La cistectomía radical es el tratamiento de elección en pacientes con carcinoma de vejiga localmente avanzado. Sin embargo, más del 50% de los pacientes presentan recurrencias y fallecen por la enfermedad. La quimioterapia neoadyuvante ha demostrado un beneficio modesto en estos pacientes, más significativo en pacientes con respuesta patológica completa tras el tratamiento. Sin embargo, aun no se ha identificado en que pacientes se obtiene un mayor beneficio. El análisis de genes que participan en las vías reparadoras del ADN puede ser útil para predecir la quimio sensibilidad a regímenes que contienen platino. BRCA1 tiene un papel importante y su baja expresión se ha asociado a mayor supervivencia en pacientes con cáncer de ovario y pulmón. RAP80 puede modular su efecto. AEG1 puede inducir la expresión de BRCA1 y causar quimioresistencia activando las vías PI3K/Akt y NF-KBeta. Pacientes y métodos Se analizaron en forma retrospectiva 126 pacientes con carcinoma de vejiga localmente avanzado (T2-4N0/+) en el Hospital Germans Trias i Pujol e Institut Catalá d' Oncología, entre 1990 y 2011, correlacionando variables clínicas, patológicas y moleculares con los resultados de los pacientes, y se analizaron los niveles de expresión de ARNm de BRCA1, RAP80 y AEG-1 mediante qRT-PCR en las biopsias de tejido tumoral disponible y su relación con la supervivencia y respuesta al tratamiento. Resultados La mayoría de los pacientes eran hombres, con una edad mediana de 64 años (35-80). El 80% presentó enfermedad localmente avanzada y un 20% enfermedad ganglionar positiva. Tras una mediana de 3 ciclos de quimioterapia basada en cisplatino, se practicó cistectomía radical en 118 pacientes, siendo completa en el 85% de ellos. Se registró una respuesta patológica significativa (pT0-1) en 52 pacientes (44%), incluyendo 28 con respuesta patológica completa (pT0) La supervivencia global mediana de la serie fue de 52 meses. (95% IC, 34.3-69.6) El estadio clínico, la resección completa, la linfadenectomía superior a 7, el TNM patológico y el tamaño tumoral fueron pronósticos de supervivencia global (SG) y libre de enfermedad en el análisis univariante, y los niveles de expresión de BRCA1 en el subgrupo de pacientes sin enfermedad ganglionar. La supervivencia mediana fue de 168 meses en aquellos con niveles bajos de expresión de BRCA1 y de 45 meses en aquellos con niveles altos (p=0.03). La respuesta patológica fue completa en 38% pacientes con niveles bajos e intermedios de BRCA1, comparada con 5% en aquellos con niveles altos (p=0.006). No se hallaron diferencias al correlacionar los niveles de expresión de ARNm de RAP80 y AEG1 con la supervivencia y con la respuesta a la quimioterapia neoadyuvante. Conclusiones La quimioterapia neoadyuvante es un tratamiento adecuado en pacientes con enfermedad localmente avanzada y existen factores pronósticos clínicos y patológicos que nos permiten conocer mejor la evolución de los pacientes. Los niveles de expresión de BRCA1 y la invasión linfovascular en la RTU fueron factores pronósticos independientes de SG. Los niveles de expresión de BRCA1 se asociaron con una mejor respuesta patológica y pueden predecir la eficacia a quimioterapia neoadyuvante basada en cisplatino. Se requieren estudios con mayor número de pacientes para elucidar el papel de otros marcadores, como RAP80 y AEG1. / In patients with muscle-invasive bladder cancer, radical cystectomy with bilateral pelvic lymph node dissection remains the mainstay of treatment. About 50% of patients with muscle-invasive disease will develop metastatic disease even after surgery. Neoadjuvant chemotherapy has shown a modest benefit in muscle-invasive bladder cancer patients; however, the subset of patients most likely to benefit has not been identified. The analysis of genetic markers involved in DNA repair pathways could be useful to predict chemosensivity to cisplatin-based regimens. BRCA1 plays a central role in DNA repair pathways and low BRCA1 expression has been associated with sensitivity to cisplatin and longer survival in lung and ovarian cancer patients. RAP80 is an interacting protein that form complexes with BRCA1 and could modulate the effect of BRCA1. AEG1 can induce BRCA1 expression and cause chemoresistance by activating PI3K/Akt and NF-KB pathways. Patients and methods We assessed 126 patients with locally advanced bladder cancer treated with neoadjuvant cisplatin-based chemotherapy in Germans Trias i Pujol Hospital between 1990 and 2011. Clinical, pathological and molecular factors were analyzed for correlation with median survival and pathological response. Gene expression levels of BRCA1, RAP80 and AEG1 were quantified by real-time quantitative PCR from paraffin-embedded pre-treatment tumor samples obtained by transurethral resection and correlated with median survival and pathological response. Results Most patients were men with a median age of 64 years (35-80). 80% had locally advanced disease and 20% node-positive disease. After a median of 3 cycles of chemotherapy, cystectomy was performed in 118 p (85%). There was a significant pathological response (pT0-1) in 52 patients (44%), including 28 with complete pathological response (pT0).The median overall survival was 52 months (95% CI, 34.3-69.6). Clinical stage, complete resection, lymphovascular invasion in transurethral resection, >7 nodes removed, pathological stage and the tumor size were predictive of overall survival and disease free survival in univariate analysis, and expression levels of BRCA1 mRNA levels in the subgroup of patients without nodal disease. Median survival was 168 months in patients with low/intermediate levels and 45 months in patients with high BRCA1 levels (P = 0.03). A complete pathological response (pT0) was attained in 38% (16 of 42) of patients with low/intermediate BRCA1 levels compared with 5% (1 of 20) of patients with high BRCA1 levels (P = 0.006). No differences were observed according to RAP80 and AEG1 mRNA levels. Conclusions Neoadjuvant chemotherapy is an established standard, improving overall survival in patients with locally advanced bladder cancer, and prognostic factors allow us to better understand the patients’ evolution. BRCA1 expression levels and lymphovascular invasion emerged as independent prognostic factors. BRCA1 expression may predict the efficacy of cisplatin-based neoadjuvant chemotherapy and may help to customize therapy in bladder cancer patients. Further studies with larger numbers of patients are warranted to elucidate the role of other molecular markers, including AEG1 and RAP80 in this setting.

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:37Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-11-01Bitstream added on 2014-08-13T18:01:06Z : No. of bitstreams: 1 000739118_20141101.pdf: 517878 bytes, checksum: 4a69194af4a75d682d3b9a625e2ead90 (MD5) / Com intuito de desenvolver um escore preditor da resposta quimioterápica neoadjuvante, propusemos a cintilografia de mamas com sestamibi-99mTc, associada a fatores prognósticos como método preditor. Foram estudadas 65 pacientes com diagnóstico de carcinoma ductal submetidas à cintilografia de mamas préquimioterapia neoadjuvante (QT neo), painel imunohistoquímico e avaliação do espécime cirúrgico. A análise cintilográfica compreendeu a elaboração do índice de concentração, com áreas de interesse com contagens/pixels geradas sobre a lesão e na mama contralateral e cálculo da área tumoral. A analise estatística foi realizada para o grupo total de pacientes e separadamente para os grupos de esquema quimioterápico AC e ACT. Construiu-se um modelo de regressão logística utilizando como variáveis, idade, índice, localização do tumor, painel imunohistoquímico e comprometimento axilar, obtendo-se valores preditos que em função da resposta patológica completa foi elaborada uma curva ROC, para conseguir um escore de maior sensibilidade e especificidade. A área da curva ROC foi significativa para todos os grupos e o escore obtido foi de 0,728, 0,834 e 0,667 para o grupos total, AC e ACT, respectivamente. A sensibilidade, especificidade e valores preditivos positivo e negativo foram 81,6%, 81,2%, 93% e 59%, para o grupo total, 75,8%, 90%, 96,1% e 52,9%, para o grupo AC e 81,3%, 83,3%, 92,8% e 62,5%, para o grupo ACT. O escore preditor multifatorial é um método eficaz na predição da resposta quimioterápica neoadjuvante, uma vez, que reflete a biologia do tumor frente ao esquema quimioterápico, identificando precocemente as pacientes que não se beneficiariam deste tratamento / In order to develop a prediction score of neoadjuvant chemotherapy response, we proposed the breast scintigraphy with 99mTc-sestamibi associated prognostic factors as predictor method. We studied 65 patients diagnosed with ductal carcinoma undergoing breast scintigraphy before neoadjuvant chemotherapy (QT neo), immunohistochemical panel and surgical specimens. The scintigraphic analysis included the development of uptake index made by counts/pixels in identical region of interest under tumor lesion and the reference region in the contra lateral breast and area calculation. The statistical analysis was performed for the total group of patients and separately for groups of AC chemotherapy regimen and ACT. Built a logistic regression model using variables, age, index, tumor location, immunohistochemical panel and axillary nodes, obtaining values predicted according to the complete pathologic response, ROC curve was drawn up, to get score a higher sensitivity and specificity. The area under the ROC curve was significant for all groups and the score obtained was 0.728, 0.834 and 0.667 for the groups total, AC and ACT, respectively. The sensitivity, specificity, and positive and negative predictive values were 81.6%, 81.2%, 93% and 59% for the total group, 75.8%, 90%, 96.1% and 52.9%, for the AC group and 81.3%, 83.3%, 92.8% and 62.5% for the ACT group. The multifactorial prediction score is an effective method for the prediction of neoadjuvant chemotherapy response, since that reflects the biology of the tumor against chemotherapy regimen, early identification of patients who would not benefit from this treatment

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:34Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-06-23Bitstream added on 2014-06-13T20:30:24Z : No. of bitstreams: 1 facina_vb_me_arafcf.pdf: 1022448 bytes, checksum: fccac3737fb0a4e1993b48dc9b30ee8f (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O câncer é um importante problema de saúde pública mundial e, também, em países em desenvolvimento, como o Brasil. Dentre os tipos mais frequentes entre as mulheres brasileiras, têm-se os cânceres de mama, de colo de útero e de ovário. Nesta pesquisa foram estudados aspectos relativos à alimentação e nutrição de mulheres acometidas por estes cânceres ginecológicos, com o objetivo de avaliar o efeito da quimioterapia na evolução do estado nutricional destas mulheres considerando os sintomas gastrintestinais, o consumo alimentar e as alterações nos exames bioquímicos. Participaram do estudo 29 mulheres, sendo 22 acometidas pelo câncer de mama, 4 pelo câncer de ovário e 3 pelo o de colo de útero. Para tanto, no 1º, 3º e 5º ciclos de quimioterapia foram realizadas entrevistas nas quais as pacientes eram inquiridas sobre intolerâncias alimentares, sintomas gastrintestinais e aplicada a Avaliação Subjetiva Global Produzida Pelo Paciente (ASG-PPP).O consumo alimentar foi avaliado pelo recordatório do consumo de 24 horas, no dia que precedeu a quimioterapia e no dia do procedimento. No dia da quimioterapia foi realizada ainda a avaliação antropométrica. Os dados de exames bioquímicos e de protocolos de quimioterapia foram coletados dos prontuários. Como resultado se obteve que durante a quimioterapia, os sintomas mais frequentes foram: náusea, disgeusia, obstipação, anorexia, diarreia e mucosite. O consumo alimentar sofreu redução em relação à quantidade de energia e nutrientes ingeridos no período em que a paciente realizava a sessão quimioterápica em relação ao período que antecedia a esta. Houve pequena, mas significativa redução na média geral do peso corporal do primeiro para o terceiro ciclo de quimioterapia. No entanto, a maioria das mulheres com câncer de mama ganhou peso... / Cancer is an important public health problem worldwide, and also in developing countries like Brazil. Among the most frequent type affecting Brazilian women, there are cancers of breast, cervical and ovarian. This research studies the aspects related to feeding and nutrition of women affected by these gynecological cancers, with the goal to assess the effect of chemotherapy on the evolution of the nutritional status of these women considering gastrointestinal symptoms, food consumption and changes in biochemical tests. The study included 29 women, 22 affected by breast cancer, 4 by ovarian cancer, and 3 had cervical cancer. Interviews were conducted, on first, third and fifth chemotherapy protocols, in which patients were asked about food intolerance, gastrointestinal symptoms and applied Subjective Global Assessment Produced by the Patient. Dietary intake was assessed by recall of consumption of 24 hours on the day prior to chemotherapy and the day of the procedure. On the day of chemotherapy was also evaluation anthropometric. The data from biochemical and chemotherapy protocols were collected from medical records. As a result it was found that during chemotherapy, being the most common symptoms were: nausea, dysgeusia, constipation, anorexia, diarrhea and mucositis. Food consumption reduced in relation to the amount of energy and nutrients consumed in the period in which the patient was a chemotherapy session in relation to the period preceding this. There was a small but significant reduction in overall mean body weight from first to third cycle of chemotherapy. However, most women with breast cancer gained weight during the procedure. There was no association between frequency of symptoms with the anthropometric indicators, but rather with the consumption of macronutrients and erythrocytes. The ASG-PPP showed... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000429360-Texto+Completo-0.pdf: 15431687 bytes, checksum: 7e0ca619be7df1072705126b86e279cf (MD5) Previous issue date: 2011 / Introduction: Breast cancer is the most common malignancy in women worldwide and is the second type of cancer that most affects the population. Women with breast cancer adjuvant chemotherapy have a progressive tendency to gain weight. This weight gain can lead to increased risk of recurrence of cancer, and chronic diseases related to obesity such as cardiovascular disease and diabetes. Objective: To evaluate the changes of nutritional status of women diagnosed with breast cancer during adjuvant chemotherapy with combination chemotherapy at a university hospital. Methods: This is a prospective cohort study. The study population comprised 45 patients on adjuvant chemotherapy in the Chemotherapy Unit at the Hospital São Lucas - PUC / RS. Patients were evaluated at baseline and end of treatment by two structured interviews, which were verified data on the patients, measured weight and height and used a 24-hour dietary recall, to evaluate the dietary intake of patients. Categorical data were expressed as counts and percentages. The analysis was conducted by Student t test (quantitative data) and Fisher exact (categorical data). The level of significance was set at = 0. 05.Results and Conclusion: The patients studied increased their weight during chemotherapy, a significant difference between initial weight and final period (p <0. 016). This weight gain consequently reflected in increased body mass index (p <0. 018). Regarding the classification of nutritional status, the changes observed were not significant. In relation to food intake, we observed a statistically significant increase over the period studied, but the intake values remained within the dietary recommendations. / INTRODUÇÃO: O câncer de mama é a malignidade mais comum em mulheres no mundo e é o segundo tipo de câncer que mais atinge a população brasileira. Mulheres com câncer de mama em tratamento quimioterápico adjuvante apresentam uma tendência progressiva ao ganho de peso. Este aumento ponderal pode levar ao risco aumentado de recorrência da neoplasia, e de desenvolvimento de doenças crônicas relacionadas à obesidade, como a doença cardiovascular e a diabetes. OBJETIVO: Avaliar a modificação do estado nutricional de mulheres com diagnóstico de neoplasia mamária durante o tratamento quimioterápico adjuvante com poliquimioterapia em um hospital universitário. MATERIAL E MÉTODOS: Trata-se de um estudo de coorte prospectivo. A população estudada foi composta por 45 pacientes em tratamento quimioterápico adjuvante na Unidade de Quimioterapia do Hospital São Lucas – PUC/RS. As pacientes foram avaliadas no período inicial e final do tratamento através de duas entrevistas estruturadas, onde foram verificados dados de identificação das pacientes, aferidos peso e altura e aplicado um inquérito recordatório de 24h, visando avaliar a ingestão alimentar das pacientes. Os dados categóricos foram expressos por contagens e percentuais. A análise univariada foi conduzida por teste t de Student (dados quantitativos) e exato de Fisher (dados categóricos). O nível de significância adotado foi de =0,05.RESULTADOS E CONCLUSÃO: As pacientes estudadas aumentaram o peso durante o tratamento quimioterápico, com diferença significativa entre o peso inicial e final do período (p<0,016). Este aumento de peso consequentemente refletiu no aumento do índice de massa corporal (p<0,018). Quanto à classificação do estado nutricional, as modificações observadas não foram expressivas. Em relação à ingestão alimentar, observou-se aumento com significância estatística ao longo do período estudado, mas os valores de ingestão permaneceram dentro das recomendações nutricionais.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000439149-Texto+Completo-0.pdf: 1490829 bytes, checksum: bd616615ee5265db0a960d6f77c8581d (MD5) Previous issue date: 2012 / Glioblastoma multiforme (GMB) is the most malignant and common type of all astrocytic tumours. Current standard treatment for GBM patients involves maximum surgical resection of the tumour, followed by radiotherapy and chemotherapy, usually containing the alkylating agent Temozolomide (TMZ). Despite this aggressive combination therapy, the survival rate of GBM patients is still low. This work consisted in investigating the cytotoxic effects of Akt-inhibition by MK-2206 with irradiation (RT) and TMZ on in vitro human malignant glioma. Seven malignant glioma cell lines were cultured and tested for clonogenic survival, invasion inhibition, tumour spheroid growth and proliferation. The Akt-inhibitor MK-2206 and TMZ were added at different time treatments and in varying doses. Cultures were irradiated with single dose and with fractionated γ-irradiation. Cellular modulation of Akt and p-Akt were assessed by Western blot analysis. MK-2206 reduced the levels of phospho- Akt key protein in the PI3Kinase-Akt pathway, decreased cell survival, and inhibited invasion, proliferation and cell growth. The combination of MK-2206 and RT lead to enhanced inhibition of cell proliferation and invasion, which is not observed with RT alone. The radioenhancing effect of MK-2206 was most striking in inhibition of spheroid volume growth by fractionated RT; the radiosensitizing effect of MK-2206 was stronger than that of TMZ. MK-2206 enhanced the in vitro effects of RT and TMZ in terms of decreased cell survival, invasion, proliferation and growth in malignant glioma. Effects could be ascribed to inhibition of PI3K-Akt pathway. / O Glioblastoma multiforme (GBM) é o tipo mais maligno e mais comum de todos tumores astrocíticos. O tratamento atual para pacientes de GBM envolve máxima remoção cirúrgica, seguida de radio e quimioterapia, normalmente com o agente alquilante Temozolamida (TMZ). Apesar da agressividade da terapia combinada, o tempo de sobrevivência dos pacientes ainda é baixo. Este trabalho procurou investigar os efeitos citotóxicos do inibidor de Akt MK-2206 em combinação com irradiação (RT) e TMZ em um painel de células de gliomas humanos. Sete linhagens de glioma foram cultivadas e testadas em ensaio de sobrevivência clonogênica, inibição de invasão, e modelos de proliferação e crescimento de volume em esferóides. O inibidor MK-2206 e TMZ foram adicionados em diferentes tempos de tratamento e diferentes doses. As culturas foram irradiadas com doses únicas ou em terapias fracionadas com irradiação γ. A modulação celular de Akt e fosfo-Akt foi checada via Western Blot. O composto MK-2206 reduziu a fosforilação da proteína chave Akt na via PI3K, diminuindo a sobrevivência celular e inibindo invasão, proliferação e crescimento celular. A combinação de MK-2206 com RT levou a uma maior inibição de invasão e proliferação, o que não é observado somente com a RT. O efeito radiosensível de MK-2206 foi ainda maior na inibição do volume dos esferóides em terapia combinada com RT fracionada, sendo ainda maior do que o efeito combinado com TMZ. MK-2206 aumentou os efeitos in vitro de RT e TMZ em termos de redução de sobrevivência celular, invasão, proliferação e crescimento celular em gliomas malignos. Os efeitos podem ser atribuídos a inibição da via PI3KAkt.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:05:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000445040-Texto+Completo-0.pdf: 2039522 bytes, checksum: 2f433c611b99e5b28cbd56ef7aed5bb1 (MD5) Previous issue date: 2010 / Rationale: Comorbidity between difficult-to-treat epilepsies and ADHD is high, but because of concerns with the use of stimulants in this population, there is no data on the possible impact of such treatment. Objective: We studied the effect of methylphenidate in the quality of life of children and adolescents with DSM-IV criteria for ADHD and difficult-to-treat epilepsies. Methods: Open label, non-controlled trial, with intention-to-treat analysis following 30 patients for 6 months. Subjects received methylphenidate following 3 months of baseline, during which antiepileptic drugs (AEDs) were adjusted and epilepsy, ADHD and quality of life variables were assessed. Multivariate regression analysis identified the main variables correlated with outcome. Results: Only one patient withdrew because of seizure worsening. Following methylphenidate introduction, reaching doses of 0. 40 - 0. 50 mg/kg/day, a marked improvement in quality of life scores and a significant reduction in seizure frequency and severity were observed. Female sex, reduction of core ADHD symptom burden and tolerability to adequate doses of methylphenidate correlated with quality of life scores. Conclusion: These preliminary data suggest that methylphenidate treatment is safe and effective to patients with ADHD and difficult-to-treat epilepsies and has a positive impact on quality of life scores. / Fundamentos - A associação entre epilepsia e TDAH é altamente prevalente comprometendo a Qualidade de Vida de crianças e adolescentes com crises epilépticas. Metilfenidato – Ritalina@ - é o medicamento de uso consagrado para o Transtorno de Déficit de Atenção/Hiperatividade com 80% de eficácia em crianças com TDAH com ou sem epilepsia. Questiona-se a possibilidade do MFD diminuir o limiar convulsivo dos pacientes epilépticos. Objetivos - Avaliar a influência do uso de Metilfenidato sobre a Qualidade de Vida e o perfil das crises epilépticas em crianças e adolescentes com epilepsias de difícil controle. Pacientes e Métodos - Foi realizado um ensaio clínico aberto, não randomizado, com 30 crianças e adolescentes do Ambulatório de Neuro-Epilepsias Graves apresentando crises de difícil controle e TDAH. Foram avaliadas quanto à Qualidade de Vida, sintomas de TDAH e perfil das crises antes e após o uso de MFD. Houve um ajuste/troca de FAE somente no tempo -3 (baseline). Metilfenidato foi iniciado após estes 3 meses (T 0) sem outras modificações nos FAE com avaliações 1 mês e 3 meses após. Foram avaliados também eventos adversos ao uso do MFD. Resultados - Ocorreu melhora da QV em todos os momentos avaliados: T -3 (baseline) a T0, T0 a T+1 e T+1 a T+3. A melhora ocorrida entre T-3 e T0, momento em que foi realizado o ajuste de FAE, não foi estatisticamente significativa. Nos tempos subseqüentes, com o uso de MFD, as variações de QV ocorridas apresentaram significância estatística. Ocorreu melhora da qualidade de vida com significância estatística em indivíduos do sexo feminino, os que apresentaram início mais tardio da doença e naqueles em houve maior diminuição dos escores de déficit de atenção. Os pacientes com crises generalizadas apresentaram piores índices de QV. Não houve associação estatisticamente significativa entre a variação da QV com a freqüência e/ou gravidade das crises, idade, duração da doença, QI, ocorrência de eventos adversos. Conclusões - Houve melhora da QV de pacientes epilépticos de difícil controle tratados com MFD sem que houvesse piora na freqüência ou gravidade das crises. Condizente com a literatura também não verificamos a presença de efeitos colaterais de gravidade significativa ao MFD. Estes dados preliminares sugerem a possibilidade da utilização deste fármaco no tratamento de crianças e adolescentes com crises epilépticas de difícil controle com a conseqüente melhora de QV destes pacientes.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:41:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000438124-Texto+Completo-0.pdf: 1241897 bytes, checksum: 68c450ddba15c588f04067f7bd75dae9 (MD5) Previous issue date: 2012 / Glioblastoma multiforme (GBM) is the most aggressive tumor of the CNS and most deadly primary tumors. Despite the malignant gliomas are generally treated with radiotherapy, often they exhibit a significant radioresistance that limits the treatment success. It can be postulated that molecular changes commonly observed in these tumors contribute to this resistance. The nucleotide ATP is an important signaling molecule in CNS and it is a selective P2X7 purinergic receptor (P2X7R) ligand at high concentrations. Some studies have reported that P2X7R is responsible for ATP-induced cell death in various cell types, but some human glioma cells were resistant to death induced by ATP. In addition to ATP resistance, patients with GBM develop spontaneous antitumor immune responses. These studies show the requirement for an exogenous induction of the immune system to generate an antitumor response. IL-17 is a pro-inflammatory cytokine and its role in cancer is already unknown. Herein, we first aimed to characterize a radiosensitive human glioma cell line for sensitivity to ATP and to investigate whether activation of the P2X7R could be involved in the death of this cell line. Furthermore, aimed to elucidate the IL-17 receptor susceptibility to irradiation, as well as, elucidate the effect of IL-17 and a possible interaction between this cytokine and P2X7R in human glioma cells. The human glioma cell lines U-138 MG and U-251 MG were resistant to death when treated with either ATP (5 mM) or BzATP (100 μM), a selective P2X7R agonist, whereas in the radiosensitive M059J glioma cell line, the high ATP (5 mM) or BzATP (100 μM), significantly diminished the cell viability (32. 4% ± 4. 1 and 24. 6% ± 4. 0, respectively).The M059J lineage expresses significantly higher P2X7R levels when compared to the U-138 MG and U-251 cell lines (0. 40 ± 0. 00; 0. 28 ± 0. 01 and 0. 31 ± 0. 01, respectively) and irradiation upregulated P2X7R expression in all lineages. Additionally, the selective P2X7R antagonist A740003 (10 µM) significantly decreased the cell death caused by irradiation. We provided novel evidence indicating that M059J human glioma cell line is ATP-P2X7R sensitive, pointing out the relevance of the purinergic P2X7R in glioma radiosensitivity. The IL-17 receptor was significantly more expressed after irradiation (2 Gy), showing a possible participation of the IL-17/R on the irradiation susceptibility. The treatment with IL-17 (10 ng/ml) diminished approximately 62% the human glioma cell lines viability. Other preliminary result showed that the P2X7R antagonist was able to partially reverse the toxicity caused by IL-17 in these cell lines. Our data show an antitumor role of this cytokine and corroborate to the idea of a possible interaction between IL-17/P2X7R. This work prospects for studies to be conducted to better understanding the action of IL-17 in gliomas and interaction IL-17/P2X7R. / O glioblastoma multiforma (GBM) é considerado o mais agressivo tumor do sistema nervoso central (SNC), e o mais letal entre os tumores primários. Apesar dos gliomas malignos serem geralmente tratados com radioterapia, muitas vezes estes exibem uma significativa radioresistência que limita o sucesso do tratamento. Pode-se postular que mudanças moleculares comuns observadas nestes tumores contribuem para essa resistência. O nucleotídeo ATP é uma importante molécula de sinalização no SNC e um ligante seletivo do receptor purinérgico P2X7 (P2X7R) em altas concentrações. Estudos mostram que o P2X7R é responsável pela morte induzida pelo ATP em vários tipos de células, porém, algumas células de glioma humano mostram-se resistentes à morte induzida pelo ATP. Além da resistência ao ATP, pacientes com GBM espontaneamente desenvolvem resistência a respostas imunes antitumorais. Estudos levantam a necessidade de uma indução exógena do sistema imunológico a fim de gerar uma resposta antitumoral. A IL-17 é um citocina pró-inflamatória e seu papel no câncer ainda é desconhecido. O presente trabalho primeiramente objetivou caracterizar uma linhagem de glioma humano radiossensível quanto à sensibilidade ao ATP e investigar se a ativação do P2X7R poderia estar envolvida na morte destas células. Além disso, visou elucidar a susceptibilidade do receptor da IL-17 à radioterapia, bem como, o efeito da IL-17 e uma possível interação entre esta citocina e o P2X7R em células de glioma humano. As linhagens celulares de glioma humano U-138 MG e U-251 MG mostraram-se resistentes à morte, quando tratadas com ATP (5 mM) ou BzATP (100 µM), agonista seletivo do P2X7R. Na linhagem de glioma radiossensível M059J, o tratamento com alta concentração de ATP (5 mM) ou com BzATP (100 µM), diminuiram significativamente a viabilidade celular (32,4% ± 4,1 e 24,6 ± 4,0%, respectivamente).A linhagem M059J expressou níveis significativamente maiores do P2X7R quando comparada com as linhagens celulares U-138 MG e U-251 MG (0. 40 ± 0. 00; 0. 28 ± 0. 01 e 0. 31 ± 0. 01, respectivamente) e a irradiação aumentou a expressão do P2X7R em todas linhagens. Além disso, o antagonista seletivo do P2X7R, A740003 (10 μM), diminuiu significativamente a morte celular causada pela irradiação. Nesta primeira parte do trabalho, fornecemos novas evidências indicando que a linhagem de glioma humano M059J é sensível ao ATP-P2X7R, apontando a relevância do P2X7R na radiossensibilidade do glioma. Na segunda parte deste trabalho, observou-se que o receptor da IL-17 foi significativamente mais expresso após a irradiação (2 Gy) mostrando uma possível participação da via IL-17/R na susceptibilidade à irradiação. O tratamento com a IL-17 (10 ng/ml) diminuiu em aproximadamente 62% a viablidade de linhagens celulares U-138 MG e M059J de glioma humano. Outros resultados preliminares mostraram que o antagonista do P2X7R foi capaz de reverter parcialmente a toxicidade causada pela IL-17 nestas linhagens. Nossos dados demonstram um papel antitumoral desta citocina e corroboram com a idéia de uma possível interação entre a IL-17/P2X7R. Este trabalho deixa perspectivas de estudos a serem realizados para melhor compreender a ação da IL-17 nos gliomas e a interação IL-17/P2X7R.

Resumo:A neoplasia mamária canina (NMC) é o tipo de neoplasia que mais comumente afeta cadelas não castradas. A terapia para a NMC é um desafio já que não são descritos tratamentos efetivos para neoplasias de alto grau histológico. Uma possibilidade terapêutica que age diminuindo a angiogênese tumoral é a quimioterapia metronômica (QM). Tem sido proposta a quantificação da angiogênese tumoral através da mensuração do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) e da densidade microvascular (DMV). Desta forma, neste estudo, foi avaliada a resposta de carcinomas mamários caninos à QM por mensuração da DMV e detecção do VEGF tecidual, índice apoptótico (IA) e índice de proliferação celular (IP). Foram utilizadas 28 cadelas com carcinomas mamários, distribuídas igualmente em um grupo controle (GC) tratadas com mastectomia e um grupo tratado (GT) com QM (ciclofosfamida 15mg/m2 e piroxicam 0,3mg/kg) ambos por via oral e diariamente durante 28 dias seguido de mastectomia. As neoplasias mamárias foram classificadas e graduadas histologicamente. DMV, grau do VEGF tecidual, IA e IP de todas as neoplasias foram obtidas por imunomarcação. A análise estatística mostrou diferença entre os grupos na DMV e IA (p<0.05), evidenciando redução quantitativa na microvasculatura tumoral e aumento na apoptose de células neoplásicas. Com base neste resultado, é possível afirmar que a QM possui efeitos antiangiogênicos e pró-apoptóticos em carcinomas mamários de cadelas e pode ser utilizada como uma nova opção terapêutica / Abstract:The canine mammary tumor (CMT) is the neoplasia that most commonly affects not spayed bitches. Therapy for CMT is a challenge since there are not described effective treatments for high-grade tumors. A therapeutic option that slows down tumor angiogenesis is metronomic chemotherapy (MC). Quantification of tumor angiogenesis has been proposed by measuring the vascular endothelial growth factor (VEGF) and microvessel density (MVD). Thus, in this study, the response of canine mammary carcinomas by the MC was evaluated by the measurement of MVD and tissue VEGF detection, apoptotic index (AI) and cell proliferation index (PI). Twenty-eight dogs with malignant CMT, equally distributed into a control group (CG) treated with mastectomy and a treated group (TG) treated with MC (cyclophosphamide 15mg/m2 and piroxicam 0.3 mg/kg) both orally and daily for 28 days followed by mastectomy. Mammary tumors were classified and graded histologically. MVD, tissue VEGF, AI and PI of all malignancies were obtained by immunostaining. The analysis showed statistical difference between groups in MVD and AI (p <0.05), showing quantitative reduction in tumor microvasculature and increase in tumor cells apoptosis. Based on this result, we can affirm that MC has antiangiogenic and proapoptotic effects in mammary carcinomas of bitches and can be used as a new therapeutic option / Orientador:Alexandre Lima de Andrade / Banca:Sabryna Gouveia Calazans / Banca:Maria Cecilia Rui Luvizotto / Mestre

Orientador: Anaglória Pontes / Resumo: O câncer de mama é uma doença maligna relativamente comum em mulheres adultas jovens, justificando a preocupação com a potencial toxicidade gonadal relacionada à quimioterapia. É importante considerar o encaminhamento precoce de pacientes jovens com câncer de mama que tenham desejos reprodutivos para especialistas, a fim de discutir sobre a preservação da fertilidade. A criopreservação de embriões ou de oócitos estão entre os principais métodos à disposição, e para conseguir isso, estimulação ovariana controlada (EOC) é o primeiro passo a ser considerado. O presente estudo tem como objetivo apresentar protocolo de estimulação ovariana em para preservação da fertilidade em pacientes com câncer de mama. De novembro de 2014 a dezembro de 2016, 109 pacientes com câncer de mama com menos de 40 anos de idade foram selecionadas para preservar seu potencial reprodutivo. Elas foram divididas de acordo com a fase do ciclo menstrual em que o estímulo ovariano foi iniciado: fase folicular inicial, fase folicular tardia e fase lútea. Para reduzir o tempo necessário da obtenção dos oócitos, este estudo utilizou o princípio do início aleatório, no qual a EOC pode ser iniciada durante qualquer período do ciclo menstrual sem consequências negativas. O letrozol foi utilizado durante toda a estimulação para diminuir as concentrações de estradiol, independentemente da imunohistoquímica tumoral. Na presença de tumores positivos ao estradiol, e indicação de quimioterapia neoadjuvante, o tamoxi... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Breast cancer is a relatively common malignancy in young adult women, justifying the concern about the potential gonadal toxicity related to chemotherapy. It is important to consider early referral of young breast cancer patients with reproductive desires to fertility specialists, in order to discuss the fertility preservation. Embryos or oocytes cryopreservation are among the main methods available, and to achieve that, controlled ovarian stimulation (COS) is the first step to be considered. From November 2014 to December 2016, 109 breast cancers patients under 40 years were enrolled to preserve their reproductive potential. They were divided according to the menstrual cycle status in: initial follicular phase, late follicular phase and luteal phase. In order to reduce the time necessary to obtain the oocytes, this study used the principle of random start, in which the COS can be initiated during any period of the menstrual cycle without negative consequences. Letrozole was used during all stimulation to reduce estradiol concentrations, regardless of tumor immunohistochemistry. In the presence of estradiol positive tumors, and indication of neoadjuvant chemotherapy, tamoxifen was administerd as an additional protective measure. A GnRH agonist was used to trigger ovulation, in order to mitigate the risk of ovarian hyperstimulation syndrome. The following parameters were analyzed: age, day of COS start, number of days required to COS, total FSH dosage, estradiol levels at fi... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Uma das consequências mais devastadoras do tratamento do câncer na população jovem do sexo feminino é a falência ovariana, que resulta na diminuição do potencial de fertilidade. Nenhum tratamento curativo para a falência ovariana primária é conhecido, no entanto, as células-tronco mesenquimais, através de seu potencial de auto-renovação e de regeneração, vem sendo utilizadas com o intuito de avaliar o seu papel no tratamento da falência ovariana. O objetivo deste estudo foi explorar o impacto das células-tronco adiposo derivadas (ADSC), células de macerado de ovário e células –tronco femininas germinativas mouse vasa homologue positivas (MVH+) na falência ovariana induzida pela cisplatina em camundongos e esclarecer quais tipos celulares promovem melhor recuperação neste modelo. Quarenta e oito camundongas adultas foram injetadas com 7,5 mg/kg de cisplatina para induzir a falência ovariana. Como doadores de células foram utilizadas fêmeas C57BL6 transgênicas para a proteína verde fluorescente (GFP +) . Os animais foram subdivididos em três grupos: grupo controle (que recebeu somente solução salina) grupo ADSC- animais que receberam injeção intra ovariana de células-tronco mesenquimais adiposo derivadas (1x104), grupo ovário - animais que receberam injeção intra ovariana de células obtidas a partir de macerado de ovário (1x104) e grupo FGSC- animais que receberam injeção de células tronco germinativas MVH positivas(1x104). Todos os grupos foram avaliados em dois tempos de eutanásia: 7 e 14 dias após o transplante das células. A partir das análises histológicas, pode-se perceber um aumento significativo (p≤ 0,05) na probabilidade de obtenção de folículos viáveis nos grupos ADSC (43%) e suspensão de células de ovário (48%) quando comparados ao grupo controle (24%) no dia 7 e um amumento significativo na probabilidade de obtenção de folículos viáveis no número no grupo FGSC (71%) quando comparado aos outros grupos. Nos grupos eutanasiados 14 dias pós transplante os animais do grupo MVH apresentaram 72% de probabilidade de folículos viáves em comparação aos grupos: controle (50%), ADSC (58%) e suspensão de ovário (52%) diferença não foi estatisticamente significativa. A dosagem de estradiol não mostrou diferença estatística entre os grupos, nos diferentes tempos de eutanásia. / One of the most devastating consequences of cancer treatment in the young female population is ovarian damage, resulting in diminished fertility potential. No curative treatment is known for primary ovarian failure; however, mesenchymal stem cells, trough self -renewal and regeneration, was tested to evaluate their role in the treatment of ovarian failure. The aim of this study was to explore the impact of adipose derived stem cells (ADSC), ovarian cells macerated and female germline stem cells MVH + (FGSC) in ovarian failure induced by cisplatin in mice and to clarify the mechanism (s) by which the ADSCs exert their action. Methods: Thirty-six adult female mice were injected with 7.5 mg / kg of cisplatin to induce ovarian failure. As donor cells used C57BL6 females GFP +. Animals were divided into three groups: control group (which received only saline), ADSC-group: animals received intra ovarian 1x104 adipose derived stem cells; Ovarian cell group - animals received intra ovarian 1x104 cells obtained from macerated ovarian tissue and FGSC-group: animals received 1x104 female germline stem cells MVH positive. All groups were assessed at two times of euthanasia: 7 and 14 days after cell transplantation. Results: From the histological analysis, one can see a significant increase in the number of viable follicles in groups and MVH ADSC compared to the control group at day 7. On day 14 we also observed a tendency to better recovery in group MVH compared to the control group and the other groups, although this difference was not statistically significant. There was no difference in estradiol serum levels between all groups.