La ventilation naturelle est une solution passive de rafraichissement des bâtiments dont la performance est souvent limitée par des contraintes acoustiques et visuelles. Les travaux de cette thèse visent à améliorer la conception des ouvertures vitrées pour intégrer ces multiples contraintes. Des modèles thermo-aéraulique, acoustique et d'éclairement sont intégrés dans une plate-forme de simulation énergétique du bâtiment afin d'évaluer la performance de la ventilation naturelle dans des bâtiments tertiaires et résidentiels en termes de confort global et de consommation énergétique. La thèse contribue en particulier au développement et à la validation de modèles thermo-aérauliques à partir d'essais expérimentaux et de la simulation numérique. Une nouvelle technique de mesure du taux de renouvellement d'air par gaz traceur est développée en conditions de laboratoire puis appliquée dans une campagne d'essais in-situ pour caractériser l'écoulement d'air en ventilation traversante et mono-façade. Des simulations numériques ont été menées pour analyser les écarts observés entre les mesures et les corrélations. A l'aide de la CFD, des géométries d'ouverture spécifiques au cas d'étude (présence de loggia, tailles différentes de fenêtres) sous différentes conditions de vent permettent d'identifier les plages d'application des corrélations. Enfin, des simulations énergétiques du bâtiment intégrant les modèles développés et comparant différents modes de gestion sont effectuées en bâtiment de bureaux et résidentiel. On observe une réduction importante du potentiel de rafraichissement dans un environnement bruyant. Des prototypes de volets acoustiques sont conçus pour assurer un compromis entre confort thermique et acoustique. Des indicateurs applicables à la conception des ouvertures vitrées en fonction de paramètres climatiques sont également proposés. / Natural ventilation is a passive solution to refresh and cool down the buildings whose performance is often limited by acoustic and visual constraints. This thesis aims to improve the design of glazed windows to integrate these multiple constraints. Thermo-aeraulic, acoustic and lighting models are integrated in a platform of building energy simulation to evaluate the performance of natural ventilation in office and residential buildings according to global comfort and energy consumption. The thesis contributes in particular to the development and the validation of thermo-aeraulic models from experiments and numeric simulations. A new technique of air change rate measurement by tracer gas is developed in laboratory conditions and then applied in an in-situ experimental campaign to characterize the airflow in cross and single-sided ventilation. The numeric simulations are conducted to analyze the deviation observed between the measures and correlations. With the help of CFD tool, the specific opening geometries of this case study (loggia, different window sizes) under different wind conditions allow to identify the application range of the correlations.Finally, building energy simulation integrating the developed models comparing different control modes are carried out for two case studies: office and residential buildings. Significant reductions of cooling potential are observed in a noisy environment. To provide a response to the constraints of external noise, prototypes of acoustic shutters are designed to ensure a good compromise between thermal and acoustic comfort. Indicators applicable to the design of glazed openings based on climatic parameters are also proposed.

Les microARNs sont de petits ARN non codants régulant négativement l'expression génique au niveau post-transcriptionnel. Ils interviennent dans de nombreux processus biologiques et leur rôle dans la régulation de l'homéostasie cutanée est clairement démontrée. Cependant, leur fonction durant le vieillissement épidermique n'a jamais été étudiée. Nous avons donc réalisé une analyse exhaustive du miRnome épidermique durant son vieillissement afin d'identifier les microARNs différentiellement exprimés avec l'âge dans ce tissu. Plusieurs microARNs significativement modulés dans des kératinocytes âgés, nous ont permis d'établir une signature du vieillissement épidermique. Parmi eux, les deux brins du microARN miR-30a sont induits dans les épidermes âgés. La construction d'un lentivirus permettant la surexpression stable et inductible de ce microARN a facilité son étude fonctionnelle dans un modèle organotypique d'épiderme reconstruit. Nous avons observé que la surexpression de ce microARN dans un modèle de culture tridimensionnelle induit un phénotype épidermique présentant des similitudes avec celui observé durant son vieillissement chronologique et caractérisé par une forte altération de la différenciation des kératinocytes, par une perturbation de sa fonction barrière et par une augmentation de l'abondance des cellules apoptotiques. Ce projet de thèse a permis l'identification de 3 cibles directes de miR-30a dans les kératinocytes. Il s'agit de LOX, codant pour la lysyl oxydase qui intervient dans la balance prolifération/différenciation des kératinocytes, d'AVEN, un inhibiteur de caspase et d'IDH1, codant pour l'isocitrate déshydrogénase, enzyme du métabolisme énergétique. Ainsi, ce projet de thèse a révélé un nouveau microARN acteur du vieillissement épidermique et a permis de de mettre à jour de nouveaux mécanismes moléculaires expliquant certaines altérations phénotypiques observées dans l'épiderme avec l'âge / MicroRNAs are small non-coding RNA that negatively regulate gene expression at the post-transcriptional level. There are involved in many biological processes and play a key role in the regulation of skin homeostasis. However, their function during epidermal aging has never been studied. We performed an exhaustive analysis of the epidermal miRnome during its aging in order to identify microRNAs differentially expressed with age in this tissue. Several microRNAs significantly modulated in elderly keratinocytes, allowed us to establish a signature of epidermal aging. Among them, the two strands of the microRNA miR-30a are induced in aged epidermis. The construction of a lentivirus allowing inducible and stable overexpression of this microRNA facilitated its functional study in an organotypic model of reconstructed epidermis. We observed that the overexpression of this microRNA in a three-dimensional culture model induces an epidermal phenotype similar of those observed during its chronological aging characterized by a strong alteration of keratinocyte differentiation, by a disturbance of its barrier function and by an increase in the abundance of apoptotic cells. This thesis project allowed the identification of three miR-30a targets in keratinocytes : LOX encoding lysyl oxidase, which plays a role in proliferation/differentiation balance of keratinocytes, AVEN encoding a caspase inhibitor and IDH1 encoding isocitrate deshydrogenase, a key enzyme of cellular metabolism.Our work revealed a new miRNA actor and deciphered new molecular mechanisms to explain some alterations observed in epidermis during aging, especially those concerning keratinocytes differentiation and apoptotic death

La détection de la température externe par la peau est le point de départ de nombreuses adaptations cellulaires et comportementales permettant de maintenir notre température interne constante. Selon ce concept, les fibres sensorielles cutanées sont les seuls récepteurs sensoriels de la peau pour la détection de la température. Plusieurs canaux ioniques activés directement par des températures chaudes ou froides ont été identifiés, ce sont les canaux TRPs. Le froid peut-il modifier le fonctionnement des organes du toucher?Nous montrons chez l’homme et la souris que les cellules de Merkel (CMs), qui sont les cellules tactiles des complexes de Merkel, peuvent être activées par le froid. Chez les souris dépourvues du canal TRPM8 (KO M8) la réponse au froid des CMs diminue. Le BCTC et le M8B, 2 bloqueurs du canal TRPM8, diminuent également la réponse au froid des CMs. Pour déterminer l’impact de cette sensibilité au froid sur la performance tactile, nous avons enregistré les variations de l’activité nerveuse des récepteurs de Merkel chez les souris WT et KO M8. Un froid modéré (20°C) appliqué sur la peau diminue le train de potentiels d’action issu d’un récepteur de Merkel stimulé mécaniquement. A 20°C ni le seuil de déclenchement des potentiels d’action, ni le train de potentiels d’action en réponse à une stimulation électrique ne sont modifiés. En revanche chez les souris KO M8 cette réponse mécanique tactile n’est plus diminuée. Ce résultat montre pour la première fois qu’une cellule non nerveuse de la peau, la cellule de Merkel, contient un récepteur au froid, le canal TRPM8, qui ajuste l’activité des récepteurs de Merkel lors d’une stimulation tactile. / In the skin, Merkel cells (Mcs) are connected to keratinocytes and A sensory nerve fibers and the complexes works as a slow adaptive mechanoreceptor (SA1 receptor). We observe that cooling human and mouse Merkel cells to 15°C increases intracellular Ca2+ ions concentration. The TRPM8 agonist’s provoke intracellular Ca2+ increases. The responses to cooling and TRPM8 agonist’s are reduced in absence of extracellular Ca2+ ions, by the TRPM8 antagonist’s and in KO M8 mouse. These results show that MCs sense cooling through TRPM8 channels. We hypothesize that cooling sensitivity modulate mechano-transduction and we investigate the modulation of SA1 response using the skin nerve and microneurography techniques in mouse and human, respectively. In mouse, cooling the skin at 22°C reduces the frequency of the SA1 discharge, without modifying the nerve conduction. This reduction disappeared in KO M8 mouse. These results suggest that MCs activity reduced the discharge of SA1 receptor at mild fresh temperature, anticipating effect of lower temperature on A nerve fiber excitability.This study is the first report about the sensitivity of MCs to cold temperature and its consequences on the SA1 receptor activity in mouse and human. We conclude that cold sensitivity of Merkel cells mediated by TRPM8 regulates the SA1 mechanical response, particularly at mild fresh temperature, when the nerve conduction is not significantly modified by cold. This is the first description of an active inhibitory process, driven by a TRP channel, during sensory transduction in the skin.

En dehors du cadre pathologique, la notion de temps est la base essentielle dans le processus de vieillissement de l’organisme et des systèmes associés. Ces derniers vont progressivement présenter un déclin de leur(s) fonction(s) où de nombreux mécanismes complexes vont intervenir à différents niveaux. Parmi les premiers constats proposés, le vieillissement est la conséquence d’un processus inéluctable, d’une succession d’agressions au niveau cellulaires qui pourraient être réparées voire évitées, ouvrant ainsi la voie à de futures études qui permettront à terme de proposer une explication détaillée, complète et claire de ce processus. Pour exemple, les travaux que nous avons menés tentent d’apporter un élément de réponse afin d’établir un lien entre sénescence et vieillissement, avec pour base de générer par reprogrammation cellulaire des cellules hiPSCs à partir de cellules issues de biopsies de patients jeunes et âgées, sénescentes ou prolifératives. Outre la caractérisation de leur état pluripotent comparable à celui des cellules souches embryonnaires, nous avons également mis en évidence après une différenciation spécifique en fibroblastes, que les caractéristiques cellulaires de ces fibroblastes présentaient un effacement des marques du vieillissement, signe d’une plasticité cellulaire possible au cours du vieillissement. A présent, étendre une telle étude au modèle tissulaire cutané par la mise en place de protocoles de différenciation dans le lignage épidermique permettra à l’avenir de mieux comprendre pour mieux appréhender les pathologiques associées au vieillissement, et ainsi pouvoir offrir aux patients une médecine appropriée et concrète. / Beside the pathological context, time is the essential basis in the aging process of the body and associated systems. These will gradually introduce a decline in function(s) where many complex mechanisms will take part at different levels. Among proposed findings, aging is the result of an inevitable process, a succession of cellular stress that could be prevented or repaired, opening the way for future studies that will eventually offer an explanation detailed, clear and complete which occur. For example, our work provide a response element to establish a link between senescence and aging, based on the generation of hiPSCs by cellular reprogramming of cells from biopsies of young, older, senescent and proliferating cells patients. Further characterization of their pluripotent state comparable to that of human embryonic stem cells, we have also showed by a specific differentiation into fibroblasts, that cellular characteristics of those fibroblasts had erased aging features. Next step, is to extend such study in cutaneous tissue model by the introduction of differentiation protocols in the epidermal lineage which will able us to better understand aging-associated diseases, and thus bring the ability to propose an appropriate and cocnrete medicine to aged patients.

La couleur de la peau est le caractère physique de l’homme possédant la plus grandevariabilité. Originairement répartie selon un gradient géographique, les migrations depopulations sont venues nuancer cette répartition chromatique. La pigmentation caractérisetoutefois un espace géographique et les populations qui y vivent, constituant un marqueuridentitaire selon l’origine géographique des individus. La rencontre de populations d’originesdifférentes a donné naissance à un imaginaire construit autour de la couleur de la peau. Lapigmentation comme marqueur identitaire, qui n’a de sens que dans le domaine social, seconjugue à des mythes et stéréotypes qui ont évolués au cours du temps mais qui restenttoujours présents dans l’imaginaire social.Stigmatisante et chargée symboliquement, la couleur de la peau est soumise au mêmetitre que le reste du corps à un travail des apparences. Pour être jugée esthétiquementconforme aux normes dominantes, la peau doit répondre à des critères. Comme tout travaildes apparences, l’éclaircissement de la peau est un fait social s’inscrivant dans un système dereprésentations propre à l’environnement socio-culturel des populations qui s’éclaircissent.C’est dans ce contexte que cette pratique corporelle prend son sens. Or dans le cas despopulations originaires d’Afrique vivant en France, leur environnement socio-culturel se voitinfluencé à la fois par leur pays d’origine mais aussi par leur pays d’accueil, ainsi que par lesenjeux politiques les liant historiquement, des enjeux pour lesquels la couleur de la peau a putenir un rôle prépondérant, notamment durant la période de la colonisation.Au cours de notre étude, nous cherchons à faire un état des lieux de cette pratique auprèsdes femmes africaines vivant à Marseille. Nous essayons de mettre en évidence comment estréalisée cette pratique et à quels systèmes de représentations elle fait référence. Pour cela nousnous intéresserons aux produits et aux techniques permettant d’éclaircir la peau, au regard desfemmes africaines qu’elles utilisent ou non ces produits, mais également au discours socialsur la pratique émanant des publicités pour produits éclaircissants, des magazines fémininsciblant les femmes africaines mais aussi les vendeurs et les médecins témoins de l’impactnocif des produits.L’analyse globale de ces différents discours montre que la pratique de l’éclaircissementde la peau ne se limite pas à un changement de couleur de peau. En modifiant la teinte, maisaussi la texture et la luminosité de la peau, les femmes répondent à une logique sociale etimaginaire. En effet, la pratique de l’éclaircissement s’inscrit dans une logique imaginaire auxfondements empiriques et dont le résultat imprimé sur la peau des femmes aura un impactdans leur vie sociale. En changeant leur couleur de peau, les femmes rentrent dans uneconstruction bio-socio-subjective. Elles matérialisent ainsi une quête identitaire s’inscrivantdans un référentiel socio-culturel et chromatique.Ce travail a pour particularité d’apporter une analyse originale sur l’éclaircissement chezles femmes africaines à Marseille mais aussi un regard pluridisciplinaire nécessaire à l’étudede l’éclaircissement de la peau, une pratique corporelle qui renvoie à la fois à des fonctionsbiologiques et culturelles. / The skin color is the physical feature of human who has the biggest variability. Originallyspread in fonction a geographic gradient, the migrations of populations came to shade thischromatic distribution. However pigmentation caracterises a goegraphic space andpopulations living there, it is them a tracer of identity in fonction of individual geographicorigin. From the meeting of populations of different origin came forth an imaginary built onthe skin color. The skin pigmentation, as identitary tracer, wich has sens only in the socialdomain, is combined with mythes and stereotypes wich had evolved in the course of time butwich still remain presents in the social imaginary.Stigmatising and symbolically weighty, the skin color is subordinate as the rest of thebody to a work of the appareances. To be judged esthetically coplining dominant norms, skinhas to answer to specific standards. Like all works of appreances, the lightening of skin is asocial fact circumscribing within a system of representation belonging to the socio-culturalenvironment of populations who light itself. It is in this context that this corporal practicetakes sens. Thus, in the cas of populations originating from Africa and living in France, theirsocio-cultural environment is influenced by both the country of origin and the recievingcountry, and also by the political stakes wich historically bind them, stakes for wich skin colorhad taken a preponderant function, in particular during the periode of colonisation.In the course of our study, we try to estimate the situation of this practice by africanwomen living in Marseille. We try to make evident how is realised this practice and to wichsystems of representations it makes reference. In this purpose, we take interest to the productsand techniques enabling to light the skin, to the position of african women using or not thoseproducts, to the social discourse on the practice coming from advertising for lighteningproducts, from feminin magazines targetting african women and also the sellers and thedoctors witness of the harmful impact of the products.The global analyse of these different discourses shows that the practice of lightening skindoes not limite itself to a changing of skin color. Modifing complexion, but also texture andluminosity of the skin, women answer to a social and imaginary logic. Indeed, the practice oflightening lies within an imaginary logic with empirical fondations and whose result printedon the women skin will have an impact in their social life. Changing the skin color, womenbring in a bio-socio-subjective construction. Thus they materialise an identitary questcircumscribing itself in a socio-cultural and chromatic referential.This work has for particularities to bring an original analyse on the lightening of africanwomen living in Marseille but also a pluridisciplinar glance necessary for the study of thelightening skin, a corporal practice wich refer to either biological either cultural functions.

D’un point de vue mécanique, la peau est une structure multicouche complexeayant des propriétés viscoélastique, non-linéaire, quasi-incompressible, anisotrope eten état de précontrainte. Le travail présenté dans cette thèse associe expérimentation,modélisation et identification numérique et se distingue en particulier parl’utilisation d’un dispositif d’extensométrie développé au laboratoire et adapté à desmesures in vivo non invasives. Des tests ex vivo ont cependant été réalisés égalementà titre de comparaison et de validation. Une attention particulière a été portée à latension cutanée initiale (ou naturelle). Les essais in vivo ont permis d’obtenir desréponses force – déplacement sous différentes configurations angulaires, d’intensitéet pour diverses localisations corporelles. Les essais ex vivo ont quant à eux permisd’estimer l’état de contrainte initiale par la mesure des forces nécessaires à la remiseen tension d’explants. Ces différents essais expérimentaux ont été modélisés en utilisantdeux lois de comportement : la loi d’Ogden du premier ordre permettant dedécrire un comportement hyperélastique isotrope et la loi d’Holzapfel-Gasser-Ogden(HGO) décrivant un comportement hyper élastique anisotrope. Cette dernière a étéimplémentée sous l’interface utilisateur du logiciel ANSYS. Les paramètres caractéristiquesdes zones cutanées testées ont été identifiés par méthode inverse. L’influencede la compressibilité de la peau sur son comportement mécanique est mise en évidence.Au final, les travaux de cette thèse ont été appliqués au lambeau d’avancementde type V-Y qui est une technique de suture pratiquée pour combler les pertes desubstance.229 / From a mechanical point of view, the human skin is a complex multilayerstructure with viscoelastic, non-linear and anisotropic properties and a pre-stressstate. The work presented in this thesis combines experimentation, modeling andnumerical identification and distinguishes especially by the use of an extensometerdevice developed in the laboratory and suitable for non-invasive in vivo measurements.Ex vivo tests were however also performed for comparison and validation.Particular attention was paid to the initial skin tension. in vivo tests allowed theobtaining of load – displacement responses for different angular configurations, intensitiesand body locations. ex vivo tests in turn allowed the estimation of the stateof initial stress by measuring the forces necessary for the re-tension of the explants.These different experimental tests were modeled using two constitutive laws : thefirst order Ogden law allowing the description of an isotropic hyperelastic behavior,and the Holzapfel-Gasser-Ogden’ law (HGO) allowing the description of an anisotropichyperelastic behavior. The latter was implemented in the user interface ofANSYS software. The characteristics parameters of the skin areas tested were identifiedby the reverse method. The influence of the compressibility of the skin on itsmechanical behavior is highlighted. Finally, the work of this thesis were applied toan advancement flap of V-Y type.

Le but de cette étude est de proposer un modèle combiné au transfert de chaleur dans la veine et des tissus de la peau humaine. Il permet de mieux comprendre le comportement thermomécanique de la peau et de son environnement direct lorsqu'ils sont exposés à de fortes variations thermiques. Le travail est basé sur des études expérimentales et numériques. La première étape expérimentale consiste à placer une barre d'acier cylindrique refroidie ou réchauffée sur la peau d'un avant-bras humain et en mesurant l'évolution de température en utilisant une caméra infrarouge. L'influence de la circulation sanguine dans les veines sur la diffusion de la chaleur est très nettement.La deuxième étape expérimentale consiste à mesurer les propriétés géométriques des veines et la vitesse du sang en utilisant une sonde d'écho-Doppler. Ces mesures expérimentales fournissent un modèle numérique de la peau et de son environnement direct. Le modèle tridimensionnel multicouche utilise l'équation biothermique de Pennes pour modéliser les tissus et celle de la chaleur dans un fluide pour modéliser le sang. Les propriétés des matériaux sont tirées de la littérature et validées par notre expérimentation. Le modèle numérique permet de retrouver les mesures expérimentales, mais aussi d'accéder à la température et à la vitesse du sang dans les veines. Enfin, un modèle numérique d'endommagement thermique, couplé au modèle multicouche de la peau, a été développé dans cette étude. Il permet de simuler l'endommagement suite à une brûlure de la peau et de tester l'efficacité de différents traitements visant à limiter les lésions. / The aim of this study is to propose a combined model of heat transfer in the vein and tissue of human skin. It allows to better understand the thermomechanical behavior of the skin and its direct environment when exposed to strong thermal variations. The work is based on experimental and numerical investigations. The first experimental step consists in placing a cooled or a heated cylindrical steel bar on the skin of a human forearm and measuring the temperature change using an infrared camera. Blood circulation in the veins was seen to clearly influence heat diffusion. The second experimental step consists in measuring geometrical properties of the veins and blood velocity using an echo-Doppler probe. These experimental measurements provide a numerical model of the skin and its direct vicinity. The three-dimensional multilayer model uses Pennes equation to model biological tissue and the convective heat transport equation, to model blood. The properties of the biological materials obtained from the literature are validated by our experimentation. The numerical model is able to simulate the experimental observations, but also to estimate blood temperature and velocity in the veins. Finally, a numerical model of thermal damage, coupled with the multilayer model of skin, was developed in this study. It simulates the damage due to burning of the skin and to test the efficacy of different treatments to limit the damage.

En cette période de mondialisation des modes d’habitation et d’uniformisation desagencements de l’espace, est-ce qu’il subsiste des différences au niveau du fonctionnementfamilial dans les pays occidentaux ? Et si ces différences subsistent, comment se transposent-ellessur l’habitat réel ? Ainsi cette recherche universitaire propose une étude comparative del’investissement psychologique de l’habitat entre la France et les Etats-Unis. Le test projectifnommé « l’épreuve familiale de spatiographie projective » élaboré par Patrice Cuynet (1999-2000) a pour objectif de comprendre l’image du corps familial à travers l’analyse du dessincollectif de leur maison de rêve. Ce test a été administré à 30 familles françaises et 30familles américaines. Nous sommes partis du postulat que l’habitat est une enveloppe, unepeau réelle et fantasmée de la famille (A. Eiguer, 1983) qui fonctionne comme le Moi-peau(D. Anzieu, 1985). Grâce à cette méthodologie, nous allons pouvoir établir un diagnostic surla structuration familiale et comparer les résultats obtenus en France et aux Etats-Unis. / In this current period of globalization of the housing arrangements and of thestandardization in the space layouts, are some differences subsisting in the family functioningin western societies? And if these differences remain, how do they reflect on the real housingenvironment? This thesis will approach a comparative study of the psychological investmentof the housing environment between France and the United States. The projective test named" the family test of spatiography projective " developed by Patrice Cuynet (1999-2000) set outto gain a better understanding of the image of the family body through the analysis of thecollective drawing of their dream house. This test was assigned to 30 French families and 30American families. We started from the postulate that the housing environment is anenvelope, a real skin and fantasized over the family (In. Eiguer on 1983) which works as theEgo-skin (D. Anzieu on 1985). Thanks to this methodology, we are going to be able toestablish a diagnosis on the family structuring and compare the results obtained in Franceand in the United States.

L'exposition aux ultraviolets solaires constitue un facteur de risque majeur dans le développement de cancers cutanés. L'initiation de ces cancers est cependant pondérée par des mécanismes cellulaires de protection qui contrecarrent l'instabilité génomique éventuellement promue par les UV. Dans ces mécanismes, le suppresseur de tumeur p53 joue un rôle fondamental en régulant l'expression de nombreux gènes permettant de bloquer le cycle cellulaire et de réparer l'ADN ou, si les dommages cellulaires sont trop importants, d'activer l'apoptose. Les régulateurs de la stabilité de la protéine p53 en réponse au stress UV sont ainsi capitaux pour assurer la stabilité du génome. En réponse au stress UV in vivo et in vitro, nous mettons en évidence que le facteur de transcription USF1 est primordial à l'activation du programme génétique contrôlé par la protéine p53. Nos données convergent vers un modèle dans lequel USF1 agit sur la voie p53 par deux moyens. D'une part, USF1, assure par interaction physique la stabilité de p53 en contrecarrant de manière mutuellement exclusive l'association du suppresseur de tumeur à MDM2 son inhibiteur physiologique. D'autre part, USF1 agit synergiquement avec le suppresseur de tumeur pour transcrire certains gènes cibles de p53 comme le régulateur du cycle cellulaire CDKN1A (p21). Ces deux niveaux de régulation dépendent étroitement du niveau de stress et permettent d'assurer un contrôle optimal de l'arrêt du cycle cellulaire en réponse à l'exposition UV. Collectivement, nos données montrent qu'USF1, par le contrôle de la voie p53, est un facteur essentiel contre l'instabilité génomique induite par les UV. / Ultraviolets (UV) solar exposure is a critical risk factor in skin cancers development. Initiation of these cancers is however lowered by cellular protective mechanisms that counteract the genomic instability potentially promoted by UV. In these mechanisms p53 protein is critical in regulating a large number of genes that blocks the cell cycle to allow DNA repair or, if damages are beyond repair, to activate apoptosis. The regulators of p53 stability in response to UV are thus crucial to ensure genomic stability. In response to UV stress, we found by in vivo and in vitro studies that USF1 is essential in the activation of p53 genetic program. Our data converge to a model whereby USF1 acts on p53 pathway by two means. On one hand, USF1 stabilizes p53 from MDM2 mediated degradation by a physical association to the tumor suppressor in a MDM2 mutually exclusive manner. On the other hand USF1 synergizes with the tumor suppressor in the transcription of several targets of p53 protein and particularly the CDKN1A inhibitor of the cell cycle. These two levels of regulation are closely dependent in the stress level and ensure an optimal control of the cell cycle progression in response to UV. Collectively, our results show that USF1, by controlling p53 pathway, is a critical factor against the genomic instability promoted by UV.

Les microARN sont des petits ARN (22 nucléotides en moyenne) non codants connus pour réguler l'expression des gènes au niveau post-transcriptionnel. Ils jouent un rôle dans de nombreux processus cellulaires, notamment dans la peau. La nature et la fonction précise des microRNAs contrôlant la différenciation épidermique restent à clarifier. De même; leur rôle dans la réponse à l'irradiation ionisante du kératinocyte n'a jamais été étudié. Nous avons donc entrepris une analyse d'expression du miRnome par la technique de TLDA dans ces deux contexts. Pour la différentiation épidermique, ces travaux de thèse ont permis de mettre en évidence une induction globale de l'expression des microARN au cours de la différentiation précoce des kératinocytes. Plusieurs microARN significativement modulés ont été caractérisés. Parmi eux, MiR-132 a été validé in vivo sur coupe de peau. Au cours des étapes tardives de la différentiation, miR-23b est induit. Nous avons montré qu'il agit en régulant TGIF1, répresseur de la voie TGF-β et active la phosphorylation de SMAD2, facteur de transcription nécesssaire à la différenciation terminale. Nous avonss également observé que les microARN répondent de façon globale aux rayons γ, mais que la nature de cette réponse dépend de l'état de différenciation des cellules. Cette réponse globale n'est pas corrélée à des modifications d'expression de protéine de la voie de synthèse des microRNAs comme AGO2 et DICERI. Nous avons montré que, dans les cellules proliférantes, l'induction de micro ARN réprimés par les rayons γ affecte la viabilité des cellules après irradiation. Ainsi, ces travaux de thèse contribuent à une meilleure compréhnesion du rôle des microRNA dans la régulation de la différenciation épidermique et la réponse des kératinocytes au stress génotoxique. / MicroRNA are small non-coding RNA (22 nucleotides in mean) known to regulate gene expression at the post-translational level. They play a role in many cellular processes, especially in skin. However, their exact role during epidermal differenciation remains to be clarified. Moreover, their role in the response of keratinocytes to ionizing irradiation has never been studied. Therefore, we settled up a miRnome expression analysis by TDLA technique in both situations. In epidermis differenciation, we observed a global induction of microRNA expression during the early steps of keratinocytes differenciation. Several significantly modulated microRNA have been characterized. Among them, miR-132 was validated in vivo on skin sections. During the late steps of differentiation, miR-23b is induced. We showed that miR-23b is able to regulate TGIF1, repressor of TGF-β pathway and to induce SMAD2 phosphorylation, a key transcription factor in terminal differentiation. In keratinocytes exposed to ionizing irradiation, we observed that microRNA display a global response to γ-rays that is higly dependent to the differentiation state of irradiated cells. This global response is not correleted to expression modifications of proteins from the microRNA synthesis pathway such as AGO2 and DICERI. We finally found that in proliferative keratinocytes the induction of irradiation-repressed microRNA impact cell viability after irradiation. Taken together, those results contribute to a better understanding of the microRNA function in the regulation of epidermal differentiation and in the response of keratinocytes to genotoxic stress