Submitted by Rosana Amâncio (rosana.amancio@ufcg.edu.br) on 2018-07-12T15:42:24Z No. of bitstreams: 1 ALUSKA VIEIRA TAVARES - DISSERTAÇÃO PPGCNBio 2016..pdf: 3420076 bytes, checksum: 285c96d7eef3fab2a5f91adabb044549 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-12T15:42:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ALUSKA VIEIRA TAVARES - DISSERTAÇÃO PPGCNBio 2016..pdf: 3420076 bytes, checksum: 285c96d7eef3fab2a5f91adabb044549 (MD5) Previous issue date: 2016-07-20 / CNPq / O acidente ofídico é um problema de saúde pública negligenciado em países tropicais e subtropicais. Este estudo é uma investigação transversal das características epidemiológicas dos acidentes ofídicos no estado do Rio Grande do Norte, Nordeste do Brasil, de 2007 a 2014.Os dados foram coletados na Secretaria de Saúde do Rio Grande do Norte, utilizando o banco de dados do Sistema de Informação de Agravos de Notificação. Um total de 3.019 casos foram analisados. Os acidentes foram notificados em 163 municípios do estado, com maior incidência nos pequenos municípios localizados na região central. Os casos ocorreram em todos os meses dos anos investigados, com maior frequência entre março e agosto. A maioria dos casos envolveu homens com idade entre 20 e 59 anos, trabalhadores e residentes rurais, com baixa escolaridade e raça parda. Os casos ocorreram com maior frequência em áreas rurais. Houve predomínio de acidentes com serpentes do gênero Bothrops. As picadas acometeram principalmente as extremidades dos membros. A maioria das vítimas recebeu assistência médica entre 1 e 3 horas após o acidente. Os casos foram prevalentemente classificados como leves e progrediram para cura. Foram notificados 13 óbitos. A maioria das vítimas realizou o teste do tempo de coagulação e fez uso da soroterapia. As principais manifestações locais foram dor e edema. As principais manifestações sistêmicas foram vagais e neuroparalíticas. As complicações locais mais frequentes foram a infecção secundária e o déficit funcional. Quanto às complicações sistêmicas exibiu-se, sobretudo, a insuficiência renal e o edema generalizado. O perfil epidemiológico dos acidentes ofídicos no Rio Grande do Norte é semelhante aqueles observados em outros estados do Nordeste Brasileiro. Esses acidentes podem ser considerados como um problema de saúde pública no estado, devido à elevada frequência e ampla distribuição espacial dos casos. Isso revela a necessidade de desenvolver políticas públicas regionais, visando o controle preventivo desses acidentes, bem como o aprimoramento do atendimento médico das vítimas. / The snakebite is a neglected public health problem in tropical and subtropical countries. This study is a transversal investigation of the epidemiological characteristics of snakebites in the state of Rio Grande do Norte, Northeastern Brazil, from 2007 to 2014. Data was collected from the Injury Notification Information System database of the Health Department of Rio Grande do Norte. A total of 3,019 cases were analyzed. Snakebite cases were reported in 163 municipalities in the state, with the highest incidence in small municipalities in the central region. Snakebites occurred in every month of the year investigated, more frequently between March and August. Most cases involved men aged 20 to 59 years, workers and rural residents with low education level and mulattos. The cases occurred more frequently in rural areas. There was a predominance of envenoming involving Bothrops snakes. The bites mainly reached the extremity of the limbs. Most of the victims received medical assistance between 1 and 3 hours after the accident. The cases were mainly classified as mild and progressed to cure. 13 deaths have been reported. Most of the victims made the blood-clotting time test and made use of antivenom. The main local reactions were pain and swelling. The main systemic reactions were vagal and neuroparalytic. The most frequent local complications were infection secondary and functional deficit. As for systemic complications showed especially renal insufficiency and generalized edema. The epidemiological profile of snakebites in Rio Grande do Norte is similar to those observed in other states of the Brazilian Northeast. Snakebite may be considered as a public health problem in the state, due to the high frequency and high spatial distribution of the cases. This reveals the need to develop regional public policies aimed at preventive control of such injury, as well as medical care enhancement of the victims.

Submitted by Rosana Amâncio (rosana.amancio@ufcg.edu.br) on 2018-07-25T20:37:15Z No. of bitstreams: 1 JOSÉ FRANSCISDAVID BARBOSA BELMINO- DISSERTAÇÃO PPGCNBio 2015..pdf: 2603348 bytes, checksum: 2fbb701d116d617718c670099be997a9 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-25T20:37:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JOSÉ FRANSCISDAVID BARBOSA BELMINO- DISSERTAÇÃO PPGCNBio 2015..pdf: 2603348 bytes, checksum: 2fbb701d116d617718c670099be997a9 (MD5) Previous issue date: 2015-08-28 / CNPq / Os casos de acidentes ofídicos são um problema de saúde pública para países de regiões tropicais. O presente estudo é uma investigação retrospectiva que descreve e analisa as características epidemiológicas dos casos de acidentes ofídicos no Estado do Ceará, Brasil, de 2007 a 2013. Os dados foram coletados na Secretaria Estadual de Saúde do Ceará, utilizando a base de dados do Sistema de Informação de Agravos de Notificação. Foram analisados um total de 4 058 casos. Os acidentes foram distribuídos em todos os meses dos anos, ocorrendo com maior frequência entre os meses de março (n = 437) a julho (n = 479). A maioria dos casos afetou homens (n = 3 275), na faixa etária entre 20 e 29 anos (n = 696), com baixo nível de escolaridade (n = 1 821), pardos (n = 2 729), residentes (n = 3 327) e trabalhadores (n = 1 360) rurais. Os casos ocorreram predominantemente na zona rural (n = 3 623) e sem relação com o trabalho (n = 1 984). O gênero Bothrops foi responsável pelo maior número de casos (n = 3 319). O pé foi região do corpo mais atingida pelas picadas (n = 2 027). A maioria das vítimas foi atendida entre 1 e 3 horas após o acidente (n = 1 718). Ocorreram mais manifestações locais (n = 3 468) que sistêmicas (n = 785). O sintoma local mais frequente foi dor (n = 3 211) e o sistêmico foram as manifestações hemorrágicas (n = 262). A maior parte dos acidentes foram classificados como leve (n = 2 463) e evoluíram para cura (n = 3 564). A soroterapia foi administrada na maioria dos casos (n = 3 534). Os acidentes ofídicos no Estado do Ceará pode ser considerado um problema de saúde pública. Treinamento adicional para os profissionais de saúde parecem ser necessários para aprimorar a sua capacidade para coletar os dados epidemiológicos, bem para melhorar o atendimento as vítimas dos acidentes ofídicos. / The cases of snakebites are a public health issue for countries from tropical regions. This study is a retrospective research to describe and analyze the epidemiological characteristics of cases of snakebites in the State of Ceará, Brazil, from 2007 to 2013. Data was collected from the Injury Notification Information System database of the Health Department of Ceará. A total of 4,058 cases were analyzed. Snakebites were distributed in every month of the year, occurring most between the months from March (n = 437) to July (n = 479). Most cases affected young men (n = 3,275), aged between 20 and 29 years old (n = 696), with low educational level (n = 1,821), brown skin (n = 2,729), rural residents (n = 3,327) and workers (n = 1,360). The cases occurred predominantly in rural areas (n = 3,623) and unrelated to the work (n = 1 984). The genus Bothrops was responsible for the largest number of cases (n = 3,319). The part of the body most affected by the bites was the foot (n = 2,027). Most of the victims was attended between 1 and 3 hours after the accident (n = 1,718). There were more local events (n = 3,468) that systemic (n = 785). The most frequent site symptom was pain (n = 3,211) and systemic were hemorrhagic manifestations (n = 262). Most cases were classified as mild (n = 2,463) and were cured (n = 3,564). The antivenom was administered in most cases (n = 3,534). The snakebites in the State of Ceará may be considered an environmental health problem. Additional training for health professionals appear to be necessary to enhance their ability to collect epidemiological data and to improve the care of victims of snakebites.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-06-27Bitstream added on 2014-06-13T19:09:59Z : No. of bitstreams: 1 motta_yp_me_botfmvz.pdf: 1081354 bytes, checksum: b0200a48d1eec7085df0054b7dd38175 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O presente trabalho avaliou os aspectos clínicos, laboratoriais e histopatológicos da intoxicação experimental por Bothrops jararaca e Crotalus durissus terrificus em ratos Wistar e comparou o tratamento entre soro antiofídico isolado e o soro antiofídico associado ao extrato de Mikania glomerata. Os ratos foram distribuídos em 2 grupos: VB – veneno botrópico e VC- veneno crotálico. Os grupos foram divididos em 3 subgrupos G1 (controle), G2 (veneno + soro antiofídico), G3 (veneno + soro antiofídico + extrato de Mikania glomerata). O veneno das serpentes (10mg/kg) foi inoculado, via intramuscular, na face lateral da coxa do membro posterior esquerdo. O soro antiofídico foi administrado via intraperitonial e o extrato de Mikania glomerata foi administrado por gavage. Os animais foram submetidos a avaliações clínicas, hematológicas e bioquímica sérica em 3 momentos: (M1) 30 minutos após inoculação, (M2) 6 horas após inoculação e (M3) 24 horas após inoculação. A histopatologia foi realizada somente no momento M3. Nos grupos VB e VC, foram observados hipotermia, edema de membro esquerdo, e no grupo VB, foram observadas incoagulabilidade sangüínea e diminuição nos valores de número de hemácias, hemoglobina, proteína plasmática total e volume globular. Nos dois grupos, houve aumento de leucócitos, neutrófilos e diminuição de linfócitos. Também foi observada elevação nos valores de uréia, creatinina e creatina quinase. Os achados histopatológicos incluem: degeneração, edema, congestão e hemorragias renais e musculares, necrose de coagulação, degeneração hidrópica renal e necrose tubular aguda. A principal ação da Mikania glomerata foi a redução ou prevenção de lesões musculares no veneno botrópico e a redução ou prevenção de lesões musculares e renais como observadas à histopatologia, nos animais do grupo crotálico. / This study has evaluated clinical, laboratorial and histopathologic aspects of experimental poisoning by Bothrops jararaca and Crotalus durissus terrificus in Wistar rats and has compared the treatment between antiophidian serum and antiophidian serum plus the extract of Mikania glomerata. The rats were distributed in two groups: BV – Bothrops venom and CV - Crotalus venom. The groups were splited in 3 subgroups: G1 (control), G2 (venom + antivenon), G3 (venom + antivenin + extract of Mikania glomerata). The snake venoms (10mg/kg) were inoculated for via intramuscular, on a lateral face of the left posterior limb. The antivenin was applied intraperitoneal and the extract of Mikania glomerata was given by gavage. The animals were submitted to clinical and laboratory evaluations in 3 moments: (M1) 30 minutes after inoculation, (M2) 6 hours after inoculation and (M3) 24 hours after inoculation. Histopathology examination was performed only at M3. Rats from both groups (BV and CV) presented hypothermia, noticeable left limb edema. Also in the group BV, blood incoagulability and decrease in red blood cell counts, hemoglobin, total plasma protein and packed cell volume were detected. Both groups showed leukocytosis, neutrophilia and lymphopenia. It was also verified increases in urea, creatinine and creatine kinase. Degeneration, edema, congestion, kidney and muscle hemorrhages, coagulation necrosis, kidney hydropic degeneration and acute tubular necrosis were found on histopathologic results. The main effect of the extract of Mikania glomerata was to reduce or prevent muscle lesions for the Bothrops venom and to reduce or prevent muscle and kidney lesions as showed by histophalologic examination in animals from Crotalus group.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T20:11:40Z : No. of bitstreams: 1 santos_kr_me_botfmvz.pdf: 577779 bytes, checksum: f6cb1f6609857301bad4076f3bd221a7 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação para o Desenvolvimento da UNESP (FUNDUNESP) / A criação de serpentes em cativeiro vem se tornando atividade cada vez mais relevante, inicialmente para obtenção do veneno para produção dos soros antiofídicos e, mais recentemente, para o estudo de suas propriedades farmacológicas. Esta atividade, porém, tem esbarrado em alguns problemas, dentre os quais estão as doenças parasitárias que podem acometer estes répteis. Em regime de criação semi-extensiva, uma importante alteração observada é a presença de nematódeos do gênero Rhabdias em pulmão de serpentes. Particularmente, em Crotalus durissus terrificus, altas taxas de infecção pulmonar por estes nematódeos têm sido relatadas. Estudos sobre os efeitos da presença destes helmintos nos órgãos respiratórios de serpentes são escassos. O objetivo deste trabalho foi estudar as implicações da presença de nematódeos do gênero Rhabdias no pulmão de serpentes C. d. terrificus, através de avaliação histopatológica, microbiológica e hematológica de serpentes parasitadas e não parasitadas. Na análise histopatológica das amostras de pulmões de serpentes parasitadas observou-se epitélio e parênquima pulmonar, apresentando infiltrado de células granulocíticas e infiltrado mononuclear. Essas alterações também foram observadas em alguns animais não parasitados, mas em menor grau (p < 0,05). Na análise microbiológica de animais parasitados, foram isoladas bactérias gram-negativas das seguintes espécies: Citrobacter divergens, Burlkholderia cepacia, Stenotrophomonas maltophilia, Proteus vulgaris, Enterobacter sakazakii, Enterobacter ammnigenus, Pseudomonas aeruginosa, Pantoea spp., Providencia rettgeri. Nos pulmões de animais não parasitados foram identificadas as seguintes espécies: Burlkholderia cepacia, Pseudomonas fluorescens, Acinetobacter baumanii. Em relação aos parâmetros hematológicos foi observado aumento... . / Snake breeding in captivity is becoming more and more important, initially to extract venoms for producing antivenom serum and, more recently, to study their pharmacological properties. This activity, however, has encountered some problems, including parasitic diseases that can attack them. In semi-extensive breeding systems, Rhabdias genus nematodes have been found in snake lung. High lung infection rates from these nematodes have been reported in Crotalus durissus terrificus. Studies on the effects of these helminths in the snake respiratory system are scarce. Our objective was to study the implications of nematodes of Rhabdias genus in C. d. terrificus lung through histopathological, microbiological, and hematological analysis of snakes with and without the parasite. Pulmonary parenchyma and epithelium with acidofilic granulocytic and mononuclear infiltrates were observed in histopathological analysis of parasite infested snake lung. These alterations were also observed in some non infested animals, but in a smaller degree (p<0.05). Microbiological analysis of infested animals revealed gram-negative bacteria: Citrobacter divergens, Burlkholderia cepacia, Stenotrophomonas maltophilia, Proteus vulgaris, Enterobacter sakazakii, Enterobacter ammnigenus, Pseudomonas aeruginosa, Pantoea spp., Providencia rettgeri. In non infested lungs, the following species were indentified: Burlkholderia cepacia, Pseudomonas fluorescens, Acinetobacter baumanii. In relation to hematological parameters, increased plasmatic protein, decreased lymphocytes and normal red blood cell values were observed in parasite infested animals. We concluded that the nematodes of the genus Rhabdias cause significant health problems in snakes and so, all infected animal should be treated when they are maintained in captivity.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:12:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000382367-Texto+Completo-0.pdf: 1512459 bytes, checksum: 7aa97dd4baa9710ef6d3785f21cfed9c (MD5) Previous issue date: 2005 / The analysis of variation of Echinanthera occipitalis (Jan, 1863) was made on 255 specimens. The species presented variation in the head and neck coloration indicating geographic variation and allowing the description of a new species. After statistical treatment of the external characters and analysis of the hemipeniana morphology, it was evidence that E. occipitalis is composed by groups of species formed by three different taxa, which informally is called occipitalis group. This group is composed by the taxa: E. occipitalis sensu stricto, from northeastern Brazil; E. miolepis (Boettger, 1891), revalidated here; and Echinanthera sp. n., described for the easter Brazilian Amazonia in Para State. / Foi realizada a análise da variação morfológica de Echinanthera occipitalis (Jan, 1863) baseada em 255 exemplares. A espécie apresentou variação na coloração da cabeça e do pescoço indicando variação geográfica e possibilitando a descrição de uma nova espécie. Após tratamento estatístico dos caracteres externos e análise da morfologia hemipeniana, constatou-se que E. occipitalis é formada por um grupo de espécies formado por três táxons, o qual tratamos informalmente como grupo occipitalis. Esse grupo é composto por: E. occipitalis sensu stricto, própria da região Nordeste do Brasil; E. miolepis (Boettger, 1891), revalidada neste trabalho; e Echinanthera sp. n., ocorrente no leste da Amazônia brasileira, Estado do Pará.

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:12:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000379490-Texto+Completo-0.pdf: 2432240 bytes, checksum: 754b0e0f479a79dbcde2d66ac779b3da (MD5) Previous issue date: 2006 / The present study deals with composition and natural history of a snake community at primary forest reserve ( 150 ha) in the selective logging area of the Continental Farm (11° 24’49,9” S e 55° 19’ 45,1” W), in the Matas Secas de Mato Grosso ecorregion, southwest of Claudia, Mato Grosso state, focusing on: species richness, relative abundance, habitat use, diel and seasonal activity, diet and reproduction. The data are based on 250 non consecutive days of fieldwork, from April 2002 to June 2004, encompassing 18 field trips to the locality. Fieldwork included four sampling methods: pitfall traps with drift fences (AIQ), time constrained search (PVLT), incidental encounters (EO), and local collectors (CT). The AIQ effort was 4200 h/pitfall (=117600 hours to 28 pitfall), and captured 123 snakes (0,001 snake/pitfall/hour or 0,72 snake/pitfall/month). The PVLT were effectuated from June 2003 to June 2004, the mean rate of the search was five hour-man/day, totalizing 945,2 hour-man (805,3 during day and 139,9 during the night), and captured 41 snakes (13 species) (0,04 snake/hour-man; night = 0,05 and day = 0,007; or 1,04 snake/day/observer). The EO was measured to workfield per day (250 non consecutive days), the effort was 6000 hour-field, and captured 108 snakes (33 species) (0,043 snake/day-field/man). The CT included the snakes captured at three local collectors. This method captured 43 snakes (18 species) during 775 days (0,0007 snake/hour/collector). We recorded 315 specimens of the 39 species, distributed in five families (Typhlopidade, Boidae, Colubridae, Elapidae e Viperidae). The composition of the snake community is more related to those from Amazonian habitats forest, principally the oriental area. Considering areas that were studied at Amazônia region, Claudia is the most related to the Cerrado. Oxyrhopus melanogenys was the dominant specie (9,8%).The distribution abundance was equilibrated and was statistically adjusted to three models: geometric series, lognormal, and Broken Stick. The activity is mainly nocturnal and the soil and litter exploration is the most frequent pattern. The relative abundance is related to monthly precipitation and averages of minimum temperatures. The AIQ and PVLT mean rate of snake capture, and the number of female and male captured also showed quantitative variation, although only female capture rate can be related with the precipitation (positively) and with the difference between the maximum and minimum temperature (negatively); these show that there is more female movement in humid and more stable thermal period. The most frequent food items consumed by the snakes were lizards, anurans, and mammals (in this order). They also eat invertebrates (18%), being centipedes the principal (11%). Reproduction is aseasonal. In the Claudia region the number of females involved in reproductive events and juveniles captured did not change between dryness and rainy periods. However, the analysis of the reproductive cycle of particular species showed a clear seasonality, indicating that the general aseasonal pattern of the community results from the superposition of asynchronic seasonal cycles of different species, each one variable in its extension. / O presente estudo teve como objetivos básicos conhecer a composição, estrutura e história natural de uma comunidade de serpentes de uma reserva de floresta primária (≈150 ha) localizada em área de corte seletivo de madeira da Fazenda Continental (11° 24’49,9” S e 55° 19’ 45,1” W), ecorregião Florestas Secas de Mato Grosso, no sudoeste do município de Claudia, centro-norte de Mato Grosso. Enfocou a riqueza e a abundância relativa das espécies, a utilização do ambiente (hábitat e microhábitat), os padrões de atividade diária e sazonal, a dieta e a reprodução das serpentes. Entre abril de 2002 e junho de 2004, foram realizadas 18 campanhas, totalizando 250 dias não consecutivos de trabalho de campo. Foram utilizados quatro métodos de amostragem: armadilhas de interceptação e queda (AIQ), procura visual limitada por tempo (PVLT), encontros ocasionais (EO) e coletas por terceiros (CT). As AIQ permaneceram abertas por 175 dias; resultaram em um esforço de 4200 h (= 117600 horas-tambor) e no registro de 123 indivíduos (0,001 serpente/hora/tambor) de 27 espécies. A PVLT, efetuada ao longo de 136 dias, de junho de 2003 a junho de 2004, correspondeu em média a cinco horas-homem de procura diária, totalizou 945,2 horas-homem (805,3 no período noturno e 139,9 no diurno) e registrou 41 indivíduos de 13 espécies (0,04 serpente/hora/homem; noite = 0,05 e dia = 0,007). Os EO foram quantificados por dia de trabalho de campo (250 dias-campo), e resultaram no registro de 108 indivíduos de 33 espécies (0,43 serpente/dia-campo). A CT incluiu as serpentes coletadas por três colaboradores residentes na área e registrou 43 indivíduos de 18 espécies em 775 dias (0,017 serpente/dia/colaborador). No total foram registrados 315 indivíduos de 39 espécies, distribuídas em cinco famílias (Typhlopidade, Boidae, Colubridae, Elapidae e Viperidae).A composição de espécies da comunidade é mais assemelhada às de outras áreas florestadas da Amazônia, principalmente da porção oriental, que às áreas de Cerrado. Entretanto, dentre as demais áreas amazônicas estudadas, a comunidade de Claudia é a que mais se assemelha às de áreas de Cerrado. A espécie dominante foi Oxyrhopus melanogenys, com 9,8% dos registros. A distribuição de abundância da comunidade mostrou-se equilibrada e se ajustou estatisticamente a três modelos: série geométrica, lognormal e Brocken Stick. Predominaram serpentes de atividade noturna que exploram o solo e a serapilheira. A abundância relativa variou sazonalmente e apresentou correlação positiva com a precipitação mensal e as médias mensais da temperatura mínima. Também houve variação sazonal na taxa de captura de AIQ e PVLT e nas capturas de machos e fêmeas. A movimentação de fêmeas foi correlacionada diretamente com a precipitação pluviométrica e inversamente com a variação da diferença entre médias mínimas e máximas mensais, indicando maior movimentação no período mais úmido e de maior estabilidade térmica. A utilização de recursos pelas espécies da comunidade foi diversificada, sendo que os itens alimentares mais consumidos foram lagartos, anuros e mamíferos, nessa ordem. Invertebrados estiveram presentes em cerca de 18% das amostras; dentre eles, a categoria mais recorrente foi representada por quilópodes (11%). O número de fêmeas em eventos reprodutivos e a captura de juvenis não diferiu significativamente entre a estação seca e a chuvosa, e a distribuição temporal dos eventos reprodutivos indicou a ocorrência de um padrão reprodutivo assazonal para a comunidade como um todo. Contudo, foram identificadas espécies com ciclos sazonais bem definidos, o que indica que a assazonalidade registrada resulta da sobreposição de ciclos reprodutivos de diferentes espécies e extensões (sazonais e assazonais).

As serpentes da tribo Pseudoboini apresentam grande diversidade quanto à sua ecologia, são consideradas um grupo monofilético e possuem uma filogenia conhecida. A partir disso, tornou-se possível a análise, sob um contexto evolutivo, das possíveis associações entre a morfologia e a ecologia neste grupo. Neste estudo, analisamos a dieta da tribo, bem como, testamos hipóteses de possíveis relações adaptativas entre a morfologia e a dieta e entre a morfologia e o uso do ambiente arborícola, e exploramos a evolução destes aspectos em serpentes da tribo. Nove espécies foram consideradas generalistas e 13, especialistas, sendo seis em lagartos, três em pequenos mamíferos, duas em serpentes, uma em ovos de lagarto e uma em ovos de ave. Um aumento no consumo de pequenos mamíferos, não esteve associado com um aumento da robustez e do volume da cabeça. Especializações em lagartos, pequenos mamíferos e serpentes surgiram independentemente em táxons terminais ao menos duas vezes durante a história evolutiva da tribo. A especialização em ovos de ave é uma autapomorfia de Rhachidelus brazili. A robustez decresceu no ancestral do gênero Siphlophis, e aumentou substancialmente em R. brazili. O tamanho da cabeça decresceu no ancestral do gênero Siphlophis e em Oxyrhopus petola e aumentou substancialmente em Phimophis guianensis, no ancestral de O. trigeminus e O. rhombifer e em R. brazili. Siphlophis cervinus, S. compressus, S. pulcher e D. anomalus foram consideradas espécies semi arborícolas. A reconstrução do hábito semi-arborícola indica que este surgiu independentemente pelo menos duas vezes durante a diversificação do grupo. Não foram encontrados indícios de efeito da freqüência do uso da vegetação sobre o tamanho do corpo, a robustez, o formato da cabeça e o número de vértebras por unidade corporal. Entretanto, o hábito arborícola parece ter levado a um aumento no tamanho da cauda. O tamanho corporal diminuiu substancialmente em P. guianensis e aumentou substancialmente em Clelia rustica e no ancestral de C. clelia e C. plumbea. Já o número de vértebras por unidade corporal diminuiu substancialmente em C. rustica, no ancestral de C. clelia e C. plumbea, e em Pseudoboa haasi; aumentou substancialmente no ancestral de O. trigeminus e O. rhombifer, e em O. melanogenys e P. guianensis. O tamanho da cauda diminuiu significativamente em C. rustica, Boiruna maculata e P. haasi e aumentou consideravelmente no ancestral do gênero Siphlophis, O. petola, D. anomalus, R. brazili e no ancestral do gênero Pseudoboa. A largura da cabeça diminuiu substancialmente em Pseudoboa neuwiedii e aumentou substancialmente em S. compressus, P. guianensis e em B. maculata. As ausências de relações possivelmente adaptativas podem estar ligadas a uma forte inércia filogenética e/ou ao efeito de outros agentes seletivos. Um ancestral morfologicamente adequado a uma dieta baseada em pequenos mamíferos e ao uso da vegetação também pode ter influenciado os resultados. O conhecimento do grupo externo da tribo Pseudoboini ajudaria a esclarecer ainda mais as relações entre morfologia e ecologia nestas serpentes. / Snakes of the tribe Pseudoboini are ecological diversity, considered as a monophyletic group and have a known phylogeny. Thus, the analyses of possible associations between the morphology and the ecology of this group in an evolutionary framework became possible. In the present study, we analyze the diet of pseudoboine species, and we test hypotheses of possible adaptative relationships between morphology and diet, and between morphology and microhabitat use in pseudoboine snakes. We also explore how these traits evolved during the diversification of the tribe. Nine species were considered as diet generalists and 13, as diet specialists, being six lizard specialists, three small mammal specialists, two snake specialists, one a lizard egg specialist, and one a bird egg specialist. An increase in the consumption of small mammals was not associated with an increase in robustness and head volume. Lizard, small mammal and snake specializations occurred independently at least twice in terminal taxa during the diversification of the tribe. A specialization in bird eggs seems to be an autapomorphy of Rhachidelus brazili. Robustness decreased in the ancestor of Siphlophis species, and increased substantially in R. brazili. Head volume descreased in the ancestor ofSiphlophis species and in Oxyrhopus petola, and increased substantially in Phimophis guianensis, in the ancestor of O. trigeminus and O. rhombifer and in R. brazili. Siphlophis cervinus, S. compressus, S. pulcher and D. anomalus were considered as semi-arboreal. The semi-arboreal habit reconstruction indicates that this habit evolved independently at least twice during the diversification of the group. We did not find indications of the effect of vegetation use on body size, robustness, head shape and the number of ventral scales per body unit. However, vegetation use seems to have led to an increase in tail length. Body size substantially decreased in P. guianensis and substantially increased in Clelia rustica and in the ancestor of C. clelia and C. plumbea. The number of vertebrae per body unit decreased substantially in C. rustica, in the ancestor of C. clelia and C. plumbea, and in Pseudoboa haasi. It substantially increased in the ancestor of O. trigeminus and O. rhombifer, and in O. melanogenys and P. guianensis. Tail length significantly decreased in C. rustica, Boiruna maculata and P. haasi, and increased substantially in the ancestor of the genus Siphlophis, in O. petola, D. anomalu ,R. brazili and in the ancestor of Pseudoboa spp.. Head width decreased substantially in Pseudoboa neuwiedii and increased significantly in S. compressus, P. guianensis and in B.maculata. Strong influence of phylogenetic inertia and/or the effect of alternative selective agents could be related to the absences of these possible adaptative 69 relationships. An ancestor with a morphology adequate to a diet based on small mammals and to arboreality could also have influenced the results. Knowing the outgroup of the tribe Pseudoboini would help to further clarify the relationships between morphology and ecology of these snakes.

A superfamília das fosfolipases A2 (FLA2) é composta por proteínas dotadas de propriedades diferenciadas que as tornam capazes de apresentar distintas atividades biológicas, além de sua atividade catalítica. Esta diversidade funcional é intrigante devido à alta similaridade de seqüência primária e de estrutura entre essas proteínas. O principal objetivo deste trabalho é o desenvolvimento de uma metodologia para a predição de atividades biológicas específicas em FLA2 de peçonha de serpentes a partir da análise de seqüências primárias. A metodologia desenvolvida compreende: a) seleção de seqüências anotadas quanto à função ou atividade biológica que desempenham; b) detecção e validação estatística de motivos de seqüência relacionados à atividade estudada; e c) construção de Modelos Ocultos de Markov (MOMs) representando cada motivo. MOM consiste em uma modelagem estatística que tem sido aplicada com sucesso em diversas áreas onde se faz necessária a detecção e representação de padrões de informação; por sua base matemática robusta e formal, pode ser utilizada na automação deste tipo de processo. A metodologia foi testada para duas atividades de FLA2 de peçonha de serpente: neurotoxicidade e miotoxicidade. Para as FLA2 neurotóxicas, foram detectados seis motivos conservados, dos quais três foram validados estatisticamente como sendo adequados na discriminação de seqüências neurotóxicas de não neurotóxicas. Para as FLA2 miotóxicas, foram detectados seis motivos conservados, dos quais quatro foram validados. Os MOMs dos motivos validados podem ser usados na predição de atividade neurotóxica e miotóxica. As relações entre seqüência, estrutura, função e evolução das FLA2s são discutidas. Os dados obtidos foram coerentes com a hipótese apresentada por Kini (2003), da existência de diferentes sítios farmacológicos na superfície das FLA2, interagindo independente ou cooperativamente com diferentes receptores, para gerar as diversas funções biológicas observadas. Por não haver, até o momento, qualquer ferramenta automatizada para a predição de função biológica de FLA2, os resultados deste trabalho foram a base para a construção de uma ferramenta (disponível em www.cbiot.ufrgs.br/bioinfo/phospholipase) para a identificação de miotoxicidade e neurotoxicidade em FLA2.

Fosfolipases A2 constituem uma família de enzimas interfaciais que catalisam a hidrólise de fosfolipídios de membrana na posição sn-2. Nas fosfolipases cataliticamente ativas (FLA2 D49), o resíduo Asp49 possui um importante papel na coordenação do íon cálcio divalente que auxilia na estabilização do intermediário tetraédrico. Nesse trabalho, foram realizadas simulações por dinâmica molecular (DM) de uma fosfolipase secretada de veneno de Agkistrodon halys pallas utilizando como solventes: água, metanol e octanol. Devido à baixa afinidade do íon cálcio em ambientes aquosos, diferentes forças de restrição foram aplicadas nesse íon e mediu-se o comportamento desse, através da variação da sua distância em relação ao resíduo Asp49. Todas as simulações foram realizadas por um período de tempo de 5 ns, somando um total de 45 ns de simulação, utilizando o pacote GROMACS implementado com o campo de força GROMOS96 43a2. Os resultados mostraram uma série de mudanças conformacionais importantes na fosfolipase durante a sua aproximação à superfície da membrana, como o aumento da área acessível ao solvente e a reorientação de cadeias laterais de resíduos com importância catalítica. Os dados obtidos com as simulações foram utilizados para propor um modelo interfacial de ativação para FLA2sv. Desta forma, os principais eventos associados com a ativação de FLA2sv envolvem: a) a reorganização da alça de coordenação de cálcio na proximidade da membrana, seguida pela captura do íon Ca2+; b) a reorientação da cadeia lateral de Trp31, que irá definir um novo sítio de especificidade para a cadeia fosfolipídica; c) a redução da distância entre os resíduos His48 e Asp49, para aumentar a nucleofilicidade da His48; d) a reorientação da cadeia lateral do resíduo Lys69 concomitante com a projeção da alça-69 para o solvente, resultando no aumento da acessibilidade ao sítio ativo. Assim, esses resultados, em adição ao conhecimento bioquímico e a dados cristalográficos, abrem acesso a uma compreensão mais detalhada dos mecanismos moleculares associados com a ação de fosfolipases A2. / Phospholipases A2 (PLA2) are interfacial active enzymes that catalyze hydrolysis at the sn-2 position of membrane phospholipids. In the catalytic active PLA2 (D49 PLA2), the Asp49 residue plays a key role in the coordination of the calcium ion that assists in the stabilization of the transition state intermediary. Despite the catalytic importance of Ca2+, it has low affinity for the sPLA2 active site. Molecular dynamics simulations of a D49 svPLA2 from Agkistrodon halys pallas were performed in aqueous environment, methanol and octanol. Because of the svPLA2 low affinity for the calcium ion in aqueous systems, different restrain forces were applied on Ca2 + and evaluated with respect to ion coordination with key residues. All simulations were performed for a time period of 5 ns using the GROMACS package with GROMOS96 43a2 force field. The results have showed a series of important conformation changes of sPLA2v during its approaches to membrane surface, as the increase of the solvent accessible surface area and the reorientation of side chains of residues of catalytic importance. Analyses of the simulations data were utilized to propose an interfacial activation model for svPLA2. According, the principal events associated with svPLA2 activation involve: a) the reorganization of calcium binding loop at membrane proximity followed by the Ca2+ up take; b) side chain reorientation of Trp31, which will define a new specificity pocket for the phospholipid chain; c) reduction of the distance between His48 and Asp49, in order to increase the nucleophilicity of His48; d) side chain reorientation of Lys69 concomitant with the projection of the 69-loop to solvent resulting in an increase of the active site accessibility. These results, in addition with biochemical and crystallographic data knowledge, open access to a more detailed understanding for the molecular mechanism associated with the interfacial activation of phospholipases A2.

Orientador: Lea Rodrigues Simioni / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T07:49:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 OliveiraeSilva_SaraguaciHernandezde_D.pdf: 978243 bytes, checksum: 7e35557ec13bc4cdfff9957cdfcaf502 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Este trabalho está dividido em três momentos, o primeiro trata-se de um estudo comparativo do efeito dos venenos brutos de Crotalus durissus terrificus; C. d. ruruima; C. d. cascavella e C. d. collilineatus, bem como da crotoxina e da crotamina sobre a junção neuromuscular. O veneno C. d. ruruima foi purificado pela primeira vez através de HPLC em uma coluna Protein Pack SW 300, onde foi obtida a crotoxina e a crotamina (os demais venenos já foram purificados e os dados publicados). O estudo neurotóxico foi realizado em duas preparações nervo-frênico diafragma de camundongo e biventer cervicis de pintainho. Dos experimentos realizados em mamíferos e aves obteve-se o efeito neurotóxico esperado nas concentrações de 10 mg/ml. Os venenos brutos e as crotoxinas das serpentes C. d. terrificus e C. d. ruruima em preparações de mamífero produziram aumento da amplitude seguido de bloqueio total da resposta contrátil, diferentemente dos venenos e das crotoxinas das serpentes C. d. cascaavella e C. d. collilineatus, que causaram apenas bloqueio total neuromuscular. Em preparações de aves os quatro venenos e crotoxinas estudados induziram bloqueio total, porém sem causar facilitação. As crotaminas-positivas, estudadas em nervo-frenico diafragma de camundongo das serpentes C. d. terrificus e C. d. ruruima, na concentração de 10 mg/ml, causaram efeito facilitatório retornando à amplitude controle após 120 min de incubação. Ao recombinar a crotoxina 10 mg/ml e crotamina 5 mg/ml houve o aumento da amplitude seguido de bloqueio total da resposta contrátil. Nas preparações ensaiadas em aves, apresentou um efeito facilitatório fugaz seguido de bloqueio neuromuscular total. No segundo momento, as isoformas de crotapotina e PLA2 isoladas a partir da crotoxina dos venenos das serpentes de C. d. terrificus, C. d. cascavella e C. d. collilineatus, foram ensaiadas em mamíferos e aves nas concentrações de 10 mg/ml. As crotapotinas e PLA2 isoladas não causaram diferenças significativas em relação ao controle em preparações de mamíferos. O mesmo não ocorrendo com as PLA2 testadas em aves que causaram bloqueio neuromuscular, efeito este não esperado. Após a recombinação (5 mg/ml crotapotina) + (5 mg/ml PLA2), o complexo crotoxina causou bloqueio neuromuscular total em ambas preparações. Na terceita etapa deste trabalho, foram produzidos antivenenos específicos contra o veneno bruto e crotoxina do veneno C. d ruruima e PLA2 do veneno de C. d. collilineatus. O título de anticorpos e a especificidade dos antivenenos produzidos foram avaliados por ELISA. A neutralização da atividade neurotóxica foi avaliada em preparações biventer cervicis de pintainho. A capacidade neutralizante dos antivenenos produzidos em coelhos foi comparável ao soro anticrotálico comercial contra o veneno e crotoxina na proporção 1:1. O veneno, a crotoxina e os antivenenos estudados induziram liberação de CK significativamente diferente do controle / Abstract: This work is divided at three moments, the first one if terrificus deals with a comparative study of the effect of the crude venoms of Crotalus durissus; C. d. ruruima; C. d. cascavella and C. d. collilineatus, as well as of the crotoxin and the crotamine on the junction neuromuscular. Venoms C. d. ruruima was purified for the first time through HPLC in a column Protein Pack sw 300, where it was gotten the crotoxin and the crotamine (the too much venoms already had been purified and the published data). The neurotoxic study nerve-frênico was carried through in two preparations diaphragm of mouse and to chick biventer cervicis. The experiments carried through in mammals and birds the waited neurotoxic effect in the was gotten concentrations of 10 mg/ml. The crude venoms and the crotoxin of rastnaks C. d. terrificus and C. d. ruruima in preparations of mammal had produced increase of the followed amplitude of complete blockade of the contractil reply, differently of the venoms and the crotoxin of rastnakes C. d. cascavella and C. d. collilineatus, that they had caused only complete blockade to neuromuscular. In preparations of birds the four studied venoms and crotoxin had induced complete blockade, however without causing facilitation. The crotamine-positive, studied in nerve-frenico diaphragm of mouse of snakes C. d. terrificus and C. d. ruruima, in the concentration of 10 mg/ml, had caused facilitatori effect returning to the 120 after amplitude have controlled min of incubation. When crotoxin being recombined 10 mg/ml and 5 crotamine mg/ml had the increase of the followed amplitude of complete blockade of the contractil reply. In the preparations assayed in birds, fast followed of blockade presented a facilitatori effect to neuromuscular complete. At as the moment, isoforms of isolated crotapotin and PLA2 from the crotoxin of the venoms of the rastnakes of C. d. terrificus, C. d. cascavella and C. d. collilineatus, had been assayed in mammals and birds in the concentrations of 10 mg/ml. Isolated crotapotin and PLA2 had not caused significant differences in relation to the control in preparations of mammals. The same not occurring with the PLA2 tested in birds that blockade caused to neuromuscular, effect this not waited. After the recombination (5 mg/ml crotapotin) + (5 mg/ml PLA2), the crotoxin complex caused blockade to neuromuscular complete in both preparations. In the third stage of this work, specific antivenoms against crotoxin the crude venoms and of C. d. ruruima had been produced and PLA2 of the poison of C. d. collilineatus. The heading of antibodies and the especific of the produced antivenoms had been evaluated by ELISA. The neutralization of the neurotoxic activity was evaluated in preparations to chick biventer cervicis. The neutralizing capacity of the antivenoms produced in rabbits was comparable to commercial the anticrotalic serum against the venoms and crotoxin in ratio 1:1. The venoms, the crotoxin and the antivenoms, studied had induced significantly different release of CK of the control / Doutorado / Doutor em Farmacologia