Os viperídeos estão entre as serpentes de menor custo energético de manutenção, o que é, geralmente, relacionado a seus baixos níveis de deslocamento e a tática de forrageio por emboscada. Dois importantes componentes do alocamento energético destes animais são: 1) o metabolismo de repouso padrão, que está relacionado ao custo de manutenção visceral durante o repouso e 2) o aumento metabólico pós-prandial (AMPP), que está relacionado ao custo do processo digestório. O presente trabalho teve como objetivos estudar as variações da TMRP (taxa metabólica de repouso padrão) e do AMPP em 5 espécies pertencentes ao gênero Bothrops levando em conta aspectos filogenéticos, ontogenéticos e testando hipóteses acerca de possíveis variações destes componentes em função de características ecológicas. Além disso, o presente trabalho testou, através de ferramentas de ponderação filogenética, a hipótese atualmente aceita que prediz que as TMRPs em serpentes estão essencialmente ligadas a estratégia alimentar e não a filogenia. O trabalho está dividido em quatro capítulos, sendo o primeiro devotado a uma introdução geral acerca dos assuntos que serão abordados nos demais. Os resultados e discussões específicas estão divididos em dois capítulos redigidos em forma de artigo, primeiro referente aos estudos das taxas metabólicas de repouso (capítulo 2) e o segundo sobre o AMPP (capítulo 3). Por fim, a conclusão final acerca dos achados e as perspectivas para pesquisas futuras estão presente no capítulo 4. / The viperids are among the snakes with the lowest energetic maintenance costs which are generally related to the low mobility and ambush foraging mode. Two important components of energy allocation in these animals are 1) standard metabolic rates (SMR), related to the cost of keeping visceral components during resting and 2) specific dynamic action (SDA) , which is related to the cost of digestion. The present work aimed to study the variations of SMR and SDA in 5 species of the genus Bothrops taking into account aspects of phylogeny and ontogeny plus testing hypotheses about possible variations in these metabolic rates related to ecological characteristics. Furthermore, the present study used phylogenetic weighting tools to test the currently accepted hypothesis that predicts that SMR in snakes is related to the feeding strategy and not to phylogeny. The work is divided into four different chapters. Chapter 1 is devoted to a general introduction about the issues that will be addressed in the others chapters. The results and discussions are divided into two chapters presented as articles, the first referring to studies of SMR ( chapter 2 ) and the second to the SDA (chapter 3 ). Finally, in chapter 4 we include the final conclusion and prospects for future research

Orientadores: Marcio Martins, Otavio Augusto Vuolo Marques / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:29:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sawaya_RicardoJannini_D.pdf: 1555163 bytes, checksum: 2187a71d06f84ebd2830746982355536 (MD5) Previous issue date: 2003 / Doutorado

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A tribo Hydrops ini constitui um grupo formado pelos gêneros de xenodontíneos Helicops, Hydrops e Pseudoeryx, que se distribuem exclusivamente pelo continente sul-americano. O presente trabalho se propôs a fornecer uma hipótese filogenética, baseada em 47 caracteres morfológicos envolvendo morfologia hemipeniana, osteologia e folidose para 16 das 18 espécies atualmente reconhecidas na tribo. Para essa análise, foram utilizados os princípios da cladística, e os terminais do grupo internos foram analisados simultaneamente com outros nove táxons da subfamília Xenodontinae como grupos externos funcionais. Foram encontradas duas árvores igualmente parcimoniosas com 112 passos, índice de consistência de 0,482 e índice de retenção de 0,768. A análise de ponderação sucessiva dos caracteres indicou uma das duas árvores mais parcimoniosas já na primeira pesagem. Essa árvore foi utilizada para a discussão das relações do grupo interno. A tribo Elapomorphini representa o grupo-irmão de Hydrops ini. O monofiletismo da tribo e dos três gêneros que a compõe foi confirmado e o relacionamento de Farancia abacura e Sordellina punctata com as espécies de Hydropsínios foi rejeitado. A tribo Hydropsini foi organizada em 13 grupos monofiléticos, sendo 11 deles totalmente resolvidos. Diferentemente das propostas anteriores, o gênero Hydrops é indicado como grupo irmão de um clado que reúne Pseudoeryx plicatilis e as espécies do gênero Helicops. A árvore de consenso estrito encontrada, com seus 13 componentes monofiléticos está representada dessa forma: (Hydrops martii; Hydrops triangularis) (Pseudoeryx plicatilis ((Helicops hagmanni; Helicops trivittatus) (((Helicops carinicaudus (Helicops infrataeniatus; Helicops leopardinus; Helicops modestus)) (Helicops danieli ((Helicops angulatus; Helicops gomesi) (Helicops petersi; Helicops scalarisi (Helicops pastazae; Helicops polylepis)))))))). Informações sobre os modos reprodutivos dos Hydropsínios foram otimizadas na topologia encontrada para assim avaliar a origem e evolução da viviparidade neste grupo / The tribe Hydropsini represents a group of three exclusively South American xenodontine genera: Helicops, Hydrops and Pseudoeryx. The aim of the present work is to provide a phylogenetic hypothesis for the tribe Hydropsini, based on Cladistic principles. The data matrix includes 47 morphological characters derived from hemipenial morphology, osteology and scutellation, coded for 16 of the 18 currently recognized species belonging to the tribe. Beside the 16 ingroup terminals, the data matrix also includes nine taxa of the subfamily Xenodontinae that were used as functional outgroups and analyzed simultaneously. Two equally parsimonious trees were found, with a length of 112, consistency index of 0,482, and retention index of 0,768. The successive weighting analysis pointed to one of the two most parsimonious trees found during the first round of analysis. This tree is used to discuss the interrelationships of the ingroup terminals. The tribe Elapomorphini appears as the sister-group of the Hydropsini. The monophyly of the tribe and of the three Hydropsini genera were confirmed, and a closer relationship of the taxa Farancia abacura and Sordellina punctata with the Hydropsini was rejected. The tribe Hydropsini is organized in 13 monophyletic subgroups, from which 11 are unambiguous. Contrary to previously published hypotheses of relationships, the genus Hydrops appears as the sister-group of the clade formed by Pseudoeryx plicatilis and the species of the genus Helicops. The consensus tree for the Hydropsini with the 13 monophyletc components are as follows: ((Hydrops martii; Hydrops triangularis) (Pseudoeryx plicatilis ((Helicops hagmanni; Helicops trivittatus) (((Helicops carinicaudus (Helicops infrataeniatus; Helicops leopardinus; Helicops modestus)) (Helicops danieli ((Helicops angulatus; Helicops gomesi) (Helicops petersi; Helicops scalarisi (Helicops pastazae; Helicops polylepis)))))))). Informations about the reproductive mode of the Hydropsines were optimized in the phylogenetic tree recovered in the present study, in order to evaluate the origin and evolution of viviparity in the tribe.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-03-16Bitstream added on 2014-06-13T20:29:27Z : No. of bitstreams: 1 rodrigues_mg_me_sjrp.pdf: 1264858 bytes, checksum: 0078fa5981910a3510d18b60f351fd54 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Foram analisados exemplares das cinco espécies de Chironius (C. bicarinatus, C. exoletus, C. foveatus, C. fuscus e C. laevicollis), provenientes da Floresta Atlântica na Serra do Mar, incluindo os estados do Paraná, São Paulo e Rio de Janeiro. Todas as espécies foram caracterizadas em relação à morfologia, dieta e uso do ambiente. O dimorfismo sexual no tamanho de corpo é variável entre as espécies: machos de C. bicarinatus e C. foveatus são maiores que as fêmeas conspecíficas, ao passo que em C. fuscus e C. laevicollis não existe dimorfismo sexual de tamanho, e em C. exoletus, as fêmeas são maiores. Essas diferenças sugerem que o comportamento de combate ritual, registrado em algumas espécies não esteja difundido em todos representantes do gênero. A comparação interespecífica evidência diferenças marcantes na morfologia e dieta: Chironius laevicollis tem corpo grande, maior robustez, a menor cauda e dieta baseada em anfíbios terrestres, características condizentes com o hábito terrestre; C. fuscus, tem corpo pequeno, robustez intermediária e alimenta-se principalmente de anuros terrestres, indicando hábito predominantemente terrestre; C. bicarinatus tem corpo médio, robustez intermediária e dieta baseada em anuros arborícolas e terrestres, sugerindo que forrageia freqüentemente nos dois ambientes; C. exoletus possui corpo pequeno, é pouco robusta e apresa principalmente anuros arborícolas, indicando que forrageia principalmente no substrato arbóreo, e por fim, C. foveatus possui o maior tamanho corporal, menor robustez, a maior cauda e dieta baseada em anuros arborícolas, o que indica ser a espécie mais arborícola do grupo. O ancestral hipotético desse grupo possuía tamanho médio de corpo e cauda, era semi-arborícola e alimentava-se de anfíbios terrestres e arborícolas. / We explored the relationship of morphology, diet and habitat use in five sympatric species of Chironius (C. bicarinatus, C. exoletus, C. foveatus, C. fuscus and C. laevicollis) from Serra do Mar, eastern Brazil. Sexual dimorphism in body length varies among species: males C. bicarinatus and C. foveatus are larger than conspecific females, whereas no sexual dimorphism in body size is recorded for C. fuscus and C. laevicollis, and female C. exoletus is the larger sex. Such differences suggest that ritual combat (already recorded in the genus Chironius) may be absent in some species. Interespecific comparison shows differences in morphology and diet: Chironius laevicollis has large body size and the smallest tail, is more stout, and prey on terrestrial anurans, characters that may reflect terrestrial habit; C. fuscus, has small body length, medium stoutness and feed on terrestrial anurans, indicating a predominant terrestrial habit; C. bicarinatus has medium body size and stoutness, preying on terrestrial and arboreal anurans, suggesting a semi arboreal habit; C. exoletus has small and slender body and prey on arboreal anurans, indicating an arboreal habit, and finally C. foveatus has the largest body size and tail length, is more slender, and feed on arboreal anurans, thus may been the most arboreal species of the group. Hypothetic ancestor of this clade had medium body and tail length, was semi arboreal and fed on terrestrial and arboreal anurans.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:05:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1817_1.pdf: 544861 bytes, checksum: 273b8fd85ce7e992f4b4753d8bac0934 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2005 / A espécie Bothrops erythromelas, conhecida em Pernambuco como jararaca malha-de-cascavel, está amplamente distribuída na Região Nordeste do Brasil. A hemorragia é um dos sintomas mais característicos do envenenamento botrópico, especialmente em Pernambuco. A ação hemorrágica ocorre devido a um grupo de metaloproteínas zinco-dependentes, denominadas hemorraginas, que agem diretamente na parede dos vasos sanguíneos, sendo divididas em 4 classes de acordo com a massa molecular. O objetivo deste trabalho foi purificar e caracterizar duas hemorraginas de alta massa molecular da peçonha de Bothrops erythromelas (pBe). Para tanto, 865 mg de pBe foram aplicados em coluna de gel filtração Sephacryl S-200 equilibrada com tampão acetato de amônio 50mM contendo 0,3 M de NaCl, pH 5,0, sendo as frações analisadas quanto a intensidade de atividade hemorrágica em camundongos. A fração com maior atividade foi aplicada em coluna Mono Q 5/50 equilibrada com tampão Tris-HCl 100mM, pH 8,0 e eluída em gradiente não linear de NaCl 2M. Os tubos 9 e 18 provenientes da troca iônica foram recromatografados, separadamente, em coluna de gel filtração TSK G-2000 SW equilibrada com tampão acetato de amônio 150 mM, pH 5,0. As toxinas purificadas tiveram sua massa molecular estimada em 55 KDa segundo EGPA-SDS em condições redutoras e foram completamente inibidas por EDTA. Em conclusão, duas novas metaloproteinases hemorrágicas da classe P-III, denominadas berythrogina 1 e berythrogina 2, foram purificadas da peçonha de Bothrops erythromelas

A tribo Hydrops ini constitui um grupo formado pelos gêneros de xenodontíneos Helicops, Hydrops e Pseudoeryx, que se distribuem exclusivamente pelo continente sul-americano. O presente trabalho se propôs a fornecer uma hipótese filogenética, baseada em 47 caracteres morfológicos envolvendo morfologia hemipeniana, osteologia e folidose para 16 das 18 espécies atualmente reconhecidas na tribo. Para essa análise, foram utilizados os princípios da cladística, e os terminais do grupo internos foram analisados simultaneamente com outros nove táxons da subfamília Xenodontinae como grupos externos funcionais. Foram encontradas duas árvores igualmente parcimoniosas com 112 passos, índice de consistência de 0,482 e índice de retenção de 0,768. A análise de ponderação sucessiva dos caracteres indicou uma das duas árvores mais parcimoniosas já na primeira pesagem. Essa árvore foi utilizada para a discussão das relações do grupo interno. A tribo Elapomorphini representa o grupo-irmão de Hydrops ini. O monofiletismo da tribo e dos três gêneros que a compõe foi confirmado e o relacionamento de Farancia abacura e Sordellina punctata com as espécies de Hydropsínios foi rejeitado. A tribo Hydropsini foi organizada em 13 grupos monofiléticos, sendo 11 deles totalmente resolvidos. Diferentemente das propostas anteriores, o gênero Hydrops é indicado como grupo irmão de um clado que reúne Pseudoeryx plicatilis e as espécies do gênero Helicops. A árvore de consenso estrito encontrada, com seus 13 componentes monofiléticos está representada dessa forma: (Hydrops martii; Hydrops triangularis) (Pseudoeryx plicatilis ((Helicops hagmanni; Helicops trivittatus) (((Helicops carinicaudus (Helicops infrataeniatus; Helicops leopardinus; Helicops modestus)) (Helicops danieli ((Helicops angulatus; Helicops gomesi) (Helicops petersi; Helicops scalarisi (Helicops pastazae; Helicops polylepis)))))))). Informações sobre os modos reprodutivos dos Hydropsínios foram otimizadas na topologia encontrada para assim avaliar a origem e evolução da viviparidade neste grupo / The tribe Hydropsini represents a group of three exclusively South American xenodontine genera: Helicops, Hydrops and Pseudoeryx. The aim of the present work is to provide a phylogenetic hypothesis for the tribe Hydropsini, based on Cladistic principles. The data matrix includes 47 morphological characters derived from hemipenial morphology, osteology and scutellation, coded for 16 of the 18 currently recognized species belonging to the tribe. Beside the 16 ingroup terminals, the data matrix also includes nine taxa of the subfamily Xenodontinae that were used as functional outgroups and analyzed simultaneously. Two equally parsimonious trees were found, with a length of 112, consistency index of 0,482, and retention index of 0,768. The successive weighting analysis pointed to one of the two most parsimonious trees found during the first round of analysis. This tree is used to discuss the interrelationships of the ingroup terminals. The tribe Elapomorphini appears as the sister-group of the Hydropsini. The monophyly of the tribe and of the three Hydropsini genera were confirmed, and a closer relationship of the taxa Farancia abacura and Sordellina punctata with the Hydropsini was rejected. The tribe Hydropsini is organized in 13 monophyletic subgroups, from which 11 are unambiguous. Contrary to previously published hypotheses of relationships, the genus Hydrops appears as the sister-group of the clade formed by Pseudoeryx plicatilis and the species of the genus Helicops. The consensus tree for the Hydropsini with the 13 monophyletc components are as follows: ((Hydrops martii; Hydrops triangularis) (Pseudoeryx plicatilis ((Helicops hagmanni; Helicops trivittatus) (((Helicops carinicaudus (Helicops infrataeniatus; Helicops leopardinus; Helicops modestus)) (Helicops danieli ((Helicops angulatus; Helicops gomesi) (Helicops petersi; Helicops scalarisi (Helicops pastazae; Helicops polylepis)))))))). Informations about the reproductive mode of the Hydropsines were optimized in the phylogenetic tree recovered in the present study, in order to evaluate the origin and evolution of viviparity in the tribe.

O desenvolvimento de biossensores é um tema de pesquisa bastante promissor, uma vez que permite monitorar diversas classes de substâncias, que muitas vezes apresentam grande interesse nas mais diversas áreas da ciência. Biossensores são pequenos dispositivos que utilizam componentes biológicos como elementos de reconhecimento, ligados a um sistema dedetecção, transdução e amplificação do sinal gerado na reação com o analito-alvo. Podem ser utilizados diversos elementos, sendo os principais, atualmente, aqueles baseados em aptâmeros e nanomateriais, por sua alta especificidade e sensibilidade. Seu potencial de utilização varia desde a detecção e tratamento de doenças ou a medição de componentes nos fluidos biológicos, até o monitoramento ambiental e prevenção de contaminação e bioterrorismo. Neste projeto foi desenvolvido um biossensor eletroquímico cujo objetivo é identificar toxinas inoculadas em pacientes que sofreram acidentes com animais peçonhentos. Foram utilizados os anticorpos/imuniglobulinas comerciais e a peçonha bruta de jararaca (Bothrops) para fazer o estudo/desenvolvimento do biossensor. Neste trabalho foram apresentados os resultados da imobilização dos anticorpos (imunoglobulinas) sobre o eletrodo de trabalho, bem como sua resposta eletroquímica utilizando voltametria cíclica. As soluções utilizadas foram de NaCl 0,9% e tampão fosfato (0,1 mol.L-1) com pH=7,4 por ser bem próximo ao pH fisiológico, pois, posteriormente quer se investigar em plasma sanguíneo. Os voltamogramas cíclicos e a microscopia eletrônica de varredura mostraram a diferença do eletrodo com e sem a imobilização das imunoglobulinas, evidenciando que o biossensor é eficaz para o sistema analisado, sendo promissor aos estudos. Com o biossensor construído, foi investigada a resposta eletroquímica relativa à interação antígeno-anticorpo (veneno-soro) para analisar a interação específica entre eles, sendo o resultado positivamente o esperado. / The development of biosensors is a research topic very promising, since it allows you to monitor various classes of substances, which often exhibit great interest in several areas of science. Biosensors are small devices that use biological recognition elements and components, bound to a selfAdetecting system, transduction and amplification of the signal generated in the reaction with the target analyte it. Various elements, the main currently those based on aptamers and nanomaterials for their high specificity and sensitivity can be used. Their potential use varies from the detection and treatment of diseases or measurement of components in biological fluids to the environmental monitoring and contamination prevention and bioterrorism. In this project we developed an electrochemical biosensor whose objetico is inoculated identify toxins in patients who have suffered accidents with poisonous animals. Antibodies / commercial imuniglobulinas and the crude venom of pit viper (Bothrops) were used to study / development of the biosensor. In this work the results of immobilization of antibodies (immunoglobulins) on the working electrode and its electrochemical response using cyclic voltammetry were presented. The solutions used were 0.9% NaCl and phosphate buffer (0.1 mol L-1) of pH = 7.4 to be close to physiological pH and therefore further investigated whether in blood plasma. Cyclic voltammetry and scanning electron microscopy showed the difference of the electrode with and without immobilization of immunoglobulins, indicating that the biosensor is effective for the system analyzed, and promising to studies. With the biosensor constructed, we investigated the electrochemical response on the antigen-antibody (venom antiserum) interaction to analyze the specific interaction between them, the result being positively expected.

A espécie Bothrops atrox é responsável por grande parte dos acidentes no estado do Amazonas. No entanto, ainda são poucos os estudos sobre as toxinas que compõem o veneno dessa serpente, os mecanismos envolvidos na sintomatologia dos acidentes, bem como de formas de inibição. Os soros antiveneno utilizados atualmente com o objetivo de neutralizar as atividades sistêmicas e locais dos venenos mostraram reatividade cruzada entre componentes dos venenos de serpentes do gênero Bofhrops (MOURA DA SILVA et al., 1990). No entanto alguns componentes do veneno não apresentaram essa reatividade (SILES-VILARROEL et al.., 1974), mostrando a existência de toxinas espécie específicas.Os venenos de serpentes estão sujeitos a grandes variações induzidas por diversos aspectos ontogenéticos e influencia do habitat. Assim, essas variações podem gerar toxinas espécie específicas cujos mecanismos de ação ainda são desconhecidos e que os anticorpos presentes nos antivenenos disponíveis não sejam capazes de reconhecer e neutralizar eficientemente. O gênero Bothrops possui espécies extremamente variáveis, algumas de difícil classificação taxonõmica, e novas espécies têm sido descobertas recentemente. Como contribuição para o acúmulo de informações a respeito das diferentes composições do veneno do gênero Bothrops, e para o conhecimento de toxinas já isoladas e as ainda não isoladas na espécie tipo Bothrops atrox, foi construída uma biblioteca de cDNA da glândula de veneno.Os dados obtidos são importantes para a elaboração de um painel da expressão gênica dessa espécie e permitirá a identificação de toxinas que podem ser comuns ou não ao veneno de outras espécies do gênero. Aliado a isso, esses dados permitirão a correlação com o estudo proteõmico, e possivelmente fornecerão subsídios para a melhoria da terapêutica empregada no tratamento dos casos envenamento na região. / The species Bothrops atrox is responsible for most accidents in state of Amazonas. However, there are few studies on toxins that make up the venom of this snake, mechanisms involved in symptomatology of accidents, as well as inhibition forms. Sera antivenom currently used in order to neutralize the systemic and local activities of the venoms showed cross-reactivity between components of the venom of Bothrops (MOURA DA SILVA et al., 1990). However some components of the venom showed no reactivity (SILES-VILARROEL et al., 1974), indicating the existence of species-specific toxins. Snake venoms are subject to large variations induced by several aspects and influences of ontogenetic habitat. Thus, these variations can produce toxins whose mechanisms of species-specific action are still unknown and antibodies present in available antivenoms maybe not are capable to recognize and neutralize some toxins efficiently. Bothrops species have highly variable, some of difficult taxonomic classification and new species have been discovered recently. As a contribution to gain of information about of different compositions of Bothrops venom and to knowledge of toxins not yet isolated and the isolated in Bothrops atrox type species we constructed a venom gland cDNA library . The data obtained are important for the development of gene expression panel of this species and enable the identification of toxins common or not in the venom of other species. These data will allow correlation with the proteomic study, and possibly provide input for improving the therapeutic used in the treatment of accidents cases in the region.

A jararaca-ilhoa (Bothrops insularis) é uma serpente endêmica e criticamente ameaçada de extinção que atualmente possui uma população estimada de 2.100 indivíduos restritos a uma única ilha no Estado de São Paulo, a Ilha da Queimada Grande. Esta vulnerabilidade levou à criação de um programa de reprodução em cativeiro para a espécie que, entre outras ações, propõe o desenvolvimento e aplicação de biotécnicas reprodutivas, tais como avaliação e preservação seminal e inseminação artificial. Este trabalho teve como objetivos: (1) avaliar três diluidores (HAM F-10, ACP-120® e BWW) em três diluições diferentes (1:100, 1:200 e 1:500 µL) e determinar qual o melhor protocolo de incubação para o sêmen de B. insularis; (2) avaliar um protocolo de inseminação artificial na espécie e (3) avaliar três diferentes sistemas de refrigeração (geladeira, banho-maria em geladeira e isopor tipo BotuFLEX® )a fim de determinar qual deles é capaz de preservar melhor a motilidade do sêmen da jararaca-ilhoa por um período de até 48 h. Verificamos que as amostras de sêmen diluídas com o meio HAM F-10 na diluição 1:100 µL apresentaram os melhores resultados para motilidade e motilidade progressiva e, desta forma, foi o protocolo de diluição seminal eleito para a inseminação artificial realizada. O protocolo de inseminação artificial foi realizando de maneira segura e minimamente invasiva nos animais, no entanto, até o momento não houve detecção de prenhez nas fêmeas inseminadas. A refrigeração se mostrou um método eficiente para a manutenção da motilidade e motilidade progressiva do sêmen de B. insularis por até 48 h pois, no período de duração do experimento, não foi verificada queda significativa nos parâmetros avaliados em nenhum dos sistemas de refrigeração. Foi observada, ao longo deste trabalho, uma alta incidência de decapitações nos espermatozoides de boa parte dos machos, o que pode comprometer seriamente a fertilidade do plantel estudado. Acreditamos, com os resultados deste projeto, ter elucidado questões fundamentais acerca do melhor diluidor e diluição a ser utilizada na manipulação do sêmen de B. insularis, assim como ter demonstrado que protocolos de refrigeração seguros e versáteis são capazes de manter a motilidade seminal por até 48 h, permitindo a troca de material genético entre diferentes plantéis no Brasil ou até mesmo com a população nativa da Ilha da Queimada Grande. O conhecimento gerado a partir deste estudo também servirá como base para estudos que visem o estabelecimento e aprimoramento de outras biotécnicas reprodutivas e a criação, em um futuro breve, de um banco de germoplasma da espécie. / The golden lancehead (Bothrops insularis) is a venomous pitviper endemic from Ilha da Queimada Grande, a small island located 40 miles off the coast of southeastern Brazil. Due to its small population (about 2000 individuals), highly restricted range, continuous decrease in habitat quality and illegal trading, B. insularis is currently listed as critically endangered in the IUCN Red List. As a consequence, efforts have been directed towards the development of a captive breeding program that involves both natural and assisted reproduction. Nonetheless, successful application of assisted reproductive technologies such as artificial insemination and semen cryopreservation in B. insularis requires a clear understanding of the reproductive physiology of this species, particularly aspects of sperm quality and production, and conservation. Thus, this study aims on: (1) determining which extenders (ACP-120, BWW and HAM-F10) and dilutions are better suited for maintenance of sperm motility; (2) testing an artificial insemination protocol in B. insularis maintained in captivity; (3) evaluating three different cooling systems (refrigerator, water bath on refrigerator and BotuFLEX®) to determine which one is able to preserve the semen motility of the golden lancehead for a period up to 48 hours. We found that semen samples diluted with HAM F-10 medium at a 1: 100µL dilution had the best motility and progressive motility results. To date, no pregnancies have been detected in inseminated females. Therefore, further studies and the improvement of this protocol for the species are required. We observed that all three cooling methods work successfully, maintaining the motility and progressive semen motility without significant changes for 48h, which demonstrates versatility in the preservation and transportation of this material, including from field work. With our results, we have elucidated fundamental questions about both the best diluent and dilution to be used, as well as refrigeration systems that ensure the maintenance of semen motility up to 48 hours. This is crucial for allowing the exchange of genetic material between different Brazilian Institutions and the income of material from Ilha da Queimada Grande, what may minimize problems due to consanguinity, besides serving as a basis for future studies on seminal cryopreservation protocols and the creation of germplasm banks.