Orientador: Carmen Silvia Bertuzzo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-10T08:44:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paiva_AnaCarolinaZimianide_M.pdf: 1547364 bytes, checksum: 2eadb25c166c68e374144663ac431576 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A asma atópica é uma doença com prevalência média na população brasileira de 20%. Estima-se que 60% dos casos de asma sejam intermitentes ou persistentes leves, 25% a 30% moderados e 5% a 10% graves. O receptor beta-2-adrenérgico, quando ativado, provoca o relaxamento da musculatura lisa das vias aéreas. Os polimorfismos Arg -> Gly 16 (46 A->G) e Gln -> Glu27 (79C->G) do gene ADRB2 provocam uma mudança nos aminoácidos situados ao lado do sítio ligante do receptor. Estes receptores não são responsáveis pela presença da asma, mas agem como moduladores de gravidade da doença. Desse modo, o estudo dos polimorfismos do gene ADRB2 é muito importante para prever a resposta ao uso de broncodilatadores beta-adrenérgicos no tratamento da asma atópica. Os objetivos do trabalho foram: 1) Determinar o genótipo de pacientes asmáticos e voluntários sadios quanto aos polimorfismos Gln27, Glu27, Arg16 e Gly16. 2) Verificar se existe correlação entre o genótipo estudado e a gravidade da asma. Foram genotipados 87 pacientes com asma atópica, de acordo com o critério GINA, e 141 voluntários sadios. Após a extração de DNA do sangue periférico foi efetuada PCR-alelo específica (ARMS). No método de ARMS-PCR é utilizado um primer comum a todas as reações e outro alelo específico,isto é, apenas uma base nitrogenada é diferente. Além disso é utilizado um par de primers como controle interno da reação. Os resultados encontrados foram analisados através do teste de qui-quadrado. Amostra de pacientes quanto ao códon 16 não está em equilíbrio de Hardy-Weinberg, entretanto a amostra controle está. No códon 27, ambas as amostras estão em desequilíbrio. A diferença na freqüência dos alelos no códon 16 entre os pacientes e o grupo controle foi significativa, enquanto no códon 27 não. Na comparação entre os diferentes genótipos no códon 16 dos asmáticos e do grupo controle foi observada diferença significativa, modtrando que o alelo Arg 16 pode estar envolvido na etiologia da asma. Comparando-se os pacientes com asma grave e grupo controle, foi encontrada uma diferença significativa, assim como quando comparados os pacientes com moderada, também sendo encontrada diferença significativa quando comparados os pacientes leve. No códon 27 verificou-se diferença significativa entre os genótipos dos pacientes e voluntários sadios. Comparando-se os pacientes com asma grave e grupo controle foi encontrado uma diferença significativa, assim como quando comparados os pacientes com moderada, também sendo encontrada diferença significativa quando comparados os pacientes leve. Na verificação dos genótipos do grupo controle e do total de pacientes temos uma diferença significativa. Na comparação entre os grupos de asmáticos só tivemos diferença significativa entre o grupo de asma grave e leve. Na comparação de asma grave e moderada não tivemos diferença significativa assim como moderada e leve. Os genótipo homozigotos Arg 16 parece estar relacionada à presença da asma e homozigotos Gln 27 parecem estar associados com a gravidade da asma / Abstract: The atopic asthma is an illness with 20% of average prevalence in the Brazilian population. It?s estimated that 60% of the asthma cases are intermittent or persistent light, 25% to 30% moderate and 5% to 10% serious. The receptor beta-2-adrenergic, when activated, causes the relaxation of the aerial ways' smooth muscle. The polymorphisms Arg -> Gly 16 (46 A->G) and Gln -> Glu27 (79C->G) from the ADRB2 gene cause a change on amino acids situated beside the receptor?s linking place. These receptors are not responsible for the asthma?s occurrence, but they act as modulators of the illness? severity. In this way, the study of the ADRB2 gene's polymorphisms is very important to foresee the reply of using beta-adrenergic bronchodilators in the treatment of the atopic asthma. The objectives of the proceeding were: 1) Determinate the genotype of healthy and asthmatic voluntary patients in respect of the polymorphisms Gln27, Glu27, Arg16 and Gly16. 2) Verify if there is a correlation between the studied genotype and asthma?s severity. 87 patients with atopic asthma were genotyped, in accordance with the healthy criterion GINA, and 141 volunteers. After the extraction of peripheral blood's DNA, an specific PCR-allele (ARMS) was made. In the ARMS-PCR method, it is used a common primer for all the reactions and another specific allele, that means, only one base is different. Moreover, a pair of primers is used as internal control of the reaction. The achieved results were analyzed through the qui-square test. The patients' sample, according to codon 16, is not in Hardy-Weinberg equilibrium, while the control sample is. In codon 27, both of the samples are in disequilibrium. The difference in the frequency of alleles in codon 16 between the patients and the control group was significant, while in codon 27 not. In the comparison between the different genotypes in codon 16 of the asthmatic and the control group, significant difference was observed, showing that the Arg 16 allele can be involved in the asthma's etiology. Comparing the patients with serious asthma and the control group, significant difference was found, as well as when compared the patients with moderate, also being found significant difference when compared the patients with light. In codon 27, significant difference was verified between the genotypes of patients and healthy volunteers. Verifying the genotypes of the control group and the total of patients, we have a significant difference. In the comparison between the asthmatic groups, we only had significant difference between the serious asthma group and the light one. In the comparison between serious and moderate asthma, we didn?t have significant difference, as well as between moderate and light. The genotype homozygote Arg 16 seems to be related to the asthma's occurrence and homozygote Gln 27 seems to be associated with the asthma?s severity / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Introdução: O Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2) é uma doença crônica complexa causada pela combinação de resistência à insulina no músculo esquelético, fígado e tecido adiposo, e desregulação na secreção de insulina pelas células-beta pancreáticas. Tanto o DM2 quanto a resistência à insulina são considerados como estado de inflamação crônica pré-clínica, resultantes de mudanças na resposta imune inata. Dessa forma, polimorfismos em genes que codificam proteínas do sistema imune inato, como os receptores do tipo Toll, podem influenciar a resposta imunológica bem como desenvolvimento do DM2. Este trabalho descreve um estudo de caso-controle e uma meta-análise realizada para determinar se os polimorfismos Asp299Gly (rs4986790) e Thr399Ile (rs4986791) no gene TLR4 estão associados com DM2. Métodos: No estudo de caso-controle foram incluídos 1.684 pacientes com DM2 e 584 indivíduos não diabéticos do Brasil. A pesquisa bibliográfica foi realizada a fim de identificar os estudos que investigaram a associação entre os polimorfismos referidos no gene TLR4 e DM2. As razões de chances (RC) dos grupos foram calculadas para os modelos de herança de contraste de alelos e dominante. Resultados: No estudo de caso-controle, as frequências genotípicas e alélicas dos polimorfismos Asp299Gly e Thr399Ile diferiram entre pacientes com DM2 e indivíduos não diabéticos (p <0,05). Além disso, a presença de alelos raros desses polimorfismos foi significativamente associada com proteção para DM2, após o ajuste para etnia, sob o modelo dominante [Asp299Gly: RC = 0,68 (IC 95% 0,49- 0,94); Thr399Ile: RC = 0,65 (IC 95%,46-0,90)]. Sete estudos foram selecionados para inclusão na meta-análise. Resultados da meta-análise mostram que o polimorfismo Asp299Gly foi associado à proteção para o DM2 [RC = 0,68 (IC 95% 0,46-1,00), modelo de contraste alelo]. A estratificação por etnia revelou que ambos os polimorfismos foram associados à proteção para DM2 sob os modelos de contraste de alelos e dominante na população brasileira, mas não em europeus. Conclusões: Em nosso estudo de caso-controle, demonstramos uma possível associação entre os polimorfismos Asp299Gly e Thr399Ile no gene TLR4 e proteção para DM2. Da mesma forma, os resultados da meta-análise mostraram uma associação do polimorfismo Asp299Gly com proteção para o DM2 em todos os grupos étnicos. No entanto, após estratificação por etnia, encontramos associação entre os dois polimorfismos estudados e proteção para o DM2 em brasileiros, mas não em descendentes de europeus. Essa é a maior meta-análise que investigou os polimorfismos Asp299Gly e Thr399Ile no gene TLR4 até o presente momento. Em outras etnias são necessários novos estudos com amostras maiores para confirmar essas associações, bem como elucidar os papéis possivelmente desempenhados por esses polimorfismos na patogênese do DM2. / Introduction: Type 2 Diabetes Mellitus (T2DM) is a chronic disease caused by a complex combination of insulin resistance in skeletal muscle, liver and adipose tissue, and deregulation of insulin secretion by pancreatic beta-cells. Both T2DM and insulin resistance are considered as a state of chronic pre-clinical inflammation resulting from changes in the innate immune response. Therefore, polymorphisms in genes encoding proteins of the innate immune system, such as Toll-like receptors, can influence the immune response and the development of T2DM. This work describes a case-control study and a meta-analysis conducted to determine whether the TLR4 Asp299Gly (rs4986790) and Thr399Ile (rs4986791) polymorphisms are associated with T2DM. Methods: In the case-control study were enrolled 1684 T2DM patients and 584 nondiabetic subjects from Brazil. A literature search was conducted in order to identify studies that investigated associations between the referred TLR4 polymorphisms and T2DM. Pooled odds ratios (OR) were calculated for allele contrast and dominant inheritance models. Results: In the case-control study, genotype and allele frequencies of the Asp299Gly and Thr399Ile polymorphisms differed between T2DM patients and nondiabetic subjects (P <0.05). Moreover, the presence of the minor alleles of these polymorphisms were significantly associated with protection for T2DM, after adjusting for ethnicity, under a dominant model [Asp299Gly: OR=0.68 (95% CI 0.49-0.94); Thr399Ile: OR=0.65 (95% CI 0.46-0.90)]. Seven studies were eligible for inclusion in the meta-analysis. Meta-analysis results showed that the Asp299Gly polymorphism was associated with T2DM protection [OR=0.68 (95% CI 0.46-1.00), allele contrast model]. Stratification by ethnicity revealed that both polymorphisms were associated with T2DM protection under allele contrast and dominant models in Brazilian population but not in Europeans. Conclusions: In our case-control study, we were able to demonstrate a possible association between the TLR4 Asp299Gly and Thr399Ile polymorphisms and protection for T2DM. In agreement, the meta-analysis results showed an association of the Asp299Gly polymorphism with T2DM protection in the whole group, and associations of the Asp299Gly and Thr399Ile polymorphisms with T2DM protection in the Brazilian group but not in European descendent. This is the largest TLR4 meta-analysis performed so far. In other ethnicities further studies with large sample size are necessary to confirm these associations as well as to elucidate the roles possibly played by these polymorphisms in the pathogenesis of T2DM.

Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2015-05-21T18:13:44Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação - Matheus Filgueira Bezerra.pdf: 1273109 bytes, checksum: 6d941505fbd1fa66ae0aee92822b04dd (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-21T18:13:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação - Matheus Filgueira Bezerra.pdf: 1273109 bytes, checksum: 6d941505fbd1fa66ae0aee92822b04dd (MD5) Previous issue date: 2014-11-19 / Capes / Leucemia mielóide aguda (LMA) é uma doença de caráter multifatorial e heterogênea. Alterações somáticas no código genético recorrentes na LMA são causadas principalmente por agentes químicos e físicos nocivos ao DNA, associados a falhas nos sistemas de reparo. Pesquisas realizadas na última década sugerem que metilação aberrante e polimorfismos genéticos em genes supressores tumorais e genes do metabolismo de radicais livres podem estar envolvidos na leucemogênese. O presente estudo teve como objetivo investigar a associação entre polimorfismos nos genes TP53 codon 72, GSTT1, GSTM1 e hipermetilação da região promotora do gene BRCA1 com a leucemia mielóide aguda. Duzentos e vinte e três pacientes adultos diagnosticados com LMA e 202 indivíduos adultos são (controles) foram genotipados para polimorfismos no TP53, GSTT1 e GSTM1 e 55 pacientes com AML de novo foram avaliados para metilação no BRCA1. As frequências observadas para o TP53 foram: 33,6% ARG/ARG, 44,4% ARG/PRO e 22% PRO/PRO nos pacientes e 38,3% ARG/ARG, 48,5 ARG/PRO e 12,8% PRO/PRO nos controles. O alelo PRO foi associado à susceptibilidade ao desenvolvimento de LMA no modelo genético recessivo (p=0.0198), no co-dominante (p=0.0291) e no alélico (p=0.0438). O polimorfismo do GSTT1 foi observado em 23% dos pacientes e em 27% dos controles (p=0,297). O polimorfismo do GSTM1 foi observado em 45% dos pacientes e em 43% dos controles (p=0,573) e a co-ocorrência dos dois polimorfismos foi observada em 12% dos casos e 8,5% dos controles (p=0.286). Nenhuma associação foi encontrada entre os polimorfismos nos genes GSTs e LMA. O gene BRCA1 não foi encontrado hipermetilado em nenhum dos 55 pacientes analisados. Os resultados do presente estudo apontam que o polimorfismo do TP53 parece favorecer a leucemogênese. Em contrapartida, os polimorfismos no GSTT1, GSTM1 e metilação do BRCA1 parecem não ter relevância na leucemia mielóide aguda.

Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2015-05-21T18:40:29Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação - Matheus Filgueira Bezerra.pdf: 1273109 bytes, checksum: 6d941505fbd1fa66ae0aee92822b04dd (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-21T18:40:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação - Matheus Filgueira Bezerra.pdf: 1273109 bytes, checksum: 6d941505fbd1fa66ae0aee92822b04dd (MD5) Previous issue date: 2014-11-19 / CAPES / Leucemia mielóide aguda (LMA) é uma doença de caráter multifatorial e heterogênea. Alterações somáticas no código genético recorrentes na LMA são causadas principalmente por agentes químicos e físicos nocivos ao DNA, associados a falhas nos sistemas de reparo. Pesquisas realizadas na última década sugerem que metilação aberrante e polimorfismos genéticos em genes supressores tumorais e genes do metabolismo de radicais livres podem estar envolvidos na leucemogênese. O presente estudo teve como objetivo investigar a associação entre polimorfismos nos genes TP53 codon 72, GSTT1, GSTM1 e hipermetilação da região promotora do gene BRCA1 com a leucemia mielóide aguda. Duzentos e vinte e três pacientes adultos diagnosticados com LMA e 202 indivíduos adultos são (controles) foram genotipados para polimorfismos no TP53, GSTT1 e GSTM1 e 55 pacientes com AML de novo foram avaliados para metilação no BRCA1. As frequências observadas para o TP53 foram: 33,6% ARG/ARG, 44,4% ARG/PRO e 22% PRO/PRO nos pacientes e 38,3% ARG/ARG, 48,5 ARG/PRO e 12,8% PRO/PRO nos controles. O alelo PRO foi associado à susceptibilidade ao desenvolvimento de LMA no modelo genético recessivo (p=0.0198), no co-dominante (p=0.0291) e no alélico (p=0.0438). O polimorfismo do GSTT1 foi observado em 23% dos pacientes e em 27% dos controles (p=0,297). O polimorfismo do GSTM1 foi observado em 45% dos pacientes e em 43% dos controles (p=0,573) e a co-ocorrência dos dois polimorfismos foi observada em 12% dos casos e 8,5% dos controles (p=0.286). Nenhuma associação foi encontrada entre os polimorfismos nos genes GSTs e LMA. O gene BRCA1 não foi encontrado hipermetilado em nenhum dos 55 pacientes analisados. Os resultados do presente estudo apontam que o polimorfismo do TP53 parece favorecer a leucemogênese. Em contrapartida, os polimorfismos no GSTT1, GSTM1 e metilação do BRCA1 parecem não ter relevância na leucemia mielóide aguda.

Submitted by Isaac Francisco de Souza Dias (isaac.souzadias@ufpe.br) on 2016-06-09T18:09:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação biblioteca CD - corrigida.pdf: 1306281 bytes, checksum: f6269bdbfa9eb44850607213a01cdaa0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T18:09:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação biblioteca CD - corrigida.pdf: 1306281 bytes, checksum: f6269bdbfa9eb44850607213a01cdaa0 (MD5) Previous issue date: 2015-02-12 / FACEPE / Cromossomos B foram descritos para a subespécie de gafanhoto Xyleus discoideus angulatus e embora alguns estudos tenham proposto a possível origem do cromossomo B na subespécie, pouco se conhece a respeito da sua composição molecular. Neste trabalho, uma análise citogenética foi realizada nos cromossomos supernumerários do gafanhoto X. d. angulatus em distintas populações do nordeste do Brasil, para obter um melhor conhecimento acerca das características destes cromossomos e de sua dinâmica evolutiva em diferentes populações. Para isso, um levantamento populacional de cromossomos B em X. d. angulatus foi realizado, assim como a medição cromossômica destes elementos e o mapeamento físico do DNA C0t-1, de sequências teloméricas e de cromossomos B no cariótipo de indivíduos com B. Os resultados mostraram que houve uma alta prevalência (44,44%) de cromossomos B em uma população de Juazeiro do Norte – CE, além de mostrar que alguns cromossomos B eram menores em algumas populações. A técnica de FISH apresentou padrões semelhantes para sondas de C0t-1 em todos os indivíduos, além disso, as sondas teloméricas e de cromossomos B obtidas por microdissecção mostraram variações na sua distribuição. É provável que tenham ocorrido mecanismos de mutação e acumulação dos elementos supernumerários, que deram origem à sua alta prevalência. A presença de quatro morfotipos de cromossomos B em X. d. angulatus evidencia uma variação da composição molecular destes elementos ao longo da evolução. / B chromosomes was described for the grasshopper subspecie Xyleus discoideus angulatus and, although some studies have suggested the possible origin of the B chromosomoes in this subspecies, little is known about its molecular composition. In this study, cytogenetic analysis was performed in supernumerary chromosomes of grasshopper X. d. angulatus in distinct populations of northeastern Brazil, in order to get a better understanding of the characteristics of these chromosomes and their evolutionary dynamics in different populations. For this purpose, a populational survey of B chromosomes in X. d. angulatus was performed, as well as chromosomal measurement of these elements and the physical mapping of DNA C0t-1, telomeric and B chromosomes sequences in the karyotype of individuals with B. Results showed a high prevalence (44,44%) of B chromosomes in a population of Juazeiro do Norte - CE, and also that some B chromosomes were smaller in some populations. The FISH approach showed similar patterns for C0t-1 probes in all subjects, in addition, telomeric and B chromosome probes obtained by chromosome microdissection showed variations in their distribution. It is likely to have occurred mutation mechanisms and accumulation of supernumerary elements, giving rise to its high prevalence. The presence of four B chromosomes morphotypes in X. d. angulatus shows a variation of the molecular composition of these elements throughout evolution.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-07-04T22:01:35Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Fabrício Andrade Martins Esteves.pdf: 2070591 bytes, checksum: cd3f61e4b208e5062bd0ee88b718cf5f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-04T22:01:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Fabrício Andrade Martins Esteves.pdf: 2070591 bytes, checksum: cd3f61e4b208e5062bd0ee88b718cf5f (MD5) Previous issue date: 2015-09-09 / A Doença Celíaca (DC) trata-se de uma enteropatia imuno-mediada causada pela intolerância ao glúten. Através da ativação de linfócitos T presentes na lâmina própria da mucosa intestinal em indivíduos geneticamente susceptíveis, são desencadeados mecanismos inflamatórios regulados pelo balanço entre citocinas de perfil Th1, como o interferon gama (IFNg), o fator de necrose tumoral alfa (TNF-α), a interleucina 6 (IL-6), a interleucina 15 (IL-15) e interleucina-18 (IL-18) e outras reguladoras tais como TGFβ e interleucina-10 (IL-10). Em consequência ao mecanismo inflamatório desencadeado, a doença celíaca cursa com mal- absorção e diarréia secundária à diminuição da superfície de absorção da mucosa do intestino delgado. Uma vez que o grau e o tipo de alterações que sofre a mucosa intestinal depende do padrão de citocinas e de suas concentrações locais, o presente estudo avaliou a possível relação entre os polimorfismos nas regiões promotoras dos genes das IL-10, IL-6 e TNF-α na imunopatogênese da Doença celíaca em uma população de pacientes italianos. Participaram do estudo 204 indivíduos italianos portadores de doença celíaca (subdivididos em 96 indivíduos HLA-DQ2+ e 96 indivíduos HLADQ8+) e 96 indivíduos saudáveis (grupo controle). Foram realizadas genotipagens para as regiões promotoras dos genes da IL-10 (posições -1082G>A, -819C>T e - 592C>A), IL-6 (posição -174G>C) e TNF- alfa (posição -308G>A). Foram estabelecidas as frequencias alélicas, genotípicas e haplotípicas dos grupos. Com intervalo de confiança de 95%, após a aplicação do teste de Qui-Quadrado, diferenças de frequencias que apresentaram valores de p < 5% foram consideradas estatisticamente significativas para estabelecimento da Odds Ratio (O.R.). Diferenças significativas foram observadas para o polimorfismo do TNF-α (-308 G>A) quando foram comparados os seguintes grupos celíacos DQ2-positive com controles (OR = 0.45, p = 0.0002), celíacos DQ8-positivos com controles (OR = 3.55, p< 0.0001) e celíacos DQ2-positivos com celíacos DQ8-positive (OR = 0.12, p < 0.0001). Não foram observadas diferenças de frequências estatisticamente significativas para o polimorfismo da IL-6 (-174 G>C) entre celíacos e indivíduos saudáveis (p > 0.05). Também não foram observadas diferenças significativas entre as frequências dos polimorfismos da região promotora do gene da IL-10 (posições - 1082G>A, -819C>T e -592C>A). A análise de haplótipos da região promotora do gene desta citocina demonstrou que, na população estudada, não houve associação que pudesse sugerir uma participação imunomoduladora da IL-10 na Doença celíaca. Contudo, por ter um caráter anti-inflamatório, a IL-10 poderia eventualmente desempenhar algum papel no tipo de forma clínica da Doença celíaca. Ou seja, indivíduos com haplótipos de baixa produção de IL-10 estariam mais susceptíveis a apresentar as formas mais graves dessa enteropatia imunomediada. Sugerimos que o polimorfismo da região promotora do gene do TNF-alfa (posição -308G>A) possa estar envolvido na imunopatogênese do mecanismo inflamatório desencadeado pela exposição alimentar ao glúten em portadores da Doença celíaca. / Celiac disease (CD) it is an immune-mediated enteropathy caused by intolerance to gluten, a family of proteins in wheat and various grains. Through the activation of T lymphocytes present in the lamina propria of the gut mucosa in genetically susceptible individuals are triggered inflammatory mechanisms regulated by the balance between Th1 cytokines such as interferon gamma (IFNg), Tumor necrosis factor (TNF-α), interleukin-6 (IL-6) interleukin 15 (IL-15) and interleukin-18 (IL-18) and other regulatory and TGFb such as interleukin-10 (IL-10). As a result of the inflammatory mechanism triggered, celiac disease progresses with malabsorption and diarrhea secondary to decreased mucosal absorptive surface of the small intestine. Since the degree and type of changes that suffers the intestinal mucosa depends on the pattern of cytokines and their local concentrations, the present study evaluated the possible relationship between polymorphisms in the promoter regions of the genes of interleukins IL-10, IL -6 and TNF-α in the immunopathogenesis of celiac disease in a population of Italian patients. Methods: A total of 204 individuals Italian patients with celiac disease (subdivided into 96 HLA-DQ2 + individuals and 96 individuals HLA-DQ8 +) and 96 healthy subjects (control group). Genotyping was performed in the promoter regions of the genes of IL-10 (positions -1082G> A, - 819C> T and -592C> A), IL-6 (-174G position> C) and TNF-alpha (position -308G> A). The frequencies were established allelic, genotypic and haplotype of the above groups. With 95% confidence interval, after applying the chi-square test, differences in frequencies with values of p <5% were considered statistically significant for establishment of Odds Ratio (OR). Significant differences were observed for the polymorphism of TNF-α (-308 G> A) when the celiac groups DQ2-positive with controls were compared (OR = 0:45, p = 0.0002), DQ8- positive celiac with controls (OR = 3.55, p <0.0001) and celiac DQ2-positive with celiac DQ8-positive (OR = 0:12, p <0.0001). Statistically significant differences in frequencies were observed for IL-6 polymorphism (-174 G> C) from celiac and healthy individuals (p> 0.05). Also there was no difference between the frequencies of polymorphisms of the promoter region of the IL-10 gene (positions -1082G> A, -819C> T and -592C> A). The haplotype analysis of the promoter region of the gene of this cytokine showed that in the population studied, there was no association that would suggest an immunomodulatory participation of IL-10 in celiac disease. However, being an anti-inflammatory protein, IL-10 could eventually play a role in the type of clinical presentation of celiac disease. Thus, patients with IL-10 low production haplotypes could present more likely the severe forms of this immune-mediated enteropathy. We suggest that the polymorphism of TNF-alpha promoter region of the gene (position - 308 G>A) may be involved in the immunopathogenesis of nflammatory mechanism triggered by dietary exposure to gluten in patients with celiac disease.

PEREIRA, Gisnayle Ana da Silva, também é conhecida em citações bibliográficas por: SILVA, Gisnayle Ana da / Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-08-14T22:46:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Gisnayle Ana da Silva Pereira.pdf: 3581049 bytes, checksum: 0e1c269d58eb70f1e94adebbfd3193ea (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-16T18:35:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Gisnayle Ana da Silva Pereira.pdf: 3581049 bytes, checksum: 0e1c269d58eb70f1e94adebbfd3193ea (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-16T18:35:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Gisnayle Ana da Silva Pereira.pdf: 3581049 bytes, checksum: 0e1c269d58eb70f1e94adebbfd3193ea (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / CAPES / O câncer do colo do útero é um dos principais tipos de câncer no mundo, e seu desenvolvimento está associado principalmente à infecção pelo Papilomavirus humano (HPV). Embora esse tipo de infecção esteja intimamente associado à atividade sexual, a alta incidência das lesões cervicais pode estar relacionada a uma deficiência na resposta imune. Receptores Toll-like (TLRs) tem um importante papel na imunidade inata, atuando no reconhecimento de antígenos e gerando sinais para produção das citocinas pró-inflamatórias. O TLR9, atua no reconhecimento do DNA bacteriano e viral conduzindo ao recrutamento de células imunológicas para os sítios da infecção. Polimorfismos de nucleotídeo único (SNP) em TLR9 podem influenciar no aumento da susceptibilidade a diversas doenças, como, por exemplo, o câncer cervical. O presente estudo teve por objetivo identificar polimorfismos não sinônimos com potencial correlação com a infecção por HPV, assim como avaliar efeitos estruturais e funcionais ocasionados por essas mutações em TLR9 através de ferramentas in silico. Análises para 5 nsSNPs da TLR9 foram realizadas por PCR-RFLP em amostras cervicais de 57 pacientes atendidas nas Unidades de Saúde da Família (SUS, Olinda – PE). Adicionalmente, para determinar como SNPs não sinônimos (nsSNPs) podem afetar a estrutura molecular e a função de TLR9, uma análise de nsSNPs existentes para TLR9 foi realizada e apenas nsSNPs que possuíam variação no grau de hidrofobicidade maior ou igual a 50% foram utilizados para análise preditiva do efeito estrutural e funcional através de 16 algoritmos. A metodologia para PCR-RFLP para os polimorfismos 7021T>G (Met85Arg), 7191G>A (Glu115Gln), 7351C>T (Ala168Val), 7986G>T (Asp380Tyr), 8159G>T (Met347Ile) foi desenhada através de bioinformática. A análise molecular demonstrou que para TR9 8159G>T, o alelo T pode estar associado com lesões cervicais (p=0.0005). Em relação à predição computacional, 18 nsSNPs foram encontrados com alto impacto funcional/estrutural para a TLR9, sendo 12 nsSNPs localizados na região de reconhecimento do patógeno. Através do nosso estudo, descobrimos polimorfismos que podem ter alta correlação com doenças causadas por agentes patogênicos, de acordo com a previsão dos impactos estruturais e funcionais através de polimorfismo deletério não sinônimo na molécula de TLR9. / Cervical cancer is among the main types of cancer of higher incidence in the world. It is associated mainly with human papillomavirus (HPV) infection. Although this type of infection is closely associated with sexual activity, the high incidence of cervical lesions may be also related to a deficiency in the immune response. Toll-like Receptors (TLRs) play an important role in innate immunity, acting in the recognition of antigens and the generation of signals that produce proinflammatory cytokines. TLR9 operates in the recognition of bacterial and viral DNA leading the recruitment of immune cells to the infection sites. Therefore, single nucleotide polymorphisms (SNPs) in TLR9 could influence the increased susceptibility to many diseases, for example, cervical cancer. This study aimed to identify non-synonymous SNPs (nsSNPs) with potential correlation with HPV infection, also evaluating structural and functional effects caused by these mutations in TLR9 through computational analysis. Evaluation of 5 nsSNPs in TLR9 was performed by PCR-RFLP in cervical samples of 57 patients treated in the Family Health Units (SUS, Olinda - PE). To determine how nsSNPs may affect the molecular structure and function of TLR9, a computational analysis was performed, and only nsSNPs with of hydrophobicity variation degree equal or greater than 50% were used for predictive analysis of structural and functional effect through 16 algorithms. The PCR-RFLP test for 7021T> G (Met85Arg), 7191G> A (Glu115Gln), 7351C> T (Ala168Val), 7986G> T (Asp380Tyr), 8159G>T (Met347Ile) was determined through by bioinformatics approaches. Molecular analysis showed that T allele of TR9 8159G> T may be associated with cervical lesions (p=0.0005). Regarding the computational prediction, 18 nsSNPs were found with high functional/structural impact for TLR9, 12 nsSNPs located in pathogen recognition region. Through our study, we found polymorphisms that may have high correlation with diseases caused by pathogens, according to the prediction of structural and functional impacts through deleterious polymorphism not synonymous in TLR9 molecule.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-21T22:46:55Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Joana D’arc Rozendo dos Santos.pdf: 2832084 bytes, checksum: 98dea1008c46aecb8db1bf23fc46be2e (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-28T22:43:00Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Joana D’arc Rozendo dos Santos.pdf: 2832084 bytes, checksum: 98dea1008c46aecb8db1bf23fc46be2e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-28T22:43:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Joana D’arc Rozendo dos Santos.pdf: 2832084 bytes, checksum: 98dea1008c46aecb8db1bf23fc46be2e (MD5) Previous issue date: 2016-02-26 / CAPES / FACEPE / O câncer de colo do útero, o quarto tipo mais comum entre as mulheres brasileiras, é precedido por lesões epiteliais, classificadas como neoplasia intraepitelial cervical (CIN) de grau I, II, ou III, normalmente associadas com infecção genital pelo papilomavírus humano (HPV). Porém, os elementos envolvidos no prognóstico da infecção por HPV ainda estão pouco esclarecidos. O óxido nítrico (NO), um gás solúvel envolvido em processos de vasodilatação, neurotransmissão e imunidade, é produzido a partir da ação de 3 isoformas da enzima óxido nítrico sintase (NOS), sendo a endotelial (eNOS) uma das moléculas envolvidas com o câncer. No entanto, investigações sobre o efeito de mutação na eNOS no câncer ainda geram resultados conflitantes, com poucos estudos relacionando essas diferenças genéticas com CIN ou câncer cervical. No presente estudo, os polimorfismos 894G>T e VNTR 4b4/a forma investigados por PCR em amostras de mulheres atendidas em USFs de Olinda – PE. Os dados foram correlacionados com os aspectos de citologia oncótica, infecção por HPV, assim como genótipos de HPV de alto risco. Amostras de DNA de sangue de 94 pacientes atendidas em unidades de atenção primária foram avaliadas, e os dados analisados em relação ao tipo de lesão cervical para determinar o efeito do polimorfismo da eNOS na susceptibilidade à infecção por HPV. A distribuição dos polimorfismos de eNOS 894G>T e VNTR 4b/a apresentou maior frequência para os genótipos G/G (64,9%) e 4b/4b (67%), respectivamente. Apenas genótipo eNOS 894 T/T poderia estar associado à lesão cervical (p=0,0018), enquanto o genótipo VNTR 4a/4a não foi encontrado nesta população. Não houve associação entre os polimorfismos de eNOS com a infecção pelo HPV, HPV de alto risco ou vaginose bacteriana. No entanto, o haplótipo G/T+4a/4b apresentou OR de 5,3 para vaginose bacteriana (95% CI 0.76-37.1), enquanto T/T+4b/4a mostrou OR de 5,0 para infecção por HPV (95% CI 0.11-220) e para 1,8 lesões cervicais (95% CI 0.04-79.5). A combinação dos alelos T+4a apresentaram valores de OR para infecção por HPV de 3,0 (95% CI 0.07-115) e lesões cervicais 1,29 ( 95% CI 0.03-53.6). Os resultados indicam polimorfismos na eNOS podem influenciar na resposta imunológica do organismo contra o HPV e no surgimento das lesões cervicais. Estudos adicionais serão necessários para confirmar o papel polimorfismos da eNOS na evolução das lesões cervicais para o câncer. / The cervical cancer, the fourth most common type among Brazilian women is preceded by lesions in the epithelium cervical intraepithelial neoplasia (CIN), usually associated with genital human papillomavirus (HPV). However, the elements involved in HPV infection of prognosis are still poorly understood. Nitric oxide (NO) is a soluble gas processes involved in vasodilation, neurotransmission and immunity. NO is produced from 3 isoforms of the enzyme nitric oxide synthase (NOS) and endothelial (eNOS) of the molecules involved in cancer. However, investigations of the mutation effect on eNOS in cancer also generate conflicting results, with few studies linking these genetic differences with cervical cancer. In the present study, a panel involving molecules associated with eNOS and signaling pathways related to eNOS was designed, highlighting 5 stimulatory molecules production eNOS, 4 and 38 signaling pathways related molecules eNOS. DNA from blood samples of 94 patients with and without cervical intraepithelial lesion were analyzed for the presence of two polymorphisms in the eNOS gene, G894T and intron 4VNTR (4a/b). The distribution of eNOS 894G>T and VNTR 4b/a polymorphisms showed higher frequency of G/G (64.9%) and 4b/4b (67%) genotypes. No VNTR 4a/4a genotype was found in this population. Only eNOS 894 T/T genotype may be associated with cervical lesions (p = 0.0018). There was no association between polymorphisms of eNOS with HPV infection, high risk HPV or bacterial vaginosis. However, the haplotype G/T + 4a/4b showed an OR of 5.3 for bacterial vaginosis (95% CI 0.76-37.1), while T/T + 4b/4a showed an OR of 5.0 to HPV infection (95 % CI 0.11-220) and 1.8 cervical lesions (95% CI 0.04-79.5). The combination of T + 4a alleles presented OR values for HPV infection of 3.0 (95% CI 0.07-115) and cervical lesions 1.29 (95% CI 0.03-53.6). The genotype 894 T/T associated with the genotype VNTR 4b/4a can be related to HPV infection. And more studies are needed to confirm the role of eNOS polymorphism in cervical lesions.

ARAUJO, Antônio Roberto Lucena de, também é conhecido em citações bibliográficas por: LUCENA ARAUJO, Antônio Roberto / Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-08-29T20:27:44Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Jéssica Vitória Gadelha de Freitas Batista.pdf: 1325693 bytes, checksum: 4544a28b935d533b1a17b98ce4822801 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-09-10T19:36:16Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Jéssica Vitória Gadelha de Freitas Batista.pdf: 1325693 bytes, checksum: 4544a28b935d533b1a17b98ce4822801 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-10T19:36:16Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Jéssica Vitória Gadelha de Freitas Batista.pdf: 1325693 bytes, checksum: 4544a28b935d533b1a17b98ce4822801 (MD5) Previous issue date: 2017-02-14 / CNPq / A anemia falciforme (AF) é uma doença marcada por grande heterogeneidade clínica. Diante disso, muitos genes são investigados a fim de avaliar sua possível modulação no curso clínico da doença: dentre eles, o KLOTHO (KL), que está envolvido na biologia do óxido nítrico, estresse oxidativo e adesão vascular. Com o objetivo de avaliar o papel de polimorfismos em KL na clínica dos indivíduos com AF, investigamos os SNPs rs211239 (A>G) e rs685417 (G>A) e sua possível associação com algumas complicações clínicas da doença. Também investigamos os níveis de expressão de KL, para avaliar possíveis diferenças entre os genótipos dos SNPs estudados e entre as complicações clínicas analisadas. O estudo foi conduzido por comparação de grupos (casos e controles). Após análise de 703 pacientes, não foram encontradas associações do SNP rs211239 com nenhuma das complicações. Em contrapartida, os portadores dos genótipos GA e AA para o SNP rs685417 apresentaram maior frequência de crises vaso-oclusivas (p=0,006), de doença cerebrovascular (DCV) (p=0,017), maior número de complicações (p=0,029) e menor tempo para desenvolvimento de DCV (p=0,004) quando comparados aos indivíduos com genótipo selvagem (GG). No que concerne aos níveis de expressão, não foram encontradas diferenças entre os diferentes genótipos dos polimorfismos nem com as complicações. Por outro lado, houve diferença entre indivíduos com AF (HbSS) e sem AF (HbAA) (p=0,0001). Dessa forma, pôde-se perceber que os genótipos GA e AA do SNP rs685417 parecem indicar um pior prognóstico ao paciente, embora não tenham se mostrado como fator que altera os níveis de expressão. / Sickle cell anemia (SCA) is a disease characterized by high clinical heterogeneity. Therefore, many genes are investigated in order to evaluate their possible modulation in the clinical course of the disease: among them, KLOTHO (KL), which is involved in the biology of nitric oxide, oxidative stress and vascular adhesion. In order to evaluate the role of KL polymorphisms in the clinical setting of individuals with SCA, we investigated the SNPs rs211239 (A>G) and rs685417 (G>A) and their possible association with some clinical complications of the disease. We also investigated KL expression levels to evaluate possible differences between the genotypes of the studied SNPs and between the clinical complications analyzed. The study was conducted by performing a comparison of groups (cases and controls). The analysis of 703 patients showed no associations of the SNP rs211239 with any of the complications. On the other hand, patients with GA and AA genotypes for the rs685417 SNP had a higher frequency of vaso occlusive crises (p = 0.006), cerebrovascular disease (CVD) (p = 0.017), a greater number of complications (p = 0.029), and a shorter time to develop CVD (p = 0.004) when compared to individuals with wild genotype (GG). Regarding the levels of expression, no differences were found neither between the different genotypes of the polymorphisms nor with the complications. On the other hand, a notable difference was seen between subjects with SCA (HbSS) and without SCA (HbAA) (p = 0.0001). Thus, the genotypes GA and AA of the SNP rs685417 seem to indicate a worse prognosis for the patient, although they have not yet been shown as factors that change levels of expression.

Orientador: Joyce Maria Annichino-Bizzacchi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-02T08:19:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_DalvaNery_M.pdf: 16457240 bytes, checksum: efaa7db9002ceb22a6effb7c5b8cd9a2 (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O fator VII humano é uma glicoproteína dependente da vitamina K que tem a função de iniciar a coagulação sanguínea, ao formar um complexo com o fator tissular. O gene do fator VII está localizado no cromossomo 13q34, é composto por 9 exons e 8 introns, e possui 12,8 kb. A deficiência do fator VII é transmitida por herança autossômica recessiva, e os aspectos clfnicos são muito variáveis, nem sempre havendo uma correlação entre a atividade do fator VII e a tendência hemorrágica. Apenas um estudo, em 705 doadores de sangue de origem inglesa, determinou que a prevalência da deficiência de fator VII foi de 2,1%. A origem étnica da população brasileira é muito diferente, sendo altamente heterogênea e composta de imigrantes da Europa, África, Ásia e indígenas. Neste estudo a prevalência da deficiência de fator VII em 267 pacientes brasileiros acompanhados no Ambulatório de Hemostasia do Hemocentro-Unicamp, por alteração laboratorial do tempo de protrombina, ou quadro clínico hemorrágico foi de 3,7%. A análise das mutações no gene do F7 em seis pacientes não relacionados, permitiram a identificação de um defeito genético em todos os pacientes, incluindo uma nova mutação de ponto. O rastreamento das alterações moleculares foi realizado pelos métodos de SSCP e CSGE, que se mostraram complementares. O método de SSCP evidenciou um padrão anormal em dois pacientes não relacionados, referente a mutação G10828A no exon 8, levando a substituição R304Q. O CSGE revelou quatro padrões anormais referentes a três mutações no exon 8 (G10846T que corresponde a C310F; G10828A que corresponde a R304Q; e G10909A que corresponde a G331D) e uma mutação no exon 6 (G8926T que corresponde a 11405), esta a única ainda não descrita anteriormente. A atividade plasmática do fator VII varia significativamente inter e intraindividualmente. Essas variações podem ser decorrentes de fatores adquiridos e genéticos. Assim determinamos cinco polimorfismos no gene do fator VII (5'F7, IV57, R353Q, -401GIT e --402G/A), mas apesar do pequeno número de pacientes analisados, não se detectou nenhuma relação entre os genõtipos e a atividade do fator VII / Abstract: Factor VII is a vitamin K-dependent glycoprotein with a pivotal role in the initiation of the blood coagulation, following interaction with tissue factor. The Factor VII gene is located on chromosome 13q34 and is consist of nine exons and eight introns spanning 12,8Kb. Factor VII deficiency is transmitted as an autossomal recessive trait, the incidence of the disorder in the general population being 1 in 500.000. The clinical manifestations of Factor VII deficiency are variable, and there is no correlation between coagulation activity and tendency to bleed. A prevalency of 2,1% was reported for Factor VII deficiency in a series of 705 English blood donors. In the present study, the prevalence of. Factor VII deficiency based on na altered prothrombin time or hemorrhagic state 267 brazilian patients attended at the Hemostasis Ambulatory of Hemocentre at UNICAMP was 3,7%. Analysis of the Factor VII gene in six unrelated patients revealed a genetic defect in ali cases, including a new point mutation. The screening for molecular alterations was done using SSCP and CSGE, which gave complementary result.s. SSCP gave an abnormal pattern in two unrelated patients in which the mutation G10828A in the exon 8,resulted in the substituation R304Q. CSGE identified four abnormal patterns resulting from three mutations in exon 8 (G10846T corresponding to C310F; G10828A corresponding to R304Q; and G10909A corresponding to G331D) one mutation in exon 6 (G8926T corresponding to 1140S), the only one of these mutations not already described. Plasma Factor VII activity showed considerable inter-and intra-individual variation which may have resulted from acquired or genetic factors. Five polymophisms in the Factor VII gene, which can contribute to Factor VII levei variation were described (5'F7, IVS7, R353Q, -401GIT and -402G/A). However, the study of these patients with FVII deficiency demonstrated no relationship between the genotypes and Factor VII activity / Mestrado / Mestre em Farmacologia