O preparo biomecânico acompanhado pela irrigação no tratamento endodôntico de canais infectados tem se mostrado efetivo, porém alguns micro-organismos ainda sobrevivem. A espécie bacteriana mais frequentemente encontrada em casos de fracasso endodôntico é Enterococcus faecalis. Para combatê-lo diferentes medicações intra-canal são utilizadas, principalmente as pastas a base de hidróxido de cálcio e outras substâncias vem sendo associadas a estas para potencializar seu efeito antimicrobiano. Desta forma, é pertinente comparar in vitro a capacidade antimicrobiana do hidróxido de cálcio com diferentes veículos e aditivos, sobre Enterococcus faecalis, através de cultura microbiológica e microscopia confocal de varredura a laser (MCVL). Para isso, tubos de dentina bovina padronizados foram previamente esterilizados e em seguida contaminados durante 5 dias com a bactéria. Os espécimes receberam a medicação por 15 dias e foram divididos em cinco grupos-teste: pasta de hidróxido de cálcio veiculado em água destilada (G1), pasta veiculada em propilenoglicol(G2), pasta de hidróxido de cálcio veiculado em propilenoglicol com os aditivos extrato etanólico de própolis (G3), clorexidina (G4) e paramonoclorofenol canforado - PMCC (G5). Após o período da medicação, a coleta bacteriana dos fragmentos de dentina foi realizada com brocas de Largo em dispositivo esterilizado, para contagem dos micro-organismos ainda viáveis em unidades formadoras de colônias. A MCVL analisou as bactérias viáveis (verde) e mortas (vermelho) no interior dos túbulos dentinários, com o auxílio do corante Live and Dead®. Houve ação antimicrobiana intra-tubular dentinária sobre Enterococcus faecalis por todas as pastas de hidróxido de cálcio testadas. A partir deste trabalho foi possível observar a melhor ação antimicrobiana contra E. faecalis pela pasta de hidróxido de cálcio com propilenoglicol e PMCC nas regiões superficial e profunda da massa dentinária. / Biomechanical preparation followed by irrigation in endodontic treatment of infected root canals has been shown, however, some micro-organisms still survive. The most frequently founded bacterial specie in endodontic treatment fail is Enterococcus faecalis. To combat it, different intra-canal medications are used, mainly the calcium hydroxide pastes and other substances have been associated to calcium hydroxide to leverage it antimicrobial effect. Thus, its relevant to compare in vitro the antimicrobial ability of calcium hydroxide with different vehicles and additives, against Enterococcus faecalis, through microbiological culture and confocal laser scanning microscopy (CLSM). For this, standard dentine tubes were sterilized and then infected with the bacteria for 5 days and were divided in five test-groups, submitted to medication for 15 days with calcium hydroxide paste in distilled water (G1), in propylene glycol (G2), besides clacium hydroxide in propylene glycol with ethanol extract of propolis (G3), chlorexidine (G4) and CPMC (G5). After the medication period, the bacterial collection of the dentine´s fragments was done with Largos drill in a sterilized device, to count micro-organisms still viable in colony forming units. The CLSM evaluated the viable (green) and dead (red) bacteria inside the dentinal tubules with the aid of the Live and Dead® dye. There was dentinal intra-tubular antimicrobial action against Enterococcus faecalis for all the tested calcium hydroxide pastes. From this work was possible to observe a better antimicrobial activity against Enterococcus faecalis by the calcium hydroxide paste in propylene glycol and CPMC in superficial and deep areas of the dentine.

Dentre os produtos naturais que contém compostos secundários com atividade biológica, está a própolis, uma resina coletada por abelhas Apis mellifera de diversas partes da planta com atividades biológicas tais como, antimicrobiana, antiinflamatória, cicatrizante, anestésica, antiviral e antioxidante. Um tipo diferente de própolis e com perfil químico peculiar, foi denominada de própolis vermelha, a qual possui alto teor de compostos fenólicos, principalmente da classe dos isoflavonoides. De acordo com a literatura, esta própolis possui alta atividade antioxidante in vitro, porém estudos sobre o efeito antioxidante in vivo ainda não são conhecidos. Portanto, o objetivo desse trabalho foi avaliar a atividade antioxidante in vivo do extrato etanólico da própolis vermelha brasileira (EEP) por modelo de experimentação animal, assim como comparar o desempenho in vivo do EEP com antioxidantes de alta atividade e efetividade em sistemas biológicos. Para certificação do alto potencial antioxidante da própolis vermelha utilizada, conforme relatado na literatura , o EEP foi caracterizado quanto ao seu potencial antioxidante por várias metodologias in vitro, além de análises da composição química das substâncias não voláteis e voláteis. A avaliação do perfil químico do EEP incluiu análises como espectrofotometria na região ultravioleta visível, teor de compostos fenólicos totais, cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE), cromatografia gasosa acoplada com espectrometria de massas (CG-EM) e CG/EM-Headspace. Para as análises da atividade antioxidante in vitro foram utilizadas as metodologias de CLAE on-line, sequestro do radical ABTSo+; poder de redução do ferro (FRAP) e capacidade de absorbância de radicais de oxigênio (ORAC). No ensaio de avaliação da atividade antioxidante in vivo foi utilizado um delineamento experimental com 50 ratos Wistar machos, divididos em 7 tratamentos: Controle Normal (CTL/N), Controle estressado (CTL-J/APAP), Ácido Ascórbico (AA-J/APAP), Quercetina (Q-J/APAP), Própolis na dose de 150mg/kg (P150-J/APAP), 300mg/kg (P300-J/APAP) e 600mg/kg (P600-J/APAP). Todos os animais, com exceção do grupo CTL/N, foram tratados por 15 dias com os antioxidantes via intragástrica, e, ao 16º dia foram estressados com 800mg/kg de acetaminofen (APAP), via intragástrica, submetidos a 12 horas de jejum e então anestesiados e sacrificados para retirada de sangue e fígado para as análises de função hepática (enzimas ALT, AST e \'gama\'GT), atividade de sequestro de radical superóxido no plasma pela enzima Superóxido Dismutase (SOD), Western Blot para as enzimas SOD e CAT, análise ORAC de plasma e fígado e histopatologia do tecido hepático. O EEP apresentou alto teor de compostos fenólicos (266,8 mg/g) e a presença de isoflavonoides e pterocarpanos, tais como liquiritigenina, isoliquiritigenina, vestitol, neovestitol, formononetina, biochanina, medicarpina, 3,4-diidroxi-9-metoxipterocaroano e 3,8-diidroxi-9-metoxipterocarpano, os quais são peculiares da própolis vermelha. Além disto, foram encontradas altas concentrações das substâncias voláteis \'alfa\'-cubebeno e germacreno D, as quais não são as substâncias majoritárias da própolis vermelha de outras regiões. O EEP também apresentou elevado potencial antioxidante in vitro, tendo o valor de 4,26 mmol/g equivalente de Fe++ para o FRAP, 4,84 e 19.779,7 mmol de trolox para o ABTS e o ORAC, respectivamente. O APAP na dose e via de administração utilizada não gerou um estresse intenso para ser detectável por meio de alguns intermediários de vias e/ou rotas que respondem ao alto potencial oxidante. Porém, e de acordo com os resultados dos ensaios in vivo, a concentração para uso como antioxidante contra o estresse oxidativo se situa entre 150 a 300mg/kg. Portanto, a própolis vermelha brasileira além de alto potencial antioxidante in vitro também apresenta potencial antioxidante benéfico in vivo / Propolis is one of the natural products containing secondary compounds with biological activity. Propolis is a resin collected by honeybees from various plant parts and has several biological activities such as antimicrobial, anti-inflammatory, healing, anesthetic, antioxidant and antiviral. The Brazilian red propolis is a different type of propolis with a peculiar chemical profile compared to other types of Brazilian propolis, containing a high content of phenolic compounds, especially isoflavones. The literature reports that this propolis has high in vitro antioxidant activity, but studies on the in vivo antioxidant effects are still scarce. Therefore, this study investigated the in vivo antioxidant activity of the ethanol extract of Brazilian propolis (EEP) using animal experiments model. We also compared the in vivo EEP performance with high antioxidant activity and effectiveness in biological systems. To evaluate the high antioxidant propolis potential, as reported in the literature, the EEP was characterized for its in vitro antioxidant potential in various methodologies, as well as in analyses of the chemical composition of volatile and non-volatile substances. The evaluation of EEP chemical analyses included visible spectrophotometry in the ultraviolet region, total phenolic content, high performance liquid chromatography (HPLC), gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC-MS) and GC/MS-Headspace. For in vitro analyses of antioxidant activity, we used the online HPLC methods, sequestration of ABTSo+ radicals, Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP) and Oxygen-Radical Absorbance Capacity (ORAC). To assess in vivo antioxidant activity, we used an experimental design with 50 male Wistar rats divided into 7 treatments: Normal Control (N/CTL), Stressed Control (CTL-J/APAP), Ascorbic Acid (AAJ/ APAP), Quercetin (QJ/APAP), Propolis at 150mg/kg (P150-J/APAP), 300mg/kg (P300-J/APAP) and 600mg/kg (P600-J/APAP). All animals, except for the N/CTL group, were treated for 15 days with intragastric antioxidants, and on the 16th day, they were stressed with 800mg/kg of acetaminophen (APAP), intragastrically. Afterwards, they underwent a 12-hour fast, then, anesthetized and sacrificed to collect blood and liver for analyses of liver function (ALT, AST and \'gama\'GT enzymes), activity of superoxide radical sequestration in plasma by the enzyme Superoxide Dismutase (SOD), Western Blot for SOD and CAT enzymes, ORAC analysis of plasma and liver histopathology and liver tissue. The EEP showed high content of phenolic compounds (266.8 mg/g) and the presence of isoflavones and pterocarpans such as liquiritigenin, isoliquiritigenin, vestitol, neovestitol, formononetin, biochanin, medicarpin, 3,4-dihydroxy-9-methoxy pterocarn and 3,8-dihydroxy-9-methoxy pterocarpan, which are peculiar to the red propolis. Moreover, we found high concentrations of volatile \'alfa\'-cubebeno and germacrene D, which are not the majority of substances in propolis from other regions. The EEP also showed high in vitro antioxidant activity, with 4.26 mmol/g equivalent of Fe++ for FRAP, 4.84 and 19779.7 mmol of trolox for ABTS and ORAC, respectively. The APAP in the dose and route of administration used did not generate intense stress detectable through some intermediate routes and/or routes that respond to the high oxidizing potential. However, according to the results of in vivo analysis, the concentration for use as an antioxidant against oxidative stress ranges from 150 to 300mg/kg. Therefore, the Brazilian red propolis has high in vitro antioxidant potential as well as beneficial in vivo antioxidant potential

Propolis as natural dietary additive can be used to manipulate rumen fermentation towards less methane (CH4) and it may affect animal reproductive and productive performance. To study the application of propolis, three studies were conducted. The first study aimed to evaluate the in vitro nutritive value of two types of propolis (Brazilian red propolis (BRP) and Egyptian brown propolis (EBP) for their anti-methanogenic activity, ruminal fermentation and degradability. Propolis extracts were prepared using 70% ethanol and added to a 50:50 Tifton hay to concentrate diet at three levels [0 (negative control, CTL), 25, 50 and 100 micrograma / 0.5 g substrate]. Each propolis were compared with monensin as positive control. Both BRP50 micrograma and EBP25 micrograma showed similar significant effects on CH4 production as monensin; on average 14.2 ml/TDOM g compared with CTL (19.3 ml/TDOM). Monensin supplementation increased (P<0.001) the propionate concentration and decreased the acetate/propionate ratio, while BRP and EBP enhanced (P<0.001) the individual and total volatile fatty acids concentrations and reduced (P<0.002) protozoa count compared to CTL. The objective of the second study was to evaluate the oral administration of BRP extract to Santa Inês ewes during and after flushing period on the reproductive performance and animal health (hormonal profiles, hematological, biochemical and parasites responses). Thirty adult grazing ewes (40±2.0 kg BW) were divided into two dietary treatments, control (basal diet) and BRP (basal diet plus 3.0g of BRP/ewe/day) for 21 days. Blood and fecal samples were collected weekly for eight weeks. Oral administration of BRP did not affect (P>0.05) any of the observed reproduction traits, but there was promising improvement on the number of services per conceptions and hormones levels: increased (P<0.01) progesterone, decreased cortisol (P<0.05) and thyroxin (T4) (P<0.01) without significant changes in triiodothyronine (T3). Propolis resulted in increasing (P<0.01) of total leukocyte while there were no significant differences observed for other hematological parameters. Propolis increased (P<0.01) total protein and globulin but reduced (P<0.01) triglycerides, glutamate oxaloacetate transaminase (GOT), glutamate pyruvate transaminase (GPT) and fecal egg counts (P<0.05) compared with control. The third study was conducted to evaluate the oral administration of BRP extract to Santa Inês ewes from 25±3 day pre-partum through 48 d post-partum on milk yield, milk composition and lamb performance. Twenty Santa Inês ewes (60 ± 2.0 kg BW) were divided into two groups: control (basal diet) and BRP (basal diet plus 3.0g of BRP/ewe/day for 21 days). Milk samples were collected weekly for seven weeks. Propolis fed group showed increasing (P<0.05) milk yield, fat content, fat yield, protein yield, lactose yield and energy corrected milk while somatic cell counts was decreased (P<0.05). Propolis increased (P<0.05) ewes body condition score. Lambs average daily gain and milk conversion ratio were improved (P<0.05) by propolis treatment. The studies highlight the potential of propolis to handle the ruminal fermentation in order to reduce the production of CH4, as well as improved the health of ewes during the breeding season, besides increasing milk production and performance of lambs / Própolis, aditivo natural, pode ser usada para manipular a fermentação ruminal e diminuir a produção de metano (CH4), podendo afetar o desempenho dos animais. Foram conduzidos estudos visando avaliar a aplicação da própolis em ovinos. O primeiro experimento foi realizado com o objetivo de avaliar o valor nutritivo in vitro de dois tipos da própolis (Vermelho Brasileiro (PVB) e Marrom Egípcio (PME)), através da atividade antimetanogênica, fermentação ruminal e degradabilidade. Os extratos da própolis foram preparados usando etanol e adicionados a um substrato base (50:50 feno Tifton x concentrado) em quatro concentrações [0 (controle, CTL), 25, 50 e 100 micrograma / 0,5 g de substrato]; sendo comparadas com a monensina como controle positivo. As própolis PVB50 micrograma e PME25 micrograma apresentaram redução na produção de CH4 similar à monensina, sendo menores que o CTL. A monensina aumentou (P < 0,001) a concentração de proprionato e diminuiu (P < 0,001) a proporção de acetate / propionate, enquanto as própolis aumentaram (P < 0,002) as concentrações dos ácidos graxos voláteis e reduziram (P < 0,001) os protozoários. O segundo estudo objetivou avaliar a administração de extrato de PVB em ovelhas durante o período de \"flushing nutricional\" sobre o desempenho e a saúde dos animais durante a estação de reprodução. Trinta ovelhas (40 ± 2,0 kg PV) foram divididas em dois grupos, controle (dieta basal) e PVB (dieta basal com suplementação de 3,0 g de PVB / ovelha / dia) e suplementadas durante 21 dias. Amostras de sangue e fezes foram coletadas semanalmente durante oito semanas. Administração do PVB não afetou nenhuma característica reprodutiva, mas houve melhora (P < 0.01) no número de serviços por concepção, e aumento (P < 0,01) no teor de progesterona, diminuição (P < 0,01) nas concentrações de cortisol e tiroxina (T4), sem efeito na concentração de tri-iodotironina (T3). Própolis resultou apenas em aumento (P < 0,01) no número de leucócitos dentre os parâmetros hematológicos. A própolis aumentou (P < 0,01) a concentração de proteina total e de globulina, e reduziou (P < 0,05) os teores de triglicerídeos, transaminase oxalacética (TGO), transaminase glutamato piruvato (TGP) e contagem de ovos nas fezes quando comparado com o controle. O terceiro estudo foi conduzido para avaliar a administração do extrato de PVB para as ovelhas desde 25 ± 3 dias pré-parto até 48 dias pós-parto sobre a produção e composição do leite e desempenho dos cordeiros. Vinte ovelhas (56 ± 2,0 kg PV) foram divididas em dois grupos e suplementadas conforme descrito no segundo estudo: controle e PVB durante 21 dias. Amostras de leite foram coletadas semanalmente durante sete semanas. Própolis aumentou (P < 0,05) a produção de leite, conteúdo de gordura, rendimentos de gordura, proteína e lactose e leite corrigido para energia, enquanto diminuiu (P < 0,05) a contagem de células somáticas, mas aumentou (P < 0,05) a condição corporal. O ganho em peso médio diário dos cordeiros e taxa de conversão de leite foram melhoradas (P < 0,05) pelo tratamento com própolis. Os estudos destacam o potencial da própolis para manipular a fermentação ruminal visando redução na produção de CH4, assim como melhorar a saúde de ovelhas durante a estação de reprodução, além de aumentar a produção de leite e desempenho dos cordeiros

A própolis é uma substância resinosa, cujas atividades antibacteriana, antiinflamatória, antiviral, fungicida, imuno estimulante, cicatrizante e de anestésico local tem sido valorizadas no uso clínico. O lipopolissacarídeo (LPS) é reconhecidamente uma endotoxina e pode induzir processos inflamatórios. Os objetivos deste trabalho foram: a) analisar in vitro as seguintes propriedades do extrato de própolis verde: 1) perfil físico químico 2) Concentração Inibitória Mínima (CIM) frente à endotoxina da bactéria gram negativa Escherichia coli; e 3) sua atividade imunorregulatória sobre leucócitos de baço de ratos; b) analisar &Prime;in vivo&Prime; a ação do Extrato Etanólico de Própolis (EEP) 10% e 90% e do Extrato de Própolis Puro (EPP), em alvéolos dentais contaminados ou não com lipopolissacarídeo (LPS) bacteriano. Para o estudo in vivo 35 ratos foram submetidos às exodontias dos primeiros molares superiores direito e esquerdo, os quais, imediatamente tiveram o alvéolo dental direito contaminado com 0,1µL de lipopolissacarídeo (LPS) (100µg/kg) e o esquerdo sem tal contaminação. Os grupos com (n=7) para cada tratamento, após 2 semanas: GI- Controle Negativo (CN) - sem tratamento; GII- Tratados com Extrato de Própolis puro (EPP) GIII- Tratados com pasta de própolis a 90% (P90); GIV- Tratados com pasta de própolis a 10% (P10); e, GV- Tratado com veículo das pastas (SB) foram analisados. Os alvéolos foram removidos, desmineralizados, processados pela técnica histológica de rotina, submetidos a secções sistematizadas a 6 µm de espessura e corados em H.E. O volume de osso formado, foi avaliado por contagem de pontos, usando um Sistema Teste sobreposto as imagens capturadas com auxílio de uma câmera acoplada a um microscópio. Observada a normalidade dos dados, procedeu-se o teste ANOVA fatorial e Tukey-Kramer test (p<0,05). In vitro determinou-se a propriedade da própolis, sua CIM e atividade imunorregulatória. In vivo os alvéolos dentais contaminados com lipopolissacarídeo bacteriano e tratados com a própolis verde apresentou maior área de osso neoformado, quando comparado aos demais grupos experimentais. O alvéolo não contaminado e tratado com própolis pura mostrou maior área de fibras colágenas. / Propolis is a resinous substance, whose antibacterial, antiinflammatory, antiviral, antifungal, immune stimulant, and local anesthetic wound healing properties has been considered for clinical practice. The lipopolysaccharide (LPS) is recognized as an endotoxin and can induce inflammatory processes. Our objectives were: a) to analyze in vitro the following properties of green propolis extract: 1) physicochemical profile of green propolis sample, 2) Minimum Inhibitory Concentration (MIC) against endotoxin from gram negative Escherichia coli and 3) its immunoregulatory activity using leukocytes from the spleen of mice,. b) analyze in vivo, the action of propolis ethanol extract (EEP) 10% and 90% and Pure Propolis Extract (EPP) in dental alveoli or not contaminated with lipopolysaccharide (LPS) bacterial. For in vivo study, 35 rats were subjected to extractions of maxillary first molars, right and left, which immediately had the right dental socket contaminated with 0.1 µL of lipopolysaccharide (LPS) (100µg/kg) and left without such contamination. They were divided into groups (n = 7) for each sample after 2 weeks, according to the treatment in the right and left alveoli: GI-Negative Control (NC) - no treatment, GII-Treated Pure Propolis Extract (EPP) GIII-Treated folder with propolis 90% (P90), GIV-Treated folder with propolis 10% (P10) and GV-Treated folder with vehicle (SB). The alveoli were removed, demineralized, processed by routine histologic technique, submitted to systematic sections (6 microns) of thick and stained with HE for histological analysis to assess the new bone tissue volume by point counting method, using a Test system on images captured with the aid of a digital camera attached to a microscope. Observed data normality, we proceeded to ANOVA and Tukey-Kramer tests (p <0.05). In vitro, it was determined the propolis properties, CIM and immunoregulatory activity. In vivo, the alveoli contamined with bacterian lipopolysaccharide and treated with green propolis induced higher bone formation when compared to other groups. The non contamined alveoli and treated with pure propolis showed more quantity of collagen fibers.

Orientador: João Ernesto de Carvalho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-17T17:11:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Madjarof_Cristiana_D.pdf: 1735987 bytes, checksum: 696cbfdb2d89fba67710fa58c64078fa (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A própolis é uma resina coletada por abelhas da espécie Apis mellifera e atualmente esse produto vem se destacando por apresentar propriedades biológicas interessantes, como atividade antimicrobiana, antiinflamatória, antiulcerogênica, antiviral, antioxidante e anticâncer. A própolis brasileira apresenta uma constituição química diferenciada principalmente pela diversidade de espécies vegetais para a retirada de resina; variação esta que aponta para a necessidade de novas investigações tanto da composição química quanto das propriedades biológicas das própolis encontradas em diferentes regiões do país. Neste trabalho, duas novas variedades de própolis, a vermelha (Alagoas) e a pertencente ao grupo 6 (Bahia), foram avaliadas quanto às atividades antitumoral, antiinflamatória e antiulcerogênica revelando resultados diferenciados e promissores com relação a essas atividades. Ambos os extratos brutos das própolis demonstraram atividade antiproliferativa nos ensaios in vitro em cultura de células tumorais, bem como suas frações e compostos isolados; mas quando avaliadas in vivo, observou-se que a própolis vermelha demonstrou maior potência e baixa toxicidade. O mesmo foi observado nos ensaios in vivo para atividade antiinflamatória, podendo essa atividade, estar relacionada à atividade antitumoral. Já para a atividade antiulcerogênica ambas as própolis reduziram o volume de secreção gástrica, sendo esse o provável mecanismo de ação para essa atividade. / Abstract: Propolis is a resinous product collected by Apis mellifera bees and has been used as a pharmaceutical because of its antimicrobial, antiinflammatory, antiulcer, antiviral, antioxidant and anticancer activities. Depending on the region, Brazilian propolis has presented a different chemical composition has a composition reflecting the rich biodiversity of vegetal species to collect the resins. This suggests that further studies are needed to investigate biological properties and chemical composition of each regional propolis. The aim of this study was to investigate antitumoral, antiinflamatory and antiulcerogenic activities of two new types of propolis, collected in Alagoas (called Red Propolis) and in Bahia (a propolis from Group 6). Both propolis etanolic crude extracts had demonstrated an antiproliferative activity in vitro in human tumoral cells, as well their fractions and isolated compounds, although in vivo evaluation pointed out that red propolis was more efficient and less toxic. The same result was observed to antiinflamatory activity and probably there is a relationship with antitumoral activity. Antiulcerogenic activity of both própolis was significative and probably due to gastric secretion reduction as the pharmacological mechanism of action. / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Yong Kun Park / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-18T01:55:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Toreti_VivianeCristina_M.pdf: 2525794 bytes, checksum: ef95a1cd07713376ff14615e60664e12 (MD5) Previous issue date: 2011 / Resumo: Própolis é o nome genérico dado ao produto vindo de substâncias resinosas, gomosas e balsâmicas que são coletadas pelas abelhas de flores, brotos e exsudatos de plantas, as quais são transformadas dentro da colméia com adição de cera e pólen (PARK et al., 1998). A própolis é usada pelas abelhas para vedar frestas na colméia, protegê-la e impedir a entrada de insetos invasores. Tem sido alvo de estudo de muitos pesquisadores devido aos seus efeitos antioxidantes, antiinflamatório e antimicrobiano. Essas propriedades biológicas estão ligadas a sua composição química, mais precisamente aos compostos fenólicos que variam em relação a sua estrutura e concentração dependendo da região de produção, disponibilidade de fontes vegetais para coleta de resinas, variabilidade genética da abelha rainha, técnica empregada para produção e época do ano. O Brasil é muito bem visto no mercado externo como produtor da própolis orgânica com características organolépticas de elevado padrão. Sendo assim, o objetivo desse trabalho foi avaliar a composição química e algumas propriedades biológicas da própolis verde relacionando-as com a influência sazonal. Neste trabalho, as própolis de dois apiários distintos no Estado de São Paulo foram classificadas e avaliadas quanto ao teor de fenólicos totais, flavonóides totais e composição química por meio de CLAE-FR. Além disso, foi avaliada a atividade antimicrobiana e antioxidante em diferentes meses. O conteúdo de fenólicos totais variou de 82 a 155 mg/g da própolis para o apiário localizado em Mogi Mirim, e de 66 a 115 mg/g da própolis para o apiário localizado em Águas de São Pedro. O teor de flavonóides totais variou de 11 a 31 mg/g da própolis para o apiário localizado em Mogi Mirim e de 8 a 18 /g própolis para o apiário localizado em Águas de São Pedro. A maior atividade antibacteriana foi notada com os extratos etanólicos da própolis coletados em Janeiro de 2010, independente do apiário. Sobre a atividade antioxidante, as amostras de Mogi Mirim mostraram melhor capacidade de seqüestrar radicais livres quando comparadas com amostras coletadas em Águas de São Pedro. Foi observada a influência da sazonalidade sobre a composição química quantitativa e atividade biológica da própolis dos dois apiários diferentes localizados no Estado de São Paulo, sendo que a atividade antimicrobiana e antioxidante variou em função do período de coleta e da sazonalidade local. Como o melhor período de coleta da própolis é durante o verão, isso provavelmente influencia as alterações na concentração de compostos bioativos oriundos das fontes vegetais destas própolis / Abstract: Propolis is the generic name given to the product obtained from resinous substances, which is gummy and balsamic, and which is collected by bees from flowers, buds and exudates of plants. These substances are transformed by the addition of wax and pollen when into the hive (PARK et al., 1998). Propolis is used by bees to seal cracks in the hive in order to protect and prevent the entry of invasive insects. This substance has been studied by many researchers due to its antioxidant and antimicrobial properties. These biological properties are related to its chemical composition and more specifically to the phenolic compounds that vary in their structure and concentration depending on the region of production, availability of sources to collect plant resins, genetic variability of the queen bee, the technique used for production and the season in which propolis is produced. Brazil is well regarded in the international market as a producer of propolis with organic sensory characteristics of high standard. Therefore, the aim of this study was to evaluate the chemical composition and some biological properties of green propolis relating it to seasonal influence. In this research, the propolis from two different apiaries in the state of São Paulo were classified and evaluated for total phenolic content, total flavonoids and chemical composition by RP-HPLC. In addition, we evaluated the antimicrobial and antioxidant activities in different months. The total phenolic content ranged from 82 to 115 mg/g of propolis at the apiary in Mogi Mirim; and from 66 to 115 mg/g of propolis at the apiary in Águas de São Pedro. The total flavonoid content ranged from 11 to 31 mg/g of propolis at the apiary in Mogi Mirim and from 8 to 18 mg/g of propolis at the apiary in Águas de São Pedro. The highest antibacterial activity was noticed with the ethanol extracts of propolis collected in January 2010 regardless the apiary. Regarding the antioxidant activity, the samples from Mogi Mirim showed better ability to scavenge free radicals when compared to samples collected in Águas de São Pedro. The influence of seasonality on quantitative chemical composition and biological activity propolis from two different apiaries located in the State of São Paulo was observed, so that the antimicrobial and antioxidant activities varied depending on the sampling period and the local seasonality. Finally, since the best period for collection of propolis is during the summer, this will probably change the concentration of bioactive compounds from these plant sources of propolis / Mestrado / Ciência de Alimentos / Mestre em Ciência de Alimentos

Orientadores: Marcos Nogueira Eberlin, Maria Cristina Marcucci Ribeiro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-07T02:59:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sawaya_AlexandraChristineHelenaFrankland_D.pdf: 1255664 bytes, checksum: 590eb73bc0e239bc517bb37afcab9c89 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: A própolis é uma resina obtida de plantas que as abelhas utilizam, acrescida de cera, para proteger sua colméia contra a entrada de correntes de ar, de predadores e de microrganismos. A composição química e fontes vegetais de própolis obtida das abelhas Apis mellifera de regiões de clima temperado como Europa e América do Norte, já foi estudada, constando da literatura pesquisada. Com o objetivo de determinar a composição química e fontes vegetais de própolis brasileira, foram feitos vários estudos, utilizando a espectrometria de massas com ionização por eletrospray (ESI-MS). Inicialmente, extratos etanólicos de própolis (EEP) de Apis mellifera do sul, sudeste e nordeste do Brasil, bem como EEP provenientes da Bulgária, Inglaterra, Finlândia, América do Norte e Moçambique, foram analisados diretamente por ESI-MS e seus espectros comparados por quimiometria. A seguir, EEP de A. mellifera do sul e sudeste do Brasil foram analisados por ESI-MS e comparados com extratos de plantas sugeridas como fontes vegetais de própolis destas regiões. Cromatografia liquida foi acoplada a espectrometria de massas para isolar e identificar compostos encontrados nos EEP e nos extratos de plantas. Em outro estudo, amostras de um tipo de própolis de A mellifera do nordeste brasileiro foram analisadas, permitindo identificar uma fonte vegetal e alguns compostos com atividade antioxidante. Dois estudos foram realizados com própolis de abelhas nativas. Inicialmente, EEP da abelha nativa brasileira (Tetragonisca angustula) provenientes do sul, sudeste e nordeste do Brasil foram comparados entre si, com EEP de A. mellifera destas regiões e com extratos de plantas visitadas por T. angustula, permitindo a identificação da fonte vegetal desta própolis. Depois, EEP de diversas espécies de abelhas nativas sem ferrão de cinco regiões do Brasil foram comparadas entre si e com extratos de plantas e EEP de A. mellifera das mesmas regiões, determinando padrões na composição de própolis de abelhas nativas. Os resultados obtidos contribuíram para um melhor conhecimento da variável composição química de própolis brasileira e de suas fontes vegetais / Abstract: Propolis is a resin, collected from plants, which bees mix with wax and use to protect their hives against air currents, predators and microorganisms. The chemical composition and plant origins of propolis obtained from Apis mellifera bees from temperate regions such as Europe and North America, have already been studied and can be found in literature. With the objective of determining the chemical composition and plant origins of Brazilian propolis, several studies were carried out, using electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS). Initially, ethanolic extracts of propolis (EEP) of Apis mellifera bees from the south, southeast and northeast of Brazil, as well as EEP from Bulgaria, England, Finland, North America and Mozambique, were analyzed by direct insertion ESI-MS and the results analyzed by chemometric analysis. Next, EEP from A. mellifera from the south and southeast of Brazil were analyzed by ESI-MS and their MS fingerprints compared to those of extracts of plants that were previously indicated as plant sources of propolis from those regions. Liquid chromatography was used in-line with mass spectrometry to isolate and identify components of the EEP and plant extracts. In another study, samples of one type of A mellifera propolis from the northeast of Brazil were analyzed, identifying their main plant source and some compounds with antioxidant activity. Two studies were carried out with propolis from native Brazilian stingless bees. Initially EEP of the native bee (Tetragonisca angustula) from the south, southeast and northeast of Brazil were compared with each other, with EEP of A. mellifera from the same regions and with extracts of plants visited by T. angustula, allowing us to identify the main plant source of this type of propolis. Next, EEP of several species of native stingless bees from five regions in Brazil were also compared with plant extracts and EEP of A. mellifera from the same regions, identifying patterns in the composition of propolis from native Brazilian stingless bees. The results obtained contributed to a grater understanding of the variable composition of Brazilian propolis and its plant sources / Doutorado / Quimica Analitica / Doutor em Ciências

Orientador: Mary Luci de Souza Queiroz / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-14T06:41:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Perhs_SimoneMariaCipas_M.pdf: 3198961 bytes, checksum: 7dcc68b78919337c618a237e6794be07 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: O modelo experimental de infecção por Listeria monocytogenes tem provado ser útil na investigação dos efeitos de novos compostos na resposta imunológica primária contra bactérias intracelulares. Em particular, o número de células hematopoéticas na medula óssea e baço é de fundamental importância na resistência a esta infecção. No presente estudo, investigamos o efeito da solução hidro alcoólica de própolis (SHAP), sobre o crescimento e diferenciação de precursores hematopoéticos para granulócitos e macrófagos (CFU-GM) da medula óssea e do baço de animais infectados com Listeria monocytogenes. Além disso, quantificamos os níveis de fatores estimuladores de colônias (CSFs). A eficácia da SHAP frente a uma dose letal da bactéria também foi avaliada. Demonstramos que a SHAP protegeu os animais contra uma dose letal de L. monocytogenes, quando administrada profilaticamente na dose de 4 mg/kg durante 10 dias, com aumento de 20% na sobrevida. Este tratamento também preveniu a mielossupressão e hematopoese extramedular causadas por uma dose subletal de L. monocytogenes, devido a um aumento no número de CFU-GM na medula óssea. Além disso, observamos que os animais somente tratados (não infectados) não apresentaram diferenças significativas em relação ao grupo controle. Adicionalmente, a investigação da produção de fatores estimuladores de colônias no soro dos animais revelou um aumento de CSA nos grupos infectados após 48 e 72h pré-tratados com SHAP, sugerindo que a estimulação da mielopoese pelo produto seja mediada pela produção de fatores de crescimento. Além disso, observamos o aumento da citocinas interferon- gamma IFN-g no grupo infectado/tratado com o produto nas 48 e 72h. / Abstract: Infection with Listeria monocytogenes has proven to be a useful model to investigate early effects of new compounds on the immune response to intracellular bacteria. In particular, the number of hematopoietic cells in the bone marrow and spleen is critically important to resistance to this infection. In this study, we demonstrated the protective effects of hydro alcoholic solution of propolis in mice infected with a lethal dose of Listeria monocytogenes, when administered prophylactically at 4mg/kg for 10 days, with survival rates up to 20%. This dose also prevented the myelosuppression and the splenomegaly caused by a sublethal infection with Listeria monocytogenes, due to the maintenance of granulocytemacrophage progenitors (CFU-GM) numbers in the bone marrow. Non-infected mice treated with hydro alcoholic solution of propolis presented similar numbers of CFU-GM in the bone marrow when compared to the controls. Furthermore, investigation of the production of colony-stimulating factors (CSF) revealed increased colony-stimulating activity (CSA) in the serum of infected mice pre-treated with hydro alcoholic solution of propolis 48 and 72 hours after the infection, suggesting that its effects on the production of growth factors mediate stimulation of myelopoiesis by hydro alcoholic solution of propolis. Moreover, we observed increased level of IFN-g in infected/treated mice. These results sustain our proposal of hydro alcoholic solution of propolis use as an adjuvant agent in the prophylaxis of opportunistic infections and reduction of side effects caused by immunosuppressive therapies. / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Orientador: Yong Kun Park / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-08T03:38:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Daugsch_Andreas_D.pdf: 2046442 bytes, checksum: 6c7927a805842c622f8365909bcb5a1a (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: Própolis contém substâncias resinosas coletadas pelas abelhas (Apis mellifera) de várias plantas. Ela é usada pelas abelhas para selar buracos e proteger a colméia. Própolis é usada na medicina popular desde 300 anos antes de Cristo. Numerosas propriedades biológicas têm sido encontradas nas própolis, incluindo anti-microbiana, citotoxidade, anti-herpes, anti-tumor, anti-HIV, e efeitos supressivos da toxicidade da dioxina. Anteriormente as própolis brasileira haviam sido classificadas em 12 grupos, baseado nas características físico-químicas. Foi também analisada as origens botânicas das principais própolis, como do grupo 3 que foi identificada sendo resina do botão floral de Populus (Salicaceae), do grupo 6 e 12 foi identificada sendo resina de folhas jovens de Hyptis divaricata (Lamiaceae) e Baccharis dracunculifolia (Asteracea), respectivamente. Própolis normalmente é uma resina amarela escura ou amarronzada. Recentemente, nós encontramos uma própolis vermelha em colméias localizadas ao longo do mar e costas de rios no nordeste brasileiro que foi classificada então como própolis do grupo 13. Foi observado que as abelhas coletavam o exudato vermelho da superfície de Dalbergia ecastophyllum (L) Taub. (Leguminosae). Através de análises químicas e histológicas foi comprovado a existência de um novo grupo de própolis de origem botânica Dalbergia ecastophyllum com alta atividade anti-microbiana e anti-radical livre / Abstract: Propolis contains resinous substances of various plants gathered by the honeybee (Apis mellifera). It is used by the bees to seal of holes and to protect the beehive. Propolis is used as a folk medicine since 300 BC. Numerous biological properties have been found including anti-microbial, cytotoxic, anti-herpes, antitumor, anti-HIV and suppressive effects towards dioxin toxicity. Previously, 12 groups of Brazilian propolis have been classified based upon physiochemical characteristics. It was also analyzed the botanical origins of the main própolis. Propolis G3 was identified to contain resins of the buds of Populus (Salicaceae). The botanical origin of propolis of group 6 and 12 was identified as the resins on young leaves of Hyptis divaricata (Lamiaceae) and Baccharis dracunculifolia (Asteracea), respectively. Propolis normally is a dark yellow or brownish resin. Recently, we found a red propolis in beehives along the see and river shores of northeastern Brazil that was classified as propolis group 13. It was observed that honeybees collected red exudates from the surface of Dalbergia ecastophyllum (L) Taub. (Leguminosae). Through chemical and histological analyses the existence of a new group of propolis with botanical origin of Dalbergia ecastophyllum and a high biological activity against microorganisms and free radicals was confirmed. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Orientador: Ronei Jesus Poppi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-08T04:12:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pataca_LuizCarlosMoutinho_D.pdf: 3563791 bytes, checksum: f2877b8f6fa77bd24a2a89eed93b78c4 (MD5) Previous issue date: 2006 / Doutorado / Quimica Analitica / Doutor em Ciências