O consumo de frutas e hortaliças vem aumentando rapidamente, em função de mudanças nos hábitos das populações urbanas. Novas técnicas para produção são necessárias, para que haja um suprimento contínuo de alimentos de alta qualidade e baixo custo. Este foi o principal propósito da introdução do cultivo em estufas plásticas, em muitos países. Porém, à medida em que este sistema evoluiu, surgiram vantagens e limitações, ao mesmo tempo. Assim, tornou-se indispensável aprofundar conhecimentos das relações planta-atmosfera. Em particular, as relações entre as condições hídricas e o crescimento das plantas, em resposta às alterações físicas nos ambientes protegidos, devem ser melhor avaliadas. Com este objetivo conduzido um experimento com tomateiro cultivado dentro e fora de estufa plástica, em ciclos de primavera-verão e verão-outono, em Eldorado do Sul, Rio Grande do Sul, em 1999/2000. As reduções na radiação solar incidente e na velocidade do vento mostraram ser as causas primárias das alterações no ambiente interno. A redução na entrada de energia e na ventilação, combinadas ao aumento da umidade do ar causado pela transpiração do tomateiro, reduziram a demanda evaporativa do ambiente interno, causando modificações morfológicas e fisiológicas nas plantas. A área foliar, a duração da área foliar e a altura das plantas dentro da estufa foram maiores do que fora dela. A mesma tendência se deu na produção de biomassa. A condutância foliar e a transpiração relativa mostraram ser melhores indicadores de déficit hídrico do que o potencial da água na planta e a taxa fotossintética. A aclimatação das plantas nos ambientes protegidos provocou alterações morfológicas que resultaram em aumento na eficiência de uso da radiação fotossinteticamente ativa. Como resultado, as plantas aumentaram a produção de matéria seca, apesar da redução (em cerca de 30%) na radiação global dentro da estufa. O uso de tela plástica anti-insetos nas bordas da estufa amplificaram tanto as alterações físicas como seus efeitos sobre as plantas do ambiente interno.

Orientador: Shizuo Seno / Banca: José Luis Susumu Sasaki / Banca: Max José de Araujo Faria Junior / Banca: Jairo Augusto Campo de Araujo / Banca: Tiyoko Nair Hojo Rebouças / Resumo: A proteção de cultivos com malhas coloridas e agrotêxtil vem sendo muito usado, visando melhoria na eficiência do cultivo e a minimização da aplicação de defensivos. Diante disso, este trabalho teve como objetivo verificar o efeito do tipo de proteção de plantas ou dos frutos de dois híbridos de tomate, conduzidos em ambiente protegido, com e sem aplicação de inseticidas, na área experimental da UNESP - Campus de Ilha Solteira - SP no período de abril a agosto de 2007. Foram conduzidos experimentos em quatro tipos de proteção. Em cada tipo o delineamento experimental em blocos casualizados (DBC), sendo os tratamentos dispostos em parcelas subdivididas no esquema fatorial 2x2, dois tipos de aplicação de inseticidas e dois híbridos. Foram avaliados os seguintes parâmetros: altura; diâmetro médio da haste; taxas médias de crescimento absoluto e produtividade de frutos total, comercial e furados. Os resultados foram submetidos a análise de variância (teste F) e os efeitos dos tratamentos foram comparados pelo teste de Tukey a 5% de probabilidade, levando as seguintes conclusões: a aplicação de inseticidas não alterou o desenvolvimento das plantas; o tipo de proteção com agrotêxtil proporcionou um incremento na amplitude térmica dentro da estufa, entretanto a estufa protegida com chromatinet proporcionou maior altura de plantas; o híbrido Saladete teve melhor adaptação as condições de cultivo; estufas desprotegidas lateralmente apresentam maiores produtividades, entretanto com maiores perdas devido ao descarte de frutos não comerciais; a estufa protegida com agrotêxtil proporcionou as menores produtividades de frutos furados nos tratamentos com e sem aplicação de inseticidas; o híbrido Saladete mostrou-se melhor adaptado as condições de cultivo, apresentando maior produtividade comercial e menor produtividade de frutos furados; ocorrem alterações... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The protection of cultivation with colored meshes and nonwoven has been very used, seeking minimization of the defensive application. With that, this work had as the aim verifies the effect of the type of plant protection or the fruits in two hybrid of tomato, driven in protecting environment, with and without application of insecticides in the experimental area of College of Engineering of Ilha Solteira - SP UNESP/FEIS from April to August of 2007. Experiments were driven in four protection types. In each type the experimental design was in randomized blocks (DBC), being the treatments disposed in split splot array in the factorial outline 2x2, two types of application of insecticides and two hybrid. They were appraised the following parameters: height; medium diameter of the stem; taxes averages of absolute growth and total, commercial and discarded productivity of fruits. The results were submitted to the variance analysis (Test F) and the effects of the treatments were compared by the test of Tukey to 5% of probability, taking the following conclusions: the of insecticides application do not alter the plant development; the greenhouse protected with Chromatinet Blue 30% provided a larger height of plants; Therefore the type of protection with nonwoven offered an increment at the termal high inside the greenhouse protected; the hybrid Saladete had better adaptation of the cultivations conditions; greenhouses failed to protect sidelong present larger total productivities, meantime with larger losses due to the discard of fruits don't trade; the greenhouse protected with nonwoven provided the smallest productivities of discarded fruits in the treatments with and without application of insecticides; the hybrid Saladete best was shown adapted to the cultivation conditions presenting larger commercial productivity and smaller productivities of discarded fruits; they happen alterations... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Max José de Araújo Faria Júnior / Banca: Shizuo Seno / Banca: José Luis Susumu Sasaki / Banca: Rerison Catarino da Hora / Banca: Humberto Silva Santos / Resumo: O trabalho teve por objetivo avaliar o efeito da aplicação de diferentes concentrações (0; 50; 100 e 150 mg L-1) de paclobutrazol (PBZ) na produção de mudas, no crescimento, desenvolvimento de plantas, na produção e na qualidade físico-química de dois híbridos de tomateiro (Jennifer e AF 7631), em campo aberto e em ambiente protegido. O trabalho foi desenvolvido de abril a outubro de 2007, na UNESP - Campus de Ilha Solteira, Estado de São Paulo. O PBZ foi aplicado às mudas, aos 15 dias após a germinação. Para avaliação das mudas, foi utilizado delineamento inteiramente casualizado, em esquema fatorial, com 4 repetições e 10 plântulas por parcela. Para avaliação do desenvolvimento e produtividade dos híbridos após transplante, adotou-se o delineamento em blocos casualizados, em esquema fatorial, com análise para grupo de experimentos, modelo fixo, com 4 blocos por ambiente e 9 plantas por parcela. O uso de concentrações crescentes de paclobutrazol reduziu a taxa de crescimento e a altura de plantas, aumentou o diâmetro da haste, reduziu a brotação lateral e reduziu a produtividade da cultura. O PBZ também influenciou significativamente na massa de seca de parte aérea, com aumento linear na massa seca da parte radicular. O híbrido Jennifer apresentou maiores taxas de crescimento absoluto, resultando em plantas com maior altura que o AF 7631, sem que houvesse diferenças entre eles, no que se refere ao diâmetro da haste, brotação lateral e produtividade. Em ambiente protegido, foram obtidas plantas mais vigorosas, com maior altura, brotação lateral e maior produtividade que em campo aberto. O ambiente de cultivo não interferiu em nenhuma das características qualitativas avaliadas, para o híbrido AF 7631, enquanto que, para o Jennifer houve efeito significativo do ambientes de cultivo sobre o teor de sólidos solúveis e acidez titulável... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study aimed to evaluate the effect of different concentrations (0, 50, 100 and 150 mg L-1) of paclobutrazol (PBZ) on the production of seedlings, plant growth, development, plant yield and physico-chemical quality of fruits, of two tomato hybrids (Jennifer and AF 7631), cultivated in open field and in protected environment. The work was conducted from April to October of 2007, at UNESP - Campus of Ilha Solteira, Sao Paulo State. The PBZ was applied to seedlings, at 15 days after germination. For evaluation of the seedlings, the used statistical experimental design was completely randomized, in factorial outline, with 4 repetitions and 10 seedlings per plot. For evaluation of the development and productivity of two hybrids after transplant it was used a randomized block design, in a factorial array, with analysis for group of experiments, in a fixed model, with 4 replications for environment and 9 plants per plot. The use of increasing concentrations of paclobutrazol reduced the height of plants and their growth rate, increased the stem diameter, decreased the side shooting and reduced the crop yield. PBZ also influenced significantly in the dry shoot, with lineal increase in the dry roots. The hybrid Jennifer showed higher rates of absolute growth, resulting in higher plants than AF 7631, but, with no differences between them, regarding to the stem diameter, to side shooting and crop yield. In the greenhouse, it was obtained higher plants with higher side shooting and higher yield than that observed in the open field. The cultivation environment didn't interfere in none of the appraised qualitative characteristics, for the hybrid AF 7631, while, for Jennifer there was significant effect of the cultivation environment on the contents of soluble solids and titratable acidity, not affecting, however, the maturation index. However of the cultivation... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:37:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2474594 bytes, checksum: 6cdab11f886d77e7d0c8a3d024dde318 (MD5) Previous issue date: 2008-07-30 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The genus Begomovirus (family Geminiviridae) includes viruses with a genome comprised of one or two molecules of circular, single-stranded DNA, transmitted to dicot species by the whitefly Bemisia tabaci. In Brazil, after the introduction of the B biotype of B. tabaci in the early 1990s, the incidence of begomoviruses in tomato has become frequent, with several reports of new viral species. Some of these species have become prevalent under field conditions, including Tomato severe rugose virus (ToSRV) and Tomato yellow vein streak virus (ToYVSV). The purpose of this study was to characterize two isolates of these species through the cloning of their whole genomes followed by molecular analysis, and the production of infectious clones for determination of their host ranges. Total DNA extracts of infected plants were used for whole genome amplification using the phi29 phage DNA polymerase. The amplification products were cloned into plasmids and completely sequenced. Sequence analysis indicated that the DNA-A and DNA-B of ToSRV-[BR:Pir1:05] and ToYVSV- [BR:Pda30:05] isolates had greater than 90% identities with other isolates of ToSRV and ToYVSV, respectively. The molecular analysis indicated that the DNA-A of the BR:Pir1:05 isolate may be the result of a recombination event, in which the virus acquired the rep ORF of Tomato rugose mosaic virus (ToRMV) and the cp ORF of an unidentified virus. Analysis of the DNA-B of the same isolate indicated the existence of a relationship with viruses that infect weed/wild hosts in Brazil, corroborating the hypothesis that viruses present in wild hosts led to the virus currently found in tomatoes. Additionally, because of the high identity observed between the DNA-B of ToSRV-[BR:Pir1:05] and ToRMV, it is possible that this genomic component is shared by the two viruses. In host range assays, plants showing latent infections were observed for both isolates. Such plants can act as natural reservoirs and serve as a primary source of inoculum for host plants of economic importance such as the tomato. The infectious clones of ToYVSV- [BR:Pda30:05] had low infectivity in the host range assays. It is possible that the inoculation method was not effective in the transmission of this isolate, or one or both clones could contain mutations that reduce the efficiency of their replication. / O gênero Begomovirus (família Geminiviridae) inclui vírus com genoma composto por uma ou duas moléculas de DNA fita simples, transmitidos a espécies de plantas dicotiledôneas pela mosca-branca Bemisia tabaci. No Brasil, após a introdução do biótipo B de B. tabaci no início da década de 1990, a incidência de begomovírus em tomateiro tornou-se freqüente, com vários relatos de novas espécies virais. Algumas dessas espécies tornaram-se prevalentes em condições de campo no Brasil, incluindo o Tomato severe rugose virus (ToSRV) e o Tomato yellow vein streak virus (ToYVSV). O objetivo deste trabalho foi caracterizar dois isolados dessas espécies, por meio da clonagem de seus genomas completos seguida de análise molecular, e da obtenção de clones infecciosos para determinação de suas gamas de hospedeiros. Extratos de DNA total de plantas infectadas foram utilizados para a amplificação do genoma viral completo utilizando-se a DNA polimerase do fago φ29. Os produtos da amplificação foram clonados em plasmídeos e completamente seqüenciados. A análise das seqüências do DNA-A e DNA-B dos isolados ToSRV- [BR:Pir1:05] e ToYVSV- [BR:Pda30:05] indicou valores de identidade acima de 90% com outros isolados de ToSRV e ToYVSV, respectivamente. A análise molecular indica que o DNA-A do isolado BR:Pir1:05 pode ser resultado de um evento de recombinação, no qual o vírus adquiriu a ORF rep do Tomato rugose mosaic virus (ToRMV) e a ORF cp de um vírus não identificado. A análise do DNA-B do mesmo isolado indica a existência de relacionamento com vírus que infectam plantas daninhas/silvestres no Brasil, reforçando a hipótese de que vírus presentes em hospedeiros silvestres deram origem aos vírus atualmente encontrados em tomateiro. Adicionalmente, devido à alta identidade observada entre os DNAs-B dos isolados BR:Pir1:05 e do ToRMV, é possível que este componente genômico seja compartilhado pelos dois vírus. Nos testes de gama de hospedeiros, plantas apresentando infecções latentes foram observadas para os dois isolados. Tais plantas podem atuar como reservatórios naturais e servir de fonte de inóculo primário para plantas hospedeiras de importância econômica, como o tomateiro. Os clones infecciosos do isolado BR:Pda30:05 apresentaram baixa infectividade nos testes de gama de hospedeiros. É possível que o método de inoculação não tenha sido eficiente na transmissão deste isolado, ou que os clones apresentem mutações que reduzam a eficiência de sua replicação.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:37:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 494315 bytes, checksum: ae779e1b9f8fc13a152740edf2e2b595 (MD5) Previous issue date: 2009-02-12 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The fusarium wilt caused by Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol), is one of the major problems in tomato cultivation especially in green house crop. The soil infestation with this pathogen can make the green house cultivation unviable, therefore periodic fumigation is recommended to maintain low inoculum level in soil. This study was done to evaluate the fumigant effect of the mustard essential oil (MEO), containing 90% allyl isothiocyanate, to control Fol. In vitro bioassays were done to determine its effect on mycelial growth, sporulation and germination of conidia and clamydospores, with use of a wild Fol and benomyl resistant mutant (Folm). The fungal cultures in Petri plates were fumigated with different concentration of the MEO for 24 or 48 h, and then incubated in MEO free atmosphere. For all fungal propagules, the estimated DE50 was lowest if the fumigation was done for 48 h. The mycelium and conidia of the Fol were more susceptible to MEO than chlamydospores. The MEO did not affect sporulation. Fumigation with MEO was also evaluated for eradication of the chlamydospores of Folm in soil. Initially, the interaction between dose (0, 50, 100 or 150μL/L) and exposure time was determined (2, 4, 6 or 8 days). The soil infested with 2000 ±200 chlamydospores/g was placed in flasks, and after adding the requited amount of MEO the flasks were hermetically sealed. After each exposure period, the inoculum density of the fungus was determined by plating the soil dilutions on benomyl enriched galactosenitrate agar. The regression equation revealed that at dose of 125μL/L an exposure period of 5.4 days was required to eradicate Folm. To determine the fumigant effect of MEO in the green house, 20L of soil infested with 4000 ±250 chlamydospores/g was placed in the plastic bags of 30L, and treated with 0, 50, 100 or 150μL/L of MEO. The bags were then sealed and stored. After 7-days exposure period, the soil was distributed into 4L-plastic pots, and one 20-day old tomato seedling was transplanted into each pot. At 15-day interval, soil from each pot was sampled at 15-day interval to follow the population dynamic of the fungus. The disease progress was accompanied by leaf chlorophyll analysis leaves, and the final severity was evaluated by use of a numerical at the end of 60 days. It was found that the soil fumigation with 150μL/L of MEO reduced the Folm inoculum density by 95% and the disease severity was less than 15%. / A murcha de fusário, causada por Fusarium oxysporum f. sp. lycopersici (Fol), é um problema comum em campos de produção de tomate, especialmente quando o cultivo é realizado em ambiente protegido. Solos infestados por este patógeno podem inviabilizar a produção em estufas, sendo recomendada a fumigação periódica, visando à manutenção de um baixo nível de inóculo no solo. Este trabalho teve como objetivo avaliar o efeito fumigante do óleo essencial de mostarda, que é composto por 90% de isotiocianato de alila (ITCA), na redução de inóculo e no controle da murcha vascular causada por Fol. Foram realizados bioensaios in vitro de crescimento micelial, formação de conídios e germinação de conídios e de clamidósporos. Para os testes, foram utilizados um isolado selvagem (Fols) e um mutante resistente ao benomil (Folm), os quais foram fumigados com ITCA, em diferentes doses, dentro de recipientes plásticos vedados, por períodos de 24 ou 48 horas. Após a fumigação, as placas contendo as culturas foram incubadas na ausência dos vapores do produto até a avaliação. Os menores valores de DE50 foram estimados para o período de 48 horas de exposição, tanto para o bioensaio de crescimento micelial como para os de germinação de conídios e de clamidósporos. Verificou-se que os conídios foram os propágulos de Fol mais sensíveis ao produto e os clamidósporos os mais resistentes. O ITCA não afetou significativamente a formação de conídios pelos isolados. Avaliou-se também a eficiência do produto na erradicação de clamidósporos de Folm no solo. Inicialmente, foi estudada a interação entre doses (0, 50, 100 e 150μL/L) e tempo de exposição (2, 4, 6 e 8 dias) ao ITCA. Solo infestado com 2000 ±200 clamidósporos/g foi transferido para erlenmeyers, que receberam a dose desejada, sendo, em seguida, hermeticamente vedados. Após exposição, a população do fungo foi determinada por meio de plaqueamento de diluições em série em meio seletivo para F. oxysporum acrescido de benomil. A partir da equação de regressão gerada, pôde-se estimar que seria necessária uma fumigação de solo com 125μL/L por períodos superiores a 5,4 dias para erradicação de Folm no solo. Para determinar o efeito de ITCA em casa de vegetação, 20L de solo infestado com 4000 ±250 clamidósporos/g foram colocados em sacos de polietileno de 30L, os quais receberam as doses de 0, 50, 100 ou 150μL/L sendo, posteriormente, vedados, permitindo a fumigação por 7 dias. Decorrido este período, o solo foi transferido para vasos de 4L, os quais receberam uma muda de tomate com 20 dias de idade. As plantas foram cultivadas por 60 dias, sendo retiradas amostras quinzenais de solo para acompanhamento da dinâmica populacional do fungo no solo. Através de análise do conteúdo de clorofila nas folhas, acompanhou-se o desenvolvimento da doença e a severidade final foi avaliada por meio de escala de notas. Foi verificado que a fumigação com 150μL/L de ITCA reduziu em mais de 95% a população de Folm no solo e que a severidade da doença aos 60 dias foi inferior a 15%.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:40:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 306256 bytes, checksum: 5e206a1bfc74dd2b223fdef1b7789111 (MD5) Previous issue date: 2007-03-13 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The genetic variability of nine accesses of tomato (Lycopersicon esculentum Mill.) of indeterminate type, of the Vegetable Germplasm Bank of the Viçosa Federal University was evaluated for photosynthetic capacity (A), dry matter, partitioning dry matter and yield, having been used as standard of the cultivating tomato the Santa Clara cultivar. The experiment was lead in protecting environment and favorable conditions of the irrigation, nutrition and temperature requirements, in randomized complete block design, with 10 treatments and 5 repetitions. It was measured photosynthesis with analyzer of gas for infra-red ray, LI-6400, between 51 and 56 days before of the transplanting (DBT). To the 83 DAT and in the end of the productive cycle (EPC), IAF was determined. In EPC the dry mass of the fruits, leaves, roots and shoots was gotten for drying in dryer equipment to 75ºC until constant weight. The partitioning index of leaves, shoot, root and fruit had been calculated that the reason between dry matter of each part and the dry matter total and expresses in relative values. The data had been submitted analyze of variance (F; p<0,01), test of Tukey (p<0,05) and Pearson correlation (r) using statistical software SAEG 9. The results had shown to genetics significant variability (test F, p<0,01) for all the evaluated characteristics. Was determined too, that not exist correlation between A, dry matter total and yield, but IAF correlated negatively with A. The assimilate partitioning to vegetative part competes strong with the one of the fruits. This showed that are possible to have productive plants with small IAF to the ones of the current tomato cultivate, if to combine high A and harvest index, being allowed to visualize one another ideotype of plants that demand little resources for similar unit of plant with current productivity cultivar. Promising accesses for favorable characteristics of the evaluated had been identified. / Foi avaliada a variabilidade genética de nove acessos de tomateiro de tipo indeterminado do Banco de Germoplasma de Hortaliças da Universidade Federal de Viçosa, com base na capacidade fotossintética (A), matéria seca total, partição de fotoassimilados e produção. Tendo sido utilizado como padrão de referencia o cultivar Santa Clara. O experimento foi conduzido em ambiente protegido e condições favoráveis de irrigação, nutrição e temperatura, em delineamento de blocos completos casualizados, com 10 tratamentos e 5 repetições. Mediu-se a fotossíntese, com analisador de gás por infravermelho LI-6400, entre 51 e 56 dias após do transplante (DAT). Aos 83 DAT e no final do ciclo produtivo foi determinado IAF. No final do ciclo produtivo foi obtida a massa seca dos frutos, folhas, caule e raiz por secagem em estufa a 75 ºC até peso constante. Os índices de partição de assimilados às folhas, caule, raiz e fruto foram calculados com base na fração da massa total seca e expressos em valores relativos. Os dados foram submetidos a analise de variância (F; p<0,01), teste de Tukey (p<0,05) e correlação de Pearson (r), utilizando o programa estatístico SAEG 9. Os resultados mostraram significativa variabilidade genética para todas as características avaliadas (Teste F; p< 0,01). Entre os acessos estudados não houve correlação alguma entre A, matéria seca total e produção. A correlacionou negativamente com IAF. Matéria seca e partição de assimilados não tiveram associação alguma. A partição de fotoassilados à parte vegetativa, compete fortemente com a dos frutos. Este conjunto de relações mostra que é possível ter plantas produtivas com menores IAF aos das atuais cultivares, se combinar, elevadas A e índices de partição aos frutos, permitindo visualizar um outro ideotipo de plantas que demandam menos recursos por unidade de planta com produtividade similares às atuais cultivares. Foram identificados acessos promissores para combinações favoráveis das características avaliadas.

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:42:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2907131 bytes, checksum: 7c8c658c01f5e065741077a77ef12f4d (MD5) Previous issue date: 2011-02-28 / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / The genomes of most plant viruses code for only 4-10 proteins which are required to complete the infection cycle, including the stages of viral genome replication, cell-to-cell movement and systemic spread. For a successful infection, these viral proteins must interact with host factors, modulating metabolic pathways and coordinating a complex network of biochemical and molecular interactions in the pathogen s favor. A subtractive library constructed from susceptible tomato plants infected by the plant potyvirus Pepper yellow mosaic virus (PepYMV) identified several genes which are putatively involved in the initial steps of the viral infection process, including those that code for the Translationally Controlled Tumor Protein (TCTP) and the tomato homologue of the Saccharomyces cerevisae Gal83 (Sl-Gal83), a protein of the SNF1 complex. TCTP is a highly conserved protein in eukaryotes, and is involved in several fundamental cellular processes such as cell growth, cell cycle progression, programmed cell death and protection against different types of stresses. SNF1 plays an important role in transcriptional activation and expression of genes involved in the cellular response to different stresses, such as nutrient limitation, high salinity, heat shock and virus infection. The objectives of this work were to study the roles of TCTP and Sl-Gal83 during PepYMV infection in susceptible hosts. Transgenic tomatoes (cv. 'Moneymaker') silenced for these genes were generated and were mechanically inoculated with PepYMV. ELISA and qRT-PCR were performed to verify the phenotype resulting from Sl-Gal83 and TCTP silencing. The results showed that non-transformed plants were infected, while all ten silenced plants remained symptomless, were ELISA negative and had reduced viral load. The subcellular localization of TCTP in healthy and PepYMVinfected plants was analyzed by confocal microscopy using a TCTP-YFP fusion. In healthy plants the subcellular localization of TCTP is cytoplasmatic, as described for other organisms. Forty-eight hours after PepYMV infection, TCTP is relocated to the nucleus. To determine which PepYMV protein(s) promotes nuclear targeting of TCTP, each viral protein (P1, HC-Pro, P3, PIPO, P3N-PIPO, CI, 6K2, NIa, NIb and CP) was coexpressed individually with pYFP-TCTP. Results showed that TCTP accumulates predominantly in the nucleus when co-infiltrated with CI and NIa, and is distributed equally in the nucleus and cytoplasm when co-infiltrated with P1, PIPO, P3N-PIPO, 6K2 and NIb. In plants co-infiltrated with HC-Pro, P3 and CP, TCTP remained in the cytoplasm. In order to identify and characterize additional viral and host factors involved in the TCTP-mediated network of plant-potyvirus interactions, TCTP was cloned as a TAP (tandem affinity purification) tag fusion.Protein complexes were purified using TAP, and its constituents were analyzed by mass spectrometry. However,it was not possible to identify the proteins. The probable limiting factor for a more efficient detection was the low concentration of protein eluted. Thus, it is necessary to optimize the protocol of extraction/elution to obtain a higher concentration of proteins complexed with nTAPi- TCTP. Together, the results of this work indicate that both TCTP and Sl-Gal83 play critical roles in the tomato-PepYMV interaction, being necessary for the establishment of a systemic infection. Further studies should be conducted to improve our understanding of the nature and mechanisms of the interactions between TCTP, Sl-Gal83 and PepYMV. / O genoma da maioria dos vírus que infectam plantas codifica apenas 4-10 proteínas, que são necessárias para completar o ciclo de infecção, incluindo as etapas de replicação do genoma viral, movimento célula-a-célula e movimento sistêmico. Para uma infecção bem sucedida, as proteínas virais devem interagir com fatores do hospedeiro, modulando processos metabólicos e coordenando uma rede complexa de interações bioquímicas e moleculares a favor do patógeno. Uma biblioteca subtrativa foi construída a partir de plantas de tomateiro suscetíveis infectadas pelo potyvírus Pepper yellow mosaic virus (PepYMV). Foram identificados vários genes potencialmente envolvidos nas etapas iniciais do processo de infecção viral. Dentre os genes identificados encontram-se os genes que codificam as proteínas Translationally controlled tumor protein (TCTP) e o homólogo de tomate de Saccharomyces cerevisae Gal83 (Sl-Gal83), uma proteína do complexo Sucrose non-fermenting-1 (SNF1). TCTP é uma proteína altamente conservada em eucariotos, e está envolvida em vários processos celulares básicos, como crescimento celular, progressão do ciclo celular, morte celular programada e proteção contra diversos tipos de estresses. SNF1 desempenha um papel importante na ativação da transcrição e expressão de genes envolvidos na resposta celular aos diferentes tipos de estresses, tais como limitação de nutrientes, salinidade elevada, choque térmico e infecção viral. O objetivo deste trabalho foi estudar o papel das proteínas TCTP e Sl-Gal83 durante o processo de infecção pelo PepYMV em hospedeiros suscetíveis. Plantas transgênicas de tomate cv. Moneymaker silenciadas para estes genes foram produzidas e inoculadas mecanicamente com o PepYMV. O estabelecimento da infecção viral foi avaliado por ELISA e qRT-PCR. Plantas não-transformadas foram infectadas, enquanto as plantas silenciadas permaneceram assintomáticas. Nas plantas silenciadas o ELISA apresentou resultado negativo e a carga viral foi reduzida. A localização subcelular de TCTP em plantas sadias e infectadas pelo PepYMV foi analisada por microscopia confocal utilizando-se uma fusão YFP-TCTP. Em plantas sadias a localização subcelular de TCTP é citoplasmática, conforme descrito para outros organismos. Quarenta e oito horas após a infecção pelo PepYMV, TCTP foi redirecionada para o núcleo. Para determinar qual é a proteína viral que direciona a relocalização de TCTP para o núcleo, cada uma das proteínas virais (P1, HC-Pro, P3, PIPO, P3N-PIPO, CI, 6K2, NIa, NIb e CP) foi coinfiltrada individualmente com pYFP-TCTP. Os resultados mostraram que TCTP acumula predominantemente no núcleo quando co-infiltrada com CI e NIa, e está igualmente distribuída no núcleo e citoplasma, quando co-infiltrada com P1, PIPO, P3NPIPO, 6K2 e NIb. Em plantas co-infiltradas com HC-Pro, P3 e CP, TCTP permaneceu no citoplasma. Para identificar possíveis proteínas virais e/ou do hospedeiro que interagem com TCTP foi realizado um ensaio de purificação por afinidade em tandem. A análise por SDS-PAGE de extratos protéicos de plantas expressando nTAPi-TCTP mostrou duas bandas entre 40 e 50 kDa presentes no extrato purificado. Os fragmentos foram analisados por espectrometria de massa, porém não foi possível identificar as proteínas. Provavelmente o limitante para uma detecção mais eficiente foi a baixa concentração de proteínas eluídas. Com isso, torna-se necessário a otimização do protocolo de extração/eluição para a obtenção de uma maior concentração de proteínas complexadas com nTAPi-TCTP. Em conjunto, os resultados obtidos neste trabalho sugerem que tanto TCTP quanto Sl-Gal83 possuem papéis fundamentais na interação PepYMV-tomate, sendo necessárias para o estabelecimento de uma infecção sistêmica. Estudos adicionais devem ser realizados para melhor compreensão da natureza e dos mecanismos das interações entre TCTP, Sl-Gal83 e o PepYMV.

Submitted by JELENA PURIC (jelena0puric@gmail.com) on 2018-04-16T12:39:06Z No. of bitstreams: 1 Jelena Puric Dissertação de Mestrado.pdf: 2830343 bytes, checksum: 555cfd034f96e02e12c50107d2077d5f (MD5) / Rejected by Adriana Aparecida Puerta null (dripuerta@rc.unesp.br), reason: Prezada Jelena, Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: 1) A folha de aprovação está em local errado. No arquivo enviado, está em primeiro lugar, antes da capa. O correto de acordo com as normas vigentes é que a folha de aprovação venha após a ficha catalográfica (que o seu arquivo também não tem) e venha antes do Resumo. 2) Falta a ficha catalográfica, que deve ser solicitada pelo site da biblioteca da Unesp de Rio Claro e inserida após a folha de rosto no arquivo pdf e no verso da folha de rosto na versão impressa. O documento enviado não foi excluído. Para revisá-lo e realizar uma nova tentativa de envio, acesse: https://repositorio.unesp.br/mydspace Agradecemos a compreensão e aguardamos o envio do novo arquivo. Atenciosamente, Biblioteca Campus Rio Claro Repositório Institucional UNESP on 2018-04-16T14:20:27Z (GMT) / Submitted by JELENA PURIC (jelena0puric@gmail.com) on 2018-04-16T14:31:14Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Jelena Puric.pdf: 2938364 bytes, checksum: b7379106bbe1a2cdf5ce930d5337096b (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Aparecida Puerta null (dripuerta@rc.unesp.br) on 2018-04-16T18:28:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 puric_j_me_rcla.pdf: 2383486 bytes, checksum: e2cb2e6c5d3d71426040a339c65c55ce (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-16T18:28:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 puric_j_me_rcla.pdf: 2383486 bytes, checksum: e2cb2e6c5d3d71426040a339c65c55ce (MD5) Previous issue date: 2018-02-22 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Este trabalho teve como objetivo obter extratos contendo metabólitos secundários de fungos filamentosos isolados de sedimentos marinhos da Antártica e avaliar sua potencial atividade antibacteriana em Xanthomonas citri subsp. citri, Xanthomonas euvesicatoria e Xanthomonas axonopodis pv. passiflorae (bactérias fitopatogênicas que causam doenças em cítricos, pimenta e tomate, e maracujá, respectivamente). Entre os 90 extratos brutos intracelulares e extracelulares obtidos a partir de fungos, 19 mostraram a capacidade de impedir o crescimento de X. citri subsp. citri e X. euvesicatoria in vitro e 22 mostraram a capacidade de dificultar o crescimento de X. axonopodis pv. passiflorae in vitro. Os extratos extracelulares inibiram em média 97,12% de X. citri subsp. citri, 95,94% de X. euvesicatoria e 96,58% de X. axonopodis pv. passiflorae a 3,0 mg / mL. / This work aimed to obtain extracts containing secondary metabolites from filamentous fungi isolated from marine sediments from Antarctic and assess their potential antibacterial activity on Xanthomonas citri subsp. citri, Xanthomonas euvesicatoria and Xanthomonas axonopodis pv. passiflorae (phytopathogenic bacteria causing diseases in citrus, pepper and tomato, and passionfruit, respectively). Among the 90 raw intracellular and extracellular extracts obtained from fungi, 19 showed the ability to hamper the growth of Xanthomonas citri subsp. citri and X. euvesicatoria in vitro and 22 showed the ability to hamper the growth of X. axonopodis pv. passiflorae in vitro. The extracellular extracts inhibited on average 97,12% of Xanthomonas citri subsp, 95,94% of X. euvesicatoria and 96,58% of X. axonopodis pv. passiflorae at 3,0 mg/mL.

Orientador: Rumy Goto / Banca: João Domingos Rodrigues / Banca: Manuel Abílio de Queiróz / Banca: Max José de Araújo Junior / Banca: Dimas Menezes / Resumo: Conduziu-se o experimento em cinco ambientes protegidos, tela termo refletora, tela de sombreamento branca, tela de sombreamento preta, tela difusora e céu aberto, sendo cada ambiente de 10mx24m, com pé direito de 3,0 m, estrutura tipo "Sombreiro", no município de Juazeiro, BA, em área experimental do Departamento de Tecnologia e Ciências Sociais (DTCS) da UNEB (Campus III), entre julho a dezembro de 2006. O delineamento experimental foi de blocos ao acaso, em cinco ambientes com quatro repetições e dois tratamentos por bloco, representados por dois híbridos de tomateiro de crescimento determinado, fruto tipo Caqui e Santa Cruz, D-4768 e C-5240, respectivamente, e análise realizada em grupos de experimentos, com parcelas de 2,0m x 3,6m (7,2m2). A utilização das telas de sombreamento reduziu a intensidade da energia radiante, proporcionando melhor qualidade e distribuição da radiação solar dentro dos ambientes protegidos, resultando melhor performance da cultura, quando comparada com o cultivo a céu aberto. O melhor desempenho dos genótipos foi registrado nos ambientes: tela difusora e tela de sombreamento preta, respectivamente, que apresentaram a menor transmitância da radiação global, evitando-se o excesso de radiação incidente na cultura, melhorando fisiologicamente todos os processos da distribuição de fotoassimilados nas plantas, com conseqüente aumento da produção. / Abstract: The experiment was carried out under four shading houses covered with different shade nets (heat reflector net, white shade net, black shade net and net diffuser) and open field. Each environment measured 10mx24 m, 3.0 m tall, in shade net structure, in the county of Juazeiro- BA, in the Experimental Field of UNEB - DTCS (Departamento Tecnologia e Ciências Sociais), in the period between July and December of 2006. The experiment was carried out in a randomized block design, in five environments with four replications and two treatments (two tomato hybrids) in each block. The two hybrids of tomato presented plants with a determined growth (hybrids D-4768 and Santa Cruz C-5240). The plot size was 2.0m x 3.60 m (7.2m2). The use of screens reduced the intensity of the radiant energy, what brought about a better distribution of the solar radiation within the protected environments. This resulted in a better crop performance when compared with open sky crops. The best genotype performance was registered for the environments diffuser screen and black screen, respectively. They showed the smallest transmittance of the global radiation, avoiding excess of incident radiation on the crop, improving physiologically the distribution of assimilate in the plants, which consequently increased the production. / Doutor

Resumo: Objetivou-se com este trabalho avaliar possíveis fontes de resistência de genótipos de tomateiro a Tuta absoluta (Meyrick, 1917) (Lepidoptera: Gelechiidae), dos tipos não preferência, para oviposição, alimentação e antibiose, em avaliações de parâmetros biológicos das fases jovem e adulta do inseto. Os experimentos foram realizados no Laboratório de Resistência de Plantas a Insetos, do Departamento de Fitossanidade da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, Câmpus de Jaboticabal-SP. As espécies de tomateiro utilizadas foram Lycopersicon esculentum (Mill.) (cv. Santa Clara, cinco híbridos: Saladete Italiano Ty Tyna, Santa Cruz Débora Ty, Salada Lumi, Saladete Italiano Andrea Victory e Santa Cruz Ty Carina Ty), Lycopersicon hirsutum f. glabratum (C.H. Mull.) (linhagens PI 134418 e PI 134417) e Lycopersicon pimpinellifolium (Just) (linhagens NAV 1062 e PI 126931), para os testes de não preferência para oviposição e alimentação, e todos esses materiais, menos Santa Cruz Ty Carina Ty, para o teste de antibiose. Para os testes de não preferência para oviposição, avaliou-se o número de ovos às 24; 48 e 72 horas após a liberação dos adultos. Os testes de não preferência para alimentação foram realizados com e sem chance de escolha, utilizando lagartas de 12 dias de idade. As avaliações foram realizadas aos 1; 3; 5; 10; 30; 60; 120; 360; 720 e 1440 minutos após a liberação das lagartas, contando o número de indivíduos alimentando-se por genótipo, e quantificando, ao término do experimento, a massa foliar consumida por genótipo. Constatou-se que os genótipos de tomateiro ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The objective of this study was to evaluate possible sources of resistance of tomato genotypes to Tuta absoluta (Meyrick, 1917) (Lepidoptera: Gelechiidae), types of non preference for oviposition, feeding and antibiosis in evaluations of biological parameters of the stages and young adult insect. The experiments were performed at the Laboratory of Plant Resistance to Insects, Department of Plant Protection, Faculty of Agriculture and Veterinary Sciences, Jaboticabal-SP. The species used were tomato Lycopersicon esculentum (Mill.) (cv. Santa Clara, five hybrids: Saladete Italian Ty Tyna, Santa Cruz Débora Ty, Salad Lumi, Saladete Italian Andrea Victory and Santa Cruz Ty Carina Ty), Lycopersicon hirsutum f. glabratum (CH Mull.) (lines PI 134418 and PI 134417) and Lycopersicon pimpinellifolium (Just) (lines NAV 1062 and PI 126931), tests for non preference for oviposition and feeding, and all these materials, less Santa Cruz Ty Carina Ty, to test antibiosis. For testing non preference for oviposition, we evaluated the number of eggs at 24, 48 and 72 hours after the release of adults. Tests of non preference for feeding were performed with and without choice, using larvae of 12 days of age. Evaluations were performed at 1; 3; 5; 10; 30; 60; 120; 360; 720 and 1440 minutes after the release of the caterpillars, counting the number of individuals feeding on the genotype, and quantifying the end the experiment, the leaf mass consumed by genotype. It was found that the tomato genotypes evaluated did not show resistance type non preference for oviposition. Since PI 134417 showed resistance of the non-feeding preference. The antibiosis test, were performed 20 repetitions with 3 larvae each. The parameters were: duration and viability of larval and pupal, duration and survival of the caterpillars hatch to adult emergence (total), longevity of unfed adults, weight of pupae with 24 hours of age and ... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Arlindo Leal Boiça Júnior / Coorientador: André Luiz Lourenção / Banca: Júlio Cesar Galli / Banca: José Roberto Scarpellini / Mestre