Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-10T14:57:02Z No. of bitstreams: 2 ANDRÉ_DE_LIMA_AIRES_MED_TROP_2013.pdf: 3595336 bytes, checksum: 9680bd3e04ccae9cd957fa4b9ddb0628 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-10T14:57:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 ANDRÉ_DE_LIMA_AIRES_MED_TROP_2013.pdf: 3595336 bytes, checksum: 9680bd3e04ccae9cd957fa4b9ddb0628 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-02-08 / FACEPE - Fundação de Amparo à Pesquisa de Pernambuco / Uma a cada trinta pessoas é portadora de esquistossomose ao redor do mundo. Atualmente, o praziquantel (PZQ) é o único medicamento recomendado para o tratamento e controle da esquistossomose. Embora seguro e eficaz, é preocupante disponibilizar apenas uma droga para o tratamento de uma doença que afeta milhões de pessoas. Além disso, o PZQ apresenta baixa atividade contra esquistossômulos, vermes jovens e vermes fêmeas adultas e diversos estudos alertam para uma possível seleção de cepas Schistosoma-resistentes e/ou tolerantes a esse fármaco. Isso nos encoraja a contribuir com novos estudos para preservar o PZQ. Inicialmente desenvolvida como droga anti-tumoral, ß-lapachona (ß-lap), orto-naftoquinona lipofílica de ocorrência natural, análogo semi-sintético do lapachol, tem recebido muita atenção da comunidade científica devido a sua ampla atividade biológica. As naftoquinonas, incluindo β-Lap, têm se mostrado ativas contra o S. mansoni bloqueando a penetração cercariana quando aplicados topicamente e também atuando como cercaricida; inibindo a glicólise aeróbica de vermes adultos; alterando a motilidade e superfície do tegumento dos vermes e atuando como moluscicida contra adulto e massas de ovos de Biomphalaria glabrata. O presente estudo fornece, pela primeira vez, conclusões sobre as propriedades esquistossomicida in vitro e in vivo de ß-lap. Nos ensaios in vitro a mortalidade, motilidade e alterações no tegumento observadas por microscopia eletrônica de varredura foram utilizadas como parâmetros esquistossomicida. Em modelo murino avaliamos os efeitos esquistossomicida da ß-lap sobre esquistossômulo de pele, esquistossômulo pulmonar, vermes jovens e vermes adultos. In vitro a morte do parasito foi precedida por progressivo dano na superfície da membrana, caracterizado por descamação do tegumento, redução dos espículos, formação de bolhas, ruptura e aparecimento de erosão na superfície tegumentar. Além disso, intenso edema generalizado, áreas de rachaduras com superfície rugosa, sulcos e aparente fibrose, também foram visualizadas na porção anterior do verme. O número de parasitos mortos foi concentração e tempo dependentes. ß-Lap reduziu significativamente (p < 0,001) a carga parasitária total em 29,78%, 37,2%, 24,2% e 40,22%, quando administrado in vivo durante as fases de esquistossômulo de pele, esquistossômulo pulmonar, vermes jovens e vermes adultos, respectivamente. Redução significativa também foi alcançada na carga de vermes fêmeas para os mesmos esquemas \terapêuticos. Em todos os grupos, houve redução significativa no número de ovos e granulomas no tecido hepático. A intervenção, realizada durante a fase de vermes adultos, reduz o tamanho dos granulomas hepático e percentual de ovos imaturos, além de aumentar a porcentagem de ovos maduros e mortos. O emprego de novas formulações contendo ß-lap abrem perspectivas de novos estudos que visem aumentar sua atividade e elucidar seu mecanismo de ação, além de utilizá-la como protótipo para a síntese de novos derivados naftoquinônicos com potencial esquistossomicida.

Submitted by Milena Dias (milena.dias@ufpe.br) on 2015-03-11T18:54:51Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Rafael J. R. Padilha 2013 - Biblioteca-UFPE.pdf: 1472601 bytes, checksum: 92378dee73d227bb531c33d4c68f5d1a (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-11T18:54:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação Rafael J. R. Padilha 2013 - Biblioteca-UFPE.pdf: 1472601 bytes, checksum: 92378dee73d227bb531c33d4c68f5d1a (MD5) Previous issue date: 2013 / Uma alternativa para identificar componentes bioquímicos necessários ao estabelecimento e manutenção do parasito no hospedeiro pode ser obtida através da citoquímica. Foi realizado um estudo citoquímico ultraestrutural do verme adulto macho de S. mansoni com 25, 45 e 130 dias. Para localizar sítios de cálcio utilizamos a técnica de Hepler e para evidenciar grupamentos aniônicos empregamos a ferritina cationizada, além do tratamento enzimático com condroitinase, tripsina e neuraminidase. Para a identificação de lipídios insaturados foi utilizada, a técnica do Tampão Imidazol e para localizar proteínas básicas empregamos às técnicas do Ácido Fosfotúngstico (PTA) e da Prata Amoniacal. A localização de sítios de cálcio mostrou-se bastante uniforme, demarcando os espaços internos, principalmente, o tecido muscular do verme, independente da sua idade. As amostras tratadas com ferritina cationizada apresentaram uma forte marcação na membrana do tegumento e glicocálice a intensidade da marcação aumentou de acordo com a idade do verme. O tratamento das amostras com a neuraminidase não alterou o padrão de marcação, enquanto com a tripsina marcou moderadamente a superfície do trematóide. Já, o tratamento com a condroitinase resultou em marcação pontual na superfície do verme. Foi observada a presença de lipídios insaturados de formato globular em toda a região tegumentar e subtegumentar do verme, sendo maior a concentração de lipídios à medida que verme ficava mais velho. Através da técnica da prata amoniacal, identificamos forte marcação dos carboidratos ácidos nas regiões tegumentares e subtegumentares do verme, com marcação do glicocálice presente apenas nos vermes com 45 dias. Já com o PTA foi identificada a presença de proteínas básicas no núcleo e nucléolo de células subtegumentares para todos os vermes, além de corpos de inclusão e espículas do tegumento nos vermes com 45 e 130 dias. O esclarecimento da composição bioquímica da região tegumentar e subtegumentar do verme adulto S. mansoni fornece dados para um melhor entendimento das relações parasitohospedeiro.

Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-03-13T16:01:18Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃo Antônio Sérgio Alves de Almeida Júnior.pdf: 886764 bytes, checksum: 8a5411f5817b0d9e4652b1183674ced5 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T16:01:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃo Antônio Sérgio Alves de Almeida Júnior.pdf: 886764 bytes, checksum: 8a5411f5817b0d9e4652b1183674ced5 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-02-25 / FACEPE / A esquistossomose é reconhecida pela Organização Mundial de Saúde, como um grave problema de saúde pública, acometendo os países da África, América Latina, Caribe e Oriente Médio. No Brasil, é encontrada a espécie Schistosoma mansoni, com estimativas de 6 a 8 milhões de indivíduos infectados. O fármaco utilizado para a quimioterapia desta parasitose é o praziquantel (PZQ). Contudo, são relatados na literatura casos de possíveis cepas de S. mansoni resistentes a esse tratamento, havendo a necessidade de desenvolver novos medicamentos mais eficazes e menos tóxicos para o tratamento da esquistossomose mansônica. O núcleo imidazolidínico é um heterociclo pentagonal, farmacóforo importante presente em vários compostos biologicamente ativos, conhecido na literatura pelo seu amplo espectro de atividades biológicas, inclusive a atividade esquistossomicida. Neste trabalho foi realizada a síntese e comprovação estrutural de novos derivados imidazolidínicos das séries LPSF/FZ e LPSF/RH e a sua avaliação esquistossomicida in vitro frente a vermes adultos de S. mansoni. Assim foram sintetizados oito novos compostos finais, onde inicialmente sintetizou-se o 1º intermediário (LPSF/FZ-1) através de uma reação de N-alquilação. Em seguida, a síntese do 2º intermediário (LPSF/FZS-1) através de uma reação de tionação. A formação dos quatro compostos finais da série LPSF/FZ (5-benzilideno-3-benzil-imidazolidina-2,4-diona) se deu através de uma reação de condensação de Knoevenagel entre o 1º intermediário e os benzaldeídos substituídos em meio etanólico. Para a formação dos quatro compostos finais da série LPSF/RH (5-benzilideno-3-benzil-4-tioxo-imidazolidin- 2-ona), utilizou-se o 2º intermediário e os benzaldeídos através de uma reação de condensação de Knoevenagel. Sete derivados imidazolidínicos (LPSF/RH-38, LPSF/RH-39, LPSF/RH-40, LPSF/RH-41, LPSF/FZ-20, LPSF/FZ-21 e LPSF/FZ- 24) foram avaliados quanto ao efeito na viabilidade celular através da linhagem de células macrofágicas J774 e atividade in vitro frente a vermes adultos de S. mansoni. Os compostos sintetizados apresentaram bons rendimentos e foram caracterizados pelas técnicas espectroscópicas (IV, RMN e Massas). Os derivados imidazolidínicos demonstraram ser menos citotóxicos quando comparados ao PZQ. Dentre os compostos testados in vitro, o LPSF/RH-38 foi o que demonstrou um melhor resultado, apresentando 100% de mortalidade na concentração de 100 μg/mL no sexto dia de observação. A presença do átomo de enxofre na posição 4 da imidazolidina nos compostos da série LPSF/RH foi um fator importante para o aumento da atividade esquistossomicida, ao contrário dos compostos da série LPSF/FZ, que apresentam um átomo de oxigênio na mesma posição. Diante dos resultados obtidos, verificamos uma atividade esquistossomicida promissora dos derivados imidazolidínicos sendo ainda necessários os testes in vivo para uma melhor avaliação destes compostos.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:53:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5200_1.pdf: 2394068 bytes, checksum: 636e2547c0bd1abae3964acd903ee19e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / O insucesso surgido na terapia da esquistossomose com o praziquantel, vem acenando para uma necessidade de se buscar novas drogas para o tratamento desta doença bem como a de se monitorar sua atividade frente cepas de Schistosoma. O objetivo deste trabalho foi de avaliar a atividade esquistossomicida in vivo do Praziquantel (PZQ) e do derivado imidazolidínico 3-(4-clorobenzil)-5-(4-nitrobenzilideno)-imidazolidina-2,4-diona (FZ-4). Foram utilizados nove grupos de camundongos Swiss, com seis animais cada, que foram infectados experimentalmente com 80 cercárias de S. mansoni (cepa BH), e tratados por via oral durante cinco dias consecutivos com PZQ nas doses de 25, 50, 100 e 200 mg/Kg e com FZ-4 nas doses de 25, 50 e 100 mg/Kg, 50 dias após a infecção. Um grupo controle foi utilizado para o PZQ e outro para o FZ-4. O praziquantel mostrou-se eficaz em reduzir a carga parasitária dos animais infectados, com redução de 100 % nas doses de 100 e 200mg/Kg. A ED50 calculada foi de 14,75mg/Kg demonstrando que a cepa BH de S. mansoni utilizada foi sensível ao Praziquantel. O FZ-4 nas doses utilizadas não mostrou ser capaz de reduzir o número de vermes nem alterar o oograma nos animais infectados, todavia na dose de 25mg/Kg apresentou significativo aumento no número de ovos inviáveis com p < 0,05. Também foi capaz de reduzir o número de ovos por grama de fezes quando analisados no sexto e décimo quarto dias após o término do tratamento. A análise histopatológica indicou que o FZ-4 promoveu redução das áreas de fibrose e proteção da mucosa intestinal da reação granulomatosa, ativando nódulos linfáticos locais. na dose de 100mg/Kg. Em conclusão a atividade esquistossomicida do praziquantel foi evidenciada, mas não foi com o FZ-4, contudo este tenha reduzido o número de ovos do parasito nas fezes

Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2017-03-24T17:31:10Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO - HIANNA SILVA, 2016.pdf: 6380348 bytes, checksum: ae05ad6fcbbd20876322b50236e96c44 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-24T17:31:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) DISSERTAÇÃO - HIANNA SILVA, 2016.pdf: 6380348 bytes, checksum: ae05ad6fcbbd20876322b50236e96c44 (MD5) Previous issue date: 2016-01-25 / CNPQ / A esquistossomose, doença infecciosa parasitária, é causada por vermes do gênero Schistosoma, sendo o S. mansoni a espécie comumente encontrada na África, Caribe e América do Sul. Possuem como hospedeiros intermediários planorbídeos do gênero Biomphalaria, que liberam cercárias que podem infectar os mamíferos, causando a esquistossomose. A Organização Mundial de Saúde (OMS) estima que 261 milhões de pessoas estejam infectadas. Um dos métodos para o combate desta patologia é o controle populacional de caramujos utilizando moluscicidas. A niclosamida, moluscicida sintético, é recomendada pela OMS, porém sua utilização tem originado problemas devido à baixa seletividade, elevada toxicidade, alto custo e resistência dos caramujos. Por esta razão, estudos que visam o estabelecimento de moluscicidas de origem natural tem sido incentivada. Líquens, organismos simbióticos, produzem diversos metabólitos secundários fenólicos, dentre estes está o ácido divaricático (DIV), para-depsídeo com potencial biológico ainda pouco estudado. No presente estudo, o DIV, isolado de Ramalina aspera, foi testado sobre Biomphalaria glabrata, vetor da esquistossomose, em sua fase embrionária e adulta, assim como sobre cercárias de S. mansoni. Concomitantemente, foi avaliada sua toxicidade ambiental, utilizando o microcrustáceo Artemia salina. Para a obtenção do DIV, foi realizada a extração etérea de líquens da espécie R. aspera. Do extrato etéreo obtido, foi feita a purificação do DIV, sendo a pureza deste confirmada através de cromatografia de camada delgada, cromatografia líquida de alta eficiência, infravermelho e ressonância magnética nuclear de prótons. Para a verificação da atividade moluscicida do DIV foram utilizados caramujos adultos pigmentados da espécie B. glabrata e embriões em fase de blástula. Os animais adultos foram expostos às concentrações de 2.5, 3.5, 4.5 e 5.5 μg/mL por 24 horas e os embriões às concentrações de 7,5; 8; 8,5; 9,5; 10; 10,5; 11; 11,5; 12; 15 e 20 μg/mL nos tempos de 6, 12, 18 e 24 horas. A análise da atividade cercaricida foi realizada por meio da exposição de cercárias (cepa Belo Horizonte) ao DIV nas concentrações de 0.5, 1, 5, 10 e 100 μg/mL, sendo estas avaliadas nos tempos de 15, 30, 60 e 120 minutos. A toxicidade ambiental sobre A. salina foi verificada por exposição dos náuplios às concentrações de 25, 50, 100, 200 e 400 μg/mL por 24 horas. Ao final das análises, pôde-se observar que o DIV purificado mostrou-se eficiente na eliminação dos caramujos adultos e embriões de B. glabrata, apresentando 100% de letalidade em 5.5 μg/mL e 15 μg/mL em 24 horas, respectivamente. Já para a atividade cercaricida, a concentração necessária para 100% de eficácia foi 10 μg/mL. De acordo com os resultados de toxicidade ambiental, a utilização do DIV é segura até a concentração de 200 μg/mL, não mostrando valores de mortalidade significativos estatisticamente. Os resultados deste estudo se mostraram eficientes para o controle da esquistossomose, já que o DIV apresentou-se como uma ferramenta de elevado potencial biológico no combate ao vetor da parasitose, dentro das faixas preconizadas pela OMS, tanto em sua fase embrionária quanto em fase adulta. Também mostrando eficácia sobre a forma cercariana do parasito, sendo atóxica ambientalmente. / Schistosomiasis, parasitic infectious disease, is caused by worms of the genus Schistosoma, and the S. mansoni species is commonly found in Africa, Caribbean and South America. They have as intermediate host snails of the genus Biomphalaria, which release cercariae that can infect mammals causing schistosomiasis. The World Health Organization (WHO) estimates that 261 million people are infected. One method for combating this disease is the control of snails population using molluscicides. Niclosamide, synthetic molluscicide, is recommended by the WHO, but its use has caused problems because of the low selectivity, high toxicity, high cost and resistance of snails. For this reason, studies regarding the establishment of natural molluscicides has been encouraged. Lichens, symbiotic organisms produce various phenolic secondary metabolites, among them is the divaricatic acid (DIV), para-depside with biological potential yet little studied. In this study, the DIV, isolated from Ramalina aspera, has been tested on Biomphalaria glabrata, schistosomiasis vector in its embryonic and adult stage and on cercariae of S. mansoni. Concomitantly, its environmental toxicity was evaluated using the microcrustacean Artemia salina. From the ether extract of R. aspera performed, the DIV purification was done, and its purity confirmed by thin layer chromatography, high-performance liquid chromatography, infrared and nuclear magnetic resonance of protons. The molluscicidal activity of DIV was verified throught of pigmented adult snails of the species B. glabrata and embryos in the blastula stage. Adult snails were exposed to concentrations of 2.5, 3.5, 4.5 and 5.5 μg/mL for 24 hours and the embryos at concentrations of 7.5, 8, 8.5, 9.5, 10, 10.5, 11, 11.5, 12, 15 and 20 μg/mL at times of 6, 12, 18 and 24 hours. The analysis of cercaricide activity was performed by exposing the cercariae (Belo Horizonte strain) to the DIV at concentrations of 0.5, 1, 5, 10 and 100 μg/mL, which are evaluated at times of 15, 30, 60 and 120 minutes . The environmental toxicity in A. salina was verified by exposing the nauplii at concentrations of 25, 50, 100, 200 and 400 μg/mL for 24 hours. At the end of the analyzes, it was observed that the DIV purified was efficient in the elimination of adult snails and embryos of B. glabrata, with 100% mortality at 5.5 μg/mL and 15 μg/mL in 24 hours, respectively. As for the cercaricide activity, the concentration required for 100% efficacy was 10 μg/mL. According to the results of environmental toxicity, the use of the DIV is safe even the concentration of 200 μg/mL, showing no statistically significant mortality values. The results of this study proved effective in the control of schistosomiasis as the DIV proved to be a high potential biological tool in combating vector parasitosis, within the ranges recommended by the WHO, both in its embryonic stage and in adulthood. Also showing effectiveness on cercariae form of the parasite, non-toxic environmentally.

Orientador: Luiz Augusto Magalhães / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T19:20:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Seta_Lucianede_D.pdf: 7041259 bytes, checksum: 63818bb271fb5ebabc71fe09ec0a175a (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Estudamos a atração miraxonal frente à moluscos Biomphalaria glabrata e Biomphalaria tenagophila infectados ou não pelo Schistosoma mansoni, sua água de condicionamento (SCW), sua hemolinfa e seu extrato da glândula do albúmen. Em síntese, pudemos observar que moluscos B. tenagophila infectados atraíram mais miracídios de S. mansoni S1 que os moluscos não infectados. O mesmo ocorreu com sua SCW, sua hemolinfa e também seu extrato da glândula do albúmen. O mesmo não ocorreu em B. glabrata infectada por S. mansoni, que apresentou uma nítida repelência aos miracídios BH. Em B. glabrata observamos que sua SCW atraiu mais miracídios de S. mansoni BH que o próprio molusco. Moluscos B. glabrata sadios atraíram mais miracídios que os moluscos infectados. Ao compararmos a atração miraxonal frente ao extrato da glândula do albúmen de moluscos sadios e infectados com sua SCW pudemos verificar que: 1) Os componentes do extrato da glândula do albúmen seriam quimioatraentes para os miracídios de S. mansoni; 2) O extrato da glândula do albúmen atraiu mais miracídios que sua SCW, independente dessa SCW ser de moluscos sadios ou infectados por S. mansoni. Paralelamente analisamos o conteúdo de aminoácidos livres da hemolinfa, da SCW e do extrato da glândula do albúmen de B. glabrata e B. tenagophila infectadas ou não pelo S. mansoni. Na hemolinfa de B. glabrata sadia (HBgS) foram encontrados 28 aminoácidos livres, e na hemolinfa de moluscos infectados (HBgI) foram encontrados 32. Na hemolinfa de B. tenagophila sadia (HBtS) foram encontrados 28 aminoácidos livres e na hemolinfa dos moluscos infectados foram encontrados 33. Na hemolinfa de B. glabrata infectada houve um aumento geral da concentração de aminoácidos livres em relação ao encontrado na hemolinfa de moluscos sadios. Na hemolinfa de B. tenagophila infectada houve uma redução da concentração de aminoácidos livres em relação aos moluscos sadios. Na água de condicionamento (SCW) de B. glabrata sadias foram encontrados 19 aminoácidos livres, enquanto que na SCW desses moluscos, infectados por S. mansoni foram encontrados 17. Na SCW de B. tenagophila sadias foram encontrados 19 aminoácidos livres, enquanto que na SCW de B. tenagophila infectados foram encontrados 16. Não houve correspondência entre o conteúdo de aminoácidos livres da hemolinfa e da SCW. No extrato da glândula do albúmen de B. glabrata sadios foram encontrados 4 aminoácidos livres e nos moluscos infectados foram encontrados 5. No extrato da glândula do albúmen de B. tenagophila sadia foram encontrados 7 aminoácidos livres e nos moluscos infectados foram encontrados 6. Analisamos o conteúdo de aminoácidos livres como possíveis quimioatraentes para os miracídios de S. mansoni. Através da eletroforese em gel de poliacrilamida da hemolinfa verificamos haver uma redução de algumas frações proteicas na hemolinfa de B. tenagophila infectadas por S. mansoni, por volta de 45 Kda. A cromatografia de exclusão molecular da hemolinfa apresentou em ambas espécies de moluscos sadios ou infectados uma característica nítida da presença da hemoglobina e as demais frações de menor peso molecular. Tal resultado foi confirmado na eletroforese (SDS-P AGE) / Abstract: We studied the miraxonal atraction in the snails Biomphalaria glabrata and B. tenagophila, both infected with Schistosoma mansoni and non infected , the snail conditioned water (SCW), the hemolymph and the albwnen gland extract. We were able to observe that infected B. tenagophila atracted more SJ S. mansoni miracidia than the non-infected snails. The same fact was observed with the SCW, the hemolymph and the albwnen gland extract. The opposite results occur with infected B. glabrata snails, wich showed a clear repellence to the BH S. mansoni miracidia. In B. glabrata snails, we observed that their SCW atracted more BH S. mansoni miracidia than snails. Non infected B. glabrata atracted more miracidia than the infected ones. The comparison of the miraxonal atraction to the albumen gland extracts of non infected and infected snails with their SCW, showed that: 1) The components of the albumen gland extract were chemoattactive to S. mansoni miracidia; 2) The albwnen gland extracts attracted more miracidia than their SCW, regardless of the SCW being from infected or non infected snails. In addition, we analysed the presence of free amino acids in the hemolymph, SCW and albumen gland extracts of infected by S. mansoni or non infected B. glabrata and B. tenagophila. In the hemolymph of non infected B. glabrata (HBgS), we found 28 free amino acids, and in the hemolymph of snails infected with S. mansoni (HBgI) we found 32. In the hemolymph of infected B. glabrata, there was a general increase in concentration of free arnino acids when compared to the values observed in the hemolymph of non infected snails. In the snail conditioned water (SCW) of non infected B. glabrata (WBgS) we found 19 free amino acids, while in the SCW of snails infected with S. mansoni, on1y 17 amino acids were found. In the SCW of non infected B. tenagophila 19 free amino acids were found, whereas in the the SCW of infected B. tenagophila 16 free amino acids were found. No relationship between the content of free amino acids of the hemolymph and SCW was detected. In the albumen gland extract of non infected B. glabrata 4 free amino acids were found and 5 in the infected snails. In the albumen gland extract of non infected B. tenagophila we found 7 free amino acids and 6 in the infected snails. Free amino acids were tested as possible chemoattratents to the S.mansoni miracidia. Through polyacrilamide gell electrophoresis (SDS-P AGE) we verified a reduction of some protein fractions with molecular weight in the range of 45 Kda, in the hemolympph of B. tenagophila infected with S. mansoni. The molecular exc1usion cromatography of the hemolymph of both species of snails showed a c1ear presence of haemoglobin and other fractions with lower molecular weights. This result was confirmed by the electrophoresis (SDS-P AGE) / Doutorado / Parasitologia / Doutor em Ciências

Orientador: Eliana Maria Zanotti-Magalhães / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-14T15:49:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zuim_NadiaReginaBorim_D.pdf: 2561919 bytes, checksum: 9793a302a9d0497fca07cd4cc0bf9f23 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Na esquistossomose mansônica, a reação granulomatosa que ocorre em torno dos ovos de S. mansoni constitui a principal manifestação patogênica. A resposta granulomatosa mostrou ser específica para os ovos de cada uma das três principais espécies de Schistosoma que parasitam o homem ( S. mansoni, S. haematobium e S. japonicum). A reação granulomatosa que se desenvolve ao redor dos ovos de S. mansoni é estágio específico. Os objetivos deste trabalho foram estudar a evolução das reações granulomatosas em torno dos ovos de S. mansoni das linhagens BH e SJ, verificar se a reação granulomatosa em torno do ovo de S. mansoni é linhagem específica e avaliar a patogenia do S. mansoni da linhagem isolada do Jardim São Domingos (Campinas, SP), realizando um estudo comparativo com as linhagens BH e SJ. Para o estudo da evolução das reações granulomatosas, dois grupos de camundongos foram inoculados pela veia caudal com ovos maduros das linhagens BH e SJ e mortos após 1, 8, 15 e 34 dias. Para o estudo da especificidade da reação granulomatosa dois grupos de camundongos foram infectados por cercárias de S. mansoni BH e na 8ª semana de infecção um grupo foi inoculado pela veia caudal com ovos BH e outro grupo com ovos SJ. Os camundongos foram mortos após 1, 8, 15 e 34 dias após a inoculação dos ovos. Os parâmetros analisados foram: número de granulomas por área de tecido pulmonar e hepático e tamanho das reações granulomatosas. Para avaliar a patogenia do S. mansoni da linhagem isolada no Jardim São Domingos (Campinas, SP) e realizar um estudo comparativo com as linhagens BH e SJ foram constituídos três grupos de camundongos infectados e na oitava semana de infecção, os camundongos sobreviventes foram sacrificados para recuperação de vermes. Os parâmetros verificados foram: número de cercárias penetrantes; número de ovos eliminados nas fezes; número de esquistossomos no sistema porta-mesentérico; número de granulomas presentes no fígado, baço, intestino (cólon ascendente), pâncreas e pulmão, área dos granulomas observados no fígado e intestino e tamanho dos ovos de S. mansoni. Os resultados obtidos permitiram concluir que a reação granulomatosa em torno dos ovos de S. mansoni das linhagens BH e SJ, mostrou ser linhagem específica, indicando haver identidade parcial na resposta granulomatosa entre os ovos das duas linhagens. Os dados obtidos no estudo da linhagem SD de S. mansoni indicaram ser esta linhagem, a mais patogênica das linhagens já descritas, que tem B. tenagophila como hospedeira do trematódeo. Nos camundongos infectados com esta linhagem foi observada maior recuperação de vermes (48,62%) em relação ao número de cercárias penetrantes ( =64,50), maior número de granulomas na maioria das vísceras, maior reação granulomatosa em torno dos ovos do trematódeo e maior tamanho dos ovos (155,60 µm x 64,63 µm). De importância epidemiológica, foi a constatação de elevado número de ovos eliminados nas fezes, apresentando aspecto morfológico distinto, com um espículo lateral recurvado. / Abstract: In the schistosomiasis mansoni, the granulomatous reaction that happens around the S. mansoni eggs constitutes the principal pathogenic manifestation. The granulomatous answer showed to be specific for the eggs to each one of the three main of Schistosoma species that parasite the man (S. mansoni, S. haematobium and S. japonicum). The granulomatous reaction that grows around the S. mansoni eggs is specific stage. The objectives of this work were to study the evolution of the granulomatous reactions around the S. mansoni eggs of the BH and SJ strain, to check if the granulomatous reaction around the S. mansoni egg is specific strain and to evaluate the S. mansoni pathogenesis, of the isolated strain from Jardim São Domingos (Campinas, SP), carrying out a comparative study with the BH and SJ strains. To the study of the evolution of the granulomatous reactions, two groups of mice were inoculated by the vein tail with ripe eggs of the BH and SJ strain and sacrificed after 1, 8, 15 and 34 days. To the specific study of the granulomatous reaction, two groups of mice were infected by S. mansoni cercariae BH and in the 8th week of infection, a group was inoculated by the vein tail with BH eggs and other group with SJ eggs. The mice were killed after 1, 8, 15 and 34 days after the eggs inoculation. The analyzed parameters were: number of granulomas for area of lung tissue and hepatic and size of the granulomatous reactions. To evaluate the S. mansoni pathogenesis of the isolated strain in the Jardim São Domingos (Campinas, SP) and to accomplish a comparative study with the strains BH and SJ, three groups of infected mice were constituted and in the eighth week of infection, the surviving mice were sacrificed for recovery of the worms. The verified parameters were: number of penetrating cercariae; number of eliminated eggs in the feces; schistosome number in the system portal-mesenteric; number of granulomas present in the liver, spleen, intestine (ascending colon), pancreas and lung, area of the granulomas observed in the liver and intestine and the S. mansoni eggs size. The conclusions allowed that the granulomatous reaction around the S. mansoni eggs from BH and SJ strains, showed to be specific strain, indicating there to be partial identity in the answer granulomatous among the eggs of the two strains. The informations obtained in the study of the SD strain of S. mansoni indicated to be this strain, the most pathogenic of the strains described already, that has B. tenagophila as trematode host. In the mice infected with this strain was observed a greatest recuperation of worms (48,62%) in relation to the number of cercariae penetrating ( = 64,50), a greatest number of granulomas in most of the innards a greatest granulomatous reaction around the trematode eggs and a greatest size of the eggs (155,60 µm x 64,63 µm). About epidemic importance, it was the established high number of eliminated eggs in the feces, presenting morphological different aspect, with a side recurved spine. / Doutorado / Doutor em Parasitologia

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:28:06Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1037_1.pdf: 1031551 bytes, checksum: 819a7831fc55c8031a5df9ea6070cb60 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / As técnicas de Kato-Katz (método padrão-ouro) e ELISA são dois métodos utilizados para diagnóstico da esquistossomose mansônica em áreas endêmicas para doença. O primeiro possui baixo custo e alta especificidade, porém, possui baixa sensibilidade aumentando os resultados falsos negativos. O segundo possui boa sensibilidade e pela alta imunogenicidade das infecções por Schistosoma, pode ser utilizado em conjunto com o primeiro na detecção e controle de cura da enfermidade. Neste sentido, o objetivo deste trabalho foi avaliar os métodos de Kato-Katz a partir da contagem de ovos nas fezes e ELISA pela dosagem de anticorpos no soro de pacientes infectados pelo S. mansoni antes e após 6, 8 e 10 meses da terapêutica com praziquantel. Os dois testes diagnósticos foram realizados em 38 indivíduos saudáveis e 38 indivíduos infectados por S. mansoni de áreas endêmicas e 29 indivíduos saudáveis de áreas não endêmicas. Dois examinadores realizaram a contagem de ovos nas fezes de todos os indivíduos sendo obtido o numero de ovos por grama de fezes (Opg). Para o ELISA foi utilizado antígeno de verme adulto (AVA) de S. mansoni. Ambos os testes foram realizados antes do tratamento em todos os indivíduos e três vezes após o tratamento nos indivíduos infectados. O teste t-Student ou ANOVA para dados pareados foram usados para análise estatística dos grupos, e para testar as diferenças encontradas pelo ANOVA foi aplicado o Least Significant Difference (LSD). Todas as conclusões foram baseadas no nível de significância de 5%. Comparado aos grupos controle, pacientes infectados revelaram níveis elevados de Opg e anticorpos IgG AVA-ELISA (p<0,001). Observou-se nos três intervalos pós-tratamento, diminuição nos níveis de IgG e nos valores de Opg (p<0,001) com contagens negativas de ovos a partir do 8º mês. No 10º mês pós-tratamento, os níveis de IgG encontrados no ELISA não diferenciaram significativamente dos valores dos grupos controle, ou seja, retornaram a valores considerados basais. A obtenção de valores nulos de Opg a partir do 8º mês e o declínio dos valores do ELISA aos valores do grupo controle no 10º mês demonstrou a eficácia do tratamento em zonas endêmicas e a utilidade do uso conjunto das duas técnicas como controle de cura

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:29:36Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo3465_1.pdf: 1730703 bytes, checksum: 1be40ad900b4fb4035643453c3215a8e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O Schistosoma mansoni induz imunossupressão a antígenos homólogos e heterólogos no hospedeiro. Em áreas onde a esquistossomose é endêmica, é comum observar gestantes cronicamente infectadas. Atualmente, todas as espécies de Schistosoma infectam aproximadamente 40 milhões de mulheres em idade fértil no mundo, e já é sabido que a exposição in utero aos antígenos do parasita provoca alterações na resposta imune do recémnascido que podem afetar respostas subseqüentes a antígenos homólogos. Neste estudo, investigamos se a exposição à infecção materna por Schistosoma mansoni pode influenciar a resposta imune dos descendentes a um antígeno heterólogo, ovalbumina (OVA). Camundongos adultos nascidos e/ou amamentados em fêmeas infectadas pelo S. mansoni foram utilizados para formação de três grupos experimentais: filhotes nascidos (MI), amamentados (AI) ou nascidos e amamentados (MIAI) em mães infectadas, e um grupo controle: animais nascidos e amamentados em mães não-infectadas. Os animais foram imunizados s.c. com OVA em adjuvante e após 8 dias, foram desafiados no coxim plantar com OVA agregada para análise das reações de hipersensibilidade e dosagem plasmática de IgG1 e IgG2a OVA-específica. As células esplênicas foram cultivas para quantificação das citocinas IL-2, IFN- , IL-4 e IL-10 nos sobrenadantes. Em comparação ao grupo controle, as respostas humoral e celular anti-OVA foram potencializadas nos animais MIAI+OVA, enquanto que nos animais AI+OVA esta potencialização foi melhor observada na produção de anticorpos anti-OVA. Nestes dois grupos ocorreu um aumento na produção de IL-2. Por outro lado, os animais MI+OVA apresentaram uma alta produção de IL-10. Mesmo assim, a resposta imune anti-OVA neste grupo só foi parcialmente suprimida. Com base nestes resultados, concluímos que filhotes de mães esquistossomóticas podem sofrer na vida adulta alterações na sua resposta imunológica a um antígeno heterólogo, adquirindo um potencial supressivo através da gestação, mas que com a amamentação vai se tornando mais eficaz. Esses resultados destacam a importância da amamentação

Orientador: Eliana Maria Zanotti-Magalhães / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T15:01:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Zuim_NadiaReginaBorim_M.pdf: 7012909 bytes, checksum: 2b07fbfa03cd4b504eee1f253e91a52d (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Tendo por objetivo verificar as características morfológicas e biológicas do S. mansoni oriundo de moluscos suscetíveis e resistentes à infecção, utilizaram-se progênies de B. glabrata e B. tenagophila obtidas por autofecundação de exemplares suscetíveis e/ou resistentes ao S. mansoni das linhagens BH e SJ, respectivamente. Como hospedeiros definitivos foram utilizados camundongos Swiss, expostos às cercárias originadas em moluscos selecionados geneticamente. Foram estudados ovos, miracídios, cercárias e vermes adultos. Verificou-se também a capacidade de penetração das cercárias e o número de vermes recuperados 60 dias após a infecção. As características morfológicas de S. mansoni da linhagem BH, foram obtidas das gerações Parental, F1S (Suscetível), F1R(Resistente), F2S e F2R; da linhagem SJ: geração Parental,F1S , F1R e F50S. A seleção por autofecundação dos moluscos suscetíveis e resistentes ao trematódeo revelou que a suscetibilidade à infecção foi mais facilmente obtida do que a resistência. A resistência absoluta ao trematódeo nunca foi obtida nas duas espécies de moluscos expostas às respectivas linhagens simpátricas. As gerações F1R de B. glabrata e B. tenagophila apresentaram taxas de infecção semelhantes às gerações parentais (não selecionadas), enquanto as gerações F1S, de ambas as espécies apresentaram taxas de infecção significativamente maiores do que as gerações parentais. Taxa de infecção menor do que aquela apresentada pela geração parental, só foi obtida na geração F2R de B. glabrata. A maior resistência de B. glabrata (F2R) implicou em menor capacidade de penetração das cercárias e menor número de vermes recuperados, enquanto a maior suscetibilidade de B. tenagophila resultou somente na maior capacidade de penetração das cercárias. Em relação aos aspectos morfológicos verificou-se que o aumento da resistência a infecção em B. glabrata resultou em cercárias mais longas, ovos mais largos, miracídios menores, vermes machos com maior número de lobos testiculares e um menor número de remeas continham um ovo no útero. A maior suscetibilidade de B. glabrata correspondeu machos e remeas com menor comprimento e ovos mais estreitos. O aumento da suscetibilidade de B. tenagophila (F50S e F1S) resultou em maior capacidade de penetração das cercárias, em vermes machos e remeos mais longos e em ovos de S. mansoni maiores, tanto na largura como no comprimento e no tamanho do espículo. Em B. tenagophila selecionadas não se observaram alterações no comprimento dos miracídios, porém miracídios oriundos de moluscos selecionados (F50S e F1) foram mais estreitos.Vermes oriundos de B. tenagophila selecionadas para a resistência apresentaram menor número de lobos testiculares. Na comparação (geração Parental, F1S e F1R) entre as linhagens BH e SJ de S. mansoni, foi possível verificar uma superioridade da linhagem mineira em relação à linhagem paulista nos aspectos: largura dos ovos, comprimento dos miracídios, tamanho das cercárias, capacidade de penetração das cercárias, número de vermes recuperados, comprimento dos vermes e distância entre as ventosas e percentagem de remeas com um ovo no útero / Abstract: The objective of this work was to evaluate morphological and biological characteristics of the S. mansoni originated from mollusks susceptible and resistant to the infection. It were used progenies of B. glabrata and B. tenagophila obtained by self-fertilization of copies susceptible and/or resistant to the S. mansoni of the strains BH and SJ, respectively. As definitive hosts were used Swiss mice exposed to the cercariae originated in mollusks selected genetically. It was analyzed eggs, miracidia, cercariae and adult worms. It was also verified the cercariae capacity of penetration and the number of worms recovered 60 days after the infection. The morphologic characteristics of S. mansoni from the BH strain were obtained from the Parental generations F 1S (Susceptible), FIR (Resistent), F2S and F2R; from SJ strain: Parental, F1S, F1R and F50S. The selection of the susceptible and resistant mollusks to the trematode using self-fertilization revealed that the infection susceptibility was more easi1y obtained than the resistance. The absolute resistance to the trematode was never obtained in the two species of mollusks exposed to the respective simpatric strains. The generations F IR of B. glabrata and B. tenagophila presented 1ft infection rates similar to the parental generations (not selected), while the generations F IS on both species presented infection rates significant1y larger than the parental generations. Rate of smaller infection than that presented by the parental generation, it was only obtained in B. glabrata of the generation F2R The largest resistance of B. glabrata (F2R) implicated in smaller cercariae penetration capacity and smaller number of recovered worms, while the largest susceptibility of B. tenagophila resulted in the largest cercariae penetration capacity. In relation to the morphological aspects, it was verified that the increasing infection resistance in B. glabrata "resulted in longer cercariae, wider eggs, smaller miracidia, male worms with larger number of lobe testicular and a smaller number of females contained an egg in the uterus. The largest susceptibility of B. glabrata corresponded males and females with smaller length and more narrow eggs. The increase of the susceptibility of B. tenagophila (F50 S and F1S) resulted in larger cercariae penetration capacity, in longer male and female worms and in larger eggs of S. mansoni, as much in width as in the length and the size of the spine. In selected B. tenagophila it were not observed alterations in the miracidia length. However, miracidia deriving from selected mollusks (F50S and FI) were narrower. Worms originating from B. tenagophila selected for infection resistance presented smaller number of lobe testicular. Comparing (generations Parental, FI S and F IR) the strains BH and SJ of S. mansoni, showed a superiority of the Belo Horizonte strain in relation to the São Paulo strain in the following aspects: eggs width, miracidia length, cercariae size, cercariae penetration capacity, number of recovered worms, worms length and distance between the suckers and percentage of females with an egg in the uterus / Mestrado / Mestre em Parasitologia