A cana-de-açúcar possui uma característica única entre as plantas de interesse econômico mundial: a capacidade de acumular altos níveis de sacarose no colmo. No Brasil, em virtude do aumento da demanda interna e mundial por fontes energéticas renováveis, é nítida a expansão da cultura canavieira para regiões menos propícias para cultivo, como as regiões secas do centro-oeste brasileiro. O déficit hídrico é um dos principais agentes que afetam o desenvolvimento das plantas e a obtenção de variedades melhor adaptadas é fundamental para a sustentabilidade e expansão da agroindústria canavieira. Neste sentido, genes regulados por seca são alvos importantes para a obtenção de plantas transgênicas mais tolerantes ao estresse. Como a expressão constitutiva do transgene pode causar efeitos indesejáveis nas plantas transgênicas, também é necessária a identificação de promotores induzíveis pelo estímulo ambiental. O objetivo deste trabalho é a identificação de genes e sequências promotoras reguladas pela seca em cana-de-açúcar que, além de contribuir com o entendimento dos mecanismos envolvidos na tolerância ao estresse, podem ser utilizados como alvos para obtenção de plantas transgênicas mais resistentes. Para a identificação de genes diferencialmente regulados por seca, utilizamos diferentes plataformas de microarranjo: SUCAST (com 1.830 genes relacionados à transdução de sinal), SUCAMET (com 4.594 genes relacionados a metabolismo) e CaneRegNet (com sondas para a identificação de transcritos senso e antisenso que correspondem a 14.522 genes únicos). Nestas plataformas, analisamos a expressão dos genes de quatro variedades de cana-de-açúcar, duas tolerantes e duas sensíveis à seca, submetidas a 24, 72 e 120 h de déficit hídrico. Dos genes diferencialmente expressos (alguns identificados como transcritos pelas fitas senso e/ou antisenso), 53 foram selecionados para validação por PCR em tempo real. As regiões promotoras de quatro dos genes selecionados foram identificadas por meio das técnicas de andamento cromossômico, de seleção e sequenciamento de cromossomos artificiais de bactéria contendo DNA de cana-de-açúcar e de análise de contigs obtidos por Whole Genome Shotgun. Sete sequências promotoras foram selecionadas e clonadas em um vetor contendo o gene repórter gus. As atividades promotoras destas sequências foram testadas e verificadas em transformações transientes de calos embriogênicos de cana-deaçúcar. Para obtenção de plantas de cana-de-açúcar transgênicas, selecionamos o gene induzido por seca que codifica uma PP2C. Através da transformação de calos embriogênicos de cana-de- açúcar com vetor de silenciamento de pp2c, obtivemos algumas plantas com expressão de pp2c reduzida. O transcriptoma das plantas transgênicas foi avaliado. Em comparação com plantas controles e em condições normais de irrigação, identificamos 352 transcritos com expressão alterada. As plantas transgênicas com pp2c silenciado e plantas controles também foram estudadas num experimento de supressão de rega. Os dados fisiológicos e as observações morfológicas demonstraram que um dos eventos transgênicos apresentou tolerância à seca. A comparação do transcriptoma das plantas irrigadas contra as submetidas à seca e da planta tolerante contra não tolerantes ao estresse mostrou que diversos genes estavam diferencialmente regulados, inclusive aqueles envolvidos na sinalização por ABA, via no qual o gene pp2c atua. / Sugarcane has a unique characteristic among crop plants in the world: the ability to accumulate high levels of sucrose in its stems. In Brazil, due to the local and global increasing demand for renewable energy sources, it is notable the expansion of sugarcane cultivation to areas less favorable for cultivation, such as the dry regions of central-western Brazil. Water deficit is one of the main agents that affect plant development. The production of better varieties is critical to the sustainability and expansion of the sugarcane industry. In this way, genes regulated by drought are important targets for obtaining transgenic plants tolerant to stress. Since transgene constitutive expression may cause unwanted effects in transgenic plants, it is also important to identify of stress inducible promoters. The goal of this work is the identification of genes and promoters regulated by drought in sugarcane that, in addition to contributing to the understanding of the mechanisms involved in stress tolerance, can be used as targets for the production of transgenic plants more resistant to water stress. For the identification of genes differentially expressed in response to drought, we have used different microarray platforms: SUCAST (contains 1,830 genes related to signal transduction), SUCAMET (contains 4,594 genes related to metabolism) and CaneRegNet (contains probes for the identification of sense and antisense transcripts that correspond to 14,522 unique genes). In these platforms we analysed gene expression of four different sugarcane varieties, two tolerant and two sensitive to drought, after 24, 72 and 120 h of water deficit. From the genes differentially expressed (some transcribed by the sense and/or antisense strand), 53 were selected for qPCR validation. Promoter regions of four genes were identified by Chromosome Walking, selection and sequencing of BACs and the analyses of Whole Genome Sequencing contigs. Seven promoter sequences were selected and cloned into a vector containing the gus reporter gene. Promoter activity was tested and verified through the transient transformation of sugarcane embryogenic calli. For sugarcane transgenics production we selected the drought-induced pp2c gene. Through the transformation of sugarcane embryonic calli with a vector for pp2c silencing we obtained transformed plants with pp2c gene expression reduced. The transcriptome of transgenic plants was analysed. In comparison with control plants and in irrigated conditions, we identified 352 differentially expressed transcripts. Transgenic plants with silenced pp2c and control plants were studied in a pilot drought experiment. Physiological data and morphological observations indicated that one of the transgenic events presented tolerance to drought. The comparison between irrigated and drought plants and between tolerant and no tolerant showed that a large number of genes was differentially regulated including genes related to the ABA signaling, pathway in which pp2c acts.

Os benefícios advindos da tecnologia Roundup Ready são expressivos, e a aceitação desta tecnologia pelos produtores rurais é inegável, dando suporte para o rápido crescimento das áreas da soja RR. Mas ao mesmo tempo resultados de pesquisas recentes indicam que o glyphosate aplicado em pós-emergência, em soja RR, pode em algumas situações, além de gerar efeitos fitotóxicos, influenciar o balanço nutricional, afetar a fotossíntese, a rizosfera, o acúmulo de biomassa, a síntese de aminoácidos e compostos secundários, a eficiência no uso da água, e ainda a qualidade das sementes produzidas. Porém, persistem muitas especulações e dúvidas que precisam ser melhores elucidadas, no âmbito científico e técnico, envolvendo a questão da soja transgênica (RR). Em virtude deste fato faz-se necessária a busca de informações que permitam diagnosticar as reais consequências do uso do glyphosate. Deste modo, o presente trabalho teve por objetivo avaliar o impacto da aplicação de diferentes doses, manejos e formulações de glyphosate, na soja RR, em distintos ambientes de produção. Para isso foram conduzidos dois experimentos principais, em duas safras, em diferentes locais, e alguns experimentos complementares. Foi utilizado, na maioria dos experimentos, arranjo fatorial 2X2X5 (formulações X manejos X doses), totalizando 20 tratamentos. Nestes ensaios foram avaliadas diversas variáveis relacionadas ao desempenho agronômico. Os resultados alcançados permitiram caracterizar alguns problemas referentes ao uso de glyphosate em pós-emergência, na cultura da soja RR, identificando que altas doses são nocivas ao desempenho das plantas e produtividade. A partir dos resultados obtidos, espera-se fomentar um posicionamento mais seguro e sustentável desta tecnologia, possibilitando a diminuição de possíveis efeitos deletérios do glyphosate sobre a cultura da soja RR. / The benefits of the Roundup Ready technology are expressive and the acceptance of this technology by farmers is undeniable, giving support to the rapid growth of RR soybean crops. Recent studies indicate, however, that glyphosate applied in post-emergence in RR soybean can eventually cause phytotoxic effects, as well as influence the plant nutritional balance, affecting photosynthesis, the rhizosphere, biomass accumulation, amino acid synthesis and secondary compounds, water use efficiency, and the quality of seeds produced. Therefore, there are many speculations and questions that need to be clarified in the scientific and technical context, involving the issue of RR soybeans regarding the use of glyphosate. Thus, it is necessary the search for information allowing to diagnose the real consequences of its use. This study evaluated the impact of the application of different doses, management procedures and formulations of glyphosate, in RR soybean, in different production environments. For that purposes, were conducted two major experiments, in different harvests, in different locations, and some additional experiments. Were used a factorial design 2X2X5 (formulations X management X doses) totaling 20 treatments. Were evaluated several variables related to the agronomic performance. The results allowed to characterize some problems regarding the glyphosate use in post-emergence in RR soybeans, identifying that high doses are harmful to the plant performance and productivity. The results allow a better understanding and a more secure positioning of this technology, enabling the reduction of possible deleterious effects of glyphosate on RR soybeans.

Fusarium verticillioides, produtor de fumonisinas, é comumente associado aos grãos de milho. O objetivo proposto foi pesquisar a micobiota e fumonisinas em diferentes genótipos de milho transgênico (Bt) e seus respectivos controles. A micobiota dos grãos, realizada pela técnica da semeadura direta, revelou a presença de variados gêneros fúngicos. As cepas de Fusarium isoladas foram identificadas até espécie por metodologia clássica e molecular. A atividade de água média nos híbridos foi superior a 0,90. Observamos maior contaminação fúngica nos controles, com exceção do 2B710Hx. A freqüência relativa do gênero Fusarium nos diferentes híbridos revelou menor contaminação nos transgênicos, excetuando o AG8088 VTPRO. F. verticillioides foi o fungo mais frequente. A análise de fumonisinas, revelou fumonisina B1 em 92,5 % das amostras e fumonisina B2 em 47,1%. Não foi constatada variação na produção de fumonisinas nos genótipos 2B710 e 30F35 (transgênico e não transgênico). Já para o genótipo AG8088 houve menor produção de fumonisina B1 na variedade transgênica. / Fusarium verticillioides, fumonisin producer, is commonly associated with corn kernels. The proposed objective was to investigate the mycobiota and fumonisins in different genotypes of transgenic corn (Bt) and their respective controls. The mycobiota of grain, using the technique of direct plating, revealed the presence of several genera of fungi. The strains of Fusarium isolated were identified to species by classical and molecular methods. The average water activity in the hybrids was higher than 0.90. We observed greater fungal contamination in controls, with the exception of 2B710Hx. The relative frequency of Fusarium in different hybrids revealed lower contamination in transgenic, excepting AG8088VTPRO. F. verticillioides was the most common fungus. Analysis of fumonisins revealed fumonisin B1 in 92.5% of the samples and fumonisin B2 in 47.1%. No change was observed in the production of fumonisins in genotypes 2B710 and 30F35 (transgenic and non-transgenic). However AG8088 for genotype had lower production of fumonisin B1 in transgenic variety.

Conexinas são proteínas que compõem as junções comunicantes do tipo gap, e a diminuição na sua expressão tem sido relacionada com diversas alterações fisiológicas, entre elas algumas síndromes, malformações genéticas, o aumento da proliferação celular e a carcinogênese. Dentre as isoformas das conexinas presentes nos tecidos animais, a Cx43 é a mais abundante e a mais estudada, tendo a sua importância relatada in vivo em camundongos que tiveram um dos alelos de Cx43 deletado (Cx43+/-), devido a morte desses animais logo após o nascimento devido a malformações cardíacas. Considerando o fato de esse gene ser expresso em dezenas de tipos celulares, tivemos como objetivo avaliar os outros tecidos em busca de anomalias ocorridas durante o desenvolvimento, e a possível interferência do background gentético. Para isso acompanhamos dia-a-dia o último terço gestacional de camundongos de background C57BL/6 e CD1, avaliando histologica e morfologicamente os fetos em busca de anomalias nos animais Cx43+/- e Cx43-/- em relação aos animais Cx43+/+. Exceto pelo tecido ósseo, não encontramos alterações nos órgãos que expressam esse gene, bem como alterações causadas pelo refluxo de sangue causado pela malformação da válvula tricúspide. Durante a osteogênese, por meio da avaliação das costelas e tíbia, percebemos um retardo no desenvolvimento, que se agrava conforme a deficiência do gene Cx43. Percebemos nitidamente que o processo de diferenciação celular ocorre de maneira menos eficiente, atrasando processos como deposição de colágeno e de matriz óssea. Conclui-se que a Cx43 é importante para o desenvolvimento ósseo na fase fetal em camundongos. / Connexins are proteins that compose the gap junctions, and the reduction in its expression has been related with diverse physiological alterations, like some syndromes, malformations, the increase of the cellular proliferation and carcinogenesis. Among isoforms of the connexins in animal cells, the Cx43 is the most abundant and studied, having its importance been shown up in alive mice that had one allele of Cx43 (Cx43+/-) deleted. REAUME et al. related that Cx43-/- mice presented cardiac malformation and died immediately after birth. Considering the fact that this gene is expressed in many cell types, we evaluate the possibility of other tissues also to present alterations during the fetal development. Due to this, we studied the mouse development initiating in 12.5 to 19.5 DE (embryologic day) and evaluated the histology of C57BL/6 and CD1 mice searching for anomalies of Cx43+/- and Cx43-/- mice in relation to the Cx43+/+ animals. We did not find alterations in the main organs that express Cx43, nor alterations due to blood out flow related to cardiac malformations. We only found significant difference was the bones; through the evaluation of the ribs and tibia. It has been observed a delay in the development, that was more important in Cx43 knockout mice. We observed clearly that the process of cellular differentiation occurs in less efficient way, delaying processes as deposition of collagen and bone matrix. In conclusion, this study showed that Cx43 is important for bone development in mice.

Frames são dispositivos cognitivos que organizam os sentidos da vida cotidiana. Enquadrar um risco ambiental é fazer mais saliente algumas de suas possibilidades, promovendo uma ou outra interpretação. A dissertação examina como a pauta dos transgênicos foi enquadrada pelos portais Estadão Digital <estadao.com.br> e Folha de S. Paulo <folha.uol.com.br> no período de 1998 a 2015. Para tanto, mediante a análise dos elementos textuais dos artigos (metáforas, escolhas de palavras e argumentos), 1.396 notícias foram classificadas em um dos seguintes frames de notícia: progresso, prospecto econômico, ética, caixa de Pandora, descontrole, natureza, responsabilidade pública e globalização. Os achados revelam que o frame predominante foi \"responsabilidade pública\", especialmente durante o biênio 2003/04 que antecedeu a sanção da \"Lei da Biossegurança\" em 2005. Mas antes de comunicar informações plurais, equilibradas, relacionando antecedentes e pressupostos, avaliando implicações e examinando alternativas e critérios de comparação, a mídia paulista tratou muito mais dos aspectos associados às polêmicas e conflitos políticos nacionais / Frames are cognitive devices that organize the meanings of everyday life. To frame a certain risk is to do more prominent some of its possibilities, promoting one or another interpretation. The research examines how the agenda of transgenic organisms has been framed by the Brazilian online newspapers Estadão Digital <estadao.com.br> and Folha de S. Paulo <folha.uol.com.br> from 1998 to 2015. To do so, an analysis of the internal textual elements (metaphors, selection of words and arguments) presented in the articles was done, resulting in 1.396 classified news according to one of the following news frames: progress, economic prospect, ethics, Pandora\'s box, runaway technology, nature/nurture, public accountability and globalization. The findings suggest that \"public accountability\" was the most frequently frame, especially during the years 2003/04, which preceded the sanction of the \"Biosafety Law\", in March 2005. Thus, despite communicating plural and balanced information, relating antecedent and assumptions, evaluating and examining alternatives criteria, the state of São Paulo\'s press has been dealing much more with the controversies and political conflict aspects of the subject

Submitted by Fernanda Weschenfelder (fernanda.weschenfelder@uniceub.br) on 2018-05-28T17:29:25Z No. of bitstreams: 1 61250027.pdf: 2887550 bytes, checksum: 8b67741a27abdf366ff1d09c1fa5fa81 (MD5) / Approved for entry into archive by Fernanda Weschenfelder (fernanda.weschenfelder@uniceub.br) on 2018-05-28T17:29:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 61250027.pdf: 2887550 bytes, checksum: 8b67741a27abdf366ff1d09c1fa5fa81 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-28T17:29:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 61250027.pdf: 2887550 bytes, checksum: 8b67741a27abdf366ff1d09c1fa5fa81 (MD5) Previous issue date: 2016 / Trata a presente tese de uma pesquisa vinculada à linha de pesquisa de Políticas Públicas do Centro Universitário de Brasília – UniCEUB, que tem como propósito atestar a possibilidade de se aperfeiçoar a Política Nacional de Biossegurança com vistas à devida segurança alimentar de organismos transgênicos, em observância aos princípios bioéticos da autonomia, beneficência, não-maleficência e justiça; e da precaução, juntamente. Estabeleceu-se um fio condutor lógico, perpassando por conceitos operacionais fundamentais, análise de doutrina, julgados, pareceres conclusivos para liberação comercial de organismos transgênicos para consumo humano, e entrevistas realizadas com ex-membros da Comissão Técnica Nacional de Biossegurança - CTNBio. O estudo, para tanto, foi delineado em quatro eixos: conceitual operacional, político normativo, analítico e propositivo. Partiu-se de correlações entre os princípios bioéticos e da precaução, responsabilidade ética e equidade intergeracional, tendo como ponto convergente a segurança alimentar frente os organismos transgênicos. Foi realizada, em seguida, problematização quanto a relação entre transgênicos, bioética e meio ambiente equilibrado, por meio de análise crítica da atual legislação. Posteriormente foi realizado o estudo de Pareceres Técnico Conclusivos de liberação comercial de organismos transgênicos, emitidos pela CTNBio. Por fim, analisou-se um conjunto de políticas conectadas com segurança alimentar, bioética e transgênicos e entrevistou-se ex-membros da Comissão supracitada, no intuito de confirmação de dados colhidos via legislação, doutrina e pareceres. A realização da pesquisa possibilitou concluir que os princípios bioéticos não são utilizados quando dos estudos para a liberação comercial de transgênicos, muito menos quando da construção da Política de Biossegurança atual. Sugere-se que tais princípios são condição sine qua non para toda a lisura do processo, e que a adoção dos mesmos possibilitaria o fortalecimento do princípio da precaução. Garantir-se-ia, inclusive, a devida participação social e científica interessada, cumprindo o solicitado pelo Estado de Direito Ambiental, frente ao solicitado pelo meio ambiente equilibrado.

Made available in DSpace on 2016-04-27T18:15:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Edson Cinaqui Filho.pdf: 2131297 bytes, checksum: aef7f7cc013ddbf281ee30bc79baa5a2 (MD5) Previous issue date: 2015-03-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Transgenic organisms have inserted into its genome one or more DNA sequences of a species of interest, to ensure the inserted genic expression. Of these genes. These sequences (genes) may come from any living organismo (bactéria, fungus, plants, animals, protozoan) or nonliving (vírus). The permission for planting and commercialization of these organisms which are modified to resist various environmental pressusres raised the debate about its biosafety to the environment and to human and animal health. In this research were analyzed and discussed the decision-making processes involved in the approval of three varieties of transgenic corn in Brazil: the Liberty Link herbicide tolerant, insect resistant MON810 and Bt11 also resistant to insects. The choice of analyzing corn soybeans, is due the fact that Brazil is one of the centers of diversity of this plant and also for its importance to indigenous tribes and traditional communities. The studies submitted by the companies planning release the transgenic seeds were inadequate perfomed at short notice and grounded in statistical methods poorly documented. The samples were not representative and the number of repetitions insuficiente. Studies on the possible effects of there transgenic varieties on populations of non-target organisms were performed improperly, disregarding its ecological importante. The releases of these three varieties of transgenic com in Brazil contradicted Article 225 of the Federal Constitution which states that everyone has the right to a balanced environment which is essential to a healthy quality of life, and the Government should protect and preserve it for presente and future generations.The permission for planting and sala of transgenics occurred throught a comission in which the majority of members were interested in a transgenic research funded by multinationals. In addition to the political nature of problems, the release of transgenic corn wounded three basic environmental principles: precaution, sustainability and responsibility, for damage. Currently several studies attest problems in human and animal health and in the environment arising from transgenic organisms. Thus, the adoption of the Precautionary Principle should be essential before the release of transgenic corn in Brazil, to ensure that with so many scientific uncertainties the environment small farmers and the health human beings and other animals would be sabe. , to ensure that with so many scientific uncertainties, the environment, small farmers and the health of human beings and other animals would be safe / Organismos transgênicos possuem inseridos em seu genoma uma ou mais sequências de DNA de uma espécie de interesse, de modo a garantir a expressão gênica destes genes inseridos. Essas sequências (genes) podem provir de qualquer organismo vivo (bactérias, fungos, plantas, animais, protozoários) ou não vivo (vírus). A liberação para plantio e comercialização destes organismos modificados e resistentes a diversas pressões ambientais levantaram o debate sobre a biossegurança destes ao meio ambiente, saúde humana e animal. Neste trabalho foram analisados e discutidos os processos decisórios envolvidos na aprovação de três variedades de milhos transgênicos no Brasil: o Liberty Link tolerante a herbicida, o MON810 resistente a insetos e o Bt11 também resistente a insetos. A escolha de analisar o milho e não a soja, se deve ao fato do Brasil ser um dos centros de diversidade dessa planta, e também por sua importância para os povos indígenas e para as comunidades tradicionais. Os estudos apresentados pelas empresas que pleiteavam liberar suas sementes transgênicas foram inadequados, realizados à curto prazo e embasados em métodos estatísticos mal documentados. As amostragens não foram representativas e os números de repetições insuficientes. Estudos sobre os possíveis efeitos destas variedades transgênicas em populações de organismos não-alvo foram realizados de forma inadequada, desprezando a importância ecológica destes. As liberações destas três variedades de milho transgênico no Brasil contrariaram o Artigo 225 da Constituição Federal que afirma que todos têm direito ao meio ambiente em equilíbrio e essencial à sadia qualidade de vida, e que caberia ao Poder Público defende-lo e preservá-lo para as gerações presentes e futuras. As liberações para plantio e comercialização de transgênicos ocorreram por meio de uma comissão cuja maioria dos membros estavam interessados em pesquisas de transgenia com financiamento de multinacionais. Além dos problemas de cunho político, a liberação do milho transgênico feriu três princípios ambientais básicos: da precaução, da sustentabilidade e da responsabilidade por danos. Atualmente diversos estudos atestam problemas na saúde humana, animal e ao meio ambiente decorrentes de organismos transgênicos. Desta forma, a adoção do Princípio da Precaução se fazia fundamental antes da liberação do milho transgênico no Brasil, para garantir que diante de tantas incertezas científicas o meio ambiente, o pequeno agricultor e a saúde do ser humano e demais animais estariam seguros

Frames são dispositivos cognitivos que organizam os sentidos da vida cotidiana. Enquadrar um risco ambiental é fazer mais saliente algumas de suas possibilidades, promovendo uma ou outra interpretação. A dissertação examina como a pauta dos transgênicos foi enquadrada pelos portais Estadão Digital <estadao.com.br> e Folha de S. Paulo <folha.uol.com.br> no período de 1998 a 2015. Para tanto, mediante a análise dos elementos textuais dos artigos (metáforas, escolhas de palavras e argumentos), 1.396 notícias foram classificadas em um dos seguintes frames de notícia: progresso, prospecto econômico, ética, caixa de Pandora, descontrole, natureza, responsabilidade pública e globalização. Os achados revelam que o frame predominante foi \"responsabilidade pública\", especialmente durante o biênio 2003/04 que antecedeu a sanção da \"Lei da Biossegurança\" em 2005. Mas antes de comunicar informações plurais, equilibradas, relacionando antecedentes e pressupostos, avaliando implicações e examinando alternativas e critérios de comparação, a mídia paulista tratou muito mais dos aspectos associados às polêmicas e conflitos políticos nacionais / Frames are cognitive devices that organize the meanings of everyday life. To frame a certain risk is to do more prominent some of its possibilities, promoting one or another interpretation. The research examines how the agenda of transgenic organisms has been framed by the Brazilian online newspapers Estadão Digital <estadao.com.br> and Folha de S. Paulo <folha.uol.com.br> from 1998 to 2015. To do so, an analysis of the internal textual elements (metaphors, selection of words and arguments) presented in the articles was done, resulting in 1.396 classified news according to one of the following news frames: progress, economic prospect, ethics, Pandora\'s box, runaway technology, nature/nurture, public accountability and globalization. The findings suggest that \"public accountability\" was the most frequently frame, especially during the years 2003/04, which preceded the sanction of the \"Biosafety Law\", in March 2005. Thus, despite communicating plural and balanced information, relating antecedent and assumptions, evaluating and examining alternatives criteria, the state of São Paulo\'s press has been dealing much more with the controversies and political conflict aspects of the subject

Conexinas são proteínas que compõem as junções comunicantes do tipo gap, e a diminuição na sua expressão tem sido relacionada com diversas alterações fisiológicas, entre elas algumas síndromes, malformações genéticas, o aumento da proliferação celular e a carcinogênese. Dentre as isoformas das conexinas presentes nos tecidos animais, a Cx43 é a mais abundante e a mais estudada, tendo a sua importância relatada in vivo em camundongos que tiveram um dos alelos de Cx43 deletado (Cx43+/-), devido a morte desses animais logo após o nascimento devido a malformações cardíacas. Considerando o fato de esse gene ser expresso em dezenas de tipos celulares, tivemos como objetivo avaliar os outros tecidos em busca de anomalias ocorridas durante o desenvolvimento, e a possível interferência do background gentético. Para isso acompanhamos dia-a-dia o último terço gestacional de camundongos de background C57BL/6 e CD1, avaliando histologica e morfologicamente os fetos em busca de anomalias nos animais Cx43+/- e Cx43-/- em relação aos animais Cx43+/+. Exceto pelo tecido ósseo, não encontramos alterações nos órgãos que expressam esse gene, bem como alterações causadas pelo refluxo de sangue causado pela malformação da válvula tricúspide. Durante a osteogênese, por meio da avaliação das costelas e tíbia, percebemos um retardo no desenvolvimento, que se agrava conforme a deficiência do gene Cx43. Percebemos nitidamente que o processo de diferenciação celular ocorre de maneira menos eficiente, atrasando processos como deposição de colágeno e de matriz óssea. Conclui-se que a Cx43 é importante para o desenvolvimento ósseo na fase fetal em camundongos. / Connexins are proteins that compose the gap junctions, and the reduction in its expression has been related with diverse physiological alterations, like some syndromes, malformations, the increase of the cellular proliferation and carcinogenesis. Among isoforms of the connexins in animal cells, the Cx43 is the most abundant and studied, having its importance been shown up in alive mice that had one allele of Cx43 (Cx43+/-) deleted. REAUME et al. related that Cx43-/- mice presented cardiac malformation and died immediately after birth. Considering the fact that this gene is expressed in many cell types, we evaluate the possibility of other tissues also to present alterations during the fetal development. Due to this, we studied the mouse development initiating in 12.5 to 19.5 DE (embryologic day) and evaluated the histology of C57BL/6 and CD1 mice searching for anomalies of Cx43+/- and Cx43-/- mice in relation to the Cx43+/+ animals. We did not find alterations in the main organs that express Cx43, nor alterations due to blood out flow related to cardiac malformations. We only found significant difference was the bones; through the evaluation of the ribs and tibia. It has been observed a delay in the development, that was more important in Cx43 knockout mice. We observed clearly that the process of cellular differentiation occurs in less efficient way, delaying processes as deposition of collagen and bone matrix. In conclusion, this study showed that Cx43 is important for bone development in mice.

Made available in DSpace on 2017-07-10T17:37:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lettice_Aparecida_Dias_Canete_de_Lima.pdf: 1299468 bytes, checksum: 7cf5f1fe2ed78c46edd66e92c79ae1ea (MD5) Previous issue date: 2010-03-10 / Wheat is one of the most important crops because the human diet is based on in many countries. The plant genetic transformation is considered an important tool in obtaining tolerant genotypes to abiotic stresses by the introduction of genes involved in mechanisms of cellular protection Proline is an osmoprotectant that can act in different mechanisms to increase the tolerance of plants. The enzyme ∆1-pyrroline-5-carboxylate synthetase (P5CS), encoded by the gene p5cs, is considered the limiting step in the proline biosynthesis. The study of the stability of transgene expression and productivity are critical to the commercial release of transgenic varieties. This study was conducted to evaluate five events through biophysical and production analysis under water stress. The results obtained were as the following parameters: relative water content (RWC); malondialdehyde contents (MDA), membrane stability index (%) and proline quantified. Production rates were quantified as the number of seeds per plant, number of ears per plant, 100 seeds average weight per plant and total weight of seeds per plant. The results permitted to conclude that transgenic plants responses were differently under severe and partial water stress conditions. Plants from different events under severe stress presented a higher content of proline (1.16x to 1.62x greater), lower levels of MDA and the IEMs were higher due to the fact of showing a more efficient mechanism of protection for cell membranes against oxidative stress. The perception of severe stress occurred at the 8th day of water restriction, however in partial water stress, the beginning of perception was after 12 days. The results obtained for production indexes were similar among events and stressed controls, which shows that, although there was expression of the transgene (p5cs) the higher amount of proline did not result in higher production of plants / O trigo é umas das mais importantes culturas pelo fato de ser base da dieta humana em muitos países. A transformação genética de plantas é considerada uma importante ferramenta na obtenção de genótipos tolerantes aos estresses abióticos pela introdução de genes envolvidos nos mecanismos de proteção celular sob condições de estresse hídrico. A prolina é um osmoprotetor que pode atuar nos diversos mecanismos para o aumento da tolerância ao déficit hídrico das plantas. A enzima .1-pirrolina-5-carboxilato sintetase (P5CS), codificada pelo gene p5cs, é considerada o passo limitante na rota de síntese de prolina. O estudo da estabilidade de expressão do transgene e a sua produtividade são fundamentais para o lançamento de variedades comerciais transgênicas. Este trabalho foi conduzido com o objetivo de avaliar cinco eventos de transformação, por meio de análises biofísicas e índices de produção, quanto à tolerância ao estresse hídrico. Como resultados obtidos, na avaliação dos seguintes parâmetros: Conteúdo Relativo de àgua (CRA); concentrações de malondialdeído (MDA), índices de estabilidade de membrana (%) e quantificação de prolina. Como índices de produção foram quantificados: número de sementes/planta, número de espigas/planta, peso médio de 100 sementes/planta e peso total das sementes por planta. Os resultados demonstraram que plantas transgênicas responderam de modo diferenciado aos dois tipos de estresse aplicados (severo e parcial). As plantas dos eventos avaliados sob condições de estresse severo e parcial apresentaram conteúdos maiores de prolina (1,16x a 1,62x mais), níveis menores de MDA e consequentemente e os IEMs destas plantas foram maiores por demonstrarem um mecanismo mais eficiente de proteção das membranas celulares contra o estresse oxidativo. A percepção do estresse severo ocorreu a partir do 8º dia de restrição hídrica severa, enquanto que na restrição hídrica parcial, o início da percepção ocorreu após o 12º dia. Os resultados obtidos para os índices de produção foram similares entre plantas transgênicas dos diferentes eventos e controle estressado, o que demonstra que, embora tenha havido expressão do transgene (p5cs) esta maior concentração de prolina não resultou em uma maior produtividade das plantas