Orientadores: Jose Carlos Maldonado, Mario Jino / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Eletrica e de Computação / Made available in DSpace on 2018-07-22T21:00:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vergilio_SilviaRegina_D.pdf: 8065952 bytes, checksum: 030c4242de7564d75e341340132d08f7 (MD5) Previous issue date: 1997 / Resumo: Critérios de teste estrutural dividem o domínio de entrada de um programa em teste, em sub-domínios e requerem que pelo menos um ponto de cada sub-domínio seja executado, auxiliando na geração de dados de teste; permitem ainda, a avaliação da adequação de um dado conjunto de dados (casos) de teste. Uma vez particionado o domínio, é necessário responder à seguinte questão: "Que pontos de cada sub-domínio devem ser selecionados?". Isso diz respeito à tarefa de geração de dados de teste para satisfazer um critério. Essa é uma atividade bastante complexa de ser automatizada pois não existe um algoritmo de propósito geral para determinar um conjunto de casos de teste que satisfaça um dado critério para um particular programa. Não é possível nem mesmo determinar se esse conjunto existe. Na literatura são encontradas diferentes técnicas de geração de dados de teste que utilizam diferentes fundamentos para selecionar pontos do domínio que descrevem certos tipos de erros e, por isso, com alta probabilidade de revelar esses erros. No entanto, essas técnicas são apresentadas de forma dissociada dos critérios estruturais. Este trabalho introduz uma família de Critérios Baseados em Restrições, denominados Critérios Restritos, que têm o objetivo de aumentar a eficácia das atividades de teste e de oferecer medidas de cobertura. Os Critérios Restritos permitem a utilização de critérios estruturais juntamente com os princípios de técnicas de geração de dados de teste sensíveis a erros e foram motivados por resultados de estudos teóricos e empíricos conduzidos com essas técnicas. Nesse trabalho, esses resultados, que serviram como motivação para a introdução dos Critérios Restritos, são apresentados. São discutidos aspectos de complexidade e de relação de inclusão entre os Critérios Restritos e os demais critérios. Também é proposta uma extensão da ferramenta de testes POKE- TOOL para apoiar a utilização desses critérios e para facilitar a etapa de geração de dados de teste. Um experimento de avaliação dos Critérios Restritos é descrito. Os resultados desse experimento comprovam a aplicabilidade desses critérios e indicam um aumento no número de erros revelados. Ao final, são propostas duas estratégias de geração de dados de teste para satisfazer critérios de teste estrutural. Elas têm como objetivo reduzir os efeitos causados por caminhos não executáveis na atividade de teste e gerar dados com alta probabilidade de revelar erros. Entre essas estratégias propõe-se uma estratégia incremental, baseada na hierarquia entre os critérios, e que garante a preservação da relação de inclusão mesmo quando o fator eficácia é considerado / Abstract: Structural testing criteria divide the program input domain to sub-domains and require the execution of at least one point from each sub-domain. They support the test data generation phase and the adequacy analysis of a test set. Once the domain is divided, the question is posed: "What points in each sub-domain should be selected?" This question concerns to the task of generating test data to satisfy a criterion, which is very complex to be automated since there is no general algorithm to determine a set of test cases that satisfy a given criterion; it is not possible to determine even that such set exists. In the literature there are different test data generation techniques with different principIes for choosing points from the program domain associated to certain errors, with a high probability of revealing them. However these techniques are presented not associated to structural criteria. This work introduces a family of criteria, named Constraint Based Criteria. They have the goal of increasing the testing activity efficacy and make possible to obtain coverage measures. They permit the use of error-sensitive data generation techniques with structural criteria. The Constraint Based Criteria proposal was motivated by results obtained from empirical and theoretical studies with these techniques. These results are presented. Aspects of complexity and the inclusion relation among Constraint Based Criteria and othercriteria are discussed. An extension to POKE- TOOL is proposed with the goal of supporting Constraint Based Criteria and easing the data test generation phase. An experiment to evaluate the Constraint Based Criteria is described. The results from this experiment show their applicability and an increase in the number of revealed errors. And finally, two test data generation strategies to satisfy structural criteria are proposed. They have the goal of reducing the effects of infeasible paths in the testing activity and of generating test data with high probability of revealing errors. One of these strategies is incremental, based on the hierarchy of criteria and always preserve the inclusion relation among criteria even when the factor efficacy is considered. / Doutorado / Engenharia de Computação / Doutor em Engenharia Elétrica

Orientador: Antonio Celso Fonseca de Arruda / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecanica / Made available in DSpace on 2018-07-23T17:24:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrade_AronJosePazinde_M.pdf: 5105080 bytes, checksum: d30d5085c99dc76c9006430bbe53388c (MD5) Previous issue date: 1988 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Engenharia Mecânica

Orientador: Clarice Weis Arns / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-27T02:26:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Domingues_HelenaGallicchio_M.pdf: 3430595 bytes, checksum: ec59d99db25139771cd4d4d2b1ba15b4 (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Neste trabalho foram adaptados e padronizados dois ensaios imunoenzimáticos (dot ELISA e S-ELISA), para auxiliar 110 diagnóstico do vírus respiratório sincicial bovino (BRSV). A amostra vira! padrão, BRSV -25-BR isolada 110 Brasil foi utilizada nos dois ensaios, tendo sido produzida em célula CER e processadas por ultracentrifugação em gradiente descontínuo de sacarose 30-55% (v/v). Foram analisadas 423 amostras de sorosco1etados nos principais centros de bovinocultura do país. as quais foram submetidas ao teste padrão de soroneutralização (SN). onde 67,8% das amostras foram positivas. A técnica de dot-EUSA, utjlizando O.7/µg de proteína purificada por disco, detectou 71,6% deamostras positivas, apresentando uma sensibilidade de 92.3% e especificidade de 71,3%. Oteste de S-EUSA, utilizando 3,0 µg de proteina bruta por poço, detectou 72.5% de amostras positivas, com sensibilidade de 91.6% e especificidade de 68,4%. Por meio dos dados coletados, valida-se os testes de S-ELISA e dot-ELISA para a detecção de anticorpos anti-BRSV como alternativa para o uso em laboratório e no campo / Abstract: Two Enzyme-Linked Immunosorbent Assay techniques (dot-ELISA e S-ELISA) were developed to detection of antibodies against Bovine Respiratory Syncytial Virus (BRSV). The antigen was produced in Chicken Embroyo Related (CER) continuous cell line, inoculated with virus strain , BRSV-25-BR, isolated in Brazil, and it was processed by centrifugation 1hrougb a discontinue sucrose gradient (30-55% p/v). Four hundred twenty three bovine serum samples were analised by the standard test of serum neutralization (SN), and 67,8% were positive. Dot-ELISA test was standardized, utilizing 0,7 .µg of purified BRSV protein per nitrocelulosis disc, anel 3,0 µg per well in the S-ELISA test. The dot-ELISA test detected 71,6% of positives serum samples, showing a sensitivity of 92,3% and a specificity of 71.3%. The S-ELlSA test, detected 72,5% of positive serum samples. with a sensitivity of 91,6% and specificity by 68,4%. These results show that dot-ELISA and S-ELISA tests may be an option to detect anti-BRSV antibodies in labarotory and field / Mestrado / Microbiologia / Mestre em Genética e Biologia Molecular

Orientador: Eliane Martins / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Computação / Made available in DSpace on 2018-07-27T10:44:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Yanagawa_RosilenyLie_M.pdf: 14473662 bytes, checksum: 0043470ed494fa6d88de20deb23220ba (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Esta dissertação descreve uma metodologia para a construção e uso de classes autotestáveis. A metodologia busca melhorar a testabilidade de Sistemas Orientados a Objetos, através da adaptação de conceitos consolidados em hardware, como o Projeto para Testabilidade (DFT, do inglês Design for Testability) e o conceito de autoteste, que significa a adição de estruturas especiais a componentes para permitir que testes sejam gerados e avaliados internamente. Além do conceito do autoteste, nosso trabalho faz uso da hierarquia de herança existente para permitir também a reutilização dos testes. Neste sentido, a Técnica Incremental Hierárquica (HIT) [Har92] é usada com o objetivo de permitir que os testes de uma superclasse possam ser reusados para uma subclasse. As vantagens e desvantagens do uso da metodologia são mostradas na dissertação de duas formas: a primeira através de uma apresentação dos passos para a construção e uso de classes autotestáveis baseada nos testes de classes da biblioteca MFC (Microsoft Foundation Classes); e a segunda através do uso da metodologia nos testes de um conjunto de classes de uma aplicação real. Esta dissertação também apresenta uma avaliação empírica feita para determinar se os testes gerados neste trabalho têm um bom potencial para encontrar falhas. Os resultados mostraram que os testes gerados possuem um bom potencial na detecção de falhas. Nossos resultados ainda não oferecem uma evidência definitiva sobre a eficácia do conjunto de requisitos de teste gerado, porém mostram que a estratégia de teste adotada pode ser útil nos testes de classes de sistemas 00. / Abstract: This thesis describes a methodology for building and using self-testing classes. The methodology aims to improve the testability of Object Oriented (00) Systems, through the adaptation of concepts consolidated in hardware, as the Design for Testability (DFT) and the self-testing concepts, which means the addition of special structures to the components to allow tests to be generated and evaluated internally. In addition to the self- testing concept, our work makes use of the existing inheritance hierarchy allowing also the tests reuse. In this direction, the Hierarchical Incremental Testing (HIT) approach, proposed in [Har92], allows a test sequence for a parent class to be reused, whenever possible, when testing one of its subclasses. The advantages and disadvantages of the methodology are shown in the thesis in two ways: (1) a presentation of steps that should be carried out in building and using a self- testing class, based on classes from the Microsoft Foundation Class (MFC); and (2) the methodology use in testing a set of classes from a real application. This thesis also presents an empirical evaluation to determine if the tests generated in this work have a good potential for finding faults. The results have shown that the generated tests have a good potential in fault detention. Our results still do not offer a definitive evidence on the effectiveness of a set of generated test cases; however, they show that the adopted strategy of test can be useful in the 00 systems classes tests. / Mestrado / Mestre em Ciência da Computação

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-10-04T18:22:23Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Jacilene Marques Maciel.pdf: 949269 bytes, checksum: 6fdbdf68b085f91edadead362316fa1e (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-11-14T18:45:04Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Jacilene Marques Maciel.pdf: 949269 bytes, checksum: 6fdbdf68b085f91edadead362316fa1e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-11-14T18:45:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Jacilene Marques Maciel.pdf: 949269 bytes, checksum: 6fdbdf68b085f91edadead362316fa1e (MD5) Previous issue date: 2013-08-15 / CNPq / O petróleo e seus derivados são a principal fonte de energia em todo o mundo, porém as atividades que os envolvem podem causar sérios danos ao meio ambiente e à saúde humana. Neste contexto, é imprescindível o desenvolvimento de tecnologias que eliminem ou reduzam esses poluentes e consequentemente, sua toxicidade. Este trabalho teve como objetivo avaliar a capacidade de micro-organismos, isoladamente e em consórcio, na degradação de óleo diesel. Inicialmente foram utilizados 6 fungos e 3 bactérias, e estes, foram submetidos ao teste que investiga o potencial de degradação de petroderivados pelos micro-organismos. Em seguida, estas culturas foram submetidas à concentrações crescentes de óleo diesel (1% a 10%) a uma temperatura de 300C (+2°C) de forma estática. Com base nos resultados dos ensaios de aclimatação, foram selecionadas as linhagens para a formação do consórcio. Após a seleção do consórcio microbiano, este foi submetido a uma aclimatação e em seguida, a um planejamento experimental, em que foram utilizadas como variáveis: o inóculo, a concentração de nitrogênio e a temperatura, visando a obtenção das melhores condições favorecendo o processo de degradação. Dentre as bactérias, Bacillus sp. apresentou os maiores percentuais de degradação e entre os fungos, a levedura L24. Os resultados do planejamento experimental com o consórcio misto indicaram que, uma menor quantidade de inóculo (1 bloco/gelose) e uma maior concentração da fonte de nitrogênio (C:N 50:1) foi a condição que mais favoreceu a biodegradação da fonte oleosa. As culturas testadas isoladamente, apresentaram percentual de degradação acima de 70% enquanto que em consórcio os maiores valores foram de 30%. Nos ensaios de fitotoxicidade, todos os micro-organismos em consórcio, e isoladamente, apresentaram valores de redução da toxicidade do óleo diesel, sendo que, isoladamente mostraram-se mais eficientes, apresentando valores de IG entre 60% e 100%. / Oil and its derivatives are the main source of energy in the world, but the activities that involve them can cause serious damage to the environment and human health. In this context, it is essential to develop technologies that eliminate or reduce these pollutants and consequently its toxicity. This study aimed to evaluate the ability of micro-organisms, alone and in partnership, in the degradation of diesel oil. Initially we used 6 3 fungi and bacteria, and these were tested to investigate the potential of petroderivados degradation by micro-organisms. Then, these cultures were subjected to increasing concentrations of diesel oil (1% to 10%) at a temperature of 300C statically. Based on the results of tests of acclimatization, the strains were selected for the formation of the consortium. After selecting the microbial consortium, has been subjected to an acclimatization and then the experimental design, in which were used as variables: the inoculum, nitrogen concentration and temperature in order to obtain the best conditions favoring the degradation process. Among bacteria, Bacillus sp. showed the highest percentage of degradation among fungi, yeast L24. The results of the experimental design with the mixed consortium indicated that a smaller amount of inoculum (1 block / agar) and a higher concentration of the nitrogen source (C: N 50:1) was the condition that most favored the biodegradation of oil supply. The cultures tested alone, had percentage of degradation is above 70% while the highest values in a consortium was 30%. In phytotoxicity tests, all micro-organisms in a consortium, and separated showed reduced toxicity values diesel oil, and, separately shown to be more effective, with GI values between 60% and 100%.

Orientador : Ronaldo Aloise Pilli / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-01T10:17:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MacedoJunior_FernandoCesarde_M.pdf: 3886522 bytes, checksum: 3bd5a9c7b8bc4b7362890e39e89d65c8 (MD5) Previous issue date: 2001 / Mestrado

Orientador : Elenice Aparecida de Moraes Ferrari / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T14:29:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Freitas_PatriciaMariaPugginade_M.pdf: 5287418 bytes, checksum: 9104e63200145181912fdccb48cab28e (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O presente estudo teve como objetivo investigar as possíveis alterações comporta mentais em situação de escolha alimentar e de omissão de estímulos, após a lesão neuroquímica unilateral com Ácido Ibotênico no Complexo Paleoestriatal (CP) em pombos (Columba livia). Foram utilizados 20 pombos machos divididos em 3 grupos: grupo controle, grupo sham e grupo experimental. Todos os animais passaram por um treinamento em escolha alimentar durante 4 condições (pré lesão, pós lesão, reversão 1 e reversão 2). Nas condições Pré, Pós e Rev 2 os comedouros ficavam dispostos paralelamente um ao outro no segmento final da caixa experimental, sendo que um deles continha alimento coberto por areia e o outro continha só areia. Na condição Rev 1, os comedouros foram colocados no outro segmento da caixa. Cada condição era composta de 4 sessões. O teste de omissão de estímulos (retirada dos comedouros) ocorreu no dia seguinte à última sessão da condição Rev 2. Os itens comporta mentais foram descritos de acordo com categorias presentes em um catálogo de pombos mantidos em cativeiro. As sessões experimentais foram gravadas em fitas de vídeo e as transcrições das fitas foram usadas para as análises dos comportamentos dos pombos. Os resultados indicaram que os animais não apresentaram alterações comporta mentais (p>O,O5) com relação aos comportamentos analisados (MOV, EXP, LOC, MAN). No teste de omissão de estímulos, os dados também não indicaram diferenças significativas (p>0,O5). Com relação ao tempo gasto em cada quadrante da câmara experimental, observou-se uma diferença significativa (p<O,O5) relacionada ao quadrante D (local correto). Os dados são indicativos de que a lesão unilateral no Cp, não provocou alterações comportamentais que viessem a prejudicar a aprendizagem de escolha alimentar. Os animais foram capazes de codificar eventos externos, armazenar informações, usá-las para detectar alterações contextuais espacial e direcional e, conseqüentemente, gerar previsões sobre o ambiente específico / Abstract: The present work investigated the possible behavioural alterations in situation of food choice and stimulus omission, after unilateral lesion with Ibotenic Acid into Paleoestriatal Complex (PC) in pigeon. Twenty male pigeons were divided in three groups: control sham and experimental. Ali the animals were trained in a food choice task with four conditions ( Pre-lesion, Post-lesion, Reversion 1 and Reversion2). In the conditions Pre, Post and Rev2, two feeders were placed in the final segment of the experimental box opposed to the entrance door. Only one feeder had food covered with sand. The other feeder had only sand. In the condition Rev l, the feeders were placed in the opposed segment of the box. Each condition had four sessions. During stimulus omission test the feeders were absent. Behavioural items were recorded according to categories described in a behavioural catalogue of captive pigeons. The experimentals sessions were videotaped and the tape transcriptions were used for analysis of pigeon' s behavior. The results indicated the animals did not present behavioural alterations (p> O,O5) related to the behaviors analised (MOV, EXP, LOC and MAN). The data of the stimulus omission test did not indicate statistics differences (p> O,O5) related to these behavioural categories. The data related to the time spent in each quadrant of the experimental box, indicated a statistic difference (p< O,O5) related to the quadrant D (location of the feederwith-food in the conditions Pre, Post and Rev2). The data indicated that the unilateral lesion in the PC did not cause behavioural alterations capable to impair the learning of the food choice. The animals were able to encode external events, to storage informations, use it to detect spatial and directional contextual alterations and, consequently, to generate predictions about the especific environment / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Carmino Antonio de Souza / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:05:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Visentainer_JeaneElieteLaguila_D.pdf: 1194644 bytes, checksum: d07a083add30d2d7b71ee0a06824e08e (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo:O transplante alogênico de células progenitoras hematopoiéticas é o tratamento de escolha para muitas doenças hematológicas e imunodeficiências primárias. A seleção de doadores é baseada na definição de moléculas HLA-A e B por sorologia, de alelos HLA-DRB1 e DQB1 por técnicas de biologia molecular e na cultura mista de linfócitos. Apesar disto, a doença do enxerto contra o hospedeiro (GVHD) é ainda uma grave complicação, que ocorre em aproximadamente 35% dos receptores de medula HLA-idênticos. O presente estudo teve por objetivo avaliar o poder prognóstico da ocorrência de rejeição e GVHD dos seguintes testes laboratoriais: (1) cultura mista de linfócitos clássica (CML) e potencializada com citocinas exógenas (CMLp); (2) tipagem de genes de citocinas, pela técnica de PCR-SSP e (3) seguimento do nível sérico de citocinas dos pacientes transplantados, empregando-se métodos imunoenzimáticos quantitativos. No estudo, foram avaliados 118 transplantes, com doadores HLA-idênticos, realizados no Centro de Hematologia e Hemoterapia e Hospital de Clínicas da Universidade Estadual de Campinas, de agosto de 1994 a fevereiro de 2002. Na CMLp, a resposta dos linfócitos do doador contra as células do receptor (DxR) foi aumentada 1,9 e 4,1 vezes, com a adição de IL-4 (100 hg/mL) e IL-2 (10 hg/mL), respectivamente. Todavia, a resposta do doador contra suas próprias células (DxD) também sofreu um incremento de 2,0 e 6,4 vezes, respectivamente. Como o tratamento avaliado também induziu aumento das respostas autólogas, o emprego da CMLp não trouxe vantagens adicionais ao método tradicional (CML), que mostrou correlação com a incidência de GVHD crônica. A análise do polimorfismo dos genes reguladores de citocinas mostrou que, os genótipos de TNF-a-308, IFN-g+874, IL-6-174, IL-10-1082, -819, -592 e TGF-b1+869, +915 não foram associados ao risco aumentado de GVHD aguda e rejeição, enquanto o fenótipo de baixo produtor de IL-6 mostrou associação com GVHD crônica. O acompanhamento da variação dos níveis séricos de sIL-2R, IL-6, IL-10, TNF-a, IFN-g e TGF-b1 dos receptores até 15 semanas pós-transplante revelou que, os níveis médios de sIL-2R e IL-10 foram maiores no grupo que desenvolveu GVHD aguda (776,4 ± 65,5 rg/mL e 10,9 ± 3,3 rg/mL) em relação ao grupo que não desenvolveu esta doença (541,1 ± 17,3 rg/mL e 2,5 ± 2,2 rg/mL). Os níveis de sIL-2R no período de ¿pega¿ do enxerto (1.165,0 ± 179,2 rg/ml vs. 578,0 ± 47,2 rg/ml) e ao tempo da GVHD aguda (926,4 ± 142,5 rg/ml vs. 496,5 ± 48,7rg/ml) também diferiram entre os grupos. A cinética destas citocinas também revelou que os níveis de TNF-a e TGF-b1 foram correlacionados com GVHD aguda. Nas primeiras semanas após o transplante, os níveis de TNF-a foram associados a GVHD aguda (72,7 ± 2,6 rg/mL vs. 38,1 ± 1,7 rg/mL). Nas últimas semanas, os níveis de TGF-b1 foram menores no grupo que desenvolveu a GVHD aguda (7,5 ± 1,4 hg/ml), comparado ao grupo sem a doença (17,0 ± 1,6 hg/ml). Assim sendo, o monitoramento dos níveis séricos de sIL-2R, IL-10, TNF-a e TGF-b1 poderia fornecer ao clínico um indicativo do risco de GVHD aguda, enquanto a genotipagem de IL-6-174 poderia oferecer um novo método para identificar pacientes ao risco de GVHD crônica / Abstract: Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation is the chosen treatment for many hematological diseases and primary immunodeficiency¿s. The donor¿s selection has been based on the serological definition of HLA-A and B, in the definition of HLA-DRB1 and DQB1 by DNA-based molecular method and in the standard mixed lymphocyte culture. Regardless, the graft-versus-host disease (GVHD) is still one of the several complications that occur in approximately 35% of HLA-identical bone marrow recipients. The objective of this study was to evaluate the prognostic power of rejection and GVHD development of laboratorial assays: (1) standard mixed lymphocyte culture (MLC) and potencialized (MLCp) with exogenous cytokines; (2) typing of cytokine genes, by PCR-SSP, and (3) following-up of serum level cytokines from transplanted patients, using quantitative enzyme-linked immunoassays. From August 1994 to February 2002, it was analyzed 118 transplants, with HLA-identical donors, who had been performed in the Hematological and Hemotherapy Center and Clinic¿s Hospital at Campinas State University. In the MLCp, the donor lymphocyte response versus receptor cells (DxR) was augmented 1.9 and 4.1 times with IL-4 (100 hg/mL) and IL-2 (10 hg/mL) supplementation, respectively. However, the donor response versus their selves-cells (DxD) also augmented, 2.0 and 6.4 times, respectively. Since this treatment also stimulated an increase of autologous responses, MLCp did not have advantages on relation to standard method (MLC) that showed a correlation with the incidence of chronic GVHD. Cytokine gene polymorphism analysis showed that TNF-a-308, IFN-g+874, IL-6-174, IL-10-1082, -819, -592, and TGF-b1+869, +915 genotypes were not associated to increased risk of acute GVHD and rejection, whereas the IL-6 low producer phenotype showed significant statistical association to chronic GVHD. The following-up of sIL-2R, IL-6, IL-10, TNF-a, IFN-g, and TGF-b1 recipient serum levels during 15 weeks post-transplant showed that sIL-2R and IL-10 average levels were higher in the group with acute GVHD (776.4 ± 65.5 rg/mL and 10.9 ± 3.3 rg/mL), than in the group without the disease (541.1 ± 17.3 rg/mL and 2.5 ± 2.2 rg/mL). Soluble IL-2 receptor levels at the engraftment and at onset of acute GVHD were also different between the groups with and without acute GVHD (1.165.0 ± 179.2 rg/ml vs. 578.0 ± 47.2 rg/ml and 926.4 ± 142.5 rg/ml vs. 496.5 ± 48.7rg/ml), respectively. The cytokine kinetics also showed that TNF-a and TGF-b1 levels were associated with acute GVHD. In the first weeks after the transplant, high TNF-a levels were associated with acute GVHD (72.7 ± 2.6 rg/mL vs. 38.1 ± 1.7 rg/mL). In the last weeks, TGF-b1 levels were lower in the group with acute GVHD (7.5 ± 1.4 hg/ml) than those in the group without the disease (17.0 ± 1.6 hg/ml). Therefore, the monitoring of sIL-2R, IL-10, TNF-a, and TGF-b1 serum levels after the transplant can provide to physician an indication of acute GVHD risk, while IL-6-174 genotype may offer a new method for identifying patients at increased risk of chronic GVHD / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica

Orientador: Alba R. M. Souza Brito / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-25T09:34:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_DeniseAparecidade_M.pdf: 1891538 bytes, checksum: 9531d707782ea16a1bb6911bddf290db (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Estudos recentes mostraram a eficácia dos derivados de E/Z-3-(4'-bromo-[l, l' -bifenil]-4-il)-( 4-X-fenil)-N,N -dimetil-2-propeno-1-amina sobre as três formas do protozoário Trypanosoma cruzi, agente causador da doença de Chagas. O derivado não-substituído (X=H) foi um dos mais ativos e menos tóxicos desta série. Neste trabalho, o composto (X=H) foi preparado e seus isômeros Z e E foram isolados por cromatografia de camada delgada preparativa para a realização dos ensaios biológicos. O isômero Z foi mais ativo que o E sobre formas tripomastigotas do T. cruzi. Nos ensaios de quantificação de DNA (DNA) e de redução do sal de tetrazólio (MTT), usando células fibroblásticas V79, o isômero Z foi o mais tóxico. No método de incorporação do corante vermelho neutro, a mistura isomérica e os isômeros isolados apresentaram toxicidades equivalentes. Os compostos foram mais tóxicos neste método em comparação com MTT e DNA. O isômero E foi o mais tóxico na avaliação da toxicidade aguda sobre a bactéria Escherichia coZi e sobre camundongos. Não houve alteração comportamental em camundongos tratados com a mistura I isomérica, em relação ao controle, no ensaio do Campo Aberto. Os estudos da atividade do composto (X=H) sobre o fungo Trichophyton rubrum e sobre epimastigotas do T. cruzi, sugerem a inibição da biossíntese do ergosterolcomo um possível mecanismo de ação tripanossomicida / Abstract: The abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Orientador: Maria Edwiges Hoffmann / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-25T13:25:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fanan_Simone_M.pdf: 3709051 bytes, checksum: f6eaf9d25517cc0dc4912e984bd7a64a (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A melatonina, honnônio produzido pela glândula pineal, apresenta um gr-ande interesse na atualidade, devido à demonstração de sua ação antioxidante tanto in vitro como in vivo. Neste trabalho, foi investigado o potencial de risco genético e toxicológico da melatonina em culturas de células, e sua atividade antimutagênica. A mutagenicidade da melatonina foi determinada pelo teste de Ames, na presença e na ausência de ativação metabólica (fração S9), nas linhagens de Salmonella typhimurium TA97, Tal00 e TA102. A exposição das culturas por 30 minutos, à diferentes concentrações de melatonina (29-1160 _g/placa) não induziu nenhum aumento significativo do número de colônias revertentes, tanto na presença como na ausência de ativação metabólica. A melatonina mostrou, também, uma reversão dose-dependente (29 ¿ 232 _g/placa) dos efeitos mutagênicos causados pelo H2O2 (0,5 mM), na linhagem T A1O2. A atividade citotóxica da melatonina para fibroblastos de hamster chinês (linhagem V79) foi determinada pela medida de seus efeitos sobre a viabilidade e proliferação celular. A melatonina não alterou a viabilidade celular, medida pela redução do MTT, na faixa de concentração entre 0,0001 a 1 mM. A exposição das células por 30 minutos a diferentes concentrações de melatonina (0,01 - 5 mM) não causou inibição significativa do crescimento celular, no período de 24 horas subsequente ao tratamento. Entretanto, a exposição das células por 24 horas a concentrações de melatonina entre 0,5 a 5 mM causou inibição significativa do crescimento celular, de fonna dependente da dose. A melatonina mostrou ser um antioxidante altamente eficiente em solução, inibindo a oxidação degradativa da desoxirribose, induzida pelo sistema H2O2/Fe+3/NTA, de forma dependente da dose. Este hormônio foi 10 vezes mais eficiente que a glutationa e 200 vezes mais que o manitol, ao sequestrar os radicais hidroxila. Porém, o trolox foi 15 vezes mais eficaz que a melatonina. Entretanto, ao avaliar crescimento celular em fibroblastos V79, a melatonina (0,001 mM) mostrou uma proteção apenas parcial (50+ 7%) do efeito inibitório induzido por H2_ (50 µM). Contudo, a melatonina não protegeu a membrana mitocondrial de fibroblastos V79 contra os ataques dos oxidantes H2O2 e HPC (2,5 mM), como demonstrado pela ausência de proteção no ensaio do MTT. Já em eritrócitos humanos, ela mostrou ser um antioxidante eficiente contra a peroxidação lipídica, induzida pelo H2O2 (5 mM), apresentando um efeito protetor dose-dependente. Estes resultados indicam que a melatonina não é mutagênica e, além disso, inibe a mutação induzida pela H2O2 . A análise da toxicidade da melatonina pelas células V79 mostrou que a melatonina é citotóxica somente quando presente em altas concentrações e por tempo prolongado. A melatonina mostrou ser um eficiente antioxidante em sistema livre de células, em cultura de fibroblastos V79 apresentou proteção apenas parcial contra os efeitos da H2O2 . Entretanto, em eritrócitos mostrou eficiente proteção contra danos de membrana induzidos por este oxidante / Abstract: The melatonin, hormone produced 1>y the pineal gland,presents _ great interest at the present time due to the demonstration of its antioxidant action as in vitro as in vivo. In this work, the potential of toxicological risk of the melatonin was investigated in bacterias and in mammal cells,and its antioxidant activity was examined in cell tree systems, in human fibroblast V79 and in erythrocyte. The mutagenicity of the melatonin was determined by Ames Test, in the presence and in the absence of metabolic activation (S9-traction), in the strains of Salmonella typhimurium TA97, TA100 and TA102. The exposition of cultures by 30 minutes, to different melatonin concentrations (29 to 1,160 µg/plate) didn't induce any significant increase of the number of reverted colonies, after 48 hours of cultivation, so much in the presence as in the absence of metabolic activation. The melatonin also showed, a dose dependent reversion (29 to 232 µg/plate) ofthe mutagenics effects caused by the hydrogen peroxide (0.5 mM), in the TA102 straip.. Theçytotmric activity of the melatonin to V79 Chinese hamster fibroblasts was determined by the measure of its effects on proliferation. The melatonin didn't chage the cellular viability mesured by the reduction of MTT, in the concentration range trom 0.0001 to 1 mM. The exposition of the cells for 30 minutes to different melatonin concentrations (0.01 -5 mM) didn't caus_significant iphibitionof the cellular growth, in the period of subsequent 24 hours of treatment. However, the exposition of the cells for 24 hours to increasing melatonin concentrations between 0.5 and 5 mM, caused significant inhibition in the cellular growth, in dependent way of the dose. The .melatonin,showed to be ahighly efficient antioxidant in solution, inhibiting thedegradative oxidation of the deoxyribose, induced by the system H2O2/Fe3+/NTA, in a dependent way to the dose. This honnone was more than 10 times efficient than the glutathione and 200 times more efficient than the manit04 when scaveng the hydroxil radical. Even so, the trolox was more than 15 times effective than the melatonin. However, when evaluating cellular growth in fibroblasts V79, the melatonin just showed a partial protection (50+ 7%) ofthe inhibition effect induced by H2O2 (50µM), in _low concentration (0.001 mM). However, the melatonin up to lmM didn't protect the mitochondrional membrane of fibroblasts V79 against the attacks of the hydrogen peroxide and cumene hydroperoxide (2.5 mM), as demonstrated by the absence of protection related to the inhibition of the MTT reduction induced by these oxidizers. Yet in human erythrocytes, it showed to be an efficient antioxidant against lipid peroxidation, induced in the membrane by hydrogen peroxide (5 mM), presenting a dose-dependent protecting effect. These results indicate that melatonin is not mutagenic; besides, it inhibits mutations induced by H2O2 . The analysis of melatonin toxicity through the cells V79 showed that melatonin is citotoxic, on1y when it is present in high concentrations, for a long time. Melatonin showed to be na efficient antioxidant in a cell ftee system, but in cultures of fibroblasts V79 it showed just a partial protection against the effects of H2O2 . However, in erythrocytes, it showed an efficient protection against membrane injuries caused by this oxidant / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Ciências Biológicas