Resumo: O experimento foi desenvolvido no setor de Ovinocultura da Universidade de Marília com o objetivo de avaliar os efeitos dos níveis de suplementação alimentar com ração contendo 25% de PB e 3,18 Mcal EM/kg/MS para cordeiras criadas em pastagem com comedouro privativo sobre o peso e desempenho em distintas idades, bem como o inicio da puberdade e desempenho reprodutivo. Foram utilizadas 21 cordeiras Suffolk oriundas de parto simples, divididas em 3 lotes experimentais, sem e com suplementação, alimentadas do nascimento ao desmame em comedouros privativos com 2 níveis de ingestão de concentrado (300 e 600 g/dia) fornecido uma vez ao dia com o registro das sobras diárias. As cordeiras foram identificadas, pesadas ao nascimento e a cada 30 dias, permanecendo com suas mães até o desmame, pré-estabelecido em 60 dias. Não houve diferenças significativas para peso e ganho médio de peso diário aos 30 dias de idade, demonstrando que os níveis de ingestão não influenciaram os parâmetros analisados. O peso e ganho médio de peso diário foram influenciados pelo nível de suplementação alimentar. O lote com consumo de 600 gramas mostrou desempenho superior aos outros dois lotes aos 60 e 120 dias de idade. Para os lotes de 300 gramas e sem suplementação não houve diferença para os parâmetros analisados. A disponibilidade de 600 gramas diários de concentrado contendo 25% de PB e 3,18 Mcal de EM/kg/MS para as cordeiras até o desmame promoveu maior ganho médio de peso diário aos 60 e 120 dias de vida e melhor desempenho reprodutivo no 2º ano de cobertura. / Abstract: The experiment was developed in the Sheep Production Department at University of Marília, wich aim was to evaluate the effects of the levels of the food supplies (without supplies, 300, 600 g of concentrate/day) with concentrate containing 25% of CP and 3,18 Mcal ME/kg/DM for females lambs raised in pasture with creep feeding about weight and acting in different ages, as well as the beginning of puberty and reproductive performance. The subjects were 21 female lambs Suffolk breed proceeding from simple birth which were divided into 3 experiment lots, fed from birth up to weaning in creep feeding with 2 levels of ingestion of concentrated (without supplied, 300 and 600 g/concentrate/day) given once a day by recording daily leftovers. The female lambs were identified weighed soon after birth and then, weighed every 30 days, remaining with their mothers up to weaning, pre established for 60 days. There was no significant difference for weight and medium gain of weight daily at 30 days of age, showing that the levels of ingestion did not influence the analyzed parameters. The weight and medium gain of daily weight were influenced for the level of food supplied, the lot consuming of 600 g showed performance greater than the other 2 lots at 60 and 120 days of age. For the lots of 300 g and without supplied there was no significant differences for the analyzed parameters. The availability of 600 g concentrated daily containing 25% of CP and 3,18 Mcal of ME/kg/DM for the female lambs up to weaning resulted in higher medium gain of weight daily at age of 60 and 120 days, as well as better reproductive performance in the 2º year of animal copulation. / Orientador: Ciniro Costa / Coorientador: Cledson Augusto Garcia / Banca: Paulo Roberto de Lima Meirelles / Banca: Katia de Oliveira / Banca: Rodolfo Claudio Spers / Banca: Wagner Reis / Doutor

O período de puberdade, em equinos, define-se pela aparição de espermatozóides maduros no ejaculado de animais jovens, bem como a maturação das funções endócrinas. Os espermatozóides precisam passar por um processo de maturação no epidídimo. Para se obter marcadores moleculares que permitam estabelecer a fertilidade de um garanhão, é necessário um melhor conhecimento das proteínas presentes em espermatozóides imaturos e maduros, uma das quais é a PDI (proteína dissulfeto-isomerase). A PDI foi descrita também como importante marcador de fertilidade no plasma seminal e espermatozóides de diversas espécies. O objetivo deste trabalho foi identificar a presença da PDI no epidídimo equino durante a puberdade, e quantificá-la no fluido e espermatozóides epididimários. Visou verificar a presença da PDI no plasma seminal e espermatozóides ejaculados, em garanhões férteis e subférteis. Foram realizados dois experimentos: Experimento 1: utilizou-se 22 equinos Crioulos saudáveis, castrados e divididos em três grupos: G1: potros até 24 meses, G2: de 25-36 meses e G3: a partir de 36 meses. Imediatamente após a castração, foi efetuada a dissecação do epidídimo para a coleta de fluido epididimário, o qual foi separado dos espermatozoides por centrifugação a 800 g por 10minutos. O sobrenadante foi removido, e criopreservado a -196º C. Os espermatozóides foram ressuspendidos em PBS e armazenados a -196º C. Para a dosagem de proteína das amostras, utilizou-se o método de Kit BCA espectrofotômetro e a eletroforese em gel de poliacrilamida a 10% SDS- Page.Para imunodetecção das proteínas, efetuou-se a incubação do anticorpo primário específico por no mínimo, 6 horas a 4º C, e incubação com anticorpo secundário conjugado com peroxidase anti-igG de camundongo ou anti-IgG de rato. Para a visualização das bandas foi utilizado o Kit de ECL em filmes de raio-X, e as bandas quantificadas pela utilização do software livre ImageJ. A PDI foi identificada nos três grupos avaliados na análise proteômica do fluido , e espermatozoides epididimários, sendo sua quantidade inferior no G1 em relação aos grupos dois (2) e três (3). Em conclusão, a expressão da PDI nos espermatozóides e fluido epididimários de potros castrados cirurgicamente, aumenta conforme o animal atinge a maturidade sexual. Experimento 2- Utilizou-se 12 garanhões adultos que já haviam sido submetidos à pelo menos duas temporadas de monta na região da Campanha do Rio Grande do Sul, efetuando-se quatro (4) coletas de cada garanhão, fora da estação de monta, respeitando-se um intervalo de 48h entre coletas. Imediatamente após a coleta, analisou-se motilidade, vigor e concentração com auxílio de microscópio óptico e retirou-se uma alíquota de sêmen para avaliação das patologias espermáticas. A partir dos dados obtidos, os garanhões foram divididos em dois grupos: Grupo 1: motilidade não inferior a 70%, tendo-se uma média de 76,04±5,89% e histórico reprodutivo de temporadas anteriores com índice de prenhez mínimo por temporada de 80%. Grupo 2: motilidade igual ou inferior a 30%, com média de 11,83±11,21%, e histórico reprodutivo de temporadas anteriores de índices de prenhez inferiores a 35%. Efetuadas as análises, as mostras foram centrifugadas a 800 g por 10 minutos para separar o plasma seminal, de mesma forma que no Exp. 1. Os pellets passaram por ressuspensão em PBS gelado e posteriormente armazenados a -196º C. As amostras foram submetidas à dosagem das proteínas, para serem submetidas à eletroforese, utilizando-se géis de poliacrilamida a 10% SDS-Page.Para imunodetecção das proteínas, efetuou-se a incubação do anticorpo primário específico por no mínimo, 6 horas a 4º C, e incubação com anticorpo secundário conjugado com peroxidase anti-igG de camundongo ou anti-IgG de rato. Na visualização das bandas foi utilizado o Kit de ECL em filmes de raio-X, e as bandas foram quantificadas pela utilização do software livre Image J. Ao analisar a presença da PDI no plasma seminal dos garanhões, verificou-se sua expressão em ambos os grupos; porém não houve diferença de expressão da PDI entre eles(p˂0,05). Não houve também relação da PDI com motilidade, nem com a concentração espermática. Considerando os dados obtidos no presente experimento, não foi possível relacionar a PDI com qualidade espermática e assim considerá-la como um potencial marcador de fertilidade em equinos. São necessários mais estudos que possam envolver outros fatores moleculares inclusive as demais proteínas da família das PDIs. / Puberty, in the equine species, may be defined by the appearance of mature spermatozoa in young animals´ ejaculates, as well as endocrine function maturation. One of the proteins found in immature and mature spermatozoa is PDI (protein dissulfide-isomerase). PDI was also described as an important fertility marker both in seminal plasma and sperm of many species. is responsible for rearranging dissulfide bonds, necessary for sperm adhesion proteins to link to the oocyte. The aim of this work was to identify PDI in equine epididymis during puberty, and quantify it in epididymal sperm and fluid of fertile and subfertile sperm. Two experiments were performed. Experiment 1-twenty-two healthy Crioulo colts were surgically castrated, and divided in three groups: G1: until 24 months; G2: from 25-36 months and G3: more than 36 months. Immediately after castration, testicles were measured, weighed, and the epididymis was dissecated for epididymal fluid collection, which was centrifuged at 800 g for 10minutes to separate epididymal fluid from sperm. Supernatant was removed, and cryopreserved at -196º C. Sperm were re-suspended in PBS and stored at -196º C. Protein dosing of samples was performed with BCA Kit and electrophoresis at 10% SDS-Page. To detect proteins, primary antibody was incubated for at least 6 hours at 4º C, and then incubation with secondary antibody conjugated with anti-mouse IgG or anti-rat IgG. To see bands, ECL Kit in X-ray films was used, and the bands quantified with softwareImageJ. In the three groups PDI was identified, in epididymal fluid and epididymal sperm, but in smaller amount in G1 when compared with Groups 2 and 3. In conclusion, expression of PDI in epididymal fluid and sperm of surgically castrated colts, increases as the animal attains sexual maturity. Experiment 2- The aim of this work was to verify the presence of PDI in equine seminal plasma and sperm, quantify it and to compare its expression on seminal plasma from fertile and subfertile stallions. Twelve adult stallions with at least two breeding season were used. For the study, four collections of each animal were performed. Immediately after collection, analysis of motility, velocity, concentration and sperm morphology were performed. Stallions were divided in two groups, according to the semen analysis and previous breeding history: Group 1: motility greater than 70% and previous history of pregnancy rates higher than 80%; Group 2: sperm motility less or equal than 30% and breeding history of less than 35% of pregnacy per season. After the analysis, samples were centrifuged at 800 g/10minutes to remove seminal plasma. Samples were prepared as described in Exp. 1. The expression of PDI in seminal plasma was seen in both groups, but with no statistical difference between them. There was no correlation of PDI with sperm motility or concentration. According to these findings, it is not possible to consider PDI as a fertility marker in stallions. More research is needed, involving other mollecular factors, including other PDIs family proteins.

Submitted by Ana Flávia Teresa Paiva (aflavia.paiva@gmail.com) on 2018-07-05T15:29:33Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de mestrado.pdf: 699288 bytes, checksum: 3c4b62716218390065cac7fea5b0cb42 (MD5) / Rejected by Isabel Pereira de Matos (isabel@fmva.unesp.br), reason: Falta Ficha Catalográfica; Arrumar palavras chave on 2018-07-05T19:05:16Z (GMT) / Submitted by Ana Flávia Teresa Paiva (aflavia.paiva@gmail.com) on 2018-07-05T20:22:53Z No. of bitstreams: 1 Dissertação de mestrado.pdf: 790947 bytes, checksum: 15861ab0546530441a0c751b2150ab34 (MD5) / Approved for entry into archive by Ederson Vasconcelos Pereira null (edersonpereira@fmva.unesp.br) on 2018-07-06T14:09:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 paiva_aftp_me_araca_int.pdf: 790947 bytes, checksum: 15861ab0546530441a0c751b2150ab34 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-06T14:09:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 paiva_aftp_me_araca_int.pdf: 790947 bytes, checksum: 15861ab0546530441a0c751b2150ab34 (MD5) Previous issue date: 2018-06-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Objetivou-se comparar a concentração de LH plasmático, em resposta à kisspeptina exógena, em novilhas Nelore, para avaliar a maturação sexual do Sistema Nervoso Central. As hipóteses testadas foram de que em resposta a kisspeptina, a secreção de LH aumenta com a idade e que em uma mesma idade, novilhas com maior peso à desmama secretam mais LH que as desmamadas mais leves. Utilizou-se 50 bezerras, segregadas em leves (174kg) e pesadas (232kg), desafiadas mensalmente dos 8 aos 16 meses, com 10 µg/kg (IM) de kisspeptina recombinante bovina, e após 20 min foi realizada a coleta de sangue. Aos 16 meses as novilhas foram expostas a touros por 60 dias e 30 dias depois a taxa de prenhez foi avaliada. A quantificação de LH, P4 e leptina foi feita por radioimunoensaio e IGF-I por ELISA. Houve aumento na concentração de LH em resposta a kisspeptina dos 8 aos 14 meses de idade. Comparando diferença na concentração de LH entre o 8º mês com meses os subsequentes, observou-se aumento no grupo prenhe no 11º mês, e no grupo não prenhe no 12º mês. A taxa de prenhez no grupo pesado foi de 92% enquanto que no grupo leve foi de 62,5% e o tempo gestacional estimado foi maior no grupo pesado. A concentração do IGF-I foi maior aos 12 meses no grupo leve e aos 15 meses no grupo não prenhe, enquanto que a concentração de leptina foi maior no grupo pesado aos 13, 15 e 16 meses, e prenhe aos 9 e 10 meses. A concentração de LH após a kisspeptina aumentou com a idade, mas não foi maior nos animais mais pesados à desmama, mas foi capaz de avaliar a maturação sexual do hipotálamo e futuramente pode ser usada para a triagem de novilhas Nelore com precocidade sexual. / The objective was to compare the plasma luteinizing hormone (LH) concentration in response to exogenous kisspeptin in Nellore heifers in order to evaluate the sexual maturation of the Central Nervous System. The tested hypotheses were: in response to kisspeptin the LH secretion increases with age and at the same age, heifers with higher weaning weight secrete more LH compared to lighter ones. Fifty heifers were used, secreted in light (174kg) and heavy (232kg), challenged monthly from 8-16 mo, with 10 μg / kg (IM) of recombinant bovine kisspeptin, and after 20 min blood sample was collected. At 16 months the heifers were exposed to bulls for 60 days, the pregnancy was evaluated 30 days later. The LH, P4 and leptin quantification were done by radioimmunoassay and IGF-I by ELISA. There was an increase in LH concentration in response to kisspeptin from 8th to 14th months of age. Comparing the difference on LH concentration between the 8th with the following months, the pregnant group presented an increase at 11th whereas the non-pregnant group it was observed at 12th month. The heavy heifers pregnancy rate was 92% while in the light group it was 62.5% and gestational time was also higher in the heavy group. IGF-1 levels was greater at 12th mo in the light group and at 15th mo in non-pregnant group. Leptin level was higher at 13th, 15th and 16th mo in the heavy group and at 9th and 10th mo in pregnant group. The LH concentration after kisspeptin injection increased according to age, was not higher in heavier animals at weaning, but was able to evaluate hypothalamus sexual maturation and in the future can be used as a screening tool for sexual precocity in Nellore heifers.

Orientador: Guilherme de Paula Nogueira / Banca: Claudia Maria Bertan Membrive / Banca: Rafael Silva Cipriano / Resumo: Objetivou-se comparar a concentração de LH plasmático, em resposta à kisspeptina exógena, em novilhas Nelore, para avaliar a maturação sexual do Sistema Nervoso Central. As hipóteses testadas foram de que em resposta a kisspeptina, a secreção de LH aumenta com a idade e que em uma mesma idade, novilhas com maior peso à desmama secretam mais LH que as desmamadas mais leves. Utilizou-se 50 bezerras, segregadas em leves (174kg) e pesadas (232kg), desafiadas mensalmente dos 8 aos 16 meses, com 10 µg/kg (IM) de kisspeptina recombinante bovina, e após 20 min foi realizada a coleta de sangue. Aos 16 meses as novilhas foram expostas a touros por 60 dias e 30 dias depois a taxa de prenhez foi avaliada. A quantificação de LH, P4 e leptina foi feita por radioimunoensaio e IGF-I por ELISA. Houve aumento na concentração de LH em resposta a kisspeptina dos 8 aos 14 meses de idade. Comparando diferença na concentração de LH entre o 8º mês com meses os subsequentes, observou-se aumento no grupo prenhe no 11º mês, e no grupo não prenhe no 12º mês. A taxa de prenhez no grupo pesado foi de 92% enquanto que no grupo leve foi de 62,5% e o tempo gestacional estimado foi maior no grupo pesado. A concentração do IGF-I foi maior aos 12 meses no grupo leve e aos 15 meses no grupo não prenhe, enquanto que a concentração de leptina foi maior no grupo pesado aos 13, 15 e 16 meses, e prenhe aos 9 e 10 meses. A concentração de LH após a kisspeptina aumentou com a idade, mas não foi maior nos animais mais p... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective was to compare the plasma luteinizing hormone (LH) concentration in response to exogenous kisspeptin in Nellore heifers in order to evaluate the sexual maturation of the Central Nervous System. The tested hypotheses were: in response to kisspeptin the LH secretion increases with age and at the same age, heifers with higher weaning weight secrete more LH compared to lighter ones. Fifty heifers were used, secreted in light (174kg) and heavy (232kg), challenged monthly from 8-16 mo, with 10 μg / kg (IM) of recombinant bovine kisspeptin, and after 20 min blood sample was collected. At 16 months the heifers were exposed to bulls for 60 days, the pregnancy was evaluated 30 days later. The LH, P4 and leptin quantification were done by radioimmunoassay and IGF-I by ELISA. There was an increase in LH concentration in response to kisspeptin from 8th to 14th months of age. Comparing the difference on LH concentration between the 8th with the following months, the pregnant group presented an increase at 11th whereas the non-pregnant group it was observed at 12th month. The heavy heifers pregnancy rate was 92% while in the light group it was 62.5% and gestational time was also higher in the heavy group. IGF-1 levels was greater at 12th mo in the light group and at 15th mo in non-pregnant group. Leptin level was higher at 13th, 15th and 16th mo in the heavy group and at 9th and 10th mo in pregnant group. The LH concentration after kisspeptin injection increased according to a... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Using life-history theory within a biocultural perspective, this research explores whether household food insecurity correlates with early or delayed menarche among adolescent females in Tampa Bay, Florida. Early onset of puberty and menstruation is connected with numerous health consequences including growth stunting, obesity, type-2 diabetes, adult-onset asthma, reproductive cancers, increased risk for depression, behavioral problems, and early sexual activity which increases the risk for STIs and ovarian cancer. Early menarche also seems to disproportionally impact disadvantaged and minority groups. While there are many known factors that influence age at menarche (e.g.: genetics, diet), little is understood regarding the effect of food insecurity on menstrual timing. When considering food insecurity as an environmental adversity, long-term exposure may result in biological trade-offs within growth and development. Using a mixed-methods approach, 40 girls and 36 parents or guardians from Pinellas, Hillsborough, and Manatee counties participated in household dyadic interviews that included the assessment of household food security, girls’ dietary analysis, and anthropometry. Using quantitative analyses, the associations of diet, food security, and body size/composition to menarche were evaluated. A Cox hazards model and regression further analyzed the association of food insecurity and the timing of menarche. The research concludes that adolescents and their families are vulnerable to food insecurity for both biological and social reasons. Qualitative results examine the prevalence, experiences, and perpetrators of food insecurity, as well as strategies used by families to mitigate food insecurity. Food insecurity in this study refers to the inconsistent or limited access to adequate amounts of safe and nutritious foods to sustain health and wellbeing. Food insecurity does not necessarily result in hunger. Once can have access to enough calories and not feel hungry but may still be food insecure if their access does not include enough high-quality, nutritious foods. Quantitative analyses showed that iliac height, waist-hip ratio, snack consumption, and household food insecurity is associated with age at menarche among this sample. Spearman’s Rho confirms that height, leg length (p = 0.032, rs = 0.407), and snack consumption (p = 0.042, rs = 0.464) significantly positively correlate with age at menarche. Waist-hip ratio significantly negatively correlates with age at menarche (p = 0.032, rs = -0.518). Cox Hazard Regression analysis interprets that for every one unit increase in household food security survey score, the risk of experiencing menarche increases by 25% (p = 0.023, OR = 1.25). However, when adding leg length, waist-hip ratio, and snack consumption to the Cox Hazard Regression equation, no variables significantly predict menarche. These findings provide a better understanding of the biocultural influences within the timing of menarche. The research provides new insights and further stresses the importance of improving food assistance programs for adolescents and families with older children.

The thesis focuses on the period of individual adolescence. It presents definitions of adolescence as well as describes physical, psychical, and social changes relevant to the period. It also includes developmental and psychological theories concerning this period. The case study is focused on a family which experienced the puberty of their children. It examines the period within the context of family relationships. It then asks what puberty symptoms are characteristic and how puberty affected relationships among family members and relationships with the social environment.

A antecipação da puberdade por meio da estimulação do macho poderá permitir que a primeira cobertura possa ser realizada mais cedo reduzindo assim os dias não produtivos de fêmeas suínas. No presente estudo, 417 fêmeas DB-DanBred foram estimuladas por 42 dias em dois tratamentos, BEAR, local específico de exposição das leitoas a diferentes machos, e BAIA, a exposição tradicional das leitoas na própria baia, em três idades diferentes de início de estímulo, 150, 170 e 200 dias. No sistema BEAR foram alojados quatro machos e as leitoas introduzidas nesta área permaneceram durante um período de 15 minutos, sendo os primeiros cinco minutos apenas em contato focinho com focinho e após um macho era solto na baia para uma estimulação por mais 10 minutos. No sistema BAIA o macho foi introduzido na baia de alojamento das fêmeas e tiveram 15 min de contato físico. Não houve diferença na porcentagem de entrada em estro em nenhum intervalo (10, 20, 30 e 45 dias) do início do estimulo e apresentação do estro quando comparados os dois sistemas, dentro de cada idade de início de estímulo. Porém a média do intervalo entre o início do estimulo e apresentação do estro foi significativamente menor quando o contato com o macho começou aos 200 dias em comparação com 150 e 170 dias de idade (14,6 ± 1,1 dias vs. 22,9 ± 1,4 e 20,0 ± 1,3 dias respectivamente, P <0,05). Da mesma forma, a proporção de fêmeas que atingiram a puberdade no período de 10 dias do início da exposição ao macho foi duas vezes maior em fêmeas que iniciaram o estímulo aos 200 dias de vida, quando comparadas com fêmeas que iniciaram os estímulos aos 150 e 170 dias. Em conclusão, os dados do presente estudo indicam que apesar da diferença de manejo de estimulação entre os sistemas BEAR e BAIA, não existe diferença na porcentagem de entrada em estro entre os dois sistemas. Além disso, é evidente que a sincronia da puberdade em fêmeas DB-DanBred é significativamente melhor quando a exposição ao macho é adiada para os 200 dias de idade. / The anticipation of puberty through stimulation of the boar can allow the first mating to be conducted earlier, thus reducing non-productive days of the female swine. In the present study, 417 DB-DanBred gilts were stimulated for 42 days in two treatments; BEAR, specific area of gilt exposure to different boars, and BAIA, traditional exposure of gilts in their own stall, at three different ages at the beginning of stimulation, 150, 170 and 200 days. In BEAR system four boars were housed and the gilts introduced in this area remained for 15 minutes, the first five minutes being just in snout to snout contact and then a boar was relaesed in the stall for stimulation for 10 more minutes. In BAIA system the boar was introduced in the lodging stall of the gilts and they had 15 minutes of physical contact. There was no difference in the estrus onset percentage at any interval (10, 20, 30 and 45 days) from the beginning of the stimulation and estrus presentation when comparing the two systems, within each age at the beginning of stimulation. However the average of the interval between the beginning of stimulation and presentation of estrus was significantly lower when the contact with the boar began at 200 days in comparison with 150 and 170 days of age (14.6 ± 1.1 days vs. 22.9 ± 1.4 and 20.0 ± 1.3 days respectively, P < 0.05). In the same way, the proportion of gilts that reached puberty within 10 days from the beginning of exposure to the boar was twice as high in gilts that began the stimulation at 200 days of age, when compared with gilts that began the stimulation at 150 and 170 days. In conclusion, the data of the present study indicate that, in spite of the stimulation management difference between BEAR and BAIA systems, a difference does not exist in the estrus onset percentage between the two systems. Furthermore, it is evident that timing of puberty in DB-DanBred gilts is significantly better when exposure to the boar is postponed to 200 days of age.

O objetivo do presente trabalho foi avaliar o desempenho reprodutivo de leitoas que foram selecionadas com baixos ganhos de peso diários (GPD) aos 160 dias de vida. Leitoas da linhagem Camborough® (n = 3301) foram alocadas em quatro grupos de acordo com o GPD no momento da seleção: G1 (n = 799) leitoas com GPD ≥480 a ≤ 530g/dia, G2 (n = 978) leitoas com >530 a ≤ 580g/dia, G3 (n = 916) fêmeas com >580 a ≤ 630g/dia e G4 (n = 608) leitoas com >630 a ≤ 810g/dia. Não foram encontradas diferenças na idade de início de estimulação com o macho e manifestação do primeiro estro entre as classes (P> 0,05). Na cobertura todos os grupos diferiram entre si sendo o G4 o grupo mais precoce e com maior peso (P< 0,05). O GPD da seleção até a cobertura diferiu entre as classes, sendo que o G1 teve maiores ganhos de peso quando comparado ao G3 e G4 respectivamente (P< 0,05). As médias de nascidos totais, nascidos vivos e intervalo desmame-estro não diferiram entre os grupos (P> 0,05). As remoções entre a seleção e a cobertura pós-desmame foram maiores no G1 e G2 quando comparados ao G4 (P< 0,05). Quando agrupados G1 e G2 e, a partir disso, formadas duas classes de acordo com o peso na cobertura (≤ 130 kg e > 130 kg), o grupo > 130 kg obteve 0,93 leitão a mais no primeiro parto (P< 0,05). Em conclusão, leitoas selecionadas com baixos GPDs (inferiores a 630g/dia) podem ser incorporadas no plantel sem gerar prejuízos no desempenho reprodutivo até o primeiro parto, desde que alcancem 130 kg no momento da cobertura. / The aim of this study was to evaluate the reproductive performance of gilts selected with low average daily gain (ADG) at 160 days of age. Camborough® gilts (n = 3301) were allocated into four groups according to ADG at selection: G1 (n = 799) represented the group of gilts with ADG ≥480-≤ 530g/day, G2 (n = 978) corresponded to gilts with >530- ≤ 580g/day, G3 (n = 916) represented the gilts with > 580-≤ 630g/day and G4 (n = 608) gilts with > 630-≤ 810g/day. There were no differences in the age at the onset of boar exposure and first estrus expression among groups (P> 0.05). Age and weight at insemination were different (P< 0.05) among groups. Gilts from G4 were inseminated earlier and heavier. The ADG from selection until mating was different among the groups, and G1 had greater weight gains when compared to G3 and G4 (P< 0.05). Total number of piglets born, number of piglets born alive and weaning to oestrus interval were not different among classes (P> 0.05). The removals since the selection until post-weaning insemination were higher in G1 and G2 when compared to G4 (P< 0.05). When gilts from G1 and G2 were grouped and categorized into two classes according to the weight at insemination (≤ 130 kg and > 130 kg), the heavier group (> 130 kg) had an increasing of 0.93 total born piglets at first farrowing (P< 0.05). The results of this study suggest that gilts selected with low ADG (less than 630g/day) could be incorporated into the breeding herd with no reproductive performance losses until the first farrowing if they reach 130 kg at insemination.

O período de puberdade, em equinos, define-se pela aparição de espermatozóides maduros no ejaculado de animais jovens, bem como a maturação das funções endócrinas. Os espermatozóides precisam passar por um processo de maturação no epidídimo. Para se obter marcadores moleculares que permitam estabelecer a fertilidade de um garanhão, é necessário um melhor conhecimento das proteínas presentes em espermatozóides imaturos e maduros, uma das quais é a PDI (proteína dissulfeto-isomerase). A PDI foi descrita também como importante marcador de fertilidade no plasma seminal e espermatozóides de diversas espécies. O objetivo deste trabalho foi identificar a presença da PDI no epidídimo equino durante a puberdade, e quantificá-la no fluido e espermatozóides epididimários. Visou verificar a presença da PDI no plasma seminal e espermatozóides ejaculados, em garanhões férteis e subférteis. Foram realizados dois experimentos: Experimento 1: utilizou-se 22 equinos Crioulos saudáveis, castrados e divididos em três grupos: G1: potros até 24 meses, G2: de 25-36 meses e G3: a partir de 36 meses. Imediatamente após a castração, foi efetuada a dissecação do epidídimo para a coleta de fluido epididimário, o qual foi separado dos espermatozoides por centrifugação a 800 g por 10minutos. O sobrenadante foi removido, e criopreservado a -196º C. Os espermatozóides foram ressuspendidos em PBS e armazenados a -196º C. Para a dosagem de proteína das amostras, utilizou-se o método de Kit BCA espectrofotômetro e a eletroforese em gel de poliacrilamida a 10% SDS- Page.Para imunodetecção das proteínas, efetuou-se a incubação do anticorpo primário específico por no mínimo, 6 horas a 4º C, e incubação com anticorpo secundário conjugado com peroxidase anti-igG de camundongo ou anti-IgG de rato. Para a visualização das bandas foi utilizado o Kit de ECL em filmes de raio-X, e as bandas quantificadas pela utilização do software livre ImageJ. A PDI foi identificada nos três grupos avaliados na análise proteômica do fluido , e espermatozoides epididimários, sendo sua quantidade inferior no G1 em relação aos grupos dois (2) e três (3). Em conclusão, a expressão da PDI nos espermatozóides e fluido epididimários de potros castrados cirurgicamente, aumenta conforme o animal atinge a maturidade sexual. Experimento 2- Utilizou-se 12 garanhões adultos que já haviam sido submetidos à pelo menos duas temporadas de monta na região da Campanha do Rio Grande do Sul, efetuando-se quatro (4) coletas de cada garanhão, fora da estação de monta, respeitando-se um intervalo de 48h entre coletas. Imediatamente após a coleta, analisou-se motilidade, vigor e concentração com auxílio de microscópio óptico e retirou-se uma alíquota de sêmen para avaliação das patologias espermáticas. A partir dos dados obtidos, os garanhões foram divididos em dois grupos: Grupo 1: motilidade não inferior a 70%, tendo-se uma média de 76,04±5,89% e histórico reprodutivo de temporadas anteriores com índice de prenhez mínimo por temporada de 80%. Grupo 2: motilidade igual ou inferior a 30%, com média de 11,83±11,21%, e histórico reprodutivo de temporadas anteriores de índices de prenhez inferiores a 35%. Efetuadas as análises, as mostras foram centrifugadas a 800 g por 10 minutos para separar o plasma seminal, de mesma forma que no Exp. 1. Os pellets passaram por ressuspensão em PBS gelado e posteriormente armazenados a -196º C. As amostras foram submetidas à dosagem das proteínas, para serem submetidas à eletroforese, utilizando-se géis de poliacrilamida a 10% SDS-Page.Para imunodetecção das proteínas, efetuou-se a incubação do anticorpo primário específico por no mínimo, 6 horas a 4º C, e incubação com anticorpo secundário conjugado com peroxidase anti-igG de camundongo ou anti-IgG de rato. Na visualização das bandas foi utilizado o Kit de ECL em filmes de raio-X, e as bandas foram quantificadas pela utilização do software livre Image J. Ao analisar a presença da PDI no plasma seminal dos garanhões, verificou-se sua expressão em ambos os grupos; porém não houve diferença de expressão da PDI entre eles(p˂0,05). Não houve também relação da PDI com motilidade, nem com a concentração espermática. Considerando os dados obtidos no presente experimento, não foi possível relacionar a PDI com qualidade espermática e assim considerá-la como um potencial marcador de fertilidade em equinos. São necessários mais estudos que possam envolver outros fatores moleculares inclusive as demais proteínas da família das PDIs. / Puberty, in the equine species, may be defined by the appearance of mature spermatozoa in young animals´ ejaculates, as well as endocrine function maturation. One of the proteins found in immature and mature spermatozoa is PDI (protein dissulfide-isomerase). PDI was also described as an important fertility marker both in seminal plasma and sperm of many species. is responsible for rearranging dissulfide bonds, necessary for sperm adhesion proteins to link to the oocyte. The aim of this work was to identify PDI in equine epididymis during puberty, and quantify it in epididymal sperm and fluid of fertile and subfertile sperm. Two experiments were performed. Experiment 1-twenty-two healthy Crioulo colts were surgically castrated, and divided in three groups: G1: until 24 months; G2: from 25-36 months and G3: more than 36 months. Immediately after castration, testicles were measured, weighed, and the epididymis was dissecated for epididymal fluid collection, which was centrifuged at 800 g for 10minutes to separate epididymal fluid from sperm. Supernatant was removed, and cryopreserved at -196º C. Sperm were re-suspended in PBS and stored at -196º C. Protein dosing of samples was performed with BCA Kit and electrophoresis at 10% SDS-Page. To detect proteins, primary antibody was incubated for at least 6 hours at 4º C, and then incubation with secondary antibody conjugated with anti-mouse IgG or anti-rat IgG. To see bands, ECL Kit in X-ray films was used, and the bands quantified with softwareImageJ. In the three groups PDI was identified, in epididymal fluid and epididymal sperm, but in smaller amount in G1 when compared with Groups 2 and 3. In conclusion, expression of PDI in epididymal fluid and sperm of surgically castrated colts, increases as the animal attains sexual maturity. Experiment 2- The aim of this work was to verify the presence of PDI in equine seminal plasma and sperm, quantify it and to compare its expression on seminal plasma from fertile and subfertile stallions. Twelve adult stallions with at least two breeding season were used. For the study, four collections of each animal were performed. Immediately after collection, analysis of motility, velocity, concentration and sperm morphology were performed. Stallions were divided in two groups, according to the semen analysis and previous breeding history: Group 1: motility greater than 70% and previous history of pregnancy rates higher than 80%; Group 2: sperm motility less or equal than 30% and breeding history of less than 35% of pregnacy per season. After the analysis, samples were centrifuged at 800 g/10minutes to remove seminal plasma. Samples were prepared as described in Exp. 1. The expression of PDI in seminal plasma was seen in both groups, but with no statistical difference between them. There was no correlation of PDI with sperm motility or concentration. According to these findings, it is not possible to consider PDI as a fertility marker in stallions. More research is needed, involving other mollecular factors, including other PDIs family proteins.

This thesis focuses on relationship between specific learning disorders and conduct disorders in puberty. The theoretical part explains the basic terms apearing in the thesis such as specific learning disorders, conduct disorders, puberty and prevention of conduct disorder formation. It presents Czech and foreign research which have already been done in this and related areas. The empirical part uses a quantitative method to measure anxiety and occurrence of conduct disorders in second grade students in 2. ZŠ in Třeboň and ZŠ Londýnská in Prague. Data gained from children with specific learning disorder are compared with data from children without disorder.