Dissertação de Mestrado apresentada ao Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde da Universidade do Extremo Sul Catarinense para obtenção do título de Mestre em Ciências da Saúde. / Este trabalho consiste de uma revisão sistemática para mapear as evidências sobre o efeito da suplementação de proteína de soro de leite em idosos submetidos a treinamento resistido. Foi realizada uma busca exaustiva nas bases de dados Medline, Lilacs, Embase e Cochrane Library para publicações relevantes até agosto de 2015. Os bancos de dados foram pesquisados utilizando os seguintes termos: "Resistance Training" combinando com “Whey protein” e com “elderly”. A pesquisa foi limitada para humanos sem restrição de idioma. Dois pesquisadores analisaram de forma independente os títulos e os resumos. Foram encontrados 657 estudos. Cinco estudos foram incluídos compondo uma amostra de 391 pacientes. A suplementação de proteína de soro de leite foi associada a uma maior ingestão total de proteína, diferença de media padronizada 9,40 (95% IC 4,03 a 14.78), aumento da concentração plasmática de leucina diferença de media padronizada 7,80 (IC de 95% 3.05 a 12.54; P=0,001) e aumento da taxa de síntese de proteínas muscular diferença de media padronizada 1,26 (95% IC 0,46-2,07) em comparação ao grupo controle. Conclusão: Observou-se um aumento na ingestão de proteína total, resultando em aumento da concentração de leucina e taxa de síntese de proteína muscular, porém não foi observado aumento significativo relacionado à massa ou força muscular.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-11-08T18:19:36Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 493390 bytes, checksum: 5040656239f5ad4f22e5d51bfb060885 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-08T18:19:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 493390 bytes, checksum: 5040656239f5ad4f22e5d51bfb060885 (MD5) Previous issue date: 2005-10-31 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Neste trabalho foi estudada a partição das proteínas do soro de queijo α- lactoalbumina (α-la) e ß-lactoglobulina (ß-lg) usando sistemas aquosos bifásicos (SAB) pela técnica de extração no ponto de névoa. O ponto de névoa de uma solução copolimérica pode ser afetado por vários fatores, como, adição de sal, massa molar do copolímero, proporção entre óxido de etileno (EO) e óxido de propileno (PO) ou pela concentração de copolímero. Os sistemas foram compostos por copolímero tribloco EO-PO-EO L 31 (Aldrich, Alemanha) e sais de fosfato de potássio e por copolímero tribloco EO-PO-EO PE 61 (Oxiteno, Brasil) e sais de fosfato de potássio. As temperaturas do ponto de névoa foram determinadas para os sistemas em diferentes condições de concentrações de copolímero e de sal. A seleção do SAB que proporcionou a melhor separação entre as proteínas estudadas foi determinada avaliando-se o coeficiente de partição das proteínas (k), partindo dos dados de concentração protéica nas fases pela técnica de cromatografia líquida de alto desempenho. Os sistemas com melhor índice de separação de proteínas foram compostos por: i) 30% (p/p) de copolímero L 31, solução de sais de fosfato de potássio 45 mM em pH 7 e 1 g de solução de isolado protéico de soro (WPI) na concentração de 20 mg de WPI/mL de solução, e ii) 20% (p/p) de copolímero PE 61, solução de sais de fosfato de potássio 100 mM em pH 7 e 1 g de solução de WPI na concentração de 20 mg de WPI/mL de solução. Os dados de partição revelaram para os sistemas avaliados, que a α-la permaneceu preferencialmente na fase aquosa, e que a ß-lg transferiu-se parcialmente para a fase copolimérica, proporcionando a separação entre as duas proteínas. / This work focuses on the partitioning study of cheese whey proteins α- lactoalbumin (α-la) and ß-lactoglobulin (ß-lg) using aqueous two phase systems (ATPS) by the cloud point extraction technique. The cloud point of a copolymeric solution can be affected by several factors, such as salt addition, copolymer molar mass, ratio of ethylene oxide (EO) and propylene oxide (PO) or copolymer concentration. The systems used were formed by EO-PO-EO L 31 triblock copolymer (Aldrich, Germany) and potassium phosphate salts, and EO-PO-EO PE 61 triblock copolymer (Oxiteno, Brazil) and potassium phosphate salts. The cloud point temperatures were determined for the systems at different conditions of copolymer and salt concentrations. The ATPS selection for the best separation between the studied proteins was determined evaluating the proteins partition coefficient (k), from data of proteins concentration in both phases using high performance liquid chromatography. The systems with better index of protein separation were composed by: i) 30% (mass) L 31 copolymer, 45 mM potassium phosphate salts solution at pH 7, and 1 g of whey protein isolate (WPI) solution at the concentration of 20 mg WPI/mL solution, and ii) 20% (mass) PE 61 copolymer, 100 mM potassium phosphate salts solution at pH 7, and 1 g of WPI solution at the concentration of 20 mg WPI/mL solution. The partition data revealed for the evaluated systems, that the α-la remained preferably in the aqueous phase, and ß-lg was partially transferred to the copolymeric phase, providing the separation between the two proteins.

Submitted by Automação e Estatística (sst@bczm.ufrn.br) on 2018-07-03T13:09:50Z No. of bitstreams: 1 AnnyKarolinyDeOliveiraCavalcanti_DISSERT.pdf: 1644681 bytes, checksum: 30eb323487d0a8f24078ae24a790b8b2 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2018-07-10T13:46:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 AnnyKarolinyDeOliveiraCavalcanti_DISSERT.pdf: 1644681 bytes, checksum: 30eb323487d0a8f24078ae24a790b8b2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-10T13:46:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AnnyKarolinyDeOliveiraCavalcanti_DISSERT.pdf: 1644681 bytes, checksum: 30eb323487d0a8f24078ae24a790b8b2 (MD5) Previous issue date: 2018-05-04 / Objetivou-se produzir e caracterizar o extrato rico em carotenoides da polpa de melão Cantaloupe encapsulado em gelatina suína (EGS) e proteínas concentrada (EPC) e isolada (EPI) do soro do leite e, avaliar a solubilidade em água e a estabilidade de cor em iogurte. Foi realizada a determinação de carotenoides totais por espectrofotometria UV-visível e β-caroteno por Cromatografia Líquida de Ultra Eficiência. A encapsulação ocorreu por dupla emulsão A/O/A. As partículas foram caracterizadas por Difração a laser, Potencial Zeta (PZ), Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), Difração de raio X (DRX), Espectrofotometria no Infravermelho por Transformada de Fourier (FTIR), e avaliadas quanto à eficiência de incorporação (EI), solubilidade em água e estabilidade de cor em iogurte (CIElab). A cromatografia indicou 40 μg (0,02) de β-caroteno/g de polpa de melão. O tamanho médio de partícula e o índice de polidispersão obtidos para EGS indicaram presença de material homogêneo em escala nanométrica [59,3 (2.60) nm e 0,3 (0,04)]. Os resultados obtidos para PZ foram 21.2 (0.10) mV, - 10.8 (0.55) mV e -14.2 (0.25) mV, respectivamente, para o EGS, EPI e EPC. O MEV mostrou partículas com superfície lisa para todos os grupos avaliados, porém somente EGS apresentou tamanhos homogêneos. Todos os difratogramas obtidos revelaram estruturas amorfas. O FTIR mostrou principalmente para EGS e EPC novas bandas não observadas nos materiais isolados, indicando novas interações químicas. As eficiências de incorporação obtidas para EGS, EPC e EPI foram, respectivamente, de 90% (7,39), 77% (8,65) e, 58,5% (0,71). EGS apresentou solubilidade três vezes maior [0,073mg/ml (0,007)] comparada ao extrato bruto [0,0263mg/ml (0,003)], sendo portanto, utilizado no estudo de estabilidade. O iogurte, adicionado de EGS, não apresentou diferença significativa (p>0,05) para nenhum dos índices de cor avaliados ao longo de 60 dias de armazenamento, ao contrário do adicionado de extrato bruto (p<0,05). A encapsulação com gelatina suína é uma estratégia promissora para o encapsulamento de carotenoides, visando ampliar o potencial de aplicação em alimentos. / The objective of this study was to produce and characterize the carotenoid-rich extract of the Cantaloupe melon (Cucumis melo L. reticulatus Naud.) Encapsulated in porcine gelatin (EPG) and whey protein concentrated (EWPC) and isolated (EWPI), to evaluate the solubility in water, and the color stability in yogurt. The total of carotenoids was determined by UV-visible spectrophotometry, and the β-carotene by Ultra High-Performance Liquid Chromatography (UHPLC). The encapsulation was performed by double emulsion W/O/W. The particles were characterized by Laser Diffraction, Zeta Potential (PZ), Scanning Electron Microscopy (SEM), X-ray Diffraction (XRD), Fourier Transform Infrared Spectrophotometry (FTIR), and evaluated for the efficiency of incorporation (EI), water solubility, and color stability in yogurt (CIElab). The UHPLC indicated 40 μg (0.02) of β-carotene/g of Cantaloupe melon pulp. The mean particle size and polydispersity index obtained for EPG indicated the presence of homogeneous material at the nanometer scale [59.3 (2.60) nm and 0.3 (0.04)]. The results obtained for PZ were 21.2 (0.10) mV, - 10.8 (0.55) mV and -14.2 (0.25) mV, respectively, for EPG, EWPI and EWPC. SEM showed particles with a smooth surface for all groups evaluated, but only EPG presented homogeneous sizes. All the obtained diffractograms revealed amorphous structures. The FTIR showed, mainly, for EPG and EWPC new bands not observed in the isolated materials, indicating new chemical interactions. The incorporation efficiencies obtained for EPG, EWPC, and EWPI were, respectively, 90% (7.39), 77% (8.65) and, 58.5% (0.71). In the solubility test, EPG showed three times greater solubility [0.073mg / ml (0.007)] compared to the crude extract [0.0263mg / ml (0.003)], and was therefore used in the stability study. EPG added in yogurt show no significant difference (p> 0.05) for any of the evaluated color indexes during 60 days of storage, as opposed to crude extract (p <0.05). The encapsulation with porcine gelatine is a promising strategy for the encapsulation of carotenoids, increasing the potential of application in food.

Orientador: Flavia Maria Netto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-16T11:33:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sabadin_IsabeleSerimarco_M.pdf: 18689391 bytes, checksum: fc0347d65995a6512c7579ac02277fea (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The abstract is available with the full electronic document / Mestrado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Mestre em Alimentos e Nutrição

Orientador: Jaime Amaya-Farfan / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-15T06:19:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_GiovanaErmeticedeAlmeida_D.pdf: 896103 bytes, checksum: 9bd11829f054f3e4de67f748821a4ab4 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A atividade física (AF) de resistência provoca diversas respostas fisiológicas, dentre elas a alteração dos padrões de células sangüíneas e atividade enzimática. Recursos alimentares são freqüentemente utilizados para aumentar o rendimento esportivo e minimizar os danos causados pelo exercício. O tipo de proteína e sua forma são determinantes dos efeitos que estas podem proporcionar. As proteínas do soro do leite (PSL) são fontes de aminoácidos indispensáveis, dentre eles, os de cadeia ramificada que estão envolvidos na sinalização da síntese protéica e no metabolismo energético, e os sulfurados que se destacam por serem precursores para a formação de glutationa. Este trabalho foi realizado com o objetivo de verificar os efeitos do consumo de dietas contendo proteínas do soro do leite, nas formas intacta e pré-hidrolisada, no desempenho, composição corporal e parâmetros bioquímicos e hematológicos de ratos submetidos à atividade física em esteira. Foram utilizados animais machos divididos em dois grupos de acordo com a prática (treinados) ou não (sedentários) de AF, sendo estes subdivididos em três grupos conforme o tipo de proteína (AIN-93M): caseína (controle), e PSL nas formas intactas ou pré-hidrolisadas como única fonte de proteínas, totalizando 6 grupos experimentais. Os ratos ativos correram cinco dias por semana, durante nove semanas consecutivas seguindo protocolo de treinamento com velocidade e tempo progressivos. O desempenho dos animais foi crescente ao longo do experimento em todos os grupos e a evolução de peso foi similar independentemente da dieta ou da prática de AF. Os resultados hematológicos e bioquímicos mostraram efeito redutor do treinamento sobre os parâmetros analisados sem interferência especifica da dieta, à exceção da concentração de glutationa total em eritrócitos que foi significativamente superior em animais sedentários que consumiram PSL intactas. A composição química da carcaça revelou um perfil lipídico reduzido em animais treinados em comparação aos sedentários, com significância estatística somente em relação aos grupos que receberam PSL, mostrando ser um efeito positivo e dependente da ação conjunta da dieta e da AF. Dados de peso dos órgãos apontam possível influência das PSL sobre o fígado e pâncreas, mas o peso e o comprimento dos fêmures não mostraram alteração nem pelo tipo de dieta nem pelo treinamento. Assim, concluiu-se que os resultados obtidos nesse estudo são, em sua maioria, decorrentes do efeito do treinamento, e que as PSL ao nível oferecido na dieta (12%), mesmo apresentando diferente forma físico-química, não causaram variações hematológicas e bioquímicas significativas quando avaliadas, respectivamente, após 24 horas da última sessão de treino e passadas 48 horas do teste de desempenho final. Ressalta-se, entretanto, o potencial antioxidante dessas proteínas pelo incremento da glutationa intracelular / Abstract: Endurance exercise leads to many physiological responses, as changes in the blood cells and enzymatic activity. Food resources are often used to improve the sport performance and diminish injuries caused by exercise. The type and form of protein are determinant of the effects that they can provide. Milk whey proteins (MWP) are sources of indispensable amino acids, among them the branched-chain amino acids are involved in protein synthesis signaling and energetic metabolism, and sulfur ones point out in order to be precursors for glutathione formation. This work was conducted with the objective of verifying the effects of consuming diets containing MWP, in intact or pre-hydrolyzed forms over performance, body composition, biochemical and hematological parameters in rats undergoing a treadmill exercise. Male animals, segregated into two groups according to the practice (trained) or not (sedentary) of exercise, were used. They were subsegregated into three groups regarding the type of protein in the diet (AIN-93M): casein (control), and intact or pre-hydrolyzed MWP as the only source of protein, for a total of 6 groups. Active rats run 5 d/wk, during nine consecutive weeks, following a progressive time and speed protocol. The performance of the animals increased for all groups along the experiment and weight evolution remained similar independent of the diet and exercise. Hematological and biochemical results showed that training had a diminishing effect over the analyzed parameters without specific interference of the diet, except for total glutathione concentration in erythrocytes that was significantly higher in the sedentary animals that consumed intact MWP. Carcass chemical composition revealed a decreased lipid profile in trained animals compared to sedentary, with statistical significance only related to the groups that received MWP showing a positive dependence from the combined action of diet and exercise. Analyses of organ weight data suggest a possible influence of MWP upon liver and pancreas, but weight and length of femurs did not show to be changed either by diet or exercise. Thus, it was concluded that outcomes obtained in this study are mostly due to training, and that MWP at the level offered in the diet (12%), even in different physical-chemical forms, did not cause significant hematological and biochemical variation when analyzed, respectively, 24 hours after the last training session and 48 hours from the final performance test. It should be noted, however, the antioxidant potential of these proteins by increased intracellular glutathione / Doutorado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Doutor em Alimentos e Nutrição

Orientador: Jaime Amaya Farfan / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-19T23:55:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lollo_PabloChristianoBarboza_D.pdf: 1703113 bytes, checksum: 420e19e11b5feb4766bf0be0c9076acc (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Em situacoes especiais e desejavel estimular o anabolismo e reduzir o catabolismo. As proteinas do soro de leite apresentam excelente balanco de aminoacidos para o anabolismo. A suplementacao com L-leucina vem sendo relacionada a inibicao do catabolismo e ao estimulo do anabolismo, assim como o exercicio fisico. Na busca de estrategias para estimular o anabolismo e reduzir o catabolismo, optou-se por estudar o efeito combinado do consumo de proteinas do soro lacteo e a suplementacao com L-leucina, aliados ao exercicio fisico. Objetivo: verificar o efeito dose-resposta da suplementacao com L-leucina na composicao corporal, ganho de massa corporal, parametros bioquimicos e ativacao da proteina mTOR de ratos Wistar, consumindo proteinas do soro de leite (PSL), quando submetidos ao exercicio. Metodologia: 96 ratos machos Wistar foram divididos em 16 grupos recebendo dieta AIN93 com PSL ou caseina (C) como fonte proteica, com 3, 4.5, ou 6% de suplementacao de L-leucina, exercitados e sedentarios, a saber: a) n=6, exercitados, dieta AIN93 com PSL (PSL E); b) n=6, exercitados dieta AIN93 com PSL + 3% de L-leucina; (PSL L3 E); c) n=6, exercitados, dieta AIN93 com PSL + 4,5% de L-leucina (PSL L4.5 E) e d) n=6, exercitados, dieta AIN93 com PSL + 6% de L-leucina (PSL L6 E). Para cada grupo exercitado houve um grupo controle sedentario e o mesmo desenho experimental foi repetido, com grupos sedentarios e exercitados, alterando somente a fonte proteica da dieta para caseina que foi a proteina controle. Foram analisados: ingestao alimentar; evolucao ponderal; perfil de aminoacidos plasmaticos; composicao corporal dos animais; atividades de CK, LDH, AST ALT e mTOR (muscular, cardiaca e diafragmatica), acido urico, creatinina e massa relativizada do gastrocnemio, coracao e diafragma, tudo em funcao da dieta e da atividade fisica. Para analise estatistica foi utilizado o software SPSS, versao 11.0 for Windows para analise de variancia ¿ ANOVA ¿ utilizando o criterio de significancia de p = 0,05, com teste post-hoc de Tukey. Resultados: A ativacao da via mTOR ocorreu com suplementacao de L-L-leucina em ambas dietas por 30 dias no coracao, diafragma e grastrocnemio dos ratos sedentarios e exercitados. Indicadores gerais de saude, nao pareceram alterados, exceto insulina e glicose, que demosntraram anormalidades nos animais sedentarios com altas doses de Lleucina. O ganho de massa corporal foi significativamente menor nos animais submetidos a suplementacao com 6% de L-L-leucina. As enzimas de prova hepatica (TGO e TGP) mantiveram-se em niveis plasmaticos normais, assim como os indicadores de prova renal (acido urico e creatinina) nao indicando dano renal com a suplementacao descrita. Conclusão: A via mTOR foi ativada no coracao, diafragma e musculo dos animais suplementados com L-L-leucina. A maior dose utilizada (6%) prejudicou o crescimento, niveis de glicose e insulina dos animais / Abstract: In both animals and humans L-L-leucine can activate protein synthesis in skeletal muscle by mTOR thus stimulating body growth. Currently, however, it is not clear if heart tissue is also subject to the same regulatory mechanism of protein synthesis. Objective: The purpose of this study was to assess heart mTOR activation, heart mass, growth and liver function in young Wistar rats fed standard AIN93-G diet supplemented with L-L-leucine at three levels. Methods: Ninety-six weanling male Wistar rats were divided into sixteen groups and fed one of the following diets for 30 days: a) Control (AIN 93-G); b) 3% (AIN93-G +3% L-L-leucine); c) 4,5% (AIN93-G +4,5% L-L-leucine); d) 6% (AIN93- G +6% L-L-leucine). Modified AIN 93-G diets containing whey protein instead of casein performed another 4 groups completing 8 sedentary groups, another set of 8 groups was trained, with the total of 16 groups. The supplemented diets, energy was adjusted at the expense of carbohydrate. mTOR pathway was quantified by Westernblot analysis. Serum insulin, uric acid, glucose, AST, ALT, and cardiac mass, total and body mass-adjusted protein were determined by standard methods. ANOVA and pos-hoc Duncan were applied to compare the means (significance p<0.05). Results: mTOR activation (phosphorylated mTOR/ total mTOR) was reached with L-L-leucine supplementation in heart, diaphragm and gastrocnemius. General health indicators did not show significant modifications except for glucose and insulin levels, which increased compared to control group. Supplementation did not adversely affect liver function as determined by AST, ALT, but body mass in the 6% group was significantly lower than that of the 4.5% group, showing a negative effect of the highest dose on body mass accretion. Either absolute heart mass or adjusted heart mass showed no difference between any two groups. Conclusion: mTOR activities of heart, diaphragm and gastrocnemius of Wistar rats were increased by supplementing the AIN 93-G diet with L-L-leucine, loss of the body mass and abnormalities in insulin and glucose levels were shown in 6% of L-L-leucine supplementation. Even the 6% supplementation did not alter liver function, but this concentration adversely affected normal growth / Doutorado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Doutor em Alimentos e Nutrição

Orientadores: Rosiane Lopes da Cunha, Ângelo Luiz Fazani Cavallieri / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-20T01:10:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mantovani_RaphaeladeAraujo_M.pdf: 4371985 bytes, checksum: 490b60583a49fed7d2421e32dcf9160e (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: As proteínas do soro do leite (WPI) e lecitina de soja são amplamente utilizadas em alimentos devido às suas excelentes propriedades emulsificantes. Este trabalho visou avaliar as propriedades emulsificantes da mistura de WPI e lecitina em diferentes condições de pH e concentração dos ingredientes. A primeira etapa consistiu no estudo das interações entre os emulsificantes em meio aquoso em diferentes razões WPI:lecitina e condições de pH. Os resultados mostraram que na razão 1:1 e em pH abaixo do pI da proteína, no qual os emulsificantes encontravam-se opostamente carregados, foi favorecida a formação de complexos eletrostáticos. Na segunda etapa, emulsões O/A contendo proteínas do soro e/ou lecitina foram avaliadas através da estabilidade à cremeação, microestrutura, distribuição do tamanho de gota, densidade de carga superficial, reologia, eletroforese em gel de poliacrilamida e digestão in vitro, verificando-se a influência do pH e da pressão de homogeneização. As emulsões estabilizadas somente por proteínas apresentaram separação de fases e comportamento não-Newtoniano somente em pH próximo ao pI. As emulsões contendo somente lecitina não separaram de fases e apresentaram comportamento Newtoniano. Os sistemas em pH abaixo do pI, contendo a mistura de emulsificantes apresentaram elevada instabilidade cinética devido à forte interação eletrostática entre os componentes. No entanto, em pH próximo ao pI da prote, a interação foi favorável e levou ao aumento da estabilidade das emulsões e a menores tamanhos de gota, resultando em fluidos pouco viscosos. O aumento da pressão de homogeneização, em emulsões com pH próximo e acima do pI favoreceu a formação de agregados de alta massa molecular, o que não foi observado em pH mais ácido. Também não foi notada a formação de agregados na presença de lecitina em nenhuma das condições de pH. Os ensaios de eletroforese deram indícios de que a interação entre os emulsificantes levou a modificações na estrutura das proteínas e revelaram maior afinidade da lecitina com a ?-lactoalbumina (?-la). Finalmente, na etapa de simulação do processo de digestão as proteínas mostraram-se mais resistentes, uma vez que a presença de lecitina promoveu a liberação do óleo da emulsão logo no início da etapa gástrica. De maneira geral, a utilização das proteínas do soro juntamente com a lecitina como emulsificante levou a resultados satisfatórios pois permitiu o desenvolvimento de sistemas estáveis à cremeação em diferentes valores de pH, inclusive em pH próximo ao pI, e consideravelmente resistentes às condições adversas do trato gastrointestinal / Abstract: Whey proteins (WPI) and soybean lecithin are widely used in food due to its excellent emulsifying properties. This study aimed to evaluate the emulsifying properties of the mixture of whey protein and lecithin at different conditions of pH and concentration of ingredients. Firstly, the interactions between emulsifiers in an aqueous medium at different ratios (WPI:lecithin) and pH conditions were studied. The results showed that at mixing ratio of 1:1 and at pH below the isoelectric point of the protein (pI) in which the emulsifiers were oppositely charged, was favored the formation of electrostatic complexes. Afterwards, O/W emulsions containing WPI and/or lecithin were prepared and the influence of pH and pressure homogenization were studied. Stability, microstructure, droplet size distribution, surface charge density, rheology, electrophoresis in polyacrylamide gel (SDS-PAGE) and digestion in vitro were evaluated. The emulsions stabilized by proteins showed phase separation and non-Newtonian behavior only in pH close to the pI. The emulsions containing only lecithin were stable and showed Newtonian behavior. Systems containing the mixture of emulsifiers at pH below the pI showed high kinetic instability due to the strong electrostatic interactions between the components. However, at pH close to the pI the interaction was favorable and led to an increase of the emulsion stability and to smaller droplet sizes, resulting in lower viscosities. When the pressure homogenization was increased, emulsions at a pH close to and above the pI favored the formation of high molecular weight protein aggregates which was not observed in emulsions at lower pH. In the presence of lecithin, protein aggregates were not formed in any of the pH conditions. The SDS-PAGE analysis showed that the interaction between emulsifiers led to modifications in the structure of proteins and indicated a higher affinity of lecithin to ?-lactalbumin (?-la). Finally, proteins were more resistant to digestion, since the presence of lecithin promoted release of oil emulsion at the beginning of gastric step. In general, the use of whey protein with lecithin as emulsifier led to satisfactory results because it allowed the development of stable emulsions to creaming at different pH values, even at pH close to the pI, and substantially resistant to the adverse conditions of the gastrointestinal tract / Mestrado / Engenharia de Alimentos / Mestre em Engenharia de Alimentos

Orientador: Flavia Maria Neto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-21T08:25:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Franca_CeliadeJesus_M.pdf: 1711635 bytes, checksum: 8b68d7bd0f495d93e2c2949a9229045c (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Estudos indicam que cerca de 2,5% dos recém-nascidos sofrem reações de hipersensibilidade ao leite bovino. Os principais componentes alergênicos do soro do leite bovino são as proteínas ß-Lactoglobulina (ß-Lg) e a-Lactoalbumina (a-La). A enzima transglutaminase (TG) tem sido utilizada para modificar as proteínas do soro do leite, podendo reduzir o seu potencial antigênico. O objetivo desse trabalho foi estudar o efeito do pH e relação enzima substrato (E:S) na polimerização do Isolado proteico do soro do leite (IPS) com a TG em diferentes condições utilizando a Metodologia de Superfície de Resposta, e avaliar a redução do potencial antigênico das proteínas pela suscetibilidade dos produtos obtidos à digestão com pepsina. O estudo da polimerização do IPS foi realizado por meio de experimentos fatoriais 22, nos quais as variáveis independentes foram a relação enzima:substrato (E:S) (15,7 ¿ 56,9 U TG /g de proteína) e pH (5,0 ¿ 8,4). A variável dependente foi a polimerização das amostras avaliada pela concentração relativa das proteínas ß-Lg ([ß-Lg]) e a-La ([a-La]) após a reação de polimerização, medida por densitometria do gel. Para o estudo da polimerização, foram realizados dois DCCR(Delineamento Composto Central Rotacional): DCCR 1 no qual foi utilizado o IPS sem qualquer tratamento e DCCR 2 no qual foi utilizado o IPS tratado termicamente. Para condição do DCCR 2, foi realizado um experimento preliminar afim de obter as melhores condições de tempo e temperatura de polimerização pela TG. A caracterização das amostras de IPS polimerizado foi realizada por eletroforese (SDS-PAGE). As amostras que apresentaram a menor [ß-Lg] foram empregadas para o estudo de resistência à pepsina, foram utilizados dois modelos de simulação da digestão gástrica: o adulto (182 U de pepsina/g de proteína, pH 2,0) e o infantil (23 U de pepsina/g de proteína, pH 4,0) seguida por caracterização por eletroforese (SDS-PAGE). A avaliação in vitro da antigenicidade dos digeridos gástricos foi realizada por ELISA, utilizando soro de camundongos BALB/c sensibilizados com ß-Lg na forma nativa. A polimerização do IPS pela TG foi mais eficiente quando a proteína foi previamente desnaturada por tratamento térmico. No DCCR 1 ocorreu maior polimerização da a-La do que da ß-Lg, indicando que esta proteína reage facilmente com a TG, mesmo sem tratamento térmico prévio. A digestão in vitro do IPS foi mais eficiente nas condições fisiológicas simulando o modelo adulto do que o infantil. Em ambos os modelos, a amostra tratada termicamente e polimerizada com TG (IPS/TT-TG) foi mais susceptível à pepsina e também foi a que apresentou a menor resposta frente IgE anti- ß-Lg. A diminuição moderada do potencial alergênico após os tratamentos realizados sugerem que houve modificação e ou ocultação de epítopos da estrutura da proteína / Abstract: Studies indicate that about 2.5% of newborns suffer from hypersensitivity reactions to cow¿s milk. The main allergenic components of bovine whey proteins are ß-lactoglobulin (ß-Lg) and a-lactalbumin (a-La). The enzyme transglutaminase (TG) has been used for modifying whey proteins, and may reduce their antigenic potential. The present work aimed at studying the effect of pH and enzyme substrate (E:S) on the polymerization of the IPS with TG under different conditions using Response Surface Methodology, and evaluate the reduction of potential of the antigenic proteins using the susceptibility of products to pepsin digestion. The study of the IPS polymerization was performed by factorial experiments 22, in which the independent variables were enzyme: substrate ratio (E: S) (15.7 to 56.9 U TG / g of protein (U g-1) ) and pH (5.0 - 8.4). The dependent variable was polymerization of the samples evaluated by the relative concentration of the ß-Lg ([ß-Lg]) and a-La ([La-a]) after the polymerization reaction, evaluated by densitometry of the gel. To study the polymerization, two CRCD (Central Rotatable Composite Design) were performed: CRCD 1 in which untreated WPI was used and CRCD 2 in which WPI denatured by heat treatment was used. The characterization of the samples was performed by SDS-PAGE. The evaluation of the polymerization was achieved by the relative concentration of the proteins ß-Lg ([ß-Lg]) and a-La (([a-La]) after polymerization, determined by densitometry. The samples with the lowest [ß-Lg] were chosen for the study of resistance to pepsin using two simulation models of gastric digestion, the adult (182 U pepsin / g of protein and pH 2.0) and infant (23 U pepsin / g of protein, pH 4.0). The resistance of the proteins to the action of pepsin was evaluated by SDS-PAGE. Evaluation of the antigenicity of the samples before and after gastric digestion was performed by ELISA using sera from BALB/c mice sensitized with ß-Lg in its native form. Between the two designs carried out for the polymerization of WPI by TG, the one in which the WPI has previously been denatured by heat treatment was more effective. The in vitro digestion of WPI was more efficient under conditions simulating the physiological adult model than the infant model. In both models the sample which was heat treated and subsequently polymerized by TG was more susceptible to pepsin, and showed the lowest anti-IgE response against ß-Lg, indicating that the allergenic potential was decreased after treatment. These results suggested that there was a modified and/or hidden of the epitopes / Mestrado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Mestra em Alimentos e Nutrição

Orientador: Flavia Maria Netto / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-14T13:49:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernandes_MicheleAugusto_M.pdf: 2050778 bytes, checksum: aedc46d9b78bf413f7e34cfbe46a36a6 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A ß-Lactoglubulina (ß-Lg) é uma das proteínas mais antigênicas presente no leite bovino. Tratamentos físicos, químicos ou enzimáticos podem alterar a antigenicidade desta proteína. Em trabalho anterior, verificou-se que o potencial antigênico da ß-Lg é reduzido quando polimerizada pela enzima transglutaminase (TG) na presença de cisteína (Cys). No entanto, o efeito da polimerização sobre o valor nutricional da ß-Lg ainda não é conhecido. O presente estudo teve como objetivo avaliar o efeito da reação de polimerização catalisada pela TG na digestibilidade in vitro e atividade antigênica da ß-Lg antes e após a ação das enzimas gastrintestinais. A ß-Lg polimerizada pela TG (0, 10 ou 25 U g-1), após tratamento térmico ou na presença de agentes redutores Cys (0, 0,1 e 0,25 mol L- 1) ou ditiotreitol (DTT 0,02 mol -1), foi avaliada quanto à digestibilidade in vitro, utilizando as enzimas pepsina e pancreatina. As amostras, antes e após a digestão in vitro, foram caracterizadas pelos métodos SDS-PAGE, SDSPAGE/ tricina e cromatografia líquida de alta eficiência de fase reversa (CLAE-FR). Posteriormente, as amostras foram avaliadas quanto à antigenicidade, exceto aquelas na presença de DTT, por meio do método de Imunoblote, utilizando soro de camundongos BALB/c sensibilizados com a ß-Lg na forma nativa (ß-Lg N) ou com ß-Lg polimerizada com 25 U de TG g-1, na presença de 0,25 mol L-1 de Cys (ß-Lg 0,25Cys 25TG). A adição de TG resultou na formação de polímeros com massa molar igual ou acima de 97,4 kDa, principalmente na presença de agentes redutores alcançando aproximadamente 96% de polimerização na presença de DTT e 91% na presença de Cys. A digestibilidade in vitro da ß-Lg N foi 53,6% e todos os tratamentos realizados aumentaram a digestibilidade da proteína em até 79%. Os maiores valores de digestibilidade foram obtidos quando a ß-Lg foi tratada com agentes redutores. O processo de polimerização também teve efeito positivo na digestibilidade, principalmente para as amostras polimerizadas na presença de Cys ou DTT, atingindo valores acima de 75%. A análise por Imunoblote mostrou que a polimerização da ß-Lg na presença de agente redutor Cys, na concentração de 0,25 mol L-1, reduziu o reconhecimento da ß-Lg pelas IgE específicas presente nos soros dos animais sensibilizados com ß-Lg N ou com ß- Lg 0,25Cys 25TG. Após a digestão com pepsina e pancreatina, as amostras polimerizadas pós-tratamento térmico ou na presença de Cys apresentaram redução da antigenicidade, como também os digeridos da ß-Lg tratada com Cys (não polimerizada com TG). A desnaturação pelo agente redutor Cys e a polimerização por TG em ambas as condições estudadas mostraram ser métodos efetivos no aumento da digestibilidade da ß-Lg. Por sua vez, a combinação destes métodos com a digestão por enzimas gastrintestinais levou à redução da antigenicidade da proteína, já que os peptídeos gerados apresentaram potencial antigênico baixo / Abstract: The ß-Lactoglubulin (ß-Lg) is one of the most antigenic proteins present in the bovine milk. Physical, chemical or enzymatic treatments can alter the antigenicity of this protein. In previous study, it was shown that the antigenic potential of ß-Lg is reduced when polymerized by transglutaminase (TG) in the presence of cysteine (Cys). However, the effect of polymerization on the nutritional properties of ß-Lg is still unknown. The present study aimed to evaluate the effect of the polymerization reaction catalyzed by TG on the in vitro digestibility and the antigenic activity of ß- Lg, before and after simulate digestion with gastrointestinal enzymes. The in vitro digestibility of the ß-Lg treated with TG (0, 10 or 25 U g-1), after heat treatment or in the presence of reducing agents Cys (0, 0.1 and 0.25 mol L-1) or dithiothreitol (DTT 0.02 mol L-1), was evaluated using the gastrointestinal enzymes, pepsin and pancreatin. The samples, before and after in vitro digestion, were characterized by SDS-PAGE, SDS-PAGE/tricine and reversed-phase high performance liquid chromatography (RP-HPLC). Subsequently, the samples were evaluated for antigenicity, except those prepared in the presence of DTT, by immunochemical methods (Immnoblotting), using sera from BALB/c mice sensitized with native ß-Lg (ß-Lg N) or ß-Lg polymerized with 25 U of TG g-1 in the presence of 0.25 mol L-1 of Cys (ß-Lg 0.25Cys 25TG). The formation of polymers with molar mass equal to or above 97.4 kDa was observed with the addition of TG, especially in the presence of reducing agents, reaching approximately 96% of polymerization in the presence of DTT and 91% in the presence of Cys. The in vitro digestibility of native ß-Lg was 53.6% and the all treatments performed increased the digestibility of protein up to 79%. The highest values of digestibility were obtained in the presence of reducing agents. The polymerization also had a positive effect on the digestibility, especially for those samples polymerized in the presence of Cys or DTT, with values above 75%. Analysis by immunoblotting showed that the polymerization of ß-Lg in the presence of 0.25 mol L-1 Cys, reduced the recognition of ß-Lg specific IgE present in the sera of animals sensitized with ß-Lg N or ß-Lg 0.25 Cys 25TG. After digestion with pepsin and pancreatin, the samples polymerized after heat treatment or in the presence of Cys showed reduced antigenicity. The digest of the samples treated with Cys (not treated with TG) was not recognized as antigens. The denaturation by Cys and polymerization by TG in both conditions were effective in increasing the digestibility of ß-Lg. In turn, the combination of these methods with digestion by gastrointestinal enzymes led to reduction of antigenicity of the protein and that peptides generated showed low antigenic potential / Mestrado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Mestre em Alimentos e Nutrição

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2014-09-01T20:13:51Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Mestrado - Ana Paula Stort Fernandes.pdf: 3677807 bytes, checksum: d2b738bcc2549e7d1ddb1528f875b444 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-01T20:13:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Mestrado - Ana Paula Stort Fernandes.pdf: 3677807 bytes, checksum: d2b738bcc2549e7d1ddb1528f875b444 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-02-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The packages comprise a large part of the daily disposal of household waste and these household waste are the most impactful to the environment. The development of biodegradable packaging material, seeking to replace synthetic polymers, is an approach used in an attempt to reduce the environmental impact caused by the very slow degradation of synthetic material packages. It is known that the development of biomaterials, applicable to various industries technology in the area of packaging, gaining particular attention on the issue of preserving the environment. The aim of this study was to develop a biodegradable films of whey protein irradiated subjected to pH modification, and evaluate their mechanical, optical, structural and barrier properties. The experiment was conducted in the Department of Food Engineering, College of Agronomy, Federal University of Goiás (UFG), located in Goiânia (GO). The protein concentrate, whey was supplied by the Argentine company Arla Foods. Statistical analysis was performed by analysis of variance (ANOVA) and Tukey test (p ≤ 0.05). The computer program Version 2.15.1 R (Vienna, Austria) was used for calculations. In the experiment, all analyzes were performed with three replicates read in triplicate except mechanical tests, in which three replicates were read nine times. It was found that the whey protein had an excellent alternative for the production of biodegradable films. The films were presented translucent, yellowish, with no tendency green and red colors. Movies pH 8.5 had opacity values increased with increasing doses of radiation. The films showed values of pH 5.5 solubility in water below the other, due to the proximity of the isoelectric point of proteins from whey. The pH modification and irradiation process can serve as an alternative to changing the mechanical properties of films based on whey protein concentrate milk and therefore represented an alternative raw material in the preparation of biodegradable films. / As embalagens compõem grande parte dos descartes diários dos resíduos domiciliares e estes resíduos domésticos são os mais impactantes ao meio ambiente. O desenvolvimento de material para embalagem biodegradável, visando substituir polímeros sintéticos, é uma abordagem utilizada na tentativa de reduzir o impacto ambiental provocado pela degradação muito lenta das embalagens de material sintético. Sabe-se que o desenvolvimento de tecnologia de biomateriais, aplicáveis aos vários setores industriais, na área de embalagens, vem ganhando atenção especial em relação à questão da preservação do ambiente. O objetivo desse estudo foi desenvolver filmes biodegradáveis a base de concentrado protéico de soro de leite irradiado submetido a modificações de pH, e avaliar suas propriedades mecânicas, ópticas, estruturais e de barreira. O experimento foi realizado nos laboratórios do Setor de Engenharia de Alimentos, da Escola de Agronomia, da Universidade Federal de Goiás (UFG), localizada em Goiânia (GO). O concentrado protéico de soro de leite foi fornecido pela empresa argentina Arla Foods. A análise estatística dos dados foi efetuada por meio de análises de variância (ANOVA) e do Teste de Tukey (p ≤ 0,05). O programa computacional R versão 2.15.1 (Vienna, Austria) foi utilizado para cálculos. No experimento, todas as análises foram feitas com três repetições lidas em triplicatas com exceção dos testes mecânicos, em que as três repetições foram lidas nove vezes. Concluiu-se que as proteínas de soro de leite apresentaram ser uma excelente alternativa para a produção de filmes biodegradáveis. Os filmes apresentaram-se translúcidos, de coloração amarelada, sem tendência a cores verde e vermelha. Os filmes de pH 8,5 tiveram valores de opacidade aumentados com o incremento das doses de radiação. Os filmes de pH 5,5 apresentaram valores de solubilidade em água inferiores aos demais, devido à proximidade do ponto isoelétrico das proteínas do soro de leite. A modificação de pH e o processo de irradiação podem servir como uma alternativa para alterar as propriedades de filmes a base de concentrado protéico de soro de leite e, conseqüentemente, representaram uma alternativa de matéria-prima na elaboração de filmes biodegradáveis.