Spelling suggestions: "subject:"deação dda cadeia dda polimerase"" "subject:"deação dda cadeia daa polimerase""
161 |
Diferenciação das espécies Cryptococcus neoformans e Cryptococcus gattii utilizando a metodologia de PCR multiplex e determinação do perfil epidemiológico de pacientes com meningite criptocócicaLeal, Ana Lusia January 2006 (has links)
Cryptococcus neoformans é uma levedura oportunista que pode se alojar no sistema nervoso central causando meningite, meningoencefalite e encefalite principalmente em indivíduos com algum comprometimento do sistema imune. É responsável por 4,5% das infecções oportunistas que acometem pacientes portadores do Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV-positivos). Cryptococcus gattii é um patógeno primário responsável por uma alta incidência de criptococomas no pulmão e no cérebro e que apresenta uma alta morbidez neurológica e uma resposta retardada à terapia antifúngica. O diagnóstico da criptococose é, atualmente, baseado na detecção da levedura em amostras clínicas, no cultivo com posterior identificação bioquímica e na pesquisa de antígenos circulantes. A diferenciação entre as espécies C. neoformans e C. gattii, na maioria dos laboratórios, é realizada utilizando o meio de cultura ágar canavanina-glicina-azul de bromotimol (CGB) e demora em torno de sete dias. Neste trabalho foi padronizada uma metodologia de PCR multiplex que pode vir a substituir as provas bioquímicas utilizadas atualmente para a identificação das espécies de Cryptococcus, reduzindo em 6 dias o tempo necessário para a identificação das espécies. A metodologia também se mostrou mais específica na identificação das espécies, concordando com os resultados das sorotipagens em todos os 132 isolados de Cryptococcus testados, enquanto o resultado obtido com o cultivo em ágar CGB foi discordante em 6 dos 132 isolados, sendo 5 falso-positivos e 1 falso negativo. Foi também realizado o primeiro estudo epidemiológico do perfil de pacientes com meningite criptocócica no estado do Rio Grande de Sul notificados no Laboratório Central de Saúde Pública IPB-LACEN/RS no período de 2000 a 2005. A maioria dos pacientes é do sexo masculino (77,12%), branco (83,5%), na faixa etária entre 30 a 39 anos (46,24%) e infectados pelo HIV (95%).
|
162 |
Análise do perfil de resistência e genotipagem da escherichia coli na infecção do trato urinário não complicadaAgra, Homero Neto de Cunha e January 2007 (has links)
Introdução - A Infecção do Trato Urinário (ITU) é uma das doenças mais comuns, especialmente em mulheres jovens e sexualmente ativas, causada, na maioria das vezes, pela Escherichia coli. Este estudo objetiva analisar os fatores de risco associados com este tipo de infecção, além de estudar o perfil de resistência à genotipagem da E. coli. Pacientes e métodos - Foram avaliados 62 pacientes femininas, residentes em Santa Cruz do Sul, com idade variando entre 18 a 84 anos, com o diagnóstico ambulatorial de ITU não complicada. O diagnóstico foi estabelecido na presença de sintomas urinários e urocultura com a contagem superior a 105 UFC/mL. Os pacientes responderam a um questionário para obtenção de dados clínicos. A sensibilidade dos isolados de E. coli frente aos antimicrobianos foi determinada usando o método de difusão em disco em meio Mueller Hinton. A genotipagem foi realizada através da técnica de reação em cadeia da polimerase baseada na região consenso repetitivo intergênica. Resultados: O perfil de resistência bacteriana aos antibióticos testados foi de 22,6% para a sulfametoxazol-trimetoprim, 19,3% para a cefalexina, 8,1% para a norfloxacina, 4,8% para a gentamicina e 3,2% para a nitrofurantoína. A genotipagem revelou que 43,5% dos isolados clínicos de E. coli apresentavam relação clonal. A comparação dos dados clínicos dos pacientes que eram portadores de cepas formadoras de clones com os que não eram, revelou que não houve diferença entre os dois grupos em relação ao perfil de resistência, idade da primeira infecção urinária, atividade sexual, história de doença renal no passado, número de episódios de ITU, hospitalização, uso prévio de antibióticos nos últimos 2 meses e presença de animal de estimação em casa. A análise dos grupos classificados pelo resultado da genotipagem quanto ao perfil de resistência revelou que não há diferença estatisticamente significante nos níveis de resistência à cefalexina, à gentamicina, à nitrofurantoína, à norfloxacina e à sulfametoxazol-trimetoprim nos diferentes clones observados. Conclusão: O perfil de resistência da E. coli aos antibióticos testados mostrou altos níveis de resistência à SMT e à cefalexina. A genotipagem da E. coli identificou, em 43,5% dos isolados, a presença de uma relação clonal embora não tenha sido observado uma associação da relação clonal com perfil de resistência e variáveis clínicas.
|
163 |
Expressão da urease ubíqua de soja em Escherichia coliMartinelli, Anne Helene Souza January 2007 (has links)
Ureases (uréia amino-hidrolases; EC 3.5.1.5) são metaloenzimas níquel-dependentes, que catalisam a hidrólise da uréia à amônia e dióxido de carbono. Elas são produzidas por fungos, bactérias e plantas, mas não por animais. A soja produz duas isoenzimas, a urease ubíqua, que é codificada pelo gene Eu4, presente em pequenas quantidades em todos os tecidos da planta, e a urease embrião-específica, codificada pelo gene Eu1, que é sintetizada apenas no embrião em desenvolvimento. A urease ubíqua é responsável pela biodisponibilização de nitrogênio para planta, enquanto o papel da embrião-específica permanece desconhecido. Estudos prévios, sugerem que esta urease possa estar envolvida na defesa da planta.Como a urease ubíqua é encontrada em pequenas quantidades em todos tecidos da planta, tornando difícil sua obtenção, pouco é conhecido sobre esta enzima. No presente trabalho, estabeleceu-se um sistema de expressão e purificação parcial da urease ubíqua recombinante, expressa como uma proteína fusionada a uma cauda de glutationa-S-transferase (GST). O gene da urease foi amplificado por PCR e ligado em plasmídeo pGEX-4T-2 e expresso em Escherichia coli BL21 (DE3). A urease recombinante foi parcialmente purificada em resina de afinidade Glutationa Sepharose 4B, obtendo-se um rendimento de aproximadamente 2 mg/L de cultura. A proteína recombinante foi analisada para atividade enzimática e imunorreatividade para anticorpos contra urease de Canavalia ensiformis.O sucessodeste método de expressão da urease ubíqua da soja, permitirá a produção de quantidades suficientes desta proteína para estudos posteriores de caracterização. / Urease (EC 3.5.1.5, urea amidohydrolase) is a nickel-dependent metalloenzyme, that catalyzes the hydrolysis of urea to form ammonia and carbon dioxide. Ureases are produced by many organisms, including plants, fungi and bacteria. Soybean produces two isoenzymes, the ubiquitous urease, which is encoded by Eu4 gene and is present in small amounts in all plant tissues, and the embryo-specific urease, which is encoded by the Eu1 gene, and is synthesized only in the developing embryo. The ubiquitous urease is responsible for recycling metabolically derived urea while the role of the embryo-specific urease remains unkown. Previous studies had suggested that the embryo-specific urease could be involved in plant defense. Since the ubiquitous urease is found in low amounts in plant tissues making difficult to purify the enzyme, little is known about this protein.In the present work, a system for the expression and partial purification of soluble soybean ubiquitous urease was established expressing a protein fusioned with glutathione S- transferase (GST). The urease gene amplified by PCR was inserted into a pGEX-4T-2 GST fusion vector and then expressed in Escherichia coli BL21 (DE3). The recombinant urease was partially purified by a Glutathione Sepharose 4B affinity chromatography, yielding about 2 mg protein/L of culture broth. The recombinant protein was tested for enzymatic activity and imunoreactivity against anti Canavalia ensiformis antibodies. Successful expression of ubiquitous urease in E. coli provides a way to produce this protein in amounts enough for posterior studies and characterization.
|
164 |
Detecção de Chlamydia trachomatis em amostras de urina masculina por reação em cadeia da polimeraseAquino, Alzira Resende do Carmo January 2005 (has links)
Infecções por Chlamydia trachomatis estão entre as mais freqüentes doenças sexualmente transmissíveis (DST) em todo o mundo, apresentando grande importância epidemiológica. A identificação deste patógeno pode ser difícil e um método de detecção baseado na amplificação de ácidos nucleicos é altamente desejável, por sua acurácia e rapidez. O presente estudo avaliou a acurácia, sensibilidade e especificidade de uma reação em cadeia da polimerase (PCR) in “house” em amostras de urina de homens com e sem sintomas de DST comparados a um teste comercial, o COBAS Amplicor CT/NG (Roche, Suiça). Foram utilizados primers específicos para amplificar um segmento do plasmídio críptico de C. trachomatis gerando um fragmento de 201 pb, cuja seqüência foi confirmada por clivagem enzimática e seqüenciamento automático. A especificidade analítica dos primers foi confirmada frente ao DNA de diferentes microrganismos patogênicos e não patogênicos da microbiota urogenital masculina. A detecção limite do DNA clamidial pela PCR in house após hibridização (Southern blot), foi de 1 pg. O COBAS Amplicor CT/NG foi considerado o teste de referência por ser automatizado e conter um programa de controle interno da reação para identificar inibição da DNA polimerase. Entre as 37 amostras testadas positivas para C. trachomatis pelo COBAS Amplicor, 33 foram confirmadas positivas pela PCR in house. Foram detectados inibidores da reação nas 4 amostras que apresentaram resultados falso-negativos, utilizando-se a técnica de contaminação da reação com o DNA clamidial (spiked) e um controle interno da reação com primers que amplificam a β-globina do DNA humano. Após congelamento e descongelamento para eliminar prováveis substâncias inibidoras lábeis, as 4 amostras foram re-testadas, resultando na positividade de mais 2 amostras, completando 35 amostras positivas pela PCR in house. Entre as 74 amostras testadas negativas para C. trachomatis pelo COBAS Amplicor, 72 foram confirmadas negativas pela PCR in house. Das 2 amostras prováveis falso-positivas, apenas 1 permaneceu positiva, após re-teste. Dos 111 pacientes analisados, 108 apresentaram resultados idênticos nos dois testes, o equivalente a uma acurácia = 97,3%, sensibilidade = 94,6% e especificidade = 98,6%. A alta sensibilidade e especificidade apresentada pela PCR in house, demonstra a possibilidade de triar e diagnosticar C. trachomatis em urina de homens, importante reservatório da infecção clamidial para as mulheres. / Chlamydia trachomatis infections are among the most commum sexually transmitted diseases and of great epidemiological importance world-wide. Identification of this pathogen can be difficult, and it is highly desirable to have a rapid and accurate nucleic acid amplification based detection method. The present study was designe to evaluate the accuracy, sensitivity and specificity of a in house plasmid-based polymerase chain reaction (PCR) and hybridization on first void urine specimens from symptomatic and asymptomatic men, compared with a commercial test the PCR COBAS Amplicor CT/NG (Roche, Switzerland), for detection of C. trachomatis (CT). Specific primers for the cryptic plasmid of C. trachomatis were designed to amplify a 201 bp fragment confirmed by enzymatic cleavage and automatic sequencing. The analytic specificity was determined by submitting to the intended protocol, the DNA of normal and pathogenic urogenital microbiota, the specific primers anneling was confirmed. The detection limit of the PCR and the Southern blot hibridization, was mesured in 1 pg of chlamydial DNA. The COBAS Amplicor CT/NG was considered the reference test, it contains a internal control (IC) programme to identify DNA polymerase inhibition. Among 37 positive specimens tested by COBAS Amplicor, 33 were confirmed positive by in house PCR and inhibitors of PCR were demonstrated in the 4 possibly false-negative samples performing DNA chlamydial spiking experiments and using a positive internal control of human β-globin DNA. The specimens were freezedthowed and re-tested to remove labile inhibitors, but 2 samples remained negative. Among 74 negative specimens by COBAS Amplicor, 72 were confirmed negative by in house PCR. The 2 problaby false-positive samples were re-tested and just one remained positive. The final results of the two tests were identical for 108 of the 111 pacients, accuracy = 97,3% ; sensitivity = 94,6% and specificity = 98,6%. This study shows that the in house plasmid-based PCR is fasible for detection of Chlamydia trachomatis in male urine specimens. This test presented high accuracy, sensitivity and specificity, offering great potencial for the screening of men, an important reservoir of infection chlamydial for women.
|
165 |
Polimorfismos do gene metilenotetrahidrofolato redutase e suscetibilidade à psoríaseMaldonado, Gabriela January 2009 (has links)
Introdução: A psoríase é uma doença inflamatória sistêmica crônica que afeta predominantemente a pele e as articulações. Sua etiologia é multifatorial e ainda não completamente entendida. A suscetibilidade genética à psoríase é um fator causal importante, e vários genes e polimorfismos têm sido associados à sua ocorrência. Poucos estudos avaliaram a influência dos polimorfismos C677T e A1298C do gene metilenotetrahidrofolato redutase (MTHFR) na suscetibilidade à psoríase em diferentes populações (asiáticos e caucasides), e os resultados foram contraditórios. Material e métodos: Foram estudados 339 indivíduos caucasoides; desses, 142 eram pacientes com diagnóstico clínico de psoríase e 197 controles. Os grupos foram comparados quanto à freqüência dos polimorfismos C677T e A1298C do gene MTHFR através de reação em cadeia da polimerase. Resultados: Para o polimorfismo C677T do gene MTHFR, a prevalência do genótipo mutante foi de 16,0% nos casos e 9,1% nos controles (p=0,103). Quando comparados os genótipos CC versus CT+TT, não houve diferença entre os grupos (p=0,605). A prevalência do genótipo CC para o polimorfismo A1298C foi de 2,8% nos casos e 4,1% nos controles (p=0,824). Quando comparados os genótipos AA versus AC + CC também não houve diferença significativa (p=0,943). A análise combinada dos genótipos foi similar entre os grupos. Conclusão: Nossos resultados não indicam qualquer associação entre os polimorfismos C677T e A1298C do gene MTHFR e suscetibilidade à psoríase nem demonstraram ação sinérgica da presença de ambos na redução de atividade da enzima MTHFR.
|
166 |
Diagnóstico etiológico das meningites e encefalites linfocitárias pela amplificação do DNA patogênico em pacientes com infecção pelo HVChesky, Marisa January 2004 (has links)
Resumo não disponível
|
167 |
Avaliação de diferentes fontes de DNA para a realização de nested PCR no diagnóstico de erliquiose caninaEmmanuelle de Farias Rotondano, Tereza 31 January 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2014-06-12T15:54:38Z (GMT). No. of bitstreams: 2
arquivo68_1.pdf: 787941 bytes, checksum: b2a3fbfd839f7bc4c7e54c63ad2b5596 (MD5)
license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5)
Previous issue date: 2010 / Faculdade de Amparo à Ciência e Tecnologia do Estado de Pernambuco / A erliquiose é uma hemoparasitose distribuída mundialmente causada, geralmente, pela
proteobactéria intracelular, Ehrlichia. spp, que infecta leucócitos e plaquetas, formando corpúsculos
de inclusão denominados de mórulas. A identificação das inclusões em exame direto de esfregaço
sanguíneo tem baixa sensibilidade diagnóstica devido ao pequeno número de células parasitadas. O
sangue é a principal fonte de DNA utilizada para a reação em cadeia pela polimerase (PCR), não
havendo avaliação da eficiência de frações celulares sanguíneas no diagnóstico apesar do patógeno
infectar mais de um tipo celular. Desta forma, este trabalho teve como objetivo determinar a
eficiência do sangue e de suas frações como fonte de DNA para a nested PCR (nPCR), além de
indicar a frequência dos agentes etiológicos implicados na erliquiose canina em duas localidades da
região Nordeste do Brasil. A amostra de 22 cães com sintomatologia clínica sugestiva de erliquiose
foi proveniente da rotina médica dos Hospitais Veterinários da Universidade Federal Rural de
Pernambuco (UFRPE), da Universidade Federal de Campina Grande (UFCG) e do Centro Médico
Dr. Leonardo Torres, localizados nos municípios de Recife (PE) e Patos (PB). O DNA foi extraído
de sangue total (ST), mononucleares (M), granulócitos, papa leucocitária (PL) e coágulo sanguíneo
(CS). Na pesquisa direta de hematozoários, 36,4% apresentavam mórulas sugestivas de E. spp. Pela
nPCR, a ocorrência foi de 46,6% (7/15) para E. canis e de 6,6% (1/15) A. platys. Co-infecção com
A. platys e E. canis foi evidenciada em um animal. DNA do patógeno foi amplificado em 71,4%
(15/21) das amostras de sangue total, 1,78% (3/19) de granulócitos, 31,57% (6/19) de
mononucleares e 30% (6/20) de papa leucocitária. A nPCR das amostras de ST não apresentou
diferença estatisticamente significativa (p<0,05) quando comparada com as amostras de M, PL,G e
CS, indicando ser o ST a melhor fonte de DNA para a identificação de Ehrlichia. Vale salientar que
essa é a primeira evidência molecular do envolvimento de A. platys em infecção em cães no Estado
da Paraíba
|
168 |
Próteses totais removíveis como reservatório de microrganismos oportunistas / Removable total prostheses as reservoir of oportunists microrganismsMarqueti, Antonio Carlos January 2011 (has links)
Este estudo avaliou a ocorrência de leveduras do gênero Candida sp além dos
principais microrganismos periodontopatogênicos e enterobactérias na saliva, em
mucosa e no biofilme aderido à prótese total, correlacionando com aspectos clínicos e
condição de higiene bucal de 90 indivíduos edêntulos e portadores de prótese total,
por meio de métodos moleculares (PCR). Espécimes clínicos intrabucais foram
coletados desses indivíduos após avaliação das condições sócio-econômicas e
comportamentais. A microbiota bucal dos pacientes foi caracterizada por meio da
obtenção de amostras de biofilme aderido às próteses totais, mucosa e saliva, as
quais foram processadas, por meio de PCR. As inter-relações entre os diferentes
microrganismos foram determinadas por meio dos testes de Qui-quadrado e Mann-Whitney. Verificaram-se diferenças na ocorrência de Prevotella intermedia e
Enterobacteriaceae na saliva dos pacientes edêntulos, o mesmo ocorrendo com
Enterobacteriaceae, Camphylobacter rectus e gênero Pseudomonas no biofilme
aderido às próteses totais. As condições de higiene bucal e estado de conservação da
prótese total precários favoreceram a ocorrência de leveduras do tipo Candida sp, em
especial Candida albicans, em níveis estatisticamente significante nas amostras de
mucosa e biofilme aderido à prótese total, tornando este dispositivo protético um
potencial reservatório de leveduras e bactérias entéricas que podem ser de relevância
na patogênese das infecções oportunistas. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT: The aim of this study was to evaluate the occurrence of major
periodontopathogenic microorganisms and Enterobacteriaceae and biofilm
adhered to the denture, mucosa and saliva in 90 edentulous subjects with
complete dentures, using molecular methods (PCR). Clinical specimens were
collected from these individuals after assessing the socio-economic
circumstances and behavioral. The oral microbiota of patients was
characterized by obtaining samples of the biofilm adhered to the dental
prothesis and saliva, for detection of major pathogens using PCR. The
possibility of inter-relationships between different microorganisms was
determined using the chi-square test and Mann-Whitney test. There were
differences in the occurrence of Prevotella intermedia and Enterobacteriaceae
in the saliva of edentulous patients, likewise, Enterobacteriaceae,
Pseudomonas, Camphylobacter rectus and the biofilm attached to denture
patients. The conditions for oral hygiene and stat of preservation of prosthesis
total precarious favored the occurrence of yeasts of the Candida sp, particularly
Candida albicans, statistically significant levels in samples of mucosa and
biofilm acceded to total prosthesis, prothetic device, making it a potential
reservoir of enteric bacteria and yeasts that may be of relevance in the
pathogenesis of opportunistic infections.
|
169 |
Subtipagem do virus da imunodeficiencia humana tipo I (HIV-1) em crianças infectadas via perinatalMolina, Rosana Mara 24 February 2005 (has links)
Orientador: Sandra Cecilia Botelho Costa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T06:07:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Molina_RosanaMara_D.pdf: 6324359 bytes, checksum: e228946d61b59894926210942eabbc1c (MD5)
Previous issue date: 2005 / Resumo: A infecção pelo HIV-1 em mulheres, tem aumentado nesses últimos anos, neste caso, torna-se importante o diagnóstico precoce do HIV-1 nas crianças nascidas de mães contaminadas. Para detectar o HIV-1 nessa população pediátrica, a ¿Nested-PCR¿ está sendo amplamente utilizada. O genoma do HIV-1 é variável e atualmente, há vários métodos para se detectar essas variações, sendo que o sequenciamento direto de fragmentos genéticos do HIV-1 é considerado padrão ouro para determinação dos subtipos do HIV-1. No presente trabalho foi incluído 58 amostras de crianças HIV-1 positivas (via perinatal), sendo que em 20 o diagnóstico foi obtido pela ¿Nested-PCR¿ para diagnóstico do HIV-1 (primers JA4 ¿ JA7, JA9 ¿ JA12, JÁ13 ¿ JA16 e JA17 ¿ JA20, com produto de 131, 341, 172 2 129 pb respectivamente, referentes aos genes gag, env ¿ 2 regiões e pol) antes da realização da genotipagem viral; as demais amostras (38) já eram crianças previamente diagnosticadas. As 58 amostras foram submetidas a ¿Nested-PCR¿ de região do gen env para posterior sequenciamento viral, com a utilização dos primers EN 70 - EN 85 e EN 80 - EN 95, com produto de amplificação de 682 pb. Posteriormente foi realizada a purificação do produto da PCR e o sequenciamento direto em seqüenciador automático MegaBace 1000R. Das 58 amostras analisadas, foi possível um sequenciamento e conseqüente subtipagem viral em 56. Dessas, 47 (83,93 %) foram portadoras do subtipo B e 9 (16,07 %) do subtipo F (F1) do HIV-1. Os resultados obtidos confirmam a predominância do subtipo B, seguido pelo F no Brasil / Abstract: The HIV-1 infection in women has been increased these recent years, this way the early diagnosis of HIV-1 infected children born to contaminated mothers becomes very important. The ¿Nested-PCR¿ has been widely utilized in order to detect the HIV-1 in this pediatric population. The HIV-1 genome is variable, and nowadays, there are several methods to detect these variations and furthermore the direct sequencing of the HIV-1 genetic fragments is considered gold pattern for the determination of the HIV-1 subtypes. In the present study 58 samples from positive HIV-1 children (perinatal via) were included, seeing that the diagnosis in 20 of them was obtained by the ¿Nested-PCR¿ to the HIV-1 diagnosis (primers JA4 ¿ JA7, JA9 ¿ JA12, JÁ13 ¿ JA16 and JA17 ¿ JA20, with product of 131, 341, 172 2 129 pb respectively relating to genes gag, env ¿ 2 regions e pol) before the performance of the viral genotyping; the rest of the samples (38) were children previously diagnosed. The 58 samples were submitted to the ¿Nested-PCR¿ of the region of the env gen to posterior viral sequencing with the utilization of the primers EN 70 - EN 85 and EN 80 - EN 95, with the amplification product of 682 bp. Afterwards the purification of the PCR was carried out and the direct sequencing in a MegaBace 1000R automatic sequencer. From the 58 samples analyzed it was possible a sequencing and posterior viral subtyping in 56. From those ones, 47 (83,92 %) were HIV-1 subtype B infected and 9 (16,07 %) subtype F infected (F1). The results obtained assure the predominance of subtype B, followed by subtype F in Brazil / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica
|
170 |
Prevalencia do herpesvirus humano 1 em neoplasias cutaneas epiteliais malignasRodriguez, Sylvia Ipiranga de Souza Dantas e 29 July 2003 (has links)
Orientador: Aparecida Machado de Moraes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T09:26:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1
Rodriguez_SylviaIpirangadeSouzaDantase_M.pdf: 623979 bytes, checksum: 17286e5a33fc87f5f8e05eb4538b7b2b (MD5)
Previous issue date: 2003 / Resumo: Objetivo: Identificar o DNA do herpesvirus humano tipo 1 (HHV 1) em neoplasias cutâneas epiteliais malignas (NCEM), comparando com pele normal dos mesmos pacientes e de outro grupo de pacientes livres de neoplasia de pele e estudar o seu impacto sobre a carcinogênese. Pacientes e Métodos: Colheu-se um fragmento do tumor e outro de pele aparentemente sã de 41 pacientes portadores de NCEM, incluindo carcinomas epidermóide (CEC), basocelular (CBC) e queratose actínica (QA). Num segundo grupo, sem neoplasia, fez-se 41 biópsias de pele aparentemente sã. O DNA foi extraído e realizou-se a reação em cadeia da polimerase, com a identificação de uma banda de 199 pares de base à eletroforese. Aplicou-se o teste do Qui-quadrado ou o teste exato de Fischer, para estudo estatístico. Como medida de concordância utilizou-se o coeficiente kappa. Resultados: O HHV 1 foi identificado em 21 pacientes portadores de NCEM e em 20 pacientes do grupo controle. Dentre os pacientes do grupo de estudo, o HHV 1 foi identificado na pele acometida pela neoplasia em 17 pacientes, sendo exclusivo neste tecido em 11 pacientes; enquanto, na sua pele normal de controle, foi identificado em 10 pacientes, dos quais 4 não o expressaram no tumor. O coeficiente kappa foi 0,198. Dentre os padrões tumorais, 24 tumores foram CEC/QA e 17 CBC. Destes, 13 CEC/QA (32%) e 4 (10%) dos CBC expressavam HHV 1. Discussão e Conclusões: O HHV 1 foi identificado em alta prevalência nos dois grupos estudados, sendo mais importante a sua identificação na pele acometida por tumor, em relação à pele sã de controle. Isto denota uma possível participação, dentro de um contexto multifatorial do HHV 1 na oncogênese cutânea, sem entretanto ter sido identificada uma relação direta de causalidade / Abstract: Objective: To identify human herpesvirus 1 DNA in skin samples of epithelial tumors, comparing normal skin of the same patients and other no cancer group. Settings: Division of Dermatology, Laboratory of Molecular Genetics of Cancer and Laboratory of Rheumatology, Campinas University, Campinas, Sao Paulo, Brazil. Patient and Methods: Forty-one patients with epithelial tumors were submitted to biopsies from tumor and normal skin. At control group, it was collected 41 biopsies from patients with others dermatosis. After DNA extraction, polymerase chain reaction was performed to identify a 199-bp band. The results were statistically evaluated by Chi square test or Fisher test, as statistical analysis. Results: HHV 1 was identified in 21 patients with skin cancer and 20 control group patients. The virus was present at 17 samples of epithelial skin tumor biopsies (41%). From these 17 patients with tumor, 6 have presented the virus at normal skin control and 11 do not. Among those patients who had not presented the HHV 1 at tumor samples, only 4 had had expressed at normal sample. The kappa coefficient was 0,198. There were 24 SSC/AQ and 17 BCC. Thirteen SCC and 4 BCC had presented with HHV 1. Conclusions: The prospective study evidenced the presence of human herpesvirus 1 in skin, especially in tumor samples. There is no evidence of its causative effect, but at this group, there was an increased prevalence of HHV 1 at tumor samples than over normal control skin. This study may lead others in intent to verify the herpesvirus participation in oncogenesis of epithelial skin tumors / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica
|
Page generated in 0.137 seconds