Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-11-28T12:13:06Z No. of bitstreams: 1 Liliane Marques da Silva.pdf: 566459 bytes, checksum: 54839b1e8470b48f9d90167ceb6a2716 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-28T12:13:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Liliane Marques da Silva.pdf: 566459 bytes, checksum: 54839b1e8470b48f9d90167ceb6a2716 (MD5) Previous issue date: 2013-02-04 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The bacterium Bacillus thuringiensis (Berliner) presents remarkable aspects for the control of insect pests, such as its mode of action, specificity and selectivity. Thus, this study aimed to evaluate the toxic activity of B. thuringiensis isolates in larvae of Diatraea saccharalis (Fabr.) and Diatraea flavipennella (Box) and determine the toxin gene contents for the very active isolates. The insects were maintained on artificial diet. Twenty four isolates were used, which were preserved in LB medium, 15% glycerol and 0.02% SDS and kept at -80 ° C. General and specific primers were used to survey for toxin genes. In pathogenicity tests with D. saccharalis and D. flavipennella, 16 and 18 isolates showed activity toward borers, respectively. The LC50 values among isolates for the population of D. saccharalis ranged from 0.08 x 105 (LIIT-0105) and 4104 x 105 (LIIT-2707) crystals + spores/mL. The isolated LIIT-0105 was 4,382 and 18.59 times more toxic than Btk and Btt, respectively. For D. flavipennella, the LC50 values between isolates ranged from 0.40 x 105 (LIIT-2707) and 542.75 x 105 (LIIT-2109) crystals + spores/mL. The isolate LIIT-2707 was 1,137 and 11.52 times more toxic than Btk and Btt, respectively. The isolate LIIT-0105 presented the lowest LC50 for D. saccharalis that harbored the genes cry1, cry2, cry8 cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1C, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1, cry2Ab2, cry9C. For the borer D. flavipennella, the isolated LIIT-2707 presented the lowest LC50 and the following genes cry1, cry2, cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1 and cry2Ab2 were amplified. The results suggest that B. thuringiensis isolates present a great variability of genes for bioprospection, and thus potential for developing new products and insertion on plants to express Bt genes for the control of D. saccharalis and D. flavipennella. / A bactéria Bacillus thuringiensis (Berliner) apresenta características essenciais no controle de insetos-praga, tais como seu modo de ação, especificidade e seletividade. Dessa forma, esta pesquisa objetivou avaliar a atividade tóxica de isolados de B. thuringiensis em larvas de Diatraea saccharalis (Fabr.) e Diatraea flavipennella (Box) e caracterizar quanto à presença de gene de toxinas os isolados tóxicos. Estas pragas foram mantidas em dieta artificial. Foram utilizados 24 isolados, preservados em meio LB, glicerol a 15% e SDS a 0,02% e mantidos a -80ºC. Para caracterização molecular foram utilizados iniciadores gerais e específicos. Nos testes de patogenicidade com D. saccharalis e D. flavipennella, 16 e 18 isolados mostraram-se ativos, respectivamente. Os valores de CL50 entre os isolados para a população de D. saccharalis variaram entre 0,08 x 105 (LIIT-0105) e 4104 x 105 (LIIT-2707) esporos + cristais/mL. O isolado LIIT-0105 foi 18,59 e 4382 vezes mais tóxico que o Btk e Btt, respectivamente. Para D. flavipennella, os valores de CL50 entre os isolados variaram entre 0,40 x 105 (LIIT-2707) e 542,75 x 105 (LIIT-2109) esporos + cristais/mL. O isolado LIIT-2707 foi 11,52 e 1137 vezes mais tóxico que o Btk e Btt, respectivamente. O isolado LIIT-0105 que teve a menor CL50 para D. saccharalis apresentou os genes cry1, cry2, cry8, cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1C, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1, cry2Ab2 e cry9C e para D. flavipennella o isolado LIIT-2707 apresentou a menor CL50 amplificando para os genes cry1, cry2, cry9, cry1Aa, cry1Ab, cry1Ac, cry1B, cry1D, cry1F, cry1I, cry2A, cry2Aa1 e cry2Ab2. Os resultados sugerem que isolados de B. thuringiensis apresentam grande potencial e variabilidade para bioprospecção desta bactéria, para o desenvolvimento de produtos ou transformação de plantas que expressem genes de Bt para o controle de D. saccharalis e D. flavipennella.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-05-25T13:53:41Z No. of bitstreams: 2 Tese - Jacqueline Barbosa Nascimento - 2015.pdf: 2440624 bytes, checksum: e9711ea5d1821679a63f94a9b2dda27a (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-05-25T13:56:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Tese - Jacqueline Barbosa Nascimento - 2015.pdf: 2440624 bytes, checksum: e9711ea5d1821679a63f94a9b2dda27a (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-25T13:56:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese - Jacqueline Barbosa Nascimento - 2015.pdf: 2440624 bytes, checksum: e9711ea5d1821679a63f94a9b2dda27a (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-03-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The change in composition of the host-plants in the agricultural landscape can generate enough divergent natural selection to allow ecological adaptation that leads to specialization and subsequently to speciation in species of insect. The objective of this study was to determine the diversity of genetic and population structures of Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae), which was collected in two hostplants using microsatellite markers. Samples of larvae of this stem borer were collected on rice and sugarcane in different fields during the harvest of 2012/2013 in the states of Tocantins, Goiás, Mato Grosso, Mato Grosso do Sul, and Rio Grande do Sul. A total of 127 alleles were found distributed among the eight loci in seventeen populations, with a total of 426 individuals. The loci were highly polymorphic, with average of 15,87 alleles. The expected heterozygosity (HE) and observed (HO) were 0,579 and 0,350, respectively. A lower total number of alleles (35) was found in population of Morrinhos, as opposed to Formoso do Araguaia which has the largest (62). The same way, the smallest and the largest average number of alleles per locus (Am) were observed in these populations (4,38 and 7,75). The population from the Formoso do Araguaia showed the highest value for the allelic richness (6,82). In all populations, the observed heterozygosity (HO) was lower than expected (HE). The average polymorphic information content (PIC) in populations of D. saccharalis was 0,530. The intrapopulational fixation indexes (f) estimated for each population showed positive values and significantly different from zero with a average value of 0,403. The coefficient of inbreeding species was 0,399. The estimates FIT and FST (θ) values were 0,437 and 0,062 respectively. These global estimates indicated that there is genetic structure among these populations. Despite global estimates had indicated genetic structure, the structuring (θ) among of populations of the sugarcane was not significant; in contrast with the populations of the rice which showed θ values significant. There was a significant correlation between genetic and geographic distances estimated using the Mantel’s test (r=0,76; p= 0,0033), in which there is an increase in pattern of genetic distance with the increase of geographic distance in cluster analysis and population structures observed with the formation of the two groups of populations. The first was formed by populations from the state of Goiás and the second was composed of populations of Mato Grosso, Mato Grosso do Sul and Rio Grande do Sul. The population of Formoso do Araguaia sampled in rice showed in an intermediate position to the two groups formed. These results indicate that the genetic diversity of D. saccharalis is structured in space and the plant-host, in this study, did not have a key role in the process of genetic divergence populations. / A mudança na composição das plantas-hospedeiras na paisagem agrícola pode gerar seleção divergente suficiente para permitir a adaptação ecológica que leva a especialização e subsequentemente à especiação de espécie de insetos. O objetivo deste estudo foi determinar a diversidade e estruturação genética de populações de Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) (Lepidoptera: Crambidae), coletadas em duas culturas hospedeiras, utilizando marcadores microssatélites. As amostras de lagartas foram coletadas em plantas de arroz e cana-de-açúcar em diferentes áreas de cultivo durante a safra 2012/2013, nos Estados de Tocantins, Goiás, Mato Grosso, Mato Grosso do Sul e Rio Grande do Sul. No total, foram encontrados 127 alelos distribuídos entre oito locos em dezessete populações com um total de 426 indivíduos. Os locos foram polimórficos, com média de 15,87 alelos. Os valores de heterozigosidade média esperada (HE) e observada (HO) para os locos foram de 0,579 e 0,350, respectivamente. Um menor número de alelos (35) foi encontrado na população Morrinhos, em contraposição à população de Formoso do Araguaia que apresentou o maior (62). Da mesma forma, o maior e o menor número médio de alelos por locos (Am) foram observados nestas populações (7,75 e 4.38). A população oriunda de Formoso do Araguaia apresentou o maior valor médio para a riqueza alélica (6,82). A média do conteúdo de informação polimórfica (PIC) nas populações de D. saccharalis foi de 0,530. Os índices de fixação intrapopulacional (f) apresentaram valores positivos e significativamente diferentes de zero com valor médio de 0,403. O coeficiente de endogamia da espécie foi de 0,399. Os valores de FIT e FST (θ) estimados foram respectivamente 0,437 e 0,062. Estas estimativas globais indicaram que há estruturação genética entre estas populações. Apesar das estimativas globais terem indicado estruturação genética, a estruturação entre as populações (θ) em cana-de-açúcar não foi significativa, ao contrário das populações em arroz as quais os valores de θ foram significativos. Houve correlação significativa entre as distâncias genéticas e geográficas estimadas por meio do teste de Mantel (r=0,76; p= 0,0033) indicando um padrão de aumento da distância genética com o aumento da distância geográfica. Na análise de agrupamento e estruturação populacional, formaram-se dois grupos. O primeiro formado por populações oriundas do Estado de Goiás e o segundo composto pelas populações de Mato Grosso, Mato Grosso do Sul e Rio Grande do Sul. A população de Formoso do Araguaia, amostrada na cultura do arroz apresentou-se em uma posição intermediária aos dois grupos formados. Estes resultados indicam que a diversidade genética de D. saccharalis está estruturada no espaço e que a planta-hospedeira, neste estudo, não teve um papel fundamental no processo de divergência genética de populações.

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-12-03T16:52:58Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Carlos Alberto da Silva Ferreira - 2013.pdf: 3762874 bytes, checksum: 06ca5b93d3764e7a71a4973b9944d204 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-12-03T16:54:54Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Carlos Alberto da Silva Ferreira - 2013.pdf: 3762874 bytes, checksum: 06ca5b93d3764e7a71a4973b9944d204 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-03T16:54:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Carlos Alberto da Silva Ferreira - 2013.pdf: 3762874 bytes, checksum: 06ca5b93d3764e7a71a4973b9944d204 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2013-10-29 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / The sugarcane borer Diatraea saccharalis Fabr. (Lepidoptera: Crambidae) is one of the most important pests of sugarcane in Brazil. The damages are occasioned by caterpillars that open galleries inside the stems causing death of a large number of tillers in young sugarcane plantations, and a sharp reduction of productivity in more developed sugarcane plantations. Another very common issue is the entrance of fungus that cause the “red rot”, which reduces the sugar level in the stems because of the saccharose inversion stored in the plant. The borer’s association with microorganisms in the field results in the borer rot complex, a disease, responsible for significant agro industrial losses. So, the goal of this thesis was to evaluate the effects of the intensity of infestation of Diatraea saccharalis in the technological quality of varieties of sugarcane in the State of Goias. The experiment was conducted in the town of Goianesia, GO at the plantation field of Jalles Machado Plant during the period of April 2011 to May 2012, where was applied irrigation system with 50% of hydric necessity of culture. The experimental delimitation used was randomized blocks with the treatment being formed by sixteen variety: CTC2, CTC4, CTC9, CTC11, CTC15, CTC18, IAC87-3396, IAC91 -1099, IACSP94-3046, IACSP94- 2094, IACSP94-2101, IACSP95-5000, RB857515, RB92579, RB966928 e SP86-0042. There were two experiments conducted to measure the intensity of infestation of Diatraea saccharalis. The experiment one was randomly conducted in each portion, while the experiment two consisted of sugarcane grouped as plants with borer attacks, and those without signs of borer attacks. Thereafter, there were separatly technological analyses for both kinds of experiments. According to the results, the types highlighted the most were CTC9, CTC15, CTC11 e IAC91 -1099, showing high levels of technological quality and productivity. For interaction type versus borer there was not significant difference through the test F, which means the borer effects is independent of the type analysed. For the types studied 10,7% of samples with borer internodes resulted in the lowering of technological quality of sugarcane, due to reduction of brix broth, brix sugarcane, pol broth, pol sugarcane and recoverable total sugar. For every 1% of borer internodes, a loss of 0,26% of sugars and 0,25% in ATR occurs. For the chemical control using the product ALTACOR® (Chlorantraniliprole 35%), the control level of sugar cane borer is 3,29% of intensity of infestation, against 1% if using the Cotesia flavipes. / A broca da cana Diatraea saccharalis Fabr. (Lepidoptera: Crambidae) é uma das mais importantes pragas da cana-de-açúcar no Brasil. Os danos são ocasionados pelas lagartas que abrem galerias no interior dos colmos, provocando morte de grande número de perfilhos em canaviais jovens, e acentuada redução de produtividade em canaviais mais desenvolvidos, também é comum a entrada de fungos, que causam a “podridão vermelha”, com redução do teor de açúcar nos colmos devido à inversão da sacarose armazenada na planta. A associação da broca com micro-organismos presentes no campo resulta no complexo broca-podridão, responsável por significativas perdas agroindustriais. Assim, objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da intensidade de infestação de Diatraea saccharalis sobre a qualidade tecnológica de variedades de cana-de-açúcar em Goiás. O experimento foi conduzido no município de Goianésia, GO em área de plantio da Usina Jalles Machado, no período de abril de 2011 a maio de 2012, onde foram aplicadas lâminas de irrigação correspondente à 50% da necessidade hídrica da cultura. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos ao acaso, sendo os tratamentos constituídos por 16 variedades: CTC2, CTC4, CTC9, CTC11, CTC15, CTC18, IAC87-3396, IAC91 -1099, IACSP94-3046, IACSP94-2094, IACSP94-2101, IACSP95-5000, RB857515, RB92579, RB966928 e SP86-0042. Foram realizadas dois tipos de amostragens para se medir a intensidade de infestação por Diatraea saccharalis. A amostragem 1 foi realizada aleatoriamente em cada parcela e, já amostragem 2, foram escolhidas canas com ataque por broca e canas sem sinais de ataques por broca. Consequentemente, foram realizadas análises tecnológicas separadamente para ambos os tipos de amostragens. De acordo com os resultados, as variedades que mais se destacaram foram CTC9, CTC15, CTC11 e IAC91 -1099, apresentando altos índices de qualidade tecnológica e de produtividade. Para interação variedade x broca, não houve diferença significativa pelo teste F, ou seja, o efeito da broca independe da variedade avaliada. Para as variedades estudadas, o índice de 10,7% de entrenós brocados resulta em diminuição na qualidade tecnológica da cana, devido à redução nos teores de brix caldo, brix cana, pol caldo, pol cana e açúcares totais recuperáveis. Para cada 1% de entrenós brocados, ocorrem perdas de 0,26% de açúcares e 0,25% em ATR. Para o controle químico utilizando o produto Altacor (Clorantraniliprole 35%), o nível de controle da broca-da-cana é de 3,29% de intensidade de infestação e de 1% quando se faz o uso de Cotesia flavipes.

Made available in DSpace on 2016-02-26T14:53:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DanielePerassaCosta.pdf: 931008 bytes, checksum: 8c0b48420c365bdac818f652d6ac9517 (MD5) Previous issue date: 2009-03-05 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The sugarcane borer Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) is one the most important pest of the sugarcane crop caused damage all through vegetative cycle. Knowledge of the spatial distribution of insects is important to the development of sampling plans and techniques in control crops systems. This main of this study were to determine the spatial distribution of D. saccharalis in commercial sugarcane crop. The experiment was conducted on sugarcane field variety SP-803280, the Usina Dourados Álcool e Açúcar S/A, during January to October of 2008 in the municipality of Dourados, Mato Grosso do Sul. We perform 21 samples it was observed variables culms hole, larvae and pupae of D. saccharalis, in an area of approximately 22,500 m2 divided into 100 plots of 225 m2 (15 m x 15 m). The indices of dispersion used to define the model of spatial distribution were: variance/mean (I), Morisita index (Iσ) and the exponent K of the negative binomial distribution. We also tested the settings of the probability distributions of the Poisson, negative binomial and binomial positive. The variables of spatial distribution; culms with holes and numbers of caterpillars fit the negative binomial distribution (aggregated) and Poisson (random), respectively in the studied area. Based on the spatial distribution of larvae of D. saccharalis is recommend that random sampling is performed with larger number possible of samples available in the field, so that the estimated quantity of caterpillars is the closest to the real / A lagarta Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) é a principal praga da cultura da cana-de-açúcar, ocasionando danos durante todo o ciclo vegetativo. O conhecimento da distribuição espacial do inseto é primordial ao desenvolvimento de planos de amostragens e técnicas de controle em sistemas de culturas agrícolas. Este trabalho objetivou determinar a distribuição espacial de D. saccharalis, em cultivo comercial de cana-de-açúcar. O experimento foi conduzido em talhão de cana-de-açúcar variedade SP-803280, pertencente à Usina Dourados Álcool e Açúcar S/A, situada em Dourados/Mato Grosso do Sul, no período de janeiro a outubro de 2008. Foram realizadas 21 amostragens observando-se as variáveis colmos com orifício, lagartas e pupas de D. saccharalis, em cana numa área de aproximadamente 22.500 m2 dividido em 100 parcelas de 225 m2 (15 m x 15 m). Os índices de dispersão utilizados para a definição do modelo de distribuição espacial foram: razão variância/média (I), índice de Morisita (Iσ) e o expoente K da distribuição binomial negativa. Também se testou os ajustes às distribuições de probabilidade de Poisson, binomial negativa e binomial positiva. As variáveis de distribuição espacial; colmos com orifícios e números de lagartas se ajustaram a distribuição binomial negativa (agregada) e Poisson (aleatória), respectivamente, na área de estudo. Com base na distribuição espacial das lagartas de D. saccharalis recomenda-se que a amostragem seja realizada aleatoriamente com maior número possível de amostras no talhão, para que a quantidade estimada de lagartas seja a mais próxima da real

Diatraea saccharalis (Fabricius) é a principal praga da cultura da cana-de-açúcar, causando danos diretos e indiretos, e seu controle é, em grande parte, realizado por liberações massais do endoparasitoide Cotesia flavipes (Cameron). Entretanto, o uso de inseticidas sintéticos por meio de aplicações foliares para controle da praga antes de sua entrada no colmo tem sido intensificado no Brasil. Nesse contexto, objetivou-se com o presente estudo, avaliar a toxicidade e a persistência dos principais inseticidas utilizados na cultura para controle de D. saccharalis pelo contato residual em folhas tratadas nas maiores concentrações de campo, conforme classificação da IOBC/WPRS. Os tratamentos foram clorantraniliprole (Altacor® 350 WG), lambda-cialotrina + clorantraniliprole (Ampligo® 150 SC), clorfluazuron (Atabron® 50 EC), triflumuron (Certero® 480 SC), lambda-cialotrina + tiametoxam (Engeo™ Pleno), tebufenozide (Mimic® 240 SC), novaluron (Rimon® 100 EC) e controle (água destilada). Em laboratório, discos da folha de cana-de-açúcar foram colocados em placas de Petri contendo uma solução composta por [água:ágar] e pulverizadas em torre de Potter, conforme recomendações da IOBC/WPRS. Após 2 h da aplicação, adultos de C. flavipes foram anestesiados com CO2 por 10 segundos e introduzidos em cada placa. Para avaliação da persistência, plantas de cana-de-açúcar foram pulverizadas com os tratamentos até o ponto de escorrimento em casa de vegetação. Aos 5, 15 e 30 dias após aplicação (DAA) foram coletadas as folhas e discos das folhas foram colocados em placas de Petri contendo uma solução composta por [água:ágar]. Para cada dia de avaliação, adultos de C. flavipes foram anestesiados com CO2 por 10 segundos e introduzidos em cada placa contendo os tratamentos. Tanto para o experimento em laboratório como para o de persistência, avaliaram-se os efeitos letal (após 24 h) e subletais da geração maternal e subletais das gerações F1 e F2. As placas foram acondicionadas em sala climatizada com temperatura de 25 ± 2 °C, UR 70 ± 10% e fotofase de 14 horas. Após avaliação da toxicidade aguda, os inseticidas Altacor® 350 WG, Atabron® 50 EC, Certero® 480 SC, Mimic® 240 SC e Rimon® 100 EC foram classificados como inócuos (classe 1) e vida curta (classe 1). Entretanto, Altacor®, Atabron®, Certero® e Rimon® causaram redução no tamanho da tíbia posterior de fêmeas da geração F1, Rimon® reduziu a razão sexual e Atabron® reduziu o peso das massas de casulos da geração F2. Os tratamentos Ampligo® e Engeo™ Pleno causaram 100% de mortalidade após 2 h da aplicação, sendo classificados como nocivos (classe 4) e em bioensaio de semi-campo como persistentes (classe 4). Portanto, apenas Mimic® pode ser recomendado para controle de D. saccharalis em associação com o controle biológico com liberações de C. flavipes. Os inseticidas enquadrados nas classes 4, nocivos ao parasitoide, devem ser estudados em testes de campo para confirmação da toxicidade. / Diatraea saccharalis (Fabricius) is the main pest of the sugarcane crop, causing direct and indirect damage, and its control is largely accomplished by mass releases of the endoparasitoid Cotesia flavipes (Cameron). However, the use of synthetic insecticides through foliar applications to control the pest before its entry into the stem has been intensified in Brazil. In this context, the objective of this study was to evaluate the toxicity and persistence of the main insecticides used in the crop for the control of D. saccharalis by the residual contact of treated leaves at the highest field concentrations, according to the IOBC / WPRS classification. The treatments were chlorantraniliprole (Altacor® 350 WG), lambda-cyhalothrin + chlorantraniliprole (Ampligo® 150 SC), chlorfluazuron (Atabron® 50 EC), triflumuron (Certero® 480 SC), lambda-cyhalothrin + thiamethoxam (Engeo ™ Pleno), tebufenozide (Mimic® 240 SC), novaluron (Rimon® 100 EC) and control (distilled water). In the laboratory, sugar cane leaf discs were placed in Petri dishes containing a solution composed of water: agar and pulverized in a Potter tower, according to IOBC/WPRS recommendations. After 2 h of application, adults of C. flavipes were anesthetized with CO2 for 10 seconds and introduced into each plate containing the treatments. To evaluate the persistence, sugarcane plants were sprayed with the treatments to the point of runoff under greenhouse conditions. At 5, 15 and 30 days after application (DAA) the leaves were collected and discs were made which were placed in Petri dishes containing a solution composed of water: agar. For each day of evaluation, C. flavipes adults were anesthetized with CO2 for 10 seconds and introduced into each plate containing the treatments. For both the laboratory and persistence experiments, the lethal (after 24 h) and sublethal effects of the maternal and sublethal generation of the F1 and F2 generations were evaluated in a completely randomized design. The plates were conditioned in an air conditioned room with temperature of 25 ± 2 ° C, RH 70 ± 10% and photophase of 14 hours. Insecticides chlorantraniliprole, chlorfluazuron, triflumuron, tebufenozide and novaluron were classified as harmless (class 1) and short-lived (class 1). However, chlorantraniliprole, chlorfluazuron, triflumuron and novaluron caused reduction in the posterior tibia size of females of F1 generation; tebufenozide reduced the sex ratio and chlorfluazuron reduce the weight of parasitoid pupa of the F2 generation. The treatments lambda-cyhalothrin + chlorantraniliprole and lambda-cyhalothrin + thiamethoxam caused 100% of mortality after 2 h of the application, being classified as noxious (class 4) and semi-field bioassay as persistent (class 4). Therefore, only tebufenozide can be recommended for control of D. saccharalis in association with biological control with releases of C. flavipes. The insecticides classified as classes 4 are not selective to the parasitoid and field tests should be performed to confirm toxicity.

O seqüenciamento em larga-escala e a aplicação da tecnologia de seqüências expressas (ESTs) permitiram a identificação de milhares de seqüências genômicas de vários organismos. Através de projetos como o de obtenção de ESTs de cana-de-açúcar (SUCEST – Sugarcane EST Project), a tecnologia de macro e microarranjos de DNA pôde ser aplicada para o monitoramento da expressão gênica. O primeiro passo deste trabalho foi otimizar a técnica de macroarranjos utilizando-se colônias bacterianas. Os arranjos foram construídos com o auxílio do robô Q-Bot. Células bacterianas contendo clones de cDNA de cana-de-açúcar foram arranjadas em duplicata em membranas de náilon e crescidas por 6 e 12 horas. Como resultado, concluiu-se que é possível estudar a expressão gênica em larga-escala usando macroarranjos de colônias bacterianas crescidas por 6 horas. Na segunda parte, o objetivo foi identificar genes de defesa em duas variedades de cana-de-açúcar (Saccharum sp.), em resposta ao herbívoro Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae). A cana-de-açúcar é de grande importância para a agricultura brasileira e para a economia geral de muitos países em desenvolvimento. Estas plantas são atacadas por D. saccharalis, a mais importante praga desta cultura, causando significativas perdas econômicas. Como é sabido, as plantas desenvolveram complexas estratégias para se protegerem do ataque de insetos-praga. As variedades SP80-3280 (susceptível) e SP81-3250 (tolerante) de cana-de-açúcar foram expostas à D. saccharalis. Plantas submetidas à lagarta e plantas controle foram coletadas em 0.5, 6, 12 e 24 horas de experimento. As análises permitiram a identificação de genes diferencialmente expressos em resposta à lagarta nas duas variedades. Foram analisados o tempo, dinâmica e regulação da expressão de 3.840 clones do SUCEST, os quais foram crescidos na membrana de náilon por 6 horas. Estes ESTs foram agrupados em dezesseis classes: metabolismo de aminoácidos, crescimento/desenvolvimento, metabolismo de proteínas, metabolismo de RNA, metabolismo secundário, resposta à diferentes condições de estresse, transporte, bioenergética, transdução de sinal, dinâmica celular, metabolismo de DNA, metabolismo de lipídios, elementos móveis, metabolismo de nitrogênio, sulfato e fosfato, metabolismo de nucleotídeos e função não determinada (ND). Estes resultados ajudam elucidar as estratégias de defesa desenvolvidas pela cana-de-açúcar para evitar os danos causados por esta praga. Neste estudo, os dados do macroarray revelaram 580 ESTs com expressão aumentada, oriundos das duas variedades. Estes resultados são importantes não somente porque este é o primeiro estudo em larga-escala da expressão gênica de uma monocotiledônea em resposta ao ataque de herbívoros, mas também porque permite a comparação dos perfis de expressão entre genótipos susceptível e tolerante de cana-de-açúcar. Este estudo abre possibilidades para a engenharia genética de plantas de cana-de-açúcar inseto-resistentes e também para o uso destes genes como marcadores moleculares em programas de melhoramento assistido. / Large-scale sequencing and the application of expressed sequence tag (EST) technology has led to the identification of hundreds of thousands of genomic sequences from various organisms. Through projects like the Sugarcane Expressed Sequence Tag (SUCEST), DNA arrays technology could be applied in monitoring gene expression. The first step of this work was to optimize the macroarray technique with bacterial colonies. Arrays were robotically constructed (Q-Bot). Bacterial cells carrying sugarcane cDNA clones were arrayed in duplicate onto nylon membrane and grown for 6 and 12 hours. As a result, we conclude that is possible to study the gene expression in large-scale using macroarray through bacterial colony that grown for 6 hours. The second part of this work was to study how different two sugarcane varieties (Saccharum sp.) are in response resistance against Diatraea saccharalis (Lepidoptera: Crambidae). Sugarcane is of great importance for Brazilian’s agriculture and for the general economy of many tropical developing countries. These plants are attacked by D. saccharalis, the most important insect pest of sugarcane, causing significant economic losses. As it is well known, plants have evolved complex defense strategies to protect them in opposition to attack by insects. The varieties SP80-3280 (susceptible) and SP81-3250 (tolerant) were exposed to D. saccharalis. Plants materials from plants with the borer and control plants (without the borer) were collected at 0.5, 6, 12 and 24 hours time points. The analysis revealed genes differentially expressed in response to sugarcane borer in both varieties. We analyzed the timing, dynamics, and regulation of the expression of 3,840 SUCEST clones, which were grown on a nylon membrane for 6 h. These ESTs was grouped into 16 broad categories: amino-acid metabolism, plant grow and development, protein metabolism, RNA metabolism, secondary metabolism, stress response, transport, bioenergetics, signal transduction, cellular dynamics, DNA metabolism, lipid, fatty-acid metabolism, mobile genetic elements, nitrogen, sulphur and phosphate metabolism, nucleotide metabolism, and the group matched to unable to classify, which no indication of the function of the gene product are known. These results help to elucidate the defense strategies developed by sugarcane in order to prevent against insect damage. In this study, macroarray analyses revealed 580 ESTs with increased expression, from both varieties. These results are important not only because this is the first large-scale gene expression study of a monocot in response to insect attack, but also because it allows the comparison of the gene expression pattern between susceptible and tolerant genotypes. This study opens possibilities for genetically-engineering of insect-resistant sugarcane and for using these genes as molecular markers in conventional breeding programs.

A broca gigante, Telchin licus, conhecida no Brasil desde 1927, na região Nordeste do Brasil, é considerada uma das principais pragas da cana-de-açúcar. Em 2007 foi registrada pela primeira vez no Estado de São Paulo, onde se concentram 60% das lavouras de cana-de-açúcar do país. Considerando-se que até o momento não existem métodos adequados para seu manejo e controle, o objetivo desta pesquisa foi caracterizar o comportamento reprodutivo de T. licus como base para o seu controle dentro de um contexto de Manejo Integrado das Pragas da cana-deaçúcar. Estes estudos servirão de suporte para o isolamento e identificação do feromônio sexual de T. licus, o qual poderá ser utilizado para o manejo e/ou controle desta praga. A presente pesquisa foi desenvolvida no Departamento de Entomologia e Acarologia da Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ-USP), em Piracicaba SP, e em um canavial localizado em Iracemápolis SP. A partir de uma criação de T. licus em dieta artificial, verificou-se que há sincronia na emergência de machos e fêmeas de T. licus e que as fêmeas desta espécie colocam a maior parte dos ovos nas horas mais quentes do dia, entre 12:00 e 16:00h. Para o estudo do comportamento de corte desta espécie foi necessário um telado, pois verificou-se que os insetos necessitam de espaço para movimentação, a qual, inicia-se em torno das 11h da manhã e perdura até 15h; os acasalamentos ocorrem com fêmeas novas, entre 13:00 e 15:00h e duram em média 2h; fora deste intervalo de tempo os insetos permanecem em repouso. Para a verificação da existência ou não de um feromônio sexual mediando o acasalamento da espécie foi feito um ensaio no campo, no qual foi instalada uma estrutura que simula o voo da fêmea no interior da plantação de cana-de-açúcar para verificação da atração de machos selvagens. Os tratamentos foram: (a) fêmea de T. licus viva; (b) inseto estilizado com abdome feito com massa de moldar e asas verdadeiras de fêmeas de T. licus coladas com cola quente e (c) inseto estilizado com septo de borracha, impregnado com extrato de 30 glândulas de fêmeas de T. licus, acoplado no final do abdome. O número de insetos selvagens que se aproximaram e que perseguiram os diferentes tratamentos não diferiu entre si pelo teste de Duncan a 5% de probabilidade. Contudo, houve diferença marginalmente significante (P < 0,0772) no número médio de vezes em que o mesmo macho perseguiu a fêmea viva (5,1) e o inseto estilizado (0,1). Este resultado indica que somente a atração visual não foi suficiente para estimular os machos selvagens a manterem a perseguição ao inseto estilizado. Considerandose que o número médio de vezes que os machos perseguiram o inseto estilizado com o septo de borracha (1,9) não diferiu estatisticamente do tratamento fêmea viva (5,1), sugere-se que a espécie tenha um feromônio mediando o acasalamento; entretanto, outros fatores além da comunicação química estão envolvidos neste comportamento, como a atração visual, a movimentação do inseto e a presença da luz solar. / The giant sugarcane borer, Telchin licus (Drury) known in Brazil since 1927, in the Brazilian Northeast, is considered one of the main sugarcane pests. In July 2007, this pest was recorded for the first time in the state of São Paulo, where 60% of the Brazilian sugarcane culture is concentrated. Considering that to date there are no appropriate methods for its management and control, the goal of this research was to characterize T. licus reproductive behavior as a basis to control it in a context of integrated pest management of sugarcane. These studies will support the isolation and identification of the sexual pheromone of T. licus, which may be used for the management and/or control of this pest. This research was developed at the Entomology and Acarology Department of the Escola Superior de Agricultura Luiz de Queiroz (ESALQ-USP) in Piracicaba, Brazil, and a sugarcane farm located in Iracemápolis, Brazil. Rearing T. licus on an artificial diet, we found that there is synchrony in the emergence of T.licus males and females and that the females of this species oviposit most of the eggs in the hottest hours of the day, between midday and 4:00 p.m. To study the courtship of this species a greenhouse was necessary because the insects need space to move. The activity of adults begins around 11:00 a.m. and ends at 3:00 p.m. Matings occur with young females between 1:00 p.m. and 3:00 p.m. with an average duration of 2 hours. Outside this time interval the insects remain at rest. To verify the existence of a sex pheromone mediating T. licus mating a field test was made where a structure that simulates the flight of the female was installed inside the sugarcane field to check the attraction of wild males. The treatments were: (a) a live T. licus female, (b) a stylized insect with abdomen made with mass and wings taken from T. licus females and glued with hot glue and (c) a stylized insect with rubber septum impregnated with the extract of 30 glands of T. licus females attached to the end of the abdomen. The number of wild insects approaching and chasing these treatments did not differ by the Duncan test at 5% probability, however there was a marginally significant difference (P < 0.0772) on the average number of times that the same insect chased the live female (5.1) and the stylized insect (0.1). This results indicates that visual attraction alone was not enough to stimulate free males to maintain the chase to the stylized insect. Considering that the average number of times the free males chased the stylized insect with rubber septum (1.9) did not differ statistically from the live female treatment (5.1) we suggest that the species has a pheromone mediating mating. However, factors other than chemical communication are involved in this behavior, such as visual cues, the movement of the insect and the presence of sunlight.

Orientador: Arlindo Leal Boiça Junior / Banca: José Carlos Barbosa / Banca: Marcelo Francisco Arantes Pereira / Resumo: A broca da cana-de-açúcar Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794), destaca-se como a principal praga da cultura da cana-de-açúcar e dependendo do nível de infestação, pode causar sérios prejuízos financeiros a produtores. O sucesso no seu controle depende de estudos comportamentais das variedades e avaliação de seu parasitismo, principalmente por Cotesia flavipes (Cameron, 1891). Assim o objetivo da presente pesquisa foi verificar a infestação e os danos causados por D. saccharalis e seu parasitismo por C. flavipes em duas idades de corte das plantas em variedades de cana-de-açúcar. O experimento foi conduzido na Usina Laguna, localizada no município de Batayporã no Estado do Mato Grosso do Sul. O delineamento experimental utilizado foi em parcelas subdivididas, com 5 variedades, RB86-7515, SP81-3250, RB85-5453, SP80-1842 e RB82-5211 duas idades de corte, cana planta e cana soca de segundo corte e 4 repetições, dispostas em blocos casualizados, aplicando as variedades nas parcelas e as idades de corte nas subparcelas. Foram avaliadas a porcentagem e intensidade de infestação, porcentagem de danos no colmo, população da broca por hectare e a porcentagem de parasitismo. Pelos resultados obtidos conclui-se que as variedades menos atacadas por D. saccharalis foram SP81-3250 e RB92-5211; a variedade mais atacada por D. saccharalis foi SP80-1842; as liberações de C. flavipes incrementaram o parasitismo na área; o aumento da porcentagem de parasitismo proporcionou redução na população da broca; e o parasitismo independe da idade de corte da cana-de-açúcar / Abstract: In the culture of sugar cane, and all, there are pests that directly affect production. The sugarcane borer Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794), stands out as the main and depending on the level of infestation, can cause serious financial losses to producers. The success in controlling this pest depends on behaviour studies of varieties and evaluation of their parasitism, mainly by Cotesia flavipes (Cameron, 1891). Thus the aim of this research was to verify the infestation and the damage caused by D. saccharalis and its parasitism by C. flavipes in two plant ages in varieties of sugar cane. The experiment was conducted at the Laguna Plant, located in Batayporã borough in Mato-Grosso-do-Sul state. The varieties used in the experiment were RB86-7515, SP81-3250, RB85-5453, SP80-1842 and RB82-5211 conducted in plots of 10 080 m2, repeated four times, adopting the split plot design, applying the varieties in the plots and subplots cutting ages. It was evaluated the rate and intensity of infestation, percentage of damage in the stem borer population per hectare and percentage parasitism. By the results it is concluded that varieties less attacked by D. saccharalis were SP81-3250 and RB92-5211, the variety most attacked by D. saccharalis was SP80-1842, an increase of the parasitism decreased the population of the drill, the release of C. flavipes increased the parasitism the area, and the parasitism is independent of the sugar cane cut age / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-09-10Bitstream added on 2014-06-13T18:57:45Z : No. of bitstreams: 1 camillo_mf_me_jabo.pdf: 459342 bytes, checksum: 91a470a114ea0b0b91c4435f01edec49 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Usina São Martinho / A broca da cana-de-açúcar Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794), destaca-se como a principal praga da cultura da cana-de-açúcar e dependendo do nível de infestação, pode causar sérios prejuízos financeiros a produtores. O sucesso no seu controle depende de estudos comportamentais das variedades e avaliação de seu parasitismo, principalmente por Cotesia flavipes (Cameron, 1891). Assim o objetivo da presente pesquisa foi verificar a infestação e os danos causados por D. saccharalis e seu parasitismo por C. flavipes em duas idades de corte das plantas em variedades de cana-de-açúcar. O experimento foi conduzido na Usina Laguna, localizada no município de Batayporã no Estado do Mato Grosso do Sul. O delineamento experimental utilizado foi em parcelas subdivididas, com 5 variedades, RB86-7515, SP81-3250, RB85-5453, SP80-1842 e RB82-5211 duas idades de corte, cana planta e cana soca de segundo corte e 4 repetições, dispostas em blocos casualizados, aplicando as variedades nas parcelas e as idades de corte nas subparcelas. Foram avaliadas a porcentagem e intensidade de infestação, porcentagem de danos no colmo, população da broca por hectare e a porcentagem de parasitismo. Pelos resultados obtidos conclui-se que as variedades menos atacadas por D. saccharalis foram SP81-3250 e RB92-5211; a variedade mais atacada por D. saccharalis foi SP80-1842; as liberações de C. flavipes incrementaram o parasitismo na área; o aumento da porcentagem de parasitismo proporcionou redução na população da broca; e o parasitismo independe da idade de corte da cana-de-açúcar / In the culture of sugar cane, and all, there are pests that directly affect production. The sugarcane borer Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794), stands out as the main and depending on the level of infestation, can cause serious financial losses to producers. The success in controlling this pest depends on behaviour studies of varieties and evaluation of their parasitism, mainly by Cotesia flavipes (Cameron, 1891). Thus the aim of this research was to verify the infestation and the damage caused by D. saccharalis and its parasitism by C. flavipes in two plant ages in varieties of sugar cane. The experiment was conducted at the Laguna Plant, located in Batayporã borough in Mato-Grosso-do-Sul state. The varieties used in the experiment were RB86-7515, SP81-3250, RB85-5453, SP80-1842 and RB82-5211 conducted in plots of 10 080 m2, repeated four times, adopting the split plot design, applying the varieties in the plots and subplots cutting ages. It was evaluated the rate and intensity of infestation, percentage of damage in the stem borer population per hectare and percentage parasitism. By the results it is concluded that varieties less attacked by D. saccharalis were SP81-3250 and RB92-5211, the variety most attacked by D. saccharalis was SP80-1842, an increase of the parasitism decreased the population of the drill, the release of C. flavipes increased the parasitism the area, and the parasitism is independent of the sugar cane cut age

Resumo: O objetivo da pesquisa foi avaliar a resistência intrínseca de cultivares de cana-de-açúcar a Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) e extrinseca ao parasitóide Cotesia flavipes (Cameron, 1891). Os experimentos foram conduzidos no Departamento de Fitossanidade, da FCAV/UNESP, Campus de Jaboticabal, SP. No teste de resistência intrínseca foram utilizadas as cultivares RB867515, RB855453, RB855536, CTC 15, CTC 9, SP80-1842, SP79-1011, SP89-1115, SP81-3250 e SP87-365, enquanto nos de resistência extrínseca utilizou-se as cultivares SP80-1842 e SP81-3250, resistentes, e a RB855453, suscetível a D. saccharalis. Foram realizados testes de não-preferência para oviposição, alimentação e de antibiose em dieta artificial elaboradas a partir de colmo seco triturado de cada cultivar, com exceção de uma considerada dieta padrão. Os experimentos de não-preferência para oviposição foi conduzido em casa de vegetação, e o de alimentação em laboratório sendo realizados com e sem chance de escolha e o de antibiose também em laboratório. Para avaliar os testes com chance de escolha adotou-se o delineamento experimental de blocos casualizados, e no sem chance o inteiramente casualizado, sendo utilizados dez tratamentos em cinco repetições no teste de não-preferência para oviposição, enquanto no teste de alimentação foram dez tratamentos em dez repetições. No teste de antibiose, utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado, com 11 tratamentos (uma testemunha e dez cultivares) em dez repetições. No teste de não-preferência para oviposição foi avaliada a quantidade de ovos, posturas e o de ovos por postura. Para o teste de alimentação foi observada a atratividade das lagartas de D. saccharalis por cada tolete das cultivares, anotando-se a quantidade delas e o tempo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The purpose of the study was to evaluate the intrinsic resistance of cultivars of sugar cane to Diatraea saccharalis (Fabricius, 1794) and extrinsic to the parasitoid Cotesia flavipes (Cameron, 1891). The experiments were conducted at the Departamento the Fitossanidade of Faculdade the Ciências Agrárias and Veterinárias, Campus de Jaboticabal/SP. In the test we used the intrinsic resistance cultivars: RB867515, RB855453, RB855536, CTC 15, CTC 9, SP80-1842, SP79-1011, SP89-1115, SP81-3250 and SP87-365, while in the extrinsic resistance was used the cultivars: SP80-1842 and SP81-3250, resistant and RB855453, susceptible to D. saccharalis. Performed tests of non-preference for oviposition, feeding and antibiosis in artificial diet as elaborate stem the sugar cane cultivar, exception one of them considered standard diet. The experiments of non-preference for oviposition were conducted in the greenhouse, and laboratory supply being carried out and no-choice and also in laboratory antibiosis. To assess the test-choice adopted the of randomized blocks, and in no way completely randomized experimental design, with ten treatments used in the test in five replications of non-preference for oviposition, while in the feeding test were ten treatments ten replications. In the experimental design was completely randomized design with 11 treatments (one control and ten cultivars) in ten replications. In the test of non-preference for oviposition-choice were evaluated the number of eggs, postures and of eggs per postures. For feeding test were released ten larvae of D. saccharalis in test-choice, and one larvae in the no-choice test. In both test we evaluated the attractiveness of the larvae of D. saccharalis per thole the cultivars the sugar cane (attraction time) though the observations... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Arlindo Leal Boiça Júnior / Coorientador: Dilermando Perecin / Banca: Marcelo Francisco Pereira Arantes / Banca: José Roberto Scapellini / Banca: Júlio Cesar Galli / Banca: Nilza Maria Martinelli / Doutor