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Investigação da participação de adrenoceptores α1A e α1D na contração da cauda de epididímo de rato e sua androgênica e estrogênica /Kiguti, Luiz Ricardo de Almeida. January 2014 (has links)
Orientador: Luiz Ricardo de Almeida Kiguti / Coorientador: André Sampaio Pupo / Banca: Edson Antunes / Banca: Sandra Cordellini / Banca: Erick José Ramo da Silva / Resumo: O epidídimo é o órgão do sistema reprodutor masculino responsável pela maturação e armazenamento dos espermatozóides. A contração da cauda do epidídimo (CE) é um dos primeiros eventos da fase de emissão seminal da ejaculação e o sistema nervoso autônomo simpático desempenha um papel importante na contração da CE através da ativação de adrenoceptores α1 (α1-ARs). Neste estudo mostramos que a CE expressa α1A-ARs e α1D-ARs e que ambos os receptores contribuem, de um modo complexo, para a contração da CE induzida por agonistas α1. Na ausência de ativação por agonistas o α1D-ARs modula a contração induzida pela ativação de α1A-ARs por agonistas exógenos. Os α1A-ARs da CE não são dessensibilizados pela oximetazolina. Os andrógenos desempenham um papel importante na manutenção da interação entre os α1A/1D-ARs visto que a redução de andrógenos, mas não de estrógenos, pela castração evidencia a presença dos α1D-ARs. A interação complexa entre os 1A/α1D-ARs é discutida no contexto de heterodimerização de receptores visto que mostramos, pela primeira vez, a heterodimerização entre os α1A e α1D-ARs recombinantes humanos / Abstract: The epididymis is the male reproductive organ responsible for sperm maturation and storage. The contraction of cauda epididymis (CE) during ejaculation is one of the first events of seminal emission phase of ejaculation and the sympathetic nervous system plays a key role in the CE contraction via α1 adrenoceptors (α1-ARs) activation. In this study we show that CE expresses α1A and α1D-ARs and both receptor subtypes contribute in a complex way to the CE contraction induced by α1-ARs agonists. The α1D modulates α1A-ARs induced contraction irrespective of agonist-mediated α1D activation. There is no desensitization of CE α1A-ARs to oxymetazoline. The androgens were shown to play an important role in the maintenance of such α1A/α1D interaction as the androgen deprivation unravels the cryptic functional α1D-ARs. Estrogens had no effect on α1-ARs mediated contraction of CE. The complex α1A/α1D interaction is discussed in the context of receptor heterodimerization as we showed, for the first time, heteromerization of recombinant α1A/α1D-ARs / Doutor
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Miofibroblastos cardiacos de rata adulta son resistentes a autofagia inducida por estimulación [beta]2-adrenérgicaCanales Urriola, Jimena Andrea January 2010 (has links)
Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / Los fibroblastos cardiacos son células que cumplen un rol fundamental en el mantenimiento de la homeostasis de la matriz extracelular del corazón. Luego de un daño al miocardio, además, participan activamente del remodelado cardiaco como tal o diferenciándose a miofibroblasto, un fenotipo celular que presenta características que lo hacen apto para funciones de cicatrización. Se ha observado que luego de un daño al miocardio, el corazón está expuesto a un mayor tono adrenérgico con la finalidad de compensar la disfunción adquirida por la injuria del tejido. Estudios de nuestro laboratorio han demostrado que la estimulación β2-adrenérgica por Isoproterenol induce autofagia en fibroblastos cardiacos de rata adulta, un proceso degradativo que se ha reportado capaz de perder su equilibrio en diversas patologías cardiovasculares. Por esto, se vuelve interesante determinar si estos mismos estímulos son capaces de inducir autofagia en miofibroblastos cardiacos, células que aparecen sólo cuando hay daño al miocardio. Los resultados muestran que tanto fibroblastos como miofibroblastos cardiacos presentan receptores adrenérgicos sólo del subtipo β2. Miofibroblastos cardiacos presentaron mayor número de receptores β2-adrenérgicos y con mayor afinidad por sus ligandos que fibroblastos cardiacos. En ambos fenotipos celulares los receptores mencionados se encuentran funcionales. En cuanto a la autofagia, los estímulos clásicos inductores de autofagia (rapamicina y/o privación de nutrientes) y la estimulación β2-adrenérgica por Isoproterenol inducen autofagia en fibroblastos. De modo distinto, estos inductores no fueron capaces de inducir autofagia en miofibroblastos cardiacos de rata adulta, aunque se encontró que en condiciones basales presentaban mayor nivel de autofagia que los fibroblastos. Los resultados demuestran que los miofibroblastos cardiacos son resistentes a la inducción de autofagia por estimulación β2-adrenérgica, lo que puede abrir una puerta para el entendimiento del rol de este proceso en estados patológicos del corazón.
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Efeito do agonista b2-adrenérgico formoterol na regeneração muscular de ratos idosos. / Effect of the b2-adrenoceptor agonist formoterol on skeletal muscle regeneration of aged rats.Silva, Lucila Hernandes da 01 March 2012 (has links)
Músculos esqueléticos de ratos idosos apresentam uma reduzida capacidade de se regenerar após lesão. No presente estudo, nós lançamos a hipótese de que a estimulação farmacológica de adrenoceptores b2 em músculos de ratos idosos lesados poderia melhorar a regeneração destes. Ratos jovens e idosos foram tratados com injeção subcutânea do agonista b2-adrenérgico formoterol (2 mg/kg/dia) durante 10 e 21 dias após lesão do músculo sóleo. Os músculos de ratos idosos lesados e tratados com formoterol por 10 e 21 dias apresentaram menor processo inflamatório e fibras musculares em regeneração com maior calibre quando comparados aos músculos apenas lesados. O tratamento com formoterol preveniu a queda da força tetânica e aumentou a síntese de proteínas e a fosforilação de mTOR em músculos de ratos idosos lesados e avaliados após 10 dias. Nossos resultados sugerem que o formoterol melhora a capacidade regenerativa estrutural e funcional dos músculos esqueléticos de ratos idosos, e que esse efeito é mediado pelo aumento da síntese protéica através da ativação de mTOR. / Skeletal muscles from old rats fail to completely regenerate following injury. In the present work, we hypothesized that pharmacological stimulation of b2-adrenoceptors in aged muscles following injury could improve their regenerative capacity. Young and aged rats were treated with a subcutaneous injection of b2-adrenergic agonist formoterol (2 mg/kg/day) up to 10 and 21 days after soleus muscle injury. Formoterol-treated muscles from old rats evaluated at 10 and 21 days post-injury showed reduced inflammation and regenerating myofibers of greater caliber when compared to their injured controls. Formoterol minimized the decrease in tetanic force and increased protein synthesis and mTOR phosphorylation in old muscles at 10 days post-injury. Our results suggest that formoterol improves structural and functional regenerative capacity of regenerating skeletal muscles from aged rats by increasing protein synthesis via mTOR activation.
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Ações da metilecgonidina sobre a síntese de melatonina na glândula pineal de ratos. / Actions of the metilecgonidine on the syntesis of melatonin in the pineal gland of rats.Mesquita, Livia Silva Medeiros de 19 April 2012 (has links)
A glândula pineal sintetiza o hormônio melatonina no período escuro. No rato, a ativação dos receptores a e b-adrenérgicos aumenta os níveis de AMPc, levando à síntese e ativação da enzima arilalquilamina-N-acetiltransferase (AANAT). A glândula recebe também inervação parassimpática, sendo inibitório o efeito da acetilcolina. A metilecgonidina (AEME) é o produto da pirólise da cocaína, quando esta é usada sob a forma de \"crack\". Neste trabalho estudamos os efeitos e os mecanismos de ação da AEME sobre a síntese da melatonina. Foram investigados a atividade da AANAT, o Ca2+, o AMPc e a viabilidade celular e a fragmentação do DNA. A AEME reduziu a síntese da melatonina in vivo e in vitro, sendo este efeito revertido pela atropina. A AEME induziu um aumento do Ca2+, não alterando o AMPc e a atividade da AANAT. A viabilidade celular e fragmentação do DNA não foram modificadas pela AEME. Em conclusão, a AEME reduz a síntese da melatonina, in vitro e in vivo, e a sua ação se dá por interferir com o sistema colinérgico muscarínico. / The pineal gland synthesizes the hormone melatonin in the dark. In rats, the activation of a and b-adrenergic receptors increases cAMP levels and the synthesis and activity of arylalkylamine-N-acetyltransferase enzyme (AANAT). The pineal gland is also innervated by parasympathetic fibers, being inhibitory the effect of acetylcholine. Methylecgonidine (AEME) is the pyrolysis product of cocaine when it is used as \"crack.\" In this work we studied the effects of AEME on the melatonin synthesis, in vitro and in vivo. We investigated AANAT activity, iCa2+, cAMP, cell viability and DNA fragmentation. AEME reduced melatonin synthesis in vivo and in vitro, and this effect was reversed by atropine. There was an increase in Ca2+, but not in cAMP or AANAT activity induced by AEME. Cell viability and DNA fragmentation were not affected by AEME. In conclusion, AEME reduced melatonin synthesis in vitro and in vivo, being this effect mediated by the muscarinic cholinergic system.
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Mecanismos adrenérgicos no núcleo retrotrapezóide no controle respiratório. / Adrenergic mechanisms in the retrotrapezoid nucleus in breathing control.Santos, Luiz Marcelo Oliveira 13 November 2015 (has links)
O núcleo retrotrapezóide (RTN) é uma região bulbar envolvida na respiração. Estudos prévios mostraram a presença de varicosidades catecolaminérgicas na região do RTN. O objetivo deste estudo foi investigar a fonte de catecolaminas e os efeitos promovidos pela ativação dos receptores adrenérgicos no RTN. Uma densa projeção neuronal do grupamento A7 para o RTN foi revelada usando o traçador retrógrado Fluorogold. Foi registrada a atividade eletromiográfica do diafragma (DiaEMG) e do abdominal (AbdEMG) de ratos Wistar anestesiados. A injeção de noradrenalina promoveu uma inibição da DiaEMG, sem alterar a AbdEMG; este efeito foi atenuado pela injeção prévia de ioimbina e não foi afetado pela injeção de prazosina e propranolol no RTN. A injeção de fenilefrina no RTN aumentou a DiaEMG e gerou AbdEMG; estes efeitos foram bloqueados por injeções prévias de prazosina no RTN. Os resultados deste estudo suportam a ideia de que o RTN recebe projeções adrenérgicas da ponte que modula a atividade dos neurônios do RTN por meio da ativação dos receptores adrenérgicos α -1 e α- 2. / The retrotrapezoid nucleus (RTN) is a medulla region involved in breathing. Previous studies showed the presence of catecholaminergic varicosities in the RTN region. The aim of this study was to investigate the source of cathecolamines and the effects produced by the activation of adrenergic receptors in the RTN. A dense neuronal projection from A7 to RTN was revealed using retrograde tracer FluorGold. In anaesthetized male Wistar rats, diaphragm (DiaEMG) and abdominal (AbdEMG) muscle activities were recorded. Injection of noradrenaline produced an inhibition of DiaEMG, but did not change AbdEMG; These effects was attenuated by pre-injection of yohimbine and were not affect by injection of prazosin and propranolol into the RTN. Injection of phenilephrine into the RTN increased DiaEMG and was also able to generate AbdEMG; these responses were eliminated by pre-injections of into the RTN. These results support the idea that RTN has pontine adrenergic inputs that modulate RTN neurons activity through activation of α - 1 and - α -2 adrenergic receptors.
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Alterações vasculares induzidas pelo tratamento crônico com Isoproterenol: Investigação dos subtipos de receptores b-adrenérgicos envolvidos e da possível geração de um processo inflamatório local. / Vascular alterations induced by chronic isoproterenol-treatment: b-adrenoceptor subtypes involved and possible local proinflammatory process generation.Davel, Ana Paula Couto 11 December 2008 (has links)
Neste estudo investigou-se: 1) os subtipos de receptores b-adrenérgicos (b-AR) envolvidos nas alterações de reatividade vascular induzida pela hiperativação dos receptores b-AR com do uso de camundongos nocaute para os receptores b1- ou b2-AR e selvagens tratados por 7 dias com isoproterenol; 2) a expressão gênica e protéica de mediadores pró-inflamatórios na aorta de ratos tratados por 7 dias com isoproterenol. Os dados demonstram que: em aorta de camundongos selvagens o receptor b1-AR é mais importante em mediar vasodilatação, enquanto o b2AR modula negativamente a contração vascular de maneira dependente do endotélio. A hiperativação dos receptores b-AR aumenta a vasoconstrição à fenilefrina via desequilíbrio NO/ ânion superóxido em aorta de camundongos e o b2-AR parece estar envolvido no desencadeamento destes efeitos. Sugere-se que a ativação crônica dos receptores b-AR aumenta a síntese de fatores pró-inflamatórios e induz maior ativação do NF-kB no tecido vascular, efeitos que parecem estar associados ao aumento da reatividade vascular à fenilefrina. / In this study, it was investigated: 1) the b-adrenoceptor (AR) subtypes involved in the altered vascular reactivity induced by overactivation of b-AR using b1- or b2-adrenoceptor knock-out mice and respective wild-types treated for 7 days with isoproterenol or with vehicle; 2) gene and protein expression of vascular inflammatory mediators in aorta from 7-day isoproterenol-treated rats. In conclusion, the data suggest that b1-AR is more important in the modulation of vasodilator mechanisms while b2 down regulates mice vascular contraction in an endothelium-dependent manner. Overactivation of b-AR increased vasoconstrictor response to phenylephrine, by NO/ superoxide anion unbalance in mice aortic rings, and b2-AR seems to be involved in the triggering of these chronic isoproterenol effects. The results also suggest that chronic activation of b-AR enhances the synthesis of proinflammatory factors and induces higher NF-kB activation on vascular tissue, and these effects seem to be related to hiperreactivity to phenylephrine induced by chronic isoproterenol.
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Mecanismos adrenérgicos no núcleo retrotrapezóide no controle respiratório. / Adrenergic mechanisms in the retrotrapezoid nucleus in breathing control.Luiz Marcelo Oliveira Santos 13 November 2015 (has links)
O núcleo retrotrapezóide (RTN) é uma região bulbar envolvida na respiração. Estudos prévios mostraram a presença de varicosidades catecolaminérgicas na região do RTN. O objetivo deste estudo foi investigar a fonte de catecolaminas e os efeitos promovidos pela ativação dos receptores adrenérgicos no RTN. Uma densa projeção neuronal do grupamento A7 para o RTN foi revelada usando o traçador retrógrado Fluorogold. Foi registrada a atividade eletromiográfica do diafragma (DiaEMG) e do abdominal (AbdEMG) de ratos Wistar anestesiados. A injeção de noradrenalina promoveu uma inibição da DiaEMG, sem alterar a AbdEMG; este efeito foi atenuado pela injeção prévia de ioimbina e não foi afetado pela injeção de prazosina e propranolol no RTN. A injeção de fenilefrina no RTN aumentou a DiaEMG e gerou AbdEMG; estes efeitos foram bloqueados por injeções prévias de prazosina no RTN. Os resultados deste estudo suportam a ideia de que o RTN recebe projeções adrenérgicas da ponte que modula a atividade dos neurônios do RTN por meio da ativação dos receptores adrenérgicos α -1 e α- 2. / The retrotrapezoid nucleus (RTN) is a medulla region involved in breathing. Previous studies showed the presence of catecholaminergic varicosities in the RTN region. The aim of this study was to investigate the source of cathecolamines and the effects produced by the activation of adrenergic receptors in the RTN. A dense neuronal projection from A7 to RTN was revealed using retrograde tracer FluorGold. In anaesthetized male Wistar rats, diaphragm (DiaEMG) and abdominal (AbdEMG) muscle activities were recorded. Injection of noradrenaline produced an inhibition of DiaEMG, but did not change AbdEMG; These effects was attenuated by pre-injection of yohimbine and were not affect by injection of prazosin and propranolol into the RTN. Injection of phenilephrine into the RTN increased DiaEMG and was also able to generate AbdEMG; these responses were eliminated by pre-injections of into the RTN. These results support the idea that RTN has pontine adrenergic inputs that modulate RTN neurons activity through activation of α - 1 and - α -2 adrenergic receptors.
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Efeitos das injeções de agonistas e antagonistas adrenérgicos no núcleo mediano da rafe sobre comportamentos relacionados à ansiedade e ingestão de alimento em ratosMansur, Samira Schultz 25 October 2012 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T16:33:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1
290831.pdf: 751410 bytes, checksum: 04fd3d97a64387aaca1f4bec847709dd (MD5) / Este estudo investigou a participação de receptores adrenérgicos .1, .2 e ß2 do núcleo mediano da rafe (MR) de ratos saciados no controle dos comportamentos relacionados à ansiedade e ingestão de alimento, a fim de estabelecer uma associação funcional entre eles. O agonista adrenérgico-.1 fenilefrina (FEN) (0, 0,2, 2, 6, 20 nmol) foi injetado no MR ou no núcleo pontino (Pn); o agonista adrenérgico-.2 clonidina (CLO) foi injetado no MR (0, 0,2, 2, 6, 20 nmol), no Pn (0,2 e 20 nmol) ou na formação reticular mesencefálica (FRm) (0,2 e 20 nmol); o agonista adrenérgico-ß2 terbutalina (TER) (0, 0,2, 2, 6, 20 nmol) foi injetado no MR ou no Pn. O antagonista adrenérgico-.1 prazosin (PRA, 40 nmol) ou veículo foram injetados no MR 15 min antes do tratamento com FEN (0,2 nmol); o antagonista adrenérgico-.2 ioimbina (YOH, 40 nmol) foi administrado 15 min antes da CLO (0,2 nmol e 20 nmol) ou veículo. Os animais foram colocados no labirinto em cruz elevado (LCE) para avaliação de variáveis espaço-temporais e etológicas. Na sequência, os comportamentos ingestivos e não-ingestivos foram registrados durante 30 min e a quantidade de ração e água consumida foram mensuradas. Tanto no LCE quanto na caixa de registro alimentar, todas as doses de FEN injetadas no MR diminuíram a freqüência de exibição da avaliação de risco (AR), um parâmetro etológico indicador de ansiólise; as variáveis espaço-temporais permaneceram inalteradas. Não houve alteração de comportamentos relacionados à ansiedade após o tratamento com FEN no Pn. O tratamento prévio com PRA no MR bloqueou o efeito ansiolítico da FEN. A dose mais alta de CLO injetada no MR aumentou a frequência de AR, um efeito ansiogênico; resultado similar foi observado após a injeção da mesma dose da droga no Pn e na FRm. O tratamento prévio com YOH no MR bloqueou o efeito ansiogênico da CLO. Todas as doses de TER injetadas no MR e no Pn diminuíram a frequência de AR, aumentaram a % do tempo de permanência nos braços abertos e aumentaram o número de entradas nos braços abertos do LCE, indicando efeito ansiolítico. A ingestão de alimento não foi afetada pela injeção de FEN no MR ou no Pn. O tratamento isolado com PRA no MR causou hiperfagia, acompanhada por redução na latência para iniciar a alimentação, aumento na duração, bem como aumento na frequência da resposta de alimentação. A maior dose de CLO também causou hiperfagia acompanhada por redução na latência para iniciar a alimentação e aumento na freqüência desta resposta quando injetada no MR, mas não no Pn ou na FRm. O tratamento prévio com YOH no MR bloqueou o efeito ingestivo da CLO. A ingestão de alimento não foi afetada após a injeção de TER no MR e no Pn. Os resultados indicam que: 1) a ativação de receptores adrenérgicos-a1 do MR têm efeito ansiolítico, enquanto a ativação de receptores adrenérgicos-a2 deste núcleo causa ansiogênese, sendo que estas respostas comportamentais parecem ser mediadas, respectivamente, pelo aumento e diminuição da liberação de 5-HT do MR; 2) no animal saciado há uma influência adrenérgica mediada por receptores adrenérgicos-a1 do MR, que ativa tonicamente um circuito inibitório, possivelmente neurônios serotonérgicos deste núcleo, e impede o comportamento ingestivo; 3) a ativação de receptores adrenérgicos-ß2 do MR têm efeito ansiolítico, sem alterar o comportamento de ingestão de alimento; 4) os comportamentos de ansiedade e ingestivos controlados por circuitos adrenérgicos do MR operam por vias neurais independentes.
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Vias de sinalização endotelial α2, AT1, e AT2 sobre a reatividade da aorta de ratos após consumo de etanol e exposição ao estresse, isoladamente e em associaçãoBaptista, Rafaela de Fátima Ferreira [UNESP] 27 February 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-06-17T19:33:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0
Previous issue date: 2014-02-27. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:54Z : No. of bitstreams: 1
000830123.pdf: 3340415 bytes, checksum: 6ff6732f5faa2204891e545e0e18bd75 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Introdução: o estresse e o consumo de etanol são importantes fatores de risco cardiovascular. Objetivos: avaliar os efeitos da exposição ao estresse e do consumo de etanol, isoladamente e em associação sobre a pressão arterial e a reatividade da aorta torácica in vitro. Métodos: ratos Wistar machos adultos (8- 10 por grupo) foram separados em grupos: controle, etanol (20% de etanol na água de beber por 6 semanas), estresse (contenção 1h/dia 5 dias/semana durante 6 semanas) e etanol/estresse (ambos procedimentos em associação). A pressão arterial sistólica caudal (PAS), a concentração plasmática de corticosterona e a capacidade antioxidante do plasma foram avaliadas. Curvas concentração-efeito à noradrenalina na ausência ou presença de ioimbina (bloqueador-α2), L-NAME (inibidor da sintase do óxido nítrico), ou indometacina (inibidor da ciclooxigenase); à fenilefrina; e à angiotensina II na ausência e presença de losartan (bloqueador-AT1), PD123-319 (bloqueador-AT2), L-NAME, ou indometacina foram obtidas em anéis de aortas intactas e desnudadas de endotélio. Concentração efetiva 50% (CE50) e resposta máxima (RM) foram comparadas entre os grupos utilizando MANOVA/Tukey. P < 0,05 foi considerado estatisticamente significativo. Resultados: a exposição ao estresse, isoladamente e em associação ao consumo de etanol aumentou a PAS. Estresse ou estresse em associação aumentou as RM à noradrenalina em aortas intactas. Esta hiperreatividade foi abolida pela remoção do endotélio e pela presença de indometacina ou ioimbina, mas não foi alterada pela presença de L-NAME. Por sua vez, o consumo de etanol isoladamente não alterou a reatividade à noradrenalina. As respostas à fenilefrina em aortas com e sem endotélio e à noradrenalina em aortas sem endotélio permaneceram inalteradas independentemente do protocolo. Etanol e estresse, isoladamente e em associação, não alteraram a reatividade da aorta ... / Introduction: stress and ethanol consumption are important cardiovascular risk factors. Objectives: to evaluate the effects of stress exposure and ethanol consumption, alone and in association on blood pressure and thoracic aorta reactivity in vitro. Methods: Wistar adult male rats (8-10 per group) were separated into groups: control, ethanol (20% ethanol in their drinking water for 6 weeks), stress (restraint 1h/day 5 days/week for 6 weeks) ethanol/stress (both procedures in association). Caudal systolic blood pressure (SBP), plasma corticosterone and plasma antioxidant capacity were evaluated. Concentrationeffect curves to noradrenaline in the absence or presence of yohimbine (α2- blocker), L-NAME (inhibitor of nitric oxide synthase) or indomethacin (cyclooxygenase inhibitor); phenylephrine; and angiotensin II in the absence and presence of losartan (AT1-blocker), PD123-319 (AT2-blocker), L-NAME or indomethacin were obtained from the intact and denuded-endothelium aortas. 50% effective concentration (EC50) and maximum response (MR) were compared between groups using MANOVA/Tukey. P < 0.05 was considered statistically significant. Results: exposure to stress, alone and in association with ethanol consumption increased SBP. Stress and stress in association increased the MR to noradrenaline in intact aortas. This hyperreactivity was abolished by both removal of the endothelium and the presence of indomethacin or yohimbine, but was not changed by the presence of L-NAME. In turn, the consumption of ethanol alone did not alter the reactivity to noradrenaline. Responses to phenylephrine in aortas with and without endothelium and to noradrenaline in aortas without endothelium remained unchanged regardless of protocol. Ethanol and stress, alone and in association, did not alter the reactivity of intact aorta to angiotensin II. PD123-319 decreased MR to angiotensin II in intact rat aortas of ethanol and ethanol/stress groups compared to the ...
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Caracterização de osteoblastos diferenciados de células-tronco mesenquimais da medula óssea de ratos espontâneamente hipertensos (SHR)Cursino, Natalia Manrique [UNESP] 26 August 2014 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-06-17T19:34:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0
Previous issue date: 2014-08-26. Added 1 bitstream(s) on 2015-06-18T12:47:11Z : No. of bitstreams: 1
000829196.pdf: 397092 bytes, checksum: ae8c06f67bfaa9d589934981c550dd81 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A hipertensão arterial representa um fator de risco sistêmico para várias doenças incluindo redução da massa óssea por aumentar a reabsorção e diminuir a formação óssea. Considerando que a formação óssea é resultante da atividade de osteoblastos, o objetivo deste estudo foi avaliar as características fenotípicas e genotípicas de células osteoblásticas diferenciadas de CTMs (células-tronco mesenquimais) de SHR. A partir de medulas ósseas de fêmures de SHR, CTMs foram obtidas por adesão ao plástico de cultura de células e diferenciadas em osteoblastos por cultura em meio osteogênico até que atingissem a subconfluência. Em seguida, as células foram subcultivadas na densidade de 2x104 células/poço em placas de 24 poços. Células obtidas de Wistar foram utilizadas como controle. Para a avaliação das respostas celulares foram realizados ensaios de proliferação celular, atividade de fosfatase alcalina (ALP), formação de matriz mineralizada e expressão gênica dos marcadores osteoblástico: 1) runt-related transcription fator 2 (RUNX2), 2) Osterix (OSX), 3) Fosfatase alcalina (ALP), 4) Proteína óssea morfogenética 2 (BMP2); 5) Sialoproteína óssea (BSP), 6) Osteocalcina (OC), 7) Osteopontina (OPN), 8) e Colágeno (COL), além dos receptores β1 e β2 adrenérgicos. Os dados foram comparados pelo teste ANOVA seguido do teste de Tukey, e o nível de significância adotado foi de 5% (p≤0,05). Células osteoblásticas de SHR apresentaram alterações no fenótipo osteoblástico, exibindo, em todos os períodos avaliados, menor proliferação celular, atividade de ALP e formação de matriz mineralizada. A expressão gênica de todos os marcadores ósseos também foi menor em SHR quando comparado com Wistar na maioria dos períodos avaliados. A expressão gênica do receptor β2 adrenérgico foi maior em SHR em todos os períodos avaliados e não foi detectada... / Hypertension is a systemic risk factor for several diseases including reduction of bone mass by increasing bone resorption and reducing bone formation. Considering that bone formation results from osteoblast activity, the aim of this study was to assess the phenotypic and genotypic characteristics of osteoblastic cells differentiated from MSCs of SHR. Bone marrow was harvested from SHR femurs and MSCs were selected by adherence to plastic cell culture and differentiated into osteoblasts by culturing in osteogenic medium until subconfluence. Then, the cells were subcultured at a density of 2x104 cells / well in 24 well plates. Cells from Wistar rats were used as control. Cells responses were evaluated by assaying proliferation, alkaline phosphatase activity (ALP), mineralized matrix formation and the gene expression of the osteoblastic markers: runt-related 1) runt-related transcription fator 2 (RUNX2), 2) Osterix (OSX) 3) Alkaline phosphatase (ALP), 4) Bone morphogenetic protein 2 (BMP2); 5) Bone sialoprotein (BSP), 6) Osteocalcin (OC), 7) Osteopontin (OPN), 8) and Collagen type 1 alpha (COL), in addition to the gene expression of β1 and β2 adrenergic receptors. Data were compared by ANOVA followed by Tukey test and the level of significance was 5% (p ≤ 0.05). SHR derived osteoblasts showed changes in osteoblastic phenotype, exhibiting in all periods reduced cell proliferation, ALP activity and mineralized matrix formation. The gene expression of all bone markers was also lower in SHR compared with Wistar in many periods. The gene expression of the β2 adrenergic receptor was greater in SHR in all periods and it was not detected the expression of β1receptor either in SHR or Wistar. Based on these results, we conclude that osteoblasts differentiated from SHR MSCs exhibit reduced or delayed in the differentiation process. We also suggest...
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