Na implementação de empreendimento hidroelétrico no rio Pelotas, foi iniciado o programa de monitoramento de fauna do reservatório da UHE Barra Grande, o qual foi dividido em dois períodos: (1) Monitoramento na fase de pré-enchimento do reservatório, entre os anos de 2002 e 2005. (2) Monitoramento na fase de pós-enchimento realizado entre os anos de 2006 e 2010. Para tal, foram selecionadas quatro áreas de interesse, denominadas Área Controle Três (AC3), Área Destino Dois (AD2), Área Destino Seis (AD6) e Área Destino Oito (AD8), onde a exceção da AD6 que está localizada no estado do Rio Grande do Sul, município de Bom Jesus, todas as demais estão localizadas no estado de Santa Catarina nos Municípios de Campo Belo do Sul (AD2 e AC3) e Anita Garibaldi (AD8). Durante o processo de monitoramento os métodos de amostragem da herpetofauna foram padronizados nos diferentes momentos de pré e pós-enchimento aplicando-se especificamente, para a fauna de serpentes: censo de visualização, armadilhas de interceptação e queda e registros ocasionais. Durante os oito anos de estudos na UHE Barra Grande foram coletados 334 indivíduos de 31 espécies de serpentes pertencentes a cinco famílias, Dipsadidae (75%), Viperidae (19%), Colubridae (3%), Elapidae (2%) e Leptotyphlopidae (1%), correspondendo 114 indivíduos ao pré-enchimento e 221 ao pós-enchimento. As espécies mais abundantes na UHE Barra Grande foram Bothrops jararaca (15%), Oxyrhopus rhombifer (11%), Helicops infrataeniatus (10%) e Erythrolamprus poecilogyrus (10%), com diferenciação na abundância de cada uma das espécies entre os dois períodos, observando também uma maior riqueza no pós-enchimento. A ANOSIM indicou uma similaridade baixa (R= 0,32) entre a estrutura da taxocenose entre os dois períodos, confirmando pela análise de SIMPER que as espécies mencionadas anteriormente foram responsáveis por 54% da diferenciação entre o pré e pós-enchimento, de forma que espécies de floresta tem maior dominância no pré-enchimento e espécies associadas a áreas abertas ao pós-enchimento. Evidencia-se uma reprodução sazonal com maiores picos de atividade nos meses de maior temperatura (entre outubro e março), demonstrando diferenças na maturidade das espécies analisadas, de forma que se observou 52% de adultos no pré-enchimento e 39% no pós-enchimento, com maiores tamanhos dos folículos vitelogênicos e testículos para o pré-enchimento. Em razão da dieta, observou-se um baixo registro de indivíduos com conteúdo estomacal, sendo os roedores o item alimentar de maior ocorrência no pré-enchimento e os anfíbios no período do pós-enchimento. / When the Barra Grande Hydroelectric Powerplant was built, it was initiated the Fauna Monitoring Program that was divided into two periods: (1) Monitoring of the reservoir prior to the filling, between 2002 and 2005; and (2) Monitoring of the reservoir after to the filling, between 2006 and 2010. To carry out this monitoring, four areas of interest were selected and denominated Control Area Three (AC3), Destin Area Two (AD2), Destin Area Six (AD6), and Destin Area Eight (AD8). With the exception of AD6, which is located at the municipality of Bom Jesus, State of Rio Grande do Sul, all other areas are located at the State of Santa Catarina, at the municipalities of Campo Belo do Sul (AD2 and AC3) and Anita Garibaldi (AD8). During the monitoring process the sampling methods for herpetofauna were standardized on both periods (prior and after the reservoir filling). Specifically for snakes it was applied: transects, pitfall traps and occasional records. During the eight years of study at the Barra Grande Hydroelectric Powerplant 334 individuals belonging to five families, Dipsadidae (75%), Viperidae (19%), Colubridae (3%), Elapidae (2%) and Leptotyphlopidae (1%), were collected. From those, 114 individuals were collect prior and 221 were collected after the filling. The most abundant species were Bothrops jararaca (15%), Oxyrhopus rhombifer (11%), Helicops infrataeniatus (10%) and Erythrolamprus poecilogyrus (10%). There was a difference in the abundance of each species between the two study periods, and the largest richness was observed after the filling. The Analysis of Similarities (ANOSIM) indicated low similarity (R= 0.32) of the taxocenosis structure of both periods, and the Similarity Percentages (SIMPER) confirmed that the species mentioned above were responsible for 54% of the difference between both study periods. It is noted that forest species have greater dominance in the pre-filling and species associated with open areas to post-filling. A seasonal reproduction became evident, with highest activity peaks in the months of higher temperature (October-March), demonstrating differences in maturity of the species analyzed; on the pre-filling period 52% of individuals captured were adults, while on the post-filling, there were only 39% of adults, with larger vitellogenic follicles and testis recorded pre-filling. Regarding the diet, a low number of individuals with stomach content was recorded, and rodents were the most frequent food item in the pre-filling and amphibians in the post-filling period.

ALVES, Natacha Teresa Queiroz. Efeito do extrato das raízes de Bredemeyera floribunda Willd sobre a ação local do veneno de Bothrops jararacussu em camundongos. 2013. 96 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-06-03T13:09:17Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_ntqalves.pdf: 3590591 bytes, checksum: c3151ac025ccd0d99b85c8018cd11480 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-06-03T13:09:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_ntqalves.pdf: 3590591 bytes, checksum: c3151ac025ccd0d99b85c8018cd11480 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-03T13:09:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_ntqalves.pdf: 3590591 bytes, checksum: c3151ac025ccd0d99b85c8018cd11480 (MD5) Previous issue date: 2013 / Snakebites are an important public health burden. In Brazil, most of these accidents are caused by snakes of the Bothrops genus that can lead to development of local tissue damage, including edema and hemorrhaging. Traditional antivenom therapy acts in the neutralization of systemic effects, but it has limited effectiveness of neutralizing the local effects. The antivenom activity was evaluated of aqueous extract of Bredemeyera floribunda (Bfe) through inhibition of phospholipase, proteolytic, edematogenic, hemorrhagic, necrotizing and myotoxic actions promoted by the total Bothrops jararacussu venon (Bjuv) in mice. The acute toxicity and the viability cell of the Bfe in RAW 264.7 cells were determined too. The BfE showed to be nontoxic in mice and it showing LD50 greater than the test dose (2000 mg / kg). The Bfe increased cell viability in RAW 264.7 cells. The phospholipase and proteolytic activities induced vBju were inhibited in vitro by EBF in 1:1, 1:2 and 1:3 ratios. 1:2 (Bjuv /Bfe; w/w). The Bfe also inhibited significantly edema induced by Bjuv, with a reduction of the peak oedematogenic in the venom and carrageenan groups, mainly in the group pretreated i.p. The Bfe decreased considerably hemorrhagic, necrotizing and myotoxic actions by Bjuv. Compounds isolated from plants popularly used to treat snake poisoning show good alternative to complement the antivenom treatment. Constituents of the Bfe may act by binding to Bjuv components as phospholipase A2 and their homologues and matalloproteases too, partly blocking the action of these proteins, reducing edema and phospholipasic activities, but also hemorrhaging and proteolytic activities. So there is real antiophidic activity of the extract, making necessary to study it with isolated components of the Bfe and Bjuv to achieve better evidences of the effects and possible mechanisms. / Acidentes ofídicos representam considerável problema de saúde pública. No Brasil, a maior parte desses acidentes é causada por serpentes do gênero Bothrops, que podem levar ao desenvolvimento de dano tecidual local, incluindo edema e hemorragia. A soroterapia tradicional atua na neutralização de efeitos sistêmicos, mas tem eficácia limitada contra efeitos locais. Compostos isolados de plantas usadas popularmente para tratar envenenamentos ofídicos mostram-se uma boa alternativa a fim de se complementar o tratamento. Avaliou-se a atividade antiofídica do extrato aquoso de Bredemeyera floribunda (Ebf) através de testes de inibição de atividades fosfolipásica, proteolítica, edematogênica, hemorrágica, necrosante e miotóxica promovidas pelo veneno total de Bothrops jararacussu (vBju) em camundongos. Também foi realizado o teste de toxicidade aguda do Ebf e de viabilidade celular em células RAW 264.7. O EBf mostrou-se átoxico em camundongos, apresentando DL50 maior do que a dose teste (2000 mg/kg). O EBf aumentou a viabilidade celular em células RAW 264.7. As atividades fosfolipásica e proteolítica induzidas pelo vBju foram inibidas in vitro pelo EBf nas razões de 1:1. 1:2 e 1:3 (vBju/EBf) (massa/massa). O EBf também inibiu significativamente edema induzido por vBju, havendo redução do pico edematogênico máximo do veneno e da carragenina, nos grupo pré-tratado i.p e pré-incubado. O EBf diminuiu consideravelmente as ações hemorrágica, necrosante e miotóxica do vBju. Constituintes do EBf, podem estar se ligando a componentes do vBju como as fosfolipases A2 e seus homólogos e também as metaloproteases, bloqueando parcialmente a ação dessas enzimas e diminuindo as atividades fosfolipásica e edematogênica, como também, as ações hemorrágica e proteolítica do veneno. Verifica-se, então, atividade antiofídica do extrato, fazendo-se necessário o estudo com componentes isolados do EBf e do vBju a fim de se conseguir melhor comprovação dos efeitos e possíveis mecanismos.

MARINHO, Aline Diogo. Efeitos renais e mecanismos de morte celular promovidos pelo veneno da serpente Bothropoides pauloensis. 2013. 100 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-06-20T16:18:04Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_admarinho.pdf: 2712150 bytes, checksum: 026b5412cf5d91c170caa483b64e28e7 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-06-20T16:18:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_admarinho.pdf: 2712150 bytes, checksum: 026b5412cf5d91c170caa483b64e28e7 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-20T16:18:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_admarinho.pdf: 2712150 bytes, checksum: 026b5412cf5d91c170caa483b64e28e7 (MD5) Previous issue date: 2013 / According to the Ministry of Health of Brazil, Bothrops are the main involved in snakebites in the country and acute kidney injury is a serious complication of poisoning by these snakes. In this work, we investigated the renal effects of total venom Bothropoidespauloensis (VBP) in isolated rat kidney system and in cultured renal tubular cell line MDCK (Madin - Darby Canine Kidney). For perfusion of isolated kidney Wistar rats were used weighing 250- 300g, whose kidneys were surgically excised and perfused with Krebs- Henseleit solution containing 6% w/v pre-dialysed bovine serum albumin. The effects of VBp (n = 3μg/mL and 10 mg/mL; n=6) was investigated. Reduction was observedin perfusion pressure (PP) at a concentration of 10μg/mL at 90 and 120 min. Renal vascular resistance (RVR) also decreased the concentration of 10μg/mL at 90 and 120 minutes and at a concentration of 3 mg/mL at 120 min. The urinary flow (FU) decreased at 90 and 120 minutes in both concentrations, no significant difference between the concentrations at the time of 120min. The glomerular filtration rate (GFR) was reduced to 60 minutes in both concentrations and remained decreased until the end of the experiment, no significant difference between the concentrations in the time of 60min. The percentage of tubular sodium transport (%TNA+) was reduced by both concentrations in times of 60, 90 and 120 min, with no significant difference between the concentrations at time 60 min. The tubular transport of chloride (%TCl-) was also reduced to 60, 90 and 120 min. In both concentrations; the tubular potassium transport (%TK+) decreased at 60, 90 and 120 minutes at a concentration of 10μg/mL in a concentration of 3μg/mL reduced to 60 min, returning to near control at 90 and 120min values. No significant difference between the concentrations in the times of 60 and 90 min. The analysis showed the presence of significant morphological changes such as the accumulation of proteins plate level in the culture of MDCK cells, the VBP was able to reduce cell viability (IC50 = 7.5 g/ mL). Flow cytometry with Annexin V and propidium iodide showed that cell death occurred by apoptosis predominantly. VBP treatment ( 7.5 mg/ml) led to a significant depolarization of the mitochondrial membrane potential. We verified the generation of Reactive Oxygen Species. Morphological analysis of the cells showed features indicative of apoptosis. These results demonstrate that the venom of B. pauloensis altered all renal parameters evaluated in the kidney perfusion was cytotoxic to isolated and MDCK cell culture. / De acordo com o Ministério da Saúde do Brasil, as serpentes do gênero Bothrops são as principais envolvidas nos acidentes ofídicos no país e a insuficiência renal aguda (IRA) é uma complicação grave dos envenenamentos por estas serpentes. Neste trabalho, foram investigados os efeitos renais do veneno total de Bothropoides pauloensis (VBp) em sistema de rim isolado de rato e em cultura de células tubulares renais da linhagem MDCK (Madin-Darby Canine Kidney). Para perfusão de rim isolado foram utilizados ratos Wistar pesando entre 250 e 300g, cujos rins foram excisados cirurgicamente e perfundidos com solução de Krebs-Henseleit contendo 6%p/v de albumina bovina previamente dialisada. Foram investigados os efeitos do VBp (3µg/mL e 10 µg/mL; n=6). Verificamos queda na pressão de perfusão (PP) na concentração de 10μg/mL aos 90 e 120 min. A resistência vascular renal (RVR) também diminuiu na concentração de 10μg/mL aos 90 e 120 minutos e na concentração de 3 μg/mL aos 120 min. O fluxo urinário (FU) diminuiu aos 90 e 120 minutos em ambas as concentrações, não apresentando diferença significativa entre as concentrações no tempo de 120min. O ritmo de filtração glomerular (RFG) apresentou uma redução aos 60 minutos em ambas as concentrações, mantendo-se diminuída até o final do experimento, não havendo diferença significativa entre as concentrações no tempo de 60min. O percentual de transporte tubular de sódio (%TNA+) foi reduzido em ambas as concentrações nos tempos de 60,90 e 120min, não apresentando diferença significativa entre as concentrações no tempo de 60 min; O transporte tubular de cloreto(%TCl-) também foi reduzido aos 60, 90 e 120min. Em ambas as concentrações; O transporte tubular de potássio (%TK+) diminuíram aos 60, 90 e 120 minutos na concentração de 10μg/mL, na concentração de 3μg/mL reduziu aos 60 min,retornando a valores próximos ao controle no tempo de 90 e 120min. Não havendo diferença significativa entre as concentrações nos tempos de 60 e 90 min. A análise mostrou a presença de alterações morfológicas significativas, como acúmulo de proteínas a nível tubular. Na cultura de células MDCK, o VBp foi capaz de diminuir a viabilidade celular (CI50= 7,5μg/mL). Citometria de fluxo com anexina V e iodeto de propídio mostrou que a morte celular ocorreu predominantemente por apoptose. Tratamento com VBp (7,5 μg / mL) levou a despolarização significativa do potencial de membrana mitocondrial. Verificamos a geração de Espécies Reativas de Oxigênio. A análise morfológica das células mostrou características indicativas de apoptose. Esses resultados demonstram que o veneno de B. pauloensis alterou todos os parâmetros renais avaliados na perfusão de rim isolado e foi citotóxico para cultura de células MDCK.

Made available in DSpace on 2016-05-11T13:01:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 carolina_nicolau_ioc_dout_2016.pdf: 5977694 bytes, checksum: af8dc8894964ad483ed199c8a766fe4e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2016 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Além de potencialmente letais, envenenamentos ofídicos frequentemente acarretam elevados índices de morbidade e são reconhecidos pela Organização Mundial da Saúde como uma condição negligenciada de saúde pública. Atualmente, um dos maiores problemas associados ao envenenamento por serpentes é a baixa eficácia dos soros antiofídicos em neutralizar os efeitos tóxicos locais (ex.: hemorragia e necrose). A seleção dos venenos que compõem o pool de imunização dos cavalos é uma etapa crucial na produção do soro antiofídico e um dos critérios utilizados é a classificação filogenética das serpentes. Neste contexto, com vistas à possível otimização do soro antiofídico produzido no Brasil, utilizamos a abordagem proteômica shotgun para caracterizar os venenos utilizados como antígenos na produção do soro antibotrópico produzido pelo Instituto Butantan. Outros dois venenos que não fazem parte do pool também foram analisados. Os resultados proteômicos deste trabalho indicaram que a classificação filogenética (baseada fundamentalmente em características morfológicas das serpentes e análises de DNA mitocondrial) não mostra boa correlação com a composição proteica dos venenos. Como os efeitos do envenenamento estão diretamente relacionados com os componentes proteicos, análises venômicas podem auxiliar na escolha do pool de imunização, aprimorando a eficácia do soro antiofídico. O emprego de inibidores toxinoespecíficos para administração local é uma possível alternativa na busca de terapias antiofídicas mais efetivas. Metalopeptidases (SVMP) são as principais responsáveis pela hemorragia local, sendo sintetizadas na forma de pró-enzimas. Acredita-se que o pró-domínio destas toxinas seja responsável pela modulação de sua atividade catalítica, através de um mecanismo conhecido por cysteine-switch Utilizamos as abordagens de avaliação de formação de complexo em condições nativas e cross-linking aliado à espectrometria de massas de alta resolução, para mapearmos a região de interação entre o pró-dominio recombinante (PD-Jar) de jararagina (principal metalopeptidase do veneno de Bothrops jararaca) e diferentes metalopeptidases isoladas de venenos botrópicos. Os resultados mostraram que, em concentrações equimolares, PD-Jar foi capaz de interagir com as SVMP da classe PI (BaP1, atroxlisina-I e leucurolisina-a), porém, foi degradado por todas as SVMP estudadas. Desta forma, o uso de PD-Jar na terapia antiveneno pode não ser efetivo; entretanto, pode auxiliar na elucidação do mecanismo de ativação das SVMP. Por outro lado, ainda que os componentes dos venenos possam causar efeitos deletérios significativos, eles também podem apresentar valor terapêutico. Recentemente, observamos que o peptidoma do veneno de B. jararaca é significativamente mais complexo do que previamente descrito na literatura. Desta forma, utilizando genômica funcional aliada à abordagem connectivity map, triamos o peptidoma por possíveis novas atividades biológicas relevantes. Diversas atividades potenciais, tais como antimalárica, anti-inflamatória e imunossupressora foram detectadas e serão submetidas à etapa de validação complementar. Em resumo, o presente trabalho mostrou a necessidade de estudos venômicos apara aperfeiçoar a escolha do pool de imunização para a produção do soro antibotrópico, confirmou a interação entre PD-Jar e algumas SVMP-PI e foi mostrado, pela primeira vez, um peptidoma de serpentes significativamente diverso com potencial terapêutico. Esses resultados poderão contribuir para o aprimoramento da terapia antiofídica atual e para a prospecção por novos fármacos para o tratamento de diferentes patologias / Snakebite envenoming induces high levels of morbidity, besides its lethality potential and have been classified as a neglected health condition by the World Health Organization. Currently, the major issue associated to snakebite envenoming is the low efficacy of the antiophidic serum to neutralize the toxic local effects such as hemorrhage and necrosis. One of the most essential steps in antivenom production is the appropriate choice of venoms to compose the horses\2019 immunization pool, which takes into account the phylogenetic classification of snakes. Thus, aiming at improvements in the efficacy of antibothropic sera produced in Brazil, we used shotgun proteomics to characterize the venoms used as antigens for the antibothropic serum production by the Butantan Institute. We also analyzed two other venoms not used in the immunization pool. The proteomic results indicated that phylogenetic classification (based on morphological features and mitochondrial DNA analysis) does not display good correlation to snake venom composition. Considering that the envenoming effects are directly related to venom proteins, venomic analysis may contribute for a more rational design for immunization pool, improving the efficacy of the antiophidic serum. The local administration of toxin-specific inhibitors may represent a good alternative for development of more effective antiophidic therapies. Metallopeptidases (SVMPs), mainly responsible for the local hemorrhage, are synthesized as a pro-enzyme. It is believed that the prodomain of SVMPs is responsible for the modulation of their catalytic activity, through a mechanism known as cysteine-switch Thus, we used complex formation assays in native conditions and with cross-linking allied to high resolution mass spectrometry, to map the interaction region between a recombinant prodomain (PD-Jar) from jararhagin (major class PIII SVMP from Bothrops jararaca venom), and different SVMPs isolated from bothropic venoms. The results indicated that PD-Jar is able to interact, in equimolar concentrations, with class P-I SVMPs (BaP1, atroxlysin-I and leucurolysin-a) but it was degraded by all SVMPs studied. Thus, PD-Jar may not be effective in antivenom therapy; however, it may contribute for the elucidation of the mechanism of activation of SVMPs. On the other hand, besides the dreadful effects of snake venom components, they display a therapeutic potential. Recently, we observed that the B. jararaca venom peptidome is far more complex than previously reported in the literature. Thus, using functional genomics associated to connectivity map approach, we screened for novel relevant activities in this peptidome. We identified different potential activities such as antimalarial, anti-inflammatory and immunosuppressive, which will be further validated through biological assays. In summary, in the present work we showed the importance to use venomic studies to improve the rational design for immunization pool for antibothropic serum production, we confirmed the interaction between PD-Jar and some SVMP-PI and we showed, for the first time, a significant diverse snake venom peptidome with therapeutic potential. Thus, these results may further contribute for improvements in the antiophidic therapy and for prospecting novel drugs to be applied to the treatment of different pathologies

Na implementação de empreendimento hidroelétrico no rio Pelotas, foi iniciado o programa de monitoramento de fauna do reservatório da UHE Barra Grande, o qual foi dividido em dois períodos: (1) Monitoramento na fase de pré-enchimento do reservatório, entre os anos de 2002 e 2005. (2) Monitoramento na fase de pós-enchimento realizado entre os anos de 2006 e 2010. Para tal, foram selecionadas quatro áreas de interesse, denominadas Área Controle Três (AC3), Área Destino Dois (AD2), Área Destino Seis (AD6) e Área Destino Oito (AD8), onde a exceção da AD6 que está localizada no estado do Rio Grande do Sul, município de Bom Jesus, todas as demais estão localizadas no estado de Santa Catarina nos Municípios de Campo Belo do Sul (AD2 e AC3) e Anita Garibaldi (AD8). Durante o processo de monitoramento os métodos de amostragem da herpetofauna foram padronizados nos diferentes momentos de pré e pós-enchimento aplicando-se especificamente, para a fauna de serpentes: censo de visualização, armadilhas de interceptação e queda e registros ocasionais. Durante os oito anos de estudos na UHE Barra Grande foram coletados 334 indivíduos de 31 espécies de serpentes pertencentes a cinco famílias, Dipsadidae (75%), Viperidae (19%), Colubridae (3%), Elapidae (2%) e Leptotyphlopidae (1%), correspondendo 114 indivíduos ao pré-enchimento e 221 ao pós-enchimento. As espécies mais abundantes na UHE Barra Grande foram Bothrops jararaca (15%), Oxyrhopus rhombifer (11%), Helicops infrataeniatus (10%) e Erythrolamprus poecilogyrus (10%), com diferenciação na abundância de cada uma das espécies entre os dois períodos, observando também uma maior riqueza no pós-enchimento. A ANOSIM indicou uma similaridade baixa (R= 0,32) entre a estrutura da taxocenose entre os dois períodos, confirmando pela análise de SIMPER que as espécies mencionadas anteriormente foram responsáveis por 54% da diferenciação entre o pré e pós-enchimento, de forma que espécies de floresta tem maior dominância no pré-enchimento e espécies associadas a áreas abertas ao pós-enchimento. Evidencia-se uma reprodução sazonal com maiores picos de atividade nos meses de maior temperatura (entre outubro e março), demonstrando diferenças na maturidade das espécies analisadas, de forma que se observou 52% de adultos no pré-enchimento e 39% no pós-enchimento, com maiores tamanhos dos folículos vitelogênicos e testículos para o pré-enchimento. Em razão da dieta, observou-se um baixo registro de indivíduos com conteúdo estomacal, sendo os roedores o item alimentar de maior ocorrência no pré-enchimento e os anfíbios no período do pós-enchimento. / When the Barra Grande Hydroelectric Powerplant was built, it was initiated the Fauna Monitoring Program that was divided into two periods: (1) Monitoring of the reservoir prior to the filling, between 2002 and 2005; and (2) Monitoring of the reservoir after to the filling, between 2006 and 2010. To carry out this monitoring, four areas of interest were selected and denominated Control Area Three (AC3), Destin Area Two (AD2), Destin Area Six (AD6), and Destin Area Eight (AD8). With the exception of AD6, which is located at the municipality of Bom Jesus, State of Rio Grande do Sul, all other areas are located at the State of Santa Catarina, at the municipalities of Campo Belo do Sul (AD2 and AC3) and Anita Garibaldi (AD8). During the monitoring process the sampling methods for herpetofauna were standardized on both periods (prior and after the reservoir filling). Specifically for snakes it was applied: transects, pitfall traps and occasional records. During the eight years of study at the Barra Grande Hydroelectric Powerplant 334 individuals belonging to five families, Dipsadidae (75%), Viperidae (19%), Colubridae (3%), Elapidae (2%) and Leptotyphlopidae (1%), were collected. From those, 114 individuals were collect prior and 221 were collected after the filling. The most abundant species were Bothrops jararaca (15%), Oxyrhopus rhombifer (11%), Helicops infrataeniatus (10%) and Erythrolamprus poecilogyrus (10%). There was a difference in the abundance of each species between the two study periods, and the largest richness was observed after the filling. The Analysis of Similarities (ANOSIM) indicated low similarity (R= 0.32) of the taxocenosis structure of both periods, and the Similarity Percentages (SIMPER) confirmed that the species mentioned above were responsible for 54% of the difference between both study periods. It is noted that forest species have greater dominance in the pre-filling and species associated with open areas to post-filling. A seasonal reproduction became evident, with highest activity peaks in the months of higher temperature (October-March), demonstrating differences in maturity of the species analyzed; on the pre-filling period 52% of individuals captured were adults, while on the post-filling, there were only 39% of adults, with larger vitellogenic follicles and testis recorded pre-filling. Regarding the diet, a low number of individuals with stomach content was recorded, and rodents were the most frequent food item in the pre-filling and amphibians in the post-filling period.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:11:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000397522-Texto+Completo-0.pdf: 4907405 bytes, checksum: c89d7657afb6c02ee73ab2305340e111 (MD5) Previous issue date: 2005 / In the last three decades, the study of communities has made great progress; however, there have been few studies on snakes with more than one species utilizing the same area. Campos sulinos are an important biome in the Subtropical region with temperate climate of the Neotropical region, presenting open formations, semideciduous and ciliar forests along water courses. There is a great relevance in relation to its biodiversity, but its composition and community structure is unknown. Our goal in the present study was to know the diversity, the natural history and some ecological aspects of species of the snake community at Serra do Sudeste in Rio Grande do Sul, Campos Sulinos. Snakes’ searching was undertaken from January 2000 to June 2003, through the following four methods: time constrained search (walking and by car); pitfall traps; resident collectors and study in scientific collections. The study area is characterized by the presence of semideciduous forest and field formation intermingled by ciliar forests. Species richness in the collecting area was represented by the presence of 28 species other than four which were identified in the collection of MCP (Museu de Ciências da Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul), totaling 32 species. The principal method to estimate the actual number of species (richness) as well as the number of specimens (abundance) was the collection made by resident collectors (23/294) and pitfall traps (916/140) respectively. The richness (Jackknife 1 and 2, Chao 1 and 2) was estimated among 32 and 36 species. Snake community composition of Serra do Sudeste was more similar to other taxocenosis which utilize areas with field formation (pampas), followed by open areas with semideciduous and Atlantic forest. The two more abundant species were Bothrops pubescens (21%) (Viperidae) and Philodryas patagoniensis (18%) (Colubridae).The species richness values obtained through traps installed at the field and inside the forest were different: species richness of forest composition (n=14), diversity (H’=2,46) and equitability (E=79%) was greater than field (n=12, H’=2,13, E=51%). The most common snakes were terrestrial and diurnal in the utilization of macro and microhabitat. Most snakes were found along vicinal roads (n=60 dislocation from one place to another) and near home environments (n=58). The mensal activity of snakes was correlated with the temperature (r2=0. 52). The three more abundant species are generalist feedeers. Anuran and lizards were the most frequently prey itens of snakes, followed by mollusks, arthropods and birds. Species composition followed the characteristic pattern of colonization and dispersion in the snake lineage known for the Neotropical region, reflecting the patterns of interference suffered by historical, phylogenetic and ecological factors. / Nas três últimas décadas, os estudos sobre comunidades progrediram muito, todavia existem poucos estudos sobre serpentes que envolvem mais de uma espécie em um mesmo local. Pampa é um importante bioma na porção subtropical de clima temperado da região neotropical, com formações predominantemente abertas, com a presença de floresta semidecidual e mata ciliar ao longo dos cursos d’água. Apresenta grande relevância quanto a sua biodiversidade, mas é praticamente desconhecido quanto a composição e estrutura de comunidades. O objetivo do presente estudo foi conhecer a diversidade, história natural e alguns aspectos ecológicos das espécies de uma comunidade de serpentes da Serra do Sudeste do Rio Grande do Sul. Registrou-se a presença das espécies de serpentes entre janeiro de 2000 e junho de 2003, com o uso simultâneo de quatro métodos amostrais: procura visual limitada por tempo (a pé e de carro); armadilhas de interceptação e queda; coletores residentes e consulta em coleções científicas. A área de estudo caracteriza-se pela presença de floresta semidecidual e formações de campos entremeados por matas ciliares. A riqueza dentro da área de coleta foi igual a 28 espécies, outras quatro foram identificadas na coleção do MCPRS (Museu de Ciências da Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul), totalizando 32 espécies. Os métodos que apresentaram melhor desempenho em número de espécies (riqueza) e indivíduos (abundância) foram coletores residentes (23/294) e armadilhas de interceptação e queda (16/140). A riqueza estimada (Jackknife 1 e 2, Chao 1 e 2) ficou entre 32 e 36 espécies.A composição das espécies de serpentes da Serra do Sudeste apresentou maior similaridade com outras taxocenoses que habitam áreas com formações de campo (pampas), seguido por áreas abertas com floresta semidecidual e de Mata Atlântica. As duas espécies mais abundantes foram Bothrops pubescens (21%) (Viperidae) e Philodryas patagoniensis (18%) (Colubridae). A riqueza de espécies obtida através das armadilhas instaladas na mata e no campo foram diferentes: a composição da mata apresentou riqueza (n=14), diversidade (H’=2,46) e eqüitabilidade (E=79%) maiores que o campo (n=12, H’=2,13, E=51%). Serpentes terrestres e diurnas foram as mais frequentemente encontradas. Locais onde houve maior número de encontro com serpentes foram em estradas vicinais (n=60 em deslocamento) e ambientes peri-domiciliares (n=58). A atividade mensal das serpentes está correlacionada à temperatura (r2=0. 52). As três espécies mais abundantes apresentaram hábito alimentar generalista. Os itens alimentares mais consumidos pelas espécies foram anfíbios anuros e lagartos, seguidos por moluscos, artrópodes e aves. A composição de espécies obedece ao padrão conhecido e característico da colonização e dispersão das linhagens de serpentes que habitam a região neotropical, refletindo assim influência de fatores históricos, filogenéticos e ecológicos.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:12:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000383111-Texto+Completo-0.pdf: 310802 bytes, checksum: 52b57e21c31e774a699dae39ae4cb899 (MD5) Previous issue date: 2005 / Were analyzed poison samples as a pool from different proceedings, one from Rio Grande do Sul area, South Brazil (regional pool), and another mainly from São Paulo area, Central Brazil (national pool). The national pool was made by venom samples from Espírito Santo, Minas Gerais, São Paulo and Paraná states. Were analyzed: lethal, proteolytic (on casein), coagulant (on human plasma), and phospholipasic enzyme activities, the quantity of protein and the electrophoretic patterns were analyzed too. The analyses between the samples were made by comparison of biochemical actions and protein composition into a species, and inter-regionally between the pools. The comparison by electrophoresis, regional samples showed particularities in their venom protein composition sharing phospholipasic miotoxinas, with 14 KDa, that were poorly observed in the national pool, suggesting this action been more regionalized for this venom. However, we can observe miotoxic phospholipases, with different molecular weigh (16 KDa), present in all of the samples, suggesting a biochemical similarity still shared although the regional differences between the samples. The major phospholipasic activity and protein quantity were verified in regional samples. The regional pool has more proteolytic and coagulant activities, when we compare with the national pool, that’s reinforces the possibility of those actions were more regionalized in B. alternatus and B. jararaca venoms. / Foram analisadas amostras de veneno em forma de “pool”, extraídos de duas espécies de Bothrops (B. alternatus, B. jararaca). O “pool” regional foi composto de venenos exclusivamente do Rio Grande do Sul coletados de exemplares provenientes de várias partes do estado. O “pool” nacional foi composto de venenos de exemplares provenientes, principalmente, de São Paulo e adjacências (estados de Espírito Santo, Minas Gerais e Paraná) e usado como veneno-referência. Foram analisadas: atividade letal; ação proteolítica sobre caseína; enzimas fosfolipásicas; ação coagulante no plasma humano; dosagem da quantidade de proteínas; e perfil eletroforético. As análises entre as amostras foram feitas comparando-se as ações bioquímicas e a composição protéica entre as espécies que compõe cada “pool”, bem como inter regionalmente, entre os “pools”. Quando comparadas pela eletroforese, as amostras regionais apresentaram particularidades quanto à composição protéica do veneno compartilhando miotoxinas fosfolipásicas com 14 KDa, que são pouco observadas nas amostras do “pool” nacional sugerindo ser esta ação mais “regionalizada” para estas peçonhas. Entretanto, observam-se outras fosfolipases miotóxicas com peso molecular diferente (16KDa) presente em todas as amostras, sugerindo a similaridade bioquímica ainda compartilhada, apesar das diferenças regionais entre as amostras. Também se verificou maior atividade fosfolipásica e teor protéico nas amostras regionais. O “pool” regional teve maior atividade proteolítica e coagulante no plasma quando comparado com o “pool” nacional, reforçando a possibilidade de maior toxicidade no “pool” regional.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:12:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000390935-Texto+Completo-0.pdf: 694578 bytes, checksum: 8d865cc1fcc32224e3fab149c5bae10f (MD5) Previous issue date: 2007 / The poisons found in animals are complex mixtures rich in toxins and enzymes that can present a large number of effects over the haemostatic mechanisms, as an example, at the platelets functions; they also induct hematological and immunological alterations and activate the liberation of pro-inflammatory cytokines. Between the Brazilian rattlesnakes species it is distinguished the Crotalus genera. At the Rio Grande do Sul state (RS) only the subspecies Crotalus durissus terrificus (Cdt) occurs, which poison’s proprieties has yet no studies. The crotoxin molecule is composed by two subunits named: basic, that has a phospholipase A2 enzyme (PLA2) activity, and the acidic, called crotapotin. PLA2 has an inflammatory activity and changes the platelets aggregation. Crotapotin - a protein that has shown in several studies that increases the PLA2 action - modulates the inflammatory response in vivo, decreasing carrageenin-induced rat paw oedema. The evaluation of different parameters related to the toxicity and haemostatic system effects is important to determine the toxicity of rattlesnake’s venoms. It is important to investigate the venoms from species that has already been described for some states of the country; therefore alterations in the poison and in its effects are known to happen at different locations. Several parameters can be utilized, like tests that describe the presence of the toxins (as the FPLC purification) and tests that evaluate its effects (as cytokines liberation tests, evaluation of alteration on cellular membrane enzymatic activity, and others).This study aimed to evaluate the poison characteristics on platelets aggregation and the possible involved mechanisms, as well to evaluate the inflammatory/anti-inflammatory action of some Cdt poison components. To go trough this objectives, two articles has been written: The first was developed in function of the alterations that can be caused by the Cdt venom over the haemostasis and platelet aggregation system, trying to identify possible action mechanisms that leads to these alterations. It was found that RS Cdt venom has the platelet aggregating capacity already described for the subspecies. In the second one we tried to understand how two crotoxin formative subunits, crotapotin and PLA2, could present antiinflammatory and inflammatory effects respectively. To evaluate the subunits actions, it was quantified the TNF-[ production. The peripherical blood mononuclear cells, stimulated by phytohemagglutinin, were incubated at different crotapotin and PLA2 concentrations to verify the proliferative and immunomodulatory capacity and the respective cytotoxicity. / As peçonhas de origem animal são misturas complexas ricas em toxinas e enzimas que podem apresentar um número variado de efeitos sobre os mecanismos homeostásicos como, por exemplo, na função plaquetária, além de induzir alterações hematológicas, imunológicas e ativar a liberação de citocinas pró-inflamatórias. No estado do Rio Grande do Sul (RS) há apenas a ocorrência da subespécie Crotalus durissus terrificus (Cdt), cuja peçonha ainda não possui suas propriedades estudadas. A crotoxina é uma fração que tem como efeito principal atividade neurotóxica pré-sináptica. Esta toxina é composta por duas subunidades denominadas: subunidade básica, que possui atividade fosfolipásica A2 (PLA2) e a subunidade ácida, a crotapotina. A PLA2 atua como estimulador de processos inflamatórios e altera a capacidade agregante plaquetária. Já a crotapotina - uma proteína que em diversos estudos demonstrou potencializar as ações da PLA2 - possui atividade antiinflamatória in vivo, apresentando inibição do edema de pata induzido por carragenina. A avaliação de diferentes parâmetros relacionados a toxicidade e efeitos sobre o sistema homeostásico são importantes para a terminação da toxicidade dos venenos de serpentes. Cabe salientar a importância de investigar venenos de espécies que possuem efeitos já descritos para algumas regiões do país, pois são descritas alterações nas peçonhas e em seus efeitos conforme a localidade que ocorrem. Diversos parâmetros podem ser utilizados, como testes que descrevam a presença das toxinas (como a purificação feita por FPLC) e testes que avaliem seus efeitos (como testes de liberação de citocinas, avaliação sobre a alteração de atividade de enzimas de membranas celulares, entre outros).Nossos estudos buscaram avaliar as características do veneno sobre a agregação plaquetária e os possíveis mecanismos envolvidos neste processo, bem como avaliar a ação inflamatória/antiinflamatória de alguns componentes da peçonha de Cdt. Para cumprir estes objetivos foram desenvolvidos dois artigos: O primeiro artigo foi desenvolvido em função das alterações que a peçonha de Cdt pode causar no processo de agregação plaquetária, buscando-se identificar os possíveis mecanismos de ação que levam a estas alterações. Verificou-se que a peçonha da Cdt do Rio Grande do Sul possui a capacidade agregante plaquetária já descrita para a subespécie e seu mecanismo de ação não parece ser via NO nem alterações da atividade das E-NTPDases. O segundo artigo buscou entender como duas subunidades formadoras da crotoxina, a crotapotina e a PLA2, podem apresentar efeitos antiinflamatórios e inflamatórios, respectivamente em culturas de células. Para avaliar as ações das subfrações foi quantificada a liberação de TNF-α. As células mononucleares de sangue periférico humano, estimuladas com fitohemaglutinina, foram incubadas com diferentes concentrações de crotapotina e PLA2, verificando-se a capacidade proliferativa, imunomoduladora, as respectivas citotoxicidades e expressão da citocina inflamatória, TNF-α.

Made available in DSpace on 2013-08-07T18:52:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000348090-Texto+Completo-0.pdf: 15072905 bytes, checksum: 4a25ac13421c7e7f5d674139029d02b1 (MD5) Previous issue date: 2006 / The research had as objective to investigate, execute and evaluate a pedagogical proposal in a learning unit related to Science teaching with students in sixth grade concerning the study of serpents. The theoretical background was based on some authors which propose innovative approaches in the process of teaching and learning. We sought to follow and evaluate the construction of knowledge about serpents in a learning unit which was developed upon students prior ideas. The investigation was carried on the analysis of students’ statements and texts produced by them. The method used was analysis of the content that has given us the opportunity to analyzing and thinking about the students statements. Taking into account the topics presented by the pupils we have gotten some questions that allow us to organize the contents studied in the classes. We have noticed that the students were able to do some important group works and that they were able to be responsible by their own learning. They have worked together in an autonomous way. They have looked at bibliographic references about serpents and they have produced texts about some specific topics divided into groups. However, these results are partial and they are related to a case study, in other words, these results were gotten in one group of students, in a given context and these results have involved students in sixth grade in a public school. These results help us to comprehend the process of learning but we could not generalize. They might help us to think and give support to the application and evaluation in other groups of students. This is just a path to develop a new methodology that was well-accepted by the students and by the teacher/researcher. This is not a final version of a practice but its beginning. / Esta pesquisa teve como objetivo acompanhar e avaliar a construção do conhecimento em uma proposta pedagógica com uma Unidade de Aprendizagem – UA – sobre serpentes, desenvolvida a partir das idéias prévias dos alunos da 6ª serie do ensino fundamental, em aulas de Ciências,. A fundamentação teórica foi baseada em autores que propõem um diferencial nos processos de ensino e aprendizagem. A investigação foi feita a partir da análise de depoimentos e de textos elaborados pelos alunos, segundo a metodologia denominada Análise de Conteúdo, que oportunizou subsídios para elaboração da UA, com base na análise e reflexão das diferentes opiniões por eles enfatizadas. A partir das idéias prévias dos alunos, foram organizados trabalhos que eles realizaram em pequenos grupos. Depois os temas trabalhados foram apresentados pelos alunos, obtendo-se perguntas e idéias em depoimentos que ajudaram a fazer uma avaliação desta proposta. Percebeu-se que os alunos foram capazes de realizar, em grupos, trabalhos de grande relevância, assumindo responsabilidades pela própria aprendizagem. Conseguiram trabalhar com autonomia, consultando bibliografia específica sobre serpentes e produzindo textos sobre o tema que coube a cada grupo. Entretanto, esses resultados são parciais e relacionam-se a um estudo de caso, ou seja, os resultados obtidos em uma turma, num determinado contexto, envolvendo alunos de 6ª série de uma escola estadual. Esses resultados auxiliam a compreensão do processo, não tendo a intenção de generalização, mas auxiliando a reflexão e subsidiando a aplicação e avaliação em outras turmas. Este é somente um caminho, um meio para aperfeiçoarmos esta nova metodologia que foi tão bem aceita pelos alunos e pela professora/pesquisadora. Esta não é a versão final de uma prática, mas o início dela.

Na implementação de empreendimento hidroelétrico no rio Pelotas, foi iniciado o programa de monitoramento de fauna do reservatório da UHE Barra Grande, o qual foi dividido em dois períodos: (1) Monitoramento na fase de pré-enchimento do reservatório, entre os anos de 2002 e 2005. (2) Monitoramento na fase de pós-enchimento realizado entre os anos de 2006 e 2010. Para tal, foram selecionadas quatro áreas de interesse, denominadas Área Controle Três (AC3), Área Destino Dois (AD2), Área Destino Seis (AD6) e Área Destino Oito (AD8), onde a exceção da AD6 que está localizada no estado do Rio Grande do Sul, município de Bom Jesus, todas as demais estão localizadas no estado de Santa Catarina nos Municípios de Campo Belo do Sul (AD2 e AC3) e Anita Garibaldi (AD8). Durante o processo de monitoramento os métodos de amostragem da herpetofauna foram padronizados nos diferentes momentos de pré e pós-enchimento aplicando-se especificamente, para a fauna de serpentes: censo de visualização, armadilhas de interceptação e queda e registros ocasionais. Durante os oito anos de estudos na UHE Barra Grande foram coletados 334 indivíduos de 31 espécies de serpentes pertencentes a cinco famílias, Dipsadidae (75%), Viperidae (19%), Colubridae (3%), Elapidae (2%) e Leptotyphlopidae (1%), correspondendo 114 indivíduos ao pré-enchimento e 221 ao pós-enchimento. As espécies mais abundantes na UHE Barra Grande foram Bothrops jararaca (15%), Oxyrhopus rhombifer (11%), Helicops infrataeniatus (10%) e Erythrolamprus poecilogyrus (10%), com diferenciação na abundância de cada uma das espécies entre os dois períodos, observando também uma maior riqueza no pós-enchimento. A ANOSIM indicou uma similaridade baixa (R= 0,32) entre a estrutura da taxocenose entre os dois períodos, confirmando pela análise de SIMPER que as espécies mencionadas anteriormente foram responsáveis por 54% da diferenciação entre o pré e pós-enchimento, de forma que espécies de floresta tem maior dominância no pré-enchimento e espécies associadas a áreas abertas ao pós-enchimento. Evidencia-se uma reprodução sazonal com maiores picos de atividade nos meses de maior temperatura (entre outubro e março), demonstrando diferenças na maturidade das espécies analisadas, de forma que se observou 52% de adultos no pré-enchimento e 39% no pós-enchimento, com maiores tamanhos dos folículos vitelogênicos e testículos para o pré-enchimento. Em razão da dieta, observou-se um baixo registro de indivíduos com conteúdo estomacal, sendo os roedores o item alimentar de maior ocorrência no pré-enchimento e os anfíbios no período do pós-enchimento. / When the Barra Grande Hydroelectric Powerplant was built, it was initiated the Fauna Monitoring Program that was divided into two periods: (1) Monitoring of the reservoir prior to the filling, between 2002 and 2005; and (2) Monitoring of the reservoir after to the filling, between 2006 and 2010. To carry out this monitoring, four areas of interest were selected and denominated Control Area Three (AC3), Destin Area Two (AD2), Destin Area Six (AD6), and Destin Area Eight (AD8). With the exception of AD6, which is located at the municipality of Bom Jesus, State of Rio Grande do Sul, all other areas are located at the State of Santa Catarina, at the municipalities of Campo Belo do Sul (AD2 and AC3) and Anita Garibaldi (AD8). During the monitoring process the sampling methods for herpetofauna were standardized on both periods (prior and after the reservoir filling). Specifically for snakes it was applied: transects, pitfall traps and occasional records. During the eight years of study at the Barra Grande Hydroelectric Powerplant 334 individuals belonging to five families, Dipsadidae (75%), Viperidae (19%), Colubridae (3%), Elapidae (2%) and Leptotyphlopidae (1%), were collected. From those, 114 individuals were collect prior and 221 were collected after the filling. The most abundant species were Bothrops jararaca (15%), Oxyrhopus rhombifer (11%), Helicops infrataeniatus (10%) and Erythrolamprus poecilogyrus (10%). There was a difference in the abundance of each species between the two study periods, and the largest richness was observed after the filling. The Analysis of Similarities (ANOSIM) indicated low similarity (R= 0.32) of the taxocenosis structure of both periods, and the Similarity Percentages (SIMPER) confirmed that the species mentioned above were responsible for 54% of the difference between both study periods. It is noted that forest species have greater dominance in the pre-filling and species associated with open areas to post-filling. A seasonal reproduction became evident, with highest activity peaks in the months of higher temperature (October-March), demonstrating differences in maturity of the species analyzed; on the pre-filling period 52% of individuals captured were adults, while on the post-filling, there were only 39% of adults, with larger vitellogenic follicles and testis recorded pre-filling. Regarding the diet, a low number of individuals with stomach content was recorded, and rodents were the most frequent food item in the pre-filling and amphibians in the post-filling period.