica mediada por azul de metileno (AMTFD) quanto a terapia mediada pelo Photogem (PGTFD) foram eficazes em reduzir o número de células viáveis, com a citotoxicidade sendo dependente da dose de luz. A cisplatina teve menor eficácia sobre as três linhagens quando comparada à TFD. Porém, a combinação cisplatina + TFD apresentou efeito sinérgico intenso e provocou maior morte celular em todas as condições testadas. A sequência de aplicação dos tratamentos (cisplatina + TFD ou TFD + cisplatina) demonstrou-se importante e dependente do fotossensibilizador. Com relação ao tipo de morte celular provocado, tanto a AMTFD quanto a PGTFD induziram morte independente de caspases, mas a AMTFD induziu morfologia típica de necrose, enquanto a PGTFD induziu morfologia mais similar à apoptose. A cisplatina induziu predominantemente apoptose e as terapias... / Cervical cancer is a malignant tumor that has HPV infection as the main risk factor for its emergence. Current therapies for the treatment of cervical cancer have as major disadvantage substantial excision of cervical stroma and many adverse effects associated with chemotherapy, especially cisplatin. In this scenario, photodynamic therapy (PDT) has proven to be a promising alternative, specially if combined with conventional treatments. The technique is based on the administration of a non-toxic photosensitizing agent to the patient with subsequent exposure to a light source of a specific wavelength, resulting in cytotoxic response by oxidative damage. Thus, the present study intended to evaluate in vitro cytotoxicity, the type of induced death and the genotoxic and mutagenic effects of PDT alone and associated with cisplatin on the cell lines SiHa, C-33 A and HaCaT, using the photosensitizers Photogem and methylene blue. It was observed that both the photodynamic therapy mediated by methylene blue (MBPDT) and Photogem mediated therapy (PGPDT) were effective in reducing cell viability with cytotoxicity being dependent on the light dose. Cisplatin was less effective over the three lines compared to PDT. However, the combination cisplatin + PDT had a greater synergistic effect and caused greater cell death in all conditions tested. The sequence of treatment application (PDT + cisplatin or cisplatin + PDT) was important and depended on the photosensitizer. Regarding the type of induced cell death, both AMPDT and PGPDT induced caspase-independent death, but AMPDT induced the typical morphology of necrosis, while PGPDT induced morphology was most similar to apoptosis. Cisplatin predominantly induced apoptosis; and combination therapy induced greater apoptosis- or necrosis-like rate according to the cell line, but always with a higher percentage of dead cells than monotherapies. MBPDT, either as monotherapy or in combination with cisplatin was ... / FAPESP: 12/25414-5

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:56Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-15Bitstream added on 2014-06-13T19:56:59Z : No. of bitstreams: 1 000748693.pdf: 2194323 bytes, checksum: 02886527a75b634177bba3e9ae53c91b (MD5) / A incidência do adenocarcinoma do colo do útero (AC) está aumentando em muitos países. A associação entre a infecção pelo Papillomavirus Humano (HPV) e o AC ainda permanece incerta. A imunoistoquímica pode auxiliar no diagnóstico nos casos duvidosos, pois algumas condições benignas reativas podem mimetizar processos neoplásicos. Marcadores como bcl-2, Ki-67 e proteína p16INK4A (p16) já foram descritos para ajudar nas dúvidas relacionadas ao epitélio glandular cervical. Trabalhos recentes demonstraram a importância da adição da marcação da proteína Ciclina D1 ao painel imunoistoquímico. A Ciclina D1 é uma proteína sensor chave e integrador dos sinais extracelulares nas células em início até meados da fase G1 do ciclo celular, sendo importante na regulação da proliferação e diferenciação celular. Foram estudados 74 casos de biópsias com diagnóstico de adenocarcinoma de colo do útero, sendo 24 de adenocarcinoma cervical in situ e 50 de adenocarcinoma cervical invasor. No grupo controle, foram incluídas 79 biópsias de colo do útero que continham endocérvice normal ou em condições benignas reativas. A pesquisa de HPV nas biópsias foi realizada pela técnica da reação em cadeia da polimerase (PCR) utilizando os primers específicos (MY09/11 e GP5+/GP6+) e a genotipagem foi realizada empregando-se a técnica de PCR Multiplex utilizando primers específicos para os genótipos 6, 16, 18 e 33. A imunoistoquímica foi realizada nos 74 casos com diagnóstico de adenocarcinoma cervical (tipo in situ e invasor) para os marcadores Ciclina D1, proteína p16, Ki-67 e bcl-2 e em 79 casos controle para a Ciclina D1. O DNAHPV foi observado em 100% dos casos de adenocarcinoma cervical. O genótipo mais frequente foi o HPV18. A Ciclina D1 se apresentou negativa nos casos da doença e positiva nos casos benignos e reativos. O painel imunoistoquímico associando Ciclina D1, p16 e Ki-67 pode ser ferramenta útil na... / The incidence of cervical adenocarcinoma (AC) is increasing in many countries. The association between Human Papillomavirus (HPV) infection and the AC remains uncertain. Immunohistochemistry may help in the diagnosis in doubtful cases, because some benign reactive conditions can mimic neoplastic processes. Markers such as bcl-2, Ki-67 and protein p16INK4A (p16) have been described to assist with questions related to cervical glandular epithelium. Recent studies have shown the importance of adding protein labeling Cyclin D1 into immunohistochemical panel. The Cyclin D1 protein is a key sensor and integrator of extracellular signals into cells in early to mid G1 phase of the cell cycle, which is important in the regulation of cell proliferation and differentiation. We studied 74 patients with biopsy diagnosis of adenocarcinoma of the cervix, 24 of cervical adenocarcinoma in situ and 50 invasive cervical adenocarcinoma, The control group included 79 cervical biopsies containing endocervix normal or benign reactive conditions. The research of HPV in biopsies was performed by the polymerase chain reaction (PCR) using specific primers (MY9/11 and GP5 + / GP6 +) and genotyping was carried out using the Multiplex PCR using primers specific for genotypes 6, 16, 18 and 33. Immunohistochemistry was performed in 74 cases diagnosed with cervical adenocarcinoma (type in situ and invasive) for markers Cyclin D1, p16, Ki-67 and bcl-2, and 79 cases control for Cyclin D1. The HPV DNA was observed in 100% of cases of cervical adenocarcinoma. The most common genotype was HPV18. The Cyclin D1 was found negative in cases of illness and positive in benign and reactive samples. The immunohistochemical panel associating Cyclin D1, p16 and Ki-67 may be useful tool in the characterization and diagnosis of cervical adenocarcinoma

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-11-25Bitstream added on 2014-06-13T19:50:52Z : No. of bitstreams: 1 bozeto_jms_me_arafcf.pdf: 1574959 bytes, checksum: a5cd125f8746a8789bce9eca1cc045e6 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Atualmente, o câncer cervical é considerado a segunda causa mais comum entre as mulheres e encontra-se associado ao Papilomavírus Humano (HPV), que infecta células epiteliais escamosas, dando origem a grandes lesões. A nitensidina A é um alcalóide guanidínico isolado de Pterogyne nitens Tul. (Fabaceae), que possui atividade anti-inflamatória e anti-oxidante, além de um amplo aspecto de atividades biológicas que está sendo estudado. Foi testada nas concentrações de 20,0 a 0,25 µg/mL (diluição seriada 1:3) e nos tempos de 24 h e 48 h nas linhagens imortalizadas com HPV-16 (SiHa) e não imortalizadas (C33A). Para avaliar a citotoxicidade da nitensidina A o teste MTT foi realizado sendo possível observar um efeito concentração-resposta em duas linhagens testadas (SiHa e C33A, CI50 = 10,31 µg/mL e 11,91 µg/mL, respectivamente) por 24 h. Com o intuito de avaliar o potencial efeito indutor de apoptose, foi realizado o ensaio de anexina V por citometria de fluxo. Em ambas as linhagens e tempos de tratamento notaram-se uma morte mais relevante por apoptose precoce, sendo que há diferença apenas na maior concentração (20,0 g/mL) na linhagem SiHa, que também induz morte por apoptose tardia/necrose. Para completar esse ensaio foi realizado o teste do Hoechst-iodeto de Propídeo, diferenciando assim apoptose precoce, tardia e necrose. Na linhagem SiHa tratada por 24 h nas menores concentrações houve morte celular por apoptose precoce, e na maior concentração por apoptose tardia (81,4±1,4 %). Por 48 h, em todas as concentrações a morte celular foi por apoptose tardia. Na linhagem C33A em 24 h não foi observado morte celular significativa. Em 48 h, a maior concentração induziu apoptose tardia (57,7±20,6 %). O modelo de estudo de implante tumoral xenográfico de células SiHa... / Currently, cervical cancer has been considered the second most common among women and is associated with human papillomavirus (HPV) which infects squamous epithelial cells, resulting in major injuries. Nitensidine A is a guanidine alkaloid isolated from Pterogyne nitens Tul. (Fabaceae), which has anti-inflammatory and antioxidant, as well as a broad spectrum of biological activities being studied. It was tested at concentrations from 20.0 to 0.25 mg/mL (serial dilution 1:3) and for 24 h and 48 h in immortalized with HPV-16 (SiHa) and non-immortalized (C33A) cell lines. To evaluate the cytotoxicity of nitensidine A MTT test was performed and it was possible to observe a concentration-response effect in two tested lines (SiHa and C33A, IC50 = 10.31 mg/mL and 11.91 mg/mL, respectively) for 24 h. In order to assess the potential effect of inducing apoptosis, we performed the annexin V assay by flow cytometry. In both strains and treatment times were noted a death most significant by early apoptosis, and a difference only at highest concentration (20.0 mg/mL) in SiHa, which also induces death by late apoptosis / necrosis. To complete this test, it was performed the Hoechst-propidium iodide assay, thereby differentiating early, late apoptosis and necrosis. In SiHa treated for 24 h at lower concentrations there was cell death by early apoptosis, and late apoptosis at highest concentration (81.4 ± 1.4%). For 48 h at all concentrations cell death was by late apoptosis. In C33A at 24 h was not observed significant cell death. At 48 h, the highest concentration induced late apoptosis (57.7 ± 20.6 %). The study model of xenographic tumor implant of SiHa cells in nude mice BALB/c treated with nitensidine... (Complete abstract click electronic access below)

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Ciências Médicas, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2013-10-22T12:24:32Z No. of bitstreams: 1 2013_LiviaBravoMaia.pdf: 3004337 bytes, checksum: 90f9a4183246f2afa79632bb98b45c41 (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2013-10-22T12:34:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_LiviaBravoMaia.pdf: 3004337 bytes, checksum: 90f9a4183246f2afa79632bb98b45c41 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-22T12:34:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_LiviaBravoMaia.pdf: 3004337 bytes, checksum: 90f9a4183246f2afa79632bb98b45c41 (MD5) / INTRODUÇÃO: O carcinoma escamoso anal tem um papel importante na morbi-mortalidade em pacientes infectados pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV). Similarmente ao câncer cervical, as neoplasias intraepiteliais anais tem forte associação com a infecção pelo papillomavírus humano (HPV), além de ser passível de ser rastreado pelos métodos citológicos. A citolologia esfoliativa convencional (CC) é de fácil execução, não agressiva e de baixo custo operacional. A citologia em base líquida (CBL) é uma técnica citológica que vem sendo utilizada por oferecer leituras mais purificadas, embora seja mais dispendiosa. São poucos os estudos que comprovem a eficácia do rastreamento do câncer anal, porém, tal prática vem sendo discutida e incentivada nos grupos considerados de risco ao desenvolvimento das neoplasias intraepiteliais anais. OBJETIVO: Avaliar a concordância das citologias esfoliativas convencional e meio líquido no rastreamento nas lesões precursoras do câncer do canal anal e comparar os achados dos padrões anuscópicos, histopatológicos e de genotipagem associados aos métodos de citologia. MÉTODOS: Estudo comparativo em pacientes de ambos os sexos, maiores de 18 anos e infectados pelo HIV. Todos os pacientes foram submetidos a exame clínico com toque retal, seguido da anuscopia de alta resolução e biopsia das lesões suspeitas. Foram obedecidos os critérios de Bethesda para classificação das lesões citológicas. Foram calculados os índices de concordância entre os métodos citológicos e sua correlação com os achados dos demais exames de rastreamento. RESULTADOS: Nas CC as amostras demonstraram os seguintes diagnósticos: 54,5% negativos, 12,1% ASC-US, 18,1% LSIL e 15,1% HSIL. Pelo método CBL as amostras demostraram os seguintes diagnósticos: 54,5% de negativos, 9,0% de ASC-US, 3,0% de ASC-H, 30,0% de LSIL, 3,0% de HSIL. A concordância diagnóstica entre os dois métodos utilizados apresentou significância estatística (p < 0,05) com teste Kappa de 0,8778 (quase perfeita) e intervalo de confiança de 95% (0,7136 a 1,000). Do total de 33 casos, 28 foram concordantes. Dos 18 casos de CC e CBL negativos, em 15 (15/18) a anuscopia foi igualmente negativa. Assim, observa-se que capacidade do teste CC identificar corretamente aqueles pacientes com biópsia positiva foi de 75,0%, com intervalo de confiança de 95% variando de 34,9% a 96,8% e, para CBL, 85,7%, com intervalo 95% de confiança variando de 34,9% a 96,8%. Quanto à genotipagem, os diagnósticos de LSIL na CC e CBL foram os que apresentaram maior positividade para os diversos subtipos do HPV. Os mais comuns do subtipo de alto risco na CC foram o 16 e o 68 e, na CBL, o 16, 18 e 68 e os de baixo risco mais comuns foram os subtipos 44/55 para ambos os métodos. Foi observada significância estatística quando associado múltiplas infecções para HPV com os achados histopatológicos. CONCLUSÃO: Concluímos que a citologia esfoliativa convencional e a em base líquida demonstraram ser igualmente eficazes, podendo ser utilizadas no auxílio do rastreamento das lesões precursoras do câncer anal. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / INTRODUCTION: The anal squamous carcinoma plays an important role in morbidity and mortality of HIV-positive patients. Similar to cervical cancer, anal intraepithelial neoplasia is strongly associated with HPV infection and can be diagnosed by cytological methods as well. The conventional cytology (CC) is easy to perform, non-aggressive and a low cost test. The liquid-based cytology (LBC) is a technique that has been used for offering more clear samples results, although it is more expensive. There are few studies that prove the effectiveness of screening for anal cancer, however, this practice has been discussed and encouraged in groups considered at risk for anal cancer. OBJECTIVE: To evaluate the agreement of conventional and liquid-based cytology in the screening of anal squamous intraepithelial lesions and compare the anuscopic results, histopathological and genotyping with both methods of cytology. METHODS: Comparative study of patients, more than 18 years old, infected by HIV. All patients were underwent clinical examination with digital rectal examination, followed by high-resolution anuscopy and biopsy of suspicious lesions. We used Bethesda criteria for classification of cytological lesions. The concordance between cytological methods was calculated and analyzed their relation with the findings of other screening tests. RESULTS: The CC samples had the following diagnoses: 54.5% negative, 12.1% of ASC-US, 18.1% of LSIL and 15.1% of HSIL. The LBC samples had the following diagnoses: 54.5% negative, 9.0% of ASC-US, 3.0% of ASC-H, 30.0% of LSIL, 3.0% HSIL. The diagnostic agreement between the two methods was statistically significant (p <0.05) with Kappa test 0.8778 (almost perfect) and confidence interval of 95% (0.7136 to 1.000). Of total 33 cases, 28 were concordant. Of Eighteen negative cases of LBC and CC, in 15 (15/18) the anoscopy was equally negative. Thus, we observe that CC can correctly identify those patients with positive biopsy in 75.0%, with a confidence interval of 95% ranging from 34.9% to 96.8%, and LBC, 85.7 %, with 95% confidence interval ranging from 34.9% to 96.8%. In the molecular biology, the LSIL diagnostic in the CC and LBC had higher positivity for the various subtypes of HPV. The most common high-risk subtype in the CC were 16 and 68, and in the LBC, 16, 18 and 68 and the most common low-risk subtypes were 44/55 for both methods. Statistical significance was observed when combined with multiple HPV infections with histopathologic findings. CONCLUSION: We conclude that conventional and liquid-based cytology shown to be equally effective and can be used both as screening for preneoplastic anal lesions.

The textbook can be an important tool for the student body of the learning process. It can also allow the understanding of the events associated with the teaching of sexually transmitted diseases in the school context, and the relationships established between the different actors involved in this process. From this premise, this study aims to evaluate the theme of the infection caused by the human papilloma virus (HPV) in the three most widely distributed collections of High School Biology suggested by the National Textbook Program (PNLD) 2015, and to propose as a final product a digital teaching manual in the form of web site to aid the teacher in his work studies on this theme. The comments made about the works followed the criteria suggested by the 2015 PNLD and if information was consistent with those published by the World Health Organization and Ministry of Health in its publications. In the works analyzed, it was observed that comments about the STD infections and are more elaborate than those that deal or genital HPV infection by such a virus known as condyloma acuminata. Of the three collections studied here presented an information more completely, although this information cannot be considered satisfactory on HPV. The main result, it was found that there is a chance of access to information relating to sexually transmitted diseases and that young people can be lax or careless as methods of preventing such diseases among adolescents in high school stage. Thus, it was concluded that the veracity and relevance of information provided in these high school books today is not enough to allow students to know about the mechanisms of transmission and prevention of HPV and infections caused by this virus. As a palliative to get around this, it is proposed in this paper an online digital manual in the form of web site as a reliable source of information that complements existing or missing information about HPV in textbooks of high school biology, enabling broad access to this worthy topic. / O livro didÃtico pode ser uma importante ferramenta para o processo de aprendizagem do alunado. Ele pode tambÃm permitir a compreensÃo dos eventos associados ao ensino das doenÃas sexualmente transmissÃveis no contexto escolar, assim como as relaÃÃes que se estabelecem entre os diferentes atores envolvidos neste processo. Partindo dessa premissa, este estudo tem como objetivo avaliar a temÃtica sobre a infecÃÃo causada pelo papiloma vÃrus humano (HPV) nas trÃs coleÃÃes mais bem distribuÃdas de Biologia do Ensino MÃdio sugeridos pelo Programa Nacional do Livro DidÃtico (PNLD) de 2015, alÃm de propor como produto final um manual didÃtico digital na forma de web site para auxÃlio ao professor em seu trabalho de estudos sobre tal tema. As observaÃÃes feitas acerca das obras seguiu os critÃrios sugeridos pelo PNLD de 2015, bem como se havia informaÃÃes condizentes com aquelas divulgadas pelo OrganizaÃÃo Mundial de SaÃde e MinistÃrio da SaÃde em suas publicaÃÃes. Nas obras analisadas, observou-se que comentÃrios feitos acerca das DST e infecÃÃes sÃo bem mais elaborados do que aqueles que tratam sobre o HPV ou a infecÃÃo genital causada por tal vÃrus conhecida com condiloma acuminado. Das trÃs coleÃÃes aqui estudadas, apenas uma apresentou informaÃÃes de forma mais completa, embora estas informaÃÃes ainda nÃo possam ser consideradas satisfatÃrias sobre o HPV. Como principal resultado, verificou-se que hà uma hipÃtese sobre acesso Ãs informaÃÃes referentes Ãs DoenÃas Sexualmente TransmissÃveis e que os jovens podem ser relapsos ou displicentes quanto aos mÃtodos de prevenÃÃo contra tais doenÃas entre adolescentes em fase de ensino mÃdio. Com isso, concluiu-se que a veracidade e relevÃncia de informaÃÃes presentes nestes livros de ensino mÃdio na atualidade nÃo à suficiente para permitir aos alunos conhecerem sobre os mecanismos de transmissÃo e prevenÃÃo contra o HPV e as infecÃÃes causadas por este vÃrus. Como paliativo para contornar esta situaÃÃo, propÃe-se neste trabalho um manual digital online na forma de web site como fonte segura de informaÃÃes que complemente as informaÃÃes existentes ou ausentes sobre o HPV nos livros didÃticos de biologia do ensino mÃdio, permitindo o amplo acesso a este valoroso tema.