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Enzimas desubiquitinadoras ligadas ao proteassoma são essenciais para a viabilidade do Schistosoma mansoni / Desubiquitinating enzymes bound to proteasome are essencial for Schsistosoma manoni

Patrocinio, Andressa Barban do 04 October 2018 (has links)
O proteassoma 26S é uma estrutura em forma de barril com um núcleo catalítico 20S que é flanqueado por tampas 19S em ambos os lados. Nosso grupo tem demonstrado que o proteassoma 26S é crítico para o desenvolvimento e sobrevivência do Schistosoma mansoni, sendo que mais de 95% dos casais de vermes tratados com o inibidor de proteassoma MG132 apresentaram alteração na postura dos ovos e viabilidade. O tampão 19S é o complexo regulador e funciona no desdobramento e na desubiquitinação das proteínas, antes de sua entrada no complexo 20S, usando enzimas desubiquitinadoras (DUBS). Recentemente, foi demonstrado que a inibição das DUBS, UCHL5 e USP14, que estão reversivelmente ligadas à partícula 19S do complexo 26S, chamada b-AP15, resulta em autofagia, seguida de morte celular, pois leva uma variedade de células de mamíferos ao estresse oxidativo. O objetivo geral deste trabalho foi avaliar o efeito da droga sobre o desenvolvimento reprodutivo de S. mansoni e como possível alvo terapêutico, tendo como objetivos específicos determinar os seus efeitos: na inibição da oviposição in vitro de casais de parasitas Schistosoma mansoni através da contagem dos ovos e expressão do gene p14; avaliar se os órgãos reprodutores dos parasitas sofreram alguma modificação estrutural; se a substância utilizada leva a autofagia; se o tratamento dos casais de parasita com a droga leva a apoptose, ocasionada pela ativação de caspase-3. Este estudo é o primeiro a documentar o papel da droga b-AP15 como um agente esquistossomicida, pois desencadeia alterações ultraestruturais em casais de vermes de S. mansoni. Os seguintes métodos foram utilizados para analisar as alterações: Microscopia Eletrônica de Transmissão (MET), Varredura (MEV) e Confocal; ensaio quantitativo colorimétrico baseado no brometo de 3- (4,5-dimetiltiazol-2-il) -2,5-difenil tetrazólio (MTT), atividade do proteassoma através do substrato Suc-Leu-Le-Al-Tyr-AMC específico para atividade de quimotripsina-like; western blotting; Reação de Polimerase em Cadeia em tempo real e TUNEL. Foram testadas várias concentrações do fármaco (0,2; 0,4; 0,8; 1,6; 3,2 até 50 µM), sendo que a partir de 1,6 µM de b-AP15 ocorreu a inibição da produção de ovos dos casais de parasitas tratados in vitro por 24 h, não havendo alteração da viabilidade, mas mostrou alterações a partir da dosagem de 3,2 µM. A partir de 1,6 µM ocorreram alterações celulares e tegumentares e vermes adultos tratados com 50 µM estavam mortos. O Western blotting mostrou acúmulo de proteínas poliubiquitinadas de alto peso molecular na presença de 1,6µM, havendo mudanças na atividade quimotripsina-like do proteassoma 20S. Os resultados mostraram que o b-AP15 altera a oviposição, a viabilidade e leva à morte de casais de parasitas, reforçando a hipótese de que o sistema ubiquitina/ proteassoma e que as enzimas deubiquitinadoras ligadas a partícula 19S são essenciais para a biologia de S. mansoni. / The 26S proteasome is a barrel structure with a catalytic core 20S that is flanked by 19S caps on both sides. Our group has been showed that 26S proteasomes are critical for Schistosoma mansoni development and survival, being that more than 95% of worms pairs treated with the proteasome inhibitor MG132 showed alteration on egg laying and viability. The 19S cap is the regulatory complex and functions in unfolding and deubiquitinating the proteins before their entry into the 20S complex using constitutive deubiquitinating enzymes (DUBS). Recently, it has been demonstrated that inhibition of the DUBS, UCHL5 and USP14, which are reversibly bound to the 19S particle of the 26S complex, called b-AP15 , results in cell death because it leads to autophagy, followed by cell death in a variety of mammalian cells. The general objective of this work was to evaluate the effect of the drug on the reproductive development of S. mansoni and as a possible therapeutic target. The specific objectives to determine its effects: in inhibiting the in vitro oviposition of couples of Schistosoma mansoni parasites by counting eggs and p14 gene expression; evaluate whether the reproductive organs of the parasites have undergone some structural modification; if the substance used leads to autophagy; if the treatment of the parasite couples with the drug leads to apoptosis, caused by the activation of caspase-3. This study is the first to document the role of the b-AP15 drug as a schistosomicidal agent, as it triggers ultrastructural changes in couples of S. mansoni worms. The following methods were used to analyze the changes: Transmission Electron Microscopy (MET), Scanning (SEM) and Confocal; Colorimetric assay based on 3- (4,5- dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT), proteasome activity through Suc-Leu-Le-Al-Tyr-AMC substrate specific for chymotrypsin-like activity; western blotting; Polymerase chain reaction in real time and TUNEL. Various concentrations of the drug (0.2, 0.4, 0.8, 1.6, 3.2 to 50 ?M) were tested. 1.6 ?M b-AP15 occurred the inhibition of egg production of couples of parasites treated in vitro for 24 h, with no change in viability, but showed changes from the dosage of 3.2 ?M. Cell and tegumentary changes occurred in 1.6 ?M and adult worms treated with 50 ?M were dead. Western blotting showed accumulation of high molecular weight polyubiquitinated proteins in the presence of 1.6?M, with changes in the chymotrypsin-like activity of the 20S proteasome. The results showed that b-AP15 alters the oviposition, viability and leads to the death of couples of parasites, reinforcing the hypothesis that the ubiquitin / proteasome system and the deubiquitinating enzymes bound to the 19S particle are essential for the biology of S. mansoni.
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Coeficientes de parentesco em espécies florestais /

Sousa, Antonio Higo Moreira de January 2018 (has links)
Orientador: Evandro Vagner Tambarussi / Resumo: Parentesco entre indivíduos em populações naturais é uma informação com múltiplos usos e pode ser acessada por meio de estimadores que usam dados moleculares. Todavia, cada estimador possui pressuposições e, muitas vezes, rigorosas para espécies florestais. Assim, a modelagem dos dados é uma etapa importante e, quase em todos os casos, negligenciada. Este trabalho teve como objetivo avaliar a eficácia de diferentes estimadores de parentesco em Acrocomia aculeata (Jacq.) Lodd. ex Mart., Hymenaea stigonocarpa Mart. ex Hayne e Dipteryx alata Vogel., bem como em quatro diferentes populações simuladas. A partir das coancestrias médias ( ������̅ ) estimadas, foi calculado o erro dos estimadores pressupondo que os indivíduos analisados eram meios-irmãos (������̅=0,125). As estimativas de parentesco oscilaram conforme a espécie e o método utilizado, gerando diferentes valores de erro para cada estimador. A correlação foi observada apenas entre estimadores que possuíam o mesmo método de estimativa ou com pressupostos similares. As populações simuladas tiveram melhores valores estimados e menores erros em comparação com dados reais. Os valores de erro dos estimadores encontrados, demonstram que somente aplicação dos estimadores para a inferência de determinado grau de parentesco, pode gerar resultados viesados e corroborar para ineficácia da tomada de decisão, sendo necessário o uso de informações complementares associadas ao parentesco, como análise do sistema de reprodução, estrutura gen... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Understanding kinship between individuals in natural populations offers useful information that can be assessed based on estimators of molecular data. However, each estimation method is based on assumptions and is often restricted for forest species. Thus, modeling the data is an important step that is almost always neglected. This study aims to evaluate the efficacy of different kinship estimators for Acrocomia aculeata (Jacq.) Lodd, ex Mart., Hymenaea stigonocarpa Mart. Ex Hayne, and Dipteryx alata Vogel., and four different simulated populations. From the estimated mean coancestry (�����̅), the error estimates were calculated assuming that analyzed individuals were perfect half-siblings (�����̅=0,125). Estimates of kinship ranged according to the species and method used, generating different error values for each estimator. A correlation was observed only between estimators that used the same estimation method or similar assumptions. Simulated populations showed more accurate estimates and lower error values compared to actual data. The error values of the estimators demonstrate that the application of estimators to infer a certain degree of kinship can generate biased results and lead to inefficient decision making. Thus, the use of complementary information associated with kinship is necessary, such as analysis of the reproduction system and genetic structure of the population, enabling more precise inferences of the kinship between evaluated individuals. / Mestre
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Avaliação do potencial protetor do extrato seco de Tribulus terrestris sobre o dano induzido por ciclofosfamida no sistema reprodutor masculino de camundongos / Assessment of the potential protector effect of Tribulus terrestris dry extract on cyclophosphamide-induced damage to male mice reproductive system

Pavin, Natasha Frasson 02 April 2016 (has links)
Submitted by Marcos Anselmo (marcos.anselmo@unipampa.edu.br) on 2016-05-02T13:45:06Z No. of bitstreams: 1 Natasha Pavin.pdf: 478428 bytes, checksum: 248a3efadd02d2695494d5e6ef077e2b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-02T13:45:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Natasha Pavin.pdf: 478428 bytes, checksum: 248a3efadd02d2695494d5e6ef077e2b (MD5) Previous issue date: 2016-04-02 / A ciclofosfamida (CP) é um agente antineoplásico e imunossupressor. É uma droga utilizada no tratamento de diversos tipos de tumores, usada para evitar a rejeição em transplante de órgãos e em doenças autoimunes, como artrite reumática e lúpus eritematoso. A CP é um pró-fármaco que sofre biotransformação no fígado pelo citocromo P450 para gerar metabólitos ativos como a mostarda fosfaramida e a acroleína. Seus metabólitos podem ocasionar um quadro de estresse oxidativo causando danos a diversos órgãos, entre eles o sistema reprodutor. A Tribulus terrestris (TT) faz parte da família das Zygophyllaceae, é uma erva rasteira perene com uma distribuição generalizada no Mediterrâneo, climas subtropicais e no deserto de todo o mundo. Na medicina popular tradicional, tem sido utilizada desde a antiguidade como um afrodisíaco, para energizar, vitalizar e melhorar a função sexual e desempenho físico em homens, bem como para tratar infecções urinárias, inflamações, edemas e outras doenças. Apesar de estudos experimentais e clínicos confirmarem parcialmente o fato de alguns efeitos da TT sobre a libido e a produção de esperma estarem envolvidos com o componente majoritário desta planta, a protodioscina, ainda há muito debate a respeito dos possíveis mecanismos de ação, bem como da sua aplicação terapêutica. Considerando o potencial antioxidante e esteroidogênico da TT, este estudo possui como objetivo investigar o potencial protetor do extrato seco da TT contra o dano testicular induzido pela ciclofosfamida em camundongos machos. Os camundongos Swiss machos receberam o extrato seco de TT como pré-tratamento por gavagem, durante 14 dias, na dose de 11 mg/Kg. No 14 ° dia, receberam uma única injeção intraperitoneal de ciclofosfamida na dose de 100 mg/Kg. Após 24 horas, esses animais foram anestesiados e eutanasiados, e o sangue, os testículos e os epidídimos foram retirados para posteriores análises bioquímicas, avaliação espermática e histopatológica. A presença e quantificação de protodioscina no vii extrato de TT foram avaliadas por HPLC (Cromatografia Líquida de Alta Eficiência), onde foi verificada uma concentração de 1,48% no extrato seco. A CP causou um desequilíbrio no sistema reprodutor destes animais, através do aumento das espécies reativas (ER), peroxidação lipídica (TBARS) e carbonilação de proteínas, bem como uma alteração nas enzimas antioxidantes: superóxido dismutase (SOD), catalase (CAT), glutationa peroxidase (GPx), glutationa S-transferase (GST) e glutationa redutase (GR). O pré tratamento com TT foi eficaz em proteger contra esses danos. Além disso, foi verificado uma redução na atividade da enzima 17β-hidroxiesteróide desidrogenase (17β-HSD), corroborando com a redução do nível de testosterona sérica verificado neste trabalho. Ao mesmo tempo, ao analisarmos a histopatologia dos testículos destes animais, verificamos uma moderada desorganização do epitélio espermatogenico, bem como, uma congestão dos vasos sanguíneos intersticiais. Estes achados corroboraram com os resultados encontrados na avaliação seminal dos animais tratados com CP, onde foi possível verificar uma diminuição da motilidade (41,07%), do vigor (23,52%), da integridade de membrana (43,44%) e da velocidade curvo-retilinea (25,43%), e o pré tratamento com TT foi eficaz em proteger contra esses danos. Em conclusão, este trabalho visou demonstrar pela primeira vez o potencial protetor do extrato seco de TT contra os danos ao sistema reprodutor masculino de camundongos expostos ao quimioterápico CP. À melhora dos parâmetros avaliados pode estar relacionada ao potencial antioxidante e esteroidogênico, bem como pela quantidade de protodioscina observada neste extrato. / Cyclophosphamide (CP) is an antineoplastic and immunosuppressive agent. It is a drug used to treat various tumours types, and also to prevent rejection in organ transplantation and autoimmune diseases such as rheumatoid arthritis and lupus erythematosus. The CP is a prodrug which is biotransformed in the liver by cytochrome P450 enzymes to generate active metabolites phosphoramide mustard and acrolein. Its metabolites can cause oxidative stress state, leading to damage in various organs, including the reproductive system. Tribulus terrestris (TT) is part of the family of Zygophyllaceae, it is a perennial creeping herb with a widespread distribution in the Mediterranean, subtropical climates and desert around the world. In traditional folk medicine, it has been used since ancient times as an aphrodisiac, to energize, vitalize and improve sexual function and physical performance in men and to treat urinary infections, inflammation, edema and other diseases. Although experimental and clinical studies partly confirm that some effects of TT on libido and sperm production are involved with the major component of this plant, protodioscin, there is still much debate about the possible mechanisms of action, as well as their therapeutic application. Considering the antioxidant and steroidogenic potential of TT, this study has the objective of investigating the protective potential of TT dry extract against testicular damage induced by cyclophosphamide in male mice. The male Swiss mice received the TT dry extract as pretreatment by gavage for 14 days at a dose of 11 mg kg-1. On day 14, animals received a single intraperitoneally injection of cyclophosphamide at a dose of 100 mg kg-1. After 24 hours, the animals were anesthetized and euthanized, and blood, testes and epididymis were removed for further biochemical analyzes, sperm and histological evaluation. The presence and quantification of protodioscin in TT extract were analyzed by HPLC (High Performance Liquid Chromatography), where a concentration of 1.48% of dry extract was verified. CP caused an imbalance in the reproductive system of these animals by increasing the reactive species (RS), ix lipid peroxidation (TBARS) and protein carbonylation, as well as change in antioxidant enzymes: superoxide dismutase (SOD), catalase (CAT), glutathione peroxidase (GPx), glutathione S-transferase (GST) and glutathione reductase (GR). The pre-treatment with TT was effective in protecting against this damage. Furthermore, a reduction in the activity of 17β-hydroxysteroid dehydrogenase (17β-HSD) was found, confirming the reduction of serum testosterone levels observed in this study. Additionally, when analyzing the histopathology of the animals’ testes, we perceived a moderate disruption of spermatogenesis epithelium, as well as a congestion of interstitial blood vessels. These findings corroborate the results found in seminal evaluation of the animals treated with CP, where we observed a decrease in motility (41.07%), vigor (23.52%), membrane integrity (43,44%) and curved-straight speed (25.43%), and the pre-treatment with TT was effective in protecting against this damage. In conclusion, this study aimed to demonstrate for the first time the protective potential of TT dry extract against damage to the male reproductive system of mice exposed to CP chemotherapy. Improvement of these parameters may be related to antioxidant and steroidogenic potential as well as the amount of protodioscin observed in this extract.
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Visitantes florais e polinização de Tecoma stans (Bignoniaceae): efeito da pilhagem de néctar na eficácia reprodutiva

Santos, Jean Miguel Alves dos 28 February 2016 (has links)
Submitted by FABIANA DA SILVA FRANÇA (fabiana21franca@gmail.com) on 2017-12-07T14:47:25Z No. of bitstreams: 1 ArquivoTotal.pdf: 1704926 bytes, checksum: fd29046df62b2cc7dd594f9946611baa (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-07T14:47:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ArquivoTotal.pdf: 1704926 bytes, checksum: fd29046df62b2cc7dd594f9946611baa (MD5) Previous issue date: 2016-02-28 / Bees are the main pollinators of plant species of agricultural system and most terrestrial environments, interacting with native and exotic plants. Exotic plants are usually found in urban areas, like Tecoma stans, an introduced ornamental species in Brazil, native from the southern United States and northern Central America. In flowers with long tubular corolla as T. stans it is common to certain species of bees make openings/holes that enable access to the floral resources. However, as they do not enter the flower, these bees perform illegitimate visits, because they do not contact the reproductive structures of flowers, and thus rob the floral resources without pollinate the flowers. However, no studies on the robbing behavior in this species has been done. Studies show that the robbing behavior of pollen and nectar can benefit, be neutral or decrease the reproductive success of other plant species. Some studies have been published on the interaction of bees with this plant, mainly in the region south and southeast of Brazil. The objective of this research was to study the bee species assemblage that visit the flowers of Tecoma stans in two areas with different characteristics emphasizing the robbing behavior and its consequences. The study was carried out at the Campus I of the Universidade Federal da Paraíba (UFPB), João Pessoa - PB, and the Sítio Olho D'água, Alhambra - PB, during October 2014 and November 2015. All the manual pollination tests resulted in fruit yield while spontaneous self-pollination did not yield fruits, confirming that Tecoma stans is auto-compatible, but needs pollinators to transfer the pollen grains. After floral anthesis, the flowers last for two days and provide pollen for its visitors, an average of 4064.9±543.9 grains/anther; and nectar, mean production of 14.4±7.3μl/day, with an average concentration of sugar of 21.3±3,8% and 0.47±0.3mg of sugar/μl. 24 species of bees were recorded in UFPB and 21 species at the Sítio Olho D'água. The bees started foraging around 5:00h till 17:30h. Visits and visitors were more constant in UFPB than at the Sítio Olho D'água that showed greater variation during the day The number of visits and visitors were significantly higher in UFPB. Peak of visitors occurred in the flowers at 8.00h (average of 9.3±8.3 visitors/plant/day in UFPB. While at the Sítio Olho D'água there was a mean peak of visitors at 8:00h and 12:00h, average of 5.6±2.4 visitors/plant/day and 4.9±2,7 visitors/plant/day, respectively. The most abundant bee species were Trigona spinipes, T. fuscipennis, Partamona littoralis, Plebeia flavocincta and Xylocopa spp. in UFPB, and M. scutellaris and Augochlora spp. in Sítio Olho D'água. Eulaema nigrita, E. atleticana, Centris analis, C. fuscata, C. tarsata, C. aenea, Euglossa carolina, M. scutellaris and Melitoma segmentaria were considered effective pollinators. Apis mellifera, Augochlora sp., Ceratina chloris, C. maculifrons, Nannotrigona punctata, Partamona littoralis, Plebeia flavocincta, Trigona spinipes and T. fuscipennis were classified as occasional pollinators. Females of Xylocopa spp., Pseudaugochlora spp. and Trigona spinipes were primary nectar robbers. Trigona spinipes and Trigona fuscipennis were primary pollen robbers. In experiments in which the flowers received a barrier to prevent nectar robbing, the Reproductive Success of open-pollination with and without barrier were low and similar in both areas, suggesting that the nectar robbing did not influenced the production of fruits, refuting the hypothesis proposed. However, in later tests the Reproductive Success and Reproductive Efficacy in flowers was higher without barrier suggesting that the nectar robbing favored pollination supporting the hypothesis tested. This difference in results may be related to different periods of carrying out the tests, as well as differences in the abundance and pollinator composition in each area. Although some results showed that nectar robbing can affect negatively the fruit production of T stans, we still need more conclusive experiments. / As abelhas são as principais polinizadoras de espécies vegetais do sistema agrícola e da maioria dos ambientes terrestres, interagindo com plantas nativas e exóticas. As plantas exóticas geralmente são encontradas em áreas urbanas como Tecoma stans, espécie nativa da região sul dos Estados Unidos e norte da América Central, introduzida no Brasil para ornamentação. Por apresentar flores com corolas tubulares longas, é comum a realização de aberturas/orifícios por certas espécies de abelhas que possibilitam o acesso aos recursos florais de T. stans. Todavia, como não entram na flor, essas abelhas realizam visitas ilegítimas, pois não contatam as estruturas reprodutivas das flores, e realizam a pilhagem dos recursos florais sem efetuar a polinização das mesmas. Alguns estudos foram publicados sobre a interação das abelhas com essa planta, principalmente, na região sul e sudeste do Brasil. Entretanto, não foram realizados estudos sobre o comportamento de pilhagem nessa espécie. Estudos demonstram que a pilhagem de pólen e néctar pode favorecer, ser neutra ou diminuir o sucesso reprodutivo de outras espécies vegetais. O objetivo desta pesquisa foi estudar a apifauna visitante de Tecoma stans em duas áreas com características diferentes, enfatizando o comportamento de pilhagem e suas consequências. O estudo foi realizado no Campus I da Universidade Federal da Paraíba (UFPB), João Pessoa - PB, e no Sítio Olho D'água, Alhandra – PB, durante outubro de 2014 e novembro de 2015. Todos os testes de polinização manual resultaram na formação de frutos enquanto a polinização espontânea não gerou frutos, confirmando que Tecoma stans possui o sistema reprodutivo autocompatível, porém necessita de agentes polinizadores para a transferência dos grãos de pólen. Após a antese, as flores duram dois dias e oferecem pólen para seus visitantes, com média de 4.064,9±543,9 grãos/antera; e néctar, com produção média de 14,4±7,3μl/dia, com concentração média de açúcar de 21,3±3,8% e 0,47±0,3mg de acúcar/μl. Foram registradas 24 espécies de abelhas visitantes florais na UFPB e 21 espécies no Sítio Olho D’água. As abelhas iniciaram o forrageio por volta das 5:00h até às 17:30h. As visitas e os visitantes foram mais constantes na UFPB que no Sítio Olho D’água que apresentou maior variação durante os dias. O número de visitas e o número de visitantes foram significativamente maiores na UFPB. Ocorreu um pico de visitantes às 8:00h (média de 9,3±8,3 visitantes/planta/dia) na UFPB. Enquanto no Sítio Olho D’água ocorreu um pico médio de visitantes às 8:00h e outro às 12:00h (média de 5,6±2,4 visitantes/plantas/dia e 4,9±2,7 visitantes/planta/dia, respectivamente). As abelhas mais abundantes foram Trigona spinipes, T. fuscipennis, Partamona littoralis, Plebeia flavocincta e Xylocopa spp. na UFPB e Melipona scutellaris e Augochlora spp. no Sítio Olho D'água. Eulaema nigrita, E. atleticana, Centris analis, C. fuscata, C. tarsata, C. aenea, Euglossa carolina, Melipona scutellaris e Melitoma segmentaria foram consideradas polinizadoras efetivas; e Apis mellifera, Augochlora sp., Ceratina chloris, C. maculifrons, Nannotrigona punctata, Partamona littoralis, Plebeia flavocincta, Trigona spinipes e T. fuscipennis foram classificadas como polinizadoras ocasionais. As espécies de Xylocopa, Pseudaugochlora e Trigona spinipes foram pilhadoras primárias de néctar. Trigona spinipes e Trigona fuscipennis foram pilhadoras primárias de pólen. Em experimentos nos quais as flores receberam uma barreira para evitar a pilhagem de néctar, o sucesso reprodutivo da polinização livre em flores com e sem barreira foram baixos e semelhantes nas duas áreas, sugerindo que a pilhagem de néctar não influenciou na produção de frutos, refutando a hipótese proposta. Porém, em testes posteriores o Sucesso Reprodutivo e a Eficácia Reprodutiva nas flores sem barreira foi maior, sugerindo que a pilhagem de néctar favorece a polinização. Essa diferença nos resultados pode estar relacionada a diferentes períodos de realização dos testes, assim como a diferenças na abundância e composição de polinizadores em cada área. Os resultados mostraram que a pilhagem de néctar pode afetar a produção de frutos, porém são necessários experimentos mais conclusivos.
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Fenologia, biologia reprodutiva e exigência térmica da uva ‘Isabel’ (Vitis labrusca L., Vitaceae) e a influência da vegetação nativa na polinização e na produção de frutos

SILVA, Natália Nunes de Andrade 20 February 2013 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-06-29T15:05:32Z No. of bitstreams: 1 Natalia Nunes de Andrade Silva.pdf: 3136989 bytes, checksum: 7d39783d6ea25e69bde1dd5738edec99 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-29T15:05:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Natalia Nunes de Andrade Silva.pdf: 3136989 bytes, checksum: 7d39783d6ea25e69bde1dd5738edec99 (MD5) Previous issue date: 2013-02-20 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Knowledge about the phenology and reproductive biology of plants can help to understand the requirements for the formation of fruits cultivated species, as well as serve as a basis for management of pollinators. Biometeorological data are also important because they can be used to predict the growth stages, helping the planning of cultural practices. Much of cultivated species are favored by animal pollination for the formation of fruits and seeds. However, there is a decrease in these populations due to fragmentation of native vegetation. This study aims to investigate the phenology, reproductive biology and thermal requirement of Vitis labrusca (Vitaceae) cultivar 'Isabel' in São Vicente Férrer, PE, during the growing seasons of 2011/2012, the periods January 2011 (P1) August 2011 (P2), April 2012 (P3) and August 2012 (P4), as well as test the influence of native vegetation on fruit production. Phenology was determined by assessing the duration, in days, of phenological stages pruning (P), cotton-bud (CB), flushing (F), appearance of inflorescence (AI), flowering (FL), early maturity (EM) and harvest (HA). The research included analyzes of floral biology of stigmatic receptivity, pollen availability, presence of osmophores and characterization of odor. The sexual system was determined by observation of morphological and functional sexuality, and reproductive system through controlled pollination in the field. The floral visitors and their frequency of visits were determined by focal observations. The thermal requirements were obtained in terms of degree-days (DD) required to achieve the subperiods P-F, F-FL and FL-HA. The influence of native vegetation on fruit production was determined by comparison of floral visitors (composition and frequency of visits) and between fruit production areas located in regions with different percentages of native vegetation cover. The duration of the cycles was 116, 125, 117 and 130 days for the periods P1, P2, P3 and P4 respectively, and the samples taken on the same rainy period (P1 and P3) and dry (P2 and P4) were similar to number of days of the cycle. The recorded periods were shorter than those observed in the southeast, south and semiarid for the same cultivar. The flowers are hermaphrodite and green, with relatively low pollen viability, and musky odor. The species is selfing, and the results of all treatments showed low percentage reproductive biology in the formation of the fruit, however self-pollination had the highest reproductive success. The base temperature of 10 ° C was the most suitable, the highest and lowest thermal demand among cycles were evaluated 1972.17 DD and 1870.05 DD, respectively. Apis mellifera was most prominent among pollinators, along with being Trigona spinipes considered effective pollinators and were observed in all areas studied. Syrphids were considered potential pollinators, excelling Ornidia obesa, and some Coleoptera and Hymenoptera. There was a higher rate of visits to vineyards with a higher percentage of native forest in the vicinity, and a lower rate of visitation in areas with a lower percentage. With regard to production, there was a trend towards an increase in physicochemical character with increasing percentage of vegetation. / O conhecimento sobre a fenologia e a biologia reprodutiva de plantas podem auxiliar na compreensão dos requerimentos para a formação de frutos de espécies cultivadas, bem como servir como base para manejo de polinizadores. Dados biometeorológicos também são importantes, pois podem ser usados para a previsão dos estádios fenológicos, auxiliando o planejamento dos tratos culturais. Grande parte de espécies cultivadas são favorecidas pela polinização por animais para a formação de frutos e sementes. No entanto, há uma diminuição dessas populações devido à fragmentação da vegetação nativa. Este trabalho tem como objetivo investigar a fenologia, a biologia reprodutiva e a exigência térmica de Vitis labrusca (Vitaceae) cultivar ‘Isabel’, em São Vicente Férrer, PE, durante as safras de 2011/2012, nos períodos de janeiro 2011 (P1), agosto 2011 (P2), abril 2012 (P3) e agosto 2012 (P4), bem como testar a influência da vegetação nativa sobre a produção de frutos. A fenologia foi determinada pela avaliação da duração, em dias, dos estádios fenológicos poda (PO), gema-algodão (GA), brotação (BR), aparecimento da inflorescência (AI), florescimento (FL), início da maturação (IM) e colheita (CO). A investigação da biologia floral incluiu análises de receptividade estigmática, de disponibilidade de pólen, presença de osmóforos e caracterização de odor. O sistema sexual foi determinado pela observação da sexualidade morfológica e funcional, e o sistema reprodutivo através de polinizações controladas em campo. Os visitantes florais e sua frequência de visitas foram determinados por meio de observações focais. As exigências térmicas foram obtidas em termos de graus-dia (GD) necessários para atingir os subperíodos PO-BR, BR-FL e FL-CO. A influência da vegetação nativa sobre a produção de frutos foi determinada com a comparação de visitantes florais (composição e frequência de visitas) e a produção de frutos entre áreas situadas em regiões com diferentes percentagens de cobertura de vegetação nativa. A duração dos ciclos foi de 116, 125, 117 e 130 dias para as épocas P1, P2, P3 e P4 respectivamente, sendo as colheitas realizadas no mesmo período chuvoso (P1 e P3) e seco (P2 e P4) foram semelhantes quanto ao número de dias do ciclo. Os períodos registrados foram mais curtos do que os observados nas regiões sudeste, sul e semiárida para a mesma cultivar. As flores são verdes e hermafroditas, com viabilidade polínica relativamente baixa, e odor almiscarado. A espécie se autofecunda, e os resultados de todos os tratamentos de biologia reprodutiva mostraram baixo percentual na formação de fruto, no entanto a autopolinização obteve o maior sucesso reprodutivo. A temperatura-base de 10 °C foi a mais adequada, a maior e a menor exigência térmica dentre os ciclos avaliados foram 1972,17 GD e 1870,05 GD, respectivamente. Apis mellifera teve maior destaque entre os polinizadores, sendo juntamente com Trigona spinipes consideradas polinizadores efetivos e foram observadas em todas as áreas estudadas. Sirfídeos foram considerados polinizadores eventuais, se destacando Ornidia obesa, além de coleópteros e alguns himenópteros. Houve maior taxa de visitas em parreirais com maior percentagem de mata nativa no entorno, e menor taxa de visitação em áreas com menor percentagem. Com relação à produção houve uma tendência de aumento nos caracteres físico-químicos com o aumento da percentagem de vegetação nativa.
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Biologia reprodutiva de Guettarda platypoda DC. (Rubiaceae) em uma área de restinga no Estado de Pernambuco

NOVO, Reinaldo Rodrigo 01 February 2010 (has links)
Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-07-01T15:29:11Z No. of bitstreams: 1 Reinaldo Rodrigo Novo.pdf: 1167162 bytes, checksum: 1ba5f71b12f4bb3d0e7b5161c00355f2 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-01T15:29:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Reinaldo Rodrigo Novo.pdf: 1167162 bytes, checksum: 1ba5f71b12f4bb3d0e7b5161c00355f2 (MD5) Previous issue date: 2010-02-01 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Distyly is a syndrome mainly found in the Rubiaceae family, being characterized by a floral dimorphism in which some individuals have thrum flowers (T) and others have pin ones (P). Typical distylous species present reciprocal hercogamy between floral morphs, a self and intramorph incompatibility mechanism and an equilibrated proportion of morphs in the population (isoplethy). Selective pressures such as the reproductive isolation or deficient pollination services may result in the break down of the distylous syndrome, and consequently in modifications on morphological and reproductive patterns of species of typically distylous groups. This study investigated the floral biology, the breeding system, the pollination and the floral morphometric relations of Guettarda platypoda DC. (Rubiaceae) in an area of coastal vegetation in the Pernambuco state, using measurement of floral parts, hand pollination experiments, estimate of floral morphs ratio in the population and focal observation of floral visitors. Guettarda platypoda have hermaphrodite, tubular, nectariferous flowers that produce a sweet odor; anthesis is nocturnal and flowers are pollinated by mophs and sphingids. Morphometric data showed the absence of reciprocity between the floral morphs, a feature that may limit distyly function. Both floral morphs produced fruits after all hand pollination experiments, and the species may be considered self and intramorph compatible. Because of these features, the species is considered as atypically distylous. Both the morphological and the compatibility conditions recorded here may be related to the break down of the distylous syndrome, which may be occurred because of deficient pollination services and/or habitat fragmentation, since the study area is strongly altered by antropogenic occupation. More specific genetical studies must be developed to investigate the distyly supergene integrity in the genus, since other studiesshowed similar morphological variations in other regions, some of them also related to pollination services. / A distilia é uma síndrome encontrada principalmente na família Rubiaceae, caracterizada por um dimorfismo floral no qual alguns indivíduos possuem flores brevistilas (B) e outros possuem flores longistilas (L). Espécies tipicamente distílicas possuem hercogamia recíproca entre os morfos opostos, um mecanismo de autoincompatibilidade e de incompatibilidade intramorfo, e uma proporção equilibrada dos morfos florais na população (isopletia). Pressões seletivas tais como o isolamento reprodutivo ou a deficiência dos serviços de polinização, podem acarretar na quebra da distilia, resultando em modificações nos padrões morfológicos e reprodutivos em espécies de grupos tipicamente distílicos. Este estudo investigou a biologia floral, o sistema reprodutivo, a polinização e as relações morfométricas de flores de Guettarda platypoda DC. (Rubiaceae) em uma área de restinga do litoral sul do Estado de Pernambuco, utilizando medições das peças florais, experimentos de polinização manual, estimativa da razão entre morfos e observação focal dos visitantes florais. Guettarda platypoda possui flores hermafroditas, tubulares, que produzem néctar, emitem forte odor, são noturnas e polinizadas por mariposas e esfingídeos. Os dados morfométricos mostraram ausência de reciprocidade entre morfos florais, o que pode limitar a funcionalidade da distilia. Ambos os morfos florais formaram frutos em todos os experimentos realizados de polinização manual, e por esta razão a espécie pode ser considerada auto e intra-morfo compatível. Devido a essas características, a espécie pode ser classificada como distílica atípica. Tanto a condição morfológica encontrada nas populações de G. platypoda quanto a autocompatibilidade podem estar relacionadas à quebra da distilia, o que pode ter ocorrido por ineficiência dos serviços de polinização e/ou fragmentação do habitat, uma vez que a área de estudo sofre forte impacto ambiental. Estudos genéticos mais específicos devem ser realizados para investigar aintegridade do supergene no gênero, uma vez que outros estudos evidenciaram variações morfológicas semelhantes em outras regiões, algumas também atribuídas ao serviço de polinização.
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Biologia floral da palma forrageira : ocorrência de mecanismos reprodutivos e causa do abortamento de frutos

PASTORIZA, Rhuan José Gonçalves 26 April 2016 (has links)
Submitted by Mario BC (mario@bc.ufrpe.br) on 2016-09-19T12:10:47Z No. of bitstreams: 1 Rhuan Jose Goncalves Pastoriza.pdf: 1390278 bytes, checksum: 857568afadece7692a6edd54a9e95c70 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-19T12:10:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rhuan Jose Goncalves Pastoriza.pdf: 1390278 bytes, checksum: 857568afadece7692a6edd54a9e95c70 (MD5) Previous issue date: 2016-04-26 / The hinterland and rural Pernambuco have a very difficult climatic conditions for agricultural operation, because they have concentrated rainy season in just three months of the year (Molion and Bernard 2000). Forage palm (Opuntia spp. And Nopalea cochenillifera Salm-Dyck) are part of a set of species that enable livestock in semi-arid regions, as they are productive and tolerant crops in low rainfall sites and high daytime temperatures, conditions similar to those recorded in much of the Brazilian semiarid region (Santos et al. 2001). In recent decades the growing area of ​​the cactus pear has been reducing due to cochineal carmine, Dactylopius opuntiae (Cockerell), insect causes damage to cladodes by injecting toxins. Cultivars traditionally used: Round, Giant and IPA-20 clone, the genus Opuntia species and Opuntia ficus-indica, have a high susceptibility to this pest (Vasconcelos et al 2009.). The Agronomic Institute of Pernambuco - IPA, through the breeding program of forage cactus, has sought for superior genotypes resistant to insect and more productive than the cultivars already released. For the generation of new cultivars are difficulties related to the reproduction of this plant, slowing the progress of breeding programs. Floral palm biology is quite complex, certain reproductive mechanisms such as apomixis and cleistogamia, are not fully understood, raising doubts as to the origin of sexual or asexual progeny. Another problem found in certain species of cactus pear fruit abortion is in controlled or non-intersections. The cause of these abscisões should be investigated and remedied, as the inability to produce fruits with viable seeds hampers sexual propagation, genetic variability source to be exploited by breeders. The objective of this study was to investigate the reproductive mechanisms of apomixis and cleistogamia in forage cactus Opuntia genus access; and identify possible high abortion causes fruit cultivar Miúda (Nopalea cochenillifera Salm-Dyck) and Clone F8 (Opuntia atropes Rose). / O sertão e o agreste pernambucano possuem uma situação climática bastante difícil para a exploração agropecuária, por apresentarem período chuvoso concentrado em apenas três meses do ano (Molion e Bernardo 2000). As palmas forrageiras (Opuntia spp. e Nopalea cochenillifera Salm-Dyck) fazem parte de um conjunto de espécies que viabilizam a exploração pecuária nas regiões semiáridas, pois são produtivas e tolerantes ao cultivo em locais de baixa precipitação e altas temperaturas diurnas, condições semelhantes às registradas em boa parte do semiárido brasileiro (Santos et al. 2001). Nas últimas décadas a área de cultivo da palma forrageira vem reduzindo devido à cochonilha do carmim, Dactylopius opuntiae (Cockerell), inseto que provoca danos nos cladódios pela injeção de toxinas. As cultivares tradicionalmente utilizadas: Redonda, Gigante e clone IPA-20, do gênero Opuntia e espécie Opuntia ficus-indica, apresentam alta suscetibilidade a esta praga (Vasconcelos et al. 2009). O Instituto Agronômico de Pernambuco – IPA, por meio do programa de melhoramento genético da palma forrageira, tem buscado por genótipos superiores resistentes ao inseto e mais produtivos que as cultivares já liberadas. Para a geração de novas cultivares existem dificuldades relacionadas à reprodução desse vegetal, retardando o andamento de programas de melhoramento genético. A biologia floral da palma é bastante complexa, certos mecanismos reprodutivos, tais como apomixia e cleistogamia, não são bem esclarecidos, gerando dúvidas quanto à origem sexuada ou assexuada da progênie. Outro problema encontrado em algumas espécies de palma forrageira é o abortamento de frutos em cruzamentos controlados ou não. A causa dessas abscisões deve ser investigada e sanada, pois a incapacidade de produzir frutos com sementes viáveis dificulta a propagação sexuada, fonte de variabilidade genética a ser explorada pelos melhoristas. O objetivo deste trabalho foi investigar os mecanismos reprodutivos de apomixia e cleistogamia em acessos de palma forrageira do gênero Opuntia; além de identificar as possíveis causas do elevado abortamento de frutos da cultivar Miúda (Nopalea cochenillifera Salm-Dyck) e do Clone F8 (Opuntia atropes Rose).
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Plantas ornitófilas de sub-bosque e suas interações com beija-flores / Ornithophilous understory plant species and their interactions with hummingbirds

Silva, Raphael Matias da 27 February 2014 (has links)
Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-11-04T14:17:31Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Raphael Matias da Silva - 2014.pdf: 1915356 bytes, checksum: 46210dde4f1e2691a46a9de1c7a3a31e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2014-11-04T14:19:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Raphael Matias da Silva - 2014.pdf: 1915356 bytes, checksum: 46210dde4f1e2691a46a9de1c7a3a31e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-04T14:19:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Raphael Matias da Silva - 2014.pdf: 1915356 bytes, checksum: 46210dde4f1e2691a46a9de1c7a3a31e (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-02-27 / Ornithophilous plant species occur in greater number in the understory of tropical forests, with Acanthaceae as one of the major families with this pollination syndrome. However, several other angiosperm families have species pollinated by hummingbirds, which is the largest group of vertebrate pollinators of the Neotropic, besides being the most representative and specialized group of nectarivorous birds. The present study is organized into three chapters, with the following objectives: 1) Conduct a literature review, compiling information on the pollination and reproductive systems found in the family Acanthaceae Juss. in Brazil, 2) Assess the association between ornithophilous understory plants and hummingbirds in two fragments, evaluating potential levels of specialization according to the floral traits, 3) To investigate the pollination biology of Geissomeria pubescens Nees (Acanthaceae), including aspects of its morphology, floral biology, nectar energy availability and reproductive system. Four pollination syndromes were recorded in a total of 28 species of Acanthaceae family: ornithophily, melittophily, psicofilia and chiropterophily. The ornithophily was the predominant syndrome and, consequently, hummingbirds were the most common group of floral visitors. Regarding the reproductive system, 94.1% of the Acanthaceae species studied in Brazil are self-compatible. In the study of the community ecology of the ornithophilous plants, 12 species were recorded, with Acanthaceae being the principal ornithophilous family. Thalurania furcata was the hummingbird which interacted with the greatest number of species, being considered as a generalist. The average amount of sugar produced in the area, by the species, was the only factor associated with the visitation rate. This feature may be a consequence of the fact, that larger resource quantities represent greater attraction and greater abundance of hummingbirds that exploit these resources in the areas. G. pubescens was the ornithophilous species that offered the greatest amount of resources to hummingbirds in the studied area. Based only on the amount of available energy for this plant species, on a daily basis, the studied fragment can support up to 94.6 hummingbirds during its flowering peak. G. pubescens produced no fruit by agamospermy and self-spontaneous pollinations. Thus, these results demonstrate the importance of the hummingbirds (the unique visitors) in the pollen flow occurrence and therefore, in the fruit formation of the species. / Espécies ornitófilas são encontradas em maior número no sub-bosque de florestas tropicais, sendo Acanthaceae uma das principais famílias com esta síndrome de polinização. Entretanto, várias outras famílias de Angiospermas apresentam espécies polinizadas por beija-flores, sendo este o maior grupo de polinizadores vertebrados do Neotrópico, além de ser o grupo mais representativo e especializado de aves nectarívoras. O presente estudo está organizado em três capítulos, com os seguintes objetivos: 1) Realizar uma revisão teórica compilando informações sobre os sistemas de polinização e reprodutivos encontrados na família Acanthaceae Juss. no Brasil; 2) Analisar a associação entre as plantas ornitófilas de sub-bosque e beija-flores em dois fragmentos avaliando possíveis níveis de especialização de acordo com os atributos florais; 3) Investigar a biologia da polinização de Geissomeria pubescens Nees (Acanthaceae), incluindo aspectos da morfologia, biologia floral, disponibilidade energética do néctar e sistema reprodutivo. Foram registradas quatro síndromes de polinização em um total de 28 espécies da família Acanthaceae, sendo elas: ornitofilia, melitofilia, psicofilia e quiropterofilia, onde a ornitofilia foi a síndrome predominante e, consequentemente, beija-flores foi o grupo mais comum de visitantes florais. Quanto ao sistema reprodutivo, 94,1% das espécies de Acanthaceae estudadas no Brasil são autocompatíveis. No estudo da ecologia de comunidades de plantas ornitófilas, foram registradas 12 espécies, sendo Acanthaceae a principal família ornitófila. Thalurania furcata foi o beija-flor que interagiu com o maior número de espécies, sendo considerado generalista. A quantidade média de açúcar produzida na área, por espécie, foi o único fator relacionado com a taxa de visitação. Tal característica pode ser consequência das maiores quantidades de recurso gerar uma maior atração e maior abundância dos beija-flores na exploração dos recursos. G. pubescens é a espécie ornitófila que ofereceu a maior quantidade de recursos aos beija-flores. Baseado apenas na quantidade de energia disponível por esta espécie vegetal, o fragmento estudado pode suportar até 94,6 beija-flores, diariamente, durante o pico de floração. G. pubescens não produziu frutos por agamospermia e autopolinização espontânea. Com isso, estes resultados demonstram a importância dos beija-flores (únicos visitantes) para que ocorra fluxo de pólen e, consequentemente, formação de frutos na espécie.
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The implementation of in vitro assays to screen environmental samples for male reproductive toxicity

Ebrahim, Mozaffar January 2010 (has links)
Magister Scientiae (Medical Bioscience) - MSc(MBS) / Endocrine disrupting compounds (EDCs) are exogenous compounds/chemicals which interfere with, or have adverse effects on the production, distribution and function of natural hormones, thereby affecting normal endocrine activity, health and quality of life of both humans and wildlife. The reproductive system is highly susceptible to EDCs due to it being controlled by an array of hormonal signals. The effects of EDCs on the male reproductive system include infertility, decreased sperm count, function and morphology, abnormal development of secondary sex characteristics, reproductive function and sexual behaviour as well as decreased libido. There are various sources by which EDCs enter the environment which include effluents from several industries (mining, agriculture, smelting, hazardous waste sites, manufacturing industries, etc.), sewage treatment effluents, urban and agricultural runoff and effluents which include natural and pharmaceutical chemicals excreted in the urine of humans and domestic livestock, pesticides, polychlorinated biphenyls, dioxins, plasticizers, surfactants, etc. Humans and animals can also be affected by EDCs by consuming food containing endocrine active substances. The growing concern regarding adverse effects due to EDC exposure of humans and wildlife, as well as the increased incidence of EDC contamination has prompted extensive research into the development and validation of screening tests to detect and monitor known EDCs and new substances with endocrine-disrupting capability. These screening tests involve assessing the effect of known and potential EDCs on reproductive function and development as well as hormone production. To assess the effect of EDCs on the reproductive system different methods are employed which include in vitro, in vivo and ex vivo methods. In vitro methods have been suggested as a suitable screening tool for EDC monitoring due to low costs, reduced animal usage, the use of standard and basic equipment as well as the ability to screen a large number of samples with multiple endpoints. Of the available in vitro methods, the minced testes method has been suggested as the most suitable method for screening EDCs and for this reason has been employed in this study. The aim of this study was thus to employ a minced testes method to screen samples for male reproductive toxicity using cell viability and hormone production (testosterone and estradiol) as endpoints.The first objective of this study was to optimize an in vitro testicular cell culture assay by determining both optimal luteinizing hormone (LH)  concentration and incubation time needed for testosterone production. Testicular cell cultures were prepared and cells were treated with varying concentrations of LH (10, 1, 0.1, 0.01 and 0 mu/ml) and incubated for 4 hours and 20 hours. Testosterone production was evaluated for each incubation period. Testosterone production was significantly increased for both incubation periods at all LH concentrations tested as compared to the control. For both incubation periods, there was no significant difference in testosterone production between the different LH concentrations tested. From the data obtained, the 4 hour incubation period as well as the LH concentration of 10 mu/ml were selected as optimal for the testicular cell culture assay. The second objective of this study was to determine the effect of Tulbaghia violacea Harv. on the male reproductive system. T. violacea is a plant species indigenous to southern Africa and is used locally as a herbal remedy/medicine to treat several ailments. Cells were treated with varying concentrations of the T. violacea ethanol extract (with/without LH-treatment) and incubated for 4 hours. Hormone production and cell viability were evaluated. The results obtained from this pilot in vitro study demonstrated that the ethanol extract of T.violacea has androgenic properties by significantly increasing LH-induced testosterone production in mouse testes with no significant change in cell viability. The third objective of this study was to assess the effect of Sutherlandia frutescens(L.) R.Br and Artemisia afra Jacq. Ex Willd. on the male reproductive system. S. frutescens and A. afra are also plant species indigenous to southern Africa and used locally as a herbal remedy/medicine to treat several ailments. Ethanol extracts of each plant was prepared and cells were treated with varying concentrations of each extract (0, 156.25, 312.5, 625, 1250,2500 and 5000 μg/ml) with or without LH-treatment and incubated for 4 hours. Cytotoxicity by LDH measurement and hormone production (testosterone and estradiol) were endpoints that were evaluated. The results obtained showed that the ethanol extracts of both plants are not cytotoxic to testicular cells and that A. afra decreases testosterone production at high concentrations. The fourth and final objective of this study was to assess the acute effect of four heavy metals, namely manganese, copper, cadmium and magnesium on the male reproductive system. These heavy metals are used extensively in manufacturing and mining industries. Cells were treated with varying concentrations of each metal salt (200, 100, 50, 25, 12.5, and 6.25 & mu;M) with or without LH-treatment and incubated for 4 hours. Endpoints evaluated included cell viability, testosterone and estradiol production. The results obtained showed that manganese, cadmium and copper are highly toxic to testicular cells in vitro and therefore may potentially cause reproductive toxicity. / South Africa
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In vitro effects of aqueous leaf extracts of moringa oleifera on human sperm

Moichela, Faith Tebatso January 2021 (has links)
Thesis (M.Sc. (Medical Sciences)) -- University of Limpopo, 2020 / Infertility affects nearly 186 million couples globally, with male factors contributing to half of the cases. Oxidative stress is an established cause of declining semen quality. Moringa oleifera has proven antioxidants. This study aimed to investigate in vitro effects of aqueous leaf extract of M. oleifera on human sperm functions. Semen samples from donors (n = 40) and patients (n = 30) were washed with HTF-bovine serum albumin (BSA), and then incubated with various concentrations of M. oleifera (0, 0.625, 6.25, 62.5, and 625 μg/ml) at 37°C for 1 hour. Sperm motility, vitality, mitochondrial membrane potential (MMP), reactive oxygen species (ROS), DNA fragmentation, capacitation, and acrosome reaction were assessed. Sperm motility, vitality, MMP, and capacitation were enhanced, while ROS production, and DNA fragmentation decreased after M. oleifera treatment. Uncapacitated spermatozoa increased significantly with a reduction in acrosome reaction in donors. M. oleifera antioxidant compounds suppressed excessive ROS, preserved mitochondrial membrane, DNA and acrosome integrity, while enhancing sperm motility and viability. / National Research Foundation (NRF)

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