XIMENES, Rafael Matos. Avaliação da atividade da cabenegrina A-II frente às alterações bioquímicas e hematológicas e aos efeitos pressóricos induzidos pelo veneno de Bothrops jararacussu em ratos. 2009. 129 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-05-09T15:35:37Z No. of bitstreams: 1 2009_dis_rmximenes.pdf: 2974617 bytes, checksum: f7ad408403edbf0955db5b8ac187add2 (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-05-14T16:01:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_dis_rmximenes.pdf: 2974617 bytes, checksum: f7ad408403edbf0955db5b8ac187add2 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-14T16:01:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_dis_rmximenes.pdf: 2974617 bytes, checksum: f7ad408403edbf0955db5b8ac187add2 (MD5) Previous issue date: 2009 / Medicinal plants against snakebite are widespread used in folk medicine in the world. This practice may be useful as a first treatment of snakebite victims, mainly in places where antivenom immunotherapy is not promptly available. Pterocarpans, especially the cabenegrins A-I and A-II, had their antiophidic activity proved by several experimental models. This work aimed to fix one efficient methodology to study biochemical and hematological alterations induced by Bothrops jararacussu venom in rats and verify the effects of cabenegrin A-II in these alterations, besides studying the effects of cabenegrin A-II in pressure changes induced by this venom. Indicatives parameters for renal function (creatinin, urea and uric acid), hepatic function (AST and ALT) and muscle injury (CK), besides glucose, electrolytes and hemogram were analyzed. Biochemical and hematological changes varied according the way of administration of the venom, variations related to the rate of absorption of the venom. In this case, intramuscular way was chosen to study the effects of cabenegrin A-II, where cabenegrin A-II was able to block the major part of biochemical and hematological effects induced by B. jararacussu venom, showing an improve in renal and hepatic function and less muscle injury than control group. On pressure changes induced by B. jararacussu venom, cabenegrin A-II blocked the hypotensive effect of the venom, indicating enzymatic inhibition promoted by this prenylated pterocarpan. These data, added to previous studies with this class, indicate prenylated pterocarpans as lead compounds in research of new antivenom drugs. / O uso de plantas medicinais no tratamento de picadas de serpentes é amplamente difundido nas culturas populares ao redor do mundo. Esta prática pode ser útil no tratamento primário de vítimas de acidentes ofídicos, principalmente em áreas onde o soro antiveneno não está prontamente disponível. Os pterocarpanos, especialmente as cabenegrinas A-I e A-II, tiveram sua atividade antiofídica comprovada em diversos modelos experimentais. Esta dissertação objetivou estabelecer uma metodologia para estudos das alterações bioquímicas e hematológicas induzidas pelo veneno de B. jararacussu em ratos e verificar o efeito da cabenegrina A-II nestas alterações, além de verificar o efeito da cabenegrina A-II nas alterações pressóricas induzidas pelo veneno. Foram analisados parâmetros indicativos da função renal (creatinina, uréia e ácido úrico), da função hepática (AST e ALT), de dano muscular (CK), além de glicose, eletrólitos e hemograma. As alterações bioquímicas e hematológicas induzidas pelo veneno variaram conforme a via de administração, variações estas relacionadas à amplitude de absorção do veneno. Neste estudo, a via intramuscular foi escolhida para os estudos com a cabenegrina A-II. Neste modelo experimental, a cabenegrina A-II foi capaz de reverter à maioria dos efeitos bioquímicos e hematológicos produzidos pela administração do veneno de B. jararacussu, apontando para uma melhora considerável da função renal e hepática dos animais, bem como um dano muscular menos pronunciado. Nas alterações pressóricas causadas pelo veneno de B. jararacussu, a cabenegrina A-II bloqueou o efeito hipotensor do veneno, um indicativo de inibição enzimática promovida por este pterocarpano prenilado. Estes dados, acrescentados a estudos prévios realizados com essas substâncias, as colocam como uma alternativa de protótipos na busca de novos agentes antiveneno.

ALVES, Natacha Teresa Queiroz. Efeito do extrato das raízes de Bredemeyera floribunda Willd sobre a ação local do veneno de Bothrops jararacussu em camundongos. 2013. 96 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-06-03T13:09:17Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_ntqalves.pdf: 3590591 bytes, checksum: c3151ac025ccd0d99b85c8018cd11480 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-06-03T13:09:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_ntqalves.pdf: 3590591 bytes, checksum: c3151ac025ccd0d99b85c8018cd11480 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-06-03T13:09:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_ntqalves.pdf: 3590591 bytes, checksum: c3151ac025ccd0d99b85c8018cd11480 (MD5) Previous issue date: 2013 / Snakebites are an important public health burden. In Brazil, most of these accidents are caused by snakes of the Bothrops genus that can lead to development of local tissue damage, including edema and hemorrhaging. Traditional antivenom therapy acts in the neutralization of systemic effects, but it has limited effectiveness of neutralizing the local effects. The antivenom activity was evaluated of aqueous extract of Bredemeyera floribunda (Bfe) through inhibition of phospholipase, proteolytic, edematogenic, hemorrhagic, necrotizing and myotoxic actions promoted by the total Bothrops jararacussu venon (Bjuv) in mice. The acute toxicity and the viability cell of the Bfe in RAW 264.7 cells were determined too. The BfE showed to be nontoxic in mice and it showing LD50 greater than the test dose (2000 mg / kg). The Bfe increased cell viability in RAW 264.7 cells. The phospholipase and proteolytic activities induced vBju were inhibited in vitro by EBF in 1:1, 1:2 and 1:3 ratios. 1:2 (Bjuv /Bfe; w/w). The Bfe also inhibited significantly edema induced by Bjuv, with a reduction of the peak oedematogenic in the venom and carrageenan groups, mainly in the group pretreated i.p. The Bfe decreased considerably hemorrhagic, necrotizing and myotoxic actions by Bjuv. Compounds isolated from plants popularly used to treat snake poisoning show good alternative to complement the antivenom treatment. Constituents of the Bfe may act by binding to Bjuv components as phospholipase A2 and their homologues and matalloproteases too, partly blocking the action of these proteins, reducing edema and phospholipasic activities, but also hemorrhaging and proteolytic activities. So there is real antiophidic activity of the extract, making necessary to study it with isolated components of the Bfe and Bjuv to achieve better evidences of the effects and possible mechanisms. / Acidentes ofídicos representam considerável problema de saúde pública. No Brasil, a maior parte desses acidentes é causada por serpentes do gênero Bothrops, que podem levar ao desenvolvimento de dano tecidual local, incluindo edema e hemorragia. A soroterapia tradicional atua na neutralização de efeitos sistêmicos, mas tem eficácia limitada contra efeitos locais. Compostos isolados de plantas usadas popularmente para tratar envenenamentos ofídicos mostram-se uma boa alternativa a fim de se complementar o tratamento. Avaliou-se a atividade antiofídica do extrato aquoso de Bredemeyera floribunda (Ebf) através de testes de inibição de atividades fosfolipásica, proteolítica, edematogênica, hemorrágica, necrosante e miotóxica promovidas pelo veneno total de Bothrops jararacussu (vBju) em camundongos. Também foi realizado o teste de toxicidade aguda do Ebf e de viabilidade celular em células RAW 264.7. O EBf mostrou-se átoxico em camundongos, apresentando DL50 maior do que a dose teste (2000 mg/kg). O EBf aumentou a viabilidade celular em células RAW 264.7. As atividades fosfolipásica e proteolítica induzidas pelo vBju foram inibidas in vitro pelo EBf nas razões de 1:1. 1:2 e 1:3 (vBju/EBf) (massa/massa). O EBf também inibiu significativamente edema induzido por vBju, havendo redução do pico edematogênico máximo do veneno e da carragenina, nos grupo pré-tratado i.p e pré-incubado. O EBf diminuiu consideravelmente as ações hemorrágica, necrosante e miotóxica do vBju. Constituintes do EBf, podem estar se ligando a componentes do vBju como as fosfolipases A2 e seus homólogos e também as metaloproteases, bloqueando parcialmente a ação dessas enzimas e diminuindo as atividades fosfolipásica e edematogênica, como também, as ações hemorrágica e proteolítica do veneno. Verifica-se, então, atividade antiofídica do extrato, fazendo-se necessário o estudo com componentes isolados do EBf e do vBju a fim de se conseguir melhor comprovação dos efeitos e possíveis mecanismos.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-graduação em Farmácia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-26T02:49:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 295819.pdf: 614658 bytes, checksum: fdb9e8caeb838ce57db3754485ca2b62 (MD5) / Atualmente ocorrem aproximadamente 22000 acidentes ofídicos por ano no Brasil, sendo no estado de Santa Catarina registrados pelo Centro de Informações Toxicológicas localizado no Hospital Universitário da Universidade Federal de Santa Catarina, 618 ocorrências no ano de 2009. O gênero Bothrops é responsável por aproximadamente 90% destes acidentes. Nenhum caso de ofidismo por Bothrops tem registro na literatura relativamente ao estabelecimento do chamado estresse oxidativo, somente em outros ofídios peçonhentos não pertencentes ao gênero, onde ocorrem igualmente processos inflamatórios relacionados. O presente trabalho consiste na análise do estresse oxidativo e monitoramento do status antioxidante nos processos de dano presente no sangue de pacientes vítimas de picadas com espécies do gênero Bothrops. O monitoramento dos pacientes ocorreu a partir da entrada na emergência do Hospital Universitário até 30 dias após, sendo os grupos divididos em relação ao tempo de seguinte forma: tempo 0 (t0), tempo 24 horas (t24h), tempo 7 dias (t7d) e tempo 30 dias (t30d). Foram examinadas as atividades das enzimas catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD), glutationa peroxidase (GPx), glutationa redutase (GR) e glutationa S-transferase (GST), e as defesas antioxidantes não-enzimáticas, como os conteúdos de glutationa reduzida (GSH) e vitamina E. Foram dosados também os marcadores de dano, como a lipoperoxidação (níveis de TBARS), proteína carbonilada (PC) e ainda a atividade da mieloperoxidase (MPO) como marcador inflamatório. Nas determinações iniciais em relação ao grupo controle (indivíduos saudáveis) observou-se aumento da atividade das enzimas CAT, GR e GPx e a diminuição de outras como SOD e GST, e também foi verificada a depleção da concentração de GSH, enquanto nos marcadores de dano houve aumento na concentração de TBARS e diminuição da proteína carbonilada em relação ao grupo controle. Em relação aos grupos em função do tempo, não houve diferença estatística nos distintos parâmetros examinados. O conjunto de respostas dos biomarcadores de estresse oxidativo permite afirmar que o acidente ofídico promoveu um acentuado estresse oxidativo sistêmico em suas vítimas.

REYES, M. A. V. Biomarcadores precoces da injúria renal no envenenamento experimental induzido pela serpente colombiana Bothrops ayerbei em ratos. 2017. 91 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Farmacologia Pós-Graduação (posgfarmacologia@gmail.com) on 2017-08-01T18:28:59Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_mavreyes.pdf: 1865163 bytes, checksum: 5c943af5338bde1e789bb5bde2374387 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-08-02T12:19:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_mavreyes.pdf: 1865163 bytes, checksum: 5c943af5338bde1e789bb5bde2374387 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-02T12:19:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_mavreyes.pdf: 1865163 bytes, checksum: 5c943af5338bde1e789bb5bde2374387 (MD5) Previous issue date: 2017-06-14 / The snake poisoning represents a public health problem, which is characterized by several systemic pathophysiologies, among which acute renal injury (AKI) is the most important. The pathogenesis of AKI induced by Botrópico poisoning is multifactorial and tends to be associated with direct nephrotoxicity, disseminated vascular coagulation and the activity of proteolytic enzymes that act on the structures of the kidney. In the state of Cauca in Colombia the snake Botrhops ayerbei was recognized as a new species through the morphological description and molecular characterization of its venom, considering the latter as a valuable signature for the identification of species and the properties of the venom. Therefore, the purpose of this work is to characterize the renal effects of venom of B. ayerbei (VBa), the present study evaluated biochemical parameters associated with renal function, oxidative profile and antioxidant activity, making a comparison with early biomarker of renal injury through gene transcription RT-PCR, and histopathological analysis. For this, 250-300g Wistar rats (150/14 protocol) were used, divided into three times 8, 16 and 24 hours each with two control (PBS) and treated groups (75% DVB of VBa). Thus, it was observed that poisoning by intraperitoneal inoculation of VBa promotes biochemical changes associated at the onset with direct injury of the venom on renal structures, causing an increase in plasma uric acid (8h: 1,220 ± 0,2061 μg / dL) and urinary (8h: 5,600 ± 0,230 μg / dL), followed by proteinuria (8h: 17,920 ± 0,807 μg / dL), decreased glomerular filtration rate (GFR) (8h: 0.9211 ± 0.2131 mL / min / 100g) , And increased clearance of free water (8h: -0.013 ± 0.003 mL / min), as well as increased urine osmolality (8h: 625.8 ± 33.27 Mmol / kg). An increase in urine urea concentrations (16h: 31,120 ± 1,866 μg / dL) and urinary creatinine (24h: 54,890 ± 3,360 μg / dL) was observed, with a decrease in the osmolality clearance (16h: 317.8 ± 26 , 05 Mmol / kg) and an increase in the Na + excretion fraction (16h: 4.552 ± 0.204%) and the RFG (24h: 0.7415 ± 0.0717 mL / min / 100g). (24h: 78.75 ± 3.059 μg / mg prot.) And renal cell damage was found by expression of renal biomarkers such as: renal injury-1 molecule (KIM-1) and neutrophil gelatinase-associated lipocalin (NGAL). In addition, pro-inflammatory cytokines such as interleukin-18 (IL-18), interleukin-1 beta (IL-1β) and chemotactic peptide-1 for monocytes (MCP-1) were found to act as adjuvants in the injury process Thus, VBa does not alter plasma parameters associated with AKI, but causes hemorrhagic processes that affect the blood circulation with extravasation, which could cause hypovolemic and consequent decrease of RFG, followed by a regulation in the excretion of substances. Compared with the results of molecular biology, renal cell damage has been proven, and inflammatory processes that may promote renal damage have been developed. We conclude that the VBa venom promotes changes in kidney damage as demonstrated by molecular biology, and not by biochemical tests, demonstrating that the use of early biomarkers is necessary for the understanding of renal pathophysiology generated by snake poisoning. / O envenenamento ofídico representa um problema de saúde pública, que se caracteriza por causar várias fisiopatologias sistêmicas, dentre estas a lesão renal aguda (LRA) é a de maior importância. A patogênese da LRA induzida por o envenenamento Botrópicos é multifatorial e tende a ser associada à nefrotoxicidade direta, coagulação vascular disseminada e atividade de enzimas proteolíticas que atuam sobre as estruturas do rim. No estado do Cauca na Colômbia a serpente Botrhops ayerbei foi reconhecida como nova espécie através da descrição morfológica e à caracterização molecular de seu veneno, considerando esta última como uma valiosa assinatura para a identificação de espécies e as propriedades do veneno. Por conseguinte, o objeto deste trabalho é caracterizar os efeitos renais do veneno de B. ayerbei (VBa), e avaliar parâmetros bioquímicos associados à função renal, perfil oxidativo e atividade antioxidante fazendo uma comparação com biomarcador precoce de lesão renal de transcrição gênica através de RT-PCR, e o análise histopatológica. Para isto, foram utilizados ratos Wistar de 250-300g (protocolo 150/14), divididos em três tempos 8, 16 e 24 horas cada um com dois grupos de avaliação controle (PBS) e tratado (75% Dl50 do VBa). Assim, foi observado que o envenenamento por inoculação intraperitoneal do VBa, promove alterações bioquímicas associadas num começo a lesão direta do veneno sobre as estruturas renais, causando um aumento do ácido úrico plasmático (8h: 1,220 ± 0,2061 µg/dL) e urinário (8h: 5,600 ± 0,230 µg/dL), seguido por proteinúria (8h: 17,920 ± 0,807 µg/dL), diminuição do ritmo de filtração glomerular (RFG) (8h: 0,9211 ± 0,2131 mL/min/100g), e aumento do clearance de água livre (8h: -0,013 ± 0,003 mL/min), assim como também um aumento da osmolalidade urinária (8h: 625,8 ± 33,27 Mmol/Kg). Posteriormente foi encontrado um aumento nas concentrações de ureia na urina (16h: 31,120 ± 1,866 µg/dL) e creatinina urinária (24h: 54,890 ± 3,360 µg/dL), com uma diminuição do clearance de osmolalidade (16h: 317,8 ± 26,05 Mmol/Kg) e um aumento da fração de excreção de Na+ (16h: 4,552 ± 0,204 %) e o RFG (24h: 0,7415 ± 0,0717 mL/min/100g), A seguir o VBa apresentou alterações no perfil oxidativo no último tempo de avaliação com uma diminuição dos níveis de GSH (24h: 78,75 ± 3,059 µg/mg prot.) e verificou-se lesão nas células renais pela expressão de biomarcadores tais como: a molécula de injúria renal-1 (KIM-1) e a lipocalina associada à gelatinase neutrofílica (NGAL). Além disso, citocinas pró-inflamatórios como a interleucina-18 (IL-18), interleucina-1 beta (IL-1β) e o peptídeo-1 quimiotático para monócitos (MCP-1) foram encontradas aumentadas, atuando como coadjuvantes no processo de lesão renal, Desta forma, o VBa não altera parâmetros plasmáticos associados a LRA, mas causa processos hemorrágicos que repercute na circulação sanguínea com extravasamento o que possivelmente causaria hipovolemia e consequente diminuição do RFG, seguido por uma regulação na excreção de substâncias. Comparando com os resultados da biologia molecular comprovou-se dano nas células renais, e desenvolvimento de processos inflamatórios que podem promover lesão renal. Concluímos assim, que o veneno de VBa promove alterações renais comprovado por biologia molecular, e não por teste bioquímicos, demonstrando que o uso de biomarcadores precoce é necessário para o entendimento da fisiopatologia renal gerada por o envenenamento de serpentes.

Made available in DSpace on 2014-12-05T18:41:19Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) monique_trugilho_ioc_dout_2009.pdf: 10986205 bytes, checksum: 7de098da6c6025322360c2bb8516382d (MD5) Previous issue date: 2014-11-18 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / A proteína antiofídica DM43 isolada do soro do gambá Didelphis aurita inibe o efeito hemorrágico e a atividade proteolítica de metaloproteases de venenos de serpentes (SVMPs). Ao se ligar às SVMPs, o homodímero de DM43 se dissocia e cada monômero se liga a uma molécula de metaloprotease. O monômero é composto de três domínios tipo-imunoglobulina, dois dos quais são glicosilados. Para investigar a relação estrutura-função de DM43, os genes codificantes para esta proteína e para seus domínios foram clonados nos vetores pET101D/TOPO ou pET102D/TOPO; neste último, a proteína recombinante foi expressa em fusão com a tiorredoxina. Expressamos as construções obtidas em bactérias competentes da linhagem BL21 Star (DE3) de E. coli, na forma de corpúsculos de inclusão. Após purificação e reenovelamento por diálise, os espectros de dicroísmo circular (CD) na região do ultravioleta distante indicaram uma mistura de \03B1-hélices e folhas \03B2 pregueadas para os domínios recombinantes expressos em fusão com a tiorredoxina. A identidade das proteínas recombinantes foi confirmada, tanto por immunoblotting com anticorpo policlonal contra DM43, quanto por espectrometria de massas (MS/MS). Entretanto, nenhum dos domínios recombinantes, isolados ou combinados, foi capaz de inibir a atividade proteolítica da jararagina, uma metaloprotease de Bothrops jararaca. Ao contrário, os domínios fusionados com a tiorredoxina foram degradados quando incubados com esta SVMP. Estes resultados podem indicar que a glicosilação é funcionalmente importante e/ou que a conformação nativa multidomínio é necessária para a atividade biológica deste inibidor. Para melhor entender seus requisitos estruturais, estudamos a DM43 nativa após degradação proteolítica. Sob condições nativas, a digestão limitada de DM43 com tripsina ou quimotripsina gerou vários fragmentos, mas nenhum peptídeo ativo contra a SVMP foi obtido. Sob condições desnaturantes, a digestão extensiva de DM43 pela endoproteinase Lys-C produziu peptídeos menores. Mesmo sem atividade biológica contra a jararagina, três destes peptídeos foram capazes de interagir com esta SVMP. Após sequenciamento por MS/MS, cada peptídeo foi localizado em um domínio diferente de DM43. Estes resultados parecem sugerir a participação conjunta dos três domínios na interação com as SVMPs / The antiophidic protein DM43 isolated from Didelphis aurita serum inhibits the hemorrhagic effect and the proteolytic activity of snake venom metalloproteinases (SVMPs). Upon SVMP addition, DM43 homodimer dissociates and one subunit binds to one SVMP. The 43 kDa monomer is composed of three immunoglobulin-like domains, two of which are glycosylated. To investigate the structure-function relationship in this protein, the genes encoding DM43 and its domains were separately cloned into pET101D/TOPO or pET102D/TOPO vector, this last with the fusion partner thioredoxin. The obtained constructions were expressed in BL21 Star (DE3) competent E. coli cells as inclusion bodies. After purification and dialysis refolding, circular dichroism (CD) spectra in the far UV region of the recombinants domains with fusion partner indicated the presence of folded proteins with both alpha-helix and beta-sheet. The identities of the recombinant proteins were confirmed by immunoblotting with polyclonal antibodies against serum DM43 and by mass spectrometry (MS/MS). However, none of the domains either isolated or in combination, were able to inhibit the proteolytic activity of jararhagin. In contrast, thioredoxin-fused domains were readily digested by this SVMP. These results may indicate that glycosylation is functionally important for DM43 and/or that a multidomain native conformation is necessary for the biological activity of the inhibitor. To better understand its structural requirements, serum DM43 was studied after proteolytic degradation. Under native conditions, limited digestion of DM43 by trypsin or chymotrypsin generated various fragments, but no active peptide against SVMP was obtained. Extensive digestion of denatured DM43 by Lys-C endopeptidase produced smaller peptides. Even though not able to neutralize the proteolytic activity of jararhagin, three DM43 Lys-C peptides were able to bind to SVMP. After sequencing by MS/MS, each peptide was localized to one DM43 domain. Taken together, these results seem to reinforce the participation of all three domains of DM43 in the interaction with SVMPs

ALBUQUERQUE, Polianna Lemos Moura Moreira. Manifestações clínicas e fatores de risco para comprometimento da função renal em pacientes vítimas de acidentes com serpentes peçonhentas. 2013. 86 f. Dissertação (Mestrado em Ciências Médicas) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-05-11T15:49:05Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_plmmalbuquerque.pdf: 2822402 bytes, checksum: acedb62b2537fc1e4a83d9d0ddfb8aa7 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-05-11T15:51:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_plmmalbuquerque.pdf: 2822402 bytes, checksum: acedb62b2537fc1e4a83d9d0ddfb8aa7 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-11T15:51:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_plmmalbuquerque.pdf: 2822402 bytes, checksum: acedb62b2537fc1e4a83d9d0ddfb8aa7 (MD5) Previous issue date: 2013 / Introduction: Envenomation by venomous snakes is a neglected disease in tropical countries. Acute kidney injury (AKI) is one of the main causes of morbidity and mortality in these cases. The aim of this study was to investigate the occurrence of AKI by snake bites, to evaluate the clinical manifestations and classify the AKI and the involved risk factors. Methods: A retrospective study was conducted with patients victims of snakebites admitted to a reference center. Patients with and without AKI were compared, and AKI was defined according to the RIFLE and AKIN criteria. Statistical analysis was performed by the program SPSS and it was considered significant p<0.05. Results: A total of 276 patients were included, with 83.7% (n= 230) male and 85.5% (n= 146) from rural área. AKI was observed in 15.2% of cases. The mean genus involved in the accidents was Bothrops (82.2%). Mean age of patients with AKI was higher than in patients without AKI (43±20 vs. 34±21 years, p=0.015), respectively. Time between the accident and the medical care was higher in the AKI group (25±28 vs. 14±16h, p=0.034), as well as the time between the accident and the administration of antiofidic sera (30.7±27 vs. 15±16h, p=0.01) and the length of hospital stay (9.1±7.7 vs. 3.2±2.2 days, p<0.01), respectively. Patients with AKI were classified as “Risk” (28.5%), “Injury” (11.9%) and “Failure” (57.1%), and as AKIN1 (35.7%), AKIN2 (7.1%) and AKIN 3 (57.1%). The mean values of creatinine and urea at admission and during hospital stay were higher in the worst stages of RIFLE and AKIN. Potassium at admission was higher in RIFLE-F and AKIN 3 (p=0.045). Hemoglobin was lower in patients classified within the worst staged of RIFLE and AKIN (p=0.041; p=0.042). Hemodialysis was required for 30% of cases, and complete renal function recovery was observed in 54.8% of cases. There were 4 deaths, of whom no one had AKI. Risk factors for AKI were hemorrhagic abnormalities (p=0.036, OR=6.718, 95% CI 1.067–25.661) and a higher lenght of hospital stay (p=0.004, OR=1.69, 95% CI 1.165–2.088). Conclusion: AKI is an importante complication of these acidentes, with low mortality, but with high morbidity, that can lead to partial renal function recovery. / Introdução. O envenenamento por serpentes peçonhentas é uma das doenças negligenciadas dos países tropicais. A lesão renal aguda é uma das principais causas de morbidade e mortalidade nestes casos. O objetivo deste estudo foi investigar a ocorrência de LRA por acidentes ofídicos, avaliar as manifestações clínicas e classificar a LRA e os fatores de risco envolvidos. Metodologia. Foi realizado estudo retrospectivo com pacientes vítimas de picadas de cobras atendidos em um centro de referência. Foram comparados os pacientes com e sem LRA, definida de acordo com RIFLE e AKIN. A análise estatística foi realizada pelo programa SPSS e foi considerado significativo p<0,05. Resultados. Foram incluídos 276 pacientes, 83,7% (n= 230) do sexo masculino e 85,5% (n= 126) procedente de zona rural. LRA foi observada em 15,2% dos casos. O principal gênero envolvido foi Bothrops (82,2%). A média de idade dos pacientes com LRA foi maior do que naqueles sem LRA (43±20 vs. 34±21 anos, p=0,015, respectivamente). O tempo entre o acidente e o atendimento médico foi maior no grupo com LRA (25±28 vs. 14±16h, p=0,034), o tempo entre o acidente e a administração de soro antiofídico (30,7±27 vs. 15±16h, p=0,01) e o tempo de internação (9,1±7,7 vs. 3,2±2,2 dias, p<0,01, respectivamente). Os pacientes com LRA foram classificados como “Risk” (28,5%), “Injury” (11,9%) e “Failure” (57,1%), e como AKIN1(35,7%), AKIN2 (7,1%) e AKIN3 (57,1%). As médias dos valores de creatinina e ureia à admissão e durante a internação foram maiores para os piores estádios do RIFLE e do AKIN. Potássio na admissão foi maior no RIFLE-F e AKIN3 (p= 0,045). A hemoglobina foi menor nos pacientes classificados dentro dos piores estádios do RIFLE e AKIN (p=0,041; p=0,042). Hemodiálise foi necessária em 30% dos casos, e recuperação completa da função renal foi observada em 54,8% dos casos. Houve quatro óbitos, nenhum com LRA. Os fatores de risco associados à LRA foram alterações hemorrágicas (p=0,036, OR = 6,718, IC95% 1,067 – 25,661) e um maior tempo de internamento (p=0,004, OR = 1,69, IC95% 1,165 – 2,088). Conclusão. A LRA é uma importante complicação desses acidentes, indicando baixa mortalidade, porém, alta morbidade, podendo levar a melhora parcial da função renal.

Submitted by Priscila Nascimento (pnascimento@icict.fiocruz.br) on 2012-11-13T17:28:10Z No. of bitstreams: 1 carlos-correa-netto.pdf: 1990428 bytes, checksum: 3a150480f1f6590c44a4c85210b6ccbb (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-13T17:28:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 carlos-correa-netto.pdf: 1990428 bytes, checksum: 3a150480f1f6590c44a4c85210b6ccbb (MD5) Previous issue date: 2007 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto de Tecnologia em Imunobiológicos. Rio de Janeiro, RJ, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Oswaldo Cruz. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Os animais peçonhentos são aqueles capazes de produzir e inocular veneno (peçonha) em suas vítimas. No Brasil, foram catalogadas, até o momento, 326 espécies de serpentes, dentre as quais cerca de 50 são peçonhentas e de grande interesse para a Saúde Publica. A Bothrops jararacussu é a espécie brasileira que possui a capacidade de produzir e inocular a maior quantidade de veneno. Nos acidentes ofídicos causados por estaespécie, a ação do veneno não é totalmente neutralizada pelo soro específico, o antibotrópico, sendo importante nestes casos a adoção de uma conduta terapêutica diferenciada através da administração do soro poliespecífico, o antibotrópico-crotálico. No entanto, considerando-se apenas os sintomas clínicos do paciente, o médico não tem como discriminar se o acidente foi provocado por B. jararacussuou por outra espécie do gênero. Vale ainda ressaltar que para as demais espécies do gênero Bothrops, o soro antibotrópico é o mais indicado, fato que impossibilita o médico de adotarcomo estratégia geral, a utilização do soro antibotrópico-crotálico como umaterapêutica única no acidente botrópico. Esta tese teve como objetivo a caracterização, através de técnicas de imunoquímica, do veneno de B. jararacussu e a identificação de possíveis biomarcadores para este veneno. Para a triagem dos biomarcadores foram produzidos soros espécie-específicos para os venenos de B. jararacussu (soro anti-jararacussu) e para B. jararaca(soro anti-jararaca). Nas análises por “imunoblotting” a partir do fracionamento por 2D-PAGE foi visto um bom reconhecimento por ambos os soros, principalmente das frações de alto peso do veneno de B. jararacussu, mostrando que estas frações são as mais imunogênicas neste veneno. A partir destes dados, foram identificadas no mapa bidimensional, as principais proteínas de baixa imunogenicidade deste veneno. Uma proteína de 60kDa e pI ácido foi identificada como uma serino proteinase. Esta identificação foi obtida a partir da homologia com uma protease com domínio tripsina, denominada BOTIN, presente no banco de dados de ESTs de B. insularis. Esta proteína de pI ácido (denominada Bjssu-pI2,2) foi, pela primeira vez, descrita nesta espécie. Na região básica, foram identificadas duas outras proteínas, as quais demonstraram um baixo reconhecimento tanto pelo soro homólogo (soro anti-jararacussu) como pelo heterólogo (soro anti-jararaca). A proteína de 29kDa foi identificada como uma serino proteinase da família S1 e a de 16kDa foi identificada como Botropstoxina-I (BthTX-I), a principal miotoxina doveneno de B. jararacussu. Desta forma, a abordagem desta tese através de técnicas como eletroforese bidimensional somado a técnicas sensíveis como "imunoblotting” e espectrometria de massas, se mostrou muito interessante para o estudo imunoquímico das frações do veneno de B. jararacussu. As diferenças no reconhecimento dos soros espécie-específicos frenteao veneno de B. jararacussupermitiram a identificação de três proteínas com potencial para serem utilizadas como ferramenta para o desenvolvimento de diagnóstico diferencial para esta espécie. Além disso, os resultados deste trabalho reforçam a questão da ineficiência do soro antibotrópico para a neutralização do veneno no acidente causado por esta espécie, podendo se relacionar a importância da fração crotálica para a neutralização de toxinas pouco imunogênicas do veneno de B.jararacussu, como é o caso da BthTX-I. / Poisonous animals are characterized by the ability to produce and inject venom (poison) in their victims. Until nowadays there are326 different species of snakes catalogued in Brazil and, among them 50 species are venomous and important regarding public health. The Bothrops jararacussuis the Brazilian specie that has the ability to produce and inoculates higher amounts of venom. In the reported cases concerning this specie, the action of this venom can not be efficiently neutralized with specific antivenin,the antibotropic serum. In such cases, the attendant must adopt a differentiated therapeutic conduct that consists in the administration of the antibotropic – crotalic serum. However, in considering just the clinical symptoms of the patient, the doctor is not able to distinguish if the accident was caused by B. jararacussuor another specimen from Bothrops genus. It is important to emphasize the fact that for other specimens from Bothrops genus, the antibotropic serum is the most indicated treatment and for this reason, it is inadequate forthe doctor adopt antibotropic – crotalic serum as a single therapeutic strategy. Inthis study we aimed to characterize specific biomarkers present in the venom of B. jararacussutrough the use 2D-PAGE combined with immunoblotting. To achieve this goal, we produced sera anti-jararacussu and anti-jararaca and cross-reacted this sera against their specific venom as well against each other. 2D-gel analyses reveled that the high–molecular–weight fractions ofboth venoms were well recognized by each specific anti-sera as well as bythe non-specific one. This suggests that the proteins present in the high–molecular–weight fraction of each venom are the most immunogenic. Also, the 2D PAGE allowed us to identify the less immunogenic proteins in these venoms. Among them is a 60 kDa acid protein identified as a serine protease due to its high homology with a protease called BOTIN that possess a trypsin domain present in ESTs data bank from B. insularis. This acidic protein characterized in this work was called Bjssu-pI2,2 and was for the first time described in this specie. The other proteins displaying low immunogenic properties were a 29 kDa protein identified as a serine protease from S1-family and a 16 kDa protein identified as a Bothropstoxin-I (BthTX-I),the major myotoxin from B. jararacussuvenom. Thus, the approach used in this thesis, based on bidimensional electrophoresis in combination with sensitive techniques such as immunoblotting and mass spectrometry, showed to be interesting for the immunochemistry study of the B. jararacussuvenom proteins. The three proteins here identified in thevenom of B. jararacussu present a potential use as biomarkers. Moreover, this study also shed light into the reasons why the anti-bothropic serum is so ineffective against the B.jararacussuvenom reinforcing the role of the anti-crotalic serum in neutralizing low immunogenic proteins from the B. jararacussuvenom, such as the BthTX-I.

O acidente ofídico foi incluído recentemente no grupo das doenças negligenciadas pela Organização Mundial da Saúde. Este agravo afeta principalmente os pobres que vivem nas zonas rurais, onde, em geral, os serviços de saúde são insuficientes, com capacidade resolutiva limitada e os anti-venenos podem ser de limitada distribuição (WHO, 2007). Justifica-se, portanto, o presente estudo, tendo em vista a importância epidemiológica dos acidentes ofídicos, que podem conduzir à morte e à incapacidade, além de produzir relevante sofrimento físico daqueles que padecem destes acidentes. O estudo, descritivo transversal, teve como referencial teórico, o conceito de vulnerabilidade. Foram entrevistados 21 pacientes internados no Hospital Vital Brazil (HVB) do Instituto Butantan da Secretaria de Saúde do Estado de São Paulo, no período de 2010 a 2012, por meio de instrumento com perguntas abertas e fechadas. A maior parcela dos sujeitos era constituída por pessoas do sexo masculino (95,2%), na faixa etária entre 21 a 30 anos e 51 a 60 (23,8%), casados (%) e que viviam com familiares (57,1%). Eram procedentes principalmente do nordeste (33,3%), todos possuíam moradia de alvenaria e usavam serviço público de saúde (81%). O acidente ocorreu, em maior prevalência no pé (42,9%) ou mão (38,1%). Foram evidenciados potencias condições de vulnerabilidade, em termos das características pessoas e relativas às condições de vida/trabalho, tais como: escolaridade precária, baixa qualificação profissional, trabalho informal, desemprego, insuficiência de renda para viver, falta de água encanada, esgoto e coleta regular de lixo, além da não participação em grupos da comunidade. No momento da ocorrência do acidente, tais sujeitos encontraram-se trabalhando (52,4%) ou em atividade de lazer (47,6%). As perguntas abertas foram objeto de análise por meio de técnica apropriada de análise de discurso e revelaram que a maior parte realizou procedimentos inadequados no local da picada (66,7%) e houve demora superior a 3 horas até a admissão no HVB. Foram também identificadas condições que comprometeram a acessibilidade dos pacientes ao tratamento, como ter que percorrer mais do que uma unidade de saúde para diagnóstico correto e/ou disponibilidade de soro. Conclui-se que é necessário atentar para tais elementos que integra a vulnerabilidade individual, social e programática, por parte da assistência e implementação de políticas sociais e de saúde adequadas, aprimorando, portanto, o Programa Nacional de Controle de Acidentes por Animais Peçonhentos e reduzindo a morbi-letalidade e seqüelas decorrentes desses acidentes / The snakebite accident has been recently included in the group of neglected diseases by the World Health Organization This injury affects mostly the poor people who live in rural areas, where, in general, health services are inadequate, with limited problem-solving capacity and anti-poisons may be of limited distribution (WHO, 2007). Justified, therefore, this study, in view of the epidemiological importance of snakebite accidents that can lead to death and disability, as well as producing relevant physical suffering of those suffering from these accidents. The study, cross-sectional, had the theoretical reference, the vulnerability concept. The 21 patients have been interviewed at the Hospital Vital Brazil (HVB) do Instituto Butantan da Secretaria de Saúde do Estado de São Paulo, in the period from 2010-2012, by means of an instrument with open and closed questions. The largest portion of the subjects consisted of males (95.2%), aged 21-30 years and 51-60 (23.8%), married (%) and living with family members (57, 1%). They were mainly from the northeast (33.3%), all lived in brick houses and used the public health service (81%). The accident occurred at a higher prevalence in the foot (42.9%) or hand (38.1%). There have been highlighted potential vulnerability conditions, in terms of personal characteristics and regarding to work / life conditions , such as poor education, low professional qualification, informal work, unemployment, insufficient income to live, lack of running water, sewage and regular garbage collection, as well as non-participation in community groups. At the time of the accident, these individuals were working (52.4%) or were at recreational activity (47.6%). Open questions have been considered by the appropriate technique of analysis of discourse and revealed that the most inadequate procedures performed at the bite site (66.7%) and that there was delay of more than three hours until admission at HVB. There have also been identified conditions that compromised the patients accessibility to treatment, such as having to travel to more than one health facility for proper diagnosis and / or availability of serum. It is concluded that it is necessary to consider such elements that integrate individual, social and programmatic vulnerability by the assistance and implementation of appropriate social and health policies, improving thus the National Program for Control of Accidents Caused by Venomous Animals and reducing morbidity and mortality and sequelae resulting from these accidents

O acidente ofídico foi incluído recentemente no grupo das doenças negligenciadas pela Organização Mundial da Saúde. Este agravo afeta principalmente os pobres que vivem nas zonas rurais, onde, em geral, os serviços de saúde são insuficientes, com capacidade resolutiva limitada e os anti-venenos podem ser de limitada distribuição (WHO, 2007). Justifica-se, portanto, o presente estudo, tendo em vista a importância epidemiológica dos acidentes ofídicos, que podem conduzir à morte e à incapacidade, além de produzir relevante sofrimento físico daqueles que padecem destes acidentes. O estudo, descritivo transversal, teve como referencial teórico, o conceito de vulnerabilidade. Foram entrevistados 21 pacientes internados no Hospital Vital Brazil (HVB) do Instituto Butantan da Secretaria de Saúde do Estado de São Paulo, no período de 2010 a 2012, por meio de instrumento com perguntas abertas e fechadas. A maior parcela dos sujeitos era constituída por pessoas do sexo masculino (95,2%), na faixa etária entre 21 a 30 anos e 51 a 60 (23,8%), casados (%) e que viviam com familiares (57,1%). Eram procedentes principalmente do nordeste (33,3%), todos possuíam moradia de alvenaria e usavam serviço público de saúde (81%). O acidente ocorreu, em maior prevalência no pé (42,9%) ou mão (38,1%). Foram evidenciados potencias condições de vulnerabilidade, em termos das características pessoas e relativas às condições de vida/trabalho, tais como: escolaridade precária, baixa qualificação profissional, trabalho informal, desemprego, insuficiência de renda para viver, falta de água encanada, esgoto e coleta regular de lixo, além da não participação em grupos da comunidade. No momento da ocorrência do acidente, tais sujeitos encontraram-se trabalhando (52,4%) ou em atividade de lazer (47,6%). As perguntas abertas foram objeto de análise por meio de técnica apropriada de análise de discurso e revelaram que a maior parte realizou procedimentos inadequados no local da picada (66,7%) e houve demora superior a 3 horas até a admissão no HVB. Foram também identificadas condições que comprometeram a acessibilidade dos pacientes ao tratamento, como ter que percorrer mais do que uma unidade de saúde para diagnóstico correto e/ou disponibilidade de soro. Conclui-se que é necessário atentar para tais elementos que integra a vulnerabilidade individual, social e programática, por parte da assistência e implementação de políticas sociais e de saúde adequadas, aprimorando, portanto, o Programa Nacional de Controle de Acidentes por Animais Peçonhentos e reduzindo a morbi-letalidade e seqüelas decorrentes desses acidentes / The snakebite accident has been recently included in the group of neglected diseases by the World Health Organization This injury affects mostly the poor people who live in rural areas, where, in general, health services are inadequate, with limited problem-solving capacity and anti-poisons may be of limited distribution (WHO, 2007). Justified, therefore, this study, in view of the epidemiological importance of snakebite accidents that can lead to death and disability, as well as producing relevant physical suffering of those suffering from these accidents. The study, cross-sectional, had the theoretical reference, the vulnerability concept. The 21 patients have been interviewed at the Hospital Vital Brazil (HVB) do Instituto Butantan da Secretaria de Saúde do Estado de São Paulo, in the period from 2010-2012, by means of an instrument with open and closed questions. The largest portion of the subjects consisted of males (95.2%), aged 21-30 years and 51-60 (23.8%), married (%) and living with family members (57, 1%). They were mainly from the northeast (33.3%), all lived in brick houses and used the public health service (81%). The accident occurred at a higher prevalence in the foot (42.9%) or hand (38.1%). There have been highlighted potential vulnerability conditions, in terms of personal characteristics and regarding to work / life conditions , such as poor education, low professional qualification, informal work, unemployment, insufficient income to live, lack of running water, sewage and regular garbage collection, as well as non-participation in community groups. At the time of the accident, these individuals were working (52.4%) or were at recreational activity (47.6%). Open questions have been considered by the appropriate technique of analysis of discourse and revealed that the most inadequate procedures performed at the bite site (66.7%) and that there was delay of more than three hours until admission at HVB. There have also been identified conditions that compromised the patients accessibility to treatment, such as having to travel to more than one health facility for proper diagnosis and / or availability of serum. It is concluded that it is necessary to consider such elements that integrate individual, social and programmatic vulnerability by the assistance and implementation of appropriate social and health policies, improving thus the National Program for Control of Accidents Caused by Venomous Animals and reducing morbidity and mortality and sequelae resulting from these accidents

Submitted by Anderson Silva (avargas@icict.fiocruz.br) on 2012-09-13T11:58:10Z No. of bitstreams: 1 Dissertação ClaudioMachado.pdf: 8617223 bytes, checksum: 5938f8ebba53a413c9f171550d4ec9af (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-13T11:58:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação ClaudioMachado.pdf: 8617223 bytes, checksum: 5938f8ebba53a413c9f171550d4ec9af (MD5) / Instituto Vital Brazil. Divisão de Herpetologia. Niterói, RJ, Brasil / Nítidas divergências foram verificadas ao comparar os acidentes crotálicos ocorridos no Estado do Rio de Janeiro no período de 2001 a 2010, disponibilizados na Internet pelo Sistema de Informação de Agravos de Notificação (SINAN WEB), com a distribuição geográfica de ocorrência de Crotalus durissus no Estado. Com base nas informações sobre a sintomatologia relatada na literatura especializada, foram verificadas as manifestações clínicas existentes nas fichas de investigação para acidentes com animais peçonhentos e determinados os padrões para reconhecer com segurança os acidentes crotálicos. Dessa forma, com base nos dados de acidentes crotálicos registrados pela Secretaria de Estado de Saúde e Defesa Civil do Rio de Janeiro (SESDEC), foi analisada a coerência na sintomatologia apresentada; a distribuição das freqüências de soro e o número de ampolas aplicadas nos acidentes notificados como crotálicos, nos casos leves, moderados e graves. Concluiu-se que as notificações dos acidentes crotálicos no Estado do Rio de Janeiro neste período não refletem a realidade desse agravo e são feitas sugestões para a melhoria da estrutura da rede de informação para acidentes com animais peçonhentos no Brasil. / Significant differences were observed when comparing crotalic accidents which occurred in the State of Rio de Janeiro for the period 2001-2010, available on the Internet for Information System for Notifiable Diseases (SINAN WEB), with the geographical distribution of Crotalus durissus in the mentioned State. Based on the information of the symptoms reported in the literature, we aimed to assess the existing clinical report forms of accidents with venomous animals and to recognize certain patterns of crotalic accidents. Thus, based on the recorded crotalic accident data registred by State Department of Health and Civil Defense of Rio de Janeiro (SESDEC), we analyzed the consistency of the symptoms presented, the frequency of the distribution of serum and the number of ampoules applied in crotalic accidents reported as in mild, moderate and severe. It was concluded that the reports of crotalic accidents in the State of Rio de Janeiro, for this period, does not reflect the reality of this condition and some suggestions are made for improving the structure of the information network for accidents with venomous animals in Brazil.