Orientador: Jaime Amaya-Farfan / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-21T05:08:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Torin_HildaRosa_D.pdf: 51325567 bytes, checksum: 520befe8880d7124ee14d039d960e8db (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A avaliação do conteúdo mineral ósseo é geralmente feita por meio de técnicas densitométricas. Contudo, a aplicação destas técnicas em estudos experimentais é cara e pouco acessível. Este trabalho propõe o uso do processamento de imagens radiográficas na determinação comparativa da mineralização óssea de animais alimentados com dietas à base farelo de arroz industrial, subproduto rico em sais do ácido fítico, agente quelante capaz de impedir a deposição de cálcio no fêmur. A avaliação dos efeitos deste subproduto como fonte mineral sobre a mineralização óssea, contudo, ainda não encontra suficiente embasamento científico, e o emprego de técnicas de processamento de imagens aparece como uma possível forma de diagnóstico nutricional. A deposição de cálcio, zinco, cobre e fósforo no fêmur de ratos em crescimento mostrou, em função da dieta, ser uma forma de avaliar a utilização destes minerais, já a medida de densidade óptica das radiografias apresentou forte correlação com os indicadores teor de cinzas do fêmur, massa seca e conteúdo de cálcio, fósforo e cobre, os quais responderam ao melhoramento da qualidade da dieta mediante suplementação do farelo de arroz com cálcio, zinco e cobre. Entretanto, a suplementação com zinco não apresentou correlação com os parâmetros acima / Abstract: Evaluation of bone mineral content is generally done by means of densitometric techniques. Implementation of such techniques in experimental studies, however, is often expensive or inaccessible. This work proposes the use of radiographic image processing for the comparative determination of bone mineralization in animals fed rice-bran diets, which are rich in phytic acid salts. Such salts are, in turn, powerful chelating agents capable of interfering with calcium deposition in the bone. Evaluation of the effects of feeding this industrial by-product as a source of mineral still requires scientific experimentation and the application of new techniques such as radiographic image could contribute to a better nutritional assessment. Deposition of calcium, zinc, copper and phosphorus in the femur of the growing rats, as a function of the quality of the diet, proved to be a viable approach to assess the utilization of such elements. Measurement of the optical density of radiographic plates, however, showed strong, positive correlation with indicators such as total ash content, dry mass, calcium, phosphorus and copper contents, which in turn, responded well to quality improvement of the diet obtained by supplementing the bran diet with calcium, zinc and copper. Supplementation with zinc alone, however, did not correlate with the above parameters / Doutorado / Doutor em Ciência da Nutrição

Orientador: Lourenço Gallo Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T05:51:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Golfetti_Roseli_D.pdf: 4644875 bytes, checksum: c9a3c4cc6ee6ea0a15525a2e7add39d4 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Os organismos vivos caracterizam-se por apresentarem grande capacidade de resposta aos estímulos internos e ou externos, no sentido de se adaptarem às condições vigentes. O sistema adrenérgico desempenha papel expressivo em muitos destes processos adaptativos. Alterações funcionais dos adrenoceptores quanto ao número, ou sensibilidade às catecolaminas apresentam repercussões fisiológicas e fisiopatológicas, restritas ou abrangentes em todos os sistemas orgânicos. O coração, por ter um expressivo número de diferentes tipos de receptores adrenérgicos, pode ser alvo de substanciais modificações das suas duas. propriedades básicas: inotrópica e cronotrópica. Neste cqntexto este trabalho teve como objetivo estudar as respostas inotrópicas à noradrenalina ( NA ) do átrio esquerdo ( AE ) isolado, de ratos adultos jovens e velhos, submetidos a estímulos provocativos ( modelo: natação de ratos ). Os grupos estudados foram: controles ( C) jovens ( n = 7 ) e, velhos ( n = 6 ); Stress Intermitente (SI) - sessões de 5, 15, 30 minutos de natação em três dias consecutivos - jovens ( n = 8) e velhos (n = 6 ); e Stress Agudo (SA) sessão única de 50 minutos de natação - jovens ( n = 6 ) e velhos ( n = 6 ). As variáveis registradas foram: Tensão, [T ( gf)]; primeira derivada temporal de T, [dT/dt ( gf / s )] e a segunda derivada temporal T, [ d2T/de ( gf / S2 )]. A resposta contrátil do átrio à NA foi avaliada por meio das curvas dose-resposta. A tensão máxima ( T max ) e a dose correspondente à concentração molar do agonista, que determina um efeito correspondente a 50% do efeito máximo ( EC50 ), foram empregadas como parâmetros para análise do ciclo contração relaxamento. Verificou-se, que os valores iniciais de T max ( antes das doses de NA ) não apresentaram diferença estatística nas três condições estudadas ¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Doutorado / Doutor em Ciências

Orientador: Marcos A. Tambascia / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-21T13:01:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Volpini_WalkyriaMaraGoncalves_D.pdf: 5363845 bytes, checksum: 243c0673aa5598aa9f2ef16ee01cd643 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: O camundongo NOD é um modelo espontâneo de diabetes auto-imune, cuja expressão clínica de síndrome hiperglicêmica é mais freqüente em fêmeas (em torno de 60%) do que em machos (< 10%), entre a 20ª e 25ª semanas de vida. Uma infiltração linfomononuclear progressiva das ilhotas de Langerhans (insulite), iniciada na 5ª semana de vida, em ambos os sexos, precede o desenvolvimento clínico do diabetes. A doença é mediada por células T CD4+ e CD8+ com auto-reatividade anticélula ß. A Ciclofosfamida (Cl), administrada a animais NOD de oito semanas de vida, induz o diabetes clínico em machos e o acelera em fêmeas, por provável depleção de células T supressoras dos mecanismos diabetogênicos. Este modelo (DMID-CI) é um instrumento experimental para aplicação de protocolos terapêuticos, descritos, sobretudo, em fase inicial do processo auto-imune. O objetivo deste estudo foi o de testar a eficiência de uma imuno-intervenção no DMID-CI do camundongo NOD, em fase avançada de insulite, com anticorpos monoclonais (AcMos) depletantes antiCD4 e antiCD8, estratégia pouco documentada na literatura. Foi caracterizado, inicialmente, o perfil de evolução da insulite, induzida em dois modelos de administração de ciclofosfamida (uma e duas doses de 200 mg/kg/dose, no intervalo de 14 dias) para definir-se a janela terapêutica adequada. A análise histológica da insulite, em NOD machos e fêmeas, semelhante em ambos modelos, demonstrou um momento preciso de progressão rápida de insulite em estádios avançados (invasivo/destrutiva), com paralela diminuição de ilhotas normais ou com periinsulite. Este momento consistiu de um intervalo, situado entre o T e o 14° dias após a primeira dose de Cl, considerado como o de estabelecimento do processo imunopatológico no pâncreas. A expressão do DMID clínico foi, porém, significativamente aumentada duas semanas após a segunda dose da droga (80% em ambos os sexos). A insulite, induzida por Cl, apresentou evolução fenotípica (análise imuno-histoquímica) similar à desenvolvida espontaneamente em camundongos NOD, com predomínio de células T CD4+ em estádios iniciais e aumento da proporção de CD8+ em fase avançada. A prevenção do DM1D-CI clínico foi alcançada, de forma similar, através de imunoterapia isolada com AcMos depletantes antiCD4 (YTS-191) e antiCD8 (YTS-169), iniciada em momento critico de progressão de insulite invasivo/destrutiva (10° dia após a primeira dose de CI). O sucesso terapêutico foi obtido com protocolo de curta duração (10 dias) e de baixas doses totais de AcMos (0,5 a 1,25 mg/camundongo). O tratamento com antiCD4 impediu a evolução da insulite para os estádios finais, os quais não foram, porém, bloqueados por antiCD8. A estratégia terapêutica utilizada demonstrou o potencial interesse clínico dos AcMos antiCD4+ e amiCD8+ no bloqueio de subpopulações T executoras da destruição auto-imune das células ß. / Abstract: The NOD (non obese diabetic) mouse is a model of spontaneous autoimmune diabetes, in which expression of the hyperglycemic syndrome occurs between 20 and 25 weeks of age and is more common in females (about 60%) than in males (< 10%). A progressive infiltration of the islets of Langerhans by lymphomononuclear cells (insulitis) preceeds the development of the clinical diabetes condition in both sexes. This diabetes is mediated by CD4+ and CD8+ T cells with autoreactivity against 6 cells. Cyclophosphamide (CY) administered to eight week-old NOD mice induces clinical diabetes in males and accelerates its development in females, probably by depleting the T suppressor cells of diabetogenic mechanisms. CY-induced insulin-dependent diabetes mellitus model (CY -IDDM) provides a useful experimental approach for investigating the application of therapeutic protocols in the initial phase of the autoimmune process. The aim of the present study was to examine the role of an intervention in advanced insulitis phase of CY-IDDM in NOD mice with depleting anti-CD4 and anti-CD8 monoclonal antibodies (MoAbs). The evolution of the insulitis induced by cyclophosphamide was initially characterized by administering two doses of 200 mg/kg separated by a 14-day interval in order to determine the appropriate therapeutic window. The histological analysis of insulitis in male and female NOD mice yelded similar results for both sexes and showed that the period of rapid progression of advanced invasive/destructive insulitis was paralleled by a reduction in the number of normal or peri-insulitis islets. This period of insulitis development ocurred between the 7th and the 14m day after the first CY injection and was considered to represent the establishing of the immunopathologic process in the pancreas. The clinical expression of IDDM was significantly increased within two weeks after the second CY dose (80% in both sexes). Based on immunohistochemical analysis the CY-induced insulitis showed a phenotypic evolution similar to that spontaneously developed in NOD mice with the predominance of CD4+ T cells in the initial phase and an increased proportion of CD8+ T cells in the advanced phase. CY-induced IDDM could be prevented by treating the mice with depleting anti- CD4 and anti-CD8 MoAbs. This treatment was initiated at a critical moment in the progress of the invasive/destructive insulitis (10 days after the first CY dose). Therapeutic success was achieved with in a short time (10 days) and at low total doses of MoAbs (0.5 to 1.25 mg/mouse). Anti-CD4 but not anti-CD8 MoAbs prevented the insulitis from evolving to its final stages. These results clearly indicate the potential clinical usefulness of anti-CD4 and anti-CD8 MoAbs in abolishing or neutralizing the activity of specific subpopulations involved in the autoimmune destruction of ß cells. / Doutorado / Clinica Medica / Doutor em Ciências Médicas

Orientador: Antonio Carlos Boschero / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T19:08:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alves_SilviaCristinaCrepaldi_D.pdf: 4970540 bytes, checksum: caabd222e7acbf570b4567612f3ce6fe (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo aprofundar os conhecimentos sobre os mecanismos celulares envolvidos na maturação do acoplamento estímulo-secreção de insulina na fase de vida perinatal; e da função do lactogênio PRL neste processo. Para tanto, ilhotas de ratos neonatais foram mantidas em cultura durante períodos de tempo diferentes, recebendo ou não tratamento hormonal diário. À seguir, analisamos a expressão dos transportadores de glicose, a permeabilidade ao cálcio e a secreção de insulina estimulada por substâncias diferentes. Os dados obtidos nos indicam que em ilhotas neonatais o tratamento crônico com PRL e a concentração de glicose no meio de cultura, modulam o aumento na expressão do GLUT2. A expressão do GLUTl não é alterada pela PRL ou pela glicose. A permeabilidade ao 45Ca²+ é modificada após o tratamento prolongado com PRL, aproximando-se ao padrão do adulto. A PRL induz aumento no conteúdo de insulina e maturação da resposta secretória estimulada por glicose e aminoácidos. A maturação da resposta secretória estimulada por glicose é potencializada pelo tempo de tratamento hormonal. O tratamento com PRL parece não atuar nos mecanismos envolvidos na modulação muscarínica embora induza maturação no sistema PKC. O tempo de cultura "per se" induz uma maturação parcial da resposta secretória de insulina. A cultura por período de tempo prolongado torna as células B mais sensíveis à estimulação por Leu ou Arg. Finalmente, a comparação dos dados obtidos após cultura durante 7 ou 19 dias, indica que o tratamento prolongado com PRL atua em etapas importantes do mecanismo de secreção de insulina, favorecendo o acoplamento entre o metabolismo do nutriente, a despolarização da membrana da célula B, a elevação na concentração citosólica de Ca²+ e a resposta secretória. Portanto, ilhotas neonatais cultivadas em presença de PRL durante 19 dias, adquirem uma resposta secretória de insulina mais próxima ao padrão do adulto. Estes dados reforçam a importância da PRL no processo de maturação da resposta secretória de insulina, das células B-pancreáticas, na fase perinatal e sugerem um efeito tempo-dependente na ação do hormônio / Abstract: Maturation of the glucose sensing mechanism in mammals occurs during the perinatal life period. In rats, the poor secretory response to glucose obselVed during fetal period is rapidly converted to an adult response in few days after birth. This poor secretory response is ascribed to an uncoupling between glucose stimulation and membrane depolarization resulting in the opening of an insufficient number of voltage-sensitive Ca2+ -channels, and an impaired increase in cytosolic Ca²+ concentration. The obselVed uncoupling in fetal and neonatal islets seems to be also consequence of a reduced A TP generation by B cells. Growth and differentiation of the endocrine pancreas are controlled by many factors including the somatolactogenic hormones, especially prolactin (pRL). The present work aimed at investigating the cellular mechanisms envolved in the maturation of stimulus-response coupling of insulin secretion in the perinatal life phase and the functions of PRL in this processo For this purpose, islets trom neonatal rats were kept in culture during differents periods of time receiving or not daily hormonal treatment. Glucose transporter expression (GLUTI and GLUT2), Ca²+ membrane permeability and insulin secretion were analysed in these cultured neonatal islets. The PRL treatment and the glucose concentration in the culture medium affect GLUT2 expression. GLUTI expression is not modified by PRL or glucose. After prolonged PRL treatment 45Ca permeability in the neonatal islets are cio ser to that obselVed in adult islets. PRL induces increase in the insulin total content and accelerates the maturation of secretory response stimulated by glucose and aminoacids in a time-dependent fashion. The maturation of secretory response stimulated by glucose is accelerated by time of PRL treatment. The PRL treatment does not affect mechanisms controled by muscarinic receptors in B-cells. The PRL treatment induces maturation in the PKC system. The culture time "per se" induces partial maturation of insulin secretion response. B cells submited to prolonged period of culture become more sensitive to Leu or Arg stimulation. Finally, data obtained after culture during 7 or 19 days, show that a prolonged PRL treatment influence important steps of the insulin secretion mechanisms, favouring the coupling among nutrient metabolism, membrane B cell despolarization, increase in the [Ca²+]i and increase secretory response. Therefore, neonatal islets cultured in the presence of PRL during 19 days acquire an insulin response to the nutrients elo ser to the adult pattem. These data reinforce the importance of PRL in the maturation process of insulin secretion response by pancreatic B cells during the perinatal life period and suggest an effect time-dependent in the hormonal action / Doutorado / Fisiologia e Biofisica / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Mario Jose Abdalla Saad / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-21T22:58:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Thirone_AnaClaudiaPelegrinelli_M.pdf: 3468685 bytes, checksum: 5b77284d1cf448cbe7c8ba863ce0f7ef (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: A insulina estimula a atividade tirosina quinase de seu receptor, resultando na fosforilação de substratos citoplasmáticos, substratos I e 2 do receptor de insulina (IRS-I e IRS-2). Estes dois substratos, por sua vez, ativam a fosfatidilinositol 3-quinase (PI 3-quinase). Sabe-se que um excesso crônico de hormônio do crescimento (GH) produz resistência insulínica, mas o exato mecanismo permanece não esclarecido. No presente estudo, examinamos os níveis protéicos e graus de fosforilação do receptor de insulina, do IRS-I e do IRS-2, bem como a associação destes substratos com a PI 3-quinase, no fígado e músculo de ratos tratados cronicamente com GR. Os níveis de receptor de insulina no fígado e músculo foram semelhantes nos grupos tratados com GH e controle. A autofosforilação do receptor, estimulada pela insulina, não mudou no fígado, mas mostrou se reduzida para 56 ::!: 5% (p<O,OOI) no músculo dos ratos tratados com GR. Em contraste, o nível protéico de IRS-I diminuiu para 40 ::!: 6% (p<O,OOI) no fígado dos ratos tratados com GH, mas não no músqIlo. A fosforilação do IRS-I, estimulada pela insulina, mostrou se diminuída para 67 ::!: 11% (p<0,05) e 64 ::!: 9% (p<O,OI) no fígado e músculo, respectivamente. A quantidade de IRS-2 fícou semelhante nos animais tratados com GH, em relação aos controles, tanto em fígado quanto em músculo, enquanto a fosforilação deste substrato, após estímulo com insulina, reduziu para 43 ::!: 4% (p<O,OOI) no fígado e 72 ::!: 8% (p<0,05) no músculo dos ratos tratados com GR. A associação do IRS-I com a PI 3 quinase, estimulada pela insulina, mostrou-se diminuída para 45 ::!: 5% (p<O,OOI) no fígado e para 63 ::!: 10% (p<0,05) no músculo dos ratos tratados com GR. Também a associação do IRS-2 com a PI 3-quinase decresceu para 47 ::!: 10% (p<0,05) e 68 ::!: 10% (p<0,05) em fígado e músculo, respectivamente. Concomitantemente, houve redução para 75::!: 4% (p<O,OOI) no nível hepático da PI 3-quinase. Estes dados sugerem que estas alterações, nas etapas iniciais de transmissão do sinal insulínicq, possam desempenhar alguma função na resistência insulínica observada nos animais tratados cronicamente com GR / Abstract: Insulin stimulates the tyrosine kinase activity of its receptor which results in the phosphorylation of the cytosolic substrates, insulin receptor substrate-l (IRS-l) and insulin receptor substrate-2 (IRS-2). These two substrates in tum associate with and activate phosphatidylinositol 3-kinase (PI 3-kinase). An excess of growth hormone (GH) is known to produce insulin resistance, but the exact molecular mechanism remains unclear. In the present study, we have examined the levels and phosphorylation status of the insulin receptor and its substrate IRS-l, as well as the association between this substrate and PI 3-kinase, in the liver and muscle of rats chronically treated with GH. The levels of insulin, receptor in the liver or muscle were similar in both the GH-treated and non-treated rats. Insulin-stimulated receptor autophosphorylation, as determined by immunoblotting with an antiphosphotyrosine antibody, did not change in the liver, but was reduced by 56 :t 5% (p<O. 001) in the muscle of rats treated with GH. In contrast, IRS-l protein levels decreased to 40 :t 6% (p<O.OOI) in, the liver of GH-treated rats, but not in muscle. In samples previously immunoprecipitated with anti-IRS-l antibody and blotted with antiphosphotyrosine antibody, there was a decrease in insulin stimulated IRS-l phosphorylation levels to 67:t 11% (p<0.05) and 64 :t 9% (p<O.OI) in the liver and muscle of GH treated rats, respectively. The insulin-stimulated IRS-l association with PI 3-kinase decreased to 45:t 5% (p<O.OOI) in the liver and to 63 :t 10% (p<0.05) in.the muscle ofrats treated with GR. Concomitantly, there was a decrease to 75:t 4% (p<O.OOI) in t4e leveI of hepatic PI 3-kinase. While there was no change in the hepatic and musde IRS-2 concentrations, the tyrosine phosphorylation of this substrate after insulin stimulation was reduced to 43 :t 4% (p<O,OOI) and 73 :t 8% (p<0,05) in the liver and muscle of GH treated rats, respectively. The association of IRS-2 with PI 3-kinase decreased to 47 :t 10% (p<0,05) in the liver and to 68 :t 11 % (p<0,05) iR the muscle of GH treated rats. These data suggest that changes in the early steps of insulin signal transduction may have a role in the insulin resistance observed' in animaIs chronically treated with GH / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Medicina

Orientadores: Maria Alice Rostom de Mello, Eduardo Kokubiun / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-22T16:06:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gobatto_ClaudioAlexandre_D.pdf: 5697371 bytes, checksum: d057d19e61b0337f49f20e8edd3ce01f (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Mais do que a simples reposição dos estoques energéticos, a recuperação nutricional deve restaurar a funcionalidade orgânica, com a mobilização normal dos substratos energéticos. O principal objetivo desse estudo foi verificar o efeito dos ácidos graxos livres na desnutrição e do treinamento físico na recuperação nutricional no que se refere ao fluxo glicolítico de ratos. O experimento foi realizado em duas partes: na primeira, os animais foram separados em dois grupos: D, alimentados com uma dieta contendo baixo teor protéico (6%) do desmame aos 60 dias de idade e C, animais alimentados com dieta normoprotéica (17%) no mesmo período. Do 61Q ao 10_ dia de idade, os ratos foram novamente separados em dois grupos: C - ratos que foram sempre alimentados com a dieta normoprotéica e R - animais alimentados com a dieta hipoprotéica do desmame aos 60 dias, passando então a receber a dieta a 17% de proteína. C e R foram ainda subdivididos em sedentários (8) e treinados (T - natação 1 h/dia, 5 dias/semana, com carga equivalente a 5% do peso corporal). Ao final de cada uma das etapas, fatias de músculos sóleos (25-35 mg) foram incubadas em frascos contendo Krebs-Ringer bicarbonato com [3H]-2-deoxyglucose (0.5 _Ci/ml), [U_14C]glucose (25 _Ci/ml) e insulina para a determinação da captação de glicose e síntese de glicogênio. Na primeira fase, as fatias dos sóleos de ratos C e D foram ainda incubadas em meio com (P) e sem (N) oleato (0.8 mM), formando quatro grupos: CN ,CP, DN e DP. Após 60 minutos de incubação. a concentração de lactato foi determinada no meio. Todos os resultados foram expressos em /lmol.g-1.h-1. Na primeira fase, não foram observadas alterações na captação de glicose entre os grupos (CN=19.60 + 1.34; CP=21.19 + 1.15; DN=19.13 + 1.09; DP=18.45 + 1.03). Os animais desnutridos apresentaram menor síntese de glicogênio muscular, independente da presença ou não de AGL (CN=3.12 + 0.18; CP=3.42 + 0.22; N=2.29 + 0.22; DP=2.04+ 0.24). No meio N, a produção de lactato foi maior nos animais D do que nos C. Entretanto, ambos os grupos apresentaram menores concentrações no meio com AGL que os respectivos resultados das fatias musculares no meio N (CN=37.10+1.85; CP=19.36+ 1.91; DN=61.03+ 6.00; DP=25.32 + 2.24). Na segunda fase, os ratos I captaram mais glicose que os animais sedentários, com valores inferiores nos ratos R em relação aos C. (CS=29.91+1.10, CT=34.14+1.52, RS=25.88+1.28, RT=29.53+1.00). A síntese de glicogênio na incubação foi similar nos quatro grupos (CS=2.71+O.26, TC=3. 1 O:tO. 18, RS=2.42+O.14, RT=3.07+ O.26), mas os ratos CT apresentaram maior produção de lactato (15.22+O.66) em ralção aos ratos CS (12.29+O.67). Não houveram diferenças entre a produção de lactato entre os grupos RS (16.78+1.04) e RT (15.95 + 0.75), mas a concentração de lactato foi maior nos RS do que nos CS. Nossos resultados sugerem que a desnutrição leva a alterações no fluxo glicolítico, o qual não é totalmente restabelecido com a recuperação nutricional utilizada em nosso modelo. O treinamento físico parece melhorar a recuperação nutricional / Abstract: Carbohydrate metabolism in the rats isolated soleus muscle. Effects of the oleate on malnourished and the physical training on the nutritional recovery . The nutritional recovery must provide, beyond the simple reposition of the energetic fuels, also the restauration of the normal mobilization these substrates. This study was designed to verify the effects of free fatty acids on malnutrition and the physical training on the nutritional recovery in rats soleus glycolitic flux. The experiment was developed in two parts: First, the animais were separated into 2 groups: M, fed a low protein (6%) diet from weaning to 60 days of age and C, fed a normal protein (17%) diet on some period. From 61!h to 10o!h days of age, the rats were separated into 2 groups: C: rats allways fed the normal protein diet and R: rats fed the low protein diet from weaning to the 6o!h days of age and the normal diet from this day on. C and R animais were divided into 2 sub-groups: S (sedentary) and T (swimming 1 h/day, 5d/week supporting a. load equivalent to 5% of body weight). At the end of each part, soleus muscles were isolated for incubation procedures. Muscle strips (25-35 mg) were transferred to separate flasks countaining Krebs-Ringer bicarbonate solution with [3H]-2-deoxyglucose (0.5 I-ICi/ml), [U_14C]glucose (25 I-ICi/ml) and insulin for determination of glucose uptake and glycogen synthesis. Muscle slices from C and M animais (first period) were incubated in the presence (P) ar absence (N) of FFA (0.8 mM), forming four groups: CN, CP, MN and MP. After 60 minutes of incubation, the concentration of lactate in the medium was measured. Ali results were expressed as Jlmol.g-1.h-1. In the first part, no alterations in glucose uptake were observed among groups (CN=19.60+ 1.34; CP=21.19 +.15; MN=19.13 + 1.09; MP=18.45 + 1.03), although the malnourished animais presented lower glycogen synthesis than the control rats in medium with or without FFA (CN=3.12 + 0.18; CP=3.42 + 0.22; MN=2.29+ 0.22; MP=2.04 + 0.24). In medium N, lactate production was higher in M rats than C rats. However, both nutritional treatments showed lower lactate production in medium P than in medium N (CN=37.10 + 1.85; CP=19.36+1.91; MN=61.03+ 6.00; MP=25.32+ 2.24). In the second period, the T rats showed higher glucose uptake than S animais (SC=29. 91 :t1.1 O, TC=34.14+1.52, SR=25.88+1.28, TR=29.53+1.00), with lower values for R rats than C rats. The glycogen synthesis was similar for the four groups (SC=2.71+O.26, TC=3.10+O.18, SR=2.42+O.14, TR=3.07+O.26), but the TC rats showed greater lactate production (15.22:t0.66) than SC rats (12.29+O.67). There was no difference in the lactate production between SR (16. 78+1. 04) and TR (15.95+O.75) rats, but the lactate production was higher for SR than for SC rats. Our results suggest that malnutrition leads to alterations on glycolitic flux, wich do not totally disappear with the nutritional recovery, although physical training appears to improve the nutritional recovery / Doutorado / Fisiologia e Biofisica / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Pedro Luiz Rosalen / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-27T00:31:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Coppi_LucianeCristina_M.pdf: 5986629 bytes, checksum: 52c4ab1d0e447bf1d4ca8a1aefacbdb6 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Este trabalho teve como objetivos avaliar a cariogenicidade dos leites bovino, humano, formulados infantis e o efeito anticariogênico do flúor, quando suplementado em uma fórmula infantil, utilizando modelo animal de cárie sujeito a um alto desafio cariogênico. Dois experimentos foram realizados para atingir os objetivos propostos. No primeiro experimento, foram utilizadas sessenta ratas Wistar spf (specífíc pathogen free) infectadas com Streptococcus sobrínus e dessalivadas, que receberam dieta 2000 e água destilada, deionizada esterilizada (ADE) com 10% de sacarose, ad líbítum, por sete dias. Após estes procedimentos, os animais foram individualmente aleatorizados e colocados em gaiolas suspensas individuais, sendo divididos em seis grupos experimentais: Grupo (1) ADE com 5% de sacarose ad líbítum e dieta essencial NCP#2, via entubação gástrica, duas vezes ao dia; (2) Leite bovino (Tipo A), ad líbítum; Leites elaborados em fórmulas infantis: (3) Nan 2@ reconstituído com ADE, ad líbítum; (4) Nestogeno 2@ reconstituído com ADE, ad líbítum; (5) Ninho@ coadjuvante de crescimento reconstituído com ADE, ad líbítum; (6) ADE ad líbítum e dieta essencial NCP#2, via entubação gástrica, duas vezes ao dia. No segundo experimento, foram testados os leites humano e a formulação industrial mais cariogênica obtida do primeiro experimento a qual foi suplementada com flúor. Desta forma, cinco grupos de dez ratas dessalivadas infectadas com S. sobrínus foram divididas em gaiolas suspensas recebendo: Grupo (1) ADE com 5% de sacarose ad líbítum e dieta essencial NCP#2, via entubação gástrica, duas vezes ao dia; (2) Leite humano, ad líbítum; Leites elaborados em fórmulas infantis: (3) Ninho@ coadjuvante de crescimento reconstituído com ADE, ad líbítum; (4) Ninho@ coadjuvante de crescimento reconstituído com ADE suplemetado com 10 ppm de flúor (NaF), após reconstituição e fornecido ad líbítum; (5) ADE ad líbítum e dieta essencial NCP#2, via entubação gástrica, duas vezes ao dia. Ao final de 21 dias experimentais, os animais de ambos experimentos foram sacrificados e avaliados quanto à microbiota oral recuperada e ao índice de cárie pelo método de Keyes(1958) modificado por Larson (1981). Os resultados foram tratados estatisticamente através dos testes Shapiro-Wilk e Kruskal-Wallis. No experimento I, o leite bovino se apresentou como o menos cariogênico entre os leites, enquanto o Ninho@ foi o que causou maior índice de cárie. Quanto à porcentagem de S. sobrinus recuperada da cavidade oral dos animais, não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos estudados, exceto para o grupo ADE. No experimento 11, tanto o leite humano quanto o Ninho@ suplementado com flúor, se apresentaram com menor cariogenicidade, não diferindo estatisticamente do grupo ADE, quanto ao total de cárie de superfície lisa. Quanto à porcentagem de S. sobrinus recuperada da cavidade oral, não houve diferença estatisticamente significante entre os grupos que receberam solução com sacarose e leites. Podese concluir que os leites bovino e humano não foram cariogênicos e a adição de flúor na reconstituição do leite formulado foi capaz de reduzir sua cariogenicidade de forma significativa. As fórmulas infantis mostraram significante potencial cariogênico, devendo ser utilizadas com cautela / Abstract: The aim of this study was to evaluate the cariogenic potential of cow, human and infant formula milks, and an infant formula milk supplemented with fluoride, using an animal model for caries assessment subjected to a high cariogenic challenge. Two separate animal experiments were performed. In the first, sixty female Wistar spf (specific pathogen free) rats, infected with Streptococcus sobrinus and desalivated, received diet 2000, and sterile dionized distilled water (SDW) with 10% sucrose ad libitum for seven days. After these procedures the animais were randomly placed in individual suspended cages and divided into six experimental groups. Group (1) SDW with 5% sucrose ad libitum and essential diet NCP#2, by gavage twice a day; (2) cow milk, ad libitum; infant formula solutions: (3) Nan 2@ reconstituted with SDW, ad libitum; (4) Nestogeno 2@ reconstituted with SDW, ad libitum; (5) Ninho@ growth supporting reconstituted with SDW, ad libitum; (6) SDW ad libitum and essential diet NCP#2, by gavage twice a day. In the second experiment, the human milk and the most cariogenic infant formula found in the first experiment, which was supplemented with fluoride, were tested. Therefore, five groups of desalivated female rats infected with S. sobrinus were assigned to suspended cages and given: Group (1) SDW with 5% sucrose ad libitum and essential diet NCP#2, by gavage twice a day; (2) Human milk, ad libitum; infant formulas: (3) Ninho@ growth supporting reconstituted with SDW, ad libitum; (4) Ninho@ growth supporting reconstituted with SDW with 10 ppm fluoride (NaF), final concentration ad libitum; (5) SDW ad libitum and essential diet NCP#2, by gavage twice a day. In the end of 21-experimental days the animais from both experiments were killed and evaluated according to recovered oral microbiota and caries score by using Keyes (1958) modified by Larson (1981). The results were statistically assessed through Shapiro-Wilk and Kruskal-Wallis. On experiment I, cow milk was the least cariogenic of ali milks examined, whereas Ninho@ was the most cariogenic. As for the percentage of S. sobrinus obtained from the oral cavity of the animais, there were no statistically significant differences between the groups studied, except for SDW group. In experiment 11, both the human milk and Ninho@ supplemented with fluoride showed less cariogenic potential, showing no difference in some seores when compared to the SDW group. As for the percentage of S. sobrinus recovered from the oral cavity, there were no statistically significant differences among the groups that received sucrose and milk solutions. It can be coneluded that cow milk and human milk were not cariogenic, and that the addition of fluoride during the reconstitution of infant formula was able to decrease its cariogenicity significantly. The infant formulas showed some cariogenic potential and should be consumed under caution / Mestrado / Farmacologia, Anestesiologia e Terapeutica / Mestre em Odontologia

Orientador: Hernandes Faustino de Carvalho / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-27T02:39:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernandes_JussaraKiyaHuaranga_M.pdf: 4864855 bytes, checksum: d12800feff0bc35bdd1697ca1f215352 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Os glicosaminoglicanos (GAGs) têm sido implicados em diversos aspectos da fisiologia celular. Uma vez que as glândulas acessórias do aparelho reprodutor masculino são dependentes de andrógenos, o presente trabalho foi realizado para examinar o efeito da privação androgênica sobre os tipos e conteúdo de GAGs na próstata ventral, glândula de coagulação e vesícu1a seminal de ratos com três meses de idade. Os animais foram castrados e sacrificados 7, 14 e 21 dias após a cirurgia. Ratos não castrados foram utilizados como controles. Os glicosaminoglicanos foram extraídos e quantificados pelo método do azul de dimetilmetileno. Os tipos de GAGs foram identificados por eletroforese, digestão enzimática e degradação com ácido nitroso. A incorporação in vivo de esS] foi acompanhada por autoradiografia de cortes histológicos. O conteúdo total de GAGs sulfatados aumenta progressivamente após castração até o 210. dia após cirurgia. Condroitim sulfato (CS), dermatan sulfato (DS) e heparam sulfato foram encontrados nas diferentes glândulas de animais controles. DS é o GAG predominante tanto nos controles como nos animais castrados, aparecendo em concentração crescente nestes últimos. Este aumento de DS é o principal responsável pelo aumento dos GAGs totais, sendo acompanhado por um ligeiro aumento de HS. Por outro lado a concentração de CS diminui após castração. A marcação com esS] mostrou aspectos semelhantes, mas revelou uma marcante alteração da expressão de CS para HS na próstata ventral de animais castrados, quando comparados com os controles. A autoradiografia demonstrou que os GAGs encontram-se difusos no estroma e concentrados na membrana basal das estruturas epiteliais e das células musculares lisas. Aspectos similares foram observados nos animais controles e castrados. Os resultados demonstram que as variações na organização tecidual que ocorrem após a castração são associadas a alterações nos GAG sulfatados, provavelmente refletindo uma reprogramação celular, não somente do estroma mas também das células epiteliais / Abstract: Glycosaminoglycans have been implicated in several aspects of cellular physiology. Since the male accessory sex glands are high1y dependent on androgens, the present study was undertaken to examine the effect of androgen deprivation on sulfated glycosaminoglycan (GAG) types and content in the ventral prostate, coagulating gland and seminal vesic1e of 3-month-old rats. The animals were castrated and sacrificed 7, 14 and 21 days after surgery. Non-castrated animals were used as controls. The sulfated GAGs were extracted and' quantified by the dimethylmethylene blue method. GAG types were identified by electrophoresis, enzymatic digestion and nitrous acid degradation. ln vivo 35S incorporation was followed by autoradiography oftissue sections. Chondroitin sulfate (CS), dermatan sulfate (DS) and heparan sulfate (HS) were found in the different glands of the control animaIs. DS is the predominant GAG in both control and castrated groups. The total amount of GAG increased progressively after castration up to the 21th day, representing absolute increases in DS and HS. On the other hand, the CS amount decreased after castration. e5S] labeling showed similar results, but a more prominent change in the expression of CS to HS in the prostate of castrated animals as compared to controls. In situ labeling showed the GAG to be diffuse in the stroma and concentrated at the basement membrane of epithelial structures and of smooth muscle cells. SiIriilar aspects were observed in castrated and control animaIs. These results demonstrated that the variations in tissue organization following castration are associated with changes in the sulfated GAGs, most likely reflecting a reprogramming of both the stromal and epithelial cells / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Lea Rodrigues Simioni / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T07:20:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DalBelo_CharistonAndre_M.pdf: 1727180 bytes, checksum: d1158c558ef761a445d61af6e05ceef1 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar as alterações induzidas pelo glicocorticóide prednisolona sobre os processos fisiológicos normais da junção neuromuscular de ratos e camundongos, através de técnica miográfica e eletrofisiológica in vitro e in vivo. Prednisolona, na concentração de 0,3 mM, antagonizou os efeitos bloqueadores produzidos pela d-Tubocurarina (1,45 ~M) tanto in vitro como in vivo. Nesta mesma concentração, produziu um aumento na força de contração muscular induzida pela ß -BuTx 1 µM em preparação nervo frênico-diafragma de camundongo e também alterou o padrão de resposta contrátil da guanidina. Além disso, Prednisolona causou efeitos pré¬ sinápticos como demonstrado pelo discreto aumento da freqüência dos potenciais de placa terminal em' miniatura (270 :t 4%) além do aparecimento de potenciais gigantes. Contudo a prednisolona', não determinou qualquer alteração sobre os valores do potencial de membrana. Assim, estes resultados confirmam os dados da literatura que apontam para uma indução por parte do glicocorticóide prednisolona, de efeitos diretos sobre a transmissão neuromuscular, possivelmente aumentando a liberação de acetilcolina no terminal nervoso motor / Abstract: The neuromuscular effects of glucocorticoids have been studied extensively since the clinical benefits of these hormones in the myasthenia gravis were reported by WARMOLTs et aI. in 1970. In this work we examined neuromuscular effects of the synthetic glucocorticoid prednisolone in isolated mammalian preparations in vitro and in vivo with supramaximal stimuli of the 0,1 Hz and 0,2 ms duration. Prednisolone (0.3 mM) antagonized the blockade produced by d¬ tubocurarine in vitro and in vivo. At this same concentration prednisolone increased in the muscle twitch tension responses to ß BuTx 1 µM in isolated phrenic nerve-diaphragm preparations but did not alter the contractile responses to 3,4-diaminopyridine; prednisolone also dimi~uished the neuromuscular effects induced by guanidine. In addition, prednisolone acted presynaptically to increase the amplitude and frequency of m.e.p.ps and generated a considerable number of giant m.e.p.ps without altering the resting membrane. These results suggest that a direct action of prednisolone on the neuromuscular transmission may increase the release of acetylcholine from the nerve terminal / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador : Ubirajara Ferreira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T16:39:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Nardi_AguinaldoCesar_D.pdf: 4057336 bytes, checksum: 1550c28c7781e3964be23c2b91d272cb (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: A litotripsia extracorpórea por ondas de choque é um método seguro e eficaz no tratamento da litíase renal, embora ainda existam dúvidas sobre os seus efeitos nos tecidos em crescimento. Com o objetivo de avaliar os efeitos das ondas de choque de alta energia nos órgãos adjacentes ao rim, no rato em crescimento, foram estudados sessenta ratos Wistar, machos. Ao completarem trinta dias de vida, realizou-se a colocação de marcador radiopaco na loja renal esquerda dos animais. Com quarenta dias de vida, após confirmação radiológica do posicionamento do marcador, os ratos foram divididos em dois grupos: grupo-controle - trinta ratos que não receberam ondas de choque; grupo experimental trinta ratos expostos a 1000 ondas de choque de 17,2 kV de intensidade. Os ratos então foram sacrificados após sete, noventa e cento e oitenta dias após a exposição às ondas de choque de alta energia. Foi avaliado o crescimento corpóreo e realizada a análise da morfologia macro e microscópica dos seguintes órgãos: figado, baço, pâncreas, pulmão direito e esquerdo, adrenal direita e esquerda. Não houve diferença estatística no crescimento corpóreo dos animais. A análise morfológica microscópica demonstrou alterações significativas no baço (alterações proliferativas da polpa vermelha) e figado (inchação turva) dos animais submetidos às OCAE e sacrificados no sétimo dia. Essas lesões desapareceram completamente nos estudos posteriores / Abstract: The extracorporeal shock wave lithotripsy (ESWL) is a safe and efficÍent method in the treatment of renallithiasis. However, there are still questions about its effects in growing tissues. Searching to evaluate the effects of shock waves in organs adjacent to the kidney in growing rats, 60 male wistar white rats were studied. At 30 days of age, a radiopaque marker was introduced in the lefi renal region ofthe animals. Ten days afier, the rats were divided in two groups. The control group - thirty rats did not receive the shock waves; experimental group - thirty rats exposed to 1000 shock waves of 17,2 k V of intensity. The rats were then sacrificed afier 7, 90 and 180 days afier the exposition to the shock waves, and the liver, spleen, pancreas, lungs and adrenals were studied grossly dand histologically. We found no significant changes in overall growth between the two groups. However, in the spleen of the rats exposed to ESWL and sacrificed in the seventh day, we observed red pulp with increase cellularity and numerous megacariocytes and large lymphoid cells, that disappeared afierwards. Regarding the liver, we observed ballooning degeneration ofthe hepàtocytes in the same group. We conclude that ESWL does not affect overall animal growth but cause transitory lesions in the spleen and in the liver ofthe rats / Doutorado / Doutor em Cirurgia