A hemodiluição normovolêmica aguda (HNA) é terapia mundialmente reconhecida como vantajosa em cirurgias que possuem grande potencial para sangramento, mas o edema provocado pela maior infusão de fluidos pode ser danoso em alguns pacientes. No intuito de avaliar as repercussões hemodinâmicas e laboratoriais da utilização da solução salina hipertônica a 7,5% como líquido parcial de reposição na HNA foram estudados 20 pacientes submetidos à artrodese para correção de escoliose de coluna. No grupo 1 (SS 0,9%, n=10) o sangue retirado na HNA, realizada momentos antes da cirurgia, foi reposto por solução salina 0,9% em um volume três vezes maior que o retirado. No grupo 2 (SS 7,5%, n=10) a metade do que foi retirado foi reposto com solução a 0,9% (três vezes o volume retirado) e a outra metade por 4 ml.kg-1 de solução salina hipertônica 7,5%. Nenhum dos pacientes apresentou distúrbios do equilíbrio ácido-básico e as alterações metabólicas (aumento da osmolaridade, sódio e cloro plasmáticos) foram passageiras. Os pacientes mantiveram-se hemodinamicamente estáveis e não foi observado sangramento anormal intra-operatório. A incidência de transfusão sangüínea foi semelhante embora os pacientes do grupo solução hipertônica tenham ficado clinicamente menos edemaciados. Mesmo não sendo objeto do estudo, observou-se menor incidência de infecções pós-operatórias nos pacientes submetidos à infusão de solução hipertônica, o que pode significar potencial efeito protetor da solução. Embora mais estudos com números maiores de pacientes sejam necessários para se comprovar esses efeitos, a solução hipertônica mostrou-se barata, simples e segura como maneira de redução do volume infundido na HNA. / The acute normovolemic hemodilution (ANH) is a therapy recognized as benefic in surgeries that have a great potential for bleeding but the swelling caused by solutions infused intra-operative can be harmful in some kind of patients. Twenty patients submitted to arthrodesis for scoliosis correction were studied in order to evaluate the hemodynamic and laboratory effects of 7.5% hypertonic saline solution as a partial fluid replacement in ANH. In group 1 (SS 0.9%, n = 10) the collected blood in ANH was replaced by saline solution 0.9% in a volume three times greater than the withdrawal. In group 2 (SS 7.5%, n = 10), half of the blood removed was restored by 0.9% solution (three times the amount withdrawn) and the other half by 4 ml.kg-1 of 7.5% solution. None of the patients presented acid-base disorders. Metabolic changes - enhanced of plasmatic levels of sodium, chlorine and osmolarity - were all transitory. Patients remain hemodynamic stable and no abnormal bleeding was observed. They had similar incidence of blood transfusion but the ones in hypertonic solution group were clinically less swollen. Lower incidences of post-operative infections were found in this group, which could mean a possible protector potential of hypertonic solution. SS 7.5% was a cheap, simple and safe alternative to reduce volume infused in ANH.

Orientador: Artur Udelsmann / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-11T15:05:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bonfim_MatheusRodrigues_M.pdf: 2022340 bytes, checksum: a5de652e3794240a34fc70fa9e5da209 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: Justificativa e objetivos: Várias soluções podem ser empregadas no tratamento da hipovolemia, sendo as mais comuns as cristalóides e as colóides. Na década de 1980, estudou-se o uso de soluções salinas hipertônicas, na reposição volêmica com pequenos volumes. Posteriormente foi indicada a associação das soluções hipertônicas com soluções colóides com resultados satisfatórios. O hidroxi-etil amido hipertônico é uma nova solução de reposição volêmica, composta por um colóide associado ao NaCl 7,2%. O objetivo deste trabalho foi estudar, em cães submetidos à hipovolemia, as respostas hemodinâmicas da reposição volêmica com solução fisiológica e hidroxi-etil amido hipertônico. Método: 40 cães sob anestesia geral e monitorização hemodinâmica com pressão arterial invasiva e cateter de Swan-Ganz, após medidas hemodinâmicas em repouso, foram sangrados 20 ml.kg-1 em 10 minutos e tiveram os parâmetros novamente medidos após 10 minutos; em seguida foi realizada reposição volêmica com solução fisiológica na razão de duas vezes o volume retirado em 5 minutos ou 4 ml.kg-1 de hidroxi-etil amido hipertônico também em 5 minutos e os dados hemodinâmicos foram medidos após 5, 15, 30, 45 e 60 minutos. Os resultados foram comparados estatisticamente. Resultados: nesse estudo, a reposição volêmica com as duas soluções fez os valores retornarem a níveis hemodinâmicos satisfatórios. Valores iniciais maiores foram observados com a solução fisiológica, mas tenderam a diminuir progressivamente, com o hidroxi-etil amido hipertônico os parâmetros estudados retornaram a valores semelhantes ao repouso e variaram menos. O índice cardíaco mostrou valores maiores para o grupo SF em todos os momentos após a reposição volêmica (p<0,001) . As pressões arteriais e pulmonares não mostraram diferenças entre os grupos. As pressões capilar pulmonar e venosa central mostraram valores maiores para o grupo SF imediatamente após a reposição volêmica (M3). Conclusões: ambas as soluções se mostraram eficientes na reposição volêmica no curto prazo estudado, mas o hidroxi-etil amido hipertônico proporcionou resultados mais estáveis. Unitermos: hipovolemia, hidroxi-etil amido, solução salina hipertônica / Abstract: Background and Objectives: Several solutions may be employed for the treatment of hypovolemia. Among the various solutions used, the most common are crystalloids and colloids. In the 80s, the use of hypertonic saline solutions was studied for small-volume fluid replacement. Subsequently, these hypertonic solutions were associated with colloid solutions producing satisfactory results. Hypertonic hydroxyethyl starch is a new solution used for volume replacement that is composed of a colloid associated with 7.2% NaCl. The purpose of this study was to examine hemodynamic response to volume replacement using saline solution and hypertonic hydroxyethyl starch in dogs subjected to hypovolemia. Method: Forty (40) dogs underwent general anesthesia and were hemodynamically monitored with intra-arterial blood pressure monitoring and a Swan-Ganz catheter. Baseline hemodynamic values were measured and the dogs were bled 20 ml.Kg.1 Parameters were measured after 10 minutes. Volume replacement with saline solution was then performed at a ratio of twice the volume removed or 4 ml.Kg-1 of hypertonic hydroxyethyl starch. Hemodynamic data was measured after 5, 15, 30, 45 and 60 minutes. The results were statistically compared. Results: In this study, values returned to satisfactory hemodynamic levels when volume was replaced with both solutions. Higher initial values were observed when saline solution was used. However, these values tended to decrease progressively. When hypertonic hydroxyethyl starch was used, the parameters studied returned more rapidly to values similar to those at baseline and less variation was observed. The cardiac index showed higher values for the saline group at all time periods studied after volume replacement (p<0.001). Arterial blood pressure and pulmonary blood pressure showed no differences between groups. Pulmonary capillary pressure and central venous pressure showed higher values for the saline group immediately after volume replacement (M3). Conclusions: Both solutions proved to be efficient at replacing volume in the short period studied. However, hypertonic hidroxyethyl starch provided more stable results. Uniterms: Hypovolemia, Hetastarch, Saline Solution, Hypertonic / Mestrado / Cirurgia / Mestre em Cirurgia

A hemodiluição normovolêmica aguda (HNA) é terapia mundialmente reconhecida como vantajosa em cirurgias que possuem grande potencial para sangramento, mas o edema provocado pela maior infusão de fluidos pode ser danoso em alguns pacientes. No intuito de avaliar as repercussões hemodinâmicas e laboratoriais da utilização da solução salina hipertônica a 7,5% como líquido parcial de reposição na HNA foram estudados 20 pacientes submetidos à artrodese para correção de escoliose de coluna. No grupo 1 (SS 0,9%, n=10) o sangue retirado na HNA, realizada momentos antes da cirurgia, foi reposto por solução salina 0,9% em um volume três vezes maior que o retirado. No grupo 2 (SS 7,5%, n=10) a metade do que foi retirado foi reposto com solução a 0,9% (três vezes o volume retirado) e a outra metade por 4 ml.kg-1 de solução salina hipertônica 7,5%. Nenhum dos pacientes apresentou distúrbios do equilíbrio ácido-básico e as alterações metabólicas (aumento da osmolaridade, sódio e cloro plasmáticos) foram passageiras. Os pacientes mantiveram-se hemodinamicamente estáveis e não foi observado sangramento anormal intra-operatório. A incidência de transfusão sangüínea foi semelhante embora os pacientes do grupo solução hipertônica tenham ficado clinicamente menos edemaciados. Mesmo não sendo objeto do estudo, observou-se menor incidência de infecções pós-operatórias nos pacientes submetidos à infusão de solução hipertônica, o que pode significar potencial efeito protetor da solução. Embora mais estudos com números maiores de pacientes sejam necessários para se comprovar esses efeitos, a solução hipertônica mostrou-se barata, simples e segura como maneira de redução do volume infundido na HNA. / The acute normovolemic hemodilution (ANH) is a therapy recognized as benefic in surgeries that have a great potential for bleeding but the swelling caused by solutions infused intra-operative can be harmful in some kind of patients. Twenty patients submitted to arthrodesis for scoliosis correction were studied in order to evaluate the hemodynamic and laboratory effects of 7.5% hypertonic saline solution as a partial fluid replacement in ANH. In group 1 (SS 0.9%, n = 10) the collected blood in ANH was replaced by saline solution 0.9% in a volume three times greater than the withdrawal. In group 2 (SS 7.5%, n = 10), half of the blood removed was restored by 0.9% solution (three times the amount withdrawn) and the other half by 4 ml.kg-1 of 7.5% solution. None of the patients presented acid-base disorders. Metabolic changes - enhanced of plasmatic levels of sodium, chlorine and osmolarity - were all transitory. Patients remain hemodynamic stable and no abnormal bleeding was observed. They had similar incidence of blood transfusion but the ones in hypertonic solution group were clinically less swollen. Lower incidences of post-operative infections were found in this group, which could mean a possible protector potential of hypertonic solution. SS 7.5% was a cheap, simple and safe alternative to reduce volume infused in ANH.

Choque séptico, a forma mais grave de sepse associada com hipotensão refratária e disfunção orgânica, é uma doença letal. A incidência aumentada é provavelmente devido ao envelhecimento progressivo da população, melhorias no suporte de terapia intensiva e o progresso nas terapias imunossupressoras, ocasionando no aumento da expectativa de vida, aumentando assim a ocorrência de episódios de sepse durante a vida. A lista de terapias ineficazes na sepse é longa e desanimadora. No estudo foram avaliados os efeitos da infusão intravenosa de salina e hidroxietilamido em soluções isotônicas e hipertônicas sobre a pressão arterial média e eletrólitos, os níveis de vasopressina, parâmetros sangue e reatividade vascular durante o choque séptico experimental induzido por ligadura e punção cecal. Ratos Wistar (250-300 g) com a veia jugular e artéria femoral canulados foram anestesiados com tribromoetanol (250 mg/kg) e submetidos à perfuração e ligadura cecal (CLP) ou cirurgia fictícia (CF). A pressão arterial média (PAM) foi monitorada durante 24 horas e os parâmetros sangüíneos (Na+, osmolaridade, hematócrito, pH, pO2, pCO2, saturação de O2, HCO3-) foram avaliados nos tempo 0, 6 e 24 horas após CLP ou CF. A expansão de volume com solução isotônica de hidroxietilamido (Iso-HES) (HES 6% em NaCl 0,9%, 4 ml/kg, 8 ml/kg, 16ml/kg), solução hipertônica de hidroxietilamido (Hyper-HES, HES 6% em NaCl 7,5 %, 4 ml/kg) ou salina hipertônica (SH, NaCl a 7,5%, 4 ml/kg) foi realizada seis horas após a CLP. PAM foi medida durante 30 minutos, os parâmetros sangüíneos foram avaliados aos 30 min, e vasopressina plasmática foi avaliada 5 minutos após expansão de volume. Na vigésima quarta hora os animais foram sacrificados para retirada da aorta para analise da reatividade vascular. CLP diminui a PAM que persistiu durante 24 horas, além da redução da reatividade vascular. A infusão endovenosa de Iso-HES provocou redução do hematócrito, mas não mudoua PAM e os demais parâmetros sanguíneos. No entanto, ambas as infusões do Hyper-HES e HS aumentaram PAM, a liberação de vasopressina e ocitocina, o sódio plasmático e osmolaridade plasmática. Não houve outras alterações nos parâmetros sanguíneos e na reatividade vascular após a administração de soluções hipertônicas. A expansão de volume com coluções hipertônicas (Hyper-HES e HS), mas não com soluções isotônicas (Iso-HES), produziu um aumento da PAM durante o choque séptico induzido por ligadura e punção cecal, e esse efeito é mediado pela liberação de vasopresina. / Septic shock, the most severe form of sepsis associated with refractory hypotension and organ dysfunction, is a deadly disease. The augmented incidence is probably due to 77 progressive aging of the population, improvements in critical care support, and progress in immunosupressive therapies, including chemotherapy, so that individuals with immunosupression and malignancies now have increased life expectancy, therefore increasing the occurrence of septic episodes during their life course. The list of therapies proven ineffective in sepsis is long and discouraging. In the present study we evaluated the effects of intravenous infusion of isotonic and hypertonic hydroxyethyl starch solutions on mean arterial pressure and on electrolytes, vasopressin levels and gases in the blood during experimental septic shock induced by cecal ligation and perforation. Male Wistar rats (250 – 300 g) with jugular vein and femoral artery catheters were anesthetized with tribromoethanol (250 mg/kg) and submitted to cecal ligation and perforation (CLP) or sham surgery (SS). Mean arterial pressure (MAP) was monitored for 24 hours and blood parameters (Na+, osmolality, hematocrit, pH, pO2, pCO2, O2 saturation, HCO3 -) were evaluated at 0, 6 and 24 hours after CLP or SS. Volume expansion with isotonic hydroxyethyl starch solution (Iso- HES) (HES 6% in NaCl 0.9%; 4 ml/kg, 8ml/kg, 16ml/kg), hypertonic hydroxyethyl starch solution (Hyper-HES, HES 6% in NaCl 7.5%; 4 ml/kg) or hypertonic saline (HS, 7.5% NaCl; 4 ml/kg) were performed 6 hours after CLP or SS. MAP was measured for 30 minutes, blood parameters were measured at 30 min, and plasma vasopressin was assessed 5 minutes after volume expansion. In the twenty-fourth hours the animals were sacrificed for removal of the aortic for analysis of vascular reactivity CLP decreased MAP and this decrease last for 24 hours,besides the reduction of vascular reactivity. Intravenous infusion of Iso-HES decreased hematocrit but did not change MAP or other blood parameters. However, both infusions of Hyper-HES and HS increased MAP, increased vasopressin and ocitocin release, increased plasma sodium and also increased plasma osmolality. There were no other changes in blood parameters and vascular reactivity after administration of hypertonic solutions. Volume expansion with hypertonic solutions (Hyper-HES and HS), but not with isotonic solution (Iso-HES), produced an increase in MAP during septic shock induced by cecal ligation and perforation, and this effect is mediated by vasopressin release. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

INTRODUÇÃO: A pancreatite aguda (PA) grave é um processo inflamatório do pâncreas caracterizado por alterações hemodinâmicas e resposta inflamatória sistêmica com altos níveis de mortalidade. A ativação inapropriada intrapancreática das enzimas pancreáticas desempenha papel importante no desencadeamento dos mecanismos inflamatórios responsáveis pelas manifestações locais e sistêmicas da doença. Em trabalho anterior observamos redução significativa da mortalidade após administração de solução salina hipertônica em ratos, através de redução das alterações hemodinâmicas e da resposta inflamatória sistêmica, mas os efeitos da solução salina hipertônica na ativação das enzimas pancreáticas e na própria lesão pancreática não foram estudados. O objetivo deste estudo foi avaliar se o mecanismo de ação da solução salina hipertônica, reduzindo a gravidade da pancreatite aguda em ratos, ocorre devido à redução da intensidade da lesão pancreática e/ou à redução da resposta inflamatória sistêmica e seus efeitos. MÉTODOS: Foi utilizado um modelo experimental de pancreatite aguda grave através da injeção intraductal de taurocolato de sódio a 2,5%. Cento e quarenta e dois ratos Wistar machos foram divididos em quatro grupos: Controle (animais que não foram submetidos à indução da PA), Grupo ST (animais que não receberam tratamento após a indução da PA), Grupo SSF (animais que receberam 34ml/Kg de solução salina fisiológica de NaCl 0,9% por via endovenosa, 1 hora após a indução da PA) e grupo SSH (animais que receberam 4ml/Kg de solução salina hipertônica de NaCl 7,5% por via endovenosa, 1 hora após a indução da PA). Após 2, 12 e 24 horas da indução da PA os animais foram sacrificados e os materiais foram coletados para análise. Foram efetuadas a quantificação do volume de líquido ascítico e as determinações no líquido ascítico e no soro dos peptídeos liberados na ativação do tripsinogênio (TAP) e da atividade da amilase. No tecido pancreático foram realizadas as análises da peroxidação lipídica (MDA), da atividade da mieloperoxidase (MPO) e a análise histológica. Os níveis de citocinas (TNF-, IL-6 e IL-10) foram analisados no líquido ascítico, soro e tecido pancreático. RESULTADOS: Os níveis de TAP e amilase no líquido ascítico e soro, de MDA e MPO no tecido pancreático e a análise histológica mostraram resultados iguais nos três grupos de animais que foram submetidos a PA (ST, SSF e SSH). Observamos redução do volume de líquido ascítico e dos níveis de TNF- , IL-6 e IL-10 no líquido ascítico, soro e tecido pancreático nos animais nos quais foi administrada solução salina hipertônica (grupo SSH) quando comparados com os animais tratados com solução salina fisiológica (grupo SSF) e os animais sem tratamento (grupo ST) (p<0,05). CONCLUSÕES: A administração de solução salina hipertônica (NaCl 7,5%) na pancreatite aguda experimental foi capaz de reduzir a resposta inflamatória local e sistêmica, sem modificar contudo a intensidade das lesões pancreáticas. / INTRODUCTION: Severe acute pancreatitis (AP) is characterized by hemodynamic alterations and systemic inflammatory response leading to a high mortality rate. In AP the inappropriate activation of pancreatic enzymes plays an important role in pancreas autodigestion and in the inflammatory mechanisms responsible for the systemic response of the disease. In a previous study, we have demonstrated that hypertonic saline solution infusion significantly reduced mortality in experimental AP through an improvement in the hemodynamic conditions and by an antiinflammatory response, but its effects on the pancreatic lesions were not evaluated. The aim of the present study was to evaluate if the hypertonic saline solution reduces mortality in AP through a local effect attenuating the pancreatic lesion and/or by reducing the systemic inflammatory response syndrome (SIRS). METHODS: An experimental model of severe AP by injection of 0.5ml of 2.5% sodium taurocholate into the pancreatic duct was utilized. A hundred and forty two male Wistar rats were divided into 4 groups: C (control, without AP), ST (no treated AP), SSF (animals received 34ml/kg of normal saline solution of NaCl 0.9% IV, 1 hour after AP), and SSH (animals received 4ml/Kg of hypertonic saline solution of NaCl 7.5% IV, 1 hour after AP). After 2, 12 and 24 hours of induction of AP volume of ascitic fluid, trypsinogen activation peptides (TAP) levels and amylase activity in ascitic fluid and serum were determined. Pancreatic lipid peroxidation (MDA), myeloperoxidase (MPO) activity, and pancreatic histology were analysed 2 and 24 hours after AP. TNF-, IL-6, and IL-10 levels in ascitic fluid, serum, and pancreatic tissue were also analyzed. RESULTS: There were no significant differences in TAP levels and amylase activity in the ascitic fluid and serum in animals of groups ST, SSF and SSH. No differences in pancreatic MPO, MDA and histological score were observed among these three groups with AP. In the SSH group it was observed a significant decrease in volume of ascitic fluid and inflammatory cytokines levels (TNF-, IL-6, and IL-10) in ascitic fluid, serum, and pancreatic tissue when compared to ST and SSF groups (p<0.05). CONCLUSIONS: These findings suggest that hypertonic saline solution decreases local and systemic inflammatory response in acute pancreatitis without changing the intensity of the pancreatic lesions.

Isquemia e reperfusão (I/R) de vasos mesentéricos que acarretam insuficiência vascular aguda são acompanhadas de insuficiência em múltiplos órgãos e estão associados a altas morbidade e mortalidade. Os benefícios da solução hipertônica e da pentoxifilina foram testados isoladamente e em conjunto para melhorar o fluxo sanguíneo e o estado de oxigenação dos tecidos com redução da reação inflamatória e de apoptose, tanto no intestino quanto no pulmão enquanto órgão alvo. Foram utilizados 24 ratos Wistar machos pesando entre 200 e 250g distribuídos em 4 grupos (n=6). Foram submetidos à laparotomia e período de isquemia por clampeamento dos vasos mesentéricos por 40 minutos. O período de reperfusão foi de 80 minutos. A cada 40 minutos foram realizadas coletas de sangue arterial para gasometria. Os animais foram alocados nos grupos: grupo I/R (IR) onde I/R foi realizada e os animais receberam 4ml/kg de solução salina isotônica. O grupo solução salina hipertônica (SH) recebeu 4ml/kg de solução hipertônica a 7,5% e o grupo pentoxifilina (PTX) recebeu 30mg/kg de pentoxifilina diluída em NaCl 0,9% em um volume total de 4ml/kg ao final da isquemia intestinal. O grupo solução salina hipertônica+pentoxifilina (SH+PTX) recebeu ambas as soluções com volume total de 4m/kg no mesmo momento. As biopsias de intestino e pulmão foram colhidas ao final do experimento e foram submetidas à coloração em HE e à imuno-histoquímica para COX 2, caspase-3 clivada e Bcl-2. Os valores de sO2 revelaram diferença estatisticamente significante aos 40 (p=0,0099) e 80 (p=0,0074) minutos de reperfusão na comparação do grupo IR com os grupos SH e SH+PTX. Os valores de lactato foram estatisticamente significantes aos 40 minutos (p=0,0069) e 80 minutos (p=0,0098) de reperfusão, entre os grupos IR e os grupos SH e SH+PTX. A avaliação histológica em HE no tecido intestinal evidenciou diferença estatisticamente significantes na comparação dos grupos SH (p=0,0200), PTX (p=0,0200) e HS+PTX (p=0,0412) com o grupo IR, assim como no tecido pulmonar, que evidenciou diferenças estatisticamente significantes na comparação de IR com SH (p=0,006), PTX (p=0,0433) e SH+PTX (p=0,0040). A marcação citoplasmática de COX 2 revelou diferença estatisticamente significante ao comparar o grupo IR com o grupo SH+PTX (p=0,0015), Na avaliação do tecido pulmonar foi observado o grupo IR estabelecendo diferenças estatisticamente significantes na comparação com os grupos SH (p=0,0455), PTX (0,0143) e SH+PTX (p=0,0455). A avaliação de apoptose por imunohistoquímica para caspase 3 clivada evidenciou diferença com significância estatística ente os grupos IR e SH (p=0,0085) e os grupos PTX e SH (p=0,0120) em tecido intestinal. Em tecido pulmonar, entre IR e PTX (p=0,0090) e SH e PTX (p=0.0412). A marcação citoplasmática de Bcl-2 evidenciou que somente entres os grupos IR e SH+PTX (p=0,0012) se estabeleceu significância estatística em tecido intestinal No pulmão a diferença foi evidenciada em relação ao grupo IR e os grupos SH (p=0,0128), PTX (p=0,0085) e SH+PTX (p=0,0066). Conclui-se que o uso associado de pentoxifilina e solução salina hipertônica oferece os melhores resultados dos pontos de vista metabólico, inflamatório e da inibição da apoptose / Ischemia-reperfusion (I/R) of the mesenteric vessels cause acute vascular insufficiency and is followed by multiple organs failure and high morbidity and mortality. The benefits of hypertonic saline (NaCl 7,5%) and pentoxifylline were tested to improve metabolic and oxygen status of tissues with reduced inflammatory reaction and apoptosis, both in the gut as in the lung as target organ. 24 male Wistar rats weighing 200 to 250g. They underwent laparotomy and ischemia by clamping the mesenteric vessels for 40 minutes. The reperfusion period was 80-minute long. Every 40 minutes, blood was collected for arterial gas analysis. The animals were set into 4 groups (n=6): I/R (IR) received isotonic saline just before reperfusion (4ml/kg). Hypertonic saline group (HS) received 7.5% hypertonic saline solution (4ml/kg) and Pentoxifylline group (PTX) received pentoxifylline (30mg/kg)diluted in NaCl 0.9% at the end of the mesenteric ischemia. Hypertonic saline+pentoxifylline group (SH-PTX) received both solutions at the same doses. Biopsies of intestine and lung were collected at the end of the experiment and were subjected to HE staining and immunohistochemistry staining to COX 2, cleaved caspase-3 and Bcl-2. About the values of sO2, a statistically significant difference was established when groups were compared at 40 (p=0.0099) minutes and 80 (p=0.0074) of reperfusion. The lactate values were statistically significant after 40 (p=0.0069) and 80 (p=0.098) minutes of reperfusion as well. Histological evaluation with HE revealed a statistically significant difference in the comparison of SH (p=0.0200), PTX (p=0.0200) and HS + PTX (p=0.0412) groups compared to IR group in intestine tissue and SH (p=0.0006), PTX (p=0.0433) and HS + PTX (p=0.040) in lung tissue. Cytoplasmic staining of COX 2 revealed a statistically significant difference when comparing IR (p=0.0015) to HS+PTX in intestinal tissue. The evaluation of the lung tissue for COX 2 showed IR group setting statistically significance when compared to HS 9p=0,045), PTX (0.0143) and HS+PTX (p=0.0455) groups. The evaluation of apoptosis by immunohistochemistry for cleaved caspase 3 revealed that there was a significant difference between IR versus SH (p=0.0085) and PTX versus HS (p= 0.0120) in intestinal tissue and IR versus PTX (p=0,0090) and PTX versus SH (p=0.0412) in lung tissue. The cytoplasmic Bcl-2 expression shows that only between groups IR versus HS+PTX (p = 0.0012) statistical significance was established in intestinal tissue. Lung tissue showed the difference was evidenced in relation to IR versus SH (p=0.0128), PTX (p=0.0085) and HS+PTX (p=0.0066). It may be concluded that the combined use of pentoxifylline and hypertonic saline offers best results on metabolic, inflammatory and apoptosis inhibitory aspects

INTRODUÇÃO: A pancreatite aguda (PA) grave é um processo inflamatório do pâncreas caracterizado por alterações hemodinâmicas e resposta inflamatória sistêmica com altos níveis de mortalidade. A ativação inapropriada intrapancreática das enzimas pancreáticas desempenha papel importante no desencadeamento dos mecanismos inflamatórios responsáveis pelas manifestações locais e sistêmicas da doença. Em trabalho anterior observamos redução significativa da mortalidade após administração de solução salina hipertônica em ratos, através de redução das alterações hemodinâmicas e da resposta inflamatória sistêmica, mas os efeitos da solução salina hipertônica na ativação das enzimas pancreáticas e na própria lesão pancreática não foram estudados. O objetivo deste estudo foi avaliar se o mecanismo de ação da solução salina hipertônica, reduzindo a gravidade da pancreatite aguda em ratos, ocorre devido à redução da intensidade da lesão pancreática e/ou à redução da resposta inflamatória sistêmica e seus efeitos. MÉTODOS: Foi utilizado um modelo experimental de pancreatite aguda grave através da injeção intraductal de taurocolato de sódio a 2,5%. Cento e quarenta e dois ratos Wistar machos foram divididos em quatro grupos: Controle (animais que não foram submetidos à indução da PA), Grupo ST (animais que não receberam tratamento após a indução da PA), Grupo SSF (animais que receberam 34ml/Kg de solução salina fisiológica de NaCl 0,9% por via endovenosa, 1 hora após a indução da PA) e grupo SSH (animais que receberam 4ml/Kg de solução salina hipertônica de NaCl 7,5% por via endovenosa, 1 hora após a indução da PA). Após 2, 12 e 24 horas da indução da PA os animais foram sacrificados e os materiais foram coletados para análise. Foram efetuadas a quantificação do volume de líquido ascítico e as determinações no líquido ascítico e no soro dos peptídeos liberados na ativação do tripsinogênio (TAP) e da atividade da amilase. No tecido pancreático foram realizadas as análises da peroxidação lipídica (MDA), da atividade da mieloperoxidase (MPO) e a análise histológica. Os níveis de citocinas (TNF-, IL-6 e IL-10) foram analisados no líquido ascítico, soro e tecido pancreático. RESULTADOS: Os níveis de TAP e amilase no líquido ascítico e soro, de MDA e MPO no tecido pancreático e a análise histológica mostraram resultados iguais nos três grupos de animais que foram submetidos a PA (ST, SSF e SSH). Observamos redução do volume de líquido ascítico e dos níveis de TNF- , IL-6 e IL-10 no líquido ascítico, soro e tecido pancreático nos animais nos quais foi administrada solução salina hipertônica (grupo SSH) quando comparados com os animais tratados com solução salina fisiológica (grupo SSF) e os animais sem tratamento (grupo ST) (p<0,05). CONCLUSÕES: A administração de solução salina hipertônica (NaCl 7,5%) na pancreatite aguda experimental foi capaz de reduzir a resposta inflamatória local e sistêmica, sem modificar contudo a intensidade das lesões pancreáticas. / INTRODUCTION: Severe acute pancreatitis (AP) is characterized by hemodynamic alterations and systemic inflammatory response leading to a high mortality rate. In AP the inappropriate activation of pancreatic enzymes plays an important role in pancreas autodigestion and in the inflammatory mechanisms responsible for the systemic response of the disease. In a previous study, we have demonstrated that hypertonic saline solution infusion significantly reduced mortality in experimental AP through an improvement in the hemodynamic conditions and by an antiinflammatory response, but its effects on the pancreatic lesions were not evaluated. The aim of the present study was to evaluate if the hypertonic saline solution reduces mortality in AP through a local effect attenuating the pancreatic lesion and/or by reducing the systemic inflammatory response syndrome (SIRS). METHODS: An experimental model of severe AP by injection of 0.5ml of 2.5% sodium taurocholate into the pancreatic duct was utilized. A hundred and forty two male Wistar rats were divided into 4 groups: C (control, without AP), ST (no treated AP), SSF (animals received 34ml/kg of normal saline solution of NaCl 0.9% IV, 1 hour after AP), and SSH (animals received 4ml/Kg of hypertonic saline solution of NaCl 7.5% IV, 1 hour after AP). After 2, 12 and 24 hours of induction of AP volume of ascitic fluid, trypsinogen activation peptides (TAP) levels and amylase activity in ascitic fluid and serum were determined. Pancreatic lipid peroxidation (MDA), myeloperoxidase (MPO) activity, and pancreatic histology were analysed 2 and 24 hours after AP. TNF-, IL-6, and IL-10 levels in ascitic fluid, serum, and pancreatic tissue were also analyzed. RESULTS: There were no significant differences in TAP levels and amylase activity in the ascitic fluid and serum in animals of groups ST, SSF and SSH. No differences in pancreatic MPO, MDA and histological score were observed among these three groups with AP. In the SSH group it was observed a significant decrease in volume of ascitic fluid and inflammatory cytokines levels (TNF-, IL-6, and IL-10) in ascitic fluid, serum, and pancreatic tissue when compared to ST and SSF groups (p<0.05). CONCLUSIONS: These findings suggest that hypertonic saline solution decreases local and systemic inflammatory response in acute pancreatitis without changing the intensity of the pancreatic lesions.

Isquemia e reperfusão (I/R) de vasos mesentéricos que acarretam insuficiência vascular aguda são acompanhadas de insuficiência em múltiplos órgãos e estão associados a altas morbidade e mortalidade. Os benefícios da solução hipertônica e da pentoxifilina foram testados isoladamente e em conjunto para melhorar o fluxo sanguíneo e o estado de oxigenação dos tecidos com redução da reação inflamatória e de apoptose, tanto no intestino quanto no pulmão enquanto órgão alvo. Foram utilizados 24 ratos Wistar machos pesando entre 200 e 250g distribuídos em 4 grupos (n=6). Foram submetidos à laparotomia e período de isquemia por clampeamento dos vasos mesentéricos por 40 minutos. O período de reperfusão foi de 80 minutos. A cada 40 minutos foram realizadas coletas de sangue arterial para gasometria. Os animais foram alocados nos grupos: grupo I/R (IR) onde I/R foi realizada e os animais receberam 4ml/kg de solução salina isotônica. O grupo solução salina hipertônica (SH) recebeu 4ml/kg de solução hipertônica a 7,5% e o grupo pentoxifilina (PTX) recebeu 30mg/kg de pentoxifilina diluída em NaCl 0,9% em um volume total de 4ml/kg ao final da isquemia intestinal. O grupo solução salina hipertônica+pentoxifilina (SH+PTX) recebeu ambas as soluções com volume total de 4m/kg no mesmo momento. As biopsias de intestino e pulmão foram colhidas ao final do experimento e foram submetidas à coloração em HE e à imuno-histoquímica para COX 2, caspase-3 clivada e Bcl-2. Os valores de sO2 revelaram diferença estatisticamente significante aos 40 (p=0,0099) e 80 (p=0,0074) minutos de reperfusão na comparação do grupo IR com os grupos SH e SH+PTX. Os valores de lactato foram estatisticamente significantes aos 40 minutos (p=0,0069) e 80 minutos (p=0,0098) de reperfusão, entre os grupos IR e os grupos SH e SH+PTX. A avaliação histológica em HE no tecido intestinal evidenciou diferença estatisticamente significantes na comparação dos grupos SH (p=0,0200), PTX (p=0,0200) e HS+PTX (p=0,0412) com o grupo IR, assim como no tecido pulmonar, que evidenciou diferenças estatisticamente significantes na comparação de IR com SH (p=0,006), PTX (p=0,0433) e SH+PTX (p=0,0040). A marcação citoplasmática de COX 2 revelou diferença estatisticamente significante ao comparar o grupo IR com o grupo SH+PTX (p=0,0015), Na avaliação do tecido pulmonar foi observado o grupo IR estabelecendo diferenças estatisticamente significantes na comparação com os grupos SH (p=0,0455), PTX (0,0143) e SH+PTX (p=0,0455). A avaliação de apoptose por imunohistoquímica para caspase 3 clivada evidenciou diferença com significância estatística ente os grupos IR e SH (p=0,0085) e os grupos PTX e SH (p=0,0120) em tecido intestinal. Em tecido pulmonar, entre IR e PTX (p=0,0090) e SH e PTX (p=0.0412). A marcação citoplasmática de Bcl-2 evidenciou que somente entres os grupos IR e SH+PTX (p=0,0012) se estabeleceu significância estatística em tecido intestinal No pulmão a diferença foi evidenciada em relação ao grupo IR e os grupos SH (p=0,0128), PTX (p=0,0085) e SH+PTX (p=0,0066). Conclui-se que o uso associado de pentoxifilina e solução salina hipertônica oferece os melhores resultados dos pontos de vista metabólico, inflamatório e da inibição da apoptose / Ischemia-reperfusion (I/R) of the mesenteric vessels cause acute vascular insufficiency and is followed by multiple organs failure and high morbidity and mortality. The benefits of hypertonic saline (NaCl 7,5%) and pentoxifylline were tested to improve metabolic and oxygen status of tissues with reduced inflammatory reaction and apoptosis, both in the gut as in the lung as target organ. 24 male Wistar rats weighing 200 to 250g. They underwent laparotomy and ischemia by clamping the mesenteric vessels for 40 minutes. The reperfusion period was 80-minute long. Every 40 minutes, blood was collected for arterial gas analysis. The animals were set into 4 groups (n=6): I/R (IR) received isotonic saline just before reperfusion (4ml/kg). Hypertonic saline group (HS) received 7.5% hypertonic saline solution (4ml/kg) and Pentoxifylline group (PTX) received pentoxifylline (30mg/kg)diluted in NaCl 0.9% at the end of the mesenteric ischemia. Hypertonic saline+pentoxifylline group (SH-PTX) received both solutions at the same doses. Biopsies of intestine and lung were collected at the end of the experiment and were subjected to HE staining and immunohistochemistry staining to COX 2, cleaved caspase-3 and Bcl-2. About the values of sO2, a statistically significant difference was established when groups were compared at 40 (p=0.0099) minutes and 80 (p=0.0074) of reperfusion. The lactate values were statistically significant after 40 (p=0.0069) and 80 (p=0.098) minutes of reperfusion as well. Histological evaluation with HE revealed a statistically significant difference in the comparison of SH (p=0.0200), PTX (p=0.0200) and HS + PTX (p=0.0412) groups compared to IR group in intestine tissue and SH (p=0.0006), PTX (p=0.0433) and HS + PTX (p=0.040) in lung tissue. Cytoplasmic staining of COX 2 revealed a statistically significant difference when comparing IR (p=0.0015) to HS+PTX in intestinal tissue. The evaluation of the lung tissue for COX 2 showed IR group setting statistically significance when compared to HS 9p=0,045), PTX (0.0143) and HS+PTX (p=0.0455) groups. The evaluation of apoptosis by immunohistochemistry for cleaved caspase 3 revealed that there was a significant difference between IR versus SH (p=0.0085) and PTX versus HS (p= 0.0120) in intestinal tissue and IR versus PTX (p=0,0090) and PTX versus SH (p=0.0412) in lung tissue. The cytoplasmic Bcl-2 expression shows that only between groups IR versus HS+PTX (p = 0.0012) statistical significance was established in intestinal tissue. Lung tissue showed the difference was evidenced in relation to IR versus SH (p=0.0128), PTX (p=0.0085) and HS+PTX (p=0.0066). It may be concluded that the combined use of pentoxifylline and hypertonic saline offers best results on metabolic, inflammatory and apoptosis inhibitory aspects

Orientadores: José Dirceu Ribeiro, Carlos Emílio Levy / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-26T05:15:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_AdrianaCarolinaMarques_M.pdf: 1197514 bytes, checksum: 10b9c6c66730ad6487f8cc77ed1cde9c (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Introdução: A eficiente detecção de microrganismos nas vias aeríferas de pacientes com fibrose cística (FC) possibilita antibioticoterapia dirigida, melhor manejo ambulatorial e promove maior preservação da função pulmonar. Métodos para melhorar a identificação bacteriana estão em estudo, porém, não fica claro na literatura o papel da solução salina hipertônica (SSH) no auxílio da detecção desses microrganismos. Objetivo: Verificar a eficácia da SSH a 7% na identificação de microorganismos nas secreções das vias aeríferas em pacientes com FC e comparar com variáveis clinicas e laboratoriais. Método: Incluídos 64 pacientes com FC, com coleta de escarro ou swab de secreção de orofaringe pré e após inalação com SSH-7%. A identificação bacteriana foi realizada pelas técnicas de rotina no laboratório de Microbiologia. Resultados: Dos pacientes, 34(53,1%) eram do sexo feminino, com idade média de 12,11(±5,12). Do total de culturas microbiológicas realizadas (704 antes e após a SSH-7%), não houve diferença estatisticamente significante entre os resultados positivos, sendo 101 antes e 118 depois (OR=0,8319, IC=0,622-1,111). O mesmo foi observado para o número de espécies identificadas, sendo inicialmente identificados 7 microrganismos diferentes, e após a SSH-7% 11(p=0,1895), contudo houve aumento na identificação de 4(36,36%) espécies diferentes. Na análise semi-quantitativa e tipo de material (escarro ou swab) não houve diferença (p>0,05). No total foram obtidos após a SSH-7%, 25 resultados positivos que eram negativos e o contrário ocorreu para 9 pacientes. Não houve efeitos colaterais devido a SSH-7%.Conclusão: Apesar de não ocorrer diferença estatisticamente significativa, pode-se observar maior número de resultados positivos,detecção de maior número de patógenos e de espécies diferentes de microrganismos e aumento de amostras de escarro no lugar do swab após o uso da SSH-7% / Abstract: Introduction: The efficient detection of microorganisms in airways of cystic fibrosis (CF) patients allows targeted antibiotic therapy, better outpatient care and, consecutively, lung function preservation. Methods to improve bacteria identification have been studied. The role of hypertonic saline solution (HSS) in sputum collection, for bacteria identification, is not clear yet. Aim: Verify the effectiveness of HSS in the identification of microorganisms in airway secretions in patients and compare with clinical and laboratory variables. Methods: The study enrolled 64 CF patients, with a sputum sample or swab before and after inhalation with HSS 7%. Bacterial identification was performed by routine laboratory techniques in microbiology. Results: Of the 64 patients, female: 34 (53.1%); mean age: 12.11 (±5.12) years. Of the total microbiological analysis performed (704 before and after of 7% HSS), there was no difference between positive results between the positive results, being, 101 before and 118 after (OR= 0.832, CI= 0.622-1.111). The same was observed for the number of microorganisms species, being initially identified 7 species and after, 11 species (p= 0.1895), an increase of four different species (36.36%). In semi-quantitative analysis, there was no difference (p> 0.05). After of 7% HSS, 25 new positive results were observed and the opposite occurred in nine patients. No collateral effects were observed due to 7% HSS. Conclusion: Although statistically significant difference does not occur, the 7% HSS allowed a greater number of microbiological identification in sputum from airways, as in absolute number and as different microorganisms¿ species / Mestrado / Saude da Criança e do Adolescente / Mestra em Ciências

Sepse é a resposta inflamatória sistêmica do hospedeiro à infecção, que pode ser desencadeada por bactérias, vírus ou fungos. Há aumento da produção de mediadores inflamatórios como citocinas, quimiocinas espécies reativas de oxigênio e do recrutamento de neutrófilos. A administração de solução salina hipertônica 7,5% (SH) acarreta na modulação da resposta inflamatória e hemodinâmica culminando na redução da morbidade e mortalidade em modelos de pancreatite e choque hemorrágico. No presente trabalho, estudamos os efeitos da SH na sepse, induzida por ligadura e perfuração cecal (CLP) em camundongos Balb/C, divididos em 3 grupos: CLP sem nenhum tratamento (CLP); CLP tratado com solução salina isotônica 0,9% (SS) e CLP tratado com SH 7,5% (SH); um quarto grupo foi utilizado como controle, no qual não foi induzido sepse ou administrado tratamento (C); ambos os tratamentos foram aplicados 30 min. após CLP. Lavado peritoneal, intestino e pulmão foram coletados após 6h, 12h e 24h para a análise de citocinas (TNF-, IL-6 e IL-10), produção de oxido nítrico, peroxidação lipídica, infiltração de neutrófilos, moléculas de adesão (ICAM-1 e VCAM-1) e quimiocinas (CXCL-1). O grupo SH mostrou aumento de sobrevida (60%) em comparação aos grupos SS (46,6%) e CLP (33,3%) após 168h. SS apresentou aumento na produção de TNF- (27,3 ± 3,05 pg/ml) em 12h comparado ao grupo CLP (14,07 ± 1,68 pg/ml) e SH (19,66±3,19pg/ml); O efeito da SH na concentração de TNF permanece até 24h (6,2 ± 3,5 pg/ml vs. CLP 73,40± 49,52 pg/ml); a produção de IL-10 em 24h aumentaram nos grupos CLP (CLP - 3,12 ± 0,46 pg/ml) e SS (2,9 ± 0,9 pg/ml) em relação ao grupo SH (0,59 ± 0,34 pg/ml). Em 24h a produção de nitrito mostrou-se reduzida no grupo SH (6,77 ± 0,82 pg/ml) comparado com SS (10,65 ± 1,08 pg/ml), no pulmão. No intestino, a produção de nitrito, em 6h, diminuiu no grupo SH (1,27 ± 0,19 pg/ml) comparado com CLP (2,44 + 0,51 pg/ml). No grupo SH houve redução do infiltrado de neutrófilos no pulmão em 24h, através da redução de moléculas de adesão e concentração de mieloperoxidase, em comparação com CLP (29,4 + 5,7 ng/mg ; 3,02 + 0,41 mU/mg). Nossos resultados indicam que SH modula a resposta inflamatória, além de melhorar a sobrevida de animais submetidos à sepse experimental / Sepsis is a systemic inflammatory response to infection triggered by bacteria, virus and fungi. There is a rise in inflammatory mediators as citokynes, chemokynes, reactive oxygen species and neutrophil recruitment (1). The hypertonic saline solution (SH) has been showed to improve hemodynamic and inflammatory response. We studied the hypertonic solution effects in sepsis through cecal ligation and puncture (CLP) in mice Balb-C, divided in 3 groups: CLP without treatment (CLP); CLP treated with isotonic saline solution 0,9% - 34mg/Kg (SS); CLP treated with hypertonic saline solution 7,5% - 4ml/Kg (SH); and a 4th group indicating the basal values without both CLP and treatment (C); both treatments were administrated 30 min after CLP. The lung, gut and peritoneal fluid were collected after 6h, 12h and 24h to analyze cytokines levels, oxide nitric, lipid peroxidation and neutrophil infiltration. The SH group showed higher survival rats (60%) when compared to SS (46,6%) and CLP (33,3%) after 168h (7 days). TNF- level in the SS group (27,3 ± 3,05 pg/ml) was increased at 12h when compared to CLP (14,07 ± 1,68 pg/ml) and SH (19,66±3,19pg/ml); and at 24h the SH (6,2 ± 3,5 pg/ml) decreased its level when compared to CLP (73,40± 49,52 pg/ml); IL-10 level at 24h was increased in CLP (CLP - 3,12 ± 0,46 pg/ml) and SS (2,9 ± 0,9 pg/ml) in relation to SH (0,59 ± 0,34 pg/ml). In 24h, the quantification of nitrite decreased in SH (6,77 ± 0,82 pg/ml) compared with SS (10,65 ± 1,08 pg/ml) in lung. In intestine, nitrite levels diminished in SH (1,27 ± 0,19 pg/ml) in relation to CLP (2,44 + 0,51 pg/ml) in 6h. SH group reduced the neutrophil infiltration in lung, through adhesion molecule and myeloperoxidase at 24h (ng/mg;1,49 + 0,24 mU/mg) in relation to CLP(29,4 + 5,7 ng/mg ; 3,02 + 0,41 mU/mg). Our results suggest that the volume replacement of both treatments modulate pro and anti-inflammatory mediators of an inflammatory response to infection, but hypertonic solution presented a more effective effect