Orientador: Carlos Augusto Araújo Valadão / Resumo: Avanços acerca da fisiopatologia da laminite equina permitiram imputar como fator primário e deflagrador dos estágios iniciais dessa doença, a ativação da cascata inflamatória. Sabe-se que equinos submetidos à sobrecarga de carboidratos, podem desenvolver laminite e que essa afecção se dá por mudanças na microbiota do trato gastrintestinal. A laminite induz alterações sistêmicas que repercutem nos valores de proteínas de fase aguda (PFA). Com este estudo, buscou-se encontrar uma associação entre os valores dessas proteínas com a evolução dos sinais clínicos de equinos expostos à sobrecarga de carboidrato (amido de milho na dose de 17,6 g/kg de peso vivo, diluído em água na proporção de um quilo/litro, fornecido via sondagem nasogástrica) e tratados com solução tampão intracecal (composto contendo 3,5 g de hidróxido de alumínio, 65,6 g de hidróxido de magnésio e 1,2 g de simeticona, diluído em água destilada em volume equivalente à metade do volume administrado via sondagem nasogástrica). Dez equinos hígidos foram divididos de maneira aleatória e fatorial (2x2), em quatro grupos (n=5): controle (GCC), controle + tratamento (GCT), laminite (GAC), laminite + tratamento (GAT). Os animais do GCC e GAC integraram, respectivamente, GAT e GCT, respeitando um intervalo de 15 dias entre o procedimento experimental. Eles foram avaliados durante sete momentos (T0h, T4h, T8h, T12h, T24h, T48h, T72h), nos quais também foram coletadas amostras de sangue venoso para obtenção do soro e realiz... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: It’s is known that the inflammatory response plays an important role in the development of the equine laminitis, mostly in its early stages. Among several risk factors, horses submitted to carbohydrate overload can develop this syndrome, due to changes in the cecal pH and microbiota, followed by an increase in the transmural absorption of several luminal contents, such as bacterial endotoxins. The acute phase response that occurs after injury elicits the overproduction of several proteins by the liver, called acute phase proteins (APP). However, there are few studies using proteinogram to characterize the inflammatory response during the development of this syndrome. The aim of this study was to correlate APP values with clinical signs of horses submitted to carbohydrate overload (17.6 g.kg-1 BW of corn starch solution, administered via nasogastric tube) and treated with a buffer solution (3.5 g of aluminum hydroxide, 65.6 g of magnesium hydroxide and 1.2 g of simethicone, administered into the cecum through catheterization). Ten healthy horses were divided in a factorial and randomized way into four groups (n = 5): control (GCC), control + treatment (GCT), laminitis (GAC), laminitis + treatment (GAT). The animals from GCC and GAC integrated GAT and GCT, respectively, respecting an interval of 15 days between the experimental procedure. They were evaluated during seven moments (T0h, T4h, T8h, T12h, T24h, T48h, T72h), in which blood were also collected to obtain serum to perfo... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

In this thesis, we consider a stochastic SIRS model of EEG data. The model is built over three different network structures: a random network, a scale-free network, and a small-world network. These models are then fit to an EEG signal from a control individual and an EEG signal from an individual experiencing an epileptic seizure. We are interested in determining whether these models can distinguish between the two data sets, and whether any of the network structures offer a significantly better fit to the data than others; there is also a broader interest in the effects of different network structures on the time series characteristics of an SIRS system. / Thesis / Master of Science (MSc)

INTRODUÇÃO: A sepse é uma resposta inflamatória sistêmica causada por infecção suspeita ou confirmada. As avaliações clínicas são essenciais para a sua detecção e tratamento precoce. Hemoculturas podem demorar até dois dias para produzir um resultado, e nem sempre são confiáveis. No entanto, estudos recentes sugeriram que a expressão de CD64 de neutrófilos pode ser uma alternativa sensível e específica para o diagnóstico de uma infecção sistêmica. OBJETIVO: Analisar a diferença de valores entre CD64 de indivíduos com síndrome de resposta inflamatória sistêmica (SIRS), e sepse suspeita ou confirmada, que satisfazem os critérios de diagnóstico para SIRS ao chegar na unidade de emergência. MÉTODO: Este foi um estudo de coorte prospectivo observacional. A amostra foi composta de 109 pacientes com idade de 18 anos ou mais, com critérios de SIRS na chegada ao serviço de emergência. Expressão CD64 foi medida no prazo de 6 horas de internação, e novamente após 48 h. RESULTADOS: A análise da curva ROC sugeriu que um corte de 1.45 dos níveis de CD64 poderia diagnosticar sepse com uma sensibilidade de 0,85, especificidade de 0,75, uma precisão de 82,08%, um valor preditivo positivo de 0,964, um valor preditivo negativo de 0,375 e uma razão de verossimilhança de 3,3381. A área sob a curva foi de 0,832. CONCLUSÃO: CD64 parece ser útil como biomarcador, sensível e específico para discriminar entre SRIS e sépsis. / INTRODUCTION: Sepsis is a systemic inflammatory response to suspected or confirmed infection. Clinical evaluations are essential for its early detection and treatment. Blood cultures may take as long as two days to yield a result, and are not always reliable. However, recent studies have suggested that neutrophil CD64 expression may be a sensitive and specific alternative for the diagnosis of systemic infection. OBJECTIVE: To analyze the difference in CD64 values between subjects with systemic inflammatory response syndrome (SIRS), suspected or confirmed sepsis, who meet diagnostic criteria for SIRS upon arriving at an emergency unit. METHOD: This was a prospective observational cohort study. The sample consisted of 109 patients aged 18 years with criteria for SIRS on arrival to Emergency department. CD64 expression was measured within 6 hours of hospital admission, and once again after 48 h. RESULTS: ROC curve analysis suggested that a cutoff of 1.45 for CD64 expression could diagnose sepsis with a sensitivity of 0.85, a specificity of 0.75, an accuracy of 82.08%, a positive predictive value of 0.964, a negative predictive value of 0.375 and a positive likelihood ratio of 3.3381. The area under the curve was 0.832. CONCLUSION: CD64 appears to be a useful, sensitive and specific biomarker in discriminating between SIRS and sepsis.

INTRODUÇÃO: A sepse é uma resposta inflamatória sistêmica causada por infecção suspeita ou confirmada. As avaliações clínicas são essenciais para a sua detecção e tratamento precoce. Hemoculturas podem demorar até dois dias para produzir um resultado, e nem sempre são confiáveis. No entanto, estudos recentes sugeriram que a expressão de CD64 de neutrófilos pode ser uma alternativa sensível e específica para o diagnóstico de uma infecção sistêmica. OBJETIVO: Analisar a diferença de valores entre CD64 de indivíduos com síndrome de resposta inflamatória sistêmica (SIRS), e sepse suspeita ou confirmada, que satisfazem os critérios de diagnóstico para SIRS ao chegar na unidade de emergência. MÉTODO: Este foi um estudo de coorte prospectivo observacional. A amostra foi composta de 109 pacientes com idade de 18 anos ou mais, com critérios de SIRS na chegada ao serviço de emergência. Expressão CD64 foi medida no prazo de 6 horas de internação, e novamente após 48 h. RESULTADOS: A análise da curva ROC sugeriu que um corte de 1.45 dos níveis de CD64 poderia diagnosticar sepse com uma sensibilidade de 0,85, especificidade de 0,75, uma precisão de 82,08%, um valor preditivo positivo de 0,964, um valor preditivo negativo de 0,375 e uma razão de verossimilhança de 3,3381. A área sob a curva foi de 0,832. CONCLUSÃO: CD64 parece ser útil como biomarcador, sensível e específico para discriminar entre SRIS e sépsis. / INTRODUCTION: Sepsis is a systemic inflammatory response to suspected or confirmed infection. Clinical evaluations are essential for its early detection and treatment. Blood cultures may take as long as two days to yield a result, and are not always reliable. However, recent studies have suggested that neutrophil CD64 expression may be a sensitive and specific alternative for the diagnosis of systemic infection. OBJECTIVE: To analyze the difference in CD64 values between subjects with systemic inflammatory response syndrome (SIRS), suspected or confirmed sepsis, who meet diagnostic criteria for SIRS upon arriving at an emergency unit. METHOD: This was a prospective observational cohort study. The sample consisted of 109 patients aged 18 years with criteria for SIRS on arrival to Emergency department. CD64 expression was measured within 6 hours of hospital admission, and once again after 48 h. RESULTS: ROC curve analysis suggested that a cutoff of 1.45 for CD64 expression could diagnose sepsis with a sensitivity of 0.85, a specificity of 0.75, an accuracy of 82.08%, a positive predictive value of 0.964, a negative predictive value of 0.375 and a positive likelihood ratio of 3.3381. The area under the curve was 0.832. CONCLUSION: CD64 appears to be a useful, sensitive and specific biomarker in discriminating between SIRS and sepsis.

INTRODUÇÃO: A sepse é uma resposta inflamatória sistêmica causada por infecção suspeita ou confirmada. As avaliações clínicas são essenciais para a sua detecção e tratamento precoce. Hemoculturas podem demorar até dois dias para produzir um resultado, e nem sempre são confiáveis. No entanto, estudos recentes sugeriram que a expressão de CD64 de neutrófilos pode ser uma alternativa sensível e específica para o diagnóstico de uma infecção sistêmica. OBJETIVO: Analisar a diferença de valores entre CD64 de indivíduos com síndrome de resposta inflamatória sistêmica (SIRS), e sepse suspeita ou confirmada, que satisfazem os critérios de diagnóstico para SIRS ao chegar na unidade de emergência. MÉTODO: Este foi um estudo de coorte prospectivo observacional. A amostra foi composta de 109 pacientes com idade de 18 anos ou mais, com critérios de SIRS na chegada ao serviço de emergência. Expressão CD64 foi medida no prazo de 6 horas de internação, e novamente após 48 h. RESULTADOS: A análise da curva ROC sugeriu que um corte de 1.45 dos níveis de CD64 poderia diagnosticar sepse com uma sensibilidade de 0,85, especificidade de 0,75, uma precisão de 82,08%, um valor preditivo positivo de 0,964, um valor preditivo negativo de 0,375 e uma razão de verossimilhança de 3,3381. A área sob a curva foi de 0,832. CONCLUSÃO: CD64 parece ser útil como biomarcador, sensível e específico para discriminar entre SRIS e sépsis. / INTRODUCTION: Sepsis is a systemic inflammatory response to suspected or confirmed infection. Clinical evaluations are essential for its early detection and treatment. Blood cultures may take as long as two days to yield a result, and are not always reliable. However, recent studies have suggested that neutrophil CD64 expression may be a sensitive and specific alternative for the diagnosis of systemic infection. OBJECTIVE: To analyze the difference in CD64 values between subjects with systemic inflammatory response syndrome (SIRS), suspected or confirmed sepsis, who meet diagnostic criteria for SIRS upon arriving at an emergency unit. METHOD: This was a prospective observational cohort study. The sample consisted of 109 patients aged 18 years with criteria for SIRS on arrival to Emergency department. CD64 expression was measured within 6 hours of hospital admission, and once again after 48 h. RESULTS: ROC curve analysis suggested that a cutoff of 1.45 for CD64 expression could diagnose sepsis with a sensitivity of 0.85, a specificity of 0.75, an accuracy of 82.08%, a positive predictive value of 0.964, a negative predictive value of 0.375 and a positive likelihood ratio of 3.3381. The area under the curve was 0.832. CONCLUSION: CD64 appears to be a useful, sensitive and specific biomarker in discriminating between SIRS and sepsis.

INTRODUÇÃO: A pancreatite aguda (PA) grave é um processo inflamatório do pâncreas caracterizado por alterações hemodinâmicas e resposta inflamatória sistêmica com altos níveis de mortalidade. A ativação inapropriada intrapancreática das enzimas pancreáticas desempenha papel importante no desencadeamento dos mecanismos inflamatórios responsáveis pelas manifestações locais e sistêmicas da doença. Em trabalho anterior observamos redução significativa da mortalidade após administração de solução salina hipertônica em ratos, através de redução das alterações hemodinâmicas e da resposta inflamatória sistêmica, mas os efeitos da solução salina hipertônica na ativação das enzimas pancreáticas e na própria lesão pancreática não foram estudados. O objetivo deste estudo foi avaliar se o mecanismo de ação da solução salina hipertônica, reduzindo a gravidade da pancreatite aguda em ratos, ocorre devido à redução da intensidade da lesão pancreática e/ou à redução da resposta inflamatória sistêmica e seus efeitos. MÉTODOS: Foi utilizado um modelo experimental de pancreatite aguda grave através da injeção intraductal de taurocolato de sódio a 2,5%. Cento e quarenta e dois ratos Wistar machos foram divididos em quatro grupos: Controle (animais que não foram submetidos à indução da PA), Grupo ST (animais que não receberam tratamento após a indução da PA), Grupo SSF (animais que receberam 34ml/Kg de solução salina fisiológica de NaCl 0,9% por via endovenosa, 1 hora após a indução da PA) e grupo SSH (animais que receberam 4ml/Kg de solução salina hipertônica de NaCl 7,5% por via endovenosa, 1 hora após a indução da PA). Após 2, 12 e 24 horas da indução da PA os animais foram sacrificados e os materiais foram coletados para análise. Foram efetuadas a quantificação do volume de líquido ascítico e as determinações no líquido ascítico e no soro dos peptídeos liberados na ativação do tripsinogênio (TAP) e da atividade da amilase. No tecido pancreático foram realizadas as análises da peroxidação lipídica (MDA), da atividade da mieloperoxidase (MPO) e a análise histológica. Os níveis de citocinas (TNF-, IL-6 e IL-10) foram analisados no líquido ascítico, soro e tecido pancreático. RESULTADOS: Os níveis de TAP e amilase no líquido ascítico e soro, de MDA e MPO no tecido pancreático e a análise histológica mostraram resultados iguais nos três grupos de animais que foram submetidos a PA (ST, SSF e SSH). Observamos redução do volume de líquido ascítico e dos níveis de TNF- , IL-6 e IL-10 no líquido ascítico, soro e tecido pancreático nos animais nos quais foi administrada solução salina hipertônica (grupo SSH) quando comparados com os animais tratados com solução salina fisiológica (grupo SSF) e os animais sem tratamento (grupo ST) (p<0,05). CONCLUSÕES: A administração de solução salina hipertônica (NaCl 7,5%) na pancreatite aguda experimental foi capaz de reduzir a resposta inflamatória local e sistêmica, sem modificar contudo a intensidade das lesões pancreáticas. / INTRODUCTION: Severe acute pancreatitis (AP) is characterized by hemodynamic alterations and systemic inflammatory response leading to a high mortality rate. In AP the inappropriate activation of pancreatic enzymes plays an important role in pancreas autodigestion and in the inflammatory mechanisms responsible for the systemic response of the disease. In a previous study, we have demonstrated that hypertonic saline solution infusion significantly reduced mortality in experimental AP through an improvement in the hemodynamic conditions and by an antiinflammatory response, but its effects on the pancreatic lesions were not evaluated. The aim of the present study was to evaluate if the hypertonic saline solution reduces mortality in AP through a local effect attenuating the pancreatic lesion and/or by reducing the systemic inflammatory response syndrome (SIRS). METHODS: An experimental model of severe AP by injection of 0.5ml of 2.5% sodium taurocholate into the pancreatic duct was utilized. A hundred and forty two male Wistar rats were divided into 4 groups: C (control, without AP), ST (no treated AP), SSF (animals received 34ml/kg of normal saline solution of NaCl 0.9% IV, 1 hour after AP), and SSH (animals received 4ml/Kg of hypertonic saline solution of NaCl 7.5% IV, 1 hour after AP). After 2, 12 and 24 hours of induction of AP volume of ascitic fluid, trypsinogen activation peptides (TAP) levels and amylase activity in ascitic fluid and serum were determined. Pancreatic lipid peroxidation (MDA), myeloperoxidase (MPO) activity, and pancreatic histology were analysed 2 and 24 hours after AP. TNF-, IL-6, and IL-10 levels in ascitic fluid, serum, and pancreatic tissue were also analyzed. RESULTS: There were no significant differences in TAP levels and amylase activity in the ascitic fluid and serum in animals of groups ST, SSF and SSH. No differences in pancreatic MPO, MDA and histological score were observed among these three groups with AP. In the SSH group it was observed a significant decrease in volume of ascitic fluid and inflammatory cytokines levels (TNF-, IL-6, and IL-10) in ascitic fluid, serum, and pancreatic tissue when compared to ST and SSF groups (p<0.05). CONCLUSIONS: These findings suggest that hypertonic saline solution decreases local and systemic inflammatory response in acute pancreatitis without changing the intensity of the pancreatic lesions.

Mit der Entdeckung des Selens als essentielles Spurenelement und der Glutathionperoxidase als Selenoenzym sowie der Tatsache, daû Selenmangel relativ weit verbreitet ist, wurde erstmals ein Zusammenhang zu einigen schweren Erkrankungen hergestellt (Keshan-Krankheit, Kaschin-Beck-Syndrom). Interessant ist dabei, daû sich trotz dieser und anderer bekannter Selenmangelerkrankungen eine Therapie in der Humanmedizin nur langsam zu etablieren beginnt, waÈ hrend die Selensupplementation in der VeterinaÈ rmedizin bereits Standard ist. Die Autoren beschaÈ ftigen sich seit 1990 mit der Rolle des Spurenelements Selen bei septischen Krankheitsbildern in der Intensivmedizin, beim ReperfusionsphaÈnomen nach gefaÈûchirurgischen Eingriffen und in der Onkologie. Sie konnten zeigen, daû die adjuvante Therapie der akuten Pankreatitis und der Sepsis mit Natriumselenit einen positiven Effekt auf das Outcome der Patienten zu haben scheint (eine multizentrische, doppelblinde, randomisierte Sepsisstudie zur Validierung dieser Ergebnisse ist in Vorbereitung). Neue Erkenntnisse zur Beeinflussung von Transkriptionsfaktoren durch Selen bei systemischem Inflammationssyndrom und Sepsis erlauben eine wissenschaftlich fundierte Interpretation der klinischen Ergebnisse. Weitere molekularbiologische Untersuchungen werden das Spurenelement Selen zu einem der interessantesten Forschungsprojekte der naÈ chsten 10 Jahre in Intensivmedizin und Onkologie machen. / Since selenium was discovered as an essential trace element being widely distributed, and since glutathione peroxidase is known as a selenoenzyme, associations with several severe diseases were established (Keshan disease, Kaschin-Beck syndrome). Despite these known selenium deficiency diseases a related human therapy is still not established so far. In veterinary medicine, however, substitution of selenium is already a standard therapy. Our laboratory investigates the role of selenium since 1990. This includes investigations about the effects of selenium in acute inflammatory diseases in intensive care, in the reperfusion phenomenon following vascular surgery, and in oncology. In acute pancreatitis and sepsis, adjuvant therapy using sodium selenite seems to have positive effects on the overall outcome of patients (a multicenter, double-blind, randomized trial on sepsis is being prepared). New findings concerning the influence of selenium on transcription factors in inflammatory processes will permit a scientifically sound interpretation of clinical results. With further investigations in molecular biology the trace element selenium will become, in the next decade, one of the most interesting topics in intensive care and oncology. / Dieser Beitrag ist mit Zustimmung des Rechteinhabers aufgrund einer (DFG-geförderten) Allianz- bzw. Nationallizenz frei zugänglich.

INTRODUÇÃO: A pancreatite aguda (PA) grave é um processo inflamatório do pâncreas caracterizado por alterações hemodinâmicas e resposta inflamatória sistêmica com altos níveis de mortalidade. A ativação inapropriada intrapancreática das enzimas pancreáticas desempenha papel importante no desencadeamento dos mecanismos inflamatórios responsáveis pelas manifestações locais e sistêmicas da doença. Em trabalho anterior observamos redução significativa da mortalidade após administração de solução salina hipertônica em ratos, através de redução das alterações hemodinâmicas e da resposta inflamatória sistêmica, mas os efeitos da solução salina hipertônica na ativação das enzimas pancreáticas e na própria lesão pancreática não foram estudados. O objetivo deste estudo foi avaliar se o mecanismo de ação da solução salina hipertônica, reduzindo a gravidade da pancreatite aguda em ratos, ocorre devido à redução da intensidade da lesão pancreática e/ou à redução da resposta inflamatória sistêmica e seus efeitos. MÉTODOS: Foi utilizado um modelo experimental de pancreatite aguda grave através da injeção intraductal de taurocolato de sódio a 2,5%. Cento e quarenta e dois ratos Wistar machos foram divididos em quatro grupos: Controle (animais que não foram submetidos à indução da PA), Grupo ST (animais que não receberam tratamento após a indução da PA), Grupo SSF (animais que receberam 34ml/Kg de solução salina fisiológica de NaCl 0,9% por via endovenosa, 1 hora após a indução da PA) e grupo SSH (animais que receberam 4ml/Kg de solução salina hipertônica de NaCl 7,5% por via endovenosa, 1 hora após a indução da PA). Após 2, 12 e 24 horas da indução da PA os animais foram sacrificados e os materiais foram coletados para análise. Foram efetuadas a quantificação do volume de líquido ascítico e as determinações no líquido ascítico e no soro dos peptídeos liberados na ativação do tripsinogênio (TAP) e da atividade da amilase. No tecido pancreático foram realizadas as análises da peroxidação lipídica (MDA), da atividade da mieloperoxidase (MPO) e a análise histológica. Os níveis de citocinas (TNF-, IL-6 e IL-10) foram analisados no líquido ascítico, soro e tecido pancreático. RESULTADOS: Os níveis de TAP e amilase no líquido ascítico e soro, de MDA e MPO no tecido pancreático e a análise histológica mostraram resultados iguais nos três grupos de animais que foram submetidos a PA (ST, SSF e SSH). Observamos redução do volume de líquido ascítico e dos níveis de TNF- , IL-6 e IL-10 no líquido ascítico, soro e tecido pancreático nos animais nos quais foi administrada solução salina hipertônica (grupo SSH) quando comparados com os animais tratados com solução salina fisiológica (grupo SSF) e os animais sem tratamento (grupo ST) (p<0,05). CONCLUSÕES: A administração de solução salina hipertônica (NaCl 7,5%) na pancreatite aguda experimental foi capaz de reduzir a resposta inflamatória local e sistêmica, sem modificar contudo a intensidade das lesões pancreáticas. / INTRODUCTION: Severe acute pancreatitis (AP) is characterized by hemodynamic alterations and systemic inflammatory response leading to a high mortality rate. In AP the inappropriate activation of pancreatic enzymes plays an important role in pancreas autodigestion and in the inflammatory mechanisms responsible for the systemic response of the disease. In a previous study, we have demonstrated that hypertonic saline solution infusion significantly reduced mortality in experimental AP through an improvement in the hemodynamic conditions and by an antiinflammatory response, but its effects on the pancreatic lesions were not evaluated. The aim of the present study was to evaluate if the hypertonic saline solution reduces mortality in AP through a local effect attenuating the pancreatic lesion and/or by reducing the systemic inflammatory response syndrome (SIRS). METHODS: An experimental model of severe AP by injection of 0.5ml of 2.5% sodium taurocholate into the pancreatic duct was utilized. A hundred and forty two male Wistar rats were divided into 4 groups: C (control, without AP), ST (no treated AP), SSF (animals received 34ml/kg of normal saline solution of NaCl 0.9% IV, 1 hour after AP), and SSH (animals received 4ml/Kg of hypertonic saline solution of NaCl 7.5% IV, 1 hour after AP). After 2, 12 and 24 hours of induction of AP volume of ascitic fluid, trypsinogen activation peptides (TAP) levels and amylase activity in ascitic fluid and serum were determined. Pancreatic lipid peroxidation (MDA), myeloperoxidase (MPO) activity, and pancreatic histology were analysed 2 and 24 hours after AP. TNF-, IL-6, and IL-10 levels in ascitic fluid, serum, and pancreatic tissue were also analyzed. RESULTS: There were no significant differences in TAP levels and amylase activity in the ascitic fluid and serum in animals of groups ST, SSF and SSH. No differences in pancreatic MPO, MDA and histological score were observed among these three groups with AP. In the SSH group it was observed a significant decrease in volume of ascitic fluid and inflammatory cytokines levels (TNF-, IL-6, and IL-10) in ascitic fluid, serum, and pancreatic tissue when compared to ST and SSF groups (p<0.05). CONCLUSIONS: These findings suggest that hypertonic saline solution decreases local and systemic inflammatory response in acute pancreatitis without changing the intensity of the pancreatic lesions.

Au cours d’une infection, les cellules de l’immunité innée sont capables de reconnaître via les Toll-like receptors (TLR) des motifs appelés pathogen-associated molecular patterns. Les cellules natural killer (NK) contribuent au processus inflammatoire en produisant de nombreuses cytokines. Chez la souris, nous avons montré que l’expression du TLR2 et du TLR4 dans les cellules NK spléniques est intracellulaire, comme pour le TLR9. La réponse des NK aux agonistes des TLR2, 4 et 9 nécessite la présence de cytokines accessoires (IL-15 et IL-18), afin d’obtenir une production significative des cytokines pro-inflammatoires IFN- et GM-CSF. En revanche, dans un modèle de sepsis polymicrobial, les NK spléniques de souris présentent une diminution dramatique de leur production d’IFN- et de GM-CSF en réponse aux agonistes des TLR. Cette diminution est sous le contrôle des cellules T régulatrices (Treg) et due au TGF-1. L’analyse des voies de signalisation nous a permis de montrer que la production de GM-CSF est abolie chez les cellules NK de souris déficientes pour STING en réponse au CpG-DNA. Ces résultats mettent en lumière une voie alternative et cytoplasmique pour la détection de l’ADN bactérien dans les cellules NK, différente de la voie classique TLR9-MyD88 dépendante. De plus, nous avons montré un trafic du récepteur TLR2 depuis l’intérieur vers la surface des cellules NK. La migration du TLR2 à la surface des NK nécessite la molécule UNC93B1, précédemment décrite comme transporteur endosomal de TLR.Chez les cellules NK humaines circulantes (sous-populations CD3-CD56bright et CD3-CD56dim), nous avons montré que l’expression des TLR2 et 4 est majoritairement intracellulaire, comme pour le TLR9 et comme chez la souris. La production d’IFN- par les NK de sujets sains en réponse aux agonistes des TLR nécessite également la présence de cytokines accessoires. Nous montrons que cette production est fortement altérée pour les NK des patients admis en soins intensifs et ayant un sepsis ou un syndrome de réponse inflammatoire systémique (SIRS). De même nous avons trouvé des différences entre les patients et les sujets sains dans l’expression du CD69 (marqueur d’activation précoce) et des TLR eux-mêmes. Cette étude indique que les NK des patients sepsis et SIRS deviennent tolérants aux agonistes des TLR en terme de production d’IFN-, de manière similaire à ce qui a été décrit pour d’autres cellules comme les monocytes / As sensors of infection, innate immune cells are able to recognize pathogen-associated molecular patterns by receptors such as Toll-like receptors (TLR). NK cells contribute to inflammatory processes by the production of numerous cytokines. In mice, we have shown that the protein expression of TLR2 and TLR4 in naive NK cells from spleen is predominantly intracellular, similarly to TLR9. The responsiveness of purified NK cells to TLR2, 4 or 9 agonists in vitro requires the presence of accessory cytokines (IL-15 and 18) to trigger a significant production of IFN- and GM-CSF. In contrast, NK cells purified from a model of in vivo polymicrobial sepsis, showed a dramatic reduction in their capacity to respond to TLR agonists in terms of IFN- and GM-CSF release due an inhibitory cross talk with Treg cells mediated by TGF-1. Analyzing the signaling pathways involved in cytokine production in response to CpG-DNA, we found that GM-CSF production was abolished in NK cells from STING-deficient mice, revealing that this intracytoplasmic receptor acts as a TLR9/MyD88-independent alternative sensor to bacterial DNA in NK cells. Additionally we show that intracellularly expressed TLR2 traffics to the cell surface of NK cells, by a mechanism involving UNC93B1, a protein previous described as an endosomal TLR carrier.In human peripheral blood NK cells (CD3-CD56bright and CD3-CD56dim subsets), we show that TLR2 and 4 protein expression is primarily intracellular, similar to TLR9, and similar to our findings in murine NK cells. The ex vivo responsiveness of human blood NK cells to TLR2, 4 or 9 agonists also requires accessory cytokines, to promote secretion of IFN-. In intensive care patients diagnosed with systemic inflammatory response syndrome (SIRS) and sepsis, IFN- production was significantly decreased. We also discovered modulations in the expression of CD69 (early activation marker) and in that of TLR themselves. This study indicates that NK cells undergo tolerance in response to TLR agonists during SIRS or sepsis, similarly to other cells, such as monocytes.

Bakgrund: Sepsis erfordrar att tidiga behandlingsåtgärder initieras, annars riskerar patienten utstå svåra komplikationer som i värsta fall kan leda till döden. Då sjukdomstillståndet uttrycks genom diffusa symtom kan denna tidiga initiering av behandlingsåtgärder vara svår, vilket ställer höga krav på vårdpersonalens kunskap. Syfte: Att kartlägga vårdpersonalens kunskaper gällande definition, identifiering och hantering av sepsis i ett tidigt skede inom akutsjukvården. Metod: Litteraturstudie baserad på nio kvantitativa artiklar. Databassökningar genomfördes i CINAHL, PubMed, Scopus och Web of science. Artiklarna är kvalitetsgranskade och analyserade med Fribergs analysmodell och sammanställd i text samt i tabeller.  Resultat: Kunskapsbrister redovisas. Professionerna med högre utbildningsnivå redovisar högre kunskapsnivåer. Lägst kunskapsnivåer redovisas gällande minskad kroppstemperatur, vätskeinfusion, vasopressorer och mätning av laktat- och leukocyter. Konklusion: Genom kontinuerlig och uppdaterad utbildning, implementering av evidensbaserade riktlinjer och ett bra teamarbete kan minska mortaliteten. Senges teori om lärande organisationer visar på vikten av teamarbetet. Vidare forskning bör fokusera på hur kunskapsnivåerna kan förbättras då resultatet redovisar kunskapsbrist hos vårdpersonal. / Background: Sepsis requires that early treatment measures are initiated, otherwise the patient risks enduring severe complications which in the worst case can lead to death. As the disease state is expressed through diffuse symptoms, this early initiation of treatment measures can be difficult, which places high demands on the care staff’s knowledge. Aim: To map the care staff’s knowledge regarding definition, identification and management of sepsis at an early stage in emergency care. Method: Literature study based on nine quantitative articles. Database searches were performed in CINAHL, PubMed, Scopus and Web of science. The articles are quality reviewed and analyzed with Friberg's analysis model and compiled in text and tables. Results: Knowledge gaps are reported. The professions with a higher level of education report higher levels of knowledge. The lowest levels of knowledge are reported regarding reduced body temperature, fluid infusion, vasopressors and measurement of lactate and leukocytes. Conclusion: Through continuous and updated training, implementation of evidence-based guidelines and good teamwork can reduce mortality. Seng's theory of learning organizations shows the importance of teamwork. Further research should focus on how the levels of knowledge can be improved as the results report a lack of knowledge among care staff.