O objetivo do presente estudo foi avaliar microscopicamente a resposta inflamatória do tecido conjuntivo subcutâneo de ratos quando em contato com formulações à base de própolis (A70D e D70D). Foram utilizados 15 ratos machos da linhagem Wistar, com aproximadamente 40 dias de vida. Em períodos experimentais de 7, 15 e 30 dias, foram implantados tubos de polietileno contendo materiais diferentes, formando 4 grupos: Grupo I - Ca(OH)2, Grupo II - A70D, Grupo III - D70D, Grupo IV Controle (tubo vazio). Após os períodos experimentais, os animais foram mortos e os tecidos contendo os implantes foram removidos para processamento histotécnico. Os cortes microscópicos semi-seriados de 5µm de espessura foram corados pela técnica da Hematoxilina e Eosina (H.E.). A reação tecidual frente ao material utilizado foi analisada de forma semi-quantitativa e qualitativa. Para análise estatística foi utilizado o teste de Kruskal-Wallis com p<0,05. Os resultados mostraram intensa reação inflamatória para todas as pastas aos 7 dias, com intensa proliferação angioblástica, moderado infiltrado neutrofílico e necrose por coagulação no grupo do hidróxido de cálcio. Com o decorrer dos períodos a intensidade da reação diminuiu, com redução significativa em 30 dias. As pastas A70D e D70D apresentaram resultados semelhantes, porém aos 30 dias a reação se manteve mais intensa para a pasta D70D. Estes resultados sugerem a possibilidade da própolis ser utilizada como medicação intracanal. / The aim of this study was to evaluate the inflammatory tissue response of different based propolis pastes for endodontic use (A70D and D70D). 15 male rats of the Wistar strain, approximately 40 days of life were used. Polyethylene tubes containing different materials were divided in 4 groups: Group I - Ca(OH)2, Group II - A70D, Group III - D70D, Group IV - Control (empty tube ). The inflammatory response of subcutaneous tissue was analyzed after 7, 15 and, 30 days. After the experimental periods, animals were killed and tissues containing the implants were removed and prepared using conventional histological procedures. Microscopic semi-serial sections of 5m in thickness were stained by the hematoxylin and eosin technique (HE). The tissue reaction was evaluated using semi-quantitative and qualitative criteria. Statistical analysis was performed using the Kruskal-Wallis test with p <0.05. The results showed intense inflammatory reaction in all the groups at the 7 day period. Intense proliferation of vessels, moderate neutrophilic infiltrate and necrosis by coagulation in the group of calcium hydroxide. The intensity of the reaction decreased with significant reduction after 30 days. The A70D and D70D pastes showed similar results, but at the 30 periods the most intense reaction was found in the D70D paste. These results suggest the possibility that propolis can be used as an intracanal medication.

The MicroImager is a fast, high resolution, real time, digital autoradiographic imaging tool with broad applications. This study utilizes the MicroImager to evaluate radiolabeled drug behavior in subcutaneous tissue. Experiments were conducted in conjunction with mathematical models to determine the diffusion coefficient (D) and elimination constant (k) for radiolabeled dexamethasone. Osmotic pumps containing [3H]dexamethasone were implanted into rat subcutaneous tissue over 6h, 24 h, and 60 h. Local tissue was explanted and slides were prepared for imaging. The MicroImager was then used to quantify the local concentration of 3H-dexamethasone in the tissue surrounding the tip of the osmotic pump. Betavision+ software was used to obtain local concentration profiles. These were then compared to a mathematical model to determine the diffusion coefficient and elimination constant for the radiolabeled drug. The diffusion coefficient for dexamethasone in rat subcutaneous tissue is 4.11 ± 1.77 x 10-10 m2/s. The elimination constant is 3.65 ± 2.24 x 10-5 s-1.A similar experiment was conducted to determine the diffusion coefficient through different means. [3H]dexamethasone was injected into the rat subcutaneous tissue for a 2.5 min and a 20 min period. A different mathematical model was applied and the diffusion coefficient was found to be 4.01 ± 2.01 x 10-10 m2/s.

O objetivo do presente estudo foi avaliar microscopicamente a resposta inflamatória do tecido conjuntivo subcutâneo de ratos quando em contato com formulações à base de própolis (A70D e D70D). Foram utilizados 15 ratos machos da linhagem Wistar, com aproximadamente 40 dias de vida. Em períodos experimentais de 7, 15 e 30 dias, foram implantados tubos de polietileno contendo materiais diferentes, formando 4 grupos: Grupo I - Ca(OH)2, Grupo II - A70D, Grupo III - D70D, Grupo IV Controle (tubo vazio). Após os períodos experimentais, os animais foram mortos e os tecidos contendo os implantes foram removidos para processamento histotécnico. Os cortes microscópicos semi-seriados de 5µm de espessura foram corados pela técnica da Hematoxilina e Eosina (H.E.). A reação tecidual frente ao material utilizado foi analisada de forma semi-quantitativa e qualitativa. Para análise estatística foi utilizado o teste de Kruskal-Wallis com p<0,05. Os resultados mostraram intensa reação inflamatória para todas as pastas aos 7 dias, com intensa proliferação angioblástica, moderado infiltrado neutrofílico e necrose por coagulação no grupo do hidróxido de cálcio. Com o decorrer dos períodos a intensidade da reação diminuiu, com redução significativa em 30 dias. As pastas A70D e D70D apresentaram resultados semelhantes, porém aos 30 dias a reação se manteve mais intensa para a pasta D70D. Estes resultados sugerem a possibilidade da própolis ser utilizada como medicação intracanal. / The aim of this study was to evaluate the inflammatory tissue response of different based propolis pastes for endodontic use (A70D and D70D). 15 male rats of the Wistar strain, approximately 40 days of life were used. Polyethylene tubes containing different materials were divided in 4 groups: Group I - Ca(OH)2, Group II - A70D, Group III - D70D, Group IV - Control (empty tube ). The inflammatory response of subcutaneous tissue was analyzed after 7, 15 and, 30 days. After the experimental periods, animals were killed and tissues containing the implants were removed and prepared using conventional histological procedures. Microscopic semi-serial sections of 5m in thickness were stained by the hematoxylin and eosin technique (HE). The tissue reaction was evaluated using semi-quantitative and qualitative criteria. Statistical analysis was performed using the Kruskal-Wallis test with p <0.05. The results showed intense inflammatory reaction in all the groups at the 7 day period. Intense proliferation of vessels, moderate neutrophilic infiltrate and necrosis by coagulation in the group of calcium hydroxide. The intensity of the reaction decreased with significant reduction after 30 days. The A70D and D70D pastes showed similar results, but at the 30 periods the most intense reaction was found in the D70D paste. These results suggest the possibility that propolis can be used as an intracanal medication.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-08-28Bitstream added on 2014-06-13T19:09:56Z : No. of bitstreams: 1 campos_ms_me_araca.pdf: 1921940 bytes, checksum: f00ae950b133ea554f96351e929ca44d (MD5) / Introdução: O sangue de dragão é um látex extraído de árvores da porção ocidental da Amazônia. Apresenta propriedades cicatrizantes, anti-inflamatórias e antitumorais. No entanto, faltam dados sobre a sua biocompatibilidade. Proposição: Este trabalho objetivou avaliar a biocompatibilidade da seiva do Croton lechleri (sangue de dragão) em tecido conjuntivo subcutâneo de ratos. Material e método: Foram utilizados 15 ratos, nos quais foram implantados tubos de polietileno em seu dorso, divididos em dois grupos: Grupo I (controle) luz do tubo selada com guta percha; Grupo II (sangue de dragão) luz do mesmo tubo preenchida com sangue de dragão. Passados 7, 15 e 30 dias do procedimento, os animais foram sacrificados e as peças obtidas, processadas em laboratório para análise microscópica. Os cortes histológicos foram realizados com a espessura de 5 micrometros. Foram observados a presença de inflamação e o tipo de células predominantes em cada implante. Resultados: Na análise histológica, alguns animais do Grupo II apresentaram tecido conjuntivo diferenciado, bem vascularizado e com pequeno número de células inflamatórias aos 15 dias, resultado este superior ao grupo I (controle). Aos 30 dias, o Grupo II mostrou tecido conjuntivo bem desenvolvido rico em fibras colágenas, pequeno número de vasos sanguíneos e alguns linfócitos. Conclusão: Em razão da semelhança da resposta inflamatória com o grupo controle, o sangue de dragão mostrou-se biocompatível em tecido conjuntivo subcutâneo de ratos e abre a perspectiva para a realização de outros estudos. / Introduction: The blood of dragon is a latex extracted from trees in the western portion of the Amazon. It has healing properties, anti-inflammatory and antitumor. However, there are just a few data on its biocompatibility. Proposition: This study aimed to evaluate the biocompatibility of Croton lechleri sap (dragon blood) in subcutaneous tissue of rats. Material and method: We used 15 rats, in which polyethylene tubes were implanted in his back, divided into two groups: Group I (control) light tube sealed with gutta percha, Group II (blood the dragon) light of the same tube filled with blood of dragon. After 7, 15 and 30 days of the procedure, the animals were sacrificed and the pieces collected, were processed in the laboratory for microscopic analysis, the histological sections were performed with a thickness of 5 micrometers. We observed the presence of inflammation and the predominant cell type in each implant. Results: In histological analysis, some animals from Group II had differentiated tissue and vascularized with small numbers of inflammatory cells at 15 days, a result higher than group I (control). At 30 days, Group II showed well-developed connective tissue rich in collagen fibers, a small number of blood vessels and some lymphocytes. Conclusion: Because of the similarity of the inflammatory response to the control group, the blood of dragon proved to be biocompatible in subcutaneous tissue of rats and opens the prospect for the realization of other studies.

Orientadores: Maria do Carmo Alberto-Rincon, Paulo Pinto Joazeiro / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-08T13:27:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_DeboraReginaMachado_D.pdf: 11484449 bytes, checksum: bfe84eec483f10c38fb1eb8fdfd9da3d (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: A utilização de biomateriais para a reparação de tecidos tem exigido o entendimento de seu comportamento in vivo. Com o intuito de avaliar a interação célula-polímero in vivo e in vitro, membranas de PLLA contendo 7% de plastificante tri-etil-citrato foram obtidas para análise pelo método de evaporação de solvente. Discos desse material foram implantados no tecido subcutâneo dorsal de ratos e retirados após um período de 2 a 180 dias de implante, processados para embebição em: a) parafina, para detecção de fibras reticulares; imunocitoquímica, utilizando-se anticorpos anti-vimentina, a-actina de músculo liso e anti-colágeno III; e análise morfométrica da incidência temporal de células gigantes; e b) resina k4M, para detecção ultraestrutural de filamentos de vimentina. Quanto à análise in vitro, fibrocondrócitos de menisco de coelhos foram extraídos e cultivados em membranas de PLLA e em lamínulas para avaliar a viabilidade da aplicação dessas membranas como substrato para crescimento celular. A análise in vitro foi realizada após 3, 8, 12, 15 e 18 dias de cultivo através de microscopia de luz e eletrônica de varredura. Os resultados da análise in vivo mostraram a deposição de fibras reticulares no interior da membrana, presença de grande número de fibroblastos e células endoteliais marcadas com anti-vimentina, além de células gigantes com expressão diferencial de vimentina e miofibroblastos na cápsula. Os resultados estatísticos da análise morfométrica da incidência temporal dessas células mostrou aumento gradual do número de células gigantes, bem como de núcleos ao longo do tempo, atingindo um platô nos períodos mais tardios após a implantação. A análise in vitro mostrou que os fibrocondrócitos aderem, diferenciam-se principalmente em células condrocíticas, e produzem grande quantidade de elementos fibrilares da matriz extracelular para formar um tecido fibroso altamente organizado que ocupa principalmente as bordas laterais e lisas da membrana. Na cultura de fibrocondrócitos em lamínulas, notou-se que as células adquirem uma morfologia predominantemente do tipo fibroblástica, com deposição de elementos fibrilares. Membranas de PLLA mostraram sustentar por um período maior a viabilidade de fibrocondrócitos in vitro, estimulando a formação de um tecido fibroso organizado, quando comparado a sistemas de cultivo em lamínulas / Abstract: The use of biomaterials for tissue repair has been demanding the understanding of his in vivo behavior. To evaluate the in vivo and in vitro polymer-cell interaction, PLLA membranes containing 7% of plasticizer were obtained by casting. Discs of this material were introduced in the subcutaneous dorsal tissue of mice and withdrawn after a period from 2 to 180 days of implant, processed by embedding in: a) paraffin, for detection of reticular fibers; immunocytochemistry, by using antibodies against vimentin, smooth muscle¿s a-actin, and type III collagen; and morphometric analysis of the temporary incidence of giant cells; and b) resin k4M for ultrastructural detection of vimentin filaments. For the in vitro analysis, fibrochondrocytes of rabbit¿s meniscus were extracted, and cultivated in membranes of PLLA and in glass coverslips to value the viability of the application of these membranes as substrate to cellular growth. The in vitro analysis was carried out after 3, 8, 12, 15 and 18 days of cultivation through light and electron microscopy. The results of the in vivo analysis showed the deposition of reticular fibers inside the membrane, presence of great number of fibroblasts and endothelial cells marked with anti-vimentin, besides giant cells with differential expression of vimentin, and myofibroblasts in the capsule. The statistical results of the morphometric analysis of the temporary incidence of these cells showed gradual increase of the giant cells number, as well as of nucleus number in these cells along the time, reaching a plateau in the late periods after the implantation. The in vitro analysis showed that the fibrochondrocytes adhere to the membrane, and that they differentiates mainly in chondrocytic cells, and produce large amount of extracellular matrix fibers to form a highly organized fibrous tissue that occupies principally the side and smooth edges of the membrane. In the fibrochondrocytes culture in glass coverslips, it was noticed that the cells acquire a predominantly fibroblastic-like morphology, with deposition of matrix fibers. Membranes of PLLA sustained the in vitro fibrochondrocytes viability for a bigger period of time, stimulating the formation of a fibrous organized tissue when compared to glass coverslips cultivation systems / Doutorado / Histologia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta do tecido conjuntivo subcutâneo de camundongos isogênicos após o uso da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (aPDT), utilizando dois fotossensibilizadores, Derivado fenotiazínico (Helbo Blue) e Curcumina, em diferentes tempos de aplicação de lasers (30 segundos, 1 minuto ou 2 minutos). Foram utilizados 141 camundongos isogênicos da linhagem BALB/c cujo tecido conjuntivo subcutâneo foi exposto aos dois fotossensibilizadores, e em seguida irradiado com laser diodo no grupo do Derivado Fenotiazínico e ao LED no grupo da Curcumina. Para cada fotossensibilizador foram utilizados três tempos de irradiação: 30 segundos, 1 minuto e 2 minutos. Ao final de cada um dos períodos experimentais (7, 21 e 63 dias), uma porção do tecido conjuntivo subcutâneo da área do centro da área em que foi aplicada a aPDT foi removida e submetida ao processamento histotécnico de rotina. Foi realizada a descrição do processo inflamatório de forma qualitativa e semi-quantitativa (por meio de escores). Adicionalmente, foi realizada a marcação imunohistoquímica para neutrófilos e macrófagos. Os dados numéricos foram analisados por meio do programa estatístico Sigma Plot 12.0®, utilizando o teste não paramétrico de Kruskal-Wallis, seguido pelo Pós-teste de Dunn, quando houve diferença significativa entre os grupos. O nível de significância adotado foi de 5%. Foi possível observar que, com relação aos parâmetros fibrosamento, espessura e infiltrado inflamatório, no período inicial de 7 dias, as alterações teciduais foram pequena magnitude. No período de 21 dias, apenas o parâmetro infiltrado inflamatório apresentou pequenas variações entre os grupos. No período final de 63 dias, a compatibilidade tecidual foi observada para os dois fotossensibilizadores (Derivado Fenotiazínico e Curcumina) que não apresentaram diferenças significativas nos parâmetros avaliados, independentemente do tempo de aplicação do laser. / The aim of this study was to evaluate the response of subcutaneous connective tissue of isogenic mice after Antimicrobial Therapy (aPDT), using two photosensitizers, Phenothiazine Derivative (Helbo Blue) and Curcumin, at different laser application times (30 seconds, 1 minute or 2 minutes). One hundred and forty one (141) BALB/c isogenic mice were used, which had the subcutaneous connective tissue exposed to the two photosensitizers, followed by irradiation with laser diode to the Phenothiazine derivatives group, and LED to the Curcumin group. Three irradiation times were used to each photosensitizer: 30 seconds, 1 minute and 2 minutes. At the end of each experimental period (7, 21 and 63 days), a sample of the subcutaneous connective tissue, was collected and histotechnical processing was performed. Inflammatory process was described by qualitative and semi-quantitative analysis, using scores. Additionally, immunohistochemical technique was performed to identify neutrophils and macrophages. Data obtained was analyzed by the statistical program Sigma Plot 12.0®, using the non-parametric Kruskal-Wallis test, followed by the Dunn\'s post-test, when significant difference was found between groups. The significance level adopted was 5%. It was also possible to observe that, in relation with the parameters: fiber collagen formation, tissue thickness and inflammatory infiltrate, at the initial period of 7 days, the tissue alteration were of small significance (p<0.05). At 21-days period, only the inflammatory infiltrate parameter presented variation between groups (p<0.05). In the later time point of 63 days, it was observed tissue compatibility regarding the two photosensitizers (Phenothiazine Derivative and Curcumin) with no differences in the evaluated parameters or the laser application times.

Recentes estudos vêm demonstrando os efeitos benéficos da infiltração percutânea de dióxido de carbono em diferentes campos da Medicina, inclusive como alternativa para tratamento de depósitos localizados de gordura formados após lipoaspiração da parede abdominal. É possível que os efeitos dessa terapia encontrem-se relacionados à capacidade do método em aumentar a circulação sangüínea local, bem como aos efeitos lipolíticos do CO2 sobre adipócitos do tecido envolvido. Entretanto, até a presente data, poucos estudos avaliaram os efeitos histológicos e citométricos sobre adipócitos, presentes no tecido subcutâneo da parede abdominal. O objetivo do presente estudo foi avaliar os efeitos da infusão de gás carbônico sobre a população e morfologia de adipócitos da parede abdominal. Quinze voluntárias, com média de idade de 34 anos, foram submetidas a sessões de infusão de CO2 durante três semanas consecutivas (duas sessões por semana com intervalos de dois a três dias entre cada sessão). O volume de gás carbônico infundido por sessão, em pontos previamente demarcados, foi sempre calculado com base na superfície da área a ser tratada, com volume de gás de 250 mL/100 cm de superfície tratada. Utilizou-se As áreas foram demarcados respeitando-se o limite eqüidistante 2 cm entre elas. Em cada ponto de punção se injetou 10 mL, por sessão, mantendo-se fluxo de gás de 80 mL por minuto. Foram colhidos, por biópsia cirúrgica, fragmentos de tecido celular subcutâneo da região anterior da parede abdominal para estudo histológico antes e após tratamento. Os números e as alterações histomorfológicas nos adipócitos, tais como área, diâmetro médio, perímetro, comprimento, largura e número de adipócitos por campos de observação foram mensurados por processamento de imagem assistida por computador, utilizando-se o programa Image-Pró-plus. Os resultados encontrados antes e após a infusão de gás carbônico foram analisados por meio de teste t pareado, adotando-se nível de significância de 5% (p<0,05). Encontrou-se redução significativa nos valores das variáveis histomorfológicas mensuradas após o uso da hipercapnia tais como redução de sua área (p= 0,00001), diâmetro (p= 0,00001), perímetro (p= 0,00001), comprimento (p= 0,00001), largura (p= 0,00001), maior espaçamento entre as mesmas (p<0,0001) e menor número de adipócitos por campo (p= 0,00001). Conclui-se que existe efeito na morfologia e população dos adipócitos do tecido adiposo subcutâneo após utilização terapêutica de hipercapnia. / Recent researches have demonstrated the beneficial effects of percutaneous infiltration of carbon dioxide in different fields of medicine. Currently, this therapy proves to be an alternative for treatment of localized fat deposits formed after lipectomy of the abdominal wall. The effects appear to be related to the ability of therapy to increase local blood circulation and lipolitic effects of CO2 on tissue involved. However few studies have evaluated histological and cytometric effects on subcutaneous adipocytes tissue subjected to this new therapeutic modality. The purpose of this study was to evaluate the effects of infusion of carbon dioxide on the population and morphology of adipocytes in the abdominal wall. Fifteen volunteers were subjected to sessions of CO2 infusion for three consecutive weeks with two sessions per week at intervals of two to three days between each session. The volume of carbon dioxide infused per session, at points previously marked, was always based on the surface of the area to be treated with gas volume of 250 mL/100 cm2 of surface treated. Areas were demarcated with the limit up to 2 cm equidistant between them. At each point of puncture was injected 10mL of CO2, per session, keeping the gas flow of 80 mL/minute. Fragments of subcutaneous tissue of the anterior abdominal wall were collected by surgical biopsy for histological study before and after treatment. The numbers and histomorphological changes in adipocytes, such as area, diameter, perimeter, length, width and number of adipocytes per field of view were measured by image processing computer assisted using the program Image-Pro Plus. The results before and after the infusion of carbon dioxide were analyzed by paired t test. Significance level of 5% (p<0.05) was adopted. A significant difference was found in the values of variables measured after the use of hypercapnia as reduction of its area (p = 0,00001), diameter (p = 0.00001), perimeter (p = 0,00001), length (p = 0,00001), width (p = 0,00001), greater spacing between them and lower number of adipocytes per field (p = 0,00001). It is concluded that there is effect of adipocyte morphology and population of the subcutaneous adipose tissue after therapeutic use of hypercapnia

Avaliou-se a capacidade dos cimentos endodônticos: Sealapex®, Activ-GP® e AH-Plus® de alterarem o perfil das citocinas nas respostas Th1, Th2 e Th17, após a implantação destes em subcutâneo de camundongos. A quantificação das citocinas IL-2, IL-6, TNF-&alpha;, IFN-&gamma;, IL-4, IL-10 e IL-17 foi realizada in vivo, no tecido reacional circundante aos implantes, os quais foram confeccionados a partir de sondas nasogástricas estéreis e apirogênicas de cloreto de polivinila preenchidas com os cimentos, tendo um grupo controle com sondas vazias. Utilizou-se camundongos isogênicos da linhagem C57BL/6 machos de 6/8 semanas de vida sendo que cada um recebeu 2 implantes na região dorsal (lado direito e esquerdo). Após os períodos experimentais de 7, 21 e 63 dias, com os camundongos anestesiados, os implantes foram removidos juntamente com o tecido circundante, e os animais sacrificados em seguida por deslocamento cervical. As amostras de cada grupo foram divididas sendo: duas, contendo implante/tecido, processadas histotecnicamente e as demais com apenas tecido (sem implante) foram homogeneizadas e centrifugadas com solução formada por tampão RIPA e inibidor de protease. O sobrenadante, fruto deste processo, foi coletado e a dosagem das citocinas realizada através do kit CBA mouse-Th1/Th2/Th17 Cytokine Kit (BD Cytometric Bead Array, San Jose, CA, USA) em análise por citometria de fluxo. Os parâmetros avaliados foram a concentração da citocina em função do cimento testado em cada período experimental. Submeteu-se os resultados à análise estatística por meio do teste t com a correção de Welch\'s. Para todos os testes o nível de significância foi de 5%. Com relação à IL-2 houve diferenças estatísticas significantes entre os grupos Activ-GP® e AH-Plus® (p=0,0391). No período de 21 dias foram detectadas diferenças entre o grupo controle e AH-Plus® (p=0,0402) e entre o grupo Sealapex® e AH-Plus® (p=0,0244). O AH-Plus® induziou um maior aumento na IL-6, aos 7 dias em relação ao Activ-GP® (p=0,0286) e aos 21 dias entre o grupo controle (p=0.0402) e Activ-GP® (p=0.0244). Os níveis de TNF-&alpha; foram estatisticamente superiores após 7 dias quando comparou-se o grupo AH-Plus® com os demais. Observou-se que no grupo controle aos 7 e 21 dias ocorreram diferenças estatísticas em relação ao Sealapex® e AH-Plus® respectivamente quando avaliadas as concentrações de IFN-&gamma;. Houve também diferenças estatísticas entre o grupo controle e Sealapex® (p=0,0158) no período de 7 dias para a citocina IL-4. Os valores de IL-10 foram estatisticamente superiores para o grupo controle em relação ao Activ-GP® no período de 21 dias (p=0,0471). Com relação a IL-17 no período de 21 dias, observou-se os maiores valores para o grupo controle, seguido pelo Sealapex®, Activ-GP® e AH-Plus®. Foram detectadas diferenças entre os grupos controle e AH-Plus® (p=0,0121), controle e Activ-GP® (p=0,0262) e entre Sealapex® e Activ GP® (p=0,0314). Baseado nesses resultados podê-se concluir que: os cimentos endodônticos são capazes de modular as respostas Th1, Th2 e Th17 através da inibição ou estimulação da liberação das citocinas testadas. O cimento AH-Plus® promoveu as maiores diferenças no perfil de resposta Th1. / It was evaluated the capacity of the following endodontic sealers: Sealapex, Activ-GP and AH-Plus to modify the cytokine profile in Th1, Th2 and Th17 responses, after their implantation in the subcutaneous tissue of mice. Quantification of IL-2, IL-6, TNF-&alpha;, IFN-&gamma;, IL-4, IL-10 and IL-17 was performed in vivo, in the reactional tissue surrounding the implants, which were made from sterile nasogastric probes and apyrogenic of polyvinyl chloride filled with sealer, and a control group of empty probes. It was used isogenic mice of C57BL/6 lineage, 6/8 weeks old males, each of which received two implants in the dorsal region (left and right). After the experimental time of 7, 21 and 63 days, the mice were anesthetized and the implants were removed along with the surrounding tissue, the animals were then sacrificed by cervical dislocation. Samples from each group were divided as follows: two containing implant / tissue processed histologically and with only the remaining tissue (without implant) were mixed and centrifuged with a solution formed by RIPA buffer and protease inhibitors. The supernatant result of this process was collected and cytokine dosage accomplished by mouse-Th1/Th2/Th17 Cytokine CBA Kit Kit (BD cytometric Bead Array, San Jose, CA, USA) for flow cytometry analysis. The evaluated parameters were the cytokine concentration in function of sealer tested in each trial. The results were submitted to statistical analysis using the t test with Welch\'s correction. For all tests the significance level was 5%. With respect to IL-2 there were significant statistical differences between groups-Activ GP and AH-Plus (p=0.0391). In the period of 21 days differences were found between the control group and AH-Plus (p=0.0402) and between the group Sealapex and AH-Plus (p=0.0244). The AH-Plus induced a greater increase in IL-6, at 7 days compared to Activ-GP (p=0.0286) and at 21 days between the control group (p=0.0402) and Activ-GP (p=0.0244). The levels of TNF-&alpha; were significantly higher after 7 days when the AH-Plus group was compared with others. It was observed that in the control group at 7 and 21 days there were statistical differences in relation to Sealapex and AH-Plus respectively when evaluated concentrations of IFN-&gamma;. There were also significant differences between the control group and Sealapex (p=0.0158) within 7 days for the cytokine IL-4. The amounts of IL-10 were statistically higher in the control group compared to the Activ GP in a period of 21 days (p=0.0471). With respect to IL-17 in a period of 21 days, it was observed the highest values for the control group, followed by Sealapex, Activ-GP and AH-Plus. Differences were found between the control groups and AH-Plus (p=0.0121), control and Activ-GP (p=0.0262) and between Sealapex and Activ-GP (p=0.0314). Based on the presented results theendodontic sealers are able to promote changes in the response cytokine profile Th1, Th2 and Th17; Sealer AH-Plus produced the greatest changes, in the Th1 response profile.

Avaliou-se a capacidade dos cimentos endodônticos: Sealapex®, Activ-GP® e AH-Plus® de alterarem o perfil das citocinas nas respostas Th1, Th2 e Th17, após a implantação destes em subcutâneo de camundongos. A quantificação das citocinas IL-2, IL-6, TNF-&alpha;, IFN-&gamma;, IL-4, IL-10 e IL-17 foi realizada in vivo, no tecido reacional circundante aos implantes, os quais foram confeccionados a partir de sondas nasogástricas estéreis e apirogênicas de cloreto de polivinila preenchidas com os cimentos, tendo um grupo controle com sondas vazias. Utilizou-se camundongos isogênicos da linhagem C57BL/6 machos de 6/8 semanas de vida sendo que cada um recebeu 2 implantes na região dorsal (lado direito e esquerdo). Após os períodos experimentais de 7, 21 e 63 dias, com os camundongos anestesiados, os implantes foram removidos juntamente com o tecido circundante, e os animais sacrificados em seguida por deslocamento cervical. As amostras de cada grupo foram divididas sendo: duas, contendo implante/tecido, processadas histotecnicamente e as demais com apenas tecido (sem implante) foram homogeneizadas e centrifugadas com solução formada por tampão RIPA e inibidor de protease. O sobrenadante, fruto deste processo, foi coletado e a dosagem das citocinas realizada através do kit CBA mouse-Th1/Th2/Th17 Cytokine Kit (BD Cytometric Bead Array, San Jose, CA, USA) em análise por citometria de fluxo. Os parâmetros avaliados foram a concentração da citocina em função do cimento testado em cada período experimental. Submeteu-se os resultados à análise estatística por meio do teste t com a correção de Welch\'s. Para todos os testes o nível de significância foi de 5%. Com relação à IL-2 houve diferenças estatísticas significantes entre os grupos Activ-GP® e AH-Plus® (p=0,0391). No período de 21 dias foram detectadas diferenças entre o grupo controle e AH-Plus® (p=0,0402) e entre o grupo Sealapex® e AH-Plus® (p=0,0244). O AH-Plus® induziou um maior aumento na IL-6, aos 7 dias em relação ao Activ-GP® (p=0,0286) e aos 21 dias entre o grupo controle (p=0.0402) e Activ-GP® (p=0.0244). Os níveis de TNF-&alpha; foram estatisticamente superiores após 7 dias quando comparou-se o grupo AH-Plus® com os demais. Observou-se que no grupo controle aos 7 e 21 dias ocorreram diferenças estatísticas em relação ao Sealapex® e AH-Plus® respectivamente quando avaliadas as concentrações de IFN-&gamma;. Houve também diferenças estatísticas entre o grupo controle e Sealapex® (p=0,0158) no período de 7 dias para a citocina IL-4. Os valores de IL-10 foram estatisticamente superiores para o grupo controle em relação ao Activ-GP® no período de 21 dias (p=0,0471). Com relação a IL-17 no período de 21 dias, observou-se os maiores valores para o grupo controle, seguido pelo Sealapex®, Activ-GP® e AH-Plus®. Foram detectadas diferenças entre os grupos controle e AH-Plus® (p=0,0121), controle e Activ-GP® (p=0,0262) e entre Sealapex® e Activ GP® (p=0,0314). Baseado nesses resultados podê-se concluir que: os cimentos endodônticos são capazes de modular as respostas Th1, Th2 e Th17 através da inibição ou estimulação da liberação das citocinas testadas. O cimento AH-Plus® promoveu as maiores diferenças no perfil de resposta Th1. / It was evaluated the capacity of the following endodontic sealers: Sealapex, Activ-GP and AH-Plus to modify the cytokine profile in Th1, Th2 and Th17 responses, after their implantation in the subcutaneous tissue of mice. Quantification of IL-2, IL-6, TNF-&alpha;, IFN-&gamma;, IL-4, IL-10 and IL-17 was performed in vivo, in the reactional tissue surrounding the implants, which were made from sterile nasogastric probes and apyrogenic of polyvinyl chloride filled with sealer, and a control group of empty probes. It was used isogenic mice of C57BL/6 lineage, 6/8 weeks old males, each of which received two implants in the dorsal region (left and right). After the experimental time of 7, 21 and 63 days, the mice were anesthetized and the implants were removed along with the surrounding tissue, the animals were then sacrificed by cervical dislocation. Samples from each group were divided as follows: two containing implant / tissue processed histologically and with only the remaining tissue (without implant) were mixed and centrifuged with a solution formed by RIPA buffer and protease inhibitors. The supernatant result of this process was collected and cytokine dosage accomplished by mouse-Th1/Th2/Th17 Cytokine CBA Kit Kit (BD cytometric Bead Array, San Jose, CA, USA) for flow cytometry analysis. The evaluated parameters were the cytokine concentration in function of sealer tested in each trial. The results were submitted to statistical analysis using the t test with Welch\'s correction. For all tests the significance level was 5%. With respect to IL-2 there were significant statistical differences between groups-Activ GP and AH-Plus (p=0.0391). In the period of 21 days differences were found between the control group and AH-Plus (p=0.0402) and between the group Sealapex and AH-Plus (p=0.0244). The AH-Plus induced a greater increase in IL-6, at 7 days compared to Activ-GP (p=0.0286) and at 21 days between the control group (p=0.0402) and Activ-GP (p=0.0244). The levels of TNF-&alpha; were significantly higher after 7 days when the AH-Plus group was compared with others. It was observed that in the control group at 7 and 21 days there were statistical differences in relation to Sealapex and AH-Plus respectively when evaluated concentrations of IFN-&gamma;. There were also significant differences between the control group and Sealapex (p=0.0158) within 7 days for the cytokine IL-4. The amounts of IL-10 were statistically higher in the control group compared to the Activ GP in a period of 21 days (p=0.0471). With respect to IL-17 in a period of 21 days, it was observed the highest values for the control group, followed by Sealapex, Activ-GP and AH-Plus. Differences were found between the control groups and AH-Plus (p=0.0121), control and Activ-GP (p=0.0262) and between Sealapex and Activ-GP (p=0.0314). Based on the presented results theendodontic sealers are able to promote changes in the response cytokine profile Th1, Th2 and Th17; Sealer AH-Plus produced the greatest changes, in the Th1 response profile.

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta do tecido conjuntivo subcutâneo de camundongos isogênicos após o uso da Terapia Fotodinâmica antimicrobiana (aPDT), utilizando dois fotossensibilizadores, Derivado fenotiazínico (Helbo Blue) e Curcumina, em diferentes tempos de aplicação de lasers (30 segundos, 1 minuto ou 2 minutos). Foram utilizados 141 camundongos isogênicos da linhagem BALB/c cujo tecido conjuntivo subcutâneo foi exposto aos dois fotossensibilizadores, e em seguida irradiado com laser diodo no grupo do Derivado Fenotiazínico e ao LED no grupo da Curcumina. Para cada fotossensibilizador foram utilizados três tempos de irradiação: 30 segundos, 1 minuto e 2 minutos. Ao final de cada um dos períodos experimentais (7, 21 e 63 dias), uma porção do tecido conjuntivo subcutâneo da área do centro da área em que foi aplicada a aPDT foi removida e submetida ao processamento histotécnico de rotina. Foi realizada a descrição do processo inflamatório de forma qualitativa e semi-quantitativa (por meio de escores). Adicionalmente, foi realizada a marcação imunohistoquímica para neutrófilos e macrófagos. Os dados numéricos foram analisados por meio do programa estatístico Sigma Plot 12.0®, utilizando o teste não paramétrico de Kruskal-Wallis, seguido pelo Pós-teste de Dunn, quando houve diferença significativa entre os grupos. O nível de significância adotado foi de 5%. Foi possível observar que, com relação aos parâmetros fibrosamento, espessura e infiltrado inflamatório, no período inicial de 7 dias, as alterações teciduais foram pequena magnitude. No período de 21 dias, apenas o parâmetro infiltrado inflamatório apresentou pequenas variações entre os grupos. No período final de 63 dias, a compatibilidade tecidual foi observada para os dois fotossensibilizadores (Derivado Fenotiazínico e Curcumina) que não apresentaram diferenças significativas nos parâmetros avaliados, independentemente do tempo de aplicação do laser. / The aim of this study was to evaluate the response of subcutaneous connective tissue of isogenic mice after Antimicrobial Therapy (aPDT), using two photosensitizers, Phenothiazine Derivative (Helbo Blue) and Curcumin, at different laser application times (30 seconds, 1 minute or 2 minutes). One hundred and forty one (141) BALB/c isogenic mice were used, which had the subcutaneous connective tissue exposed to the two photosensitizers, followed by irradiation with laser diode to the Phenothiazine derivatives group, and LED to the Curcumin group. Three irradiation times were used to each photosensitizer: 30 seconds, 1 minute and 2 minutes. At the end of each experimental period (7, 21 and 63 days), a sample of the subcutaneous connective tissue, was collected and histotechnical processing was performed. Inflammatory process was described by qualitative and semi-quantitative analysis, using scores. Additionally, immunohistochemical technique was performed to identify neutrophils and macrophages. Data obtained was analyzed by the statistical program Sigma Plot 12.0®, using the non-parametric Kruskal-Wallis test, followed by the Dunn\'s post-test, when significant difference was found between groups. The significance level adopted was 5%. It was also possible to observe that, in relation with the parameters: fiber collagen formation, tissue thickness and inflammatory infiltrate, at the initial period of 7 days, the tissue alteration were of small significance (p<0.05). At 21-days period, only the inflammatory infiltrate parameter presented variation between groups (p<0.05). In the later time point of 63 days, it was observed tissue compatibility regarding the two photosensitizers (Phenothiazine Derivative and Curcumin) with no differences in the evaluated parameters or the laser application times.