Infecções por bactérias do gênero Salmonella podem causar doenças em aves levando a perdas produtivas, como, queda de postura, diminuição do ganho de peso e mortalidade. Além disso, os produtos avícolas estão entre as principais causas de toxi-infecções alimentares em humanos. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana in vitro dos óleos essenciais de Canela da China, Orégano, Pimenta Negra e Tomilho Branco frente a amostras de Salmonella enterica isoladas de aves, bem como comparar as técnicas de disco difusão e microdiluição em caldo. Para avaliar o efeito inibitório dos óleos essenciais no crescimento dos micro-organismos usou-se uma técnica de microdiluição em caldo empregando-se resazurina como indicador de viabilidade celular. Dos quatro óleos testados, apenas a pimenta negra não exibiu efeito inibitório sobre o crescimento das bactérias testadas e o óleo de orégano foi o único que apresentou atividade frente a todas as amostras com valores de concentração inibitória mínima (CIM) variando de 8-1% (v/v). Enquanto que, os óleos de tomilho e canela foram efetivos para 91,3% (42/46) e 80,43% (37/46) das amostras, respectivamente. Os valores de CIM para o tomilho variaram de 8-4% (v/v) e para a canela foram de 8-2% (v/v). Em relação às técnicas, pode-se observar que a técnica de microdiluição em caldo apresentou melhores resultados que a disco difusão, embora seja difícil comparar os resultados devido às características peculiares dos óleos, como a viscosidade, volatilidade e diferente afinidade com a água. Além disso, a microdiluição em caldo nos fornece valores semi-quantitativos, enquanto que o método de disco difusão os resultados são descritos qualitativamente. Embora não se tenha ainda hoje padronizações para avaliar o efeito inibitório dos óleos no crescimento dos micro-organismos, com este estudo podemos observar que os óleos, principalmente orégano, são uma alternativa natural para aplicações na indústria visando a redução de Salmonella nos produtos. / Infections with bacteria of the genus Salmonella can cause disease in poultry leading to production losses, as falling posture, decreased weight gain and mortality. Furthermore, poultry products are among the major causes of human alimentary toxinfections. The aim of this study was to evaluate the in vitro antimicrobial activity of essential oils of cinnamon from China, Oregano, Thyme and Black Pepper White against strains of Salmonella enterica isolated from poultry and compare the techniques disk diffusion and microdilution. To assess the inhibitory effect of essential oils on the growth of micro-organisms used was a broth microdilution technique employing resazurin as an indicator of cell viability. Of the four oils tested, only black pepper showed no inhibitory effect on the growth of bacteria and tested oregano oil was the only one that showed activity against all samples with values of minimum inhibitory concentration (MIC) ranging from 8-1% ( v / v). While the oils of thyme and cinnamon were effective in 91.3% (42/46) and 80.43% (37/46) of samples, respectively. MIC values for the peas ranged from 8-4% (v / v) and cinnamon were 8-2% (v / v). Regarding the techniques, one can observe that the microdilution broth showed better results than disk diffusion, although it is difficult to compare the results due to the peculiar characteristics of oils, as viscosity, volatility, and different affinity for water. Furthermore, the broth microdilution provides semi-quantitative values, while the disk diffusion method results are described qualitatively. Although no standardizations today to evaluate the inhibitory effect of oils on the growth of micro-organisms, with this study we can see that the oils, especially oregano, are a natural alternative for applications in industry for the reduction of Salmonella in products.

Submitted by Ana Hilda Fonseca (anahilda@ufba.br) on 2014-09-17T17:07:47Z No. of bitstreams: 1 TESE COMPLETA.pdf: 4364010 bytes, checksum: db848addf66479f547ccb64d058e01e0 (MD5) / Approved for entry into archive by Fatima Cleômenis Botelho Maria (botelho@ufba.br) on 2014-09-19T12:34:03Z (GMT) No. of bitstreams: 1 TESE COMPLETA.pdf: 4364010 bytes, checksum: db848addf66479f547ccb64d058e01e0 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-19T12:34:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TESE COMPLETA.pdf: 4364010 bytes, checksum: db848addf66479f547ccb64d058e01e0 (MD5) / CNPq e CAPES / Os extratos MeOH de Poincinella pyramidalis (caatingueira), obtidas da casca da raiz (PPCR) e das flores (PPF), bem como, as frações orgânicas obtidas por partição, foram submetidas a testes de atividade citotóxica, antioxidante e anticolinesterásica. O teste citotóxico contra Artemia salina revelou atividade moderada para fase AcOEt em PPCR. Assim como, a fase AcOEt de PPCR apresentou 75% de inibição no teste anticolinesterásico. Para a atividade antioxidante, as fase AcOEt e BuOH de PPF foi a mais ativa, sendo atribuída a presença de galato de metila (PPF3). Por meio de processos cromatográficos foi possível isolar da fase DCM de PPF as substâncias PPF1 (alcoóis graxos), PPF2a-b (β–sitosterol/estigmasterol), PPF3 (galato de metila) e PPF4 (α e β–amirina). Além dessas, foram isoladas da fase hexano de PPCR ésteres metílicos (PPCR1) e o biflavonoide 5,7-dihidroxi-4´-metoxiflavona-6α-2´´´,4´´´-dihidroxi-4´´- metoxidihidrochalcona (PPCR3). Da fase hidroMeOH de PPCR foram isoladas as substâncias PPCR2 (ácido 3,3´-dimetoxi-4-hidroxielagico-4´-β-D-xilopiranosideo) e outro biflavonoide PPCR4 (5-hidroxi-7,4´-dimetoxiflavona-3α-2´´´-hidroxi-4´´´,4´´- dimetoxidihidrochalcona). Sendo PPCR3 e PPCR4 inéditas na literatura. O extrato hexano de Theobroma cacao (cacau) obtido das sementes (STC) foi analisado por RMN e revelou presença de triacilglicerideos. A otimização e fracionamento do extrato MeOH de T. cacao utilizando CCC levou ao isolamento simultâneo de teobromina (2), teofilina (3) e cafeína (4), fase móvel hexano:AcOEt (2:3) e estacionária MeOH:H2O (1:1). Um método analítico foi desenvolvido empregando HPLC/DAD com coluna fase reversa C-18 para a quantificação de 2, 3 e 4 nos extrativos em fase ácida/básica e nas frações STC6-22 e STC23-67 obtidas por CCC. Assim, os teores de 2 e 4 para no extrato MeOH de T. cacao e frações obtidas por CCC foram determinados. A teofilina (3) detectada e quantificada na fração STC6-22 em baixa concentração (0,78 mg/g) em relação a 2 e 4. A apigenina (6) foi sintetizada utilizando dois métodos distintos (“A” e “B”). O metodo “B” apresentou rendimento de 74% em uma única etapa. A síntese de derivados O-metilados forneceu bons rendimentos (> 90%). As substâncias isoladas/sintetizadas foram submetidas à atividade anticolinesterasica do qual, são inativas. As mesmas foram elucidadas a partir de dados de IV, UV, EM, α[D], RMN de 1H e 13C (BB e APT), RMN de correlação (HMQC, HSQC e HMBC). / The MeOH extracts from Poincinella pyramidalis (caatingueira), obtained of bark root (PPCR) and flowers (PPF), as well the organic fractions obtained by partition, have been tested for cytotoxicity, antioxidant and anticholinesterasic activity. The cytotoxic test against Artemia salina showed moderate activity for AcOEt phase in PPCR. Well the EtOAc phase of PPCR showed 75% inhibition on anticholinesterasic test. For the antioxidant activity, the EtOAc and BuOH phase of PPF was the most active, being attributed to the presence of methyl gallate (PPF3). For chromatographic process was possible to isolate the DCM phase of PPF the substances PPF1 (fatty alcohols), PPF2a- b (β–sitosterol/stigmasterol), PPF3 (methyl galate) and PPF4 (α- and β–amirin). Besides these, were isolated from the hexane phase PPCR methyl esters (PPCR1) and the biflavonoid 5,7-dihidroxy-4´-methoxyflavone-6α-2´´´,4´´´-dihidroxy-4´´-methoxy dihidrochalcone (PPCR3). The HidroMeOH phase of PPCR were the isolated substances PPCR2 (3,3´-dimethoxi-4-hidroxyellagicacid-4´-β-D-xylopiranoside) and other biflavonoid PPCR4 (5-hidroxy-7,4´-dimethoxyflavone-3α-2´´´-hidroxy-4´´´,4´´- dimethoxydihidrochalcone). Being PPCR3 and PPCR4 unpublished in literature. Hexane extract of Theobroma cacao (cacau) obtained from the seeds (STC) was analyzed by NMR and revealed the presence of triacylglycerides. The optimization and fractionation of MeOH extract of T. cacao using CCC led to the simultaneous isolation of theobromine (2) Theophylline (3) and caffeine (4), mobile phase hexane:EtOAc (2:3) and stationary MeOH:H2O (1:1). An analytical method was developed employing HPLC/DAD with reverse phase column C-18 for the measurement of 2, 3 and 4 in the extractives acid/base phase and the STC6-22 and STC23-67 fractions obtained by CCC. So, the levels of 2 and 4 for the MeOH extract of T. cacao and fractions obtained by CCC were determined. Theophylline (3) detected and quantified in the fraction STC6-22 low concentration (0.78 mg/g) in relation the 2 and 4. Apigenin (6) was synthesized using two different methods ("A" and "B"). The method "B" had a yield of 74% in one step. The synthesis of O-methylated derivatives provided good yields (> 90%). The isolated/synthesized substances were submitted to anticholinesterasic activity which are inactive. The same were elucidated from data of IR, UV, MS, α[D], 1H NMR and 13C NMR (BB and APT) NMR correlation (HMQC, HSQC and HMBC).

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-22Bitstream added on 2014-06-13T19:42:39Z : No. of bitstreams: 1 cavallari_mm_dr_botib.pdf: 2341412 bytes, checksum: 25cb49e35e82d3a208a4d24cb3f50d39 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / O presente trabalho teve como objetivo produzir ferramentas e informações úteis para a conservação e exploração racional de Casearia sylvestris Sw. (Salicaceae), uma espécie que produz diterpenos clerodânicos de grande importância farmacológica (casearinas), e que é explorada por extrativismo. Tal objetivo foi alcançado através do desenvolvimento de marcadores microssatélites específicos para C. sylvestris e de um estudo da diversidade genética e química existente entre e dentro de populações do Estado de São Paulo. Tradicionalmente são reconhecidas duas variedades em C. sylvestris (var. sylvestris e var. lingua), o que é motivo de debate devido à existência de formas intermediárias. Este trabalho objetivou, adicionalmente, contribuir com argumentos genéticos para esta discussão. Foi construída uma biblioteca enriquecida em microssatélites, a partir da qual obtiveram-se e validaram-se dez pares de iniciadores (primers) microssatélites específicos para C. sylvestris. Estes pares de iniciadores foram utilizados para o estudo da estrutura genética de populações de C. sylvestris através da amostragem de 376 indivíduos em nove populações distribuídas em quatro ecossistemas (Floresta Ombrófila Densa, Floresta Estacional Semidecidual, Cerrado e ecótonos). As duas variedades foram amostradas de acordo com sua distribuição nestes ecossistemas. A genotipagem dos indivíduos para os locos amostrados foi realizada através de eletroforese em gel de acrilamida lido a 700 e 800 nm por um seqüenciador IR2-DNA Analyser (LI-COR). Os dados foram analisados através de abordagens frequentistas, bayesianas e baseadas na teoria de coalescência, utilizando-se diversos programas computacionais. Para o estudo da diversidade química, as mesmas populações foram amostradas, selecionando-se 12 indivíduos por população, totalizando 108 indivíduos. Adicionalmente, foram... / This work aimed obtaining tools and information for the conservation and rational exploitation of Casearia sylvestris Sw. (Salicaceae), a tree species which produces casearins, pharmacologically important clerodane diterpenes. This goal was achieved through the development of a set of polymorphic microsatellite markers, and through the study of chemical and genetic diversity in populations of C. sylvestris from São Paulo State. Also, we aimed contributing for the debate on the existence of two varieties within this species (var. sylvestris e var. lingua). A genomic library was constructed and 10 primer pairs were obtained. Those primers were utilized for a population genetic structure analysis, in which 376 individuals from nine populations distributed on four different ecosystems (Evergreen Atlantic Forest, Semideciduous Atlantic Forest, Cerrado and ecotones) were sampled. The two varieties were sampled according to its distribution among these populations. Genotyping was performed at 700 and 800 nm by electrophoresis on an IR2-DNA Analyser (LI-COR). The data were analyzed through frequentist, Bayesian and coalescence-based approaches, through the use of several softwares. Chemical diversity was studied by sampling in the same populations (12 individuals per population, i.e. 108 individuals). Also, cuttings of these individuals were prepared, aiming to verify its’ chemical compounds after a year of green-house cultivation. Cuttings’ rooting was problematic and a methodology was developed. Only 46 cuttings survived. Casearins from these 154 individuals (108 + 46) were extracted and analyzed by HPLC. Genetic analysis results suggests a partial genome duplication, as more than two alleles for the same locus were observed in 8% of var. sylvestris individuals and in 70% of var. lingua individuals. Additional studies are necessary to verify the hypothesis of partial genome duplication... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-11-26Bitstream added on 2014-06-13T18:43:57Z : No. of bitstreams: 1 lopes_fcm_dr_arafcf.pdf: 1909059 bytes, checksum: 974b3ea32c4f5b47c9236b3e9490981c (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Produtos naturais têm contribuído intensamente para o desenvolvimento da terapêutica moderna. As plantas produzem um vasto número de substâncias, que em estado natural ou após sofrerem transformações químicas, possuem diversas atividades farmacológicas. Fungos endofíticos, organismos que vivem no interior das plantas, também podem representar novas fontes de produtos biologicamente ativos. Atualmente, a relação causal entre inflamação, imunidade inata e câncer é largamente aceita. O envolvimento de mediadores inflamatórios, como óxido nítrico (NO) e citocinas, gerados por macrófagos ativados, na patogênese das doenças inflamatórias já está bem estabelecido. Além disso, a inibição da angiogênese tem sido reconhecida como uma promissora abordagem terapêutica para o controle do crescimento tumoral, das metástases e das doenças inflamatórias crônicas. Alchornea glandulosa Poepp & Endl. (Euphorbiaceae) é uma planta com conhecida atividade antiinflamatória que está distribuída do sudeste ao sul do Brasil, principalmente na Mata Atlântica e no Cerrado. O potencial antiinflamatório, antitumoral e antiangiogênico dos compostos obtidos a partir da planta (fração acetato de etila e os compostos puros isoquercitrina, afzelina, ácido gálico, pteroginina e pteroginidina) e de fungos endofíticos presentes no interior das suas folhas (extratos acetato de etila ALG-A, ALG-02 e ALG-03) foram estudados por meio de experimentos utilizando-se culturas de macrófagos murinos, linhagens tumorais murinas de câncer de mama (LM2) e pulmão (LP07) e culturas de células endoteliais de veia umbilical humana (HUVEC). Ensaios de determinação de óxido nítrico (reagente de Griess), citocinas pró-inflamatórias TNF-α, IL-1β, IL-6 e IL-12 (ELISA), atividade citotóxica (MTT) e avaliação da taxa de inibição do crescimento de tumores tratados com injeção... / Natural products have contributed enormously to the development of important therapeutic drugs used currently in modern medicine. Plants produce a vast number of compounds that, either directly or after chemical modifications, exert pharmacological activities. Endophytic fungi, organisms which live in plants, are also being recognized as new sources of biological active substances. Nowadays, the relationship among inflammation, innate immunity and cancer are widely accepted. Inflammatory mediators as nitric oxide (NO) and cytokines produced by activated macrophages are involved in the pathogenesis of inflammatory diseases. Besides that, angiogenesis inhibition has been accepted as a promising therapy for the control of tumor growth, metastasis and also chronic inflammatory conditions. Alchornea glandulosa Poepp & Endl. (Euphorbiaceae) is a plant that demonstrates anti-inflammatory activity. It can be found in Brazil, distributed from southeast to south, mainly in the Atlantic Forest and Cerrado. The anti-inflammatory, antitumor and antiangiogenic potential of the compounds obtained from this plant (ethyl acetate fraction and the pure compounds isoquercitrin, afzelin, gallic acid, pterogynine and pterogynidine) and from the endophytic fungi present in its leaves (ALG-A, ALG-02 and ALG-03 ethyl acetate extracts) were studied using macrophage cultures, tumor cell lines (LM2 and LP07) and human umbilical vein endothelial cells (HUVEC). To evaluate anti-inflammatory and antitumor activity, in vitro assays were utilized to determine NO (Griess reagent), TNF-α, IL-1β, IL-6 and IL-12 proinflammatory cytokines (ELISA) and cytotoxicity (MTT). Tumor growth inhibition rate was also studied in vivo. Apoptosis (TUNEL assay), proliferation (bromodeoxiuridine – BrdU), invasion (double-chamber assay), capillary-like structures formation (matrigel) and NFκB activity (ELISA) were realized to study... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseLVR.pdf: 6988214 bytes, checksum: d780cb227a0bf1454902b195e898d753 (MD5) Previous issue date: 2005-08-31 / Universidade Federal de Minas Gerais / Raputia praetermissa (Engler) Emmerich is a tree found only in the Forest Reserve Adolpho Ducke, Amazonas, Brazil. The genus Raputia was originally described by Engler and many species were included in this genus, but in 1978, Emmerich proposed three new genera Neoraputia, Raputiarana e Sigmathantus in order to accommodate six species, four belonging to the genus Raputia, which is assigned into the tribe Cuspariae, and two that had not been described yet. From our knowledge no previous phytochemical work has been reported on Raputia. Therefore, this study describes phytochemical and chemosystematic investigation and the search of compounds with trypanocidal and leishmanicidal activity from roots of R. praetermissa. The phytochemical work involved crude extract preparation, followed by fractionation and isolation of compounds thorough different chromatography methods. Spectroscopic analyses permitted the identification of them and the results showed the presence of new substances in addition to those isolated previously. Here we reported the isolation and identification of the new compounds: two new limonoids, 11β,19α-dihydroxi-7- deoxo-7-acetoxy-ichangin e 11β,19α-oxide-7-deacetoxy-7-hidroxy-ichangin, two new prenylated indoles alkaloids, 5-[(3 -dimethylalil-4 -methylidene)-2 -tetrahidrofuran-2 - il]-indol e 5-[(4 -carbomethoxy)-furan-2 -il]-indol and a new bisindol alkaloid, 5 ,6 -[5- methyl-5(7-indol-5 -il-etene-6,7-diil)-3(1-methylprop-2-en-2-il)]-ciclopentane-5 ,6 -diilindol. The following known substances were also obtained: T-cadinol, β-sitosterol, stigmasterol, campesterol, 3-[2 ,6 -dimethoxy-6 ,6 -dimethylpyrano(2 ,3 :3 ,4 ) phenyl]-methylpropionate, 3-oxo-cadinol, lanosta-7,24-dien-21-oic acid-3-oxo, dictamine, γ-fagarine, 1-methyl-4-methoxy-2-quinolone, tricoccin S13 acetate, 6- formylindol. Our results showed that the chemical classes isolated from R. praetermissa roots are common to the Rutaceae family, but the prenylated indol alkaloids are not. These compounds are new classes of prenylated indol alkaloids. However, all isolated compounds confirm the assigned it into the tribe Cuspariae. In addition, the compounds were evaluated for: a) in vitro biological activity against trypanosomastigotes forms of Trypanosoma cruzi and amastigotes forms of Leishmania braziliensis; b) enzymatic inhibitory activity on glyceraldehydes- XXXII phospato-dehidrogenase (gGAPDH) of T. cruzi and enzymatic inhibitory activity on adenine-phosphoribosyl-transferase (APRT) of Leishmania tarentolae. None of isolated substances were promising against T. cruzi in vitro test as well as in enzymatic experimental models (gGAPDH e APRT) from which they not showed enzymatic inhibitory activity. Conversely, the T-cadinol was active against L. braziliensis and results in DL50 44 µM. / XXIX Raputia praetermissa (Engler) Emmerich é uma arvoreta encontrada somente na Reserva Florestal Adolpho Ducke, Amazonas, Brasil. O gênero Raputia foi originalmente descrito por Engler, onde várias espécies foram incluídas, mas em 1978, Emmerich propôs dividi-lo em três novos gêneros, Neoraputia, Raputiarana e Sigmathantus com o objetivo de acomodar seis espécies, quatro destas pertencentes a Raputia (incluída na tribo Cuspariae) e duas que ainda não haviam sido descritas. Atualmente este gênero possui 11 espécies. Não há relatos de estudos fitoquímicos em Raputia. Este trabalho descreve o estudo fitoquímico e quimiossistemático e a busca de compostos tripanocida e leishmanicida na raiz de R. praetermissa. O estudo fitoquímico envolveu desde a preparação dos extratos brutos, seguidos pelo fracionamento e isolamento dos compostos através de diferentes métodos cromatográficos. As análises espectroscópicas permitiram a identificação de substâncias conhecidas e inéditas. Neste são descritos o isolamento e identificação de dois limonóides inéditos, 11β,19α-dihidroxi-7-deoxo-7-acetoxi-ichangina e 11β,19α-óxido-7-deacetoxi-7- hidroxi-ichangina, dois alcalóides indólicos prenilados inéditos, 5-[(3 -dimetilalil-4 - metilideno)-2 -tetraidrofurano-2 -il]-indol e 5-[(4 -carbometoxi)-furano-2 -il]-indol, e um alcalóide bisindol também inédito, 5 ,6 -[5-metil-5(7-indol-5 -il-eteno-6,7-diil)-3(1- metilprop-2-en-2-il)]-ciclopentano-5 ,6 -diil-indol, e as substâncias conhecidas, Tcadinol, β-sitosterol, estigmasterol, campesterol, 3-[2 ,6 -dimetoxi-6 ,6 - dimetilpirano(2 ,3 :3 ,4 ) fenil] propianato de metila, 3-oxo-T-cadinol, ácido 3- oxotirucala-7,24-dien-21-óico, dictamina, γ-fagarina, 1-metil-4-metoxi-2-quinolona, acetato de tricocina S13, 6-formilindol. Nossos resultados mostram que as classes químicas isoladas são comuns na família Rutaceae, exceto os indólicos prenilados que pertencem a uma nova classe de indólicos. Contudo, todas as substâncias isoladas confirmam o posicionamento de Raputia na tribo Cuspariae. Os compostos isolados foram avaliados quanto: a) Atividade biológica in vitro contra as formas tripomastigotas de Trypanosoma cruzi e amastigotas de Leishmania braziliensis; b) Atividade enzimática inibitória em gGAPDH (Gliceraldeído-3-fosfato-desidrogenase) do T. cruzi e em APRT (adenina-fosforribosil-transferase) de Leishmania tarentolae. Nenhuma das substâncias isoladas foi promissora no teste in vitro contra T. cruzi. No modelo experimental enzimático (gGAPDH e APRT) nenhum composto mostrou atividade inibitória promissora. Por outro lado, o T-cadinol foi ativo contra L. braziliensis resultando em uma DL50 de 44 µM.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 3716.pdf: 15456968 bytes, checksum: 4a39e68e7b10a9e50bb83087365cf289 (MD5) Previous issue date: 2011-09-26 / Financiadora de Estudos e Projetos / Ten herbs used in traditional medicine supported by literature for its effectiveness to osteoarticular diseases were selected to conduct a screening of inhibition activity against the cathepsin K, an important enzyme responsible for cleavage of collagen, the main constituent of extracellular matrix of cartilage and bone. Out of the ten herbs selected (ginger, saffron, camellia, cat s claw, mentrasto , moringa , babaçu , devil s claw, urtica e pequi ), one, gengibre (Z. officinale), should be highlighted by a high inhibitory activity of its extracts and fractions against cathepsin K and due to its ancient use as a therapeutic agent. From the dichloromethane fraction obtained of the crude extract of the rhizome of Z. officinale were isolated and identified 18 compounds (4-gingerol, 6-gingerol, 8-gingerol, 6-shogaol, 8-shogaol, 10-shogaol, 6- paradol, 6-gingerdiol, methyl 6-gingerol, methyl 6-shogaol, diacetoxy-6-gingerdiol, methyl diacetoxy-6-gingerdiol, zingerone, gingerenone A, galanolactone, 3-acetoxy- 5-hydroxy-1,7-bis(4 -hydroxy-3 -methoxyphenyl)-heptane and hexahydrocurcumin). From the hexane fraction and essential oil were identified two monoterpenes and four sesquiterpenes. The most active compounds against cathepsin K were gingerols and shogaols with longer alkyl chain. Optimization of the separation of major compounds (6, 8 and 10-gingerol) and an overload study of C18 column was performed using HPLC, obtained as result dozens to hundreds of milligrams of each gingerol with high purity. Structural modifications of 6-gingerol were carried out and of the seven derivatives obtained 4 presented significant increase in inhibition of cathepsin K. Of all the compounds, three, SSi6, 10-gingerol, 6-shogaol, were selected for later tests: determinating of the mode the inhibition against cathepsin K, inhibition against cathepsin K and inhibition of nitric oxide (NO) production, in cellular culture. The inhibitions determined were: partially noncompetitive, partially uncompetitive and complete uncompetitive for the SSi6, 10-gingerol and 6-shogaol, respectively. Excellent inhibition activity against the cathepsin K, in cellular culture, can be observed for SSi6 and 6-shogaol. In the inhibition assay of NO production, the 6- shogaol was the only compound that appeared as effective. / Dez plantas utilizadas pela medicina tradicional com indicativos na literatura de suas eficácias frente a doenças osteoarticulares foram selecionadas para a realização de uma triagem de atividade inibitória frente à catepsina K, uma importante enzima responsável pela clivagem do colágeno, principal constituinte da matriz extracelular da cartilagem e ossos. Das dez plantas selecionadas (gengibre, açafrão, camélia, unha-de-gato, mentrasto, moringa, babaçu, garra-do-diabo, urtigão e pequi), uma, gengibre (Zingiber officinale), merece destaque pela alta inibição de seu extrato e frações frente à catepsina K e por seu uso milenar como agente terapêutico. Da fração de diclorometano obtida do extrato bruto dos rizomas de Z. officinale isolou-se e identificou-se 18 substâncias (4-gingerol, 6-gingerol, 8-gingerol, 6-shogaol, 8- shogaol, 10-shogaol, 6-paradol, 6-gingerdiol, metil-6-gingerol, metil-6-shogaol, diacetato de 6-gingerdioila, diacetato de metil-6-gingerdioila, zingerona, gingerenona A, galanolactona, 3-acetato de 5-hidroxi-1,7-bis(4 -hidroxi-3 -metoxifenil)-heptila e hexaidrocurcumina). Da fração de n-hexano e do óleo essencial, foram identificados 2 monoterpenos e 4 sesquiterpenos. As substâncias mais ativas frente à catepsina K foram os gingerois e shogaois de maior cadeia alquílica. Otimização da separação das substâncias majoritárias (6, 8 e 10-gingerol) e um estudo de sobrecarga de uma coluna C18 por CLAE, foram realizados, obtendo-se como resultado o isolamento de dezenas a centenas de miligramas de cada gingerol com considerável grau de pureza. Modificações estruturais do 6-gingerol foram realizadas e, das sete substâncias obtidas, 4 tiveram um aumento considerável do poder inibitório. Das substâncias obtidas, três, SSi6, 10-gingerol, 6-shogaol, foram selecionadas para ensaios posteriores: determinação do tipo de inibição frente à catepsina K, inibição da catepsina K e inibição da produção de óxido nítrico (NO), em meio celular. As inibições determinadas foram não-competitiva parcial, acompetitiva parcial e acompetitiva completa, para o SSi6, 10-gingerol e 6-shogaol, respectivamente. Excelentes atividades de inibição frente à catepsina K, em meio celular, puderam ser observadas para o SSi6 e 6-shogaol. No ensaio de inibição da produção de NO, o 6- shogaol foi a única substância que se apresentou como efetivo.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TeseLV.pdf: 6603184 bytes, checksum: 01e1859f6dba5e37f943c2c05f4651b9 (MD5) Previous issue date: 2004-06-23 / Universidade Federal de Minas Gerais / This work describes the implementation of two recent techniques in NMR - DOSY e HR-MAS as a tool for the analysis of natural products mixture and in leaves of Citrus, respectively. The work begun with the technique DOSY, in which a known mixture of two natural products was employed to implement the technique and optimise the experiments of DOSY, DOSY-COSY and DOSY-HSQC. After that, the DOSY experiments was employed in a group of natural products mixtures, in which the technique applicability was assessed. The second part of the work was carried out by the implementation of HR-MAS technique with the experimental conditions optimisation and the technique evaluation in the study of Citrus leaves. The evaluation of the technique was carried out by the distinction among six Citrus sinensis varieties, as the indicator for the defence substances present in leaves of Citrus sinensis grafted in Citrus limonea and the detection and identification of the defence substances in leaves of Citrus spp under the plague attack. / O presente trabalho relata a implementação e a aplicação de duas técnicas relativamente recentes em RMN - DOSY e HR-MAS como ferramentas na análise de produtos naturais em mistura e em folhas de Citrus, respectivamente. O trabalho iniciou-se com a técnica DOSY, em que uma mistura conhecida de dois produtos naturais foi empregada para implementar a técnica e otimizar os experimentos de DOSY, DOSY-COSY e DOSY-HSQC. Posteriormente, foram realizados experimentos de DOSY em um conjunto de misturas de produtos naturais, no qual a aplicabilidade da técnica foi avaliada. A segunda parte do trabalho foi realizada com a técnica HR-MAS, que se iniciou com sua implementação, teve continuidade com a otimização das condições experimentais e foi finalizada com a avaliação de sua potencialidade como uma ferramenta na análise de folhas intactas de Citrus. Para isto a técnica foi avaliada quanto à distinção entre seis variedades de Citrus sinensis, à indicação de substâncias de defesa presentes em Citrus sinensis enxertado em Citrus limonea e à detecção e identificação de substâncias de defesa presentes em folhas de Citrus spp sob o ataque de pragas.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissLHR.pdf: 830179 bytes, checksum: 97f70fcd0bdc01f0fae0981e6e232468 (MD5) Previous issue date: 2006-03-30 / Cariophylene sesquiterpenes are chemical compounds isolated from fungi of the Pestalotiopis genus in early studies developed in our research group. In the present work, a cultivation and analysis methodology were developed for these compounds in Pestalotiopsis, isolated from plants Pinus taeda, Swietenia macrophyla and Khaya invorenses. Different procedures were optimized for the extraction and analysis of the extracts employing liquid and gas chromatography coupled with mass spectrometry techniques (LC/MS and GC/MS). These studies had the intention of to detect the sesquiterpenes in fungal extracts without theys of isolation, and to check their production profile during a fixed cultivation period. The production of volatile organic compounds by the different species of Pestalotiospsis was also evaluated using hydrodestillation in Clevenger apparatus. The sesquiterpene cariophyllene was the main compound identified. Another study involving the secondary metabolites produced by Aspergillus aculeatus, a fungus isolated from the host plant Melia azedarach, was carried out. The target compounds in these studies were the dimeric aromatic poliketides Aurasperones A and B, Fonsesinones A and B, Orlandine and Kotanin. A poliketide production curve, obtained using HPLC, showed that the monomers are not detected during the early stage of development, indicating that probably the dimers are rapidly formed by the fungus or they are biosynthesized in the form already dimeric. Experiments of biotransformation showed that fungi possesss capacity to modify certain substracts, when cultivated in artificial ways. / Sesquiterpenos da classe dos cariofilenos são compostos químicos já isolados de fungos do gênero Pestalotiopsis no nosso grupo de estudos. No presente trabalho foram desenvolvidas metodologias de cultivo e análise de espécies de Pestalotiopsis, isoladas das plantas Pinus taeda, Swietenia macrophyla, e Khaya invorenses. Diferentes procedimentos de extração e análise desses extratos, empregando LC/MS e GC/MS, foram otimizados. Esses procedimentos visaram a detecção desses sesquiterpenos sem a necessidade de isolamento. Posteriormente foi delineada uma curva de produção desses compostos variando-se o tempo de cultivo, para posterior quantificação. A produção de compostos voláteis produzidos pelas diferentes espécies de Pestalotiopsis, foi avaliada usando a técnica de extração por hidrodestilação (através do extrator de Clevenger). Um sesquiterpeno cariofileno foi o principal composto identificado. Um outro estudo dos metabólitos secundários produzidos pelo fungo Aspergillus aculeatus, isolado da planta hospedeira Melia azedarach, foi feito tendo como alvo pré-determinado os policetídeos aromáticos diméricos como as Aurasperonas A e B, Fonsesinona A e B, Orlandina e Kotanina. Uma curva de produção desses policetídeos mostrou que os monômeros não são detectados nos tempos iniciais de cultivo, indicando uma rápida dimerização no meio ou a sua biossíntese já na forma dimerizada. Experimentos de biotransformação mostrou que o fungo possui capacidade de modificar certos substratos, quando cultivado em meios artificiais.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1925.pdf: 5727198 bytes, checksum: 46e27e09d790ee7c1350bedf5b1e7a8f (MD5) Previous issue date: 2007-05-18 / Universidade Federal de Sao Carlos / Chagas disease, caused by Trypanosoma cruzi, is endemic in 15 countries in Latin America, including Brazil, and it is estimated that about 16 million people are infected by this protozoan. The enzyme glyceraldehyde-3- phosphato-dehydrogenase (gGAPDH) is one of the nine enzymes involved in the T. cruzi glycolysis and experimentally it was proved that inhibition of this metabolic pathway causes the elimination of trypanosomes in the bloodstream. Among several natural products that have presented interesting inhibitory activity against this enzyme are the anacardic acids, isolated from cashew-nut shells. Many biologic and/or pharmacologic properties have been described for this class of compounds. In this work a serie of anacardic acids and analogues were synthetized and their biological activity evaluated . In total, 23 compounds were prepared and evaluated against T. cruzi gGAPDH and Schistossoma mansoni purine nucleoside phosphorylase (PNP) enzymes. In both cases the most active compound was 6-n-decylsalicylic acid with IC50 of 55 and 30 M respectively. Through the analysis of the experimental results together with the molecular dock studies, it was possible to observe that the size and substituents of alkyl side chain in these compounds can influence the inhibitory activity and the free hydroxyl groups in the ring are essential for the activity. / A doença de Chagas, causada pelo Trypanosoma cruzi, é endêmica em 15 países da América Latina, incluindo o Brasil, e estima-se que cerca de 16 milhões de pessoas estão infectadas por este protozoário. A enzima gliceraldeído-3-fosfato-desidrogenase glicossomal (gGAPDH) é uma das nove enzimas presentes na via glicolítica desse protozoário, e experimentalmente foi comprovado que a inibição dessa via leva à eliminação dos tripanosomas da corrente sanguínea. Dentre diversos produtos naturais que apresentaram atividade inibitória contra esta enzima estão os ácidos anacárdicos, isolados do óleo da castanha de caju. Várias propriedades biológicas e/ou farmacológicas têm sido descritas para esta classe de compostos. O presente trabalho teve como objetivo sintetizar e avaliar a atividade biológica de uma coleção de ácidos anacárdicos e análogos. No total, 23 compostos foram preparados e avaliados com as enzimas gGAPDH de T. cruzi e Purina Nucleosídeo Fosforilase (PNP) de Schistossoma mansoni. Em ambos os casos, o composto mais ativo foi o ácido 6-n-decilsalicílico que apresentou um IC50 de 55 e 30 M, respectivamente. Analisando-se os resultados obtidos, juntamente com estudos de modelagem molecular, observouse que o tamanho e subtituintes na cadeia lateral alquílica podem influenciar na atividade inibitória e que as hidroxilas livres das funções presentes no anel são essenciais para a atividade.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-06-18Bitstream added on 2014-06-13T21:07:21Z : No. of bitstreams: 1 amaral_fp_dr_araiq.pdf: 4513783 bytes, checksum: e99f12bcbcd5a5642dd150965f5e0fd8 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / No Brasil, 31 espécies vegetais de Paepalanthus foram registradas no Estado de Minas Gerais, no topo da Serra do Espinhaço, o principal centro de diversidade de Eriocaulaceae do Brasil e mais de 400 espécies de Paepalanthus e estão distribuídas geograficamente do estado do Amazonas a São Paulo. Apesar do grande número de espécies existentes em Eriocaulaceae, a sua peculiar composição química, aliadas às importantes atividades biológicas das substâncias isoladas, existem ainda muitas espécies que não possuem estudos, como no caso de Paepalanthus geniculatus. Portanto, neste trabalho, o extrato metanólico dos capítulos de Paepalanthus geniculatus (Bong.) Kunth foi estudado, utilizando HPLC-ESIMSn. As substâncias foram posteriormente isoladas do extrato metanólico e identificadas por RMN mono e bi-dimensionais. Com estas técnicas analíticas, foi possível identificar a presença de dezenove substâncias fenólicas, destas onze inéditas, sendo quinze flavonóides e quatro naftopiranonas que auxiliará na taxonomia da família. Um flavonol glicosilado ciclodimérico ligado a uma unidade truxilato, também inédito foi isolado e identificado por métodos espectroscópicos e espectrométricos. Alguns flavonóides exibiram forte atividade antioxidante e nenhuma das substâncias apresentou efeito citotóxico significativo em células humanas cancerosas de próstata / In Brazil, 31 plant species of Paepalathus were registered in the State of Minas Gerais, at the top of the Espinhaço, the main center of diversity of Eriocaulaceae in Brazil and over 400 Paepalanthus are distributed geographically from the state of Amazonas to São Paulo. Despite the large number of species existing in Eriocaulaceae, its peculiar chemical composition, which has greatly aided in the taxonomy of the family, combined with the biological activities of isolated substances, there are still many species that have no studies, as in the case of Paepalanthus geniculatus. Therefore, in this work the methanol extract of the capitulae from Paepalanthus geniculatus (Bong.) Kunth were studied. An analytical approach based on HPLC-ESI-MSn was applied to obtain the metabolite profile of this extract and led to the rapid identification of nineteen polyphenolic compounds, eleven unpublished, comprising fifteen flavonoids and four naphthopyranones. The substances were then isolated and identified by NMR mono and bidimensional. A glycosylated cyclodimeric flavonol bonded to a truxilate unit, also unpublished, was isolated and identified by spectroscopic and spectrometric methods. Some flavonoids showed strong antioxidant activity and none of the substances showed significant citotoxic effect in human prostate cancer cells