Memoria para optar al título profesional de Ingeniero Agrónomo / La presente investigación se realizó con el objetivo de mejorar y adaptar el protocolo de micropropagación normalmente utilizado para arándano, Woody Plant Medium (Lloyd y McCown, 1980) (Anexo 1), utilizado en el Laboratorio de Genética Vegetal de la Universidad de Chile para las variedades highbush: Bluecrop, Duke y Misty. Se realizaron ensayos con el fin de cubrir todo el proceso de micropropagación, desde la etapa de establecimiento hasta la aclimatación. En la etapa de establecimiento se realizó un ensayo de luz y oscuridad, con el fin de disminuir los explantes necrosados, causados por la presencia de compuestos fenólicos al someter los explantes a altas intensidades lumínicas. Se determinó estadísticamente que no existían diferencias significativas entre los tratamientos, para los parámetros número, crecimiento, tasas de establecimiento y tasa de proliferación de brotes, en las tres variedades, sin embargo se observó una tendencia positiva en respuesta a la oscuridad en las variedades Misty y Duke en los parámetros evaluados, mientras que la variedad Bluecrop se comportó en forma indiferente a la oscuridad. En la etapa de multiplicación se realizó un ensayo donde se probaron 4 niveles de pH en los medios de cultivo (pH: 5,0 – 5,3 – 5,7 – 6,0) con el objetivo de determinar el nivel al cual se produjo mayor crecimiento de brotes. Estadísticamente no se encontraron diferencias significativas entre los tratamientos para los parámetros evaluados y variedades, sin embargo también se presentó una tendencia positiva al crecimiento de brotes y tasa de proliferación a pH 5,0-5,3. A pH más altos se mantuvo el crecimiento de los brotes, pero este fue menor, y en algunos casos se produjo necrosamiento de explantes, comportamiento que se repitió en las tres variedades. Se realizó un ensayo de pre-aclimatación in vitro solo en la variedad Bluecrop para determinar el efecto de enraizamiento y aclimatación de los brotes. Los tratamientos de preaclimatación in vitro consistieron en someter los brotes durante 30 o 60 días en un medio de cultivo sin regulador de crecimiento, y una repetición de cada uno de ellos agregando 20 cc de agua destilada estéril sobre el medio sólido, 10 días antes de completar los 30 o 60 días. Se encontraron diferencias significativas en el número de brotes enraizados, a los 10 días de evaluación, presentando mayor número de brotes enraizados en aquellos sometidos a 30 días en un medio sin regulador de crecimiento. Por otra parte los brotes sometidos durante 60 días en este medio sin regulador de crecimiento y su repetición con agua, presentaron mayor longitud, vigor, tamaño y número de hojas. La adición de agua destilada no tuvo un efecto mayor en la aclimatación de los brotes. / This research was conducted to improve and adapt the protocol normally used for micropropagation of blueberry Woody Plant Medium (Lloyd and McCown, 1980) (Annex 1) used in the Laboratory of Plant Genetics, University of Chile, for varieties highbush, Bluecrop, Duke and Misty. Trials were conducted in order to cover all the micropropagation process, from setting up the stage of acclimation. At the stage of establishing a trial of light and darkness, in order to reduce the explants necrotic, caused by the presence of phenolic compounds, subjecting explants to high light intensity. It was determined that there were no statistically significant differences among the treatments for the parameters number, growth rates of establishment and rate of proliferation of shoots in the three varieties, however a positive trend was observed in response to the dark varieties Misty Duke and evaluated on the parameters, while the variety Bluecrop behaved in any way in the dark. During the multiplication was performed a test where 4 different pH levels were tested: 5,0- 5,3- 5,7- 6,0 in the culture media to determine the level at which there was greater growth of shoots. No statistically significant differences were found between treatments for the evaluated parameters and varieties; however it was observed a positive trend in the growth rate of shoots and proliferation at pH 5.0-5.3. Higher pH maintained shoot growth, but this was minor, and in some cases there were necrotic explants, this behaviour were observed in the three varieties. It was performed a trial of pre-acclimated in vitro only in the variety Bluecrop to determine their effect on rooting and acclimatization of shoots. The pre-treatment consisted of in vitro acclimatization submit outbreaks for 30 or 60 days in culture medium without growth regulators, and a repeat each adding 20 cc of sterile distilled water on the solid medium, 10 days before completing the 30 and 60 days. We found significant differences in the number of rooted shoots, the 10 days of evaluation, a greater number of shoots rooted in those subjected to 30 days in a medium without growth regulators. On the other hand shoots subjected during 60 days in this medium without growth regulator and re-using water, showed a greater length, force, size and number of leaves. The addition of distilled water did not have a greater effect on acclimation of shoots.

Memoria para optar al Título Profesional de Ingeniero en Recursos Naturales Renovables / El funcionamiento de las Plantas de Tratamiento de Aguas Servidas (PTAS) provoca la emisión a la atmósfera de gases odorantes, que podrían afectar a las comunidades vecinas a éstas. Por ello, en el presente estudio se aplicó el modelo gaussiano de dispersión atmosférica ISC AERMOD para la simulación de olores, en base a las unidades de olor europeas definidas en la Norma Europea EN 13725:2003, a fin de evaluar eventos de olores en comunidades cercanas a la Planta de Tratamiento de Aguas Servidas La Farfana. Se trabajó con datos meteorológicos como dirección y velocidad de vientos, radiación global, temperatura, humedad relativa, precipitación, presión atmosférica, cobertura y altura de nubes. Además, de características topográficas representado por un Modelo Digital de Elevación de la zona y las características de las fuentes. En tanto, la cuantificación de las tasas emisiones de olor de las fuentes fue estimada a través de la técnica de olfatometría dinámica. Los resultados del modelo fueron comparados con mediciones en terreno de tipo sensorial (paneles de olor y monitoreo continuo). Estas simulaciones concordaron con ambas mediciones en terreno, generando mapas de olores entre las concentraciones de olores y los principales puntos receptores. Del mismo modo, la modelación se comparó con normativa internacional de países como Holanda, Alemania, Bélgica, España, entre otros; debido a la ausencia de normativa en Chile. Finalmente, se concluyó que la medición de emisiones de olor a través de olfatometría dinámica y el posterior uso de modelos de dispersión para la medición de la concentración del olor son herramientas eficaces para la realización de un estudio de olores en una zona en particular. / Wastewater treatment plants (PTWW) emit to the atmosphere, odorant gases that could affect the communities near them. This study was carried out to see how wastewater treatment plants affect the communities applying the Gaussian atmospheric dispersion modelling ISC AEROMOD for odour simulation, based on European odour units defined in the European norm EN 13725:2003 to evaluate odour situations in the communities near La Farfana wastewater treatment plant. The data considered for this study case was: meteorological weather such as wind speed and wind direction, global radiation, temperature, relative humidity, precipitation, atmospheric pressure, cloud cover and cloud height. Besides topographic characteristics represented by the Digital Elevation Model of the area and the characteristics of the sources. On the other hand, the quantification of the odour emission sources was calculated through the dynamic olfactometry technique. The results of the model were compared with measurements of sensorial type in the field (odour panels and continuous monitoring). These simulations agreed with both measurements in field, generating odour maps between odour concentration and the main receptive points. In the same way, the model was compared with the international norm in countries like Holland, Germany, Belgium, and Spain among others due to the lack of an odour norm in Chile. Finally, it was concluded that the measurement of odour emission through the dynamic olfactometry technique and later use of dispersion models to measure the concentration of odour are effective tools to carry out a research on odour in a particular area.

Orientador: Jorge Vega / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-31T18:41:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Goncalves_MarcosCesar_D.pdf: 7477372 bytes, checksum: 67894da464a7b2387385005c386575c0 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: O vírus do amarelecimento foliar da cana-de-açúcar, Sugarcane yellow leaf vírus (ScYL V) constitui atualmente um grande problema nos principais países produtores de cana-de-açúcar. Este vírus possui diversas características físicas e biológicas, como tamanho e morfologia da partícula, reações serológicas, alterações morfológicas no hospedeiro e aspectos de transmissão, comuns aos membros da família Luteovírídae. As informações da sequência genõmica do isolado brasileiro obtidas nesse trabalho, referentes às regiões codificantes para capa protéica do vírus (CP), proteína de movimento (17 kOa ou MP) e parte da RNA polimerase dependente de RNA (RdRp), mostram um alto grau de identidade e similaridade de aminoácidos com sequências de luteovirus conhecidos. Isso permite estabelecer o ScYLV como um membro definitivo da família Luteovíridae. Análises filogenéticas empregando as sequências deduzidas de aminoácidos da CP e da região C-terminal da RdRp do ScYL V sugerem diferentes afinidades taxonõmicas desse vírus dentro da família Luteovírídae, de maneira similar ao que acontece com o Soybean dwarf vírus (SOV). Análises comparativas de seqüência entre o isolado brasileiro e um isolado norte-americano revelaram diferenças de apenas dois nucleotídeos nas posições 4201(G por T) e 4232 (A por C) do genoma do ScYLV, correspondentesrespectivamente à região codificadora da proteína P17 e CP. Os dados de seqüência obtidos neste trabalho foram usados no desenvolvimento de um método sensível de diagnóstico baseado na combinação da técnica de amplificação isotérmica de ácidos nucléicos NASBA (nucleic acid sequence based amplification) e "molecular beacons", denominado AmpliOet RNA. Esse sistema de detecção foi altamente específico e ofereceu uma sensibilidade de aproximadamente 100 fg de vírus purificado, permitindo a detecção em plantas com baixos níveis de infecção viral e em um único pulgão virulífero. Os membros da família Luteoviridae são transmitidos por afídeos de uma maneira circulativa e não-propagativa. Após a aquisição, o vírus permanece no corpo do inseto por várias semanas, graças a associação com a proteína GroEL, produzida por um endossimbionte primário do pulgão. As partículas de vírus purificadas apresentam dois tipos de proteína, a proteína principal da capa protéica de 22 kDa e menores quantidades de outro componente do capsídeo, a proteína de transleitura ou "readthrough" (RTD) de 54 kDa. A protéina RTD contém determinantes responsáveis pela transmissão e acúmulo do vírus em plantas agroinfectadas. O Potato leafroll vírus (PLRV) é uma espécie do gênero Polerovirus dentro da família /,..uteoviridae. Clones infectivos de cDNA do PLRV e um mutante deletério da proteína RTD foram usados para estudar as interações moleculares entre esse luteoviruse seu afídeo vetor Myzus persicae. O mutante do PLRV, no qual a proteína RTD estava inteiramente ausente, não foi transmissível por M. persicae e não se ligou a proteína GroEL. Adicionalmente, esse mutante mostrou-se significativamente menos persistente na hemolinfa do afídeo do que as partículas não modificadas do vírus / Abstract: Sugarcane yellow leaf vírus (ScYL V) is widely distributed in Brazil and other sugarcane producing countries causing significant yield losses. This virus shares biological features typical of the luteovirids. Comparisons of the coat protein (CP), 17 kDa protein and C-terminus of the RNA-dependent RNA polymerase coding regions showed that the deduced amino acid sequences of the Brazilian isolate share a considerable degree of identity and similarity with corresponding sequences of known luteovirids, thus clearly establishing ScYL V as a member of the family Luteovíridae. Phylogenetic analyses also suggest that the 5' and 3' coding blocks of the ScYLV genome possess different taxonomic affinities within the Luteovíridae family, as for the genome of Soybean dwarf vírus (SDV). Our results were published simultaneously as the sequence of a North American strain of ScYL V. Comparative analyses between the deduced peptides of Brazilian and North American strains revealed two nucleotide substitutions at positions 4201 (G_ T) and 4232 (A_C) of the ScYLV genome, corresponding to P17 and CP proteins coding regions, respectively. Our sequence data were used to develop a highly sensitive detection method based on the combination of isothermic nucleic acid sequence based amplification (NASBA) and molecular beacons, named AmpliDet RNA. This system offered a sensitivity of about 100 fg of purified virus and could detect ScYL V in plant samples with low virus titer and in one single aphid. Members in the Luteovírídae are transmitted by aphids in a circulative, nonreplicative manner. After acquisiton, luteovirus particles persist in the aphid's hemolymph for several weeks in association with a GroEL homolog, produced by the primary endosymbiont of the aphid. Luteovirus purified particles contain two types of proteins; a major 22 kDa coat protein (CP) and the minor capsid component of 54 kDa, the readthrough protein (RTD). The RTD contains determinants responsible for virus transmission and accumulation in agroinfected plants. Potato leafroll virus (PLRV) is a member of the genus Po/erovírus in the family Luteovíridae. An infectious cDNA fuI! length clone of PLRV and a mutant devoid of the RTD were used to study and better understanding the molecular interactions between this luteovirus and its aphid vector Myzus persícae. The PLRV mutant lacking the entire RTD protein was not transmissible by M. persícae and did not bind to Buchnera GroEL. Furthermore, the mutant was significantly less persistent in the aphid's hemolymph than the wild type virus. These data corroborate previous observations with Beet westem yellow vírus (BWYV) and Bar/ey ye//ow dwarf vírus (BYDV) that the RTD domain is involvedin luteovirus transmission and persistence in the aphid's body / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Orientador: Ivany Ferraz Marques Valio / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T00:09:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sanches_MariaCristina_M.pdf: 5142071 bytes, checksum: 7a27f1af73ca34e7f1e676f20ac721b3 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Lianas são plantas que dependem de algum suporte para atingir uma altura apreciável. São comuns em bordas de mata e em clareiras naturais, ou oriundas por ação antrópica. O presente trabalho teve como fim, verificar a germinação e a viabilidade de sementes de lianas armazenadas em condições naturais, no interior da Reserva Municipal de Santa Genebra, bem como o crescimento inicial de plântulas submetidas à radiação direta (borda da mata) e sombreamento natural (interior da mata). As espécies utilizadas ao longo deste estudo foram: Aristolochia galeata, Arrabidea triplinervia, Bidens brasiliensis, Byttneria catalpifolia, Canavalia parviflora, Chamissoa altissima, Cissus sicyoides, Dalechampia pentaphylla, Dicella bracteosa, Dioscorea sp., Gouania virgata, Mascagnia anisopetala, Mutisia coccinea, Oxypetalum molle, Pithecoctenium crucigerum, Rhynchosia phaseoloides, Serjania multiflora e Solanum jlaccidum. Para tal, foram feitas coletas de frutos maduros e as sementes foram colocadas para germinar a 25° C sob luz constante. Para verificação da longevidade das sementes, os diásporos foram colocados em bandejas de alumínio previamente perfuradas, contendo solo da mata esterilizado, totalizando 3 repetições para cada espécie. A intervalos regulares, cada amostra foi recolhida e a contagem das sementes germinadas, predadas e/ou aparentemente viáveis foi feita. Para o estudo do crescimento das plântulas, sementes germinadas foram plantadas e levadas à mata. As plântulas foram dispostas em dois lotes separados, um na borda da mata e outro abaixo da cobertura vegetal no interior da mata. Condições adequadas de umidade, luz e temperatura constante promoveram a germinação da maioria das sementes de lianas, exceto S.flaccidum que exibiu alta taxa de germinação em casa de vegetação. Sementes de B. catalpifolia, C. parviflora, C. sicyoides, D. pentaphylla, G. vir gata, M. coccinea, O. molle e R. phaseoloides apresentaram dormência física. No interior da mata, sementes de A. triplinervia e D. bracteosa apresentaram altas taxas de germinação, formando um típico carpete de plântulas. Por outro lado, alta porcentagem de sementes intactas viáveis foi observada em espécies com semente de testa dura, entre estas: B. catalpifolia, C. parviflora, C. sicyoides, D. pentaphylla, G. virgata e R. phaseoloides. Entre estas espécies alta taxa de predação foi encontrada em G. virgata e D. pentaphylla. Plântulas de lianas mostraram maior crescimento quando mantidas em radiação plena, comparadas com aquelas mantidas em baixa densidade de fluxo de fótons, mas a magnitude das respostas de crescimento variou entre as espécies. Entre as plantas mantidas na borda da mata, maior incremento de matéria seca foi apresentado por B. brasiliensis, enquanto que o oposto foi verificado para Dioscorea sp. No interior da mata, C. parviflora e O. molle apresentaram maior acúmulo de matéria seca e ambas formaram caule volúvel nestas condições. Quanto ao direcionamento dos fotossintatos entre a parte aérea e raiz, a maioria das espécies mostrou maior crescimento da parte aérea em detrimento das raízes, à exceção de D. bracteosa e Dioscorea sp. Em geral, não foram verificadas diferenças significativas da razão raiz parte aérea (ripa) nos dois tratamentos, borda e interior da mata. Mesmo considerando que lianas são plantas tipicamente heliófitas, a maioria delas sobreviveu por aproximadamente 100 dias em ambiente altamente sombreado. Caráter fortemente heliófito ficou evidenciado em B. brasiliensis, C. sicyoides, M. coccinea e P. crucigerum, uma vez que altas taxas de mortalidade foram verificadas nestas espécies em condições de sombreamento / Abstract: Lianas (climbers) are plants that rely on mechanical support to grow taller. They are copious in natural and man-made clearings. The objectives of this study were: a) to verify the germination and viability of seeds stored in natural conditions, under the forest canopy (RSG). b) to observe the initial growth of seedlings maintained under full sunlight and shaded conditions (under vegetation canopies). The species studied in this work were: Aristolochia galeata, Bidens brasiliensis, Byttneria catalpifolia, Canavalia parviflora, Chamissoa altissima, Cissus sicyoides, Dalechampia pentaphylla, Dicella bracteosa, Dioscorea sp., Gouania virgata, Mascagnia anisopetala, Mutisia coccinea, Oxypetalum molle, Pithecoctenium crucigerum, Rhynchosia phaseoloides, Serjania multiflora, Solanum flaccidum. Ripe fi-uits were collected in the forest and germinated in Petri dishes at of 25°C in continuous light. For seed longevity, the diaspores were placed in aluminium trays with sterilized soil (three replicates for each species). At regular times, the trays were analysed for germinated, lost through predatory action and apparently viable seeds. To study the initial growth of the seedlings, lots of all these species were maintained in two conditions: forest edge and closed forest (shaded conditions). Most of the seeds germinated in adequate conditions of moisture, light and temperature of 25°C, except S. flaccidum which presented low germination. Physical dormancy was observed in B. catalpifolia,C. parviflora, C. sicyoides, D. pentaphylla, G. virgata, M coccinea, O. molle, and R. phaseoloides. Under the canopy, seeds of A. triplinervia and D. bracteosa showed high germination forming a carpet of seedlings. Hard coated seeds presented a high percentage of viability in natural conditions as for example: B. catalpifolia, C.parviflora, C. sicyoides, D. pentaphylla, G. virgata and R. phaseoloides. Althougth the seeds of G. virgata and D. pentaphylla present a hard tegument, they suffered a high rate of predation. Seedlings of the studied lianas showed high rates of growth in full sunlight when compared to those under canopy (low PPFD). It was noted that at the edge of the forest, B. brasiliensis presented a high increment of dry mass, while in Dioscorea sp. this increment was low. Under the forest, C. parviflora and O. molle attained a high accumalation of dry mass, and both produced a volute stem. Most of the species presented higher growth of the shoot than roots, except in D. bracteosa and Dioscorea. But in general no significative differences between root/shoot were found in both treatments. Although the lianas are considered heliophytes, most of the studied species survived under deep shaded forest for approximately 100 days. Nevertheless, B. brasiliensis, C. sicyoides, M. coccinea and P. crucigerum showed a high mortality rate under this condition / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Jorge Vega / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-20T18:44:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Scagliusi_SandraMariaMansur_M.pdf: 9937858 bytes, checksum: d6a4ace430ba8b53884c9790fac917a1 (MD5) Previous issue date: 1995 / Resumo: Este trabalho teve como objetivo contribuir a um melhor conhecimento da moléstia do Enrolamento da Folha da Videira (EFV) presente no Brasil, e em todos os países vitícolas. Diversas evidências indicam a etiologia viral do EFV, entre elas a capacidade de transmissão por enxertia e a sensibilidade do patógeno à termoterapia. Além dessas características, diferentes partículas de vírus (alongadas e isométricas) têm sido isoladas de plantas de videira afetadas pelo EFV. o método aceito para diagnosticar a moléstia, consiste na enxertia do material a ser testado em variedades indicadoras para o enrolamento da folha, porém a leitura confiável dos sintomas induzidos na planta indicadora é realizada num período de 2-3 anos após a enxertia. Usando técnicas ligadas à serologia, pode-se melhorar as condições para o diagnóstico deste vírus, por testes mais rápidos que os de indexação por enxertia em variedades indicadoras. Durante o desenvolvimento deste trabalho, observou-se através de testes de microscopia eletrônica, uma maior concentração do vírus em tecido caloso de videira, obtido in vitro, em relação à concentração encontrada nas folhas e hastes da própria planta. A fim de se obter dados que contribuíssem para um melhor conhecimento da moléstia do EFV presente no Brasil e facilitar as condições de diagnóstico, foram estudados os seguintes aspectos: 1) possibilidade do uso de tecido caloso obtido in vitro a partir de tecidos de videira com EFV, como modelo, para estudo e manutenção do vírus; 2) citopatologia do tecido caloso à nível de microscopia eletrônica; 3) avaliação da relação serológica existente entre as partículas virais do tipo closterovirus detectadas em calos de videira com enrolamento da folha através de testes de microscopia eletrônica de imunoadsorção utilizando anti-soros preparados para o Vírus do Enrolamento da Folha da Videira (VEFV) e para o Vírus da Tristeza dos Citros (VTC); 4) detecção de partículas virais do tipo closterovirus em amostras semipurificadas de folhas de videira em variedades indicadoras (Pinot Noir e LN-33) e não-indicadora do EFV (Seibel 2) e 5) tentativas de transmissão mecânica do vírus do enrolamento da folha da videira para a hospedeira herbácea Nicotiana benthamiana. Outro aspecto estudado neste trabalho se refere à perpetuação do vírus através da cultura in vitro ao longo de várias repicagens do calo. Condições diferentes de temperatura e luminosidade também foram avaliadas, visando estabelecer diferenças no desenvolvimento do calo e na concentração do vírus. Os resultados deste estudo mostraram que o vírus detectado, associado ao EFV, se multiplica ativamente nas células do tecido caloso de videira. A citopatologia observada nos calos de videira afetadas pelo EFV é característica de infecção por closterovirus. O estudo das partículas virais associadas ao EFV pela técnica de tecido caloso in vitro mostrou-se útil devido à rapidez da formação do tecido caloso, diminuição do risco de contaminação das amostras, e especialmente pela baixa atividade de oxidases das células do calo. Para manutenção do vírus por períodos prolongados não se mostrou eficiente. Com relação ao efeito da luminosidade e temperatura, não foram observadas diferenças significativas no desenvolvimento do calo e na concentração do vírus. Os testes de transmissão mecânica para hospedeira herbácea Nicotiana benthamiana foram negativos. A técnica de ISEM feita com materiais semipurificados de folhas, mostrou ser um teste adequado e rápido para o diagnóstico da doença, quando comparada com a indexação por enxertia em variedades indicadoras. Os resultados das técnicas de ISEM, decoração e do teste de F(ab')2 ELISA, mostraram que o isolado do VEFV estudado neste trabalho é predominantemente do tipo IH. Os anti-soros preparados para os isolados tipos I e H somente reagiram nos testes de ISEM e decoração, indicando uma relação serológica muito fraca com o vírus estudado. Pôde-se concluir que o EFV é uma doença complexa, onde parecem estar envolvidos vários componentes virais, sendo que um deles mostrou relação serológica com o VTC, como observado nos testes de ISEM com decoração / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Maria de Fatima D. A. Pereira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-13T23:05:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melare_MariaEliza_M.pdf: 4375632 bytes, checksum: 7e59fc51365d749f1b59a66f3b21847e (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: Marchantia chenopoda é uma hepática comum em locais quentes e úmidos. A reprodução vegetativa nessa espécie ocorre através de estruturas denominadas propágulos, que se desenvolvem dentro de receptáculos situados na superfície dorsal do talo. A germinação de propágulos pode estar condicionada aos mesmos fatores controladores de desenvolvimento de plantas superiores, onde e fenômeno é mais estudado. Este trabalho teve como objetivo o estudo do envolvimento da luz e de substâncias de crescimento no controle do desenvolvimento inicial dos talos, bem como na formação destes dentro dos receptáculos. A germinação de propágulos e o crescimento inicial dos talos ocorreram quando os propágulos foram expostos à luz vermelha ou branca e não aconteceu no escuro, mesmo com a aplicação de sacarose. Em vermelho-extremo e azul também não ocorre crescimento, sugerindo o envolvimento do fitocromo como fotorreceptor. Também com aplicação de solução nutritiva não ocorre crescimento dos propágulos em escuro ... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Mestrado / Fisiologia Vegetal / Mestre em Ciências Biológicas

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-09-25T21:43:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Diogo Henrique Galiza Lopes.pdf: 1289949 bytes, checksum: f0396477efeb3542630552c6f39221ac (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-28T18:08:06Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Diogo Henrique Galiza Lopes.pdf: 1289949 bytes, checksum: f0396477efeb3542630552c6f39221ac (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-28T18:08:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Diogo Henrique Galiza Lopes.pdf: 1289949 bytes, checksum: f0396477efeb3542630552c6f39221ac (MD5) Previous issue date: 2016-02-24 / CAPES / Micro-organismos endofíticos são definidos como aqueles que vivem no interior dos tecidos das plantas sem causar danos aparente ao hospedeiro. Os fungos endofíticos são importantes fontes de novos produtos naturais com atividade biológica. A planta herbácea Symphytum officinale L. (Boraginaceae), conhecida como confrei, tem sido utilizada em diferentes formas terapêuticas. O objetivo desse estudo foi de avaliar o potencial antimicrobiano e a produção de L-asparaginase por fungos endofíticos do confrei (S. officinale L.). O material vegetal foi coletado no Centro de Educação e Formação em Medicina Popular (CEFOMP), Paulista-PE, e processada no Departamento de Micologia. A identificação dos endofíticos foi realizada por taxonomia clássica e os isolados que mostraram melhor desempenho nos testes antimicrobiano e enzimático foram identificados utilizando ferramentas da Biologia Molecular. Os micro-organismos utilizados na atividade antimicrobiana foram Enterobacter aerogenes (UFPEDA 348), Mycobacterium smegmatis (UFPEDA 71), Staphylococcus aureus (UFPEDA 02), Candida albicans (URM 7095), C. luzitaniae (URM 2101) e C. parapsilosis (URM 5789), e executados através da técnica de bloco de gelose. Quanto à produção da enzima, inicialmente foi verificado sua produção em meio líquido e posteriormente caracterizadas parcialmente. Foram isolados 117 endofíticos de 105 fragmentos e 11 gêneros identificados, além de muitos serem agrupados como Mycelia sterilia. Os isolados de Penicillium apresentaram os melhores resultados frente aos testes e teve sua identificação morfológica autenticada por meio do sequenciamento do DNA. Na atividade antimicrobiana, o isolado P. citrinum R4.5 obteve o maior halo de inibição frente as bactérias S. aureus e E. aureogenes (1,3 cm). O isolado P. citrinum F2.12 obteve maior resultado na produção da enzima (0,175 U/ml) e foi selecionado para posterior avaliação de efeito e estabilidade ao pH e a temperatura. A atividade mais elevada da L-asparaginase foi observada em solução tampão Tris-HCl pH 8,6 (0,0116 U/mL) e obteve mais de 50% da sua atividade quando incubada por 30 min e 46,91% quando incubada a 1h. Apresentou a atividade máxima a 40 °C (0,092 U/ml) e foi estável por 1h, mantendo-se entre 10-13,5% de sua atividade. Já no tempo de 30 min a enzima não mostrou estabilidade. Endofíticos da S. officinale são produtores de metabólitos bioativos de potencial uso medicinal, e são indicados para futuros estudos. / Endophytic microorganisms are defined as those who live inside plant tissues without causing apparent damage to the host. The endophytic fungi are important sources of new natural products with biological activity. The Symphytum officinale herbaceous L. (Boraginaceae), known as comfrey, has been used in various therapeutic methods. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial potential and the production of L-asparaginase by endophytic fungi from comfrey (S. officinale L.). The plant material was collected in the Center for Education and Training in Popular Medicine (CEFOMP), Paulista-PE and processed in the Department of Mycology. The identification of endophyte was performed by classical taxonomy and isolates that showed improved performance in the enzymatic and the antimicrobial tests were identified using molecular biology tools. The micro-organisms used in antimicrobial activity were Enterobacter aerogenes (UFPEDA 348), Mycobacterium smegmatis (UFPEDA 71), Staphylococcus aureus (UFPEDA 02), Candida albicans (URM 7095), C. luzitaniae (URM 2101) and C. parapsilosis (URM 5789), and run through agarose block technique. Regarding the production of the enzyme, was initially verified their production in a liquid medium and subsequently partially characterized. 117 endophytic 105 fragments and 11 genera identified were isolated, and many are grouped as Mycelia sterilia. The Penicillium isolates showed the best results in view of tests and had a certified morphological identification through DNA sequencing. The antimicrobial activity, the isolated P. citrinum R4.5 had the highest inhibition zone front bacteria S. aureus and E. aureogenes (1.3 cm). The isolated P. citrinum F2.12 obtained result in higher production of enzyme (0.175 U / ml) and was selected for further evaluation of effects and stability to pH and temperature. The highest activity of L-asparaginase was observed in solution pH 8.6 Tris-HCl buffer (0.0116 U / ml) and obtained more than 50% of its activity when incubated for 30 min and 46.91% when incubated with 1h. Showed the maximum activity at 40 ° C (0.092 U / ml) and was stable for 1h, keeping between 10 to 13.5% of its activity. In the 30-min showed the enzyme stability. Endophytic S. officinale are producers of bioactive metabolites of potential medical use and are suitable for future studies.

Orientador: Ladaslav Sodek / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T18:56:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mori_TerezinhaElizabethSoares_M.pdf: 5907627 bytes, checksum: 85951da65107d90abbde479dec26f06c (MD5) Previous issue date: 1981 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi obter informações quanto a contribuição da folha e da vagem no fornecimento de nitrogênio reduzido para a síntese de aminoácidos e proteínas na semente da planta de soja. Para esse estudo foi determinada a atividade das enzimas redutase de nitrato, glutamina sintetase e glutamato desidrogenase na folha, vagem e semente. Essas enzimas estão envolvidas na redução e assimilação de nitrogênio nesses órgãos. Foi determinado também o conteúdo de nitrogênio 'alfa¿-amino e de proteína. Inicialmente foi realizado um experimento para verificar qual sistema folha-vagem-semente seria o mais adequado para as determinações bioquímicas. Isso foi feito através da remoção de diferentes folhas e/ou frutos da planta no início da floração para verificar a contribuição de cada folha para o desenvolvimento das vagens e sementes inseridas no nó adjacente e nos nós localizados acima ou abaixo no caule. Apenas os órgãos situados no '5 GRAU¿, '6 GRAU¿, '7GRAU¿ e '8 GRAU¿ nós foram estudados, os órgãos situados no '1 GRAU¿, '2 GRAU¿, '3 GRAU¿, '4 GRAU¿ e '9 GRAU¿ nós foram removidos da planta no início da floração. Os resultados mostraram que a folha no '7 GRAU¿ e '8 GRAU¿ nós além da nutrição dos seus frutos são capazes de nutrir quando necessário, os frutos do '5 GRAU¿ e '6GRAU¿ nós... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The objective of the present investigation was to obtain information on the relative contribution of the leaf and pod of the soybean plant in the supply of reduced nitrogen for the synthesis of amino acids and protein in the seed. For this study, the activities of nitrate reductase, glutamine synthetase and glutamate dehydrogenase were determined in the leaf, pod and seed during the fruit development stage. These enzymes are involved in the reduction and assimilation of nitrogen in the plant. The amino acid and protein contents were also determined. An experiment was carried out to determined which system of leaf-pod-seed would be most adequate for this investigation. The contribution of each leaf to the development of the pods and seed of the same node and of those on nodes immediately above or below was investigated by removal of different leaves and/or fruits on flower initiation. Only those organs situated on the '5 POT. Th¿, '6 POT. Th¿, '7 POT. Th¿ and '8 POT. Th¿ nodes were used, while those of the '1 POT. St¿, '2 POT. Nd¿, '3 POT. Rd¿ and '4 POT. Th¿ nodes were removed on flowering. The results showed that the leaves of the '7 POT. th¿ and '8 POT. Th¿ nodes can, as well as supplying their own fruits, supply the fruits of the '5 POT. Th¿ and '6 POT. Th¿ nodes... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Biologia Vegetal

Orientador : Paulo Arruda / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T18:19:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sakata_RoselyTiemi_M.pdf: 4113935 bytes, checksum: 8e42d8011dd8727f1bd8af11c150c3cc (MD5) Previous issue date: 1989 / Resumo: O uso de produtos químicos para o controle de ervas daninhas é uma técnica bastante aplicada na agricultura. Para muitas culturas ainda não há um herbicida seletivo adequado, duas alternativas têm sido utilizadas para solucionar este problema. A primeira é o desenvolvimento de um herbicida seletivo ou de uma nova formulação para um já existente. Esse processo, entretanto é prolongado e caro, pois o desenvolvimento de um produto novo requer testes sofisticados de milhares de compostos. A segunda alternativa é a seleção de plantas tolerantes a um determinado produto químico já existente, que possa ser utilizado como herbicida não seletivo. O estudo da tolerância ¿in vivo¿ para caracterização e isolamento dos produtos metabólicos de plantas inteiras, após a aplicação do herbicida, é dificultado, pois este sofre influência de várias funções fisiológicas (absorção, translocação, tempo, etc.) que devem ser considerados. Uma alternativa é a utilização de técnicas de cultura de células e tecidos, as quais possibilitam uma melhor identificação e seleção de genótipos tolerantes a herbicidas. Além disso, estas técnicas permitem o estudo de sistemas enzimáticos, fornecendo desta forma dados sobre o sítio primário de ação herbicida. O presente trabalho teve como objetivo estudar o efeito de um herbicida não seletivo, o glifosato, em cultura de tecidos de milho. O glifosato tem sido largamente utilizado como um herbicida não seletivo. É rapidamente translocado nas plantas e é biodegradado por microrganismos do solo. Atua ao nível molecular através da inibição da biossíntese dos aminoácidos aromáticos, interferindo na atividade da enzima 5-enolpiruvil shiquimato 3-fosfato sintetase (EPSPs). Para o estudo do glifosato fora utilizados calos embriogênicos friáveis das linhagens de milho Cat100-1, Cat100-6 e TuxMo-1 (Banco de Germoplasma da UNICAMP. Depto. de Genética e Evolução). A escolha da concentração subletal do glifosato a ser utilizada para a seleção produziu um decréscimo na taxa de crescimento dos calos, entre 70-90%, quando submetidos a um gradiente de concentração de glifosato variando de 0 a 2,4 mM. De acordo com os resultados obtidos, os calos das linhagens Cat100-1, Cati00-6 e TuxMo-1 foram selecionados na concentração de 0,6; 2,4 e 0.3mM respectivamente. Foram realizadas 10 subculturas na presença das dosagens subletais para cada linhagem. Os calos selecionados bem como os controles foram submetidos a uma série de 10 subculturas na ausência de glifosato e a seguir foram novamente submetidos a um gradiente de concentração de glifosato variando de 0 a 4,8mM. Os calos selecionados e controles para cada linhagem apresentaram diferenças significativas com respeito à taxa de crescimento. A comparação do efeito de glifosato em calos embriogênicos friáveis das três linhagens de milho apresentou uma resposta de tolerância diferencial entre as linhagens estudadas, onde a linhagem Cat100-6 demonstrou uma maior tolerância nos testes utilizados e a linhagem TuxMo-1 foi a que apresentou uma maior redução no crescimento na presença do herbicida. Plântulas de milho das mesmas linhagens dos calos foram cultivadas em solução nutritiva contendo diferentes concentrações do herbicida glifosato. Considerando os parâmetros analisados (comprimento da radícula, peso seco da parte aérea e peso seco da raiz), verificou-se que a linhagem Cat100-6 é a mais tolerante ao herbicida glifosato do que as linhagens Cat100-1 e TuxMo-1, que apresentaram comportamento semelhante. Estes resultados demonstraram que a utilização da técnica de cultura de tecidos para a seleção ¿in vitro¿ de mutantes tolerantes ao glifosato mostrou ser eficiente na seleção de calos de milho. Os mesmos apresentaram uma boa repetibilidade na resposta ao herbicida quando plântulas das mesmas linhagens de calos foram submetidas ao tratamento com glifosato. Isto demonstrou que os dois sistemas são capazes de discriminar genótipos quanto suscetibilidade/tolerância ao glifosato. Foram realizados estudos quanto à capacidade de absorção do glifosato e também quanto às propriedades da enzima alvo (EPSPs). Calos controles e tolerantes de cada linhagem apresentaram uma rápida absorção do herbicida após uma hora de incubação em meio contendo glifosato-C, atingindo um pico a 1,5 horas, diminuindo em seguida. Os resultados obtidos sugerem que não houve alteração no mecanismo de absorção entre as subpopulações controle e tolerantes das três linhagens. A atividade da enzima alvo do glifosato, 5-enolpiruvil shiquimato 3-fosfato sintetase (EPSPs), foi determinada para as subpopulações controles e tolerantes das três linhagens de calos através do método de liberação de Pi e pelo método de Cromatografia líquida de alta resolução (HPLC). Somente o método de HPLC demonstrou uma diferença da atividade específica da EPSPs de 2,08X para a subpopulação tolerante da linhagem Cat100-6. 1,4X para os calos tolerantes da linhagem TuxMo-1. Não foi observado diferenças na atividade da enzima entre os calos tolerantes e controles da linhagem Cat100-1. Com os resultados bioquímicos realizados não foi possível determinar com precisão o mecanismo de tolerância dos calos selecionados / Abstract: The use of chemical products for weed control is a widely employed technique in agriculture. In the case of many cultures there is not an adequate selective herbicide yet. However, there are two alternatives that can be used to solve this problem. The first one is the development of a selective herbicide or a new composition for a already existing herbicide, but this process takes a long time and is expensive since the development of a new products requires sophisticated tests of many compounds. The second alternative is the selection of plants that are tolerant to a certain already know chemical product that could be used as non-selective herbicide. The study of "in vivo" tolerance for characterization and isolation of metabolic products from whole plants, after the use of the herbicide, is difficult because of the influence of many physiological functions (absorption. translocation, time, etc.) that have be considered. One alternative is the use of tissue and cell culture techniques that allow the study of enzymatic system, which supplies information about primary target of the herbicide action. The objective of the present study is to gather data on the effect of non-selective herbicide, glyphosate, in maize tissue culture. Glyphosate has been largely employed as a non-selective herbicide. It is quickly translocated in the plants and is biodegradated by the soil microorganisms. It acts at the molecular level by the inhibition of the aromatic amino acids biosynthesis and interferes with the activity of the 5-enolpyruvil shikimate 3-phosphate synthase (EPSPs) enzyme. Friable embryogenic calli from the maize inbred line Cat100-1, Cat100-6 and tuxMo-1 were used in the study of the glyphosate effect. The maize inbred lines were obtained from the Maize Genetics Laboratory - UNICAMP. The sublethal concentration of the herbicide to be used for selection was determined as the one that permitted 70-90% gradient concentrations from 0 to 2,4 mM. According to the obtained results, calli from inbred lines Cat100-1, cat100-6 and TuxMo-1 were selected for the herbicide concentrations of 0,6, 2,4 and 0,3 mM respectively. Ten subcultures were done in the presence of sublethal dosages for each inbred line. The selected calli, as well as the controls, were submitted to a series of ten subcultures in the absence of glyphosate. Afterwards, they were submitted once again to a glyphosate gradient which concentration varied from 0 to 4.8 m. The selected calli and the controls of each inbred lines used. The inbred line Cat100-6 was the most tolerant one and the inbred line TuxMo-1 was the one that presented the biggest growth reduction in the herbicide presence. Maize seedlings from Cat100-1, Cat100-6 and TuxMo-1 were cultivated in nutritive solution containing different glyphosate concentrations. Considering the analysed parameters (root length, root dry weight and leaves dry weight), it was observed that the inbred line Cat100-6 is the more tolerant to glyphosate than the inbred lines Cat100-1 and TuxMo-1, which showed similar behavior. These results demonstrated that the use of tissue culture techniques for the ¿in vitro¿ selection of glyphosate tolerant mutants is efficient for the selection of maize calli. The maize calli showed a good repetitiveness response to the herbicide when seedlings of the same inbred lines as the calli were submitted to glyphosate treatment. This results demonstrated that the differences found among the inbred lines should be due to genetic: factors. Studies regarding the glyphosate absorption capacity and the EPSP synthase target enzyme properties were performed. Control and tolerant calli from each line presented a rapid herbicide absorption after one hour of incubation in medium containing glyphosate - C. The peak was achieved within one hou and a half, falling afterwards. This behavior was observed for the inbred lines (controI and tolerant calli). The results showed that there was no alteration in the absorption mecanism among the control and tolerant subpopulations of the three inbred lines. The activity of the glyphosate target enzyme EPSP synthase was determined for the control and tolerant subpopulations of the three inbred lines. The methods used were Pi liberation and HPLC. Only the HPLC method showed a difference in the EPSP synthase activity of 2.08x for the tolerant subpopulation of the inbred line Cat100-6 and of 1.4x for the tolerant calli of the inbred line TuxMo-1. It was not observed differences in the enzyme activity fot the tolerant and control calli of the inbred line Cat100-1. Biochemical studies did not determine with precision the tolerance mecanism of the selected calli / Mestrado / Genetica / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Mary Anne Heidi Dolder / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T21:22:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rossetto_EsteladeSousa_M.pdf: 4167185 bytes, checksum: 3b1892272dc3227a1ffb4e60b4d11e7b (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: Xerophyta plicata Spreng. (Velloziaceae) é uma Angiosperma brasileira tolerante à dessecação, que ocorre em afloramentos do RJ ao RN. Embora não perca as folhas nos períodos elas ficam amarelas, encolhidas, dobradas e torcidas. Quando a agua volta, as folhas se distendem e voltam a ficar verdes. As células do mesofilo sobrevivem aos ciclos de saída e de entrada de agua por meio de alterações ultra-estruturais responsaveis pela manutenção da viabilidade celular. Essas alterações parecem processos degradativos limitados, que mantém remanescentes das estruturas vitais. A utilização de solução fixadora não aquosa previne a ocorrência de artefatos de técnica nas folhas secas, que são muito reativas à agua¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Xerophyta plicata Spreng.(Velloziaceae) is a Brazilian desiccation tolerant Angiosperm that occurs in granitic rock outcrops from Rio de Janeiro State to Rio Grande do Norte State. Although leaves do not fall during the drought periods, they become yellow, shrinked, folded and twisted. When water is available again, leaves distend and retake the green colour. Mesophyll cells survive the water inlet and outlet cycles by means of ultrastructural changes that are responsable for maintaining their viability. These changes are similar to limited degradative processes in which remnants of the vital structures are preserved. The use of a non-aqueous fixative solution for dry tissues prevent the occurrency of fixation artefacts in these that are very reactive to water....Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Biologia Vegetal