Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-09-14Bitstream added on 2014-06-13T19:41:51Z : No. of bitstreams: 1 rabelo_sb_dr_sjc.pdf: 891440 bytes, checksum: ccb82a07266cfe393903fec2e52c87af (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O sucesso dos tratamentos endodônticos está relacionado ao correto diagnóstico das alterações pulpares, à qualidade do preparo biomecânico e da obturação dos canais radiculares, bem como à compatibilidade entre os cimentos obturadores com os tecidos adjacentes ao canal. Atualmente a busca de bom comportamento biológico destes cimentos se faz de extrema importância. O presente estudo teve como objetivo analisar a citotoxicidade e a genotoxicidade dos extratos de três cimentos endodônticos e seus efeitos sobre a expressão dos genes BMP2, ALP, RUNX2, BGLAP, OPN e DMP1 em células da polpa dental humana. Foram utilizadas células primárias de tecidos pulpares de terceiro molar com rizogênese incompleta. Cimentos endodônticos foram depositados em placas de 24 poços e armazenados a 37°C por 6 h; cada espécime foi colocado em contato com 2,7 ml de meio de cultura (DMEM-F12) e as amostras foram incubadas por 24 h, a 37°C. Extratos originais (1:1) de cada material foram diluídos em série até 1:32 e analisados quanto a citotoxicidade pelo ensaio de MTT. Após a obtenção de uma diluição que não fosse extremamente tóxica e não interferisse demasiadamente na replicação celular (subdose), foi realizado o teste de micronúcleo para avaliação da genotoxicidade dos materiais. A expressão dos genes foi verificada por RT-PCR em tempo real, em 6, 12 e 24 h. O RNA total foi isolado e retrotranscrito. Os testes de citotoxicidade indicaram que a sobrevivência celular foi afetada pelos extratos na seguinte ordem: EndoREZ > AH Plus > RoekoSeal ≥ MTA. O EndoREZ propiciou o maior número de micronúleos no ensaio de genotoxicidade. A quantificação relativa indicou que em 24 h, o AH Plus e o EndoREZ agiram de modo similar, aumentando a expressão da OPN e reduzindo a ALP; o RoekoSeal gerou expressão da OPN... / The success of endodontic therapy is related to the correct pulp and periapical alterations diagnosis; to the good biomechanical instrumentation and to the root canal sealing quality; to the compatibility between the endodontic sealers and the root canal surrounding tissues as well. Nowadays, the seeking for a sealer with good biological behavior is extremely important. The aim of this study was to analyze the cytotoxicity and the genotoxicity of three endodontic sealers and their effects on the expression of the genes BMP-2, ALP, RUNX2, BGLAP, SPP1 and DMP1 in human dental pulp cells. Primary cells from the 5th passage obtained from pulp tissue of third molar with incomplete rizogenesis were used in this study. Endodontic sealers were placed in 24 well plates and stored at 37°C for 6 hours. After that, each specimen was covered with 2.7 ml of cell culture media (DMEM-F12) and incubated afterwards at 37°C for 24 h. Original extracts (1:1) of each material were serially diluted up to 1:32 and the citotoxicity was analyzed by MTT assay. After obtaining extracts subdose, non very toxic or non interfering on cell replication, genotoxicity was evaluated by micronucleus test. The gene expression was accessed by Real Time RT-PCR, after extracts exposure of 6, 12 and 24 h. Total RNA was isolate and retrotranscribed. The citotoxicity test has showed that cell survival was affected in the following order: EndoREZ > AH Plus > Roeko Seal ≥ MTA. EndoREZ has caused the highest score in micronucleus assay. Relative quantification indicated that at 24 h, AH Plus and EndoREZ increased OPN and reduced ALP; RoekoSeal has caused decreasing OPN... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-03-14Bitstream added on 2014-06-13T19:20:41Z : No. of bitstreams: 1 guinesi_as_dr_arafo_parcial.pdf: 638138 bytes, checksum: 68dfeb59e83161f4081914cf9825438f (MD5) Bitstreams deleted on 2015-06-25T13:01:10Z: guinesi_as_dr_arafo_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-25T13:03:27Z : No. of bitstreams: 1 000719748_20160314.pdf: 677818 bytes, checksum: ff64dbedbe91a1b41ce6096f0dc243fe (MD5) Bitstreams deleted on 2016-03-14T11:16:21Z: 000719748_20160314.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-14T11:17:03Z : No. of bitstreams: 1 000719748.pdf: 1314656 bytes, checksum: f277f8042d0a54dc763b6dfdd626a4d1 (MD5) / O objetivo do presente estudo foi avaliar a porcentagem de guta-percha, cimento endodôntico e falhas na obturação dos canais radiculares, usando as técnicas de cone único e condensação lateral ativa, após inserção de cimento endodôntico por meioou do próprio cone de guta-percha, ou de lima endodôntica, ou de lentulo. Sessenta canais radiculares de molares inferiores foram instrumentados com limas ProTaper Universal e divididos em 2 grupos: grupo I- Canais obturados pela técnica da condensação lateral ativa; grupo II- Canais obturados pela técnica do cone único. Cada grupo foi dividido em 3subgrupos (A, B e C), de acordo com o modo de introdução do cimento endodôntico no início da obturação: A-Por meio do próprio cone de guta-percha principal; B- Por meio de lentulo; C-Por meio de lima endodôntica. As raízes foram seccionadas a 2, 4 e 6mm do ápice radicular, fotografadas em microscópio digital e as imagens transferidas para o programa Image Tool 3.0, para mensuração das áreas de guta-percha, cimento endodôntico e falhas. A análise estatística dos resultados foi realizada por meio dos testes ANOVA, Kruskall-Wallis, Dunn e Mann-Whitney. Observamos que não houve diferença estatística significante na porcentagem de guta-percha, cimento endodôntico e falhas na técnica da condensação lateral ativa. Com a técnica do cone único, verificamos maiores porcentagens de área de cimento endodôntico e menores porcentagens de área de falhas, quando utilizado instrumento para a sua inserção. Com a técnica do cone único, a inserção de cimento endodôntico antes do cone diminui significativamente as falhas da obturação. Métodos diferentes de inserção do cimento endodôntico não influenciam na qualidade da obturação, quando utilizada a técnica da condensação lateral ativa / The aim of this study was to evaluate percentages of gutta-percha, endodontic sealer and voids in radicular canals obturations using Single Cone and active Lateral Compaction, after placing the endodontic sealer through master gutta-percha cone, endodontic file or lentulo. Sixty root canals of inferior molars, after being instrumented with ProTaper Universal files, were distributed in 2 groups: group I- Root canals sealed using active lateral condensation; group II- Root canals sealed using single cone technique. Each of these groups was subdivided into 3 subgroups (A, B and C) according different methods of placing the endodontic sealer in the beginning of the filling: A- Through the master gutta-percha cone insertion; B- Through lentulo; C- Through endodontic file. The roots were transected at 2, 4 and 6mm from the root apex and photographed with digital microscope. The pictures were transferred to Image Tool 3.0 Software, in order to allow measurement of the areas of gutta-percha, endodontic sealer and voids. ANOVA, Kruskall-Wallis, Dunn and Mann-Whitney tests were applied for statistical analysis of the results, through which we observed there are no significant differences in the percentages of gutta-percha, endodontic cement and voids, when it is used Lateral Compaction. With single cone, we verified higher percentages of sealer area and lower percentages of voids, when an instrument is used to place the sealer. Furthermore, with this technique, placing the sealer using an instrument before the insertion of the gutta-percha cone reduces voids. Different sealer placement methods do not affect the quality of the filling, when Lateral Compaction is applied

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-03-21Bitstream added on 2014-06-13T21:02:49Z : No. of bitstreams: 1 nogueira_amp_dr_botfca.pdf: 620583 bytes, checksum: 089d53867bd033e30318c49dd9e5faa8 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O objetivo deste trabalho foi realizar análise isotópica em polpas, sucos tropicais e néctares de manga e de goiaba comercializados no Brasil, quantificando o carbono proveniente de plantas dos ciclos fotossintéticos C3 (manga e goiaba) e C4 (açúcar de cana) para detectar possíveis adulterações nesses produtos. Secundariamente, parâmetros físico-químicos, teores de nutrientes e valores energéticos foram determinados para verificar se os mesmos obedeciam a padrões estabelecidos por lei. Com base na legislação brasileira, foi criado um limite de legalidade (porcentagem mínima de fonte C3) específico para cada tipo de produto. As análises isotópicas das polpas, sucos tropicais e néctares de manga e de goiaba forneceram as concentrações de carbono C3 desses produtos, as quais foram comparadas com seus respectivos limites de legalidade, verificando se os fabricantes estavam cumprindo com as normas da legislação vigente. Esses produtos também foram analisados físico-quimicamente (ºBrix, pH, acidez total e açúcares totais, além do teor de ácido ascórbico nas bebidas de goiaba), bem como tiveram seus teores de nutrientes (carboidratos, proteínas e gorduras totais) e valores energéticos estimados por meio de análise centesimal. Dentre os vinte e dois produtos de manga e os dezoito de goiaba analisados, três amostras de polpas de manga nãonão estavam de acordo com os Padrões de Identidade e Qualidade quanto às análisesfísico-químicas. No entanto, isotopicamente, sete produtos de manga foram classificados como ilegais, sendo três sucos tropicais adoçados, um não adoçado e três néctares convencionais, assim como quatro produtos de goiaba, sendo uma amostra de suco tropical adoçado, duas de não adoçado e uma de néctar light. A maioria desses produtos teve seus teores de nutrientes e valores energéticos informados... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico aba / The objective of this work was to carry out isotopic analysis in mango and guava pulps, tropical juices and nectars sold in Brazil, quantifying carbon C3 (mango and guava) and C4 (sugar cane) in order to detect likely adulteration in these products. Secondly, physico-chemical parameters, nutrients contents and energy values were determined to verify if these products complied with standards established by law. Based in the Brazilian legislation, a specific legality limit was created (minimum percentage of C3 source) for each type product. The isotopic analyses of commercial mango and guava pulps, tropical juices and nectars provided the concentrations of C3 carbon in these products which were compared to their respective legality limit, verifying if the commercial producers were respecting the current legislation rules. These products were also physically-chemically analyzed (ºBrix, pH, total acidity and total sugars, in addition to ascorbic acid in guava beverages), and had their nutrients contents (carbohydrates, protein and total fat) and energy values estimated by centesimal analysis. Out of the twenty two mango and eighteen guava products analyzed, three mango pulps weren‟t in accordance to the Identity and Quality Standards as to physical-chemical analyses. However, isotopically, seven mango... (Complete abstract click electronic access below)

Resumo: Os objetivos do presente trabalho foram analisar as microestruturas formadas pela co-cristalização da sacarose sobre a matriz da polpa de amora-preta, nas proporções de sacarose:polpa de amora de 90:10, 85:15 e 80:20, de maneira a promover uma alternativa de uso da amora-preta como corante natural para produtos alimentícios e farmacêuticos. As duas primeiras proporções produziram co-cristais, todavia a proporção de 80:20 produziu um produto semi-sólido, e não cristalizou completamente. Foi realizada uma composição centesimal e análise de atividade de água na polpa de amora-preta integral. As microestruturas foram analisadas por microscopia eletrônica de varredura (MEV), calorimetria exploratória diferencial (DSC) e difração de raio-X (XRD), nos produtos como a sacarose usada nos experimentos, na amora-preta liofilizada, no xarope re-cristalizado sem adição de polpa e nos produtos co-cristalizados nas proporções de sacarose:polpa de amora-preta de 90:10, 85:15 e 80:20. As análises comprovaram a formação do aglomerado de cristais de sacarose sobre a matriz nas amostras contendo as proporções de 90:10 e 85:15 e promoveram um melhor entendimento do comportamento do produto co-cristalizado.

Made available in DSpace on 2015-09-17T15:24:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-17. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-17T15:47:10Z : No. of bitstreams: 1 000844099.pdf: 1423355 bytes, checksum: 8649e82cdb205c9cea62cc32e42d5564 (MD5) / Os processos de reparo da polpa dentária frente a procedimentos conservadores passam, em geral, pelo confronto entre possíveis microrganismos presentes na área da exposição e as células responsáveis pela diferenciação e produção de tecido mineralizado. Entretanto, a literatura ainda necessita de informações sobre o efeito direto de produtos bacterianos sobre este processo. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do lipopolissacarídeo (LPS) bacteriano (E. coli) sobre células progenitoras da polpa dental, utilizando-se condições basais e com mineralização préinduzida por meio osteogênico. Para isso, células progenitoras caracterizadas foram submetidas a diferentes concentrações de LPS bacteriano (com ou sem indutor da mineralização [lM]), para observação da atividade de fosfatase alcalina (ALP). A concentração mínima de 200 ng/ml, para se verificar alteração de atividade enzimática de ALP, foi usada para se observar os efeitos funcionais de mineralização (pelo alizarin vermelho - ARS), expressão das citocinas IL-1β e TNF-α, além da expressão dos genes DSPP e DMP-1. Os dados quantitativos foram analisados por ANOVA e teste de Tukey. As células em meio osteogênico com as diferentes concentrações de LPS apresentaram baixa atividade da ALP no curto prazo, comparadas às tratadas com meio α-MEM. Estas apresentaram alta atividade, comparadas ao controle. 200 ng/ml do LPS afetaram o processo de mineralização ao longo do tempo, reduzindo a ação de mineralização dos grupos que o associaram ao indutor de mineralização. Houve expressão de IL-1β e TNF-α para todos os grupos em todos os tempos, além disso, para a IL-1β, o grupo que associou os 200ng/ml de LPS com o meio indutor após 7 dias apresentou maior expressão. Houve expressão do gene DMP-1 e não expressão de DSPP e ocorreu uma maior expressão gênica nos grupos tratados com meio indutor da mineralização no gene DMP-1 . Esses achados / Dental pulp repair processes due to conservative procedures are, in general, affected by the conflicts between possible microorganisms at the area of exposure and cells responsible for differentiation and production of mineralized tissue. However, the literature still lacks information on how bacterial products affect these processes directly. The purpose of this study was to evaluate the bacterial lipopolysaccharide (E. coli LPS) effects on dental pulp progenitor cells, regarding the expression of differentiation genes and function of mineralization, using basal conditions and pre-induced mineralization by osteogenic media. Characterized progenitor cells was initially submitted to different LPS concentrations (with or without osteogenic medium [lM]), to observe alkaline phosphatase activity (ALP). The minimal concentration (200 ng/ml) to observe phosphatase enzymatic activity was used to assess the functional mineralization effects (by alizarin red staining - ARS), cytokine production (IL-1β e TNF-α), besides the gene expression for odontoblast differentiation markers (DSPP and DMP-1). Quantitative data will be statistically analyzed by ANOVA and Tukey's test. Cells in osteogenic medium with different concentrations of LPS showed low ALP activity shortterm compared to those treated with α-MEM. These showed high activity, compared to control. 200 ng/ml of LPS did affect the mineralization process over time, reducing the action of mineralization of the groups that have associated LPS with the IM. There was expression of IL-1β and TNF-α for all groups at all times, additionally, IL-1β for the group that has associated 200 ng/ml of LPS with osteogenic media after 7 days showed higher expression. There was expression of DMP-1 and DSPP genes and the expression in groups treated with IM was greater in DMP-1. These findings suggest that the inflammatory potential of LPS on the pulp progenitor cells contribute to an early mineralization ...

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2018. / Submitted by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-07-19T19:07:23Z No. of bitstreams: 1 2018_MarinaMansurRamagem.pdf: 2292469 bytes, checksum: cdefb233d41217103ef47eb8727b3080 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-07-20T19:58:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2018_MarinaMansurRamagem.pdf: 2292469 bytes, checksum: cdefb233d41217103ef47eb8727b3080 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-20T19:58:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018_MarinaMansurRamagem.pdf: 2292469 bytes, checksum: cdefb233d41217103ef47eb8727b3080 (MD5) Previous issue date: 2018-07-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES); Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) e Fundação de Apoio a Pesquisa do Distrito Federal (FAPDF). / Restaurações em dentes vitais envolvem cuidados operatórios para preservar a integridade pulpar, uma vez que a elevação da temperatura pulpar pode resultar em danos celulares. A síntese de heat shock proteins (HSP) é umas das formas de se avaliar a severidade do trauma sofrido pela polpa dental em consequência de um estresse térmico. Esta pesquisa avaliou in vitro danos celulares produzidos pelo estresse térmico gerado sobre a cultura de células macrófagos RAW 264.7 devido ao uso de fotopolimerizadores LED – Valo Led (Ultradent Products Inc) e Bluephase G2 (Ivoclar Vivadent Ltda.) – de alta irradiância. As células foram irradiadas com os LED diretamente sobre a base da placa de cultivo celular de 24 poços sem ou com interposição de dentina e resina gerando os seguintes grupos: G1 – grupo controle; G2 – Valo; G3 – Valo e dentina; G4 – Valo e dentina e resina; G5 – Bluephase; G6 – Bluephase e dentina; G7 – Bluephase e dentina e resina. Avaliou-se o metabolismo celular - pelo ensaio de MTT-, a produção de óxido nítrico (NO), a morfologia celular pela microscopia eletrônica de varredura (MEV) e análise da expressão gênica da HSP 70 pelo teste de Polymerase Chain Reaction em tempo real (PCR) de cada grupo. Os dados de MTT e NO foram avaliados pelos testes não-paramétricos (Kruskal-Wallis e Mann-Whitney) e os de PCR por testes paramétricos (ANOVA e Tukey). Resultados: os grupos G2 e G3 resultaram nos menores valores para metabolismo celular quando comparados com o G1 (p<0.05); os grupos G4, G6 e G7 apresentaram valores de metabolismo celulares estatisticamente superiores ao G1; a produção de óxido nítrico foi baixa para todos os grupos, porém o grupo G1 e o G7 apresentaram valores estatisticamente superiores aos demais grupos (p<0.05); os grupos G2, G3 e G5 apresentaram células com menor número de prolongamentos entre elas e presença de restos/fragmentos celulares evidenciando morte celular; os grupos G2 e G5 foram os únicos que apresentaram dados estatisticamente superiores quando comparado com o grupo G1 para a expressão gênica da proteína HSP 70. Os resultados sugerem que a irradiação com os LED induz vias de sinalização para reparar o tecido celular danificado. Contudo, estudos adicionais são necessários para melhor evidenciação dos resultados obtidos, visto que este é um estudo in vitro. / Vital tooth restorations involve operative care to preserve pulp integrity, since raising the pulp temperature can result in cellular damage. The heat shock protein synthesis (HSP) is known as a way to evaluate the severity of the trauma suffered by the dental pulp as a result of thermal stress. The present study evaluated in vitro cell damage caused by thermal stress generated on RAW 264.7 cell culture due to the use of high irradiance LED - Valo Led (Ultradent Products Inc) and Bluephase G2 (Ivoclar Vivadent Ltda.). The cells were irradiated with the LED units directly on the base of the 24-well cell culture plate without or with dentin and/or resin interposition generating the following groups: G1 - control group; G2-Valo; G3 - Valo and dentin; G4 - Valo and dentin and resin; G5-Bluephase; G6 - Bluephase and dentin; G7 - Bluephase and dentin and resin. Samples from each group were used to evaluate cell metabolism by the MTT assay, nitric oxide (NO) production, cell morphology by scanning electron microscopy (SEM) and analysis of the gene expression of HSP 70 by the real time Polymerase Chain Reaction (PCR) test. MTT and NO data were evaluated by non-parametric (Kruskal-Wallis and Mann-Whitney) and RT-PCR data by parametric tests (ANOVA and Tukey). According to the results, it was possible to observe that the G2 and G3 groups resulted in the lowest values for cellular metabolism when compared to the G1 (p <0.05). The G4, G6 and G7 groups had statistically higher values of cellular metabolism than the G1. The production of nitric oxide was low for all groups, and the G1, as well as G7, presented statistically higher values than the other groups (p <0.05). In the analysis of the cell morphology, the G2, G3 and G5 groups presented cells with less number of extensions between them and presence of cell debris/fragments evidencing cell death. Analysis of the gene expression of HSP 70 demonstrated that the G2 and G5 groups were the only ones that presented statistically superior data when compared to the control group for the gene expression of the HSP 70 protein. The results suggest that the irradiation with the LED induce signaling pathways to repair damaged cell tissue. However, additional studies are needed to better demonstrate the results obtained, since this is an in vitro study.

Orientador: Bruno Das Neves Cavalcanti / Banca: Cláudio Antonio Talge Carvalho / Banca: Aletéia Massula de Melo Fernandes / Resumo: Os processos de reparo da polpa dentária frente a procedimentos conservadores passam, em geral, pelo confronto entre possíveis microrganismos presentes na área da exposição e as células responsáveis pela diferenciação e produção de tecido mineralizado. Entretanto, a literatura ainda necessita de informações sobre o efeito direto de produtos bacterianos sobre este processo. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos do lipopolissacarídeo (LPS) bacteriano (E. coli) sobre células progenitoras da polpa dental, utilizando-se condições basais e com mineralização préinduzida por meio osteogênico. Para isso, células progenitoras caracterizadas foram submetidas a diferentes concentrações de LPS bacteriano (com ou sem indutor da mineralização [lM]), para observação da atividade de fosfatase alcalina (ALP). A concentração mínima de 200 ng/ml, para se verificar alteração de atividade enzimática de ALP, foi usada para se observar os efeitos funcionais de mineralização (pelo alizarin vermelho - ARS), expressão das citocinas IL-1β e TNF-α, além da expressão dos genes DSPP e DMP-1. Os dados quantitativos foram analisados por ANOVA e teste de Tukey. As células em meio osteogênico com as diferentes concentrações de LPS apresentaram baixa atividade da ALP no curto prazo, comparadas às tratadas com meio α-MEM. Estas apresentaram alta atividade, comparadas ao controle. 200 ng/ml do LPS afetaram o processo de mineralização ao longo do tempo, reduzindo a ação de mineralização dos grupos que o associaram ao indutor de mineralização. Houve expressão de IL-1β e TNF-α para todos os grupos em todos os tempos, além disso, para a IL-1β, o grupo que associou os 200ng/ml de LPS com o meio indutor após 7 dias apresentou maior expressão. Houve expressão do gene DMP-1 e não expressão de DSPP e ocorreu uma maior expressão gênica nos grupos tratados com meio indutor da mineralização no gene DMP-1 . Esses achados / Abstract: Dental pulp repair processes due to conservative procedures are, in general, affected by the conflicts between possible microorganisms at the area of exposure and cells responsible for differentiation and production of mineralized tissue. However, the literature still lacks information on how bacterial products affect these processes directly. The purpose of this study was to evaluate the bacterial lipopolysaccharide (E. coli LPS) effects on dental pulp progenitor cells, regarding the expression of differentiation genes and function of mineralization, using basal conditions and pre-induced mineralization by osteogenic media. Characterized progenitor cells was initially submitted to different LPS concentrations (with or without osteogenic medium [lM]), to observe alkaline phosphatase activity (ALP). The minimal concentration (200 ng/ml) to observe phosphatase enzymatic activity was used to assess the functional mineralization effects (by alizarin red staining - ARS), cytokine production (IL-1β e TNF-α), besides the gene expression for odontoblast differentiation markers (DSPP and DMP-1). Quantitative data will be statistically analyzed by ANOVA and Tukey's test. Cells in osteogenic medium with different concentrations of LPS showed low ALP activity shortterm compared to those treated with α-MEM. These showed high activity, compared to control. 200 ng/ml of LPS did affect the mineralization process over time, reducing the action of mineralization of the groups that have associated LPS with the IM. There was expression of IL-1β and TNF-α for all groups at all times, additionally, IL-1β for the group that has associated 200 ng/ml of LPS with osteogenic media after 7 days showed higher expression. There was expression of DMP-1 and DSPP genes and the expression in groups treated with IM was greater in DMP-1. These findings suggest that the inflammatory potential of LPS on the pulp progenitor cells contribute to an early mineralization ... / Mestre

Orientador: Carlos Alberto de Souza Costa / Resumo: O objetivo geral da presente pesquisa foi avaliar se o pré-tratamento da dentina com sinvastatina (SV) antes de aplicar o cimento de inômero de vidro (CIV) permitiria a difusão transdentinária desta droga em concentrações capazes de promover aumento da capacidade de células odontoblastóides em depositar e mineralizar matriz de dentina. No Estudo 1, foram determinadas concentrações de sinvastatina que fossem bioativas e citocompatíveis quando em contato com células odotoblastóides MDPC-23. Duas concentrações (0,01 e 0,1 μM) e três tempos de tratamento (24 h, 72 h e contínuo - até 14 dias) foram avaliados. No Estudo 2, diante da confirmação da hipótese da difusão transdentinária da SV por análise em cromatografia liquida em espectro de massa (LC-MS/MS), concentrações de 2,5 e 1,0 mg/mL foram selecionadas para avaliação do efeito bioativo transdentinário sobre células odontoblastóides MDPC-23 após pré-tratamento ou não da superfície dentinária com EDTA. Também nesse estudo foi avaliada a ação antimicrobiana (teste de disco-difusão) das concentrações de 2,5 e 1,0 mg/ml de SV sobre Streptococcus mutans e Lactobacillus acidophilus. No Estudo 3, a concentração que apresentou os melhores resultados no estudo anterior foi selecionada para avaliação do efeito bioativo transdentinário sobre células MDPC-23 associado ao protocolo de forramento cavitário com Ketac Molar (3M ESPE). Nos estudos que avaliaram o efeito bioativo da SV foram analisados os seguintes parâmetros celulares: viabili... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / The aim of the present study was to determine whether the treatment of dentin with simvastatin (SV) before application of glass-ionomer cement (GIC), allows transdentinal diffusion of this drug at bioactive concentration capable of increasing the potential of odontoblast-like cells to deposit and mineralize dentin matrix. In the 1st study, the dose-response and time-course of SV were determined for the odontoblast-like MDPC-23 cells. Two concentrations (0.01 and 0.1 μM) of SV and three treatment times (24 h, 72 h and continuous - up to 14 days) were evaluated. In the 2nd study, the SV transdentinal diffusion hypothesis was confirmed by liquid chromatography mass spectrometry (LC-MS / MS). Then, concentrations of 2.5 and 1.0 mg/ml were selected to evaluate the transdentinal bioactivity of this drug with MDPC-23 cells, when dentin was treated or not with EDTA. Also in this study the antimicrobial activity (disc diffusion assay) of 2.5 and 1.0 mg/ml SV against Streptococcus mutans and Lactobacillus acidophilus was evaluated. In the 3rd study, the 2.5 mg/mL SV was selected to analyze the bioactivity of dentin treatment with SV followed by lining with Ketac Molar (3M ESPE). In all the studies, the following cell parameters were analyzed: cell viability (MTT), ALP activity (thymolphthalein monophosphate) and mineralized matrix deposition (alizarin red) (n=6). The concentration of 2.5 mg/ml SV was selected to evaluate dentin microshear-bond strength of GIC Ketac Molar when applied on dentin conditioned or not with EDTA. Data were submitted to ANOVA and Tukey test's (p<0.05). The results of the 1st study demonstrated that exposing MDPC-23 to low concentrations of SV during short periods of time resulted in a bioactive effect associated with no toxicity to cultured cells. In the transdentinal study, it was detected an increase on ALP activity...(Complete abstract electronic access below) / Mestre

Orientador: Waldemar Gastoni Venturini Filho / Banca: Carlos Ducatti / Banca: Ricardo Figueira / Banca: Lea Silvia Sant'Ana / Banca: André Ricardo Alcarde / Resumo: O objetivo deste trabalho foi realizar análise isotópica em polpas, sucos tropicais e néctares de manga e de goiaba comercializados no Brasil, quantificando o carbono proveniente de plantas dos ciclos fotossintéticos C3 (manga e goiaba) e C4 (açúcar de cana) para detectar possíveis adulterações nesses produtos. Secundariamente, parâmetros físico-químicos, teores de nutrientes e valores energéticos foram determinados para verificar se os mesmos obedeciam a padrões estabelecidos por lei. Com base na legislação brasileira, foi criado um limite de legalidade (porcentagem mínima de fonte C3) específico para cada tipo de produto. As análises isotópicas das polpas, sucos tropicais e néctares de manga e de goiaba forneceram as concentrações de carbono C3 desses produtos, as quais foram comparadas com seus respectivos limites de legalidade, verificando se os fabricantes estavam cumprindo com as normas da legislação vigente. Esses produtos também foram analisados físico-quimicamente (ºBrix, pH, acidez total e açúcares totais, além do teor de ácido ascórbico nas bebidas de goiaba), bem como tiveram seus teores de nutrientes (carboidratos, proteínas e gorduras totais) e valores energéticos estimados por meio de análise centesimal. Dentre os vinte e dois produtos de manga e os dezoito de goiaba analisados, três amostras de polpas de manga nãonão estavam de acordo com os Padrões de Identidade e Qualidade quanto às análisesfísico-químicas. No entanto, isotopicamente, sete produtos de manga foram classificados como ilegais, sendo três sucos tropicais adoçados, um não adoçado e três néctares convencionais, assim como quatro produtos de goiaba, sendo uma amostra de suco tropical adoçado, duas de não adoçado e uma de néctar light. A maioria desses produtos teve seus teores de nutrientes e valores energéticos informados... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico aba / Abstract: The objective of this work was to carry out isotopic analysis in mango and guava pulps, tropical juices and nectars sold in Brazil, quantifying carbon C3 (mango and guava) and C4 (sugar cane) in order to detect likely adulteration in these products. Secondly, physico-chemical parameters, nutrients contents and energy values were determined to verify if these products complied with standards established by law. Based in the Brazilian legislation, a specific legality limit was created (minimum percentage of C3 source) for each type product. The isotopic analyses of commercial mango and guava pulps, tropical juices and nectars provided the concentrations of C3 carbon in these products which were compared to their respective legality limit, verifying if the commercial producers were respecting the current legislation rules. These products were also physically-chemically analyzed (ºBrix, pH, total acidity and total sugars, in addition to ascorbic acid in guava beverages), and had their nutrients contents (carbohydrates, protein and total fat) and energy values estimated by centesimal analysis. Out of the twenty two mango and eighteen guava products analyzed, three mango pulps weren‟t in accordance to the Identity and Quality Standards as to physical-chemical analyses. However, isotopically, seven mango... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Carlos Henrique Ribeiro Camargo / Banca: Claudio Antonio Talge Carvalho / Banca: Ana Paula Martins Gomes / Banca: Marcia Sampaio Campos / Banca: Cácio de Moura Netto / Resumo: O sucesso dos tratamentos endodônticos está relacionado ao correto diagnóstico das alterações pulpares, à qualidade do preparo biomecânico e da obturação dos canais radiculares, bem como à compatibilidade entre os cimentos obturadores com os tecidos adjacentes ao canal. Atualmente a busca de bom comportamento biológico destes cimentos se faz de extrema importância. O presente estudo teve como objetivo analisar a citotoxicidade e a genotoxicidade dos extratos de três cimentos endodônticos e seus efeitos sobre a expressão dos genes BMP2, ALP, RUNX2, BGLAP, OPN e DMP1 em células da polpa dental humana. Foram utilizadas células primárias de tecidos pulpares de terceiro molar com rizogênese incompleta. Cimentos endodônticos foram depositados em placas de 24 poços e armazenados a 37°C por 6 h; cada espécime foi colocado em contato com 2,7 ml de meio de cultura (DMEM-F12) e as amostras foram incubadas por 24 h, a 37°C. Extratos originais (1:1) de cada material foram diluídos em série até 1:32 e analisados quanto a citotoxicidade pelo ensaio de MTT. Após a obtenção de uma diluição que não fosse extremamente tóxica e não interferisse demasiadamente na replicação celular (subdose), foi realizado o teste de micronúcleo para avaliação da genotoxicidade dos materiais. A expressão dos genes foi verificada por RT-PCR em tempo real, em 6, 12 e 24 h. O RNA total foi isolado e retrotranscrito. Os testes de citotoxicidade indicaram que a sobrevivência celular foi afetada pelos extratos na seguinte ordem: EndoREZ > AH Plus > RoekoSeal ≥ MTA. O EndoREZ propiciou o maior número de micronúleos no ensaio de genotoxicidade. A quantificação relativa indicou que em 24 h, o AH Plus e o EndoREZ agiram de modo similar, aumentando a expressão da OPN e reduzindo a ALP; o RoekoSeal gerou expressão da OPN... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The success of endodontic therapy is related to the correct pulp and periapical alterations diagnosis; to the good biomechanical instrumentation and to the root canal sealing quality; to the compatibility between the endodontic sealers and the root canal surrounding tissues as well. Nowadays, the seeking for a sealer with good biological behavior is extremely important. The aim of this study was to analyze the cytotoxicity and the genotoxicity of three endodontic sealers and their effects on the expression of the genes BMP-2, ALP, RUNX2, BGLAP, SPP1 and DMP1 in human dental pulp cells. Primary cells from the 5th passage obtained from pulp tissue of third molar with incomplete rizogenesis were used in this study. Endodontic sealers were placed in 24 well plates and stored at 37°C for 6 hours. After that, each specimen was covered with 2.7 ml of cell culture media (DMEM-F12) and incubated afterwards at 37°C for 24 h. Original extracts (1:1) of each material were serially diluted up to 1:32 and the citotoxicity was analyzed by MTT assay. After obtaining extracts subdose, non very toxic or non interfering on cell replication, genotoxicity was evaluated by micronucleus test. The gene expression was accessed by Real Time RT-PCR, after extracts exposure of 6, 12 and 24 h. Total RNA was isolate and retrotranscribed. The citotoxicity test has showed that cell survival was affected in the following order: EndoREZ > AH Plus > Roeko Seal ≥ MTA. EndoREZ has caused the highest score in micronucleus assay. Relative quantification indicated that at 24 h, AH Plus and EndoREZ increased OPN and reduced ALP; RoekoSeal has caused decreasing OPN... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor