Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-07-13T16:32:44Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2878429 bytes, checksum: f47e247b860f8a5564344ee2ac1a7457 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T16:32:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2878429 bytes, checksum: f47e247b860f8a5564344ee2ac1a7457 (MD5) Previous issue date: 2016-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Avaliou-se o uso de diferentes protocolos de cultivo in vitro de fragmentos ovarianos de cadelas domésticas adultas em anestro, em casuística de programa de controle populacional de animais errantes no município de Viçosa MG. Após a colheita dos ovários, foram obtidos fragmentos da zona parenquimatosa de cada ovário, um dos quais foi incluído fresco como controle, e os demais incubados por 48 horas em atmosfera de 5 % de CO 2 , 95 % de umidade relativa e temperatura de 39 oC, em diferentes tratamentos: T1: cultivados em Meio Essencial Mínimo (MEM); T2: cultivados em MEM associado a Soro de Cadela prenhe (MEM + SCpre) e T3: cultivados em MEM associado a Soro de Cadela no pró-estro (MEM + SCpro). Todos os fragmentos foram fixados por imersão em solução de Karnowisky por até 24 horas e processados segundo rotina para confecção de lâminas histológicas. Estas foram avaliadas quanto ao desenvolvimento folicular, sob microscópio de luz, em aumento de 100 vezes. A análise estatística foi feita pelo teste paramétrico de comparação de médias T Student. Todos fragmentos cultivados apresentaram aumento na proporção de folículos em desenvolvimento, assim conclui-se que o meio de cultivo utilizado associado à técnica de cultivo in situ foi suficiente para promover o desenvolvimento folicular em ovários de cadelas, sendo que a suplementação hormonal com SCpro e SCpre não influenciaram na taxa de desenvolvimento. / This present study evaluated different protocols of in vitro culture from ovarian fragments of domestic female dog (Canis lupus familiaris) in anestrus. For the study, ovaries from female dogs were used, obtained from the neutering of the stray animal population control of the municipal kennel program/ Veterinary Department - Universidade Federal de Viçosa (UFV). After the ovaries were collected, random fragments of the ovary parenchymal were obtained, one of them were used fresh as control, and the rest were incubated for 48 hours in 5 % of CO2 atmosphere, 95 % of relative humidity and 39 oC temperature, in different treatments: T1 cultivated in Minimum Essential Medium (MEM); T2 cultivated in MEM associated with pregnant dog serum and T3 cultivated in MEM associated with proestrus dog serum. Those ovaries cultivated in treatments T1, T2 and T3, were fixed by Karnowisky immersion for up to 24 hours, and processed following the normal laboratorial procedures for making histological slides. They were then evaluated under light microscope, using the 100X objective lens. The statistical analysis was made by the Student T`s parametric comparison measures test. All fragments of assessed ovaries showed a proportional increase of developing follicles, concluding that the culture medium used, associated to the in situ culture technique, was enough to promote the follicle development in dog’s ovaries, being that the hormonal supplementation with proestrus serum and pregnant serum did not influence the development rate.

Submitted by Amauri Alves (amauri.alves@ufv.br) on 2015-11-05T08:39:43Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 832338 bytes, checksum: d7be8073d4a572eea4ce99bab35dfe6b (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-05T08:39:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 832338 bytes, checksum: d7be8073d4a572eea4ce99bab35dfe6b (MD5) Previous issue date: 2015-02-03 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente estudo teve como objetivo a produção de proteína específica do oviduto de porcas para uso em meios de maturação in vitro (MIV). Avaliou-se o aumento da eficiência dos meios de MIV, para ovócitos de suíno, quando adicionados a melatonina ao meio, durante todo o processo de MIV, e a proteína específica do oviduto (pOSP), nas últimas quatro horas de maturação. Para aquisição da proteína, foram realizadas técnicas de transgenia, indução da expressão, purificação e dosagem da proteína. As características avaliadas foram: a expansão das células do cumulus compacto ooforus (CCOs), as concentrações intracelulares de espécies reativas de oxigênio (ROS) e desenvolvimento embrionário nos diferentes grupos experimentais (C = controle; T1 = somente com melatonina; T2 = com melatonina e proteína e T3 somente com proteína). As taxas de expansão do CCOs e de desenvolvimento embrionário foram analisadas pelo qui-quadrado (χ2) e a dosagem de ROS foi analisada pela ANOVA e teste de Duncan pelo programa estatístico SAEG 9.1 (SAEG-UFV, 2007) com probabilidade de erro de 5 %. A avaliação da produção de proteína recombinante foi feito por eletroforese e a dosagem, pelo método de Bradford. Em relação à expansão do CCOs, houve diferença (p<0,05) dos valores obtidos no grupo controle em relação aos valores médios dos grupos experimentais 1, 2 e 3, com os grupos experimentais mostrando resultados satisfatórios em relação ao controle, porém não houve diferença entre os valores dos grupos tratados (p>0,05). Na dosagem de ROS não houve diferença (p>0,05) entre os valores médios obtidos no grupo controle (26,4±10,9) e o valor médio verificado no grupo do tratamento 1 (23,4±7,8), porém no grupo do tratamento 2 (21,3±9,7) o valor médio mostrou-se satisfatório em relação ao valor médio do grupo controle. No entanto, o valor médio do tratamento 3 (16,6±10,5) foi o que mostrou o resultado mais satisfatório quando comparado aos demais tratamentos (p<0,05). A produção de embriões foi avaliada por meio da taxa de clivagem, não houve diferença (p>0,05) entre os valores obtidos no grupo controle (48,9 %) e os valores verificados nos grupos de tratamento 1 (51,5 %), tratamento 2 (50 %), tratamento 3 (57,7 %), e nem destes entre si. Conclui-se que a proteína específica do ixoviduto recombinante (pOSP) e a melatonina foram eficientes em melhorar a expansão das células do CCOs. Além disso, as células tratadas com pOSP mostraram-se com menor quantidade de ROS, podendo a pOSP ser considerada um antioxidante proteico. / The present study aimed the production of oviduct specific protein (pOSP) for its use on in vitro maturation (IVM). The increase on the efficiency of IVM was evaluated, for porcine oocytes, when melatonin is added to the environment, during the entire IVM process, and when the pOSP is added in the last four hours of maturation. In order to acquire the protein, transgenic techniques, induction of the expression, purification and determination of protein were used. The expansion of cumulus compact oophorus (CCOs), intracellular concentrations of reactive oxygen species (ROS) and embryonic development in the different experimental groups were evaluated (C = control; T1 = melatonin only; T2 = melatonin and pOSP and T3 = pOSP only). The CCOs growth rates and embryonic development were analyzed by the chi-squared test (χ2) and the ROS dosage was analyzed by ANOVA and by the Duncan Test, using the statistical program SAEG 9.1 (SAEG-UFV, 2007) with a 5% probability of error. The evaluation of the production of recombinant protein was done through electrophoresis, and the dosage was done by using the Bradford Method. Regarding the expansion of CCOs, there was a difference (p<0.05) on the values obtained in the control group in relation to the average values of the treatment group 1, 2 and 3, with the experimental groups showing satisfactory results compared with the control, however, there was no difference between treatments (p>0,05). In the ROS dosage, there was no difference between the mean values obtained in the control group (26.4 ± 10.9) and the average value observed in the treatment group 1 (23.4 ± 7.8). However, in the treatment group 2 (21.3 ± 9.7), the average value was found to be satisfactory in relation the average of the control group. Despite that, the average value of treatment 3 (16.6 ± 10.5) was found that the most satisfactory result compared to the other treatments (p <0.05). The production of embryos was evaluated by cleavage rate and there was no difference (p> 0.05) between the values obtained in the control group (48.9%) and the values that were verified in treatment groups of numbers 1 (51.5%), 2 (50%), 3 (57.7%), and neither of these with each other. This study showed that the pOSP and the melatonin xiwere effective in the improvement of the expansion of CCOs. In addition, the cells that were treated with pOSP presented less amount of ROS, allowing the pOSP to be considered a proteic antioxidant.

Orientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Coorientador: Alexeia Barufatti Grisolia / Coorientador: José Fernando Garcia / Banca: Roberto Carvalheiro / Banca: Joaquim Mansano Garcia / Banca: Fernando Sebastián Baldi Rey / Banca: Lenira El Faro / Resumo: Análises de associação genômica ampla (GWAS) para idade ao primeiro parto (IPP) e duração do período gestacional (PG) em bovinos da raça Nelore foram conduzidas utilizando painel de ~ 777.000 polimorfismos de nucleotídeo de sítio único (SNP). As análises de associação foram conduzidas em três grupos amostrais distintos com seus respectivos dados fenotípicos: 1) IPP em meses para 96 fêmeas, 2) valores genéticos preditos (EBVs) para IPP e PG para 831 touros, e 3) EBVs para IPP e PG para 1.278 fêmeas. Para cada conjunto de dados e para cada marcador, efeitos de substituição alélica foram estimados por meio do método dos quadrados mínimos ponderados e corrigidos para estratificação populacional. Os marcadores apresentando maiores efeitos estimados foram considerados como indicativos de evidência da associação da região cromossômica com o fenótipo investigado. Realizou-se a prospecção de genes candidatos nas regiões detectadas por diferentes metodologias (busca de SNP intragênicos, mapeamento de genes potencialmente em LD com SNP e construção de redes de termos funcionais, além de revisão manual para evidência em processo reprodutivo baseado em literatura científica). Grande número de regiões genômicas foram indicadas pelos efeitos de substituição alélica estimados, os quais apresentaram distribuição esperada para uma característica poligênica. Os resultados obtidos revelaram funções biológicas relacionadas a processos reprodutivos e sugeriram os genes PRKCD (protein kinase C delta type), PRKCE (protein kinase C epsilon type), ITHI-1 (inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H1 precursor), ITHI-3 (inter-alphatrypsin inhibitor heavy chain H3), ITHI-4 (inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H4 precursor), BT.62377 (sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Genome-wide scans for age at first calving (AFC) and gestation length (GL) in Nellore cattle were performed using a panel of over 777,000 single nucleotide polymorphisms (SNP). Association analyses were carried out in three distinct sample groups and their respective phenotypic data: 1) AFC, in months, for 96 cows, 2) AFC and GL estimated breeding values (EBVs) for 831 sires, and 3) AFC and GL EBVs for 1,278 cows. For each dataset and each marker, allele substitution effects were estimated via ordinary least squares and corrected for population stratification. Markers exhibiting high estimated effects were considered as indicative of evidence of association between the chromosomal region and phenotype investigated. Different methodologies were applied for the prospection of candidate genes within the detected regions (intragenic SNP mining, mapping of genes potentially in linkage disequilibrium with SNP, networking of functional terms, and manual review of genes previously found to be involved in reproductive processes). Large amounts of genomic regions were indicated by the estimated allele substitution effects, which presented a distribution consistent with a polygenic trait. The results obtained revealed biological functions related to reproductive processes and suggested PRKCD (protein kinase C delta type), PRKCE (protein kinase C epsilon type), ITHI-1 (inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H1 precursor), ITHI-3 (interalpha- trypsin inhibitor heavy chain H3), ITHI-4 (inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H4 precursor), BT.62377 (sarcoplasmic/endoplasmic reticulum calcium ATPase 3), EFCAB6 (uncharacterized gene), TPT1 (translationally-controlled tumor protein) and AMH (muellerian-inhibiting factor precursor), and ZBTB16 (zinc finger and BTB domain-containing protein 16) and PIK3R1 (Phosphatidylinositol 3-kinase... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Roberto Carvalheiro / Banca: Renata Helena Branco Arnandes / Banca: Henrique Nunes de Oliveira / Banca: Aníbal Eugênio Vercesi Filho / Banca: Fernando Sebastian Baldi Rey / Resumo: Biotécnicas reprodutivas e cruzamento constituem importantes ferramentas para o aumento da eficiência econômica e produtiva em bovinos de corte. A determinação da intensidade do uso dessas biotécnicas e o cruzamento, nas diferentes condições ambientais, de manejo e mercado, são fundamentais para otimizar a relação custo-benefício de sua adoção, visando aumentar a rentabilidade do sistema produtivo. Objetivou-se com este estudo estimar o ganho genético e econômico da utilização de diferentes biotécnicas reprodutivas e cruzamento, em um sistema produtivo de bovinos de corte, usando simulações determinísticas. O estudo foi baseado em um sistema de produção com capacidade para 1000 UA (UA = 450kg de peso vivo), adotando pastejo contínuo e taxa de lotação variável. O primeiro cenário foi caracterizado pela inseminação artificial (IA) (sêmen Nelore) e repasse com monta natural (MN) com touros Nelore. Os outros cenários envolveram o uso de ao menos uma dessas técnicas: inseminação artificial em tempo fixo (IATF), fertilização "in vitro" (FIV) e cruzamento de vacas Nelore com touros Angus (sêmen). Os parâmetros econômicos foram extraídos de instituições da região central do Brasil. Foi estimada a porcentagem de produção de animais superiores e o ganho genético, e calculado para o curto (5 anos), médio (10 anos) e longo (15 anos) prazos. Indicadores econômicos como quantidade de progênie produzida, custo total estimado a desmama e ao abate, lucro estimado a desmama e ao abate e taxa d... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: - Reproductive biotechniques and crossbreeding are important tools for increasing economic and productive efficiency in beef cattle. The determination of the intensity of use of these biotechniques and the crossbreeding, in the different environmental, management and market conditions, are fundamental to certify a better cost-benefit relation of its adoption, in order to increase the profitability of the production system. The objective of this study was to estimate the genetic and economic gain using different reproductive biotechniques and crossbreeding for a production system of beef cattle by means of deterministic simulations. The study was based on a production system with capacity for 1000 AU (AU = 992,08 pounds of body weight), adopting the continuous grazing and variable stocking rate. The first scenario was characterized by artificial insemination (AI) (Nellore) and natural mating (NM) with Nellore bulls. The other scenarios involved the use of at least one of these techniques: fixed-time artificial insemination (FTAI), in vitro fertilization (IVF), and crossbreeding of Nellore cows with Angus bulls. The economic values were extracted from institutions of the central region of Brazil. The percentage of production of superior animals and genetic gain were calculated in the short (5 years), medium (10 years) and long (15 years) time. Economic indicators such as amount of progeny produced, estimated total cost of weaning and slaughter, estimated profit of weaning and s... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Título original: Biologia e ecologia de Macrobrachium amazonicum (Heller, 1862) (Decapoda : Palaemonidae) e sua importância em reservatórios neotropicais / Orientador: Fernando José Zara / Banca: Fernando Luis Medina Mantelatto / Banca: Rogerio Caetano da Costa / Banca: João Alberto Feribelli Pantaleão / Banca: Abner Carvalho Batista / Resumo: O camarão amazônico Macrobrachium amazonicum apresenta populações com grande plasticidade fenotípica e alta variabilidade morfológica e reprodutiva. Três fenótipos são registrados para a espécie, por meio da avaliação de sua história de vida, características morfológicas e reprodutivas, sendo eles: (a) animais anfídromos de grande porte, e (b) hololimnéticos de grande e (c) pequeno porte. Tais características permitem que estes animais ocupem diversos ambientes aquáticos no Brasil. Nos últimos anos, registros de M. amazonicum em ambientes dulciaquícolas interiores em diversas regiões brasileiras aumentaram significativamente, principalmente em reservatórios da Bacia do Paraná. Porém, são escassas as informações sobre aspectos bioecológicos e reprodutivos em tais ambientes, assim como faltam estudos abordando a morfo-histologia dos sistemas reprodutores da espécie. Além disso, a plasticidade fenotípica de populações de M. amazonicum ainda não é totalmente compreendida. Na presente tese, os padrões anátomo-histológico dos sistemas reprodutores foram analisados nos três fenótipos da espécie, além biologia e a ecologia das populações com diferentes fenótipos provenientes de reservatórios do sudeste brasileiro. Adicionalmente, descreve-se o primeiro registro da intersexualidade e de infecção por microsporídeos em M. amazonicum. Independentemente da história de vida e estratégia sexual adotada, todas as populações de camarão amazônico analisadas apresentam padrões anatômicos, histo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The Amazon river shrimp Macrobrachium amazonicum exhibits populations with great phenotypic plasticity and high morphological and reproductive variability. Three phenotypes are recorded for the species, through the evaluation of their life history, morphological and reproductive characteristics, being: (a) large amphidromous, and (b) large and (c) small hololimnetic animals. These characteristics allow these animals to occupy diverse aquatic environments in Brazil. In recent years, M. amazonicum records have increased significantly in continental freshwater environments in Brazil, mainly in reservoirs inserted at the Paraná Basin. However, information on bioecological and reproductive aspects in such environments is scarce. Also, there were no studies evaluating the histomorphology of the reproductive systems in Amazon shrimp. In addition, the phenotypic plasticity of populations of M. amazonicum is not yet fully understood. In the present thesis the histoanatomic patterns of the reproductive systems were analyzed in three phenotypes of the species. As well, the biology and ecology of populations with different phenotypes were investigated in reservoirs of the southeastern Brazil. In addition, the first record of intersexuality and microsporidiosis in the species are presented here. Regardless of the life history and sexual strategy adopted, all populations of M. amazonicum analyzed present similar anatomical, histological, histochemical and ultrastructural patterns in their reproductive systems. However, females and males of the small populations tend to invest more energy in reproductive aspects when compared to large amphidromous and hololimnetic animals. Small females displace more energy to produce larger oocytes/eggs and lipid reserves for larvae, while males of this phenotype invest energy in sperm production and ... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Maria Emilia Franco Oliveira / Coorientador: Fabio Morato Monteiro / Coorientador: Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima / Banca: Letícia Zoccolaro Oliveira / Banca: Lindsay Unno Gimenes / Resumo: O exame andrológico em bovinos reprodutores é de extrema importância para identificação da capacidade reprodutiva de touros. A ultrassonografia é uma ferramenta diagnóstica que pode fornecer importantes informações de forma não invasiva da integridade dos órgãos reprodutivos, no entanto, ainda vem sendo pouco aplicada na prática de avaliação de reprodutores. O objetivo do trabalho foi caracterizar e comparar parâmetros biométricos e atributos ultrassonográficos de testículos, epidídimos e glândulas genitais acessórias, bem como, índices vasculares das artérias testiculares e ilíacas internas de touros das raças Nelore (n=203) e Caracu (n=79), agrupados de acordo com as classes de idade (≤ 18 meses e > 18 meses). Os dados foram analisados pelo PROC MIXED do programa SAS (p<0,05). O perímetro escrotal, comprimento testicular e medida dorsoventral da cauda do epidídimo foram diferentes entre animais ≤ 18 meses e > 18 meses nas raças Nelore e Caracu. A biometria das glândulas vesiculares, porção disseminada da próstata e medida craniocaudal da glândula bulbouretral apresentaram diferença entre raças. Houve diferença entre as idades para glândulas vesiculares, medidas dorsoventral e craniocaudal do corpo da próstata e próstata disseminada. Houve correlações significativas (p<0,05) entre a biometria dos testículos, cauda dos epidídimos e glândulas genitais acessórias, exceto com o corpo da próstata. A intensidade de pixel do parênquima testicular diferiu entre raças e classes de id... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The andrological examination in breeding cattle is of extreme importance for the identification of the reproductive capacity of bulls. Ultrasonography is a diagnostic tool that can provide important noninvasive information on the integrity of reproductive organs, however, it still has been little applied in practice of reproductive evaluation. The objective of this study was to characterize and compare biometric parameters and ultrasonographic attributes of the testes, epididymis and accessory sex glands, as well as vascular indices of internal testes and iliac arteries of Nellore (n=203) and Caracu bulls (n=79), grouped according to age classes (≤18 months and >18 months). Data were analyzed by PROC MIXED of SAS program (p<0.05). The scrotal perimeter, testicular length and dorsoventral measurement of the tail of the epididymis were different between animals ≤18 months and >18 months in the Nellore and Caracu races. The biometry of vesicular glands, disseminated portion of prostate and craniocaudal measurement of bulbourethral gland showed differences between breeds. Were differences between ages for vesicular glands, dorsoventral and craniocaudal measurements of prostate body and disseminated prostate. Were significant correlations (p<0.05) between the biometry of the testes, tail of the epididymides and accessory sex glands, except with the body of the prostate. The pixel intensity of the testicular parenchyma differed between breeds and age classes. The echogenicity (mea... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Carlos Augusto Araujo Valadão / Banca: Valentim Arabicano Gheller / Banca: Joaquim Mansano Garcia / Banca: Renata Gebara Sampaio Dória / Banca: Paulo Aléscio Canola / Resumo: As técnicas de fertilização in vitro e transferência de embrião são amplamente utilizadas como multiplicadores genéticos em fêmeas de alto valor zootécnico. Para sua realização é mandatório o uso de anestesia epidural, porém sabe-se que a punção repetida do espaço epidural pode causar alterações inflamatórias e fibrose do canal, aos quais reduzem a eficácia da técnica. Objetivou-se, por meio deste estudo desenvolver uma técnica cirúrgica de implantação de cateter epidural com portal de acesso subcutâneo e avaliar a patência deste dispositivo para a realização de aspiração folicular em vacas, por um período de 510 dias. Para a realização deste estudo foram utilizadas doze vacas, com idade entre 3-5 anos e peso entre 308-518 kg, que foram alocadas em dois grupos, grupo A, animais da raça Nelore e B animais da raça Holandesa. Após contenção em tronco, foi realizada sedação com 0,04 mg/kg de acepromazina 1% associada a 0,01 mg/kg de xilazina 2% pela via intramuscular e bloqueio anestésico local da região sacrococcígea e sacral direita. Procedeu-se uma incisão de pele semicircular de dez centímetros (incisão-I), abrangendo o espaço sacrococcígeo e intercoccígeo. Após divulsão da tela subcutânea, a pele foi rebatida lateralmente. Através de uma agulha de Tuohy (16G) posicionada na articulação sacrococcígea ou intercoccígea, introduziu-se dez centímetros do cateter (17G) em sentido cranial, no canal epidural. Procedeu-se uma segunda incisão (incisão-II), de quatro centímetros, no te... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In vitro fertilization and embryo transfer are often used as genetic multipliers in cows of high zootechnical value. Epidural anesthesia is mandatory preceding these procedures, but repeated puncture of the epidural space may cause inflammation and fibrosis, which reduce the effectiveness of the technique in time. The objective of this study was to describe a surgical technique for implantation of an epidural catheter with subcutaneous access portal, and to evaluate the patency this device during eight follicular aspiration cycles in cows. Twelve cows, aged between 3-5 years, weighting 308-518 kg were used in this study. They were allocated in two groups, (A) Nellore and (B) Holstein. Following physical retrain in a hydraulic stock and sedation with 0.04 mg/kg of acepromazine 1% associated with 0.01 mg/Kg of xylazine 2%, administered intramuscularly, local anesthetic block of the sacrococcygeal and right sacral region was made. Then, a 10-cm semicircular followed by skin incision (I-incision), was performed over the sacrococcygeal space, after divulsion of the subcutaneous tissue. Through a Tuohy needle (16G) positioned within the sacrococcygeal joint, ten centimeters of the catheter (17G) were cranially inserted in the epidural space. A second incision (incision-II), four centimeters long, was made at the middle third of the right sacral region. The epidural catheter was transposed from the I-incision to the II-incision through the subcutaneous by using a metallic guide, and... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Roberto Sartori Filho / Banca: João Carlos Pinheiro Ferreira / Banca: Margot Alves Nunes Dode / Resumo: Objetivou-se com o presente estudo avaliar a criotorerância de mórulas e blastocistos produzidos in vivo de doadoras da raça Sindi e Nelore (Bos indicus) e Holandês Preto e Branco (HPB - Bos taurus). No Experimento 1, 24 fêmeas lactantes e não lactantes da raça Sindi foram superovuladas com 100 mg de FSH suíno com protocolos em que as duas últimas aplicações de FSH foram substituídas ou não por 300 UI de eCG. Sete dias após a indução da ovulação, os embriões foram colhidos e avaliados quanto ao estágio de desenvolvimento embrionário e grau de qualidade. Dois terços dos embriões foram destinados à criopreservação, dos quais metade foi congelada pelo método convencional, com curva de resfriamento de -0,5ºC/min e a outra metade foi vitrificada pela técnica de Cryotop. Em seguida, foram descongelados e transferidos para receptoras sincronizadas, de maneira contemporânea aos embriões frescos. No Experimento 2, 31 fêmeas da raça Nelore foram superovuladas com 133 mg de FSH suíno e os dois terços dos embriões colhidos foram criopreservados e transferidos semelhantemente ao Experimento 1. No Experimento 3, 67 vacas lactantes e novilhas da raça HPB foram superovuladas com 500 e 300 UI de FSH suíno, respectivamente, e após a colheita dos embriões foram adotados os mesmos procedimentos realizados nos Experimentos 1 e 2. Os resultados foram analisados por modelos lineares generalizados e estão apresentados na forma de média dos quadrados mínimos ± erro padrão. Nos Experimentos 1 e 2, os embriões transferidos a fresco apresentaram maior taxa de concepção aos 30 dias do que os vitrificados e congelados (54,8±7,4a, 17,7±7,3b e 19,5±6,6%b; respectivamente; P 0,0013) na raça Sindi (n=231 embriões) e (46,0±6,1a; 31,2±5,4b e 28,1±5,3%b; respectivamente, P 0,04) na raça Nelore (n=297 embriões). O estágio de desenvolvimento embrionário parece não... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of this study was to evaluate the cryotolerance of morulae and blastocysts produced in vivo in Sindhi and Nelore (Bos indicus) and Holstein (Bos taurus) donnors. In Experiment 1, 24 lactating and non-lactating Sindhi donnors were superovulated with 100 mg porcine FSH with protocols in which the last two FSH treatments were replaced or not by 300 IU eCG. Embryos were collected 7 days after ovulation induction and embryo development and quality degree were accessed. Two thirds of the embryos were cryopreserved, by the conventional freezing or Cryotop method. After that, embryos were thawed and transferred to synchronized recipients, simultaneously to fresh embryos. In Experiment 2, 31 Nelore cows were superovulated with 133 mg porcine FSH and two thirds of the embryos were cryopreserved and transferred similarly to Experiment 1. In Experiment 3, 67 Holstein lactating dairy cows and heifers were superovulated with 500 and 300 IU pFSH, respectively, and the same procedures were performed as in Experiments 1 and 2. Results were analyzed using generalized linear models and are presented as least squares means ± standard error. In Experiments 1 and 2, fresh embryos had a higher conception rate at Day 30 than those vitrified and frozen (54.8±7.4a, 17.7±7.3b and 19.5±6.6%b; respectively; P 0.0013) in Sindhi donnors (n=231 embryos) and (46.0±6.1a; 31.2±5.4b and 28.1±5.3%b; respectively; P 0.04) in Nelore donors (n = 297 embryos). Embryo developmental stage seems to have not influenced conception rates of Zebu embryos, especially cryopreserved ones. Finnaly, in Experiment 3, conception rates of fresh and cryopreserved embryos were similar (37.4±12.3, 24.5±11.3 and 21.0±9.5%; respectively, P>0.15) and also no difference was detected for the cryotolerance of morulae versus blastocysts (P>0.10) / Mestre

Orientador: Cezinande de Meira / Banca: Sony Dimas Bicudo / Banca: Cássia Maria Barroso Orlandi / Resumo: O presente estudo visou avaliar a resposta ovariana e a taxa de recuperação embrionária em éguas tratadas com EPE nas doses de 6, 8 e 12,5 mg sendo o tratamento iniciado após a aplicação de prostaglandina F2 no oitavo ou sexto dia após a ovulação com a finalidade de reduzir o tempo e custo do tratamento. Foram realizados dois experimentos, para o experimento 1, 40 ciclos estrais de éguas Mangalarga Marchador, entre cinco e 24 anos, e para o segundo experimento 30 ciclos estrais de éguas mestiças entre quatro e 12 anos de idade, foram estudados. Foi aplicada 7,5 mg i.m.de prostaglandina F2 (Dinoprost Trometamina) no oitavo (experimento 1) ou sexto (experimento 2) dia após a ovulação. Nesse momento as éguas foram distribuídas aleatoriamente em cinco grupos para o experimento 1: (n=8 ciclos estrais/grupo): Grupo F20-23mm 6mg e F20-23mm 8mg receberam 6 e 8mg, respectivamente, de EPE por via i.m. a cada 12 horas, a partir da detecção de folículo(s) entre 20-23mm de diâmetro. Nos Grupos D8 - 6mg e D8 - 8mg foi aplicado 6 ou 8 mg de EPE, respectivamente, a cada 12 horas por via i.m. a partir do D8 (concomitante a PGF2 ). No Grupo F20-23mm Salina (Controle): as éguas receberam solução salina respeitando os mesmos intervalos que os grupos tratados com EPE a partir da detecção de folículo(s) entre 20-23mm de diâmetro. No experimento 2, a metodologia foi similiar ao experimento 1, contudo, as éguas receberam 12,5 mg de EPE, e o tratamento foi iniciado no sexto dia após a ovulação para o Grupo D6-12,5 mg (n=9), ou quando detectou-se folículo(s) entre 20-23mm, Grupo F20-23mm 12,5 mg (n=10) e F20-23mm Salina (Controle, n=10). Em todos os grupos (Exp. 1 e 2) o tratamento (EPE ou salina) foi mantido até 12 horas anterior a detecção de folículo(s) com diâmetro 35 mm, nesse momento a ovulação foi induzida com única dose de 2500 U.I. de hCG, i.v. (Vetecor®)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present study aimed to evaluate the ovarian response and embrionary recovery in mares treated with doses of 6, 8 and 12.5 mg of EPE. The treatment was started after application of prostaglandin F2 for reduce the period and cost of treatment. Two experiments were conducted, for the experiment one, 40 estrous cycles of Mangalarga Marchador mares and ranged in age from 5 to 24 yrs, and for the second experiment 30 estrous cycles of crossbreed mares ranged in age from four to 12 yrs was used. In the eighth (experiment 1) or sixth (experiment 2) after ovulation was applied 7.5 mg i.m. of prostaglandin F2 (Dinoprost Trometamina). In this moment, all mares in experiment 1 was randomly assigned to treatment and control groups as follows: Groups 1 and 2 (n=8 cycles/group) received 6 mg of EPE, i.m. twice daily, beginning when largest follicle (s) was (were) 20-23 mm (Group F20-23mm 6mg) or regardless of follicle size on Day 8 (Group D8 - 6 mg); Groups 3 and 4 (n=8 cycles/group), received 8 mg of EPE, i.m. twice daily, beginning when largest follicle was 20-23 mm (Group F20-23 mm 8 mg) or regardless of follicle size on Day 8 (Group D8 - 8mg); Group F20-23mm Saline (Control, n=8 cycles) received saline, i.m. beginning when largest follicle (s) was (were) 20-23 mm in the same range of groups treated with EPE. In the second experiment was used the same methodology of the experiment 1, however, the mares received 12.5mg of EPE, and the treatment began in the sixth day after ovulation for the Group D6- 12.5mg (n=9), or when the largest follicle (s) was (were) 20-23 mm, Group F20-23mm 12,5 mg (n=10) e F20-23mm Saline (Control, n=10). Treatments with EPE or saline continued until 12 hours before detection of follicle (s) reached 35 mm, at which time a single dose of hCG (2500 U.I., i.v., Vetecor®) was given. Groups were compared using ANOVA and mean differences among groups were... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Fernanda da Cruz Landim e Alvarenga / Coorientador: Paula Ripamonte / Banca: Frederico Ozanan Papa / Banca: Cezinande Meira / Banca: Márcio Teoro do Carmo / Banca: Claudia Barbosa Fernandes / Resumo: As alterações observadas nos folículos pré-ovulatórios dos mamíferos a partir da onda pré-ovulatória de LH são mediadas por fatores de crescimento como AR e ER, que induzem a expansão das células do cumulus e maturação oocitária. O LH também estimula a deposição de ácido hialurônico mediada pela enzima HAS-2. Em eqüinos, já foi caracterizada a expressão de HAS-2, AR e ER em resposta à administração de hCG em folículos pré-ovulatórios, mas sua ação em folículos imaturos não está esclarecida, embora tenha sido demonstrada a expansão precoce do cumulus após sua administração em folículos menores de 30mm. O objetivo deste estudo foi caracterizar o padrão de expressão de ER, AR e HAS-2 em folículos de eqüinos em diferentes estágios de maturação, submetidos ou não ao tratamento com EPE e hCG. Para isso, recuperamos células foliculares por OPU de folículos de diversos tamanhos, em 3 ou 24 horas após estímulo gonadotrófico exógeno, e avaliamos a expressão gênica de ER, AR e HAS-2 por PCR em tempo real. O tratamento com hCG induziu a expressão de ER em folículos imaturos e pré-ovulatórios, demonstrando sua capacidade de indução da maturação folicular precoce, e houve tendência do mesmo efeito ser obtido com a expressão de HAS-2, embora não tenha sido estatisticamente comprovado. O EPE apresentou efeito menor que a hCG na indução da expressão de ER, o que pode ser justificado pelo mecanismo de down regulation que o LH exerce sobre a ativação dos fatores de crescimento ligados ao EGF, como a ER e a AR / Abstract: The modifications observed on mammalia n follicles after the pré-ovulatory surge of LH are mediated by growth factors like epiregulin (ER), which is responsible for the cumulus cells expansion and interfere with the oocyte maturation . The LH also stimulates the deposition of hyaluronic acid mediated by the hialuronan synthase -2 (HAS-2). In horses , the expression of HAS-2 and ER was already characterized in pre-ovulatory follicles , after the administration of hCG. In the present experiment we were able to demonstrate that the hCG is also able to induce the expression of ER in equine follicles smaller than 30mm in diameter , confirming an ability of immature follicles in responding to hormonal stimuli. Although no statistic differences were observed among groups a tendency to the same effect was also observed for the HAS-2. Similarly, the use of EPE stimulated the expression of ER, but when EPE and hCG were combined a decrease in expression was observed. This observation indicates a mechanism of down regulation exerted by the LH on the ER and HAS expression / Doutor