Made available in DSpace on 2016-04-01T17:54:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-12-10. Added 1 bitstream(s) on 2016-04-01T18:00:37Z : No. of bitstreams: 1 000860697.pdf: 1733916 bytes, checksum: 319f98dc74fda5996433b386d24f96c0 (MD5) / A alta incidência de candidoses causadas por Candida albicans e a capacidade de adaptação desta espécie, assim como resistência aos antifúngicos impulsionam o desenvolvimento de pesquisas com terapias alternativas para controle dessa infecção. O objetivo desse trabalho foi avaliar a influência de Lactobacillus rhamnosus e produtos do seu metabolismo contra C. albicans, avaliando-se a patogenicidade e a expressão de genes que regulam a formação do biofilme de C. albicans, in vitro e in vivo em modelo invertebrado de Galleria mellonella. Foram utilizadas cepas de C. albicans ATCC 18804 e L. rhamnosus ATCC 9595 (provenientes do Laboratório de Microbiologia do Instituto de Ciências e Tecnologia de São José dos Campos / UNESP). Para o estudo foram preparadas duas suspensões de L. rhamnosus, uma contendo a porção celular e a outra com o sobrenadante da cultura, livre de células. O estudo da patogenicidade in vitro de C. albicans foi avaliado pelos testes de formação de biofilme e quantificação de UFC/mL de C. albicans, análise da atividade metabólica pelo método do XTT e filamentação de C. albicans. A análise da curva de sobrevivência de Galleria mellonella foi utilizada para a avaliação in vivo da influência de L. rhamnosus na infecção causada por C. albicans. Os genes, BCR1, EFG1, CPH1, HWP1, ALS1 e ALS3 de C. albicans foram quantificados pela RT-PCR após a interação em modelo de biofilme. No estudo in vitro L. rhamnosus foi capaz de inibir a formação do biofilme, filamentação e reduzir a atividade metabólica de C. albicans. Esses efeitos também foram observados quando utilizado a suspensão do sobrenadante da cultura de L. rhamnosus, apontando possível produção de substâncias com efeito inibitório. Os resultados obtidos in vivo apontam que L. rhamnosus e seu sobrenadante protegeram G. mellonella da infecção por C. albicans, porém a suspensão do sobrenadante apresentou melhores resultados, visto.... / The high incidence of candidiasis caused by Candida albicans and the adaptability of this species, as well as resistance to antifungal drive the development of research on alternative therapies to control this infection. The aim of this study was to evaluate the influence of Lactobacillus rhamnosus and products of their metabolism against C. albicans, evaluating the pathogenicity and the expression of genes that regulate the formation of C. albicans biofilms in vitro and in vivo in invertebrate model Galleria mellonella. Strains of C. albicans ATCC 18804 and L. rhamnosus ATCC 9595 were used (from the Microbiology Laboratory of the Institute of Science and Technology of São José dos Campos / UNESP). For the study were prepared from L. rhamnosus two suspensions, one containing the serving cell and the other with the culture supernatant free cells. The study of in vitro pathogenicity of C. albicans was assessed by biofilm formation testing and quantitation of CFU / ml of C. albicans, analysis of metabolic activity by XTT method and C. albicans filamentation. The analysis of the Galleria mellonella survival curve was used to evaluate in vivo the influence of L. rhamnosus in infection caused by C. albicans. Genes, BCR1, EFG1, CPH1, HWP1, ALS1 and ALS3 of C. albicans were quantified by RT-PCR after interacting in biofilm model. In vitro evaluation L. rhamnosus was able to inhibit biofilm formation, filamentation and reduce the metabolic activity of C. albicans. These effects were also observed when using the suspension culture supernatant of L. rhamnosus, indicating the possible of production substances with inhibiting effect. The results obtained in vivo indicate that L. rhamnosus and its supernatant protected G. mellonella of C. albicans infection, but the suspension of the supernatant showed better results, as it increased the survival caterpillar G. mellonella. The results of gene expression have shown that ....

Made available in DSpace on 2016-04-01T17:54:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-02-03. Added 1 bitstream(s) on 2016-04-01T18:00:43Z : No. of bitstreams: 1 000860755.pdf: 588393 bytes, checksum: 39a4585958739f1195d05de4a9124846 (MD5) / A maioria das bactérias probióticas utilizadas em produtos comerciais são do gênero Lactobacillus. Entretanto, os efeitos das cepas probióticas de Lactobacillus na saúde bucal precisam ser mais investigados. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos de cepas probióticas de Lactobacillus, sobre Streptococcus mutans. Foram testadas cepas de Lactobacillus acidophilus ATCC 4356, Lactobacillus rhamnosus ATCC 1465, Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469 sobre o crescimento planctônico e biofilmes de Streptococcus mutans (UA159). Para estudo da atividade antibacteriana de Lactobacillus sobre o crescimento planctônico de S. mutans, suspensões padronizadas desses micro-organismos foram cultivadas em conjunto em caldo BHI por 24 h a 37 oC em 5% de CO2. Para estudo dos efeitos de Lactobacillus sobre biofilmes, suspensões padronizadas de cada cepa de Lactobacillus foram adicionadas aos biofilmes de S. mutans formados em fundo de placas de 96 poços. Os biofilmes foram incubados em Caldo BHI com 15% de sacarose a 37 oC por 48 h, e a seguir foram desagregados por homogeneização ultrassônica. Após a execução dos testes em crescimento planctônico e em biofilmes, foram realizadas diluições seriadas e semeaduras em meios de cultura seletivo para S. mutans (ágar Mitis Salivarius Bacitracina Sacarose) e para Lactobacillus (ágar Rogosa). A seguir, as unidades formadoras de colônias (UFC/mL) foram contadas e submetidas ao teste t de Student, considerando-se nível de significância de 5%. Os resultados demonstraram que as 3 cepas probioticas de Lactobacillus reduziram o crescimento planctônico de S. mutans, entretanto não foram observadas diferenças estatisticamente significantes entre os grupos Controle (S. mutans) e interação (S. mutans e cepa de Lactobacillus). Em relação aos biofilmes, apenas a cepa de Lactobacillus rhamnosus 1465 apresentou redução significativa no biofilme de s. mutans.... / Most probiotic bacteria used in commercial products belong to the genus Lactobacillus. However, the effects of Lactobacillus probiotic strains in the oral health need to be further investigated. The objective of this study is to evaluate the effects of probiotic Lactobacillus strains, on Streptococcus mutans. Lactobacillus strains acidophilus ATCC 4356, Lactobacillus rhamnosus ATCC 1465, Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469 were tested on planktonic and biofilm growth of Streptococcus mutans (UA159). In order to study the antimicrobial activity of Lactobacillus on planktonic growth of S. mutans, standardized suspensions of these microorganisms were grown together in BHI for 24 hours at 37 °C in 5% CO2. In order to study the antimicrobial activity on biofilm growth, standardized suspensions of each strain of Lactobacillus were added to the S. mutans biofilm formed on the bottom of 96 well plates. Biofilms were incubated in BHI broth with 15% sucrose at 37 °C for 48 h and then were separated by ultrasonic homogenization. After the tests with planktonic and biofilm growth, serial dilutions and sowing in selective culture media were performed for S. mutans (Mitis Salivarius Bacitracin Sucrose agar) and Lactobacillus (Rogosa agar). Subsequently, colony forming units (CFU / mL) were counted and submitted to the Student t test, considering a level of 5% significance. The results show that the 3 Lactobacillus probiotic strains reduced the planktonic growth of S. mutans, however, no significant statistical differences were observed between the control (S. mutans) and interaction groups (S. mutans and Lactobacillus strain). Regarding biofilm growth, only the strain of Lactobacillus rhamnosus 1465 showed a significant reduction of S. mutans biofilm (p < 0.0001). It was concluded that the probiotic strains tested do not stimulate the growth nor biofilm formation of S. mutans. Moreover, the Lactobacillus rhamnosus 1465 strain has shown the potential ....

Resumo: A cadeia produtiva avícola busca cada vez mais aprimorar a qualidade da produção utilizando produtos que possibilitem melhor desempenho zootécnico, prezando também pelo bem estar animal. Estas medidas têm como objetivo melhorar a qualidade da carne e de ovos, tornando esses alimentos mais seguros para o consumidor. Para obter tais melhorias, são utilizados produtos que reduzam a contaminação por patógenos e sejam capazes de auxiliar o animal a responder melhor aos desafios. Dentre estes produtos estão os denominados probióticos, bactérias benéficas fornecidas aos animais, com o objetivo de melhorar o desempenho zootécnico dos mesmos, regulando a microbiota intestinal e estimulando o sistema imunológico. A presente dissertação busca estudar os efeitos de um probiótico contendo Enterococcus faecium sobre o sistema imunológico de frangos de corte desafiados contra Salmonella Minnesota. Esta dissertação foi dividida em dois capítulos: Capítulo 1, revisão bibliográfica sobre “Probióticos na Avicultura” e Capítulo 2, trabalho experimental “Enterococcus faecium atuando na dinâmica de infiltração celular da lamina própria de íleo e ceco de frangos desafiados com Salmonella Minnesota”. No trabalho experimental foram utilizados 60 frangos de corte de 1 a 35 dias, divididos em três tratamentos, sendo o Tratamento 1 controle negativo, o Tratamento 2 controle Positivo e o Tratamento 3 o grupo tratado com Enterococcus faecium (EF). As aves foram desafiadas aos 15 dias com Salmonella Minnesota (SM) e foi observado redução na contagem de SM aos 17 dias (suabe) e aos 35 dias (cama e ceco) nas aves consumindo EF comparado com aves desafiadas. Foi também observado maior contagem de células caliciformes em íleo e ceco, menor contagem de CD8+ em íleo e maior contagem de CD4+ em ceco de aves que consumiram EF comparada com grupo controle antes do desafio. Após o desafio as aves que consumiram EF apresentaram menor contagem de CD4+ e CD8+ em ceco comparado com aves desafiadas.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:01Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-08-22Bitstream added on 2014-06-13T21:05:41Z : No. of bitstreams: 1 lodi_cs_dr_araca.pdf: 472874 bytes, checksum: c9c4033eb4b377f2e55af453639c1621 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Um número crescente de produtos contendo probióticos está disponível no mercado e vem sendo utilizados pelos consumidores. Diante disso, o objetivo deste trabalho foi avaliar in situ, in vivo e in vitro a relação da bactéria probiótica com a cárie dentária. No estudo in situ investigou-se a cariogenicidade do leite fermentado contendo probióticos através da quantificação dos açúcares totais e redutores presente no produto, análise do seu efeito na desmineralização do esmalte dental bovino, análise microbiológica da saliva antes e após o período experimental, análise microbiológica e quantificação dos carboidratos álcalis-solúveis presente no biofilme. Para isso, dez voluntários utilizaram um dispositivos contendo 4 blocos de esmalte dental bovino. O experimento consistiu de 3 etapas de 14 dias cada onde os voluntários gotejaram solução de sacarose 20% ou a solução de tratamento (Tratamento A - Yakult® ou Tratamento B - Batavito®) 8X/dia. Decorrido o período experimental, o biofilme e a saliva foram analisados quanto a quantidade de microrganismos totais (MT), Streptococcus totais (ST) e Streptococcus do grupo mutans (SM), Lactobacillus (L). Para os dados de dureza foram calculados a porcentagem de variação de dureza superficial e a perda integrada de dureza de subsuperfície. Após o tratamento B foi observado menor quantidade de MT no biofilme quando comparado com o tratamento A, mas não diferiu da solução de sacarose 20%. Na saliva, o tratamento com solução de sacarose 20% diminuiu a quantidade de MT e ST, e aumento a quantidade de SM. O tratamento A provocou uma diminuição na quantidade de MT, ST e SM e o tratamento B diminuiu a quantidade de MT. Para os dados... / Probiotics are live microorganisms, which when administered in adequate amounts, confer a health benefit on the host. An increasing number of probiotic-containing products are available, and these products have been orally consumed. However, the objective of this study was to evaluate in situ, in vivo and in vitro the relation between probiotic bacteria and dental caries. In the in situ and in vivo study it was evaluate the effect of 2 probiotic-containing fermented milk on biofilm and saliva microorganisms and on enamel surface. The in situ study was performed in 3 phases: 20% sucrose, treatment A (Yakult®) and treatment B (Batavito®). Salivary microorganisms were counted at baseline and after and biofilm was analyzed just after the trial period. In vivo study was performed in 2 phases: treatment C (Yakult®) and treatment D (Batavito®). The saliva was collected at baseline and at the end of the trial period for microbiological analysis. In the in situ study, biofilm data showed less total microorganisms (TM) after treatment B than treatment A but similar to 20% sucrose. In the saliva, 20% sucrose decreased TM and total streptococci (TS), and increased mutans streptococci (MS). Treatment A significantly decreased TM, TS and MS. Treatment B decreased TM. It was observed less MS in treatment B when the final data were compared among the treatments. Treatment B differed from the other treatments in relation to final microhardness, percentage change of surface hardness and integrated loss of subsurface hardness (p<0.05). In vivo study showed that just treatment D decreased all microorganisms. It was observed higher lactobacilli (L) in treatment D when the baseline data were compared among the groups. In the in vitro study, it was determined the ability of probiotic bacteria to prevent primary caries development... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:25Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-10-26Bitstream added on 2014-06-13T18:09:33Z : No. of bitstreams: 1 kuba_ee_me_arafcf.pdf: 816726 bytes, checksum: 855ca4798f7fb494846e5bded4c923c4 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Os alimentos probióticos representam uma classe muito importante para a manutenção do estado de saúde. No mercado, esses produtos são predominantemente iogurtes e leites fermentados, havendo uma demanda por alimentos probióticos não-lácteos para ampliar as opções dos consumidores vegetarianos, bem como atender às necessidades dos indivíduos intolerantes à lactose. Nesse contexto, a soja apresenta-se como um adequado substituto do leite, em virtude das suas qualidades nutricionais e funcionais. O presente estudo teve como objetivo o desenvolvimento de uma sobremesa potencialmente probiótica mista de tofu e extrato hidrossolúvel de soja, fermentado com Enterococcus faecium CRL 183. No total, foram produzidas três formulações de sobremesa probiótica, com diferentes proporções de tofu e fermentado de soja: “A” (50%/ 50%), “B” (70%/ 30%) e “C” (80%/ 20%). Todas apresentavam as mesmas porcentagens de NaHCO3, creme de soja, polpa de morango, aroma de leite em pó, corante natural carmim de colchonilha, goma carragena e açúcar refinado. Testes sensoriais de aceitação e de intenção de compra foram realizados com 65 consumidores visando a escolha da melhor formulação, à qual foi submetida a análises físico-químicas e microbiológicas nos tempos de 2, 14 e 28 dias de estocagem a ±5ºC e, também, a análise sensorial nos tempos de 4, 14 e 28 dias. A composição centesimal e o valor calórico também foram determinados. Os dados foram avaliados através de análise de variância e teste de médias de Tukey (p<0,05). A sobremesa “A” foi considerada a melhor em termos sensoriais, principalmente quanto à intenção de compra, uma vez que 47% dos consumidores afirmaram que “certamente ou provavelmente comprariam” o produto. Sendo assim, ela foi selecionada para prosseguir o estudo... / The probiotic foods represent a very important class for the maintenance of health state. At the market, these products are predominantly yogurts and fermented milks. There is a demand for non-dairy probiotic foods to increase the vegetarian options and attend the individuals with lactose intolerance. In this context, soy based food appears as an ideal substitute because its nutritional and functional qualities. The present study aimed the development of a potentially probiotic dessert added with tofu and aqueous extract of soy fermented with Enterococcus faecium CRL 183. Three formulations were produced with different proportions of tofu and fermented soy product: A (50% / 50%), B (70% / 30%) and C (80% / 20 %). All the desserts contained the same percentages of NaHCO3, soy cream, strawberry pulp, flavor milk powder, natural colouring agent, carrageenan gum, and sugar. Sensory tests for acceptance and purchase intent were performed to choose the best formulation, which was studied by physico-chemical, microbiological and rheological analysis after 2, 14 and 28 days of storage (± 5 º C) and sensory analysis after 4, 14 and 28 days. The chemical composition and caloric value were also determined. Data were evaluated by analysis of variance and Tukey test (p <0,05). The dessert A was considered the best sensorially, especially regarding the purchase intent, since that 47% of the panelists said they would certainly or probably buy this product”. Thus, it was chosen for further study. The composition of the formulation A had 72.2% of moisture, 4.4% of protein, 3.1% of fat, 0.6% of ash and 19.6% of carbohydrate, and the caloric value was 124 3 kcal / 100g. In this formulation, the strains of E. faecium CRL 183 and L. helveticus 416 remained viable throughout the experimental period, they exhibited... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Juliana Campos Junqueira / Banca: Graziella Nuernberg Back Brito / Banca: Liliana Scorzoni / Banca: Fernanda Malagutti Tomé / Resumo: Devido ao aumento das infecções causadas por Candida albicans e espécies não-albicans, surge a necessidade de novas estratégias terapêuticas, como a identificação de cepas bacterianas com características probióticas. Assim, o objetivo foi avaliar a ação antimicrobiana de cepas clínicas de Lactobacillus paracasei, Lactobacillus fermentum e Lactobacillus rhamnosus sobre diferentes espécies de Candida (C. albicans, C. glabrata, C. krusei e C. tropicalis). Foram utilizadas cepas de Lactobacillus isoladas da cavidade bucal de indivíduos livres de cárie e cepas de Candida isoladas de lesões de candidose orofaríngea obtidas em estudos anteriores. Para estudo in vitro, foram formados biofilmes monoespécies de Candida (Grupo controle) e biofilmes mistos de Candida e Lactobacillus, nos quais os lactobacilos foram acrescentados antes da cepa de Candida (Grupo Profilático), após a cepa de Candida (Grupo Terapêutico) ou ao mesmo tempo da cepa de Candida (Grupo Simultâneo). Após 48 h de incubação, foi realizada a contagem do número de células viáveis de Candida (UFC/mL). Para estudo in vivo, os micro-organismos foram inoculados em larvas de G. mellonella e o desenvolvimento da candidose foi monitorado pela curva de sobrevivência, estudando-se os grupos experimentais descritos acima. Nos resultados in vitro, foi verificado que os efeitos inibitórios mais significativos de Lactobacillus sobre Candida ocorreram nos grupos profiláticos. As cepas de C. tropicalis e C. krusei foram mais sensívei... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract : Due to the increase of infections caused by Candida albicans and non-albicans species, there is a need for new therapeutic strategies, such as the identification of bacterial strains with probiotic characteristics. The objective of this study was to evaluate the antimicrobial action of Lactobacillus paracasei, Lactobacillus fermentum and Lactobacillus rhamnosus strains on different Candida species (C. albicans, C. glabrata, C. krusei and C. tropicalis). We used Lactobacillus strains isolated from the oral cavity of caries-free and Candida strains isolated from lesions of oropharyngeal candidiasis. For in vitro study, monospecies of Candida (Control Group) and mixed biofilms of Candida and Lactobacillus were prepared, in which the lactobacillus were attached before the Candida strain (Profile Group), after a Candida (Therapeutic Group) strain or same time as the Candida strain (Simultaneous Group). After 48 h of incubation, we counting the number of viable Candida cells (CFU/mL). For in vivo study, we inoculate the microorganisms in larvae of G. mellonella and the development of the application for monitoring by survival curve, studying the experimental groups described above. In the in vitro results, we find that the most significant inhibitory effects of Lactobacillus on Candida occurred in the prophylactic groups. The strains of C. tropicalis and C. krusei were more sensitive to the action of Lactobacillus than C. albicans and C. glabrata. In addition, it we verified that the three species of Lactobacillus studied (L. paracasei, L. rhamnosus and L. fermentum) had an inhibitory action on Candida. In relation to the in vivo study, we verified that the prophylactic groups had more inhibitory effects on an experimental candidose in relation to the therapeutic groups, leading to a significant increase in the survival rates of the larvae. In relation to the .....(Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Elizeu Antonio Rossi / Coorientador: Daniela Cardoso Umbelino Cavallini / Banca: Marla Simone Jovenasso Manzoni / Banca: Regina Celia Vendramini / Resumo: O presente trabalho avaliou os efeitos do simbiótico fermentado com Enterococcus faecium CRL 183 e Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416, à base de extratos de soja e de yacon produzidos em ratos com Diabetes mellitus, cuja indução foi feita quimicamente pela administração intraperitoneal de estreptozotocina (50mg/kg de peso corporal). Os animais foram divididos em quatro grupos experimentais (n=10): I - animais não diabéticos que receberam somente ração (controle negativo); II - animais diabéticos que receberam somente ração (controle positivo); III - animais diabéticos que receberam ração + dose de 1 mL/Kg de peso corpóreo/dia do produto não fermentado a base de soja e yacon; IV - animais diabéticos que receberam ração + dose de 1 mL/Kg de peso corpóreo/dia do produto fermentado a base de soja e yacon. No produto em estudo foram quantificadas a viabilidade dos microrganismos probióticos e a concentração dos frutanos (FOS e inulina). O período experimental foi de 59 dias e os parâmetros avaliados foram: peso corpóreo dos animais, ingestão hídrica e alimentar, Coeficiente de Eficácia Alimentar (CEA), glicemia, enzimas aspartato aminotransferase (AST) e alanina aminotransferase (ALT), triglicerídeos, colesterol, HDL, nHDL-C, gorduras epididimal e retoperitonial, músculos sóleo e extensor longo dos dedos, cortes histológicos de fígado, pâncreas e rim e, análise de biomarcadores de estresse oxidativo, TBARS (substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico) e DPPH (2,2 - difenil-1-picril de hidrazila). Não foi observada diferença entre os grupos que receberam os produtos não fermentado e fermentado quando comparado com o grupo de diabéticos que não recebeu tratamento, para consumo de água, ração e peso corporal. O mesmo foi observado para os parâmetros bioquímicos, exceto ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study evaluated the hypoglycemic effects of synbiotic fermented with Enterococcus faecium CRL 183 and Lactobacillus helveticus ssp jugurti 416, based on soymilk and yacon produced in rats with Diabetes mellitus, whose induction was done chemically by intraperitoneal administration of streptozotocin (50 mg/kg body weight). The rats were divided into four groups (n=10): I - non diabetic animals that received only chow diet (negative control), II - diabetic animals that received only chow diet (positive control), III - diabetic animals that received chow diet + 1mL/kg body weight/day of unfermented product of soybean and yacon, IV - diabetic rats that received chow diet + 1mL/kg body weight/day of fermented product of soybean and yacon extracts. In the product under study were quantification viability of microorganisms of the probiotic and the concentration of fructans (inulin and FOS). The experiment was carried out for 59 days and the parameters were evaluated: body weight of animals, feed and water intake, Food Efficiency Ratio (FER), glucose, enzymes aspartate aminotransferase (AST) and alanine aminotransferase (ALT), levels of triglyceride, cholesterol, HDL-C nHDL, epididymal and retoperitonial white adipose tissue, soleus and extensor digitorum longus and tissues liver, kidney and pancreas, and analysis of biomarkers of oxidative stress, TBARS (thiobarbituric acid reactive substances) and DPPH (2,2 - diphenyl-1-picryl of hidrazila). No difference was observed between the groups that received unfermented and fermented products when compared to the diabetic group that not received treatment, for drinking water, feed intake and body weight. The same was observed for the biochemical parameters, except for fractions HDL-cholesterol and triglycerides. With respect to biomarkers there was... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Co-orientador: Mariella Vieira Pereira Leão / Banca: Juliana Campos Junqueira / Banca: Aguinaldo Silva Garcez Segundo / Resumo: A alta incidência de candidoses causadas por Candida albicans e a capacidade de adaptação desta espécie, assim como resistência aos antifúngicos impulsionam o desenvolvimento de pesquisas com terapias alternativas para controle dessa infecção. O objetivo desse trabalho foi avaliar a influência de Lactobacillus rhamnosus e produtos do seu metabolismo contra C. albicans, avaliando-se a patogenicidade e a expressão de genes que regulam a formação do biofilme de C. albicans, in vitro e in vivo em modelo invertebrado de Galleria mellonella. Foram utilizadas cepas de C. albicans ATCC 18804 e L. rhamnosus ATCC 9595 (provenientes do Laboratório de Microbiologia do Instituto de Ciências e Tecnologia de São José dos Campos / UNESP). Para o estudo foram preparadas duas suspensões de L. rhamnosus, uma contendo a porção celular e a outra com o sobrenadante da cultura, livre de células. O estudo da patogenicidade in vitro de C. albicans foi avaliado pelos testes de formação de biofilme e quantificação de UFC/mL de C. albicans, análise da atividade metabólica pelo método do XTT e filamentação de C. albicans. A análise da curva de sobrevivência de Galleria mellonella foi utilizada para a avaliação in vivo da influência de L. rhamnosus na infecção causada por C. albicans. Os genes, BCR1, EFG1, CPH1, HWP1, ALS1 e ALS3 de C. albicans foram quantificados pela RT-PCR após a interação em modelo de biofilme. No estudo in vitro L. rhamnosus foi capaz de inibir a formação do biofilme, filamentação e reduzir a atividade metabólica de C. albicans. Esses efeitos também foram observados quando utilizado a suspensão do sobrenadante da cultura de L. rhamnosus, apontando possível produção de substâncias com efeito inibitório. Os resultados obtidos in vivo apontam que L. rhamnosus e seu sobrenadante protegeram G. mellonella da infecção por C. albicans, porém a suspensão do sobrenadante apresentou melhores resultados, visto.... / Abstract: The high incidence of candidiasis caused by Candida albicans and the adaptability of this species, as well as resistance to antifungal drive the development of research on alternative therapies to control this infection. The aim of this study was to evaluate the influence of Lactobacillus rhamnosus and products of their metabolism against C. albicans, evaluating the pathogenicity and the expression of genes that regulate the formation of C. albicans biofilms in vitro and in vivo in invertebrate model Galleria mellonella. Strains of C. albicans ATCC 18804 and L. rhamnosus ATCC 9595 were used (from the Microbiology Laboratory of the Institute of Science and Technology of São José dos Campos / UNESP). For the study were prepared from L. rhamnosus two suspensions, one containing the serving cell and the other with the culture supernatant free cells. The study of in vitro pathogenicity of C. albicans was assessed by biofilm formation testing and quantitation of CFU / ml of C. albicans, analysis of metabolic activity by XTT method and C. albicans filamentation. The analysis of the Galleria mellonella survival curve was used to evaluate in vivo the influence of L. rhamnosus in infection caused by C. albicans. Genes, BCR1, EFG1, CPH1, HWP1, ALS1 and ALS3 of C. albicans were quantified by RT-PCR after interacting in biofilm model. In vitro evaluation L. rhamnosus was able to inhibit biofilm formation, filamentation and reduce the metabolic activity of C. albicans. These effects were also observed when using the suspension culture supernatant of L. rhamnosus, indicating the possible of production substances with inhibiting effect. The results obtained in vivo indicate that L. rhamnosus and its supernatant protected G. mellonella of C. albicans infection, but the suspension of the supernatant showed better results, as it increased the survival caterpillar G. mellonella. The results of gene expression have shown that .... / Mestre

Orientador: Juliana Campos Junqueira / Co-orientador: Antônio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Antonio Olavo Cardoso Jorge / Banca: Simone Furgeri Godinho Vilela / Resumo: A maioria das bactérias probióticas utilizadas em produtos comerciais são do gênero Lactobacillus. Entretanto, os efeitos das cepas probióticas de Lactobacillus na saúde bucal precisam ser mais investigados. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar os efeitos de cepas probióticas de Lactobacillus, sobre Streptococcus mutans. Foram testadas cepas de Lactobacillus acidophilus ATCC 4356, Lactobacillus rhamnosus ATCC 1465, Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469 sobre o crescimento planctônico e biofilmes de Streptococcus mutans (UA159). Para estudo da atividade antibacteriana de Lactobacillus sobre o crescimento planctônico de S. mutans, suspensões padronizadas desses micro-organismos foram cultivadas em conjunto em caldo BHI por 24 h a 37 oC em 5% de CO2. Para estudo dos efeitos de Lactobacillus sobre biofilmes, suspensões padronizadas de cada cepa de Lactobacillus foram adicionadas aos biofilmes de S. mutans formados em fundo de placas de 96 poços. Os biofilmes foram incubados em Caldo BHI com 15% de sacarose a 37 oC por 48 h, e a seguir foram desagregados por homogeneização ultrassônica. Após a execução dos testes em crescimento planctônico e em biofilmes, foram realizadas diluições seriadas e semeaduras em meios de cultura seletivo para S. mutans (ágar Mitis Salivarius Bacitracina Sacarose) e para Lactobacillus (ágar Rogosa). A seguir, as unidades formadoras de colônias (UFC/mL) foram contadas e submetidas ao teste t de Student, considerando-se nível de significância de 5%. Os resultados demonstraram que as 3 cepas probioticas de Lactobacillus reduziram o crescimento planctônico de S. mutans, entretanto não foram observadas diferenças estatisticamente significantes entre os grupos Controle (S. mutans) e interação (S. mutans e cepa de Lactobacillus). Em relação aos biofilmes, apenas a cepa de Lactobacillus rhamnosus 1465 apresentou redução significativa no biofilme de s. mutans.... / Abstract: Most probiotic bacteria used in commercial products belong to the genus Lactobacillus. However, the effects of Lactobacillus probiotic strains in the oral health need to be further investigated. The objective of this study is to evaluate the effects of probiotic Lactobacillus strains, on Streptococcus mutans. Lactobacillus strains acidophilus ATCC 4356, Lactobacillus rhamnosus ATCC 1465, Lactobacillus rhamnosus ATCC 7469 were tested on planktonic and biofilm growth of Streptococcus mutans (UA159). In order to study the antimicrobial activity of Lactobacillus on planktonic growth of S. mutans, standardized suspensions of these microorganisms were grown together in BHI for 24 hours at 37 °C in 5% CO2. In order to study the antimicrobial activity on biofilm growth, standardized suspensions of each strain of Lactobacillus were added to the S. mutans biofilm formed on the bottom of 96 well plates. Biofilms were incubated in BHI broth with 15% sucrose at 37 °C for 48 h and then were separated by ultrasonic homogenization. After the tests with planktonic and biofilm growth, serial dilutions and sowing in selective culture media were performed for S. mutans (Mitis Salivarius Bacitracin Sucrose agar) and Lactobacillus (Rogosa agar). Subsequently, colony forming units (CFU / mL) were counted and submitted to the Student t test, considering a level of 5% significance. The results show that the 3 Lactobacillus probiotic strains reduced the planktonic growth of S. mutans, however, no significant statistical differences were observed between the control (S. mutans) and interaction groups (S. mutans and Lactobacillus strain). Regarding biofilm growth, only the strain of Lactobacillus rhamnosus 1465 showed a significant reduction of S. mutans biofilm (p < 0.0001). It was concluded that the probiotic strains tested do not stimulate the growth nor biofilm formation of S. mutans. Moreover, the Lactobacillus rhamnosus 1465 strain has shown the potential .... / Mestre

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:06:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000437519-Texto+Completo-0.pdf: 844123 bytes, checksum: 3e477c27cefaf468054fd8cde867db48 (MD5) Previous issue date: 2011 / Probiotics have been widely studied due to the benefic effects to host health. The main research field of probiotics is gastrointestinal tract. However, there is an increased interest in odontology research due to the benefits of probiotics in oral cavity. Oral infections, mainly caries, show high prevalence in Brazilians and its treatment has high costs. Preventive actions to this disorder should have high potential to benefit a high number of individuals. The efforts of odontology nowadays aim to recover the balance between pathogenic microorganisms and benefic micro flora. New methods, like bacteriotherapy to reduce pathogenic elements of oral micro biota, have being investigated. Probiotics are one of the new promising agents on caries disease. It is believed that among the various criteria to the selection of a certain strain, adhesion is considered the most favor to the expression of probiotic activity as well as administration. Probiotics are safe to the use of healthy people however, they should be cautious administered in ill individuals to avoid bacteremia risk. Clinical trials searching for the role of probiotics in the prevention of caries are limited and new studies should be performed to better identify the mechanisms of action as well as the benefic effects in oral cavity. / Probióticos tem sido extensivamente estudados pelos seus efeitos benéficos à saúde do hospedeiro. O principal campo de pesquisa de probiótico é o trato gastrointestinal. Entretanto, nos últimos anos tem havido um crescente interesse da pesquisa odontológica pelos benefícios dos probióticos na cavidade oral. As infecções orais, em particular a cárie, tem alta prevalência na população brasileira e seu tratamento envolve alto custo. Ações preventivas dirigidas a esta enfermidade teriam um alto potencial de beneficiar um grande número de indivíduos. Atualmente, os esforços da Odontologia visam restaurar o equilíbrio entre os microrganismos patógenos e a microflora benéfica. Novos métodos como a bacterioterapia para reduzir elementos patógenos da microbiota oral vem sendo investigados. Os probióticos são um destes novos agentes promissores na profilaxia da doença cárie. Acredita-se que dentre vários critérios de seleção para a escolha de uma determinada cepa, a adesão pode ser considerada a que mais favorece a expressão da atividade probiótica, assim como o veículo de administração. Probióticos são seguros para o uso de pessoas saudáveis, mas devem ser administrados com cautela em pessoas debilitadas para evitar o risco de bacteremias. Os ensaios clínicos sobre o papel dos probióticos na prevenção da doença cárie ainda são bastante limitados e novos estudos devem ser realizados a fim esclarecer melhor seu mecanismos de ação e efeitos benéficos na cavidade oral.