Sonchus oleraceus é usada na medicina popular brasileira para aliviar dores em geral e na culinária. Entretanto, faltam informações científicas sobre esta espécie e não há relatos de seu possível efeito no sistema nervoso central. Este estudo avaliou os efeitos antinociceptivo, ansiolítico e antidepressivo dos extratos hidroetanólico e diclorometânico de S. oleraceus. Os testes da formalina, placa quente, imersão da cauda e contorções induzidas por ácido acético foram usados para investigar a atividade antinociceptiva em camundongos. O efeito ansiolítico de S. oleraceus foi avaliado em camundongos submetidos aos testes labirinto em cruz elevado e campo aberto. O efeito antidepressivo dos extratos foi avaliado no desempenho de camundongos machos no nado forçado e no teste de suspensão pela cauda que são modelos preditivos de fármacos antidepressivos. Os extratos nas doses de 30-300 mg/kg, v.o. demonstraram atividade antinociceptiva nos testes da formalina, placa quente, imersão da cauda e contorções induzidas por ácido acético. Os extratos administrados na dose de 300 mg/kg, v.o. tiveram um efeito maior que a indometacina (5 mg/kg, v.o.) e a morfina (10 mg/kg, v.o.). No teste do labirinto em cruz elevado, os extratos de S. oleraceus aumentaram a porcentagem de entradas e tempo nos braços abertos. Os extratos induziram um efeito antitigmotático evidenciado por um aumento da atividade locomotora dos animais na parte central do campo aberto. Os extratos administrados nas doses de 30-300 mg/kg, v.o. exerceram um efeito ansiolítico similar ao clonazepam (0,5 mg/kg, v.o.). O tempo de imobilidade em ambos os testes nado forçado e suspensão pela cauda foi reduzido significativamente com a administração dos extratos nas doses 100–300 mg/kg, v.o., sem mudanças na atividade locomotora, como foi mostrado pelo teste do campo aberto. Isso exclui a possibilidade de que o efeito do extrato possa ser devido a uma ativação locomotora. A eficácia dos extratos foi comparada a amitriptilina (10 mg/kg, v.o.). Os extratos de Sonchus oleraceus demonstram atividade antinociceptiva, ansiolítica e antidepressiva em camundongos / Sonchus oleraceus has been used to relieve pain in Brazilian folk medicine and in culinary. Nevertheless, available scientific information regarding this species is scarce; there are no reports related to its possible effect on the central nervous system. This study evaluated the antinociceptive, anxyolitic and antidepressant-like of hydroethanolic and dichloromethane extracts of S. oleraceus .The formalin, hot plate, and tail immersion tests as well as acetic acid-induced writhing were used to investigate the antinociceptive activity in mice. The anxyolitic effect of S. oleraceusi was evaluated n mice submitted to the elevated plus-maze and open-field tests. The putative antidepressant-like effects of extracts was evaluated on the performance of male mice in the forced swimming test (FST) and tail suspension test (TST) models predictive of antidepressive drugs. The extracts at test doses of 30-300 mg/kg, p.o. clearly demonstrated antinociceptive activity in formalin, hot plate, tail immersion and acetic acid-induced writhing tests. The extracts administered at 300 mg/kg, p.o. had a stronger antinociceptive effect than indomethacin (5 mg/kg, p.o.) and morphine (10 mg/kg, p.o.). In the elevated plus-maze test, the S. oleraceus extracts increased the percentage of open arm entries and time spent in the open-arm portions of the maze. The extracts induce an antithigmotactic effect, evidenced by increased locomotor activity into the central part of the open field set-up. The extracts administered at 30- 300 mg/kg, p.o. had a similar anxiolytic effect to clonazepam (0.5 mg/kg, p.o.). The immobility time in both FST and TST was significantly reduced by acute oral treatment with the extracts (dose range 100–300 mg/kg), without accompanying changes in ambulation, as assessed in an open-field test. This excluded the possibility that the effect of the extracts is due to an activation of locomotion. The efficacy of the extracts was found to be comparable to that of amitriptyline (10 mg/kg, p.o.). The extracts of Sonchus oleraceus markedly demonstrated antinociceptive, anxyolitic and antidepressantlike action in mice. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A Dipirona é um medicamento anti-inflamatório não-esteroidal (AINE) fraco, utilizado principalmente como analgésico e antitérmico. No entanto, existem incertezas quanto ao mecanismo de ação da Dipirona e de outros AINEs, uma vez que inibidores da COX (ciclooxigenase) mais potentes que a Dipirona não possuem efeitos antitérmicos tão evidentes. Existem algumas hipóteses de que o mecanismo da Dipirona possa modular outras vias, entre elas, a via dos endocanabinoides. Diante disso, o objetivo desse trabalho foi avaliar uma possível participação do sistema endocanabinoide nos efeitos provocados pela Dipirona tendo como base os efeitos tétrade dos canabinoides, sendo esses: um estado antinoceptivo, indução ao estado cataléptico, hipolocomoção e hipotermia. Tais efeitos foram avaliados a partir dos testes de Placa quente e Catalepsia e do controle da locomoção e da temperatura corpórea dos animais. Para a realização dos experimentos foram utilizados camundongos Swiss machos (40-50g). Na primeira etapa, os animais foram divididos nos seguintes grupos: Salina (10 mL/kg, i.p.) grupo controle e Dipirona (10 mg/kg, 50 mg/kg, 200 mg/kg ou 500 mg/kg, i.p.); na segunda, em grupo Veículo, WIN 55,212-2 (0,1 mg/kg, 0,3 mg/kg ou 3,0 mg/kg, i.p.); e na terceira etapa, Veículo (Salina, Tween e DMSO, 8:1:1, i.p.) + Salina, Veículo + Dipirona (200 ou 500mg/kg, i.p), AM251 (3 ou 10 mg/kg, i.p.) + Salina e AM251 + Dipirona. A fim de avaliar o mecanismo de hipotermia, foi utilizado o antagonista do receptor TRPV1, Capsazepina (10 mg/kg, i.p.) para avaliação da temperatura. Para análises estatísticas, foi realizada análise de variância (ANOVA one-way ou two-way), seguida do pós-teste de Newman-Keuls ou do teste de comparações múltiplas de Tukey-Kramer. Os valores de p<0,05 foram considerados significativos. De acordo com os testes realizados, a Dipirona provocou uma redução da atividade locomotora acompanhada de um aumento da latência para resposta térmica analgésica e induziu um estado cataléptico e um estado de hipotermia, similares aos efeitos provocados pelo agonista canabinoide, WIN 55,212-2. Já o antagonista canabinoide AM251, reverteu os efeitos provocados pela Dipirona em relação à atividade locomotora, ao estado cataléptico e a resposta térmica analgésica. Em relação à hipotermia, os antagonistas dos receptores CB1 e TRPV1 acentuaram essa diminuição da temperatura corpórea provocada pela Dipirona. Os resultados indicam uma participação do sistema endocanabinoide, em especial do receptor CB1, na analgesia, na indução ao efeito cataléptico e na hipolocomoção. Já em relação à hipotermia, não há a participação dos receptores CB1 e TRPV1, porém considera-se uma hipótese de haver envolvimento de outro receptor canabinoide. O mecanismo da Dipirona é complexo, e envolve diversos outros sistemas moduladores, entre eles a via endocanabinoide. / Dipyrone is a non-steroidal anti-inflammatory drug (NSAID) used mainly as an analgesic and antipyretic. However, there are doubts concerning the mechanisms dipyrone uses to reduce the temperature, as COX (cyclooxygenase) inhibitors, stronger than dipyrone, haven’t had antipyretic effects so evident. There are some hypotheses that the mechanism of dipyrone can modulate other routes, including the route of endocannabinoids. Thus, the aim of this study was to evaluate the possible role of the endocannabinoid system in the effects induced by dipyrone based on the Tetrad effects of cannabinoids, these being: a state antinoceptivo, inducing cataleptic, hypolocomotion and hypothermia, from the hot plate test and catalepsy, and evaluation of locomotion and body temperature of the animals. For the experiments we used male Swiss mice (40-50g). In the first stage, the animals were divided into the following groups: Saline (10 mL/kg, i.p.) - control group, Dipyrone (10 mg/kg, 50 mg/kg, 200 mg/kg or 500 mg/kg, i.p.). In the second group: Vehicle, WIN 55.12-2 (0.1 mg/kg, 0.3 mg/kg or 3.0 mg/kg, i.p.) and in the third step, the groups were Vehicle (Saline, Tween and DMSO, 8:1:1, i.p.) + Saline, Vehicle + Dipyrone (200 or 500 mg/kg, ip), AM251 (3 or 10 mg/kg, i.p.) + Saline and AM251 + Dipyrone. In order to evaluate the mechanism of hypothermia was used TRPV1 receptor antagonist, capsazepine (10 mg/kg, i.p.) for temperature evaluation. For statistical analyzes were performed analysis of variance (ANOVA one-way or two-way), followed by post-test Newman-Keuls, or by multiple comparison test of Tukey- Kramer. Values p<0.05 were considered significant. According to the tests, dipyrone caused a decrease of locomotor activity, accompanied by an increase of latency to thermal analgesic response, and induced a cataleptic and hypothermic state, similar to the effects caused by the cannabinoid agonist, WIN 55,212-2. And cannabinoid antagonist AM251 reversed the effects caused by dipyrone, in relation to locomotor activity, the cataleptic response and thermal analgesic. As for hypothermia, the antagonists of CB1 and TRPV1 that reduction in body temperature caused by dipyrone accentuated. The results indicate an involvement of the endocannabinoid system, especially the CB1 receptor in analgesia, induction to the cataleptic effect and hypolocomotion. Already, as for hypothermia, there’s no involvement of CB1 and TRPV1, but there is a possibility of the involvement of other cannabinoid receptor, which requires specific experiments to better understand this system. The mechanism of dipyrone is complex and involves several other modulatory systems, including the endocannabinoid pathway. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A dor pode ser classificada em inflamatória, neuropática e fásica, que ocorre por um dano do sistema nervoso e estimulação de nociceptores, como os Receptores de Potencial Transiente (TRP’s). Nesta família destacamos o TRPV1, TRPM8 e TRPA1, estimulados por substâncias antinociceptivas, como a capsaicina, mentol e metil salicilato, respectivamente. O trabalho objetivou investigar o papel dos TRP’s na antinocicepção, pela administração dos agonistas no acuponto Zusanli (ST36), no modelo de dor inflamatória, neuropática e fásica. Foram utilizados 180 ratos Wistars, machos, 6 semanas, entre 250 a 300g. Eles foram submetidos ao modelo de dor inflamatória induzida por Adjuvante Completo de Freund (CFA), dor fásica pelo Teste de Retirada da Cauda, Tail Flick (TF) e dor neuropática por Chronic Constriction Injury (CCI). Foi realizada uma injeção subcutânea no acuponto Zusanli de 20μL de salina e agonistas dos TRP’s, capsaicina, mentol e metil salicilato, nas doses de 0,03 μg/20μL; 0,3 μg/20μL; 3,0 μg/20μL. Os limiares mecânicos foram avaliados através do aparelho Von Frey digital, antes da administração do CFA e da cirurgia de constrição do nervo ciático, após 4 horas e 72 horas para avaliação hiperalgésica, e 0, 1, 3, 6 e 24 horas após a administração dos agonistas. E os limiares de TF foram avaliados antes e após 0, 1, 3, 6 e 24 horas. A hiperalgesia inflamatória foi revertida significativamente em todos os agonistas. A administração de capsaicina induziu redução do efeito hiperalgésico, em todos os tempos avaliados, nas 3 doses, exceto no tempo após 24 horas de tratamento, onde somente a maior dose induziu redução nos limiares mecânicos. E o tratamento com mentol e metil salicilato, no acuponto, induziu efeito antinociceptivo, em todos os tempos, nas diferentes doses. No grupo de dor fásica, a administração dos agonistas, capsaicina e mentol, apresentou aumento dos limiares de latência, em todos os tempos avaliados nas 3 doses, exceto no T0. E a administração de metil salicilato obteve efeito analgésico, em todas as doses, nos tempos T3, T6 e T24, e somente a maior dose apresentou efeito no T0 e a dose intermediária no T1. No modelo de dor neuropática, a capsaicina, nas doses maior e intermediária, apresentou efeito analgésico em quase todos os tempos. O mentol obteve este efeito em todas as doses e quase em todos os tempos, assim como o metil salicilato. De acordo com os resultados, podemos sugerir que os receptores TRPV1, TRPM8 e TRPA1 estão envolvidos no efeito anti-hiperalgésico, pela administração de agonistas no acuponto Zusanli, no controle da dor inflamatória, fásica e neuropática. / Pain may be classified as inflammatory, neuropathic and phasic, which occurs by a damage in the nervous system and nociceptors stimulation, such as the Transient Receptor Potential (TRP’s). In TRP’s group, we highlight the TRPV1, TRPM8, and TRPA1, stimulated by substances anti-nociceptive, such as capsaicin, menthol, and methyl salicylate respectively. This work sought to investigate the role of the TRP’s on the antinociception, trough administration of agonists in the acupoint Zusanli (ST36), in inflammatory, neuropathic and phasic pain models. The project has composed by 180 male Wistars rats, 6 weeks old, between 250g to 300g. The inflammatory pain model induced by Complete Freund’s Adjuvant (CFA), phasic pain model by Tail Flick (TF) and neuropathic pain model by Chronic Constriction Injury (CCI). A subcutaneous injection in the acupoint Zusanli 20μL of saline and the TRP 's agonists, capsaicin , menthol and methyl salicylate was applied in doses of 0,03 μg/20μL; 0,3 μg/20μL; 3,0 μg/20μL. Mechanical thresholds assessed using a digital Von Frey device before the administration of CFA and after 0, 1, 3, 6 and 24 hours of administration of the agonists. The TF thresholds assessed before and after 0, 1, 3, 6 and 24 hours. Inflammatory hyperalgesia revealed significantly reversed in all agonists. The administration of capsaicin induced the reduction of hyperalgesic effects at all periods, in 3 doses, except for the time after 24 hours of treatment, where only the higher dose induced a reduction in a mechanical threshold. The treatment with menthol and methyl salicylate induced an antinociceptive effect in the acupoint for all the times, in different doses. In phasic pain group, the administration of agonists, capsaicin, and menthol increased the latency thresholds, at all times evaluated in three doses except the T0. In addition, the administration of methyl salicylate obtained an analgesic effect on all doses and on the times T3, T6 and T24, and only the highest dose had an effect on T0 and the intermediate dose on T1. In neuropathic model pain, capsaicin in the highest and intermediate dose showed analgesic effect in all the times. The mentol and the methyl salicylate had this effect in all the dose and the most times. According to the results obtained so far, we suggest that TRPV1, TRPM8, and TRPA1 receptors are involved in anti-hyperalgesic effect by administering agonists in the Zusanli acupoint in the control of inflammatory and phasic pain. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

A administração do LPS de Escheria coli gera resposta imunológica e endócrina, como a produção de citocinas pró-inflamatórias, produção de prostaglandinas. Além disso, a endotoxemia promove mudanças neuro-endócrinas, como alterações no metabolismo da noradrenalina e serotonina no cérebro além da ativação do eixo HPA provocando comportamento doentio evidenciado por quadros de redução da capacidade exploratória e locomotora, anorexia, pirexia, anedonia, sonolência, redução do comportamento social e sexual, comportamento semelhante à ansiedade e depressão. Já foi demonstrado na literatura que endotoxemia é capaz de provocar hipotermia em animais prenhes além de apresentar significativa taxa de aborto e falhas gestacionais. Além disso, foi evidenciado também que fêmeas gestantes também apresentam o comportamento doentio diante da administração do LPS com mudanças nos componentes da interface materno-fetal importantes para o estabelecimento da homeostase uterina. Como a ativação do eixo HPA é uma das respostas mais proeminentes da endotoxemia, o presente estudo investigou a interferência de glicocorticoides no comportamento doentio em fêmeas prenhes. Para tanto, foi utilizado glicocorticoide exógeno, a dexametasona, bem como, inibidores da síntese de glicocorticoide, metirapona e mifepristone. A metirapona é um inibidor da enzima 11-β-hidroxilase, a qual inibe o passo final de precursores da corticosterona. A mifepristone é um antagonista de receptores de glicocorticoide e ligante de receptores de progesterona. Fêmeas de camundongos SWISS no 10º dia de gestação foram pré-tratadas com as referidas drogas, 30 minutos antes do tratamento com LPS. Após duas horas, a temperatura retal foi aferida e foram realizados testes comportamentais a fim de investigar comportamentos semelhante à ansiedade, depressão, além de observar a capacidade exploratória e retenção de informações a curto prazo. A viabilidade gestacional também foi averiguada observando, para isso, o número de filhotes nascidos por ninhada. Foi observado que o tratamento com LPS provocou hipotermia nos animais prenhes sendo que o pré-tratamento com dexametasona foi o único capaz de evitar tal efeito através da redução da síntese de TNF-α. Tais achados fornecem indícios para o uso da dexametasona como antipirético em quadros de endotoxemia durante a gestação. Além disso, foi observado que o tratamento com LPS, independente do pré-tratamento utilizado, provocou um comportamento doentio evidenciado pela redução da capacidade exploratória e locomotora nos animais prenhes submetidos aos testes comportamentais. Os presentes achados comportamentais vão de encontro com a vasta literatura, indicando, adicionalmente, que o comportamento doentio é dependente de citocina pró-inflamatória e que o pré-tratamento com glicocorticoide ou inibidores de sua síntese não são capazes de prevenir o comportamento doentio. O pré-tratamento com metirapona foi o único capaz de evitar o aborto causado pelo LPS através da elevação dos níveis plasmáticos de progesterona, a qual, por sua vez, protege o feto contra ataques imunológicos maternos durante a gestação e assegura o parto. Desse modo, a metirapona pode ser usada a fim de prevenir abortos imunológicos provocados pela administração do LPS. Tais achados são significativos a fim de evitar perdas gestacionais provocadas pela endotoxemia evidenciando a metirapona como importante agente farmacológico. O pré-tratamento com mifepristone, com ou sem exposição ao LPS, provocou perda total da gestação. Tais achados vão de encontro com a literatura científica e caracterizam a mifepristone como potente agente abortivo capaz de interromper a gestação mesmo quando administrado após o período de implantação embrionária. / Administration of LPS from Escherichia coli generates endocrine and immune response, such as the production of proinflammatory cytokines and prostaglandin production. Furthermore, endotoxemia promotes neuroendocrine changes such as alteration on the metabolism of norepinephrine and serotonin in the brain beyond the activation of HPA axis resulting in sickness behavior evidenced by the reduction of exploratory locomotor ability and anorexia, pyrexia, anhedonia, drowsiness, reduction behavior social and sexual behavior similar to anxiety and depression. Has been shown in the literature that endotoxemia is able to cause hypothermia in pregnant animals as well as presenting significant abortion and pregnancy failure. In addition, it has been shown that pregnant animals also exhibit the sickness behavior in response to LPS administration with important changes in the components of the maternal-fetal interface for establishing uterine homeostasis. Since the activation of the HPA axis is one of the most prominent responses of endotoxemia, the present study investigated the interference of glucocorticoids in sickness behavior in pregnant females. For this purpose, we used exogenous glucocorticoid, dexamethasone, as well as glucocorticoid synthesis inhibitors, metyrapone and mifepristone. The metyrapone is an inhibitor of the enzyme 11-β-hydroxylase, which inhibits the last step of precursors of corticosterone. The mifepristone is an antagonist of glucocorticoid receptors, and progesterone receptor binding. SWISS female mice at 10th day of pregnancy were pre-treated with said drug, 30 minutes before the LPS treatment. Two hours after, the rectal temperature was measured and behavioral tests were performed to investigate the behavior like anxiety, depression, addition to observing the exploratory ability and short-term information retention. Gestational viability was also investigated observing, for this, the number of pups born per litter. It was observed that the treatment with LPS caused hypothermia in pregnant animals and that pretreatment with dexamethasone was the only one able to avoid this effect by reducing TNF-α synthesis. These findings provide evidence for use of dexamethasone as an antipyretic in endotoxemia frames during pregnancy. Furthermore, was noted that the LPS treatment, regardless of pretreatment employed provoked sickness behavior evidenced by the reduction in the exploratory and locomotor ability in the pregnant animals subjected to behavioral testing. Behavioral study findings corroborate with the vast literature, indicating additionally that sickness behavior is dependent on proinflammatory cytokine, and that pretreatment with glucocorticoids, or inhibitors of its synthesis are not able of preventing sickness behavior. Pretreatment with metyrapone was the only one capable of preventing abortion caused by LPS through elevated plasma levels of progesterone, which in turn protects the fetus from maternal immune attack during pregnancy and assures delivery. Thereby metyrapone can be used to prevent immunological abortions caused by LPS administration. These findings are significant to prevent pregnancy loss caused by endotoxemia indicating metyrapone an important pharmacological agent. Pretreatment with mifepristone, with or without exposure to LPS provoked a total loss of the pregnancy. These findings run counter to scientific literature and characterize the mifepristone as powerful abortive agent able to interrupt pregnancy even when administered after a period of embryo implantation. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

Tem sido demonstrado que os glicocorticóides podem modular a secreção de prolactina e ocitocina, mas a influência dos glicocorticóides sobre as respostas neuroendócrinas e comportamentais em ratas lactantes era pouco conhecida. Portanto, nós avaliamos a influência da dexametasona (glicocorticóide exógeno) e da ativação do eixo hipotálamo-hipófise-adrenal pela administração de LPS nas respostas neuroendócrinas e comportamentais durante a lactação. Além disso, nós verificamos se os efeitos produzidos pelos glicocorticóides são mediados pelos endocanabinóides. Para isto, nós utilizamos um antagonista de receptor CB1 (AM251) após a administração da dexametasona. Para confirmar a possível participação do sistema canabinóide nas respostas neuroendócrinas e comportamentais durante a lactação, nós utilizamos um agonista de receptor CB1 (WIN 55,212-22). O tratamento com a dexametasona atenuou as respostas neuroendócrinas e comportamentais em ratas lactantes, pois reduziu a secreção de ocitocina e prolactina, diminuiu o comportamento materno, assim como o agressivo, reduziu o ganho de peso da ninhada, reverteu a ansiólise materna, diminuiu a expressão de c-Fos na BST, MnPOv e MnPOd e, reduziu o número de duplas marcações para c-Fos/ocitocina em neurônios do PVN e SON. O tratamento com AM251 reverteu a maioria desses efeitos, sugerindo assim o envolvimento dos endocanabinóides nessas alterações. A redução nas respostas endócrinas e comportamentais durante a lactação produzidas pela administração do LPS é mediada por glicocorticóides, pois a metirapona (inibidor de síntese de glicocorticóides) reverteu parte dos efeitos produzidos pelo LPS. O tratamento com WIN 55,212-2 reduziu as respostas neuroendócrinas e comportamentais em ratas lactantes, confirmando assim nossa hipótese de que os efeitos dos glicocorticóides são mediados pelos endocanabinóides. Em conjunto, nossos resultados sugerem que o tratamento com a dexametasona em ratas lactantes diminuiu a secreção de prolactina e ocitocina, seguida pela redução das respostas comportamentais e estes efeitos são mediados pelos endocanabinóides. / It has been shown that glucocorticoids can modulate prolactin and oxytocin secretion, but the influence of glucocorticoids on the neuroendocrine and behavioral responses during lactation was not well known. Therefore, we evaluated the influence of dexamethasone (exogenous glucocorticoid) and hypothalamic-pituitary-adrenal axis activation by administration of LPS on the neuroendocrine and behavioral responses during lactation. In addition, we verified if the effects produced by glucocorticoids are mediated by endocannabinoids. For this purpose, we used a CB1 receptor antagonist (AM251) following the administration of dexamethasone. To confirm the possible involvement of the cannabinoid system on the neuroendocrine and behavioral responses during lactation, we used a CB1 receptor agonist (WIN 55,212-2). The dexamethasone treatment disrupted neuroendocrine and behavioral responses during lactation, because reduced oxytocin and prolactin, decreased maternal behavior as well as aggressive behavior, reduced litter weight gain, reverted the maternal anxiolysis and decreased the number of c-Fos positive neurons in the BST, MnPOv and MnPOd, and reduced the number of c-Fos/OT double labeled neurons in PVN and SON. The AM251 treatment reverted most of the effects produced by dexamethasone, suggesting the involvement of endocannabinoids in these effects. The changes in the endocrine and behavioral responses during lactation produced by administration of LPS are mediated by glucocorticoids, since metyrapone (glucocorticoids synthesis inhibitor) reverted some effects produced by LPS. The treatment with WIN 55,212-2 reduced the neuroendocrine and behavioral responses in lactating female rats, confirming our hypothesis that the effects of glucocorticoids are mediated by endocannabinoids. Taken together, our results suggest that dexamethasone treatment in lactating rats disrupts prolactin and oxytocin secretion, and this is followed by an attenuation of behavior responses and these effects are mediated by endocannabinoids. / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

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O monóxido de carbono (CO) é uma das moléculas mais antigas encontradas na atmosfera, sendo popularmente associado à asfixia por sua alta taxa de ligação à hemoglobina. Contudo, estudos também demonstram seu envolvimento em diversas funções fisiológicas através da produção endógena pela enzima heme-oxigenase (HO), que catalisa o metabolismo do grupo heme em quantidades equimolares de CO, biliverdina e ferro. Destes, o CO é um de seus produtos mais ativos, podendo atuar como neurotransmissor e neuromodulador do sistema nervoso, molécula de sinalização cardiovascular com propriedades vasoativas e com potencial participação em processos nociceptivos. Inúmeras pesquisas associam os mecanismos de ação da via da HO/CO com a ativação da enzima guanilato ciclase, GMPc ou modulação direta de canais de potássio, sendo este último, amplamente conhecido pelo seu envolvimento em respostas antinociceptivas, em especial sua classe sensível ao ATP (K+ATP). Assim, nosso objetivo neste estudo, foi verificar o possível envolvimento de K+ATP, na antinocicepção desencadeada pela via da HO/CO após indução de hiperalgesia pela administração de carragenina e exposição aos testes nociceptivos de Von Frey eletrônico e Randall Selitto. Os resultados obtidos em nossos experimentos demonstram que a aplicação intraplantar de hemina (substrato da HO) ocasionou ação antinociceptiva, sendo excluída através do tratamento contralateral a ocorrência de mecanismos sistêmicos, frente à manipulação periférica da via. Por sua vez, a administração do inibidor da via da HO (tin protoporphyrin IX dichloride) potencializou a hiperalgesia ocasionada pela carragenina. Efeitos similares não foram observados frente à administração dos demais subprodutos, biliverdina e ferro (sulfato ferroso), sugerindo o CO como sendo o mais ativo subproduto da via na modulação de processos nociceptivos. Já a administração conjunta de glibenclamide (bloqueador de K+ATP) e hemina, acarretou o bloqueio da ação antinociceptiva ocasionada pela hemina, sendo que a administração conjunta da menor dose efetiva de diazoxide (ativador de canais de potássio) e hemina evidenciou uma ação sinérgica entre as drogas potencializando a resposta antinociceptiva do substrato da via. Também observamos que o efeito antinociceptivo da hemina não foi alterado pela administração de naloxone (antagonista opióide), sugerindo assim, a exclusão da participação do sistema opióide na resposta antinociceptiva da via da HO/CO. Neste contexto, os resultados apresentados em nosso estudo sugerem fortemente que a ação antinociceptiva periférica da via HO/CO, pode estar relacionada com a ativação de canais de potássio sensíveis ao ATP / Carbon monoxide (CO) is one of the oldest molecules found in the atmosphere, being popularly associated to asphyxia by its high binding to hemoglobin. However, studies have also demonstrated its involvement in various physiological functions through the endogenous production by the enzyme heme-oxygenase (HO), which catalyzes the metabolism of heme in equimolar amounts of CO, biliverdin and iron. Of these, the CO is one of its most active and may act as a neurotransmitter and neuromodulator nervous system, cardiovascular signaling molecule with vasoactive properties and potential involvement in nociceptive processes. Numerous research associate of the mechanisms of action of the HO/CO pathway by activation of the enzyme guanylate cyclase, cGMP or direct modulation of potassium channels, the latter being widely described as involved in various nociceptive mechanisms in particular its class ATP-sensitive (K+ATP). Thus, our goal in this study was to investigate the possible involvement of K+ATP in an antinociceptive via triggered by the HO/CO after hyperalgesia induced by administration of carrageen and exposure to electronic Von Frey and Randall Selitto. The results obtained in our experiments suggest that i.pl. treatment with the substrate of HO (hemin) caused a dose-dependent antinociception, and the possible systemic action was excluded by treating contralateral paw via. In turn, the administration HO pathway inhibitor (Tin protoporphyrin IX dichloride) increased the hyperalgesia caused by carrageen. Similar effects were not observed by the administration of the other two products, biliverdin, iron, showing the CO as the more active pathway in the modulation of nociceptive processes. Since the joint administration of glibenclamide (blocker of K+ATP) and hemin, caused the blockage of antinociceptive action caused by hemin, and the joint administration of the lowest dose-response diazoxide (potassium channel activator) and hemin caused a synergistic action between drugs, and potentiate the antinociceptive response to the pathway substrate. We also observed that the antinociceptive effect of hemin was not altered by the administration of naloxone (opioid antagonist), suggesting the exclusion of the opioid system in the antinociceptive response of the HO/CO. Thus, the results presented in this study strongly suggest that the peripheral antinociceptive action via the HO/CO may be related to the activation of potassium channels sensitive to ATP / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais - FAPEMIG

Choque séptico, a forma mais grave de sepse associada com hipotensão refratária e disfunção orgânica, é uma doença letal. A incidência aumentada é provavelmente devido ao envelhecimento progressivo da população, melhorias no suporte de terapia intensiva e o progresso nas terapias imunossupressoras, ocasionando no aumento da expectativa de vida, aumentando assim a ocorrência de episódios de sepse durante a vida. A lista de terapias ineficazes na sepse é longa e desanimadora. No estudo foram avaliados os efeitos da infusão intravenosa de salina e hidroxietilamido em soluções isotônicas e hipertônicas sobre a pressão arterial média e eletrólitos, os níveis de vasopressina, parâmetros sangue e reatividade vascular durante o choque séptico experimental induzido por ligadura e punção cecal. Ratos Wistar (250-300 g) com a veia jugular e artéria femoral canulados foram anestesiados com tribromoetanol (250 mg/kg) e submetidos à perfuração e ligadura cecal (CLP) ou cirurgia fictícia (CF). A pressão arterial média (PAM) foi monitorada durante 24 horas e os parâmetros sangüíneos (Na+, osmolaridade, hematócrito, pH, pO2, pCO2, saturação de O2, HCO3-) foram avaliados nos tempo 0, 6 e 24 horas após CLP ou CF. A expansão de volume com solução isotônica de hidroxietilamido (Iso-HES) (HES 6% em NaCl 0,9%, 4 ml/kg, 8 ml/kg, 16ml/kg), solução hipertônica de hidroxietilamido (Hyper-HES, HES 6% em NaCl 7,5 %, 4 ml/kg) ou salina hipertônica (SH, NaCl a 7,5%, 4 ml/kg) foi realizada seis horas após a CLP. PAM foi medida durante 30 minutos, os parâmetros sangüíneos foram avaliados aos 30 min, e vasopressina plasmática foi avaliada 5 minutos após expansão de volume. Na vigésima quarta hora os animais foram sacrificados para retirada da aorta para analise da reatividade vascular. CLP diminui a PAM que persistiu durante 24 horas, além da redução da reatividade vascular. A infusão endovenosa de Iso-HES provocou redução do hematócrito, mas não mudoua PAM e os demais parâmetros sanguíneos. No entanto, ambas as infusões do Hyper-HES e HS aumentaram PAM, a liberação de vasopressina e ocitocina, o sódio plasmático e osmolaridade plasmática. Não houve outras alterações nos parâmetros sanguíneos e na reatividade vascular após a administração de soluções hipertônicas. A expansão de volume com coluções hipertônicas (Hyper-HES e HS), mas não com soluções isotônicas (Iso-HES), produziu um aumento da PAM durante o choque séptico induzido por ligadura e punção cecal, e esse efeito é mediado pela liberação de vasopresina. / Septic shock, the most severe form of sepsis associated with refractory hypotension and organ dysfunction, is a deadly disease. The augmented incidence is probably due to 77 progressive aging of the population, improvements in critical care support, and progress in immunosupressive therapies, including chemotherapy, so that individuals with immunosupression and malignancies now have increased life expectancy, therefore increasing the occurrence of septic episodes during their life course. The list of therapies proven ineffective in sepsis is long and discouraging. In the present study we evaluated the effects of intravenous infusion of isotonic and hypertonic hydroxyethyl starch solutions on mean arterial pressure and on electrolytes, vasopressin levels and gases in the blood during experimental septic shock induced by cecal ligation and perforation. Male Wistar rats (250 – 300 g) with jugular vein and femoral artery catheters were anesthetized with tribromoethanol (250 mg/kg) and submitted to cecal ligation and perforation (CLP) or sham surgery (SS). Mean arterial pressure (MAP) was monitored for 24 hours and blood parameters (Na+, osmolality, hematocrit, pH, pO2, pCO2, O2 saturation, HCO3 -) were evaluated at 0, 6 and 24 hours after CLP or SS. Volume expansion with isotonic hydroxyethyl starch solution (Iso- HES) (HES 6% in NaCl 0.9%; 4 ml/kg, 8ml/kg, 16ml/kg), hypertonic hydroxyethyl starch solution (Hyper-HES, HES 6% in NaCl 7.5%; 4 ml/kg) or hypertonic saline (HS, 7.5% NaCl; 4 ml/kg) were performed 6 hours after CLP or SS. MAP was measured for 30 minutes, blood parameters were measured at 30 min, and plasma vasopressin was assessed 5 minutes after volume expansion. In the twenty-fourth hours the animals were sacrificed for removal of the aortic for analysis of vascular reactivity CLP decreased MAP and this decrease last for 24 hours,besides the reduction of vascular reactivity. Intravenous infusion of Iso-HES decreased hematocrit but did not change MAP or other blood parameters. However, both infusions of Hyper-HES and HS increased MAP, increased vasopressin and ocitocin release, increased plasma sodium and also increased plasma osmolality. There were no other changes in blood parameters and vascular reactivity after administration of hypertonic solutions. Volume expansion with hypertonic solutions (Hyper-HES and HS), but not with isotonic solution (Iso-HES), produced an increase in MAP during septic shock induced by cecal ligation and perforation, and this effect is mediated by vasopressin release. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

A sepse é caracterizada por ser um processo inflamatório sistêmico devido a uma infecção, levando a lesão pulmonar aguda, síndrome do desconforto respiratório agudo e a falência múltipla dos orgãos. São achados histopatológicos da sepse: edema intersticial e alveolar, acúmulo de neutrófilos e macrófagos, hemorragia, lesão endotelial e do epitélio alveolar, e colapso alveolar. Acredita-se que a prolactina, hormônio produzido nas células lactotróficas da hipófise interfira no processo inflamatório, ora estimulando-o, ora inibindo-o. Além da relação direta com a lactação, este hormônio tem sido considerado um importante modulador do sistema imune, estimulando a proliferação e a sobrevivência celular. No presente estudo, buscou-se determinar os aspectos morfofuncionais do pulmão comprometido pela sepse induzida pela ligação e perfuração do ceco (CLP) em ratos com hiperprolactinemia induzida por sulpiride, um antagonista da dopamina. O presente estudo mostrou que os ratos pré-tratados com salina e submetidos a CLP, desenvolveram o padrão morfológico da sepse como por exemplo, aumento nas células inflamatórias com predomínio dos polimorfonucleares (neutrófilos), edema intersticial e colapso alveolar. Além disso, o presente estudo mostrou que a sepse induzida por CLP produziu diminuição da pressão arterial média bem como queda em alguns parâmetros ventilatórios como por exemplo, volume corrente e volume pulmonar em ratos não anestesiados. Interessante observação foi que grupos de ratos pré-tratados com sulpiride e submetidos a CLP apresentaram um maior comprometimento nos achados morfológicos bem como uma potencialização na queda do volume corrente durante a análise ventilatória. O presente estudo sugere que a hiperprolactinemia deve ser atentamente observada, pela estreita relação com o agravamento do processo inflamatório provocado por uma infecção pré-existente, que resultaria no aumento do número de óbitos em pacientes sépticos. / Sepsis is characterized as a systemic inflammatory process due to an infection, leading to acute lung injury, acute respiratory distress syndrome and multiple organs failure. Histopathological findings of sepsis are: interstitial and alveolar edema, accumulation of neutrophils and macrophages, hemorrhage, endothelial and alveolar epithelial injury and alveolar collapse. It is believed that prolactin, a hormone produced by pituitary lactotroph cells, interferes on the inflammatory process, sometimes stimulating it and sometimes inhibiting it. In addition to the direct relationship on lactation, this hormone has been observed to play important role on the modulation of the immune system, stimulating the cell proliferation and cell survival. In the present study, we sought to determine the morphofunctional aspects of compromised lung during sepsis induced by cecal ligation and perforation (CLP) in rats with hyperprolactinemia induced by sulpiride, a dopamine antagonist. The present study showed that pretreated rats with saline and subjected to CLP developed the morphogical pattern of sepsis such as increase in inflammatory cells with predominance of polymorphonuclear cells, interstitial edema and alveolar collapse. In addition, this study showed that sepsis induced by CLP produced a decrease in mean arterial pressure and decrease in ventilatory parameters such as tidal and pulmonary volume in unanesthetized rats. An interesting observation was that pretreated rats with sulpiride and subjected to CLP had a greater impairment in the morphological findings as well as an increase in the fall of the tidal volume during the ventilation analysis. The present study suggests that the hyperprolactinemia should be closely observed by a close relationship with the worsening of the inflammatory process caused by a pre-existing infection, which would result in increasing the number of deaths in septic patients.

Já foi demonstrado que a aminoguanidina (AG), um conhecido inibidor de AGEs (Produtos Finais de Glicação Avançada), aumenta a atividade de NOX2 (Sistema NADPH oxidase fagocítico) em neutrófilos peritoneais de ratos diabéticos. Experimentos adicionais demonstraram que o mesmo efeito ocorre em neutrófilos de ratos não diabéticos. Visando elucidar o mecanismo e a importância deste aumento de NOX2 pela AG em neutrófilos, utilizou-se um modelo experimental de ratos diabéticos e não diabéticos e um modelo in vitro com neutrófilos humanos isolados de sangue periférico ou HUVEC, uma linhagem de células endoteliais. Para isso, ratos machos Wistar diabéticos e não diabéticos foram tratados ou não por gavagem com AG (100mg/kg/dia) por 50 dias. Os neutrófilos foram recrutados e isolados do peritônio após 4 horas da injeção de caseinato de sódio e foram usados para avaliar a produção de superóxido, ERO e as atividades fagocítica e candicida destas células. No modelo in vitro, neutrófilos isolados de sangue periférico ou HUVEC foram ou não incubados com AG ou Metformina (MET) por 18h em estufa de CO2. O tratamento in vivo com a AG, mostrou aumento na produção de superóxido em comparação com grupos tratados com água, em ambos os grupos, diabéticos e não diabéticos. O aumento de atividade e expressão de NOX2 (p47phox e p67 phox) pela AG aumentou as atividades fagocíticas e candicida de Candida albicans, entretanto este aumento foi menos pronunciado no grupo diabético. Adicionalmente, os resultados demonstram a eficácia do tratamento com a AG na prevenção de glicação de proteínas, reduzindo os níveis de HbA1C e AGEs, além de reduzir os níveis de ureia e manter os níveis de creatinina no soro dos animais. O tratamento com AG reduziu a pressão arterial e a produção de nitratos no soro dos animais, mas a atividade das enzimas antioxidantes foi mantida. Verificou-se que as HUVEC tratadas com AG ou MET no estado basal ou estimuladas com LPS, tiveram menor produção de ERO. Neutrófilos humanos incubados com AG aumentaram a produção de ERO e de superóxido, enquanto o tratamento com MET manteve a produção de ambos. Além disso, o tratamento com AG aumentou a fagocitose e a atividade candicida de neutrófilos humanos nos tempos avaliados. O tratamento de neutrófilos humanos com MET manteve a expressão das subunidades avaliadas e o tratamento com AG aumentou a expressão de gp91phox. A liberação de IL-8 foi diminuída nos neutrófilos humanos tratados com a MET, e a AG aumentou a liberação de IFN-y . Em HUVEC a liberação de IL-8 e INF-y foram mantidas com ambos os tratamentos. Pode-se sugerir que a AG aumentou a atividade e a expressão de NOX2 em neutrófilos humanos e de ratos e que isso contribuiu diretamente para o aumento da atividade microbicida dos neutrófilos. Além disso, nos neutrófilos humanos, o aumento da liberação de IFN-y pode ter contribuído para o aumento da expressão de gp91phox. Adicionalmente, a influência da AG em células em processo de diferenciação para um estado mais maduro pode ser diferente dos seus efeitos in vitro, em células já maduras. / It has been showed that aminoguanidine (AG), a known inhibitor of AGE (Advanced Glycation End Products) increases the activity of NOX2 (phagocyte system NADPH Oxidase) peritoneal neutrophils of diabetic rats. Additional experiments demonstrated that the same effect occurs in non-diabetic rat neutrophils. To elucidate the mechanism and significance of NOX2 increase in neutrophils by AG, it was used an experimental model of diabetic and non-diabetic rats and an in vitro model in which human neutrophils isolated from peripheral blood or HUVEC endothelial cell lineage. For this, Wistar rats diabetic and non-diabetic were treated or not with AG by gavage (100 mg / kg / day) for 50 days. Neutrophils were recruited and isolated from the peritoneum 4h after injection of sodium caseinate and were used to evaluate superoxide generation, ROS and phagocytic and candicida activity of these cells. In vitro model, neutrophils isolated from peripheral blood or HUVEC were incubated or not with AG or Metformin (MET) for 18h in CO2 incubator. In vivo treatment with AG showed an increase in superoxide production compared with groups treated with water, in both groups diabetics and non-diabetics. The increased activity and expression of NOX2 (p47phox and p67phox) by AG increased phagocytic and candicida activity of Candida albicans, however this increase was less pronounced in the diabetic group. Additionally, the results demonstrate the effectiveness of treatment with AG on preventing glycation of proteins, reducing HbA1c and AGEs, in addition to reducing levels of urea and maintain the creatinine levels in serum of animals. The treatment with AG reduced the blood pressure and the production of nitrates and antioxidant enzymes activity were maintained in animals. It was found that HUVEC treated with AG or MET at baseline, or stimulated with LPS had lower production of ROS. Human neutrophils incubated with AG increase ROS and superoxide while treatment with MET remained the production of both. In addition, treatment with AG increased phagocytosis and candicidal activity of human neutrophils at times evaluated. In addition, treatment with AG increased phagocytosis and candicida activity of human neutrophils at times evaluated. The MET treatment maintained the expression of subunits assessed, and treatment with AG caused increased expression of gp91. The release of IL-8 by human neutrophils was decreased by treatment with MET, and AG increased the release of IFN-y The release of IL-8 was reduced in human neutrophils treated with MET, and AG increased IFN-y . In HUVEC the release of IL-8 and IFN-y were maintained with both treatments. It can be suggested that the AG used to inhibit the formation of AGEs increased activity and NOX2 expression in human and rat neutrophils and that directly contributed to the increased microbicidal activity by neutrophils. In addition, the human neutrophils the increased of IFN-y may have contributed to the increased expression of gp91phox. In addition, the influence of AG in cells in differentiation process to more mature state may be different of in vitro effects on cells already mature.