Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:27Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-03-10Bitstream added on 2015-01-26T13:30:26Z : No. of bitstreams: 1 000802130.pdf: 1723844 bytes, checksum: 40dbfc47ebdfcaaa6c3a88fc4ab89551 (MD5) / A geração de informações sobre o potencial de táticas alternativas no controle de moscas-das-frutas tem despertado crescente interesse, tanto dos produtores quanto dos pesquisadores. Esta pesquisa teve como objetivo avaliar os efeitos de variedades de goiaba e de substâncias de origem vegetal sobre parâmetros biológicos de Anastrepha fraterculus (Wied., 1830) (Diptera:Tephritidae) e sobre o parasitóide Diachasmimorpha longicaudata (Ashmead) (Hymenoptera: Braconidae). A pesquisa foi realizada no Laboratório de Resistência de Plantas do Departamento de Fitossanidade da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinária - UNESP. Os frutos de goiaba foram adquiridos da Empresa Val frutas, localizada no município de Vista Alegre do Alto-SP. As moscas-das-frutas e os parasitóides foram oriundos de criação mantida em dieta artificial no Laboratório de Radioentomologia do CENA. Foram realizados 6 bioensaios: 1. Determinação do estágio de maturação dos frutos de goiaba preferidos para oviposição de A. fraterculus 2. Não preferência para oviposição de A. fraterculus por frutos de variedades de goiaba; 3. Efeito de produtos naturais aplicados em frutos de goiaba na oviposição de A. fraterculus; 4. Associação dos efeitos dos frutos de variedades de goiaba e de produtos naturais no parasitismo de D. longicaudata; 5. Teste de antibiose em A. fraterculus criadas em frutos de variedades de goiaba e 6. Efeito da resistência extrínseca de frutos de variedades de goiaba sobre o parasitóide D. longicaudata. Os frutos foram tratados com os seguintes produtos: óleo de nim, óleo essencial de erva-doce, óleo essencial de citronela, e teste padrão com água. Foram realizados testes com e sem chance de escolha. Os resultados foram submetidos à análise de variância (ANOVA), as médias foram comparadas pelo teste de Tukey (P = 0,05). Fêmeas de A. fraterculus preferem os estádios ... / The generation of information about the potential of alternative tactics in the control of fruit flies has attracted a growing interest, both producing and researchers. This research aimed to evaluate the effects of guava cultivars and substances from plant metabolism on biological parameters of Anastrepha fraterculus (Wied., 1830) (Diptera: Tephritidae) and Diachasmimorpha longicaudata (Ashmead) (Hymenoptera: Braconidae). The study was conducted in the Laboratory of Plant Resistance, Department of Plant Protection, Faculty of Agricultural Sciences and Veterinary Medicine - UNESP. The guava fruits were obtained from Company Val fruits, located in “Vista Alegre do Alto” - SP. The fruit-flies and parasitoids were derived from rearing on artificial diet in the laboratory Radioentomologia - CENA. 6 bioassays were conducted: 1- Determining the maturity stage of guava fruits preferred for egg-laying of A. fraterculus, 2- No preference for egg-laying of A. fraterculus fruits of the guava cultivars, 3- Effect of natural products used in guava fruit on egg-laying of A. fraterculus, 4- Association of the effects of the fruits of guava cultivars and natural products on parasitism of D. longicaudata, 5- Antibiosis test of fruit varieties of guava and on A. fraterculus and 6- Effect of extrinsic resistance of cultivars of guava fruit on the parasitoid D. longicaudata. Fruits were treated with the following products: neem oil, essential oil from fennel and citronella, and controle. Tests with and without choice has been made. The results were subjected to analysis of variance (ANOVA), means were compared by Tukey test (P = 0.05). A. fraterculus female prefer stadiums semi-ripe and ripe for egg-laying. The Século XXI cultivar is more susceptible to attack by A. fraterculus. Products which showed the lowest infestation rates were oils of neem and citronella, from the 1.0% concentration. The fruits when ...

Uma das maneiras de obtenção de extratos comercialmente viáveis é a utilização dos procedimentos clássicos de maceração. Apesar de várias substâncias serem extraídas por esses métodos, moléculas mais sensíveis à degradação oxidativa podem não resistir. Neste trabalho foi avaliada a atividade antioxidante de diferentes extratos de espécies de macroalgas marinhas, obtidos por meio das marchas fitoquímicas clássicas. Os extratos não mostraram atividade significante nos modelos experimentais utilizados. Além disso, os ácidos graxos e esteróides das algas estudadas foram analisados por cromatografia gasosa. Os resultados indicaram uma maior quantidade de ácidos graxos insaturados e algumas das algas apresentaram o colesterol como o esteróide majoritário. Apesar de ser verificada a presença de carotenóides remanescentes, estes foram encontrados em concentrações baixas e nenhuma outra molécula resistente aos métodos de extração empregados foi detectada. Desta maneira, partiu-se para o desenvolvimento de metodologias de análise de carotenóides, que são substâncias com conhecida atividade antioxidante. Para isso, foi padronizado um método por HPLC-UV-EC, que separou um total de 16 pigmentos e os dados obtidos em ambos detectores foram comparados. Apesar do detector eletroquímico ser geralmente mais sensível, obteve-se melhores resultados utilizando-se o detector DAD. Com a metodologia padronizada, foi possível obter o perfil de pigmentos de cada espécie deste estudo. Dando continuidade ao desenvolvimento de metodologias para a análise de carotenóides, padrões dessa classe de substâncias, além de outras moléculas contendo polienos em sua estrutura, foram estudados por espectrometria de massas, elucidando-se seus mecanismos de ionização por diferentes fontes. Um balanço entre a formação de íons radicalares e protonados foi proposto para as xantofilas quando ionizadas por ESI, enquanto que nessa mesma fonte foram obtidos íons protonados para retinóides e moleculares para o ß-caroteno. Ao lado de cálculos teóricos de energia de ionização, sugere-se que a formação do íon molecular, exceção para as análises em ESI, é dependente da extensão da conjugação e está relacionada à presença de oxigênio na molécula. Estudos utilizando-se a fonte nanoSpray mostraram resultados opostos, obtendo-se maior intensidade do íon protonado para as xantofilas, mesmo na ausência de ácido. Visando suportar os resultados obtidos em ESI, moléculas sintéticas com cadeia poliênica de diferente extensão e uma porção flavonoídica foram analisadas. Aquela com maior número de conjugações apresentou baixa intensidade do íon molecular e reações de dissociação na fonte, de maneira análoga ao que é observado para o ß-caroteno, enquanto que a estrutura com a menor cadeia poliênica apresentou um íon molecular mais estável. Além disso, a energia de ionização calculada para a molécula maior foi menor, corroborando com os dados experimentais, o que sugere que o \"Caro-Flavo\" com maior cadeia poliênica deve apresentar atividade antioxidante mais próxima ao ß-caroteno que o de cadeia curta. Essas mesmas substâncias sintéticas, ao lado de astaxantina e epicatequina, foram testadas quanto à sua atividade em inibir a lipoperoxidação induzida por radiação UVA ou UVB, sendo que o \"Caro-Flavo\" de cadeia maior atuou como melhor antioxidante quando irradiado com UVB, apresentando maior atividade na menor dose de radiação. Porém, quando irradiado com UVA, apresentou atividade pró-oxidante mais pronunciada ainda que a da astaxantina. Nestes experimentos, foi verificada atividade atividade pró-oxidante em todas as condições de radiação para o \"Caro-Flavo\" menor. Outras moléculas sintéticas, derivadas do a-tocoferol também foram testadas e não apresentaram diferenças estatisticamente significantes desta vitamina. / Classic maceration is one of the most used processes to obtain commercially viable extracts. Despite several substances can be extracted by using these methods, molecules that are susceptible to oxidative degradation may not resist. In this work it was evaluated the antioxidant activity of extracts of different species of marine macroalgae, obtained through phytochemistry classic methods. The extracts showed no significant activity in the experimental models used. In addition, fatty acids and steroids from algae were analyzed by gas chromatography. Results indicated greater amount of unsaturated fatty acids and some of the algae showed the cholesterol as the major steroid. Although some carotenoids remained in the algae extract, they were found in low concentrations and no other molecule resistant to the methods of extraction employed was detected. Thus, it was turned to the development of methodologies for carotenoids analysis, which are known substances with antioxidant activity. A method was standardized by HPLC-UV-EC, which separated a total of 16 pigments and the data obtained in both detectors were compared. Even though the electrochemical detector is generally more sensitive, better results were obtained using the DAD detector. With a standardized methodology, it was possible to obtain the profile of pigments for each species studied. To continue the development of methodologies for carotenoids analysis, standards of this class of substances and other polyene-containing molecules were studied by mass spectrometry. Ionization mechanisms were elucidated by using different sources. A balance between the formation of radical and protonated ions was proposed for xanthophylls when ionized by ESI. When ESI was used to ionize retinoids and carotenes, only protonated and radical ions, respectively, were found. Besides theoretical calculations of ionization energy, it was suggested that the formation of the molecular ion, except for the analyses in ESI, is dependent on the conjugation extension and is related to the presence of oxygen in the molecule. Studies using the nanoSpray source showed opposite results. In this case, it was obtained higher intensity of the protonated ions for xanthophylls, even in the absence of acid. To support the results obtained in ESI, synthetic molecules containing different length of polyene chain and a flavonic portion were analyzed. Those with the greatest conjugation chain showed low intensity of the molecular ion and decoupling reactions at the source. This effect was similar to that observed for ß- carotene in the same conditions. The structure with the smaller polyene chain presented a more stable molecular ion. Furthermore, the ionization energy calculated for the larger molecule was lower, corroborating with the experimental data and suggesting that the larger \"Caro-Flavo\" should present a better antioxidant activity. These synthetic substances, along with astaxanthin and epicatechin, were tested according to their activity in inhibiting UVA or UVB induced lipoperoxidation. The largest \"Caro-Flavo\" showed better antioxidant activity when UVB-irradiated in the lowest irradiation dose. Nevertheless, when this molecule is UVA-irradiated, a pro-oxidant activity is even more pronounced than the astaxanthin pro-oxidant activity. In these experiments, a pro-oxidant activity for the smallest \"Caro-Flavo\" was verified for all irradiation conditions. Other synthetic molecules, derived from α-tocopherol were also tested and showed no statistically significant differences, when compared to this vitamin.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:32Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-12-02Bitstream added on 2014-06-13T20:37:35Z : No. of bitstreams: 1 paz_ta_me_araiq.pdf: 1193700 bytes, checksum: 6489d53c5b06afd24ac5bdf2e56d9611 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho teve como objetivo estabelecer metodologia de cultivo e produção de células e/ou órgãos in vitro da espécie Salacia campestris com vista à obtenção de triterpenos quinonametídeos. Para isso, aplicando-se técnicas biotecnológicas, diversas tentativas de inserir a espécie in vitro foram realizadas utilizando explantes de folhas (limbo foliar e pecíolo), endosperma e sementes. Raízes obtidas in vitro foram cultivadas por 105 dias, sendo a presença e o teor de triterpenos quinonametídeos avaliados no decorrer deste período. Sistemas radiculares de plantas jovens (1 ano) cultivadas em casa de vegetação e sistemas radiculares de plantas adultas foram também analisadas quanto à presença e teor de triterpenos quinonametídeos. Foram utilizadas técnicas cromatográficas e de espetrometria de massas (EM) para a detecção e identificação de 22β-hidroximaitenina, maitenina e netzahualcoieno. Os ensaios citotóxicos in vitro foram realizados, como os dois últimos quinonametídeos, frente à linhagem de células normais 3T3 (fibroblasto) e de células tumorais HeLa (cólon de útero) e B16-F10 (melanoma murino). A partir de explantes de endosperma inoculados em meio de cultura WPM, suplementado com 20 g/L de sacarose, acrescido com 4,0 mg/L de AIB (ácido indolbutírico) e 100 mg/L de PVP (polivinilpirrolidona), foram obtidas raízes in vitro. A partir dos estudos fitoquímicos foram detectados e identificados, nas raízes in vitro e em sistemas radiculares de plantas cultivadas em casa de vegetação, os triterpenos quinonametídeos maitenina e 22β-hidroximaitenina, enquanto que nos sistemas radiculares coletados em campo foram identificados os triterpenos maitenina e netzahualcoieno. O isolamento dos três triterpenos citados também foi realizado. Para as raízes cultivadas... / This work aimed to establish a methodology of cultivation and production of in vitro cells and /or organs of Salacia campestris, trying to obtain the quinone-methide triterpenes. Based on this and applying biotechnological techniques, several attempts to insert this species in an in vitro system were performed using leaf explants (leaf and petiole), endosperm and seeds. The in vitro roots obtained were cultured for 105 days, and the presence and content of quinone-methide triterpenes were evaluated during this period. The roots of young plants (1 year) grown in a greenhouse as well roots of adult plants were also analyzed for the presence and content of the quinone-methides. The analysis of the quinone-methides were performed using chromatographic techniques and mass spectrometrometry (MS) led to the identification of 22β-hydroxymaytenin, maytenin and netzahualcoyene. The in vitro cytotoxic assays were performed using the quinone-methides maytenin and netzahualcoyene, comparing with the normal cell line 3T3 (fibroblast) as well the HeLa tumor cells (uterus carcinoma) and B16-F10 (murine melanoma). The in vitro roots were obtained from endosperm explants, inoculated in WPM medium supplemented with 20 g/L sucrose, 4.0 mg/L IBA (indole-butyric acid) and 100 mg/L PVP (polyvinylpyrrolidone). The phytochemical studies of the in vitro roots and roots of plants grown in a greenhouse resulted in the identification of the quinone-methide triterpenes maytenin and 22β-hydroxymaytenin, while from the natural roots were identified the quinone-methides maytenin and netzahualcoyene. All of the triterpenes were also isolated. The results obtained for in vitro roots indicated that the greatest accumulation of biomass occurred on the 60th day of culture and the highest levels of maytenin (972.11 mg/g) and ... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-08-17T18:39:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3286.pdf: 1985838 bytes, checksum: e5ef56af190be032fb21c75bb7198227 (MD5) Previous issue date: 2010-06-01 / Universidade Federal de Sao Carlos / Studies of marine natural products in 20 years of research have revealed a wide variety of molecules with complex structures and hitherto unknown, and potent biological activities. The aims of this study were to isolate microbial strains associated with Didemnum granulatum, to fermentate such strains for the production of crude extracts and the screening of these extracts for bioactive secondary metabolites. For the isolation of the strains, six different culture media were prepared with artificial sea water: malt extract 2% and 3%, carrot/potato, corn, oat and GPY. The strains were cultivated for 30 days in 250mL of the same culture media. The crude extracts were obtained by partition with ethyl acetate. The extracts were sent for the cytotoxic activity bioassay and analyzed by thin layer chromatography (TLC) on silica gel plate (with absorption in UV-vis). Among the 26 extracts, samples DG (M3) 6'C and DG (M3) 5'C showed potent cytotoxic activity, samples DG (B) 13, DG (M3) 1 and DG (G) 2B a moderate activity. The analysis by TLC indicated the presence of bioactive secondary metabolites in the extracts. The strains were identified as bioactive three fungal: DG (M 3) 6'C (Penicillium sp.) DG (M3) 5'C (Cladosporium sp.) DG (M3) 1 (Aspergillus sp.) And two bacterial: DG (B) 13 (Aurantimonas sp.) DG (G) 2B (Nocardiopsis sp.). These were grown on a larger scale of broth (500 mL) and extracted after 7, 14, 21 and 30 days of incubation. We carried out a cleaning process of these extracts by solid phase extraction (SPE) column of silica gel derivatized with C18 (35 mL of eluent: 100% H2O, MeOH/H2O 1:1 and MeOH 100%). The fractions generated were analyzed by HPLC-UV-MS trying to find characteristic profiles of secondary metabolites. From the DG sample (M3) 6'C (A + B), was isolated and identified the compound 13- deoxy-fomenona previously obtained by Tirilly et al. in 1983. Although this compound is not unheard of, no literature reports of studies involving bioassays cytotoxic against tumor cells and even this compound has been isolated from other species of microorganisms other than the fungus Dicyma pulvinata. / Os estudos sobre produtos naturais marinhos, durante os ultimos 20 anos de pesquisa, revelaram uma grande variedade de moleculas com estruturas complexas e ate entao desconhecidas, alem de potentes atividades biologicas. Assim, os objetivos deste trabalho foram isolar linhagens de micro-organismos associadas a ascidia Didemnum granulatum, sua posterior fermentacao para a producao de extratos brutos e a analise destes extratos na busca por metabolitos secundarios bioativos. Para o isolamento das linhagens foram utilizados os seguintes meios de cultura preparados com agua do mar artificial: extrato de malte 2% e 3%, cenoura/batata, fuba, aveia e GPY. A fermentacao das linhagens foi feita em 250 mL dos mesmos meios de cultura sem agar, durante 30 dias. Os extratos brutos foram obtidos por particao com acetato de etila. Estes extratos foram enviados para bioensaio de atividade citotoxica contra celulas tumorais e analisados por cromatografia em camada delgada (CCD) em placa de silica gel (com diferentes reveladores). Dentre os 26 extratos, as amostras DG(M3) 6 C e DG(M3) 5 C apresentaram potente atividade citotoxica, as amostras DG(B)13, DG(M3)1 e DG(G)2B uma atividade moderada. As analises por CCD indicaram a presenca de metabolitos secundarios nos extratos bioativos. As linhagens bioativas foram identificadas como sendo tres fungicas: DG(M3)6 C (Penicilium sp.); DG(M3)5 C (Cladosporium sp.); DG(M3)1 (Aspergillus sp.) e duas bacterianas: DG(B)13 (Aurantimonas sp.); DG(G)2B (Nocardiopsis sp.). Estas foram cultivadas em escala maior de meio liquido (500 mL) e extraidas apos 7, 14, 21 e 30 dias de incubacao. Realizou-se um processo de limpeza destes extratos por extracao em fase solida (SPE) em coluna de silica-gel derivatizada com C18 (35 mL dos eluentes: H2O 100%, MeOH/H2O 1:1 e MeOH 100%). As fracoes geradas foram analisadas por CLAE-UV-EM buscando-se encontrar perfis caracteristicos de metabolitos secundarios. A partir da amostra DG(M3) 6 C (A+B), foi isolado e identificado o composto 13-desoxi-fomenona, previamente obtido por Tirilly et al. em 1983. Apesar deste composto nao ser inedito, nao ha relatos na literatura de estudos envolvendo bioensaios citotoxicos contra celulas tumorais e nem mesmo deste composto ter sido isolado de outras especies de microrganismos que nao seja do fungo Dicyma pulvinata.

Submitted by Viviane Lima da Cunha (viviane@biblioteca.ufpb.br) on 2016-03-15T13:04:05Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 38162809 bytes, checksum: 30693a1c23ea69db4e42ef93733e97d4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-15T13:04:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 38162809 bytes, checksum: 30693a1c23ea69db4e42ef93733e97d4 (MD5) Previous issue date: 2015-02-11 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Candidiasis is an opportunistic infection caused by Candida yeasts. In Brazil, the species C. tropicalis is the second most commonly isolated after C. albicans. Conventional fungal infection treatments are unsatisfactory because of the appearance of resistance and security issues and toxicity of commercially available antifungal drugs. Therefore, it has become essential to develop new drugs and alternative therapies for the treatment of candidiasis. In this context, antifungal compounds of natural origin, such as terpenes, have received much attention in recente times to be promising therapeutic tool for treatment fungal infections. Thus, it was investigated the antifungal activity of citral and geraniol monoterpenes on strains of C. albicans and C. tropicalis. The Minimum Inhibitory Concentration (MIC) and the Minimum Fungicidal Concentration (MFC) were determined by the broth microdilution techniques. Also, it was investigated a possible products action on fungal cell wall (0.8 M sorbitol assay), cell membranes (ergosterol complexation), the time-kill curve, (log CFU/mL) and biological activity on the yeast’s micromorphology. Among the monoterpenes, geraniol was the most potent, as showed the lowest MIC value (16 µg/mL). As for citral, the MIC and MFC was 64 µg/mL for 15 of the 16 tested strains. In accordance with the MIC results, two strains of C. albicans (ATCC 76485 and ML-70) and C. tropicalis (ATCC 13803 and ML-118) were selected for further testing. The result of the possible mechanism of action showed no involvement with cell wall (identical CIM medium with and without addition of sorbitol) or binding to ergosterol (identical CIM medium with and without addition of ergosterol). In the morphological interference assay, it was observed that both citral and geraniol inhibited pseudohyphae and chlamydoconidia formation. It was also found that the monoterpenes have concentration-dependent antifungal activity. It follows, therefore, the citral and geraniol monoterpenes showed potential antifungal activity in vitro against the tested strains, denoting are promising antifungal agents with potential applicability in the treatment of infections caused by Candida yeasts, such as those that occur in the hospital. The probable mechanism of action does not involve the cell wall or binding ergosterol. / A candidíase é uma infecção oportunista causada por leveduras do gênero Candida. No Brasil, a espécie Candida tropicalis é a segunda mais comumente isolada após Candida albicans. O tratamento convencional das infecções fúngicas não é satisfatório em virtude do surgimento de resistência e dos problemas relacionados à segurança e toxicidade dos fármacos antifúngicos comercialmente disponíveis. Assim sendo, torna-se imprescindível o desenvolvimento de novos medicamentos e terapias alternativas para o tratamento de candidíase. Neste contexto, compostos antifúngicos de origem natural, tais como os terpenos, têm recebido grande atenção nos últimos tempos por serem promissoras ferramentas terapêuticas no tratamento de infecções fúngicas. Por isso, investigou-se a atividade antifúngica dos monoterpenos citral e geraniol sobre cepas de C. albicans e C. tropicalis. A Concentração Inibitória Mínima (CIM) e a Concentração Fungicida Mínima (CFM) foram determinadas pela técnica de microdiluição em caldo. Também, foi investigada uma possível ação dos monoterpenos sobre a parede celular fúngica (ensaio com sorbitol 0,8 M), membrana celular (complexação com ergosterol), curva de morte microbiana e atividade biológica sobre a micromorfologia da levedura. Entre os monoterpenos, o geraniol foi o mais potente, pois apresentou menor valor de CIM (16 µg/mL). Já para o citral, a CIM e CFM foi de 64 µg/mL para 15 das 16 cepas testadas. De acordo com os resultados da CIM, duas cepas de C. albicans (ATCC 76485 e LM-70) e C. tropicalis (ATCC 13803 e LM-118) foram escolhidas para os outros testes. O resultado do possível mecanismo de ação, mostrou que não houve envolvimento com a parede celular (CIM idêntica no meio com e sem adição de sorbitol) ou ligação ao ergosterol (CIM idêntica no meio com e sem adição de ergosterol). No ensaio da interferência dos monoterpenos sobre a morfologia da levedura, observou-se que tanto o citral quanto o geraniol inibiram a formação de clamidoconídios e pseudo-hifas. Foi verificado também que os monoterpenos têm atividade antifúngica dependente da concentração. Conclui-se, assim, que os monoterpenos citral e geraniol apresentaram potencial atividade antifúngica in vitro contra as cepas testadas, denotando serem promissores agentes antifúngicos com potencial aplicabilidade no tratamento de infecções causadas por leveduras do gênero Candida, como aquelas que acontecem no ambiente hospitalar.

Submitted by Cristhiane Guerra (cristhiane.guerra@gmail.com) on 2017-02-03T14:55:00Z No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1708717 bytes, checksum: 2d354a04512a631331c735eca33744f1 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-03T14:55:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1708717 bytes, checksum: 2d354a04512a631331c735eca33744f1 (MD5) Previous issue date: 2015-03-26 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Natural products represent a vast source of molecules with pharmacological potential and serve as a basis for seeking and obtaining of new bioactive substances semi-synthetic and synthetic. Based on this knowledge, the interest for new pharmacologically active substances, resulted in the isolation, extraction and synthesis of various bioactive molecules. The medicinal chemistry uses natural products as template for the synthesis of new molecules that are capable of acting against various diseases that affect the global population. Natural products and bioactive molecules thiophenes are widely cited in the literature. This study evaluated two methods (conventional and ultrasonic) synthesis of new 2-aminotiofenos using as precursors various natural products through Gewald reaction by comparing several variables. 13 reactions were analyzed by varying the solvent, base, temperature, agitation mode, time and number of steps. There was the formation of at least one by-product in all reactions. Among the variables, the seconding most effective were: ultrasonic methodology, the lower temperature and shorter reaction time. The ultrasonic energy reactions conducted more quickly (in less reaction time), forming fewer byproducts of the reaction by magnetic stirring. The temperature variable is also essential to this study, the best results being obtained at lower possible temperature (ambient or ice bath). The isolation of some byproducts of the reactions was carried out, but the 1H NMR analysis allowed to identify neither the desired end product (adduct of Gewald) or intermediate (Knoevenagel adduct). New methodological changes and isolation of other byproducts still need to be carried out to prove the success of the reactions and to obtain new adducts Gewald. This study allowed the start of the optimization of reaction conditions of Gewald reaction using natural products as precursors and assist future work in the area. / Os produtos naturais representam uma vasta fonte de moléculas com um potencial farmacológico e servem como base na busca e obtenção de novas substâncias bioativas semi-sintéticas e sintéticas. Baseados nesse conhecimento, o interesse por novas substâncias farmacologicamente ativas, resultou no isolamento, extração e síntese de diversas moléculas bioativas. A química medicinal utiliza como modelo os produtos naturais para a síntese de novas moléculas, que sejam capazes de atuarem frente a várias enfermidades que acometem a população mundial. Os produtos naturais e os tiofenos são moléculas bioativas largamente citadas na literatura. Esse trabalho avaliou duas metodologias (convencional e ultrassônica) de síntese de novos 2-aminotiofenos utilizando como precursores vários produtos naturais através da reação de Gewald, comparando diversas variáveis. Foram analisadas 13 reações, variando o solvente, base, temperatura, modo agitação, tempo e quantidade de etapas. Houve a formação de pelo menos um subproduto em todas as reações. Dentre as variáveis, as que destacaram mais eficazes foram: a metodologia ultrassônica, a menor temperatura e o menor tempo reacional. A energia ultrassônica conduziu as reações de forma mais rápida (em menor tempo reacional), formando menos subprodutos do que a reação por agitação magnética. A variável temperatura foi também essencial para esse estudo, sendo os melhores resultados obtidos em menor temperatura possível (temperatura ambiente ou banho de gelo). O isolamento de alguns subprodutos das reações foi realizado, porém a análise por RMN 1H não permitiu identificar nem os produtos finais desejados (aduto de Gewald), nem o intermediário (aduto de Knoevenagel). Novas alterações metodológicas e o isolamento de outros subprodutos precisam ainda ser realizados para comprovar o sucesso das reações e a obtenção de novos adutos de Gewald. Este estudo permitiu o início da otimização das condições reacionais da reação de Gewald utilizando produtos naturais como precursores e auxiliará os trabalhos futuros na área.

Submitted by LARISSA SPÓSITO null (lari_sposito@hotmail.com) on 2017-07-27T13:11:28Z No. of bitstreams: 1 Dissertação versão final encaminhada pós- PDF.pdf: 2246283 bytes, checksum: 9ebe4c751ba29fc9cf4495fdb7288e5e (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-07-31T18:31:53Z (GMT) No. of bitstreams: 1 sposito_l_me_arafcf.pdf: 2393152 bytes, checksum: cd33f70c4383729bdf5dc49ce9d3375f (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-31T18:31:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 sposito_l_me_arafcf.pdf: 2393152 bytes, checksum: cd33f70c4383729bdf5dc49ce9d3375f (MD5) Previous issue date: 2017-06-02 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O uso de produtos naturais na terapêutica convencional vem ganhando destaque nos últimos anos com relação a atividade antimicrobiana devido à alta taxa de efeitos tóxicos e ao excessivo crescimento do número de cepas multirresistentes aos antimicrobianos convencionais empregados na prática. Entre as novas triagens terapêuticas frente às afecções bacterianas, as infecções causadas pelo Helicobacter pylori merecem atenção especial, uma vez que estão diretamente relacionadas com quadros clínicos severos, como a gastrite crônica, úlcera péptica e câncer gástrico. A Casearia sylvestris Swartz é uma planta popularmente conhecida como guaçatonga ou erva-de-bugre, utilizada na medicina popular no tratamento de transtornos gástricos que nos últimos anos vem despertando interesse na comunidade científica, por suas importantes propriedades com potencial terapêutico como atividade anti-inflamatório, antiofídico, cicatrizante, citotóxica em linhagens de células tumorais e principalmente antiulcerogênica. Neste contexto, uma excelente alternativa para o aprimoramento dos parâmetros biodisponíveis dos extratos vegetais muito utilizada na atualidade é a incorporação destes em sistemas nanotecnológicos de liberação de fármaco para que o produto ativo tenha uma melhor ação. Deste modo, o presente trabalho teve por objetivo avaliar o potencial biológico antibacteriano in vitro do extrato etanólico, extrato aquoso, fração e subfrações das folhas de Casearia sylvestris Swartz, incorporar em um sistema de liberação de fármacos os derivados mais ativos e a partir dos resultados realizar o experimento in vivo contra a cepa ATCC 43504 de H. pylori. Os extratos foram preparados por infusão e maceração. Para as análises biológicas utilizamos a técnica de microdiluição para determinar a concentração inibitória mínima e o biofilme formado. O estudo foi desenvolvido aplicando-se metodologias in vitro e in vivo para elucidar o perfil antibacteriano pretendido, obtendo-se resultados satisfatórios, deixando esse estudo mais interessante, já que a literatura mostra que a C.sylvestris tem perfil anti-ulcerogênico. A partir desses resultados pudemos concluir que os derivados de C. sylvestris apresentaram estatisticamente atividades antibacterianas tanto in vitro como in vivo, sendo que a maioria dos derivados vegetais com exceção dos extratos aquosos, fração 1 e 3 e a subfração 17, tiveram alguma atividade frente ao micro-organismo. Essa atividade provavelmente esta relacionada aos diterpenos clerodânicos que estão em abundância nos derivados da C. sylvestris. A incorporação no sistema nanoestruturado não potencializou a atividade dos derivados vegetais como esperado na maioria dos teste, isto talvez seja pelo fato de a composição dos derivados vegetais e do sistema não serem compatíveis quimicamente. Desde que a literatura mostrou a atividade antiulcerogênica dos derivados vegetais da C. sylvestris, eles podem ser utilizados tanto na cicatrização das lesões como também para a erradicação do H. pylori. / The use of natural products in conventional therapeutics has been gaining highlight in recent years relative to the antimicrobial activity due to the high rate of toxic effects and the excessive growth of the number of multiresistant strains to he conventional antimicrobials used in practice. Among the new therapeutic screenings for bacterial diseases, infections caused by Helicobacter pylori deserve special attention, since they are directly related to severe clinical conditions, such as chronic gastritis, peptic ulcer and gastric cancer. Casearia sylvestris Swartz is a plant popularly known as guaçatonga or erva-de-bugre, used in popular medicine to the treatment of gastric disorders that in recent years has gained the interest of the scientific community due to its important properties with therapeutic potential as an anti-inflammatory, antiofidic, healing, cytotoxicity against tumor cells and mainly antiulcerogenic. In this context, an excellent alternative for the improvement of the bioavailability parameters of the vegetal extracts that is used today is the incorporation of these in nanotechnological systems of drug release so that the active product has a better action. Thus, the aim of this study was to evaluate the in vitro antibacterial potential of the ethanolic extract, aqueous extract, fraction and subfractions of the leaves of Casearia sylvestris Swartz, and incorporate into a drug delivery system the most active derivatives and from these results carry out the in vivo experiment against the H. pylori ATCC strain. The extracts were prepared by infusion and maceration. For the biological analyzes we use the microdilution technique to determine the minimum inhibitory concentration and the formed biofilm. The study was developed applying in vitro and in vivo methodologies to elucidate the antibacterial profile. From the results, we can conclude that the C. sylvestris derivatives showed statistically antibacterial activities both in vitro and in vivo. Most of the vegetal derivatives with the exception of aqueous extracts, fractions 1 and 3 and subfraction 17, had some activity against to the microorganism. This activity is probably related to clerodan diterpenes that are abundant in C. sylvestris derivatives. The incorporation into the nanostructured system did not potentiate the activity of the vegetable derivatives as expected in most tests, this is perhaps due to the fact that the composition of the plant derivatives and the system are not chemically compatible. Since the literature shows an antiulcerogenic activity of C. sylvestris derivatives, they could be used both for wound healing and for H. pylori eradication.

Orientador: Wagner Vilegas / Banca: Nivaldo Boralle / Banca: Miriam Sannomiya / Banca: Mônica Tallarico Pupo / Banca: Adriana Mendes Aleixo / Resumo: No Brasil, 31 espécies vegetais de Paepalanthus foram registradas no Estado de Minas Gerais, no topo da Serra do Espinhaço, o principal centro de diversidade de Eriocaulaceae do Brasil e mais de 400 espécies de Paepalanthus e estão distribuídas geograficamente do estado do Amazonas a São Paulo. Apesar do grande número de espécies existentes em Eriocaulaceae, a sua peculiar composição química, aliadas às importantes atividades biológicas das substâncias isoladas, existem ainda muitas espécies que não possuem estudos, como no caso de Paepalanthus geniculatus. Portanto, neste trabalho, o extrato metanólico dos capítulos de Paepalanthus geniculatus (Bong.) Kunth foi estudado, utilizando HPLC-ESIMSn. As substâncias foram posteriormente isoladas do extrato metanólico e identificadas por RMN mono e bi-dimensionais. Com estas técnicas analíticas, foi possível identificar a presença de dezenove substâncias fenólicas, destas onze inéditas, sendo quinze flavonóides e quatro naftopiranonas que auxiliará na taxonomia da família. Um flavonol glicosilado ciclodimérico ligado a uma unidade truxilato, também inédito foi isolado e identificado por métodos espectroscópicos e espectrométricos. Alguns flavonóides exibiram forte atividade antioxidante e nenhuma das substâncias apresentou efeito citotóxico significativo em células humanas cancerosas de próstata / Abstract: In Brazil, 31 plant species of Paepalathus were registered in the State of Minas Gerais, at the top of the Espinhaço, the main center of diversity of Eriocaulaceae in Brazil and over 400 Paepalanthus are distributed geographically from the state of Amazonas to São Paulo. Despite the large number of species existing in Eriocaulaceae, its peculiar chemical composition, which has greatly aided in the taxonomy of the family, combined with the biological activities of isolated substances, there are still many species that have no studies, as in the case of Paepalanthus geniculatus. Therefore, in this work the methanol extract of the capitulae from Paepalanthus geniculatus (Bong.) Kunth were studied. An analytical approach based on HPLC-ESI-MSn was applied to obtain the metabolite profile of this extract and led to the rapid identification of nineteen polyphenolic compounds, eleven unpublished, comprising fifteen flavonoids and four naphthopyranones. The substances were then isolated and identified by NMR mono and bidimensional. A glycosylated cyclodimeric flavonol bonded to a truxilate unit, also unpublished, was isolated and identified by spectroscopic and spectrometric methods. Some flavonoids showed strong antioxidant activity and none of the substances showed significant citotoxic effect in human prostate cancer cells / Doutor

Orientador: Maysa Furlan / Coorientador: Ana Maria Soares Pereira / Banca: Paulo Sérgio Pereira / Banca: Renato Paiva / Resumo: Este trabalho teve como objetivo estabelecer metodologia de cultivo e produção de células e/ou órgãos in vitro da espécie Salacia campestris com vista à obtenção de triterpenos quinonametídeos. Para isso, aplicando-se técnicas biotecnológicas, diversas tentativas de inserir a espécie in vitro foram realizadas utilizando explantes de folhas (limbo foliar e pecíolo), endosperma e sementes. Raízes obtidas in vitro foram cultivadas por 105 dias, sendo a presença e o teor de triterpenos quinonametídeos avaliados no decorrer deste período. Sistemas radiculares de plantas jovens (1 ano) cultivadas em casa de vegetação e sistemas radiculares de plantas adultas foram também analisadas quanto à presença e teor de triterpenos quinonametídeos. Foram utilizadas técnicas cromatográficas e de espetrometria de massas (EM) para a detecção e identificação de 22β-hidroximaitenina, maitenina e netzahualcoieno. Os ensaios citotóxicos in vitro foram realizados, como os dois últimos quinonametídeos, frente à linhagem de células normais 3T3 (fibroblasto) e de células tumorais HeLa (cólon de útero) e B16-F10 (melanoma murino). A partir de explantes de endosperma inoculados em meio de cultura WPM, suplementado com 20 g/L de sacarose, acrescido com 4,0 mg/L de AIB (ácido indolbutírico) e 100 mg/L de PVP (polivinilpirrolidona), foram obtidas raízes in vitro. A partir dos estudos fitoquímicos foram detectados e identificados, nas raízes in vitro e em sistemas radiculares de plantas cultivadas em casa de vegetação, os triterpenos quinonametídeos maitenina e 22β-hidroximaitenina, enquanto que nos sistemas radiculares coletados em campo foram identificados os triterpenos maitenina e netzahualcoieno. O isolamento dos três triterpenos citados também foi realizado. Para as raízes cultivadas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This work aimed to establish a methodology of cultivation and production of in vitro cells and /or organs of Salacia campestris, trying to obtain the quinone-methide triterpenes. Based on this and applying biotechnological techniques, several attempts to insert this species in an in vitro system were performed using leaf explants (leaf and petiole), endosperm and seeds. The in vitro roots obtained were cultured for 105 days, and the presence and content of quinone-methide triterpenes were evaluated during this period. The roots of young plants (1 year) grown in a greenhouse as well roots of adult plants were also analyzed for the presence and content of the quinone-methides. The analysis of the quinone-methides were performed using chromatographic techniques and mass spectrometrometry (MS) led to the identification of 22β-hydroxymaytenin, maytenin and netzahualcoyene. The in vitro cytotoxic assays were performed using the quinone-methides maytenin and netzahualcoyene, comparing with the normal cell line 3T3 (fibroblast) as well the HeLa tumor cells (uterus carcinoma) and B16-F10 (murine melanoma). The in vitro roots were obtained from endosperm explants, inoculated in WPM medium supplemented with 20 g/L sucrose, 4.0 mg/L IBA (indole-butyric acid) and 100 mg/L PVP (polyvinylpyrrolidone). The phytochemical studies of the in vitro roots and roots of plants grown in a greenhouse resulted in the identification of the quinone-methide triterpenes maytenin and 22β-hydroxymaytenin, while from the natural roots were identified the quinone-methides maytenin and netzahualcoyene. All of the triterpenes were also isolated. The results obtained for in vitro roots indicated that the greatest accumulation of biomass occurred on the 60th day of culture and the highest levels of maytenin (972.11 mg/g) and ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Luiz Claudio Di Stasi / Banca: Clélia Akiko Kiruma-Lima / Banca: Jairo Kenupp Bastos / Resumo: Doença inflamatória intestinal (DII) é um termo que engloba várias doenças crônicas do trato gastrintestinal, principalmente colite ulcerativa (CU) e Doença de Crohn (DC), cuja etiologia ainda não é completamente conhecida, mas que se caracterizam por um curso crônico onde se alternam períodos de remissão e de atividade de duração variáveis. Embora DII tenha sido alvo de muitas pesquisas nos últimos anos, as drogas utilizadas correntemente causam sérios efeitos colaterais quando usados em altas doses ou durante um período prolongado, o que limita seu uso. Considerando-se a etiologia multifatorial das DII, produtos que reúnam atividades antioxidante, antiinflamatória e imunomoduladora representam uma possibilidade potencial para a descoberta de novas drogas eficazes na prevenção e tratamento desta doença. Neste sentido, inúmeras alternativas de pesquisas surgem com base em produtos naturais. Este trabalho testou a atividade antiinflamatória do extrato acetato de etila de folhas de Baccharis dracunculifolia em diferentes doses (5 a 200 mg/Kg) em duas condições experimentais distintas: quando a mucosa colônica está intacta (efeito preventivo); quando a mucosa colônica está afetada por um processo inflamatório intestinal (efeito curativo) assim como preventivo da recidiva do processo inflamatório, similar ao que ocorre com a colite ulcerativa em humanos. Diferentes marcadores bioquímicos de inflamação colônica foram avaliados, incluindo glutationa e atividade das enzimas mieloperoxidase e fosfatase alcalina. Experimentos in vitro adicionais foram realizados para testar a atividade antioxidante de diferentes concentrações do EBD. A administração oral do extrato acetato de etila de folhas de Baccharis dracunculifolia na dose de 5 mg/Kg protege o cólon de ratos do processo inflamatório através de um mecanismo que envolve a diminuição... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Inflammatory bowel disease (IBD) is a term employed to several chronic disease of the digestive tract, usually ulcerative colitis (UC) and Crohn's disease (CD), their etiology has not been clearly elucidated, but which are characterized by variable chronic and spontaneously relapsing inflammation. Although IBD has been the target of many studies in the last years, the drugs commonly used cause serious side effects when employed in high doses or while a long time, limiting their use. Whereas the multifactor etiology of IBD, products with antioxidant, anti-inflammatory and imunnomodulatory activities play potential possibility to discovery of news drugs effective in the prevention and treatment of these disorders. In this way, many alternatives appear based in natural products. This study tested the anti-inflammatory activity of ethyl acetate extract of Baccharis dracunculifolia leaves (BDE) at different doses (5 to 200 mg/Kg) in two experimental settings: when the colonic mucosa is intact (preventive effect) or when the mucosa is in process of recovery after an initial insult (curative effect) such as relapse common in human IBD. Different biochemical markers of colonic inflammation were also evaluated, including glutathione, myeloperoxidase and alkaline phosphatase activities. Additional in vitro experiments were performed in order to test the antioxidant activity of different concentrations of BDE. BDE administrated orally at lowest dose, 5 mg/Kg, protects the rat colon of the inflammatory process through a mechanism which involve an improvement on intestinal oxidative stress associated to inflammation, such as reduction of the myeloperoxidase activity and maintenance of endogenous antioxidant levels, such as the glutathione, and that intestinal anti-inflammatory activity can be due to phenolic compounds presence in extract. The specie studied showed the new possibility for the prevention and treatment to this disorder. / Mestre