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Avaliação do efeito de microrganismos probióticos sobre Cryptosporidium parvum em camundongos C57BL/6 imunossuprimidos / Evaluation of the effect of probiotics microorganisms on Cryptosporidium parvum in immunodeficient C57BL/6 mice

Coutinho, Tatiane Sueli 02 April 2008 (has links)
Os probióticos são produtos ou preparações que contém microrganismos viáveis, com concentrações definidas, capazes de alterar a microbiota intestinal do hospedeiro, exercendo efeitos benéficos a sua saúde. Os microrganismos mais usados para esta finalidade são as bactérias lácticas, destacando-se espécies de Lactobacillus. Apesar do avanço científico nesta área, poucos estudos são encontrados a respeito da ação probiótica sobre protozoários, como Cryptosporidium parvum, um parasito intestinal importante por causar uma das principais infecções oportunistas em indivíduos imunodebilitados, como aidéticos e transplantados. Os produtos probióticos podem ser uma alternativa para o tratamento da criptosporidiose, uma vez que, ainda, não há um tratamento eficaz contra esta parasitose. Sendo assim, o presente estudo visou avaliar a ação de cepas de Lactobacillus plantarum, L. acidophillus e L. delbruekii, na forma de pool, sobre Cryptosporidium parvum em camundongos imunossuprimidos. Os experimentos foram desenvolvidos utilizando-se 42 animais divididos em seis grupos: Controle - não imunossuprimidos, não infectados e não tratados; Imuno - imunossuprimidos, não infectados e não tratados; Não tratado - imunossuprimidos, infectados e não tratado; NTZ - imunossuprimidos, infectados e tratados com o antiprozotoário nitazoxanida (150mg/kg); PRO - imunossuprimidos, infectados e tratados com a preparação probiótica (3x10¹²UFC/mL); e, Preventivo - imunossuprimidos, tratados com a preparação probiótica e posteriormente infectados. Após 12 dias de imunossupressão os animais foram infectados com 1,6x106 oocistos e, os respectivos tratamentos iniciados após cinco dias da inoculação dos oocistos. A infecção foi analisada pela contagem de oocistos nas fezes, purificados pela técnica de sedimentação de formol-éter. A colonização intestinal pelos lactobacilos foi analisada pela técnica de \"pour plate\" em ágar MRS com antibiótico Rifampcina. O desempenho nutricional dos camundongos foi analisado por meio da conversão alimentar, uma relação entre a quantidade de ração consumida e o ganho de peso dos animais. Os resultados demonstraram que os animais que receberam o tratamento preventivo com os probióticos apresentaram uma eliminação de oocistos significativamente menor (P<=0,05) que os demais grupos infectados. O tratamento com a preparação probiótica, pós-infecção, também se mostrou eficaz, pois todos os animais eliminaram a infecção. Estes resultados podem ser explicados por meio do mecanismo de ação conhecido como exclusão competitiva, devido a colonização do trato gastrointestinal ou, pela produção de substância antimicrobiana, produzida por Lactobacillus, que apresentou ação sobre os oocistos. Observou-se, também, que os animais tratados com probióticos tiveram um melhor desempenho nutricional. Estes resultados confirmam a hipótese que microrganismos com propriedades probióticas representam uma forma alternativa, e promissora, na prevenção e tratamento da criptosporidiose. / The probiotics are products or preparation containing viable microorganisms, in defined concentrations, capable of change the host\'s microbiota, exerting beneficial effects on the host\'s health. The most important microorganisms which present these properties belong to the group of lactic acid bacterium, mainly species of Lactobacillus. Even though technological advances in this area, few studies are found concerning the action probiotics on protozoan, as Cryptosporidium parvum, an important intestinal parasite which causes one of the main opportunist infection in immunodeficient individuals, such as AIDS and transplanted patients. The probiotics products can be an alternative to treatment against cryptosporidiosis, since, so far an effective treatment against this infection has not been found. Therefore, the present study aimed to evaluate the action of strains of Lactobacillus plantarum, L. acidophillus and L. delbruekii, as a pool, on Cryptosporidium parvum in immunosuppressed mice. The experiments were developed using 42 animals separated in six groups: Control - the mices were not immunosuppressed, no infected and no treated; Immuno - immunosuppressed, no infected and no treated; No treated - immunosuppressed, infected and no treated; NTZ - immunosuppressed, infected and treated with a Nitazoxanide antimicrobial (150mg/kg); PRO - immunosuppressed, infected and treated with a preparation probiotic (3x10¹²UFC/mL); and, Preventive - immunosuppressed, treated with the probiotic preparation and then infected. After 12 days of immunosuppression procedure the animals were infected with 1,6x106 oocysts and, the respective treatments were started after five days of the inoculation of the oocysts. The infection was analyzed by counting of purified oocysts by tecnic of formol ether sedimentation of the feces. The intestinal colonization by lactobacilli was analyzed by pour plate technique on MRS agar containing Rifampicin antibiotic. The nutritional performance of the animals was calculated based on the rate of feed conversion, which is a relation between the amount of food consumed and the body weight gained by each animal. The results showed that the animals that received a preventive treatment with the probiotic preparation presented an elimination of oocysts lower than (P<=0,05) the other infected groups. The treatment with the probiotic preparation, post-infection also showed to be effective, once all the animals eliminated the infection. These results can be explained by competitive exclusion due to the colonization of gastrointestinal tract of the animals or by production of antimicrobial substances produced by Lactobacillus, which presented somehow any action on oocysts. It was also observed that the treated animals with the probiotic preparation presented better nutritional performance. These results confirm the hypothesis that the microorganisms which present probiotic properties represent an alternative way and promising, in the preventing and treatment of cryptosporidiosis.
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Estudo da ação de microrganismos probióticos sobre patógenos causadores de mastite em bovinos de leite / Assessment of probiotics activity on pathogenic agents of mastitis in dairy bovine

Santos, Claudio Donato de Oliveira 16 November 2015 (has links)
A mastite é o processo inflamatório da glândula mamária que constitui uma doença comum no setor pecuário leiteiro, evidenciado principalmente durante o período de lactação de vacas leiteiras e, cujos principais agentes etiológicos são o Staphylococcus aureus, Streptococcus sp. e espécies de coliformes. Os protocolos de combate à mastite preconizam o uso de antibióticos, o que pode trazer riscos à saúde dos animais e humana. Dependendo do agente patogênico, esta estratégia é considerada frequentemente ineficiente e de alto custo, o que leva pesquisadores a buscarem alternativas à antibioticoterapia, testando princípios ativos homeopáticos, fitoterápicos e micro-organismos probióticos, que apresentam potencial como alternativa promissora para a terapia quimioterápica. As formulações contendo bactérias probióticas podem representar uma alternativa de baixo custo para o combate à mastite, com a vantagem de não estimular a resistência entre os patógenos. Desta forma, este estudo baseou-se na avaliação in vitro do potencial antimicrobiano de cepas de Lactobacillus frente a agentes patógenos causadores de mastite, bem como na avaliação in vivo da inocuidade de formulações contendo probióticos em vacas em lactação. Para tanto, 6 cepas de Lactobacillus, na forma isolada e na forma de pool foram avaliadas quanto à capacidade inibitória sobre Streptococcus agalactiae (cepas 1 e 2) por diferentes técnicas de difusão em ágar e co-cultura em meio líquido. A inibição pela técnica de co-cultura foi avaliada mediante determinação de células viáveis das cepas patogênicas por reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (RT-qPCR). De acordo com os resultados observados no estudo de inibição in vitro, foram preparadas formulações probióticas utilizando dois veículos diferentes, sendo uma emulsão (Formulação A) e outra utilizando um veículo de um medicamento comercial (Formulação B) adicionadas de células de Lactobacillus na forma isolada e na forma de pool. Estas formulações foram avaliadas quanto à inocuidade em 17 vacas separadas em grupos sob regime de 1 ordenha/dia (A e B1) e 2 ordenhas/dia (B2), mediante a aplicação das formulações A e B contendo 109 ou 106 células/dose. Ao longo do cada tratamento, foram avaliados parâmetros fisiológicos como temperatura do úbere, presença de hiperemia, inchaço e manifestação de dor, contagem de células somáticas (CCS), California Mastitis Test (CMT), bem como condutividade elétrica e aspecto do leite e avaliação microbiológica. O estudo de inibição em co-cultura mostrou que as cepas de Lactobacillus avaliadas inibiram o crescimento das cepas patogênicas, em níveis superiores a 75% após 72 horas de ensaio. Após 24 horas, os maiores níveis de inibição sobre S. agalactiae cepa 1 foram exercidos pelas cepas L. acidophilus ATCC 4356, L. fermentum ATCC 9338, com índices de inibição de 99,79% e 99,91%, respectivamente. Nas mesmas condições a inibição de S. agalactiae cepa 2 por L. acidophilus ATCC 4356 e L. delbrueckii UFV H2B20 foi de 86,7% e 79,5%, respectivamente. Estes resultados indicam o potencial de inibição das cepas de Lactobacillus estudadas sobre S. agalactiae causadora de mastite. Estudos de inocuidade demonstraram que as formulações probióticas (A e B) induziram reação inflamatória no úbere dos animais, confirmado pelo aumento significativo da condutividade elétrica do leite (CEL), CCS (p < 0,05), bem como do escore de CMT. As formulações testadas no presente estudo não se mostraram adequadas ao emprego terapêutico na cura da mastite, uma vez que no teste de inocuidade provocaram processos inflamatórios nas glândulas mamárias dos animais testados. / Bovine mastitis is a common disease in dairy farms, usually observed during lactation period in dairy cattle, whose main etiological agents are Staphylococcus aureus, Streptococcus sp. and coliform species. Current protocols of mastitis therapy include the use of antibiotics, which may represent serious risks for both animal and human health. Depending on the pathogen specie, this strategy is often considered ineffective and highly expensive, what stimulates scientists to search for alternative treatments, including homeopathic or phytotherapic drugs or probiotic microorganisms, which may be a good alternative to chemotherapeutic drugs. Formulations containing probiotic bacteria may represent a low-cost alternative for mastitis treatment. The present study aimed to assess in vitro ability of Lactobacillus strains to inhibit mastitis pathogens growth, as well as in vivo assessment of the safety of formulations containing probiotics in cows with predisposition or affected by mastitis. Thus, six Lactobacillus strains were evaluated on their inhibitory ability over Streptococcus agalactiae (strains 1 and 2) by techniques of agar diffusion and co-culture in liquid medium. The effectiveness of the co-culture was evaluated by enumerating viable pathogen cells through quantitative polymerase chain reaction (qPCR). According to the results of in vitro study, two formulations were prepared based on a probiotic emulsion (formula A) and a commercial matrix (formula B) containing Lactobacillus cells (isolated or pool). Safety tests for the formulations were performed in 17 cows, which were separated into two groups under 1 milking/day (A and B1) and another group submitted to 2 milkings/day (B2), through the application of preparation A or preparation B containing 109 or 106 cells/dose. In each treatment, every cow was assessed on physiological parameters including temperature, presence of hyperemia, swelling and pain, somatic cell count (SCC), electrical conductivity and aspect of milk (color and clots/lumps formation) and microbiological evaluation. The results of the inhibition studies in co-culture showed that all Lactobacillus strains inhibited the growth of pathogenic strains, in at least 75% after 72 h of test. The highest levels of inhibition of S. agalactiae strain 1 were performed by strains L. acidophilus ATCC 4356 and L. fermentum ATCC 9338, at level of 99.79% and 96.70% after 24h, respectively. For the same period, the inhibition of S. agalactiae strain 2 by L. acidophilus ATCC 4356 and L delbrueckii UFV H2B20 was 86.7 % and 79.5%, respectively. These results showed the potential of Lactobacillus strains studied concerning to the inhibition of mastitis caused by Streptococcus agalactiae. Safety studies showed that both formulations evaluated induced inflammatory response in the udder of the animals, what was confirmed by significant raise on electric conductivity and SCC (p < 0,05) and CMT scores on milk. All formulations were considered inappropriate to be used in mastitis therapeutics, once they failed at safety tests, inducing mastitis on tested animals.
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Avaliação do uso de probióticos no combate a infecção causada por Ancylostomidae em cães (Canis familiaris) naturalmente infectados / Evaluation of the probiotic\'s microorganisms use in the control of hookworm infection in natural infected dogs (Canis familiaris)

Coêlho, Matheus Diniz Gonçalves 13 July 2010 (has links)
O cão (Canis familiaris) é o animal doméstico que convive mais em proximidade com o homem, como animal de companhia e guarda. No entanto, existe uma série de parasitos zoonóticos de cães, que levam ao desenvolvimento de patologias muitas vezes de prognóstico grave para o ser humano. Dentre esses destacam-se os helmintos da família Ancylostomidae que são encontrados com freqüência em inquéritos coproparasitológicos. A ancilostomíase canina é caracterizada pelo desenvolvimento de anemia, perda de peso e dores abdominais, sendo o tratamento com drogas anti-helmínticas alopáticas fundamental para eliminação do parasito. Porém, devido à ocorrência cada vez maior de resistência a tratamentos com medicamentos alopáticos e aos riscos inerentes ao uso abusivo destes medicamentos, a pesquisa de novos insumos terapêuticos consiste em uma promissora iniciativa, e, neste sentido os probióticos têm se destacado, por serem capazes de alterar positivamente a microbiota intestinal e exercer efeito imunomodulador, e, assim sendo, contribuir para o controle de agentes patogênicos. Com o intuito de contribuir para a compreensão do mecanismo de ação de espécies de microrganismos que apresentam atividade probiótica sobre helmintos, no presente trabalho objetivou-se avaliar o papel de espécies de Lactobacillus à saber: L. acidophilus ATCC 4536, L. plantarum ATCC 8014 e L. delbrueckii UFV H2B20, na forma de um \"pool\", no sentido de estimularem a resposta imune, bem como reduzir o quadro de anemia e a carga parasitária em cães naturalmente infectados com Ancylostomidae. Para tanto, selecionouse 40 cães do CCZ de Taubaté-SP, divididos em 4 grupos: 10 animais naturalmente infectados com Ancylostomidae aos quais foi administrada a preparação probiótica, contendo 1X106 UFC de cada cepa de Lactobacillus; 10 animais naturalmente infectados que não foram submetidos a nenhum tratamento; 10 animais não infectados e não submetidos a nenhum tratamento e 10 animais não infectados aos quais foi administrada a preparação probiótica em estudo. Esta preparação foi administrada em dias alternados, por 28 dias e os animais foram acompanhados semanalmente para determinação do número de ovos por grama (OPG) de fezes, dosagem dos níveis de IgE sérica e avaliação do hemograma. Os resultados permitiram observar que o tratamento com a preparação probiótica se mostrou promissor no controle à ancilostomíase canina, sendo observada uma redução significativa (p<0,05) de 88,83% da contagem de OPG nas fezes dos animais (GITP), sendo esta menor que a observada nos demais grupos. Observou-se também uma melhora na imunidade destes animais, observada pelo aumento de IgE e da contagem global de leucócitos. Desta forma, demonstrou-se o potencial das espécies de Lactobacillus no controle da ancilostomíase canina. / Dogs (Canis familiaris) are the domestic animals that live in more proximity to human, serving as guards as well as company but that are a range of canine diseases that leads to the development of serious prognostic pathologies to mankind. Therefore, some intestinal parasites should be emphasized, among them, the Ancylostomidae family, considering that they are frequently found in canine faecal samples. Canine ancylostomiasis has a wide array of general symptoms, eg, anemia, weight loss and abdominal pain, and the use of some alopathic antihelmintics is considered fundamental to eliminate these hookworm species. Nevertheless, taking into account the high resistance to such alopathic drugs and the inherent risk involved with their use, the development of new therapeutic strategies is a promising enterprise and probiotics seem to be a promising alternative, in view of its capacity of positively alter the intestinal microbiota and of exerting an immunomodulatory effect which can finally contribute to pathogen\'s control. Intenting to contribute for the understanding of probiotics action against helminths, the present study has the aim of evaluating the antihelmintic properties of some Lactobacillus isolates, namely L. acidophilus ATCC 4536, L. plantarum ATCC 8014 and L. delbrueckii UFVH2B20, as a \"pool\", in the stimulation of immune response against, and in reducing the anemia and the parasite counts in hookworm naturally infected dogs. Forty dogs sheltered in the Centro de Controle de Zoonoses, Taubate, Brazil, were selected and split into four groups: Ten hookworm naturally infected dogs, treated with a pool of Lactobacilli, containing 1x106 of each one of the bacterial strains; Ten hookworm naturally infected animals, not treated with any drug; Ten non-infected animals which did not receive any treatment; and ten non-infected dogs which received a pool containing the three bacterial isolates. The pool was administered during 28 alternate days and animals were followed weekly in order to determine EPG (number of eggs per gram of feces), serum IgE levels and blood counts. It was observed that the administration of the probiotic pool is promising in the control of hookworm canine infection, and a statistically significant reduction (88.83%) of EPG in the treated animal group was demonstrated. It was also observed an increase in the immune response, as demonstrated by the higher levels of IgE and increased leukocyte count, which emphasizes the potential use of these Lactobacilli specimens in the canine ancylostomiasis control.
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Avaliação do efeito de micro-organismos probiótics sobre Haemonchus contortus em ovinos / Evaluation of the effects of probiotic microorganisms on Haemonchus contortus in ovines

Teixeira, Renato da Silva 12 August 2011 (has links)
A infecção por Haemonchus contortus é a principal parasitose que afeta a ovinocultura, provocando consideráveis perdas econômicas. Sua patogenia é caracterizada por uma intensa anemia, além de hipoproteinemia e reduções nos níveis séricos de ferro. Devido ao aumento da resistência desse parasito aos anti-helmínticos comumente encontrados no mercado, surge a necessidade de tratamentos alternativos, como por exemplo, o uso de produtos probióticos. Probióticos são alimentos funcionais que contém micro-organismos vivos, que ingeridos, com frequência e em doses adequadas trazem benefícios aos hospedeiros por meio de diferentes mecanismos de ação. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito de uma preparação probiótica constituída de diferentes espécies de Lactobacillus (L. casei ATCC 7469, L. plantarum ATCC 8014, L. fermentum ATCC 9338 e L. acidophilus ATCC 4536) na forma de \"pool\" sobre H. contortus em ovinos. Para tanto foram estudados 40 animais naturalmente infectados e distribuídos em 4 grupos e por 90 dias submetidos a diferentes tratamentos, a saber: Grupo A (controle): os animais não receberam nenhum tratamento, Grupo B os animais receberam em 3 dias por semana (2ª, 4ª e 6ª feiras) uma dose de 10 mL da preparação probiótica, Grupo C os animais receberam, no dia 0 dose única de Diantel® (1 mL para cada 10 Kg de PV) e Grupo D os animais receberam, no dia 0, dose única de Diantel® (1 mL para cada 10 Kg de PV) e após 30 dias passaram a receber em 3 dias por semana 10 mL da preparação probiótica, sendo interrompido no 60° dia. A cada 15 dias foram realizados exames parasitológicos para quantificação de OPG de fezes, hemograma completo, dosagem de proteínas e ferro. Os resultados demonstraram que os animais do Grupo B (probiótico) apresentaram uma eliminação de OPG de fezes significativamente menor (p<0,05) em relação aos demais grupos com uma eficácia de ação máxima de 66,3%, além dos animais se apresentarem em melhores condições fisiológicas. Maiores concentrações de hemoglobina, hematócrito e ferro também foram observadas nesse grupo, que podem ser explicadas pela ação imunomoduladora apresentada pelas espécies de Lactobacillus avaliadas, além de facilitar a absorção de nutrientes pelo animal hospedeiro. Em relação aos animais do Grupo C (Diantel®), após 45 dias ocorreu um aumento significativo (p<0,05) na contagem de OPG de fezes indicando uma maior atividade parasitária, levando a redução dos valores de hemoglobina e hematócrito. O uso do anti-helmíntico no Grupo D apresentou eficácia máxima de 90,3% após 15 dias. A inclusão da preparação probiótica, na dieta dos animais deste grupo após 30 dias, não contribuiu para se evitar a reinfecção, possivelmente devido a sensibilidade das cepas utilizadas ao princípio ativo closantel, tendo sido evidenciada a necessidade de uma nova dosagem do anti-helmíntico após 60 dias, como indicado pelo fabricante. / The infestation by Haemonchus contortus is the main parasitize that affects the ovine farms, causing a significantly economic loss. Its pathogenesis is characterized through an intense anemia, besides hypoproteinemia and blood iron level reduction. Due to the parasite resistance increasing to anti-helmintics usually found in the market, a need of an alternative treatment is evident, as example, the use of probiotics microorganisms. Probiotics are functional food that contains live microorganisms that when ingested in appropriate amount bring benefits to the hosts through different action mechanisms. Thus, this research had as purpose to study the effect of a probiotic preparation formed by a pool of Lactobacillus species (L. casei ATCC 7469, L. plantarum ATCC 8014, L. fermentum ATCC 9338 e L. acidophilus ATCC 4536) on H. contortus in ovines. Therefore, 40 naturally infected animals were distributed in 4 groups and during 90 days they were submitted to different treatments: Group A (control): the animals did not receive any treatment, Group B: The animals received 3 times a week (2º, 4º, 6º) a 10 ml dose of the probiotic preparation, Group C: the animals received on 0 day, a Diantel single dose (1 ml /10 kg of LW) and in group D: the animals received on 0 day, a Diantel single dose (1 ml /10 kg of LW) and after 30 days they started receiving 3 times a week 10 ml of the probiotic preparation, ending at the 60th day. In each fifteen days parasitological exams were realized to check the amount of EPG of feces, complete blood exam, protein and blood iron analysis. The results showed that the animals in group B (probiotic) had \"EPG\" of feces elimination significantly minor (p 0,05) related to the other groups with a efficacy of 66,3% besides, the animals presented better physiological conditions. An increasing of hemoglobin, hematocrit and blood iron level were also observed in this group, which can be explained by the immunemodulator action presented by the Lactobacillus species, which contribute to the nutrients absorption by the host animal. In relation to group C animals (Diantel), is was observed, after 45 days, a significantly increasing (p 0,05) in the EPG counting, resulting in a major parasitary activity, decreasing the hemoglobin and hematocrit values. The usage of anti-helmintic in group D showed a efficacy of 90,3% after 15 days. The probiotic preparation administered to the animals of group D did not contribute to avoid the re-infestation, probably due to the strains sensibility regarding to the active principle (closantel) of Diantel, being necessary another anti-helmintic dose administration after 60 days as indicated by the manufacturer.
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Avaliação da atividade imunoterapêutica do probiótico LLHsp65 na asma experimental / Evaluation of the immunotherapeutic activity of probiotic LLHsp65 in asthma experimental

Lacerda, Luna Barrôco de 23 August 2017 (has links)
A asma alérgica é uma doença pulmonar de inflamação crônica caracterizada por uma resposta imune do tipo Th2 e uma das principais abordagens terapêuticas para o seu tratamento no futuro, poderia ser a imunoterapia baseada na modulação da resposta imune Th2 para um perfil Th1 e anti-inflamatório. Nosso grupo já demonstrou a eficácia de uma imunoterapia, baseada em um plasmídeo de DNA contendo o gene hsp65 de M. Leprae (DNAHsp65) em modelo murino de asma alérgica. No entanto, apesar dos excelentes resultados, o grupo está procurando outras alternativas imunoterapêuticas, usando a Hsp65 micobacteriana, para futura utilização clinica na área de saúde humana e veterinária. Efeitos benéficos na prevenção e tratamento de doenças alérgicas vêm sendo obtidos com o uso de probióticos. Nossa hipótese é de que uma nova formulação terapêutica, como o probiótico Lactococcus lactis expressando Hsp65 micobacteriana (LLHsp65), apresentaria vantagens significativas no desenvolvimento de pesquisas translacionais. Diante disso, este estudo teve como objetivo avaliar se o probiótico LLHsp65 apresenta atividades imunoterapêuticas no modelo de asma experimental induzida por ovalbumina (OVA). Em diferentes grupos experimentais, 5x109 CFU de LLHsp65 ou de L. lactis selvagem (LLSELV), foram administrados por via oral durante 10 dias consecutivos aos camundongos BALB/c previamente sensibilizados e desafiados com OVA. Em seguida, investigamos os efeitos do tratamento na inflamação alérgica, modulação do padrão de citocinas, produção de anticorpos específicos, hiper-responsividade das vias aéreas e inflamação pulmonar. Nossos resultados demonstraram que o tratamento oral com LLhsp65 modula a resposta imune alérgica de padrão Th2 para o perfil Th1 com aumento dos níveis de IFN-?, IL-12, TNF-?, IL-10, IL-6 e IL- 17, e com a redução das citocinas IL-4, IL-5 e IL-13. Os níveis de IgE e IgG1 anti-OVA no soro também foram significativamente diminuídos. Como consequência desses resultados, também observamos diminuição significativa do infiltrado de eosinófilos no lavado broncoalveolar, na hiper-responsividade nas vias aéreas e a atenuação da inflamação e produção de muco no tecido pulmonar, quando comparados com o grupo controle (OVA/SAL). Por conseguinte, nossos resultados demonstraram que a administração oral de LLHsp65 proporciona uma melhora significativa do processo inflamatório alérgico induzido por OVA, sendo portanto, uma estratégia terapêutica promissora para o desenvolvimento de pesquisa translacional no tratamento de asma alérgica. / Allergic asthma is a chronic inflammatory lung disease characterized by a Th2-type immune response and one of the main therapeutic approaches to its treatment in the future could be immunotherapy based on the modulation of the Th2 immune response to a Th1 and anti-inflammatory profile. Our group has already demonstrated the efficacy of an immunotherapy based on a DNA plasmid carrying the mycobacterial hsp65 gene (DNAHsp65) in murine model of allergic asthma. However, despite the excellent results, our group is looking for other immunotherapeutic alternatives, using mycobacterial Hsp65, for future clinical use in the area of human and veterinary health. Beneficial effects in the prevention and treatment of allergic diseases have been obtained with the use of probiotics. Our hypothesis is that a new therapeutic formulation, such as the probiotic Lactococcus lactis expressing mycobacterial Hsp65 (LLHsp65), would present significant advantages in the development of translational research. The objective of this study was to evaluate whether the probiotic LLHsp65 has immunotherapeutic activities in the ovalbumin-induced asthma model. In different experimental groups, 5x109 CFU of LLHsp65 or control L. lactis (ctLL) were administered orally for 10 consecutive days to BALB/c mice previously sensitized and challenged with OVA. We then investigated the effects of treatment on allergic inflammation, modulation of the cytokine pattern, production allergen-specific antibodies, airway hyperresponsiveness and pulmonary inflammation. Our results demonstrated that oral treatment with LLhsp65 modulates the allergic Th2 immune response to Th1 profile with increased levels of IFN-?, IL-12, TNF-?, IL-10, IL-6 and IL-17 and with the reduction of IL-4, IL-5 and IL-13 cytokines. Serum anti-OVA IgE and IgG1 levels were also significantly decreased. Correspondingly with these results, we also observed a significant decrease in eosinophil infiltrate in bronchoalveolar lavage, airway hyper responsiveness and attenuation of inflammation and mucus production in lung tissue when compared to the control group (OVA/SAL). Therefore, our results demonstrated that oral administration of LLHsp65 provides a significant improvement of the OVA-induced allergic inflammatory process and is therefore a promising therapeutic strategy for the development of translational research in the treatment of allergic asthma.
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Efeitos do Lactobacillus reuteri viável e inativado pelo calor em periodontite induzida em ratos : estudo imaginológico /

Lescura, Carlos Matheus. January 2019 (has links)
Orientador: Ana Lia Anbinder / Banca: Maria Aparecida Neves Jardini / Banca: Lucilene Fernandes Ricardo / Resumo: A doença periodontal (DP) é caracterizada pela destruição dos tecidos de proteção e suporte dentário, osso alveolar, ligamento periodontal, cemento e gengiva, e é a principal causa de perda dentária na população adulta, um grande problema socioeconômico e de saúde pública. Com o aumento da resistência antibiótica, existe interesse no uso de outras substâncias para o combate de doenças infecciosas, como os probióticos. O uso de probióticos na prevenção e tratamento de doença periodontal em animais tem apresentado bons resultados. O estudo dos efeitos do Lactobacillus reuteri viável e inativado (paraprobiótico) pode esclarecer mecanismos de ação e possibilitar o uso comercial de outras preparações, dado que os paraprobióticos teriam produção facilitada. O objetivo deste trabalho foi analisar os efeitos de L. reuteri, viável e inativado, em doença periodontal induzida em ratos. Foram utilizados 32 ratos machos, divididos em 4 grupos: (1) Grupo Controle: com saúde periodontal (n=8); (2) Grupo LIP: periodontite induzida (n=8); (3) Grupo LIP/PRO: periodontite induzida e probiótico (n=8); e (4) Grupo LIP/PARAPRO: periodontite induzida e paraprobiótico (n=8). A indução da doença periodontal foi realizada com a inserção de fio de algodão ao redor dos primeiros molares inferiores e foi realizado o tratamento com L. reuteri viável ou inativado pelo calor, via oral, diariamente, 30 dias antes da ligadura e 14 dias após, quando ocorreu a eutanásia. As hemimandíbulas direitas foram removid... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Periodontal disease (PD) is characterized by the destruction of dental protection and support tissues, alveolar bone, periodontal ligament, cementum and gingiva, and is the major cause of tooth loss in the adult population, a major socioeconomic and public health problem. With the increase of antibiotic resistance, there is interest in the use of other substances to combat infectious diseases, such as probiotics. The use of probiotics in the prevention and treatment of periodontal disease in animals has shown good results. The study of the effects of viable and inactivated Lactobacillus reuteri (paraprobiotic) can clarify mechanisms of action and enable the commercial use of other preparations, since paraprobiotics would have facilitated production. The aim of this study was to evaluate the effects of viable and inactivated L. reuteri on induced periodontal disease in rats. Thirty-two male rats were divided into four groups: (1) Control group: with periodontal health (n = 8); (2) LIP group: induced periodontitis (n = 8); (3) LIP/PRO group: induced periodontitis and probiotic (n = 8); and (4) LIP/PARAPRO group: periodontitis induced and paraprobiotic (n = 8). Induction of periodontal disease was performed with the insertion of cotton thread around the lower first molars and treatment was performed with viable or heatinactivated L. reuteri daily, 30 days prior to ligation and 14 days later, when euthanasia occurred. The right hemimandible were removed and submitted to radiographic analysis for quantification of the bone support. A computerized microtomography was performed to evaluate the alveolar microarchitecture in the first molar region. The use of paraprobiotic led to a higher percentage of weight gain when compared to other treatments. In the radiographic and microtomographic analyzes, the efficacy of the DP induction was verified, with a significant difference... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Evaluación del efecto de bacterias lácticas y levaduras probióticas en el crecimiento y supervivencia de alevines de tilapia roja Oreochromis sp.

Mariluz Fernández, Arnulfo Antonio January 2013 (has links)
Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Evalúa el efecto de las bacterias ácido lácticas (BAL) (Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Streptococcus salivarius subsp. thermophilus, Lactobacillus acidophilus y Bifidobacterium ssp.) y una levadura Saccharomyces cerevisiae en el crecimiento, conversión alimentaria, factor de condición, estado nutricional y supervivencia de alevines de tilapia roja Oreochromis sp. durante el periodo experimental de alimentación de 90 días. Para lo cual se diseñó 4 tratamientos T1. alimento + 2% de levadura Saccharomyces cerevisiae (62 x 106 ufc/g); T2. alimento + 0,1% de BAL (57 x 106 ufc/g); T3. alimento + 2% levadura (44 x 106 ufc/g) + 0,1% BAL (33 x 106 ufc/g); T4. alimento solo (control); con 3 repeticiones para cada tratamiento haciendo un total de 12 unidades experimentales (12 acuarios con sistemas de recirculación), el caudal de agua en la entrada de cada acuario fue de 250 L/h, la temperatura del agua se mantuvo de 23,5 a 24,5 ºC; el oxígeno disuelto de 7,54 a 7,73 mg/L; el pH de 7,23 a 7,25; el amonio de 0,21 a 0,28 mg/L; los nitritos de 0,28 a 0,38 mg/L. Se acondicionó 30 peces con peso promedio de 0,20 g por cada acuario, y se les alimentó al inicio con una tasa alimentaria del 20% del peso corporal por día finalizando con un 4% / día. Se midieron el peso y la talla cada 15 días durante 90 días, obteniéndose los siguientes resultados de peso final; T1 25,30±1,88 g ; T2: 21,41±3,77 g ; T3: 23,16±1,22 g y T4:. 19,46±2,96 g, encontrándose diferencia significativa (P<0,05) de mayor peso final entre el T 1 y el T4 (control), pero no así los T2 y T3 (probiótico) frente al control. La tasa de crecimiento (g/día) mostró diferencia significativa (p<0,05) entre el tratamiento T1 (2% Saccharomyces c.) de 0,5140±0,071 g/día y el tratamiento T4 (control) con 0,3681±0,019 g/día pero no con los tratamientos T2 y T3. La tasa de crecimiento específico mostró diferencia significativa (p<0,05) entre el tratamiento T1 de 2,42% y el tratamiento T4 (control) de 1,93 %. La supervivencia fue mayor en los tratamientos con probióticos T1 con 94 %, T2 con 93%, T3 con 96%; frente al T4 con 88% no existiendo diferencias significativas (p>0,05) El factor de condición mostró diferencia significativa (p<0,05) entre el tratamiento T1( probiótico) de 1,9 frente al control T4 de 1,71, la conversión alimentaria fue menor para los tratamientos con probióticos T1, T2, T3 con 1,17, 1,25, 1,26 frente al control de 1,59 pero no se encontró diferencias significativas. El estado nutricional se evaluó a través de los parámetros hematológicos; eritrocitos, leucocitos, hematocrito y hemoglobina mostrando mayores valores en los tratamientos con probióticos frente al control pero no se encontró diferencia significativa. Se concluye que la adición de 2% de levadura Saccharomyces cerevisiae en los alimentos (T 1) produjo mayores y significativas (p<0,05) ganancias de peso, tasa de crecimiento y factor de condición en alevines de tilapia roja Oreochromis sp. Así mismo, la adición de 0,1% de BAL en los alimentos (T 2) y de 2% de levadura Saccharomyces cervisiae + 0,1% de BAL en los alimentos (T 3) no produjo diferencia significativa (p>0,05) en la tasa de crecimiento, conversión alimentaria, factor de condición, porcentaje de supervivencia y estado nutricional de los alevines de tilapia roja Oreochromis sp. con respecto al control. / Tesis
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Empleo de probióticos como alternativa al uso de antibióticos promotores del crecimiento (APC) en pollos de engorde

Miyashiro Perez, Rodolfo Alberto January 2016 (has links)
El objetivo es la revisión bibliográfica sobre el empleo de probióticos como alternativa al uso de APC en pollos de carne con la finalidad de tener un mayor conocimiento del mismo. El uso de APC en nutrición animal ha generado críticas y presiones legales, para que se disminuya el uso en animales destinados para consumo humano. Esto es debido, a la preocupación en salud pública a el uso de APC en la producción animal, principalmente relacionada a la supuesta inducción de resistencia cruzada de bacterias patógenas para humanos, intensificándose las investigaciones a la búsquedas de estrategias alternativas a los antimicrobianos con el fin de mantener el rendimiento animal y su bienestar. Dentro de estas alternativas la presente investigación propone a los probióticos, prebióticos, enzimas, extractos de plantas y acidificantes; todos éstos con el fin de limitar el número de bacterias patógenas, mejorar la capacidad de absorción del intestino y por ende el rendimiento productivo. / Trabajo de suficiencia profesional
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Efecto de la suplementación de diferentes niveles de probiótico sobre la histomorfometría del intestino delgado del cuy (Cavia porcellus)

Puente Valverde, Jhosseline Marleny January 2018 (has links)
Evalúa el efecto que produce la suplementación de un probiótico líquido sobre la histomorfometría intestinal en cuyes de engorde. Se utilizaron 50 cuyes machos destetados a los 14 días de edad, distribuidos en un diseño completamente al azar de cinco tratamientos con diez repeticiones cada uno. Los tratamientos fueron: (T1) 1ml de probiótico; (T2) 2ml de probiótico; (T3) 3ml de probiótico; (T4) control y (T5) antibiótico. Se tomaron muestras de las tres secciones del intestino de cada animal a los 84 días de edad y fueron remitidas para la elaboración de láminas histológicas para las mediciones. Para la longitud de vellosidades intestinales, en el duodeno, yeyuno e íleon no existen diferencia estadística significativa (p< 0.05) entre T1, T2 Y T3 frente al control, ni frente T5, mientras que a nivel de íleon T1 y T3 fueron superiores al control y a T5 (p< 0.05) entre T1, T2 Y T3 frente al control, ni frente T5; ni entre ellos mismos, sin embargo a nivel de íleon, el T5 es superior con respecto a T1, T2, T3 y T4 (P< 0.05).Para el parámetro de relación entre la longitud de vellosidad y profundidad de cripta, en la sección del duodeno, yeyuno e íleon, no se observan diferencias estadísticas significativas (P< 0.05). Con estos resultados se concluye que la suplementación con los diferentes niveles de probiótico líquido utilizados en este estudio no tienen efecto positivo sobre la histomorfometría intestinal en cuyes de engorde. / Tesis
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Bebida láctea fermentada com cultura probiótica adicionada de semente de chia (Salvia hispanica L.)

Zerbielli, Kleber Marcos 12 September 2014 (has links)
O objetivo deste trabalho foi desenvolver uma bebida láctea fermentada preparada com 60% de leite, 32% de soro lácteo e 8% de açúcar, utilizando micro-organismos probióticos. Foram desenvolvidas 3 formulações, com 1% (A), 3% (B) e 5% de semente de chia (Salvia hispanica L.). Foram realizadas análises físico-químicas na formulação padrão e nas formulações A, B e C durante 0, 7 e 14 dias; análise sensorial nas formulações A, B, e C nos tempos 0, 7 e 14 dias e avaliação microbiológica. O teor de umidade nas 3 formulações apresentou diferença significativa aos 0 e 7 dias de estocagem (p < 0,05). Os teores de cinzas, proteínas, lipídeos e a viscosidade da bebida aumentaram significativamente à medida que se aumentou a proporção de chia na bebida. Foi observada uma redução gradativa do pH e aumento da acidez titulável em função do tempo de estocagem da bebida. A bebida láctea obteve boa aceitação sensorial, mas foi observada uma diminuição nas notas da escala hedônica e intenção de consumo durante o período de estocagem. A contagem de bactérias probióticas teve redução de aproximadamente 1 ciclo logarítmico por semana. A formulação preferida no teste de ordenação de preferência foi a formulação A. / The aim of this study was to develop a fermented dairy beverage made with 60% milk, 32% whey and 8% sugar, using probiotic microorganisms. Three formulations, with 1% (A), 3% (B) and 5% chia seed (Salvia hispanica L.) have been developed. Physico-chemical analyzes on standard formulation and the formulations A, B and C for 0, 7 and 14 days were made; sensory analysis in formulations A, B, and C for times 0, 7 and 14 days and microbiological evaluation The moisture content of the three formulations showed a significant difference at 0 and 7 days of storage (p <0.05). Contents of ash, protein, lipids and viscosity increased significantly as it increased the proportion of chia. A gradual reduction of pH and increase in acidity due to the storage time of the beverage was observed. The product has obtained good acceptability, but a decrease was observed in the global acceptability and intention of consumption during the storage period. The probiotic bacteria count was reduced by about 1 log cycle per week. The preferred formulation of the ranking preference test was the formulation A.

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