Neste experimento foi avaliado a resposta de frangos machos da linhagem Cobb x Cobb 500 e Ross x Ross 308, alimentados com dois níveis de proteína bruta e relações graduais de metionina + cisteína, dos 14 aos 35 dias de idade. A dieta foi formulada a base de milho, farelo de soja e farinha de carne, com 3060 kcal/kg e 26 % de proteína bruta, contendo 1,46 % de lisina digestível verdadeira. A concentração de metionina + cisteína digestível (58:42%) foi 0,73 % (50 %em relação à lisina), os outros nutrientes seguiram as recomendações do NRC (1994). Nesta ração foi suplementado níveis graduais de metionina + cisteina (58:42%) para alcançar 62, 69 e 77% de metionina + cisteína em relação a lisina. A diluição desta dieta de 3060 kcal/kg constituiu principalmente na inclusão de amido de milho, produzindo uma dieta com 20,5% de proteína bruta, contendo todos os aminoácidos numa razão idêntica para com lisina (1 ,12% de lisina digestível verdadeira). Cada tratamento teve 5 repetições com 36 aves (9 aves por m2 ) . Aos 35 dias de idade, 6 aves de cada repetição foram selecionadas ao acaso para avaliação de carcaça. As indinações das curvas de regressão da linhagem Ross foram similares, enquanto que a linhagem Cobb não mostrou a mesma consistência. Na conversão alimentar as linhagens não foram diferentes, mas se observa uma inclinação para a dieta de 20,5% de proteína bruta mostrando uma tendência suave na curva quando comparada com a dieta de 26% de proteína bruta. Uma relação similar foi observada para rendimento de carne de peito. O resultado indica falha devido a deficiência de metionina + cisteína quando expressado em % para satisfazer o ideal, sendo mais pronunciado nas dietas com 20,5% de proteína bruta. / Dose-response relationships of graded methionine + cysteine (Met+Cys) at two ideal protein leveis (IP) were investigated with Cobb X Cobb 500 and Ross X Ross 308 male broilers from 14 to 35 days of age. A com-soybean meal-poultry by product diet was formulated to contain 3.060 kcal/kg and 26% ideally balanced protein (IP) with 1.46%true fecal digestible lysine. The concentration of digestible Met+Cys (58:42%) was 0.73% (65% of the ideal levei). but ali other nutrients met NRC (1994) recommendations. Met+Cys in the ratio of 58:52% were supplemented in graded leveis to achieve 80. 90 and 100% of the ideal Met+Cys content. A dilution diet with 3.060 kcal/kg consisting mainly of comstarch was used to derive diets at 20.5% IP containing ali amino acids in the same ratio to lysine (true fecal digestible lysine of 1.15%). Each treatment had 5 replications of 36 birds (9 birds per m\ At 35 days of age. 6 birds from each replication were randomly selected for carcass evaluation. The data were compared on relative scales (asymptote = 1 00% dig, Met+Cys content in % of ideal concentration). The magnitude of the slope of Ross bird's regression curves was similar, whereas those of Cobb birds did not show the same consistency. There was no difference between strains for feed conversion. but the slope observed for the high IP curves tended to be smaller when compared to the low IP. A similar relationship was observed for breast meat yield. The results indicate that impairments due to Met+Cys deficiency when expressed, as a % of the ideal content is more pronounced in low IP diets.

Introdução: A esquizofrenia é um transtorno mental grave, que com frequência leva a uma deterioração progressiva, que mais recentemente tem sido descrita como uma doença sistêmica, com alterações progressivas cerebrais e corporais, e em parte por causa disto, associada a menor expectativa de vida, em média 20 anos menos que a população geral não afetada. Apesar de não terem especificidade, já foram determinados diferentes marcadores inflamatórios e oxidativos envolvidos; em contrapartida, pouco tem sido descrito sobre marcadores sistêmicos da esquizofrenia. A experiência clínica mostra que os pacientes crônicos vão ficando com pele, musculatura, e postura diferente dos não doentes, porém não há registro de estudo buscando estudar a postura, apesar de sabermos que a mesma depende da interação de inúmeros sistemas, incluindo o estado inflamatório do sujeito. Objetivo: Definir padrões de postura dentro de parâmetros básicos (postura cifolordótica - PCL, postura relaxada ou desleixada - PRD, postura escoliótica - PE) em pacientes esquizofrênicos e correlacionar com fase de doença (inicial-tardia) e com marcadores de resposta inflamatória imediata (proteína C reativa - PCR) e tardia (fator de von Willenbrand - FvW). Método: Estudo transversal, por amostra de conveniência, aprovado pelo comitê de ética do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (número 110083 HCPA). Foram recrutados 40 indivíduos com diagnóstico CID-10 e DSMIVTR de esquizofrenia, forma estabilizada, em tratamento ambulatorial no HCPA. Os pacientes foram subdivididos em 2 subgrupos, de acordo com o estágio da doença (estágio inicial n=15 menos de 10 anos do 1° surto, estágio tardio n=25 10 anos ou mais do 1° surto). O grupo controle (n=26) foi recrutado através de uma rede social (Facebook®). Todos os indivíduos foram submetidos à biofotogrametria pelo método SAPO® para avaliar a postura. O nível de significância adotado foi de 5% para todas as variáveis e as análises foram realizadas no programa Statistical Package for the Social Sciences (SPSS, versão 18.0). Resultados: Não houve perdas; em relação à postura o grupo estágio inicial apresentou 15 ângulos com diferenças significativas quando comparado aos valores de referência, enquanto no grupo estágio tardio apenas 7 ângulos foram significativos; já na comparação com o grupo controle, apenas 6 ângulos foram significativos num total de 19. Os marcadores inflamatórios (PCR e FvW) não foram significativos em comparação aos estágios inicial e tardio da doença, porém a PCR apresentou correlação com a gravidade da doença e o FvW com um ângulo postural da protusão da cabeça. A variável dor também apresentou correlação com 5 ângulos posturais, 2 da coluna e 3 dos membros inferiores; além disso o grupo estágio tardio teve maior prevalência de dor quando comparado ao estagio inicial. Conclusões: Existe um padrão postural comum na esquizofrenia caracterizado principalmente por protusão da cabeça, hiperlordose e escoliose, sendo que no início da doença é mais agravante e no estágio mais tardio se estabiliza. Isto pode ser explicado por dois fenômenos: aumento de peso e o enfraquecimento muscular. Adicionalmente, temos a influência da dor e dos fatores inflamatórios, onde a PCR se associou à gravidade da doença, mas não à postura; já o FvW e a dor se associaram aos ângulos posturais, demonstrando suas influências nessa doença. Isto sugere que existe uma maior atividade patológica no início da doença, não só no cérebro, mas também no organismo, incluindo músculos e tecido adiposo. A hiperlordose parece estar mais associada à obesidade e tecido adiposo, enquanto que a extensão da cabeça e escoliose mais a alterações de musculatura. Todos estes achados juntos, se confirmados em amostras maiores e mais heterogêneas, irão nos auxiliar em futuras condutas no tratamento destas alterações posturais características deste transtorno (hiperlordose lombar, anteriorização da cabeça, diminuição da cifose torácica), além de estimular busca de novos meios de intervenções com o enfoque nos diferentes estágios da doença. / Introduction: Schizophrenia is a severe mental disorder that leads to progressive deterioration that more recently has been described as a systemic disease with progressive changes in the brain and body, and partly because of this, associated with lower life expectancy, in average 20 years less than the not affected general population. Although not specific, it has already been determined different inflammatory and oxidative markers involved, however little has been described about systemic markers of schizophrenia. Clinical experience shows that chronic patients are presenting skin, muscles, and posture different from the non patients, but there are no records of studies seeking to study the posture, even though we know that it depends on the interaction of many systems, including the inflammatory state of the subject. Objective: To define patterns of posture within basic parameters (PCL, PRD, PE) in schizophrenic patients and correlate with illness stage and with inflammatory markers of immediate (CRP) and delayed (vWF) response. Method: Cross-sectional study of a convenience sample approved by the ethics committee of the Hospital de Clinicas de Porto Alegre (HCPA). Forty patients with stabilized schizophrenia were recruited in the clinic treatment of HCPA, and analyzed according to 2 subgroups of the stage of the illness (early stage n = 15 less than 10 years from the 1st outbreak, late stage n = 25 10 years or more from the 1st outbreak). The control group (n = 26) were recruited through a social network (Facebook ®). All subjects underwent photogrammetry by SAPO ® method to evaluate posture. The level of significance was set at 5% for all variables and the analyzes were performed using the Statistical Package for the Social Sciences (SPSS, version 18.0). Results: there was no loss, in relation to posture the initial stage group showed 15 angles with significant differences when compared with the reference values, while the late stage group only 7 angles were significant, as compared with the control group only 6angles were significant in a total of 19, the inflammatory markers (CRP and vWF) were not significant in comparison to the initial and late stages of the disease, but the CRP showed correlation with disease severity and the vWF with a postural angle of the protrusion of the head. The pain variable also showed correlation with 5 postural angles, 2 of the column and 3 of the lower limbs, besides the late stage group had a higher prevalence of pain when compared to the early stage. Conclusions: There is a common postural pattern in schizophrenia characterized primarily by protrusion of the head, hyperlordosis and scoliosis, and that early in the illness is more aggravating and in the later stage it stabilizes. And it can be explained by two phenomena: weight gain and muscle weakness. Additionally, we have the influence of pain and inflammatory factors, where the CRP was associated with disease severity but not the posture, but the vWF and the pain were associated with postural angles demonstrating their influences in this disease. This suggests that there is increased pathological activity in the onset of the disease, not only in the brain but also in the body including muscles and adipose tissue. The hyperlordosis appears to be most strongly associated with obesity and adipose tissue, whereas the length of the head and scoliosis more to changes in muscles. All together these findings, if confirmed in larger and more heterogeneous samples will help us in future conduct in treating these postural changes characteristic of this disorder (lumbar hyperlordosis, forward head posture, decreased thoracic kyphosis), besides stimulating the search for new means of interventions with the focus on different stages of the disease.

Orientador: Maria Isabel Nogueira Cano / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-10T10:53:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SiqueiraNeto_JairLagede_D.pdf: 2960762 bytes, checksum: 91f4b8aed472a4d4c93cf040e8c534e7 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A leishmaniose é uma parasitose humana emergente e ainda não controlada, causada por protozoários pertencentes ao gênero Leishmania. Atualmente, a doença atinge mais de 12 milhões de pessoas, não existindo ainda métodos eficientes para seu controle e erradicação. Por estas razões a Organização Mundial da Saúde classifica a leishmaniose como doença de categoria I e incentiva o desenvolvimento de novos métodos para controlar a doença para buscar novos alvos para drogas contra parasita. No presente trabalho, estudou-se as proteínas LaRBP38 e LaRPA-1 previamente identificadas por se associarem in vitro com a simples-fita telomérica rica em ¿G¿ de L. amazonensis. Os telomeros são extremidades físicas dos cromossomos de eucariotos, formados por complexos nucleoproteicos. São responsáveis por conferir estabilidade aos cromossomos, envitando a degradação pela maquina de reparo celular e a fusão entre extremidades cromossomais. Instabilidades no telômero causam normalmente danos irreparáveis à célula podendo levar à senescência e morte celular. As proteínas que se mantém complexadas ao telômero são responsáveis por mantê-lo funcioal. Cada proteína desempenha um papel importante, seja na proteção, processo replicativo ou manutenção da estabilidade estrutural do telômero, sendo portanto, alvos potenciais para o desenvolvimento de terapias antiparasitárias. A proteína RPA é conservada em toda escala evolutiva e cumpre importantes papéis nas maquinarias de replicação, recombinação e reparo do DNA genômico ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Leishmaniasis is an emerging and non-controlled human disease, caused by protozoan belonging to the Leishmania genera. More than 12 million people are infected and there are no efficient methods for the controlling or eradication of the disease. For those reasons, the World Health Organization classifies leishmaniasis as category I disease and encourages the development of new methods to control the disease and to find new targets for drugs against the parasite. In the present work, we studied the proteins LaRBP38 and LaRPA-1, prior identifield by in vitro assays as proteins that associates with the Leishmania amazonensis G-rich single-stranded telomeric DNA. Telomeres are the physical ends of eukaryote chromosomes formed by proteins and DNA complexes. They are responsible for the chromosome stability, avoiding degradation by the rapair machinery end-to-end fusion. Telomere instability may cause irreversible damage in the cell, leading to senescence and cell death. The proteins that interact with the telomeres are responsible for the functional dynamics of theses structures. Each protein has an important role in the protection, replication process or in the stability maintenance. Therefore, telomeric protein could be considered good targets for the development of new therapies. RPA is an evolutionary conserved protein and plays important roles in replication, recombination and repair machineries. At the telomeres, RPA recruits telomerase, the protein responsible for telomeric elengation ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Doutorado / Genetica de Microorganismos / Doutor em Genetica e Biologia Molecular

Resumo não disponível

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INTRODUÇÃO: Uma elevada proporção dos pacientes em hemodiálise crônica (HD) apresentam estado inflamatório representado pela elevação da proteína C-reativa (PCR) a qual é um marcador prognóstico de aumento de mortalidade. Os ácidos graxos w3 possuem atividade anti-inflamatória que ocorre pela inibição de eicosanóides inflamatórios. O óleo de linhaça é o único óleo vegetal composto em 60% pelo precursor α-linolênico. Neste estudo avaliamos a ação do óleo de linhaça no estado inflamatório de pacientes em HD. METODOLOGIA: Ensaio clínico randomizado, duplo-cego e multicêntrico realizado no estado do Rio Grande do Sul. Participaram 114 indivíduos alocados em 2 grupos: placebo, óleo mineral (OM) e óleo de linhaça (OL), sendo incluídos os maiores de 18 anos, em HD há mais de 90 dias, que não apreentassem infecção ou inflamação, doença auto-imune, cateteres endovenosos, infecção por HIV, doença maligna conhecida, e transplante renal prévio. O grupo OL recebeu 2 cápsulas de 1g de óleo de linhaça com α-tocoferol (3,5mg) por 120 dias. O grupo OM recebeu cápsulas de placebo. Foram coletados dados bioquímicos de proteína C reativa e perfil lipídico no início, em 60 e 120 dias de suplementação. Foram aplicados os testes estatísticos ANOVA, t-Student, chi-quadrado e Wilcoxon Mann Whitney (SPSS). O valor de p<0,05 foi considerado estatisticamente significativos e a correlação foi calculada através do teste de Pearson ou Sperman. RESULTADOS: Os grupos foram homogêneos para idade, sexo, etnia, tempo em HD e IMC. Inflamação foi definida por PCR ≥5,1mg/dL e prevaleceu em 60% dos pacientes na primeira análise. Homens obtiveram maior mediana de PCR (11,8mg/dL x 8,6mg/dL nas mulheres; p=0,03). Houve correlação entre PCR e IMC (Rs=0,22; p=0,022) e HDL-c (Rs = -0,23; p= 0,032). A variação de PCR do OL foi maior que a do OM no tempo (pinteração <0,001), mas sem diferença entre grupos. Analisando a transição dos pacientes de inflamados à não inflamados, no grupo OL 33,3% mudaram de categoria entre a primeira e a última análise, contra 16,9% no grupo OM (p=0,04). Colesterol e frações não apresentaram mudança significativa. No grupo OL, 88,8% (n=48) referiram melhora da função intestinal comparados com 25% (n=15) do grupo OM (p<0,001). CONCLUSÃO: A inflamação nos pacientes em HD parece estar correlacionada ao IMC e a diminuição de HDL-c. A função intestinal do pacientes foi melhor no grupo OL. O óleo de linhaça possibilitou redução do número de pacientes inflamados. Estudos mais prolongados e com maior número de pacientes devem ser feitos para comprovar estes achados.

A estimulação neonatal ocasiona alterações no desenvolvimento neuroendócrino, morfológico e comportamental de ratos. O procedimento de manipulação neonatal promove uma ruptura na relação mãe-filhote que pode perturbar o desenvolvimento do SNC. Uma das alterações morfológicas apresentadas em ratos machos e fêmeas manipulados no período neonatal é a diminuição do número de neurônios no locus coeruleus. A S100B é uma proteína ligante de cálcio secretada por astrócitos que pode apresentar ações extracelulares neurotróficos e neurotóxicas. Diversos estudos relacionam alterações dos níveis de S100B a eventos estressores. O estudo objetivou avaliar o efeito da estimulação neonatal, através da manipulação repetida, em ratos machos e fêmeas de 10 dias de idade sobre a concentração das proteínas S100B e GFAP no locus coeruleus, córtex frontal e bulbo olfatório, além da secreção de S100B no líquor. Os resultados revelaram um aumento da concentração de S100B no líquor apenas nas ratas fêmeas manipuladas, e uma diminuição da concentração de S100B no locus coeruleus em ratos machos e fêmeas manipulados. Ocorreu também, uma diminuição da concentração de S100B no córtex frontal em ratos machos manipulados. Em relação à proteína GFAP foi verificado um aumento no seu conteúdo no locus coeruleus em ratos machos e fêmeas manipulados. Foram encontrados diferenças entre os sexos, os machos não-manipulados têm um maior nível de S100B comparados com fêmeas nãomanipuladas no locus coeruleus. Os resultados sugerem que a manipulação neonatal pode interferir sobre o funcionamento das células gliais e através delas alterar o desenvolvimento das células nervosas. Além disso, os resultados mostram um efeito do sexo dos animais sobre as concentrações de S100B já no período neonatal.

Introdução: A esquizofrenia é um transtorno mental grave, que com frequência leva a uma deterioração progressiva, que mais recentemente tem sido descrita como uma doença sistêmica, com alterações progressivas cerebrais e corporais, e em parte por causa disto, associada a menor expectativa de vida, em média 20 anos menos que a população geral não afetada. Apesar de não terem especificidade, já foram determinados diferentes marcadores inflamatórios e oxidativos envolvidos; em contrapartida, pouco tem sido descrito sobre marcadores sistêmicos da esquizofrenia. A experiência clínica mostra que os pacientes crônicos vão ficando com pele, musculatura, e postura diferente dos não doentes, porém não há registro de estudo buscando estudar a postura, apesar de sabermos que a mesma depende da interação de inúmeros sistemas, incluindo o estado inflamatório do sujeito. Objetivo: Definir padrões de postura dentro de parâmetros básicos (postura cifolordótica - PCL, postura relaxada ou desleixada - PRD, postura escoliótica - PE) em pacientes esquizofrênicos e correlacionar com fase de doença (inicial-tardia) e com marcadores de resposta inflamatória imediata (proteína C reativa - PCR) e tardia (fator de von Willenbrand - FvW). Método: Estudo transversal, por amostra de conveniência, aprovado pelo comitê de ética do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (número 110083 HCPA). Foram recrutados 40 indivíduos com diagnóstico CID-10 e DSMIVTR de esquizofrenia, forma estabilizada, em tratamento ambulatorial no HCPA. Os pacientes foram subdivididos em 2 subgrupos, de acordo com o estágio da doença (estágio inicial n=15 menos de 10 anos do 1° surto, estágio tardio n=25 10 anos ou mais do 1° surto). O grupo controle (n=26) foi recrutado através de uma rede social (Facebook®). Todos os indivíduos foram submetidos à biofotogrametria pelo método SAPO® para avaliar a postura. O nível de significância adotado foi de 5% para todas as variáveis e as análises foram realizadas no programa Statistical Package for the Social Sciences (SPSS, versão 18.0). Resultados: Não houve perdas; em relação à postura o grupo estágio inicial apresentou 15 ângulos com diferenças significativas quando comparado aos valores de referência, enquanto no grupo estágio tardio apenas 7 ângulos foram significativos; já na comparação com o grupo controle, apenas 6 ângulos foram significativos num total de 19. Os marcadores inflamatórios (PCR e FvW) não foram significativos em comparação aos estágios inicial e tardio da doença, porém a PCR apresentou correlação com a gravidade da doença e o FvW com um ângulo postural da protusão da cabeça. A variável dor também apresentou correlação com 5 ângulos posturais, 2 da coluna e 3 dos membros inferiores; além disso o grupo estágio tardio teve maior prevalência de dor quando comparado ao estagio inicial. Conclusões: Existe um padrão postural comum na esquizofrenia caracterizado principalmente por protusão da cabeça, hiperlordose e escoliose, sendo que no início da doença é mais agravante e no estágio mais tardio se estabiliza. Isto pode ser explicado por dois fenômenos: aumento de peso e o enfraquecimento muscular. Adicionalmente, temos a influência da dor e dos fatores inflamatórios, onde a PCR se associou à gravidade da doença, mas não à postura; já o FvW e a dor se associaram aos ângulos posturais, demonstrando suas influências nessa doença. Isto sugere que existe uma maior atividade patológica no início da doença, não só no cérebro, mas também no organismo, incluindo músculos e tecido adiposo. A hiperlordose parece estar mais associada à obesidade e tecido adiposo, enquanto que a extensão da cabeça e escoliose mais a alterações de musculatura. Todos estes achados juntos, se confirmados em amostras maiores e mais heterogêneas, irão nos auxiliar em futuras condutas no tratamento destas alterações posturais características deste transtorno (hiperlordose lombar, anteriorização da cabeça, diminuição da cifose torácica), além de estimular busca de novos meios de intervenções com o enfoque nos diferentes estágios da doença. / Introduction: Schizophrenia is a severe mental disorder that leads to progressive deterioration that more recently has been described as a systemic disease with progressive changes in the brain and body, and partly because of this, associated with lower life expectancy, in average 20 years less than the not affected general population. Although not specific, it has already been determined different inflammatory and oxidative markers involved, however little has been described about systemic markers of schizophrenia. Clinical experience shows that chronic patients are presenting skin, muscles, and posture different from the non patients, but there are no records of studies seeking to study the posture, even though we know that it depends on the interaction of many systems, including the inflammatory state of the subject. Objective: To define patterns of posture within basic parameters (PCL, PRD, PE) in schizophrenic patients and correlate with illness stage and with inflammatory markers of immediate (CRP) and delayed (vWF) response. Method: Cross-sectional study of a convenience sample approved by the ethics committee of the Hospital de Clinicas de Porto Alegre (HCPA). Forty patients with stabilized schizophrenia were recruited in the clinic treatment of HCPA, and analyzed according to 2 subgroups of the stage of the illness (early stage n = 15 less than 10 years from the 1st outbreak, late stage n = 25 10 years or more from the 1st outbreak). The control group (n = 26) were recruited through a social network (Facebook ®). All subjects underwent photogrammetry by SAPO ® method to evaluate posture. The level of significance was set at 5% for all variables and the analyzes were performed using the Statistical Package for the Social Sciences (SPSS, version 18.0). Results: there was no loss, in relation to posture the initial stage group showed 15 angles with significant differences when compared with the reference values, while the late stage group only 7 angles were significant, as compared with the control group only 6angles were significant in a total of 19, the inflammatory markers (CRP and vWF) were not significant in comparison to the initial and late stages of the disease, but the CRP showed correlation with disease severity and the vWF with a postural angle of the protrusion of the head. The pain variable also showed correlation with 5 postural angles, 2 of the column and 3 of the lower limbs, besides the late stage group had a higher prevalence of pain when compared to the early stage. Conclusions: There is a common postural pattern in schizophrenia characterized primarily by protrusion of the head, hyperlordosis and scoliosis, and that early in the illness is more aggravating and in the later stage it stabilizes. And it can be explained by two phenomena: weight gain and muscle weakness. Additionally, we have the influence of pain and inflammatory factors, where the CRP was associated with disease severity but not the posture, but the vWF and the pain were associated with postural angles demonstrating their influences in this disease. This suggests that there is increased pathological activity in the onset of the disease, not only in the brain but also in the body including muscles and adipose tissue. The hyperlordosis appears to be most strongly associated with obesity and adipose tissue, whereas the length of the head and scoliosis more to changes in muscles. All together these findings, if confirmed in larger and more heterogeneous samples will help us in future conduct in treating these postural changes characteristic of this disorder (lumbar hyperlordosis, forward head posture, decreased thoracic kyphosis), besides stimulating the search for new means of interventions with the focus on different stages of the disease.

O metotrexato (MTX) é um antagonista do ácido fólico amplamente utilizado no tratamento de doenças neoplásicas e não neoplásicas. Entretanto, o uso terapêutico desse fármaco pode levar à neurotoxicidade que pode se manifestar na forma aguda, subaguda e crônica, abrangendo os seguintes sintomas: cefaléia, sonolência, confusão, edema cerebral, convulsões, encefalopatia, coma e prejuízo das funções cognitivas. Os achados neuropatológicos consistem de astrogliose reativa, desmielinização, dano axonal e necrose da substância branca. Em nível celular, o MTX parece afetar primeira e seletivamente os astrócitos, quando comparados com os neurônios.O exato mecanismo neurotóxico do MTX continua não esclarecido, e parece ser multifatorial. Visando ampliar os conhecimentos a respeito dos efeitos do MTX no SNC, foram desenvolvidos dois trabalhos com diferentes modelos em animais, nos quais foram estudados os possíveis mecanismos de ação tóxica desse fármaco, como também propomos a utilização do marcador bioquímico S100B na detecção de injúrias cerebrais associadas ao tratamento. A partir dos resultados obtidos nos experimentos de captação de glutamato in vitro, verificamos que o MTX interfere na remoção do glutamato da fenda sináptica, podendo levar à excitotoxicidade. Também, o aumento da proteína S100B auxilia no entendimento dos mecanismos de ação do MTX, pois sugere que os astrócitos estão respondendo a um insulto na tentativa de neuroproteção Além disso, a S100B, aliada a outros marcadores neuroquímicos e técnicas de diagnóstico por imagem, seria muito importante no monitoramento terapêutico, pois poderia detectar alterações celulares sutis e ajudaria a prevenir a neurotoxicidade pelo MTX. Os resultados que obtivemos nos experimentos de convulsões induzidas pelo MTX demonstraram a participação do sistema glutamatérgico na neurotoxicidade desse fármaco. Especificamente, evidenciamos o envolvimento dos receptores inotrópicos glutamatérgicos na patogênese das convulsões. Porém, neste modelo experimental, a captação de glutamato possivelmente diminuiu em decorrência das manifestações das convulsões e não por uma ação direta, ou indireta, do MTX. O entendimento dos mecanismos de ação é muito importante para a clínica médica, pois permite que novas ferramentas sejam criadas no intuito de prevenir os danos tóxicos induzidos por fármacos. Assim, mais estudos devem ser realizados para tentar desvendar os mecanismos de neurotoxicidade do MTX, como também para estudar potenciais marcadores bioquímicos de injúria cerebral que auxiliem no monitoramento terapêutico.

Orientador: Valdemiro Carlos Sgarbieri / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-23T09:28:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Candido_LysMaryBileski_D.pdf: 13282827 bytes, checksum: 16a28c41cebc9d56494c4361e954c2b5 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: O objetivo geral deste trabalho foi o de otimizar as propriedades funcionais de concentrados protéicos de tilápia do Nilo, mediante modificações nos processos de obtenção de concentrados, ou através de hidrólise enzimática de proteínas. A matéria prima empregada na elaboração deste trabalho foi a tilápia do Nilo (Oreochromus niloticus). Inicialmente foi preparado um concentrado de proteínas totais, tratado com 3 ciclos de etanol a 50°C, o qual apresentou baixo teor de gorduras (2,14 ± 0,07%), mas não apresentou funcionalidade. Foram preparados concentrados de proteínas miofibrilares, nos quais os filés de tilápia foram moídos, e lavados com soluções de cloreto de sódio, e bicarbonato de sódio e água consecutivamente. Após a eliminação da água possível, por prensagem, foram aplicados seis tratamentos diferentes, incluindo: etanol a frio (E), adição de crioprotetores, á semelhança do preparo do surimí (S), tratamento do concentrado S com etanol a frio (SE), tratamento do filé triturado com etanol hexano (EH), adição de polifosfatos aos filés triturados (F), e tratamento do concentrado F com etanol a frio (FE). A avaliação preliminar das propriedades funcionais e da estabilidade dos concentrados mostrou que o concentrado adicionado de polifosfatos e tratado com etanol foi a melhor alternativa. Este foi a seguir, preparado em grande quantidade (CP) e entre suas propriedades destacaram-se; a capacidade emulsifícante (297,33 ± 3,79 mL de óleo/g proteína), o índice de atividade emulsifícante (34,76 + 1,63 m2/g de proteína), e a capacidade espumante (171,ó7 ± 7,64%). A capacidade de retenção de água foi de 12,50 ± 0,99 mL de água/g de proteína, muito superior à das demais preparações. Foram preparados hidrolisados proteicos mediante a utilização da preparação enzimática Flavourzime® (Novo Nordisk). Os hidrolisados com 2,5%; 3,5%; 7%; 9%; e 14% de hidrólise foram utilizados para avaliação de propriedades funcionais e os restantes (22%, 25% e 45% de hidrólise) para aspectos nutricionais especiais e de avaliação sensorial. Consegui-se melhora estatisticamente significativa (p<0,05) em todas as propriedades funcionais. Com 7% de grau de hidrólise foram obtidas as melhores propriedades funcionais, destacando-se a solubilidade (42,43 ± 1,43%), capacidade emulsifícante (287,17 ± 11,14 mL de óleo/g proteína), índice de atividade emulsifícante (30,49 ±0,11 m2/ g de proteína) e capacidade espumante (177.00 ± 1,00%). Para grau de hidrólise de 14% houve expressivo abaixamento da tensão superficial (13,3%) e interfacial (53,6%). Foram desenvolvidas formulações de biscoito doce e salgado, nas quais parte da gordura foi substituída por sucedâneos de gordura de base proteica, ou seja, Dairy-Lo® para o biscoito doce e Símplesse® para o biscoito salgado, empregando-se o idrolisado com 45% de grau de oidróíise, O teor de proteínas para o biscoito doce foi de 19,86 ± 0,05, e de gordura, 10,84 ± 0,35. Para o biscoito salgado, os valores foram 20,31 ± 0,20 e 9,19 ± 0,52, para proteínas e gordura, respectivamente, bastante diferenciados dos demais produtos comerciais, que apresentam teor de gorduras superior ao de proteínas. O teor de fibras foi de 4,80% (doce) e 2,40% (salgado). O teste de aceitação dos biscoitos foi realizado com 100 atletas. O biscoito salgado foi o preferido independentemente do sexo dos provadores. No atributo aceitação global, para o biscoito doce, 14% assinalou que gostou muito e 36% que gostou. Para o biscoito salgado, os percentuais foram 11% e 66% respectivamente. Considerando a aceitação dos biscoitos pelos atletas, acreditamos que esta seja uma das aplicações para o produto, e eventualmente em usos clínicos. Estas modificações não alteraram o valor nutritivo dos diversos concentrados e hidrolisados preparados, não se verificando diferença estatística significativa entre índices como valor biológico, digestibilidade, NPU, e NPR, comparativamente à caseína. Houve diferença estísticamente significativa (p<0,05) com a caseína quando foram testadas separadamente as frações solúveis e insolúveis dos hidrolisados. Verificou-se também que quando se analisou o PDCAAS para o sobrenadante do hidrolisado, houve um aumento deste índice proporcionalmente ao grau de hidrólise, indicando que do ponto de vista nutricional o hidrolisado total seria a melhor forma de utilização do produto, porquanto mantém inalterado o balanço de aminoácidos. Foram comparados hidrolisados cora 25% de grau de hidrólise preparados com Atcalase® e Flavourzime® quanto à presença de peptídio com atividade inibidora da enzima conversora de angiotensina i em angiotensina II (ACE). O 1C30 do inibidor no hidrolisado de AlcalaseLt foi de 0,064 mg e no de Flavourzimefâ, 0,087 mg de proteína. Após purificação por HPLC de exclusão molecular, o 1C50 para hidrolisado de Alcalase® foi de 0,0048 mg de proteína, indicando um aumento de 20 vezes na atividade inibidora. / Abstract: The general objective of this research was the otimization of the Nile tilapia protein concentrate as to functional properties by modifications in the preparation procedure or controlled enzymatic hydrolysis. The raw material used for this research was the Nile tilapia (Oreochromm niloticm). Whole protein concentrate was obtained after three cycles of treatment with ethanol at 50° C. Total lipid content (2.14 ± 0,07%), was considered low, but no functionality was shown. Myofibrilar protein concentrates were prepared under milder conditions aiming at a product with better functionality. Tilapia fillets were minced and washed with sodium chloride and sodium bicarbonate solutions, and water respectively. After removing the water by compression, it was submitted to six distinct treatments including: cold ethanol (E); cryoprotector addition, as tor surimi preparation (S); treatment of the previous (S) concentrate with cold ethanol (SE), treatment of fillets with ethanol hexane (EH); addition of polyphosphates to the minced fillets (F), and treatment of F with cold ethanol (FE). Preliminary evaluation of functional properties and stability of the concentrates showed that concentrate treated with polyphosphates was the best concerning functionality. Such concentrate was then prepared in greater amounts and its major properties were: emulsifying capacity (297.33 ± 3.79 mL of oil/g protein), emulsifying activity index (34.76 ± 1.63 nvVg protein), and foaming capacity (171.67 ± 7,64%). The water retention capacity was 12.50 + 0.99 mL of water/g protein. Protein hydrolysates were prepared with Flavourzime® for obtaining nutritionally adequate products with better functional properties. The concentrates with degrees of hydrolysis of 2.5%; 3.5%, 7%, 9%, and 14% were tested for functional properties, and the others (22%, 25% and 45%) for nutricional aspects and sensorial evaluation. There was statistically significant (p<0.05) improvement for all functional properties. The best functional properties were obtained with 7% degree of hydrolysis, specially: solubility (42.43 ± 1.43%), emulsifying capacity (287.17 ± 11.14 mL of oil/g protein), emulsifying activity index (30.49 ± 0.1 i m2/g protein), and foaming capacity (177.00 ± 1.00%). Hydrolysis of 14% caused a lowering of the surface tension (13.3%. decrease), and interface tension (53.6% decrease). Cookies (sweet and salted) were developed, in which part of the fat was replaced by protein based fat replacers: Dairy-LoK for the sw-eet and Simplesse® for the salted cookies, using the sample with 45% percent of hydrolysis. Protein content was 19.86 ± 0.05 for the sweet cookies, and 10.84 ± 0.35 for total lipids. For the salted cookies the values were 20.31 ± 0.20 and 9.19 ± 0.52 for protein and fat respectively. Fiber content was 4.80% (sweet) and 2.40% (salted). Acceptance test was done with 100 athletes, and the salted cookies were preferred by athletes of both sexes. Overall acceptance for the sweet cookies was: 14% liked it very much and 36% liked it. For the salted cookies the results were 11% liked very much, and 66%, liked. Regarding acceptance the product could be recomended for athlets and for clinical nutrition. Hydrolysis did not affect the nutritional value of the concentrates. There was no statistic differences (p<0.05) among indexes such as biological value, digestibility, NPU and N'PR, among the sample when compared to casein. There was statistic differences when their soluble and insoluble fractions were tested separately. It was also shown that when the PDCAAS is calculated for the soluble fraction of the hydrolysates, there was an increase in this index proportionally to the degree of hydrolysis, indicating a better amino acid balance for the total hydrolysates. It was shown that peptides which inhibits the angiotensin converting enzyme are present in the hydrolysates. The I Cat for the Alcalase® hydrolysate was 0.064 mg of protein and for Flavourzime® was 0.087 mg protein. After separation by molecular exclusion (HPLC) the 1C50 was 0.0048 mg of protein, for the enzyme Alcalase®, a twelve-fold increase in the inhibition power. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos