Introdução: A ingestão de carboidrato (CHO) durante o exercício de resistência aeróbica de longa duração tem se mostrado capaz de otimizar o desempenho dos atletas. Alguns estudos recentes têm reportado também um efeito ergogênico quando a proteína (PTN) é adicionada a uma bebida carboidratada. Além disso, a coingestão tem sido relacionada com a atenuação do dano muscular, tido como fator limitante da recuperação muscular. No entanto, pouco se investigou sobre a influência dessas suplementações, comparadas a uma bebida placebo (PLA), no duatlo de distância olímpica. Objetivo: Comparar o efeito de três diferentes estratégias nutricionais de suplementação (CHO vs. CHO+PTN vs. PLA), durante um teste simulado de duatlo (TSD) olímpico, no desempenho e recuperação muscular de duatletas amadores. Métodos: Em um ensaio clínico, cruzado, randomizado e duplo-cego, treze atletas amadores do sexo masculino, com idade média de 29,7 ± 7,7 anos, participaram de três TSD consumindo: bebida carboidratada (CHO, 75 g); bebida isocalórica combinando carboidrato e proteína, na proporção 4:1 (CHO+PTN, 60,5 g CHO e 14,5 g PTN); e bebida placebo (PLA). Aos atletas informou-se apenas que o estudo visava investigar a influência de três diferentes tipos de suplementação. Após jejum de 8 h, sujeitos recebiam um café da manhã padrão, com 1,5 g/kg CHO e 45 min depois iniciavam o protocolo. As intensidades da primeira corrida (10 km) e da sessão de ciclismo (40 km) foram controladas, utilizando dados previamente coletados em testes preliminares, e a corrida final, de 5 km, foi tratada como um contrarrelógio (t5km). Coletas de sangue foram realizadas antes, imediatamente após e 24h após cada teste simulado, e analisou-se concentrações de glicose e creatina quinase (CK). Pico de torque (PT) isométrico foi mensurado no início do estudo e 24h após cada teste. Resultados: Os atletas completaram as distâncias totais do duatlo olímpico em ~1h 51min. Não houve diferença significativa no t5km entre as condições CHO (1270,3 ± 130,5 s) vs. CHO+PTN (1267,2 ± 138,9 s) vs. PLA (1275,4 ± 120 s); p = 0,87; TE ≤ 0,1. Os resultados de PT não demonstraram alterações significativas entre as condições basal (302,2 ± 52,8 N.m) vs. pós-24h CHO (300,1 ± 41,4 N.m) vs. pós-24h CHO+PTN (292,2 ± 49,4 N.m) vs. pós-24h PLA (282,1 ± 43,1 N.m); p = 0,24; TE ≤ 0,4. Embora, os resultados de CK tenham mostrado aumento significativo para todas as condições na comparação pré vs. pós-24h: CHO (300%; p < 0,01; TE = 0,93); CHO+PTN (82%; p < 0,01; TE = 0,73) e PLA (190%; p = 0,01; TE = 1,04), não foram encontradas diferenças entre as condições nos diferentes momentos - pré, imediatamente após e pós-24h (p = 0,32; TE = 0,3 – 1,04). Conclusão: Em uma prova simulada de duatlo olímpico, com refeição pré-teste contendo 1,5g/kg de carboidrato, as suplementações de CHO e de CHO+PTN não oferecem benefícios extras quando comparadas a uma bebida placebo no que diz respeito ao desempenho e recuperação muscular dos atletas. / Introduction: Carbohydrate (CHO) intake during long-term endurance exercise has been shown to optimize performance in athletes. Some recent studies have also reported an ergogenic effect when protein (PRO) is added to a carbohydrate drink. Furthermore, the coingestion has been related to the attenuation of muscle damage, seen as a limiting factor in muscle recovery. However, little has been investigated about the influence of such supplementation, compared to a placebo drink (PLA), in an Olympic-distance (OD) duathlon. Purpose: This study aimed to compare the effects of three different nutritional supplementation strategies (CHO vs. CHO+PRO vs. PLA) during a simulated OD duathlon, on performance and indices of muscle recovery of amateurs duathletes. Methods: In a crossover, randomized, double-blind clinical trial, thirteen male amateur athletes, mean age 29.7 ± 7.7 years, participated in three simulated OD duathlons consuming either a carbohydrate drink (CHO, 75 g); an isocaloric drink combining carbohydrate and protein in a 4:1 ratio (CHO+PRO, 60.5 g CHO and 14.5 g PRO); or a placebo (PLA) drink. The athletes were informed that the study aimed to investigate the influence of three different types of supplementation. After an 8 hours fast, subjects received a standard breakfast, with 1.5 g / kg CHO and 45 min later the protocol began. The intensities of the first running (10 km) and cycling session (40 km) were controlled using previously collected data, and the final running, 5 km, was treated as a time-trial (t5km). Blood samples were taken before, immediately after and 24 hours after each simulated duathlon and glucose and creatine kinase (CK) levels were analyzed. Isometric peak torque (PT) was measured at baseline and 24 hours after each test. Results: The athletes completed the OD duathlons in ~ 1h 51min. There was no significant difference in t5km between CHO (1270.3 ± 130.5 sec) vs. CHO+PRO (1267.2 ± 138.9 sec) vs. PLA (1275.4 ± 120 sec); p = 0.87; ES ≤ 0.1. The results of PT showed no significant changes between baseline conditions (302.2 ± 52.8 Nm) vs. 24h post-CHO (300.1 ± 41.4 Nm) vs. 24h post-CHO+PRO (292.2 ± 49.4 Nm) vs. 24h post-PLA (282.1 ± 43.1 Nm); p = 0.24; ES ≤ 0.4. Although CK results showed significant increase for all conditions when comparing pre vs. post 24h CHO (300%; p <0.01; ES = 0.93); CHO+PRO (82%; p <0.01; ES = 0.73) and PLA (190%, p = 0.01; ES = 1.04), no differences were found between the conditions in the different moments - pre, immediately after and after 24 hours (p = 0.32; ES = 0.3 – 1.04). Conclusion: In a simulated Olympic-distance duathlon, with pre-meal test containing 1.5g / kg of carbohydrate, the ingestion of CHO and CHO+PRO does not provide additional benefits when compared to a placebo drink regarding athletes’ performance and muscle recovery.

O presente trabalho objetivou avaliar os impactos de níveis de suplementação concentrada sobre parâmetros de consumo e digestibilidade aparente dos componentes da dieta total em ovinos, mensurando a magnitude dos efeitos associativos (EA) entre o suplemento concentrado e volumoso de baixa qualidade. Utilizou-se 16 ovinos machos, castrados, da raça Corriedale, com sete meses de idade e peso vivo (PV) médio inicial de 33,62 + 1,81 kg. Os animais foram dosificados preventivamente com vermífugo, receberam a dosagem de complexo vitamínico ADE e passaram por um período de adaptação de 15 dias. Utilizou-se quatro repetições por tratamento (níveis de inclusão de suplemento na dieta de 0; 0,33; 0,66; e 1% do PV) em um delineamento completamente casualizado. As dietas experimentais foram compostas pelo fornecimento de um suplemento concentrado, a base de farelo de soja, farelo de milho e farinha de mandioca, aliado a oferta ad libitum de feno de baixa qualidade, oriundo de pastagem natural diferida, da região da depressão central do Estado do Rio Grande do Sul. As avaliações foram realizadas em dois períodos de 21 dias cada. Os animais foram alocados em baias individuais com comedouros separados para o fornecimento de alimento e água. Os parâmetros de consumo de matéria seca (MS), matéria orgânica (MO), proteína bruta (PB), fibra em detergente neutro (FDN) e ácido (FDA) e energia bruta (EB) do volumoso não sofreram influência dos tratamentos, mostrando a ausência de efeitos associativos (EA) positivos e negativos. Os parâmetros de consumo total de MS, MO, PB, EB e água, foram influenciados de maneira linear crescente pelos tratamentos (P<0,0001). Já os de FDN e FDA não sofreram efeito. Todos os parâmetros de digestibilidade apresentaram comportamento linear crescente, conforme o nível de suplementação foi acrescido, exceto os da FDN e FDA que se mantiveram estáveis. A digestibilidade da MS foi afetada linearmente (P<0,0001), enquanto as digestibilidades da MO, nitrogênio e EB apresentaram comportamento quadrático (P=0,0433; <0,0001 e 0,0479, respectivamente). O balanço nitrogenado diário apresentou comportamento linear crescente (P<0,0001). O EA da digestibilidade apresentou comportamento crescente quadrático (P=0,0461). A suplementação, em um contexto geral, apresentou efeitos benéficos, maximizando o consumo de nutrientes da dieta total, bem como sua digestibilidade. / This study aimed to evaluate the impact of levels of concentrate supplementation on parameters of intake and digestibility of the components of the total diet in sheep, measuring the magnitude of associative effects (AE) between concentrate suplement and forage of low quality. It was used 16 wethers, Corriedale, with seven months of age and initial body weight (BW) of 33.62 + 1.81 kg. The animals were dosed preventatively with dewormer, received the dosage of vitamin complex ADE and went through an adjustment period of 15 days.It was used four replicates per treatment (inclusion levels of supplement in the diet of 0, 0.33, 0.66, and 1% of BW) in a completely randomized design. The experimental diets were composed by supplying a concentrated supplement, base of soybean meal, corn bran and cassava flour, combined with ad libitum supply of low quality hay, arising from deferred natural grassland of the central depression region of State of Rio Grande do Sul. Evaluations were performed in two periods of 21 days each. The animals were placed in individual stalls with separate supply of food and water feeders. The parameters of intake of dry matter (DM), organic matter (OM), crude protein (CP), neutral and acid detergent fiber (NDF and FDA) and gross energy (GE) of roughage were not influenced by treatments, showing the absence of positive or negative associative effects (AE). The parameters of total intake of DM, OM, CP, EB and water, were influenced in a linear way by the treatments (P <0.0001). But NDF and ADF were not affected. All digestibility parameters showed a linear increasing behavior as the level of supplementation was increased, except that of NDF and ADF were stable. DM digestibility was affected linearly (P <0.0001), while the digestibility of OM, nitrogen and EB showed a quadratic response (P = 0.0433, <0.0001 and 0.0479, respectively). The daily nitrogen balance showed linear increase (P <0.0001). The AE of digestibility showed quadratic behavior (P = 0.0461). Supplementation, in a general context, showed beneficial effects, maximizing nutrient intake of the total diet and its digestibility.

Orientadores: Valdemiro Carlos Sgarbieri, Antônio Fernando Ribeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-16T14:45:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bernardi_DanielaMiotto_M.pdf: 2175104 bytes, checksum: cb8cf27a5c2ba0db8cf94fbc2965beec (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: A fibrose cística (FC) é caracterizada por intenso processo inflamatório, doença pulmonar obstrutiva, infecção das vias aéreas e má digestão/ má absorção de nutrientes e micronutrientes, sendo a nutrição determinante no prognóstico do paciente. Objetivo: Avaliar os efeitos imunológicos e nutricionais da suplementação de um concentrado protéico do soro do leite bovino (whey protein concentrate - WPC), enriquecido com TGF-ß e lactoferrina, em pacientes pediátricos com fibrose cística, bem como realizar perfil imunológico e nutricional destes pacientes. Métodos: O ensaio clínico de intervenção nutricional foi prospectivo, randomizado, duplo cego com placebo e teve duração de 4 meses. As crianças que participaram eram atendidas no Ambulatório Pediátrico de FC, do Hospital de Clínicas da UNICAMP, na faixa etária entre 3 e 12 anos e escore de Shwachman entre moderado e bom. Quarenta e cinco crianças iniciaram a suplementação e apenas 28 finalizaram, sendo 15 no grupo WPC-TGFß e 13 no grupo caseína (placebo). Foram incluídas 17 crianças saudáveis como grupo controle para as análises bioquímicas e imunológicas. Os suplementos (placebo e teste) foram submetidos às análises centesimais e microbiológicas. A avaliação dos pacientes ao longo da suplementação foi realizada em três tempos (T0=antes da suplementação, T1=depois de 2 meses e T2= no final do quarto mês). Determinaram-se os níveis de glutationa nos eritrócitos, a produção de radicais reativos de oxigênio (ROS) e de citocinas em sobrenadante de cultura de sangue periférico (TNF-a, IFN-?, IL-8, IL-6, IL-10), concentração de TGF-ß2 no soro, imunoglobulinas séricas (IgA, IgG, IgM e IgE) e IgA na saliva, cultura do escarro, níveis de albumina e pré-albumina, avaliação antropométrica e de ingestão alimentar. Em relação à análise estatística, os dados paramétricos foram analisados com o teste-T e ANOVA para amostras pareadas e os dados não paramétricos foram testados por Mann-Whitney e Friedman. O nível de significância adotado foi de 5%. Resultados: Em relação aos sistemas antioxidante e oxidante em sangue periférico, verificou-se que não houve diferença significativa entre fibrocísticos e indivíduos saudáveis. A produção espontânea de TNF-a, IL-6, IL-10 estava aumentada na FC assim como a produção de IL-6 em resposta à PHA, a concentração de TGF-ß2, IgA e IgM no soro e a concentração sanguínea de leucócitos. Por outro lado, os indivíduos saudáveis tiveram maior produção de TNF-a em resposta ao estímulo pela BCG. Houve baixo índice de desnutrição nos participantes. A suplementação com WPCTGFß não influenciou de forma significativa na concentração de GSH, imunoglobulinas, na infecção das vias aéreas e no estado nutricional. Em relação à GSH embora a mudança não tenha sido significativa, observou-se uma tendência de aumento gradual ao longo da suplementação. A suplementação também provocou um aumento significativo na produção basal de ROS pelos granulócitos, uma redução na produção de TNF-a em sobrenadante de cultura em resposta à PHA, além de reduzir momentaneamente (T1) a produção de IL-10 na presença de PHA. Observou-se atenuação da diferença estatística existente para TGF-ß2, antes da suplementação, nos dois grupos. Houve um aumento do número de eritrócitos e de hemoglobina, provavelmente pela ação da lactoferrina. Conclusão: O presente trabalho mostrou que a criança clinicamente estável com FC consegue manter um balanço oxidante e antioxidante normal. As altas concentrações de TNF-a e de IL-6 demandaram uma maior produção de IL-10, que também pode ter sido a responsável pela resposta TH1 eficiente para BCG, expresso pela produção normal de IFN-?. A maior produção de IgA e IgM confirmam um sistema imune adaptativo normal frente ao estimulo freqüente da colonização bacteriana nesses indivíduos. Existem indícios nos resultados de que a suplementação à longo prazo em crianças ainda não colonizadas poderia ser mais eficiente, o que somente poderia ser elucidado por meio de novos estudos / Abstract: Cystic fibrosis (CF) is characterized by an intense inflammatory process, pulmonary obstruction, airway infection and gastrointestinal symptoms resulting maldigestion/ malabsorption of nutrients, and as a consequence nutrition is a determinant on the patient's prognostic. The aims were to evaluate the effect of supplementation with a WPC enriched with TGF-ß and lactoferrin, in pediatric patients with cystic fibrosis. Methods: The study was a randomized, double-blind, placebo controlled, prospective clinical trial of nutritional intervention with four months of duration. Children were recruited from the Pediatric Outpatient Unit, at UNICAMP Clinical Hospital, aged between 3 and 12 years and Shwachman score between moderate and good. The study group started with 45 children, nevertheless, it ended with 28 subjects: 15 of WPC-TGF ß group and 13 of casein group (placebo). Seventeen healthy children were also used as a control group. The supplements (placebo and test) were submitted to centesimal and microbiological analysis. The supplementation was done during four months with three assessments (T0= before starting the supplementation, T1= with two months of supplementation and T2= at the end the 4th months of supplementation) with appraisal of: erythrocyte glutathione concentration, production of reactive oxygen species (ROS) by granulocytes, cytokines (TNF-a, IFN-?, IL-8, IL-6, IL-10) concentration in supernatants from cultures under spontaneous condition, PHA and Bacillus Calmette-Guérin (BCG)-stimulated peripheral blood mononuclear cells, levels of serum TGF-ß2, immunoglobulins (IgA, IgG, IgM and IgE), albumin and prealbumin, salivary IgA, sputum culture, anthropometric measurements and food intake. For statistical analysis, the parametric data were analyzed with T-test and ANOVA and nonparametric data, with Mann-Whitney and Friedman tests. The level of significance was 5%. Results: There was no statistical difference between CF patients and healthy subjects in relation to oxidant and antioxidant system in peripheral blood. The spontaneous production of TNF-a, IL-6, and IL-10, production of IL-6 in response to PHA, TGF-ß2, IgA and IgM in serum and counting white blood cells was increased in CF patients. Furthermore, healthy individuals responded better to secretion of TNF-a in response to BCG stimulation. A low incidence of malnutrition was observed. Supplementation with WPC-TGF ß did not have an influence on concentration of glutathione, immunoglobulins, infection of airways and nutritional status. Regarding GSH although the change was not significant, there was a trend of gradual increase during the supplementation. Furthermore, increased basal stimulation of granulocytes for the production of ROS reduced the production of TNF-a in culture supernatants in response to PHA, slightly reduced the production of IL-10 (T1) in response to PHA and also attenuated the statistical difference existing for TGF-ß2, prior to supplementation, in both groups. The ability to increase the total number of erythrocytes and hemoglobin was attributed to lactoferrin present in the supplement. Conclusion: This study showed that clinically stable CF children could maintain a normal oxidant and antioxidant balance. The high concentrations of TNF-a and IL-6 require a higher production of IL-10, which may have also been responsible for the efficient TH1 response to BCG, expressed by IFN-?. The higher production of IgA and IgM confirm a normal adaptive immune system against bacterial colonization in these patients. It is suggested that supplementation for longer period of children not yet colonized lead to better results than the ours obtained, however, only further study could elucidate such an hypothesis / Mestrado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Mestre em Alimentos e Nutrição

O beta hidroxi beta metilbutirato (HMB), metabólito do aminoácido leucina, é utilizado para reduzir a degradação e/ou aumentar a síntese proteica. Nosso grupo demonstrou que ratos submetidos à suplementação crônica de HMB apresentaram hiperinsulinemia e normoglicemia, sugerindo um quadro de resistência à ação da insulina (RI). Em paralelo, observamos um aumento da síntese e secreção de GH e da concentração plasmática de IGF-I, sugerindo um possível envolvimento do eixo somatotrófico na RI, considerando seus efeitos diabetogênicos. No presente estudo, após sobrecarga de glicose (0,75g/kg), observamos uma redução da taxa de decaimento de glicose, com uma hiperinsulinemia (Teste de tolerância à glicose - GTT); bem como redução da ação da insulina, em resposta e este hormônio (10 U), no fígado e músculos esqueléticos, detectados por western blotting, confirmando uma RI. Não encontramos evidências do envolvimento do GH neste quadro, uma vez que, no fígado, não detectamos alterações na expressão de pSTAT5 e SOCS3. No tecido adiposo branco, observamos aumento na expressão de mRNA e proteína da lipase hormônio sensível (LHS), bem como aumento da concentração de ácidos graxos livres (AGL) plasmáticos, podendo este ser um mecanismo de RI promovido pelo GH, nesta situação. / HMB is a metabolite of leucine able to increase protein synthesis and/or reduce protein degradation. Studies carried out in our laboratory have shown that HMB-supplemented rats although normoglycemic, exhibited hyperinsulinemia, suggesting an insulin resistance status. In parallel, it was observed an increased activity of the GH-IGF-I axis, reinforcing the possibility of alterations on glucose sensitivity, since GH is recognized as being diabetogenic effects. The results demonstrate that HMB-supplemented rats, after glucose overload (0,75g/kg) present reduced glucose decay rate and increased plasma insulin levels (glucose tolerance test GTT), confirming the insulin resistance status. By western blotting, was detected reduced insulin action (liver and skeletal muscle), after insulin stimulus. No alterations were detected in retroperitoneal white adipose tissue. No significant alterations were detected on pSTAT5 and SOCS3 after HMB supplementation indicating that GH could act by another mechanism to induce insulin resistance. Additionally, was detected increased on mRNA and protein expression of hormone sensitive lipase (HSL), and plasma concentrations of non-esterified fat acids (NEFA) in HMB-supplemented rats, which could be a mechanism mediated by GH, contributing to insulin resistance.

A suplementação com ácido fólico (AF) apresenta efeitos quimiopreventivos, porém, pode aumentar o risco de desenvolvimento e acelerar a progressão do câncer se ocorrer em doses elevadas ou após a ocorrência de lesões pré-neoplásicas (LPN). O AF é essencial na síntese de novo de purinas e timidalato e consequentemente na síntese, replicação e reparo do DNA, proliferação celular e apoptose. Assim, a deficiência pode implicar em danos ao DNA e erros na sua replicação e reparo, processos importantes na carcinogênese, onde as células apresentam taxas de replicação e divisão aceleradas, e é possível que a suplementação module estes processos. Além disso, como AF ocupa uma posição de destaque no metabolismo dos grupamentos metila pode exercer efeitos sobre a hipometilação global do DNA e o aumento da expressão de proto-oncogenes como o c-myc, fenômenos característicos da hepatocarcinogênese. Assim, objetivando-se avaliar os efeitos do AF na promoção da hepatocarcinogênese em ratos Wistar, desenvolveu-se o modelo do \"Hepatócito Resistente\" e administrou-se por entubação gástrica diariamente, durante 5 semanas, o AF (0,16; 0,32; ou 0,64 mg / 100 g de peso / dia) ou água (0,25 mL / 100 g de peso / dia). Então, avaliou-se as LPN hepáticas presentes visíveis à macroscopia e microscopia (GST-P), a proliferação celular (BrdU) e a apoptose (microscopia de fluorescência) no tecido hepático ao redor das LPN e nas LPN persistentes e em remodelação, a intensidade de danos ao DNA (\"Cometa\" alcalino), e o padrão de metilação global (Dot Blot) e a expressão do c-myc (RT-PCR) especificamente em LPN microdissecadas. Apesar de não ter alterado a incidência e multiplicidade das LPN, o tratamento com AF 0,32 mg / 100 g promoveu um aumento na porcentagem de lesões &#8805; 1 mm e o com AF 0,64 mg / 100 g a diminuição na porcentagem dessa lesões com relação ao grupo água (p<0,05). De modo semelhante, observou-se na análise das LPN GST-P positivas que o AF 0,32 mg / 100 g promoveu aumento e o AF 0,64 mg / 100 g inibiu o processo carcinogênico, embora não se tenha observado diferenças significantes no número, área e porcentagem da área do corte ocupada pelas LPN. Apesar de não ter modulado significativamente o desenvolvimento das LPN, o AF nas doses de 0,32 e 0,64 mg / 100 g inibiu a proliferação celular nas LPN persistentes (p<0,05). A contagem dos corpúsculos apoptóticos permitiu constatar uma possível inibição da apoptose nas LPN persistentes e em remodelação com caráter dose-dependente (p>0,05). De acordo com a análise do comprimento dos cometas, houve um aumento dos danos ao DNA no modelo de hepatocarcinogênese e ausência de efeito do AF nesse processo (p>0,05). O padrão de metilação global do DNA e a expressão do c-myc nas LPN microdissecadas não foram significativamente alterados pelo tratamento com diferentes doses de AF, embora, em geral, se tenha observado uma tendência dos tratamentos com AF promoverem hipometilação e aumento da expressão de c-myc. Os resultados obtidos, em conjunto, auxiliaram na caracterização das ações paradoxais (inibitórias e promotoras) que o AF apresenta na etapa de promoção da carcinogênese, de forma que a dose e o estágio do desenvolvimento neoplásico em que se inicia a suplementação demonstraram ser críticos e, por isso, indicam necessidade de cautela acerca da fortificação com o AF, uma das maiores intervenções de saúde pública que expôs a população a elevadas concentrações de AF sintético. / Folic acid (FA) supplementation shows chemopreventive effects, however, it may increase the risk of development and accelerate cancer progression in case of high doses or after preneoplastic lesions (PNL) are established. FA is essential on de novo synthesis of purine and thymidalate and, consequently, on DNA synthesis, replication and repair, cell proliferation and apoptosis. Thus, its deficiency may cause DNA damage and replication and repair mistakes, important processes on carcinogenesis, where cells present high replication rates and accelerated division, and is possible that supplementation modulates these processes. Besides, as FA has a central role on methyl group metabolism, it may have effects on hepatocarcinogenesis peculiar events such as DNA global hypomethylation and on the increased expression of proto-oncogenes like c-myc. Objecting the evaluation of FA effects during hepatocarcinogenesis promotion in Wistar rats, the \"Resistant Hepatocyte\" model was developed and water (0.25 mL / 100 g BW / day) or FA (0.16; 0.32; or 0.64 mg / 100 g BW / day) were supplemented daily by gavage for 5 weeks. Then, hepatic PNL detected by macroscopy and microscopy (GST-P), cell proliferation (BrdU) and apoptosis (fluorescence microscopy) on surrounding tissue, persistent and remodeling PNL, DNA damage (alcaline Comet assay), DNA global methylation pattern (Dot Blot) and c-myc expression (RT-PCR) specifically in microdissected PNL were evaluated. Even though FA treatment was not able to change incidence and multiplicity of PNL, the treatment with 0.32 mg / 100 g of FA increased the percentage of lesions &#8805; 1 mm whereas with 0.64 mg / 100 g of FA diminished the percentage of these lesions, compaired to the water group (p<0.05). Similarly, it could be observed in PNL positive GST-P analysis that FA 0.32 mg / 100 g enhanced and FA 0.64 mg / 100 g inhibited the carcinogenic process, although it was not possible to detect significant differences on number, size and area of liver section occupied by GST-P positive PNL. Despite the fact that PNL development was not significantly modulated by FA, FA 0.32 and 0.64 mg / 100 g dosages inhibited cell proliferation on persistent PNL (p<0.05). The apoptotic body count allowed to identify a possible dosage-dependent apoptosis inhibition on persistent and remodeling PNL (p>0.05). According to the analysis of comet length, the hepatocarcinogenesis model increased DNA damage but FA showed lack of effect on this process (p>0.05). DNA global methylation pattern and c-myc expression in microdissected PNL were not significantly altered by treatment with different dosages of FA, although a trend towards promotion of hypomethylation and increase on c-myc expression was observed. Altogether, the obtained results helped to characterize the paradoxical action (both inhibitory and promoting) that FA has on carcinogenesis promotion step, in such a way that the dosage and the stage of neoplastic development in which supplementation begins seems to be critical, highlighting the necessity of caution with FA fortification, one of the biggest public health interventions taken that exposes the population to high concentrations of synthetic FA.

Orientador: Mário Roberto Maróstica Júnior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-08-21T22:33:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Furlan_CibelePriscilaBusch_M.pdf: 1142828 bytes, checksum: b13310e35dd9859ae5548ba7a4d91a00 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Obesidade se tornou o maior problema de saúde pública ao redor no mundo e é associado, geralmente, com doenças crônicas não transmissíveis como a diabetes. Alguns componentes dos alimentos estão relacionados com benefícios à saúde como modulação do estresse oxidativo, hormônios e inflamação. O ácido linoléico conjugado (CLA) é um ácido graxo que pode exercer papel antioxidante, possivelmente pela influencia na auto oxidação lipídica. Outros lipídios, esteroidais das plantas, os fitosteróis são considerados também compostos bioativos, uma vez que eles são responsáveis pela redução da circulação do LDL colesterol, bem como pela redução do peso corporal. Em adição, esses compostos são anti-inflamatórios, e apresentam importante potencial para prevenir efeitos adversos da obesidade. Nessas condições, o objetivo do presente trabalho foi investigar os efeitos da suplementação do CLA e fitosterol, sozinhos e em combinação, em relação aos hormônios da saciedade, glicose, resistência a insulina, perda de peso, consumo e os efeitos no fígado e sua influencia no sistema antioxidante de defesa em ratos machos Sprague-Dawley alimentados com dieta hiperlipídica.Quarenta ratos Sprague-Dawley recém-desmamados foram divididos em cinco grupos (n=8) aleatoriamente: grupo Padrão, grupo Hiperlipídico Padrão, e três grupos hiperlipídicos com adição de 2% de CLA, 2% de fitosterol e 2% de CLA mais 2% de fitosterol. Todas as dietas tiveram como base a AIN-93G, sendo as dietas experimentais high-fat adicionadas de 35% de banha animal e 2% de cada suplemento. O tempo de experimento foi de 65 dias. O grau de sensibilidade à insulina foi calculado nas últimas semanas experimentais, por meio dos métodos Teste de Tolerância à Glicose e Teste de Tolerância à Insulina. O acompanhamento do ganho de peso e consumo foi feito por pesagem. As análises das enzimas do estresse oxidativo, 8-F2-Isoprostana e hormônios foram determinadas utilizando kits comerciais, apenas as análises de malondialdeído foram feitas pelo método de TBARS. A dieta suplementada com CLA, fitosterol ou a combinação de ambos, por 65 dias foi efetiva na redução da massa gorda, dos tecidos adiposos e do consumo alimentar. Ademais, CLA mas não o fitosterol modulou a ação da leptina na obesidade. No entanto, os suplementos apresentaram efeito na modulação das enzimas do estresse oxidativo indicando possível dano mitocontrial e citotoxicidade, além de não reverterem o processo de intolerância a glicose e resistência a insulina. Por outro lado, os suplementos reduziram as gotas de gordura no fígados dos animais suplementados / Abstract: Obesity is one of the most serious public health problems worldwide and is generally associated with chronic diseases such as diabetes. Some food compounds are linked to benefits in health as they modulate oxidative stress, hormones and inflammation. Conjugated linoleic acid (CLA) is a fatty acid that could exert an antioxidant role, possibly by its influence on lipid auto-oxidation. Other lipids, steroidal plant, the phytosterols are considered also bioactive compounds, since they are responsible for the reduction of LDL cholesterol circulation, as well as reduction in body weight. In addition, these compounds are considered to play anti-inflammatory roles, and they are potentially important in preventing the adverse effects of obesity. Thus, the aim of the present study was to investigate the effect of CLA and phytosterol supplementation, alone or in combination, in relation to satiety hormones, glucose and insulin resistance, weight loss and adipose tissue, and feed consumption and liver effects and their influence in the modulation of antioxidant system on male Sprague-Dawley rats fed a high-fat diet. Forty rats of the Sprague-Dawley specie, males and healthy were divided into five groups (n=8) randomly: standad group, High-Fatstandad group, and three groups that received the standard experimental high-fat diet with addition of 2% CLA, with addition of 2% phytosterol and with addition of 2% CLA plus 2% phytosterols. All diets were based on the AIN- 93G, and experimental diet high-fat add of 35% lipids, and 2% each supplement. The period of experiment was 65 days. The insulin sensitivity was calculated in the last week experimental by the methods Tolerance Test Glucose and Insulin Tolerance Test. The monitoring of consumption and weight gain was made by weighing. The analysis of the enzymes of oxidative stress, 8-F2- isoprostane and hormones were determined using commercial kits, only the analyzes of malondialdehyde were made by the method of TBARS. The diet supplementations with CLA, phytosterols or their combination, for 65 days were effective in reducing body fat, adipose tissue and feed consumption. Furthermore, CLA, but not phytosterols, modulated the action of leptin in obesity. However, the supplementation had an effect in modulating the enzymes of oxidative stress indicating possible damage and cytotoxicity mitocontrial, moreover both supplements did not reverse the process of glucose intolerance and insulin. On the other hand, the supplementation reduced the liver fat droplets of the animals / Mestrado / Nutrição Experimental e Aplicada à Tecnologia de Alimentos / Mestra em Alimentos e Nutrição

Submitted by Biblioteca do Instituto Biomédico BIB (uffbib@gmail.com) on 2017-06-05T16:57:34Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_mestrado-versão_final-_Jessika_Geisebel.pdf: 1194239 bytes, checksum: b59363ae595a444e379ef361c1b537c2 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-05T16:57:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação_mestrado-versão_final-_Jessika_Geisebel.pdf: 1194239 bytes, checksum: b59363ae595a444e379ef361c1b537c2 (MD5) / A programação metabólica ocorre quando insultos promovem alterações adaptativas nos períodos críticos do desenvolvimento e alteram as funções endócrino-metabólicas ao longa da vida. Estudos com alimentos conhecidos por trazerem benefícios à saúde além do valor nutritivo, mostraram que seu consumo por mães gestantes e/ou lactantes podem vir a ter desfechos negativos para a prole. Já está bem caracterizado que a ingestão de canela gera benefícios para homeostase energética. Entretanto, dados prévios obtidos pelo grupo mostraram que a suplementação com extrato aquoso de canela (400mg/kg peso corporal/dia) durante a lactação leva ao desenvolvimento de obesidade visceral, hiperleptinemia, hiperinsulinemia, associada a normoglicemia, na prole adulta aos 180 dias de vida. Com o objetivo de melhor compreender as alterações endócrino-metabólicas deste modelo, avaliamos a expressão proteica no fígado e músculo esquelético por Western blot, além de avaliarmos o conteúdo de triglicerídeo e glicogênio hepáticos através de ensaios colorimétricos. No fígado, vimos uma diminuição na fosforilação do IR, entretanto, observamos aumento na fosforilação do IRS1 e AKT. Quando avaliamos a sinalização de leptina, não observamos alteração na expressão do ObRB e SOCS3, no entanto, vimos um aumento na expressão da JAK2 e na fosforilação da STAT3, sugerindo que a ativação do IRS1/AKT possa decorrer da maior ativação da via da leptina. Apesar de não observarmos alteração da via gliconeogênica (PEPCK, G6Pase, GLUT2), vimos que a programação leva a um menor conteúdo de glicogênio hepático acompanhado por maior ativação da GSK3β. Observamos aumento do conteúdo de triglicerídeo hepático acompanhado por expressão normal do PPARα e uma interessante redução da expressão do SREBP1c. Concluímos que a programação por canela na lactação altera as principais ações da insulina no fígado, levando a uma menor síntese de glicogênio e acúmulo de gordura neste tecido, sem gerar alterações significativas no músculo esquelético. / Metabolic programming occurs when insults promotes adaptive changes in critic periods of development that alters the endocrine-metabolic functions in the offspring in medium and long terms. Studies with foods known to promote health benefits in addition to the nutritive value, shows that its consumption by pregnant and/or lactating females could induce negative outcomes to the offspring. It is well characterized that cinnamon intake promotes benefits to energy homeostasis. However, previous data obtained by our research group showed that supplementation with cinnamon water extract (400mg/kg body weight/day) during lactation leads to the development of visceral obesity, hyperleptinemia, hyperinsulinemia, associated to normoglycemia, in the adult offspring with 180 days old. To increase the knowledge about the endocrine-metabolic changes in this model, we evaluated the protein expression in liver and skeletal muscle by Western blot, and evaluated the hepatic content of triacylglycerol and glycogen using colorimetric assays. In liver, we observed a reduced IR phosphorylation; however, we observed increased phosphorylation of IRS1 and AKT. Concerning leptin signaling pathway, we did not observed changes in the ObRB and SOCS3 expression, but we observed an increased expression of JAK2 and phosphorylation of STAT3, suggesting that the activation of IRS1/AKT could be resulted by the increased activation of leptin signaling pathway. Although we observed no changes in the gluconeogenic pathway (PEPCK, G6Pase, GLUT2), we observed that the programmed group exhibit a lower hepatic glycogen content accompanied by increased activation of GSK3β. We observed increased hepatic triacylglycerol content accompanied by normal PPARα expression and an interesting reduction of SREBP1c expression. We conclude that the programming induced by cinnamon intake during lactation alters the main actions of insulin in liver; leading to lower glycogen synthesis and accumulation of fat in this tissue, without promote important changes in skeletal muscle.

O objetivo deste trabalho foi verificar os efeitos da suplementação energético-protéica na contagem de células T e de seus subtipos CD4 e CD8. Os sujeitos eram praticantes de atividade física de carga alta e diária. Foram avaliados em dois momentos: repouso (antes da atividade) e agudo (após a atividade). A contagem de células foi feita por citômetro de fluxo. A atividade física alterou os parâmetros escolhidos e a mesma, associada com a suplementação, alterou mais ainda. Observou-se que a suplementação reduziu a contagem das células T e de seus subtipos, no momento de repouso, indicando possível ação redutora na mobilização celular gerada pelo exercício. Foram levantados indícios que apontam para o fato da proteína de soja ter uma ação potencialmente melhor em relação às proteínas do soro do leite, para os parâmetros estudados. A suplementação com proteína e maltodextrina não se mostrou mais eficaz do que a suplementação com proteínas somente. / The objective of this research was to evaluate the effects of energetic-proteic supplementation on T cells counting as well as its CD4 and CD8 subtypes. The subject individuals studied were practitioners of daily high-load physical activities. The evaluations took place in two different moments and respective conditions: at rest (prior to the development of activities) and peak (immediately after performing activities). The physical activity modified the chosen parameters as long it was more effective as associated with the supplementation. At the rest moment, it was observed that the supplementation reduced the counting of T cells and its subtypes, thus indicating possible reducing action in the cellular mobilization generated by the exercise. For the studied parameters, indications were detected that point to the fact of the soy protein as having a potentially better action in relation to whey proteins. The supplementation with protein and maltodextrin did not prove to be more efficient than the supplementation only with proteins.

A secreção de insulina é estimulada pela glicose, porém os ácidos graxos (AG) podem influenciar o processo secretório. A oxidação de AG é importante para a estimulação da secreção de insulina por aumentar o ATP, porém, existem vias dependentes e independentes de ATP. Os AG <font face=\"Symbol\">w-3 interferem em processos fisiológicos e na composição e função da membrana plasmática, promovendo potente ação anti-inflamatória. Considerando a importante relação da NAD(P)H oxidase com a secreção de insulina, o estudo das alterações induzidas pela suplementação com AG <font face=\"Symbol\">w-3 sobre o conteúdo de superóxido (O2<font face=\"Symbol\">&#183;) e a expressão da NAD(P)H oxidase, é importante para a compreensão da fisiologia das células <font face=\"Symbol\">b-pancreáticas. Neste estudo, o grupo suplementado apresentou redução do conteúdo de O2<font face=\"Symbol\">&#183;, redução da expressão das subunidades da NAD(P)H oxidase e aumento na expressão da superóxido dismutase (SOD1 e 2), quando comparado ao grupo controle. Embora desconhecido o mecanismo, este dado é relevante, pois pressupõe melhor regulação do estado redox durante a secreção de insulina. / Insulin secretion is stimulated by glucose (GSIS), but fatty acid (FA) may influence the secretory process. The oxidation of FA is important for the stimulation of insulin secretion by increasing the ATP, although there are dependent and independent ATP pathways. The <font face=\"Symbol\">w-3 FA change physiological processes, and affect the composition and function of the plasma membrane, promote potent anti-inflammatory action. Considering the important relationship of NAD(P)H oxidase with insulin secretion, the study of changes induced by supplementation with <font face=\"Symbol\">w-3 FA on the superoxide (O2<font face=\"Symbol\">&#183;) content, and expression of NAD(P)H oxidase, becomes of great importance for understanding the pancreatic <font face=\"Symbol\">b cells physiology. In this study, the group supplemented with <font face=\"Symbol\">w-3 FA showed a reduction of the O2<font face=\"Symbol\">&#183; content, reduced expression of NAD(P)H oxidase subunits, and increased the expression of the enzyme superoxide dismutase (SOD 1 and 2), compared to control. Although unknown the mechanism, this data is relevant, because it represents better regulation of the redox state during GSIS .

Introdução: A avaliação dos resultados de políticas públicas de suplementação alimentar em condições reais de sua operacionalização (efetividade) é um instrumento imprescindível para área de saúde pública. Objetivos: Avaliar a efetividade de programa governamental de suplementação alimentar no crescimento de crianças, segundo o estado nutricional ao ingressar. Métodos: Estudo de coorte com dados secundários de 25.433 crianças de baixa renda com idade entre 6 a 24 meses que ingressaram em programa de distribuição de leite fortificado \"Projeto Vivaleite\" de 2003 a 2008, em 311 municípios do Estado de São Paulo. O crescimento foi medido por meio dos valores de escore z de peso para idade (PI), calculados pelo padrão OMS/2006, obtidos, na rotina do programa, ao ingressar e a cada 4 meses durante a permanência. Os critérios de inclusão foram ter idade ao ingressar entre 6 a 24 meses, ter pelo menos duas pesagens, incluindo a obtida na entrada, e não ter relatos de problemas de saúde. As crianças foram divididas em três grupos de escore z ao entrar: sem comprometimento de peso (z> -1); risco de baixo peso (-2 &#8804;z< -1) e baixo peso (z<-2). Utilizou-se regressão linear multinível (modelo misto), permitindo a comparação, em cada idade, das médias ajustadas do escore z de ingressantes e participantes há pelo menos quatro meses, ajustadas para correlação entre medidas repetidas. Resultados: Verificou-se efeito positivo do Programa no ganho de peso das crianças, variando em função do estado nutricional ao ingressar; para as que entraram sem comprometimento de peso o ganho médio ajustado foi 0,1827 escore z, entre as que entraram com risco de baixo peso foi 0,5659 e entre as ingressantes com baixo peso foi 1,0049 escore z. Conclusões: O programa é efetivo para o crescimento infantil, medido pelo escore z PI, com efeito mais pronunciado entre as crianças que entram no programa em condições menos favoráveis de peso. / OBJECTIVE: To assess the effectiveness of a state-run food supplementation program for child growth according to childrens nutritional status at enrollment. METHODS: Cohort study including secondary data of 25,433 low-income children aged between 6 and 24 months enrolled in a fortified milk program \"Projeto Vivaleite\" in 311 cities in the State of São Paulo, Brazil, between 2003 and 2008. Children\'s growth was assessed based on weight-for-age (WA) z-scores, estimated following WHO criteria (2006). Data was routinely collected at the program enrollment and every 4 months. Inclusion criteria were: being 6 to 24 months of age at enrollment; having at least two weight measures including the first measure at enrollment; and not having any ill health conditions. At enrollment, children were categorized into three groups based on their z-scores: no compromised weight gain (z> 1); at risk of low weight (-2 &#8804;z< -1), and low weight (z< -2). Multilevel linear regression analysis (mixed model) was performed for comparison, considering age, of adjusted average z-scores between new children enrolled and those in the program for at least four months, adjusted for correlation between repeat measures. RESULTS: The program had a positive effect on children\'s weight gain. Based on their nutritional status at enrollment, adjusted average weight gain z-score was 0,1827 in children with compromised weight gain, 0,5659 in those at risk of low weight, and 1,0049 in those with low weight. CONCLUSIONS: The milk program is effective for child growth, as measured by WA z-scores. The most pronounced effect was seen among children who showed less favorable levels of weight at enrollment.